專利名稱：：埃坡霉素(epothilone),合成埃坡霉素的中間體,其類似物及其用途的制作方法
技術(shù)領域：
：本發(fā)明提供式(I)的化合物如本文中一般所述及以類及次類形式所述。本發(fā)明另外提供包含式(I)化合物的醫(yī)藥組合物，并提供治療癌癥的方法，該些方法包括投與一式(I)化合物。
背景技術(shù)：
：埃坡霉素(Epothilone)A及B(2a及2b，示意圖1)是天然存在的細胞毒性大環(huán)內(nèi)酯，其可自一纖維素降解分枝桿菌(mycobacerium)即堆囊菌(Sorangiumcellulosum)分離(Hfle等人，Angew.Chem.，Int.Ed.Engl.(1996，35，1567)及J.Antibiot.(1996，49，560)；其皆以引用的方式并入本文中)。盡管埃坡霉素A與B的結(jié)構(gòu)極為不同，但其均具有與紫杉醇(Taxol)相同的作用機理，該作用機理涉及通過聚合微管蛋白及穩(wěn)定微管裝配來抑制腫瘤細胞的生長(Bollag等人，CancerRes.(1995，55，2325)，以引用的方式并入本文)。盡管毫無疑問Taxol作為第一線化學治療劑具有臨床價值，但其遠非一理想藥物。其極低的水溶性使其需依賴于諸如氫化蓖麻油(Cremophore)等調(diào)配物媒劑，這些調(diào)配物媒劑不僅自身會帶來風險且會造成管理問題(Essayan等人，J.AllergyClin.Immunol.1996，97，42；其以引用的方式并入本文中)。而且，Taxol易于因多重抗藥性(MDR)而失活(Giannakakou等人，J.Biol.Chem.(1997，272，17118)；其以引用的方式并入本文中)。然而，亦已證實，埃坡霉素A及B可保持顯著的抗MDR腫瘤細胞效能(Kowalski等人，Mol.Biol.Cell(1995，6，2137)；其以引用的方式并入本文中)。此外，與紫杉醇相比，埃坡霉素增加的水溶性有利于調(diào)配。盡管天然存在的化合物埃坡霉素B(2b，示意圖1中的EpoB)是天然產(chǎn)物埃坡霉素家族的重要成員，但不幸的是，其具有窄治療指數(shù)，至少在異種移植老鼠中如此，此令人極為煩憂(Su等人，Angew.Chem.Int.Ed.Engl.1997，36，1093；Harris等人，J.Org.Chem.(1999，64，8434)；每一皆以引用的方式并入本文)。1aR＝ph，紫杉醇(Taxol)2aR1＝H，R2＝CH3，埃坡霉素A(EpoA)1bR＝t-Bu，多西他賽(Taxotere)2bR1＝CH3，R2＝CH3，埃坡霉素B(EpoB)2cR1＝H，R2＝CH2OH，埃坡霉素E(EpoE)2dR1＝CH3，R2＝CH2OH，埃坡霉素F(EpoF)示意圖1紫杉烷(Taxoid)及埃坡霉素因EpoB治療指數(shù)有限，此使得人們對其他埃坡霉素類似物(尤其是12，13-去氧埃坡霉素)的提供經(jīng)改良治療曲線的能力進行研究(參見，美國專利第6,242,469號、第6,284,781號、第6,300,355號、第6,369,234號、第6,204,388號、第6,316,630號；每一皆以引用的方式并入本文中)。在各種小鼠模型上所實施的活體內(nèi)試驗證實12，13-去氧埃坡霉素B(3b，示意圖2中的dEpoB)在小鼠異種移植物中具有抗各種敏感性及抗性人類腫瘤的治療潛能(Chou等人，Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.1998，95，9642及15798；其以引用的方式并入本文)。最近，該等去氧埃坡霉素優(yōu)于其他抗癌劑的治療優(yōu)勢已通過全面對比確實(Chou等人，Proc.NatlAcad.Sci.U.S.A.(2001，98，8113)；其以引用的方式并入本文)。由于dEpoB非同尋常的活體內(nèi)性質(zhì)，其已通過在狗中進行的毒物學評價，且現(xiàn)作為抗癌藥用于人體試驗。3aR1＝H，R2＝CH3，去氧埃坡霉素A(dEpoA)4aR1＝H，R2＝CH3，去氫-dEpoA(dEpoA)5aR1＝H，R2＝CH3，異-dEpoA3bR1＝CH3，R2＝CH2，去氧埃坡霉素B(dEpoB)4bR1＝CH3，R2＝CH3，去氫-dEpoB(dEpoB)5bR1＝CH3，R2＝CH3，異-dEpoB3cR1＝H，R2＝CH2OH，去氧埃坡霉素E(dEpoE)4cR1＝H，R2＝CH2OH，去氧-dEpoE(dEpoE)5cR1＝H，R2＝CH2OH，異-dEpoE3dR1＝CH3，R2＝CH2OH，去氧埃坡霉素F(dEpoF)4dR1＝CH3，R2＝CH2OH，去氫-dEpoF(dEpoF)5dR1＝CH3，R3＝CH2OH，異-dEpoF(ddEpoF)3eR1＝H，R2＝NH2，去甲基氨基-(dEpoA)4eR1＝H，R2＝NH2，去甲基氨基-ddEpoA5eR1＝H，R2＝NH2，去甲基氨基-異-dEpoA3fR1＝CH3，R2＝NH2，去甲基氨基-dEpoB(dadEpoB)4fR1＝CH3，R2＝NH2，去甲基氨基-ddEpoB5fR1＝CH3，R2＝NH2，去甲基氨基-異-dEpoB3gR1＝CH3，R2＝CH2，26-氟-dEpoB-(dadEpoB)4gR1＝CH3F，R2＝CH2，26-氟-ddEpoB3hR1＝CF3，R2＝CH2，26三氟-dEpoB-(dadEpoB)4hR1＝CF3，R2＝CH2，26-三氟-ddEpoB示意圖2各種去氧埃坡霉素類似物鑒于12，13-去氧埃坡霉素有希望的治療效用，人們期望研究其他類似物及用于合成現(xiàn)有埃坡霉素、去氧埃坡霉素及其類似物以及其新穎類似物的其他合成方法。更特定而言，假定人們對該類化合物的治療效用有興趣，人們亦期望開發(fā)出能夠提供大量上述或本文所述任何埃坡霉素或去氧埃坡霉素用于臨床試驗及用于大規(guī)模制備的方法。圖1是一關于埃坡霉素抗CCRF-CEM、CCRF-CEM/VBL及CCRF-CEM/紫杉醇細胞生長的IC50值的表。72小時細胞生長培養(yǎng)后通過XTT四唑鎓分析測量細胞生長抑制作用，如先前所闡述(Scudiero等人，CancerRes.464827-4833，1988；以引用的方式并入本文)。通過使用計算機程序(Chou等人，Adv.EnzymeRegul.(2227-55，1984)；Chou等人，CalcuSynforWindows(Biosoft，Cambridge，UK)，1997)；每一皆以引用的方式并入本文)在每一藥物的六或七個濃度處自劑量-效力關系確定IC50值，如先前所闡述(Chou等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA(9515798-15802，1998)；以引用的方式并入本文)。圖2是反-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB的1HNMR譜。圖3是反-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB的13CNMR譜。圖4顯示利用LACDAC-閉環(huán)烯烴置換反應合成11-R和14-R埃坡霉素的示意圖，并繪示經(jīng)由9，10-去氫埃坡霉素的合成方法可利用的某些取代。圖5展示各種包括某些9，10-去氫化合物(例如，圖5A中的化合物7及圖5B中的化合物88及99)在內(nèi)的埃坡霉素化合物及衍生物體外抗人類白血病細胞的相對細胞毒性數(shù)據(jù)。圖6繪示用于制備9，10-去氫埃坡霉素類似物的替代合成方法。圖6A繪示一Macro-Stille法、sp3-sp3偶合法及β-Suzuki法。圖6B繪示Julia烯烴合成法、Wadsworth-Emmons法及Macro-Reformatosky法。圖6C繪示一McMurry偶合法及一內(nèi)酰胺類似物合成法。圖7展示9，10-去氫-12，13-去氧EpoB的各種類似物。圖8展示9，10-去氫-12，13-去氧EpoB及EpoB對具有人類乳腺癌MX-1異種移植物的裸鼠的治療效果(靜脈內(nèi)輸注，Q2D×3)。圖9展示埃坡霉素類似物在鼠血漿中的穩(wěn)定性。Epo1為12，13-去氧EpoB，Epo2為26-F3-12，13-去氧EpoB，Epo3為(E)-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB且Epo4是26-F3-(E)-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB。圖10繪示埃坡霉素類似物對具有HCT-116異種移植物的裸鼠的治療效果(靜脈內(nèi)輸注，Q2D×7，n＝3)。箭頭表示投與藥物。Epo3為(E)-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB。圖11顯示與紫杉醇與長春堿相比，各種埃坡霉素類似物體外抗腫瘤細胞生長的效能及治療指數(shù)。圖12所示數(shù)據(jù)表概述dEpoB、紫杉醇及26-三氟-9，10-去氫-dEpoB抗裸鼠中MX-1異種移植物的效果。圖13展示26-三氟-9，10-去氫-dEpoB及9，10-去氫-EpoB對具有MX-1異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，分別為Q2D×6及Q2D×9)。圖14展示具有人類乳腺癌腫瘤MX-1異種移植物的裸鼠用26-三氟-9，10-去氫-dEpoB及9，10-去氫-EpoB治療后的體重變化(6小時輸注，分別為Q2D×6及Q2D×9)。圖15顯示26-三氟-9，10-去氫-dEpoB及9，10-去氫EpoB對具有MX-1異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，分別為Q2D×6及Q2D×9)。圖16顯示具有人類乳腺癌腫瘤MX-1異種移植物的裸鼠用26-三氟-9，10-去氫-dEpoB及9，10-去氫-EpoB治療后體重變化(6小時靜脈內(nèi)輸注，分別為Q2D×6及Q2D×9)。圖17顯示9，10-去氫-dEpoB對具有HCT-116異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的治療效果(靜脈內(nèi)輸注，Q2D×7)。圖18顯示9，10-去氫-dEpoB對具有人類結(jié)腸癌HCT-116異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的效果(靜脈內(nèi)輸注，Q3D×5)。圖19顯示9，10-去氫-dEpoB對具有A549/紫杉醇異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q3D×7)。圖20顯示具有A549/紫杉醇異種移植物的裸鼠用26-三氟-9，10-去氫-dEpoB及9，10-去氫-dEpoB治療后體重的變化(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q3D×7)。圖21顯示26-三氟-9，10-去氫-dEpoB及9，10-去氫-dEpoB對具有A549/紫杉醇異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的效果(靜脈內(nèi)輸注，Q2D×7)。圖22顯示具有A549/紫杉醇異種移植物的裸鼠用26-三氟-9，10-去氫-dEpoB及9，10-去氫-dEpoB治療后體重的變化(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q2D×7)。圖23顯示9，10-去氫-EpoB對具有人類結(jié)腸癌HCT-116腫瘤異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的效果(6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖24顯示具有人類結(jié)腸癌HCT-116腫瘤異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-EpoB治療后體重的變化(6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖25顯示在37℃下在存在各種埃坡霉素類似物時自微管蛋白形成微管的情況。圖26顯示在4℃下在存在各種埃坡霉素類似物時自微管蛋白形成微管的情況。圖27顯示9，10-去氫-dEpoB及dEpoB對具有HCT-116異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的效果(靜脈內(nèi)輸注，Q2D×6)。圖28顯示具有HCT-116異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-dEpoB及dEpoB治療后體重的變化(靜脈內(nèi)輸注，Q2D×6)。圖29顯示9，10-去氫-dEpoB對具有人類結(jié)腸癌HCT-116異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的效果(靜脈內(nèi)輸注，Q3D×4)。圖30顯示具有人類結(jié)腸癌HCT-116異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-dEpoB治療后體重的變化(5mg/kg，靜脈內(nèi)輸注，X3D×4)。圖31是一關于埃坡霉素類似物抗CCRF-CEM細胞生長的IC50值的表。圖32顯示埃坡霉素類似物體外代謝穩(wěn)定性。圖33所示表詳述各種埃坡霉素類似物對小鼠中人類腫瘤異種移植物的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖34顯示9，10-去氫-EpoB對具有人類結(jié)腸癌HCT-116腫瘤異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q2D×7)。圖35顯示具有人類結(jié)腸癌HCT-116腫瘤異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-EpoB及唑-EpoD治療后體重的變化(6小時輸注，Q2D×7)。圖36顯示26-三氟-9，10-去氫-dEpoB及9，10-去氫-dEpoB對具有A549/紫杉醇異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q2D×4)。圖37顯示9，10-去氫-dEpoB對具有A549/紫杉醇異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q3D×3)。圖38顯示埃坡霉素類似物在20％小鼠血漿/PBS中的穩(wěn)定性。圖39顯示埃坡霉素類似物在10％人肝臟S9/PBS中的穩(wěn)定性。圖40顯示EpoD在10％人肝臟S9/PBS中的穩(wěn)定色譜圖。圖41的表闡述在37℃下在無GTP存在下各種埃坡霉素類似物對體外微管聚合的效果(A)及各種埃坡霉素類似物對人類肺細胞株A549的細胞毒性(B)。圖42顯示在35℃及4℃下埃坡霉素對微管形成的穩(wěn)定作用。圖43展示9，10-去氫-dEpoB對具有T人類乳腺癌(MX-1)異種移植物的裸鼠的治療效果(6小時輸注，Q2D×5)。圖44展示具有人類乳腺癌(MX-1)異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-dEpoB治療后體重的變化(6小時輸注，Q2D×8)。圖45展示具有HCT-116異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-dEpoB治療后體重的變化(靜脈內(nèi)輸注，Q2D×7)。圖46展示9，10-去氫-dEpoF、dEpoB及紫杉醇對具有人類乳腺癌(MX-1)腫瘤異種移植物的裸鼠中腫瘤大小的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q2D×6)。圖47顯示具有人類乳腺癌(MX-1)腫瘤異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-dEpoF、dEpoB及紫杉醇治療后體重的變化(6小時輸注，Q2D×6)。圖48展示9，10-去氫-dEpoF及dEpoB對具有人類結(jié)腸癌HCT-116異種移植物的裸鼠的治療效果(6小時輸注，Q2D×8)。圖49顯示具有HCT-116異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-dEpoF及dEpoB治療后體重的變化(6小時輸注，Q2D×8)。圖50顯示9，10-去氫-dEpoF及dEpoB在具有紫杉醇-人類肺癌(A549/紫杉醇)異種移植物的裸鼠中的治療效果(6小時輸注，Q2D×5)。圖51顯示具有紫杉醇-人類肺癌(A549/紫杉醇)異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-dEpoF及dEpoB治療后體重的變化(6小時輸注，Q2D×5)。圖52所示表比較各種埃坡霉素類似物的體外腫瘤生長抑制作用及相對治療指數(shù)。圖53顯示9，10-去氫-dEpoB在具有MX-1異種移植物的裸鼠中的治療效果(Q3D×9，6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖54顯示具有MX-1異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-dEpoB治療后體重的變化(Q3D×9，6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖55顯示9，10-去氫-埃坡霉素B在具有MX-1異種移植物的裸鼠中的治療效果(Q3D×9，6小時輸注)。圖56顯示具有MX-1異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-埃坡霉素B治療后體重的變化(Q3D×9，6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖57顯示在具有MX-1異種移植物的裸鼠中低劑量26-三氟-去氫-dEpoB的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q2D×12)。圖58展示具有MX-1異種移植物的裸鼠用低劑量26-三氟-9，10-去氫-dEpoB治療后體重的變化(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q2D×12)。圖59顯示埃坡霉素類似物抗裸鼠中人類腫瘤異種移植物的化學治療效果。將腫瘤組織(40-50mg)在0天時皮下植入。當腫瘤尺寸達到約100mm3或以上時開始治療，如圖所示。箭頭所示的所有治療皆經(jīng)由尾部靜脈用微型導管及可編程泵6小時靜脈內(nèi)輸注實施，如先前文獻所述(Su、D.-S.等人，Angew.Chem.Iht.Ed(1997，36，2093)；Chou，T.C.等人，Proc.Natl，Acad.Sci.USA.1998，95，15798；每一皆以引用的方式并入本文中)。每一劑量組由四或更多只小鼠組成。假定1mm3腫瘤等于1mg腫瘤組織，體重是指總體重減去腫瘤體重。A.與表1的劑量(20mg/Kg及30mg/Kg)相比，用低劑量25-三氟-(E)-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB(10mg/Kg)治療的乳腺癌MX-1異種移植物。B.用25-三氟-(E)-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB(25mg/Kg)及dEpoB(30mg/Kg)治療MX-1大異種移植物(50mm3)。C.用25-三氟-(E)-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB(25mg/Kg)及dEpoB(30mg/Kg)治療的緩慢生長的A549肺癌異種移植物。D.用25-三氟-(E)-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB(20mg/Kg)及(E)-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB(4mg/Kg)治療的A549/紫杉醇(體外44-倍抗紫杉醇(paclitaxel))異種移植物。對于deH-dEpoB治療，由于在28天體重明顯快速降低，故跳過該天的治療。圖60繪示C-21修飾9，10-(E)-去氫-埃坡霉素的合成。圖60A顯示26-三氟-21-甲基氨基-9，10-(E)-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B的合成。圖60B是用于制備作為合成26-三氟-21-二甲基氨基-9，10-(E)-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B中間體的26-三氟-21-氨基-9，10-(E)-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B的合成示意圖。圖61所示表列出C-21修飾埃坡霉素抗腫瘤細胞株CCRF-CEM及其抗藥性亞株的IC50值。圖62顯示26-三氟-9，10-去氫-dEopB及紫杉醇在具有人類T-細胞淋巴性白血病CCRF-CEM異種移植物的裸鼠中的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q2D×8)。圖63顯示具有人類T-細胞淋巴性白血病CCRF-CEM異種移植物的裸鼠用25-三氟-9，10-去氫-dEopB及紫杉醇治療后體重的變化(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q2D×8)。圖64顯示26-三氟-9，10-去氫-dEopB及紫杉醇在具有人類T-細胞淋巴性白血病CCRF-CEM/紫杉醇異種移植物(抗紫杉醇)的裸鼠中的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q2D×7、×5)。圖65顯示具有人類T-細胞淋巴性白血病CCRF-CEM/紫杉醇異種移植物(抗紫杉醇)的裸鼠用26-三氟-9，10-去氫-dEopB及紫杉醇治療后體重的變化(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q2D×7、×5)。圖66顯示26-三氟-9，10-去氫-dEopB及紫杉醇在具有人類結(jié)腸癌HCT-116異種移植物的裸鼠中的治療效果(Q2D×4、×2，6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖67顯示具有人類結(jié)腸癌HCT-116異種移植物的裸鼠用26-三氟-9，10-去氫-dEopB及紫杉醇治療后體重的變化(Q2D×4、×2，6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖68顯示9，10-去氫-dEopB在具有MX-1異種移植物的裸鼠中的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖69顯示具有人類乳腺癌MX-1異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-EopB治療后體重的變化(6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖70顯示9，10-去氫-EopB在具有人類T-細胞淋巴性白血病CCRF-CEM/紫杉醇異種移植物(抗紫杉醇)的裸鼠中的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q3D×5、×2)。圖71顯示具有人類T-細胞淋巴性白血病CCRF-CEM/紫杉醇異種移植物(抗紫杉醇)的裸鼠用9，10-去氫-EopB治療后體重的變化(6小時靜脈內(nèi)輸注，Q3D×5、×2)。圖72顯示26-三氟-dEopB及26-三氟-9，10-去氫-dEopF在具有乳腺癌MX-1異種移植物的裸鼠中的治療效果(Q2D×11，靜脈內(nèi)輸注)。圖73顯示具有乳腺癌MX-1異種移植物的裸鼠用26-三氟-dEopB及26-三氟-9，10-去氫-dEopF治療后體重的變化(Q2D×11，靜脈內(nèi)輸注)。圖74顯示9，10-去氫-dEopB在具有乳腺癌MX-1異種移植物的裸鼠中的治療效果(Q3D×9，6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖75顯示具有乳腺癌MX-1異種移植物的裸鼠用9，10-去氫-dEopB治療后體重的變化(Q3D×9，6小時靜脈內(nèi)輸注)。圖76顯示26-三氟-9，10-去氫-dEopF在具有乳肺癌(MX-1)異種移植物的裸鼠中的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注及靜脈內(nèi)注射)。圖77顯示具有MX-1異種移植物的裸鼠用26-三氟-9，10-去氫-dEopF治療后體重的變化(6小時靜脈內(nèi)輸注及靜脈內(nèi)注射)。定義下文亦更詳細的闡述了本發(fā)明的某些化合物及特定官能團的定義。對于本發(fā)明而言，化學元素根據(jù)元素周期表(CAS版，化學及物理手冊(HandbookofChemistryandPhysics)第75版，內(nèi)封面)確定，且特定官能團通常如本文所述來定義。此外，有機化學的一般原則及特定官能部分及反應性皆闡述于“有機化學(OrganicChemistry)”(ThomasSorrell，UniversityScienceBooks，Sausalito1999，其整體內(nèi)容以引用的方式并入本文中)。而且，所屬領域的技術(shù)人員應了解，本文所闡述的該些合成方法可使用各種保護基團。本文所用術(shù)語“保護基團”意指暫時封阻一特定官能部分(例如，O、S或N)，以便一反應可選擇性地在多官能化合物的另一反應位置處實施。在較佳實施例中，一保護基團以高效率選擇性地反應，生成一對預計反應穩(wěn)定的被保護基質(zhì)；該保護基團必須可高效率地由不攻擊其他官能團且易于獲得(較佳無毒)的試劑選擇性去除；該保護基團形成一易于分離的衍生物(更佳不產(chǎn)生新的手性中心(stereogeniccenter))；且該保護基團具有最少的附加官能度以避免其他反應位置。如本文所詳述，可使用氧、硫、氮及碳保護基團。本文詳細闡述了實例性保護基團，然而，應了解，本發(fā)明并非意欲限于這些保護基團；相反，多種其他等效保護基團使用上述標準可容易地識別出并用于本發(fā)明方法中。此外，多種保護基團闡述于“有機合成中的保護基團”(“ProtectiveGroupsinOrganicSynthesis”第3版，Greene，T.W.及Wuts，P.G.編輯，JohnWiley&Sons，NewYork1999，其整體內(nèi)容以引用的方式并入本文中)中。應了解，本文所述化合物可用任何數(shù)量的取代基或官能部分取代。一般而言，術(shù)語“取代”(無論其前是否有術(shù)語“視情況”)及本發(fā)明化學式中所包含的取代基指用一規(guī)定取代基取代給定結(jié)構(gòu)中的氫基。當給定結(jié)構(gòu)中的一個以上位置被選自一規(guī)定群組的一個以上取代基取代時，每一位置處的取代基可相同或不同。本文所用術(shù)語“取代”意欲包括有機化合物的所有容許的取代基。廣義上，該些容許的取代基包括有機化合物的非環(huán)狀及環(huán)狀、具支鏈及不具支鏈、碳環(huán)及雜環(huán)、芳族及非芳族取代基。對于本發(fā)明而言，諸如氮等雜原子可具有滿足雜原子化合價要求的氫取代基及/或本文所述的任何容許的有機化合物取代基。而且，本發(fā)明并不意欲以任何方式受限于有機化合物的容許取代基。本發(fā)明所預期取代基及變量的組合較佳為那些可導致形成用于治療(例如)增生型疾病(包括但不限于癌癥)的穩(wěn)定化合物的組合。本文所用術(shù)語“穩(wěn)定”較佳以下化合物，該些化合物具有足以容許制造的穩(wěn)定性并可在足夠長的待檢測時期內(nèi)及對本文所述目的而言有用的足夠長的時期內(nèi)保持化合物完整性。本文所用術(shù)語“脂肪族”包括飽和及不飽和、直鏈(即，不具支鏈)、支鏈、環(huán)狀或多環(huán)脂肪族碳氫化合物，其可視情況用一或多個官能團取代。所屬領域的技術(shù)人員應了解，“脂肪族”在本文中意欲包括(但不限于)烷基、烯基、炔基、環(huán)烷基、環(huán)烯基及環(huán)炔基部分。因此，本發(fā)明所用術(shù)語“烷基”包括直鏈、支鏈及環(huán)狀烷基。一類似慣例可用于其他諸如“烯基”、“炔基”及類似基團等通稱。而且，本文所用術(shù)語“烷基”、“烯基”、“炔基”及類似基團涵蓋經(jīng)取代及未經(jīng)取代基團二者。在某些實施例中，本文所用術(shù)語“低碳烷基”用于指那些具有1至6個碳原子的烷基(環(huán)狀、非環(huán)狀、經(jīng)取代、未經(jīng)取代、具支鏈或不具支鏈)。在某些實施例中，本發(fā)明所用烷基、烯基、炔基包含1至20個脂肪族碳原子。在某些其他實施例中，本發(fā)明所用烷基、烯基、炔基包含1至10個脂肪族碳原子。在另外實施例中，本發(fā)明所用烷基、烯基、炔基包含1至8個脂肪族碳原子。在另外實施例中，本發(fā)明所用烷基、烯基、炔基包含1至6個脂肪族碳原子。在另一些實施例中，本發(fā)明所用烷基、烯基、炔基包含1至4個脂肪族碳原子。因此，例示性脂肪族基團包括(但不限于)(例如)甲基、乙基、正-丙基、異丙基、環(huán)丙基、-CH2-環(huán)丙基、烯丙基、正-丁基、第二-丁基、異丁基、第三-丁基、環(huán)丁基、-CH2-環(huán)丁基、正-戊基、第二-戊基、異戊基、第三-戊基、環(huán)戊基、-CH2-環(huán)戊基、正-己基、第二-己基、環(huán)己基、-CH2-環(huán)己基部分及類似物，其又可具有一或多個取代基。烯基包括(但不限于)(例如)乙烯基、丙烯基、丁烯基、1-甲基-2-丁烯-1-基及類似物。代表性炔基包括(但不限于)乙炔基、2-丙炔基(炔丙基)、1-丙炔基及類似物。本文所用術(shù)語“烷氧基”或“烷硫基”指通過一氧原子或通過一硫原子鍵結(jié)至一母體分子部分的上文所定義烷基。在某些實施例中，該烷基包含1至20個脂肪族碳原子。在某些其他實施例中該烷基包含1至10個脂肪族碳原子。在另外一些實施例中，本發(fā)明所用烷基、烯基、炔基包含1至8個脂肪族碳原子。在再一些實施例中，該烷基包含1至6個脂肪族碳原子。在另外的實施例中，該烷基包含1至4個脂肪族碳原子。烷氧基的實例包括(但不限于)甲氧基、乙氧基、丙氧基、異丙氧基、正-丁氧基、第三-丁氧基、新戊氧基及正-己氧基。烷硫基的實例包括(但不限于)甲硫基、乙硫基、丙硫基、異丙硫基、正-丁硫基及類似基團。術(shù)語“烷基氨基”系指具有-NHR’結(jié)構(gòu)的基團，其中R’是本文所定義的烷基。在某些實施例中，該烷基包含1至20個脂肪族碳原子。在某些其他實施例中該烷基包含1至10個脂肪族碳原子。在另外一些實施例中，本發(fā)明所用烷基、烯基、炔基包含1至8個脂肪族碳原子。在另外實施例中，該烷基包含1至6個脂肪族碳原子。在再一些實施例中，該烷基包含1至4個脂肪族碳原子。烷基氨基的實例包括(但不限于)甲氨基、乙氨基、異-丙氨基及類似基團。本發(fā)明化合物上述脂肪族(或其他)部分的取代基的某些實例包括(但不限于)脂肪族基團；雜脂肪族基團；芳基；雜芳基；芳基烷基；雜芳基烷基；烷氧基；芳氧基；雜烷氧基；雜芳氧基；烷硫基；芳硫基；雜烷硫基；雜芳硫基；F；Cl；Br；I；-OH；-NO2；-CN；-CF3；-CH2CF3；-CHCl2；-CH2OH；-CH2CH2OH；-CH2NH2；-CH2SO2CH3；-C(O)Rx；-CO2(Rx)；-CON(RX)2；-OC(O)RX；-OCO2Rx；-OCON(RX)2；-N(RX)2；-S(O)2RX；-NRx(CO)Rx，其中所出現(xiàn)的Rx獨立地包括(但不限于)脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中上文及此處所闡述的任一脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基烷基或雜芳基烷基取代基皆可經(jīng)取代或未經(jīng)取代、具支鏈或不具支鏈、環(huán)狀或非環(huán)狀，且其中上文及此處所闡述的任一芳基及雜芳基取代基皆可經(jīng)取代或未經(jīng)取代。通?？捎萌〈钠渌麑嵗杀疚乃鰧嵗兴镜奶囟▽嵤├U述。一般而言，本文所用術(shù)語“芳基”及“雜芳基”指較佳具有3至14個碳原子的穩(wěn)定單-或多環(huán)、雜環(huán)、多環(huán)及多雜環(huán)不飽和部分，每一部分皆可經(jīng)取代或未經(jīng)取代。取代基包括(但不限于)上述任一取代基，即，所述用于脂肪族部分或用于本文所述其他部分導致形成穩(wěn)定化合物的取代基。在本發(fā)明的某些實施例中，“芳基”是指具有一或兩個芳族環(huán)的單或二環(huán)碳環(huán)體系，其包括(但不限于)苯基、萘基、四氫萘基、二氫茚基、茚基及類似基團。在本發(fā)明某些實施例中，本文所用術(shù)語“雜芳基”系指具有5至10個環(huán)原子的環(huán)狀芳基，其中一個環(huán)原子選自S、O及N；零、一或兩個環(huán)原子是獨立選自S、O及N的另外雜原子；且其余環(huán)原子為碳，該基團通過任一環(huán)原子結(jié)合至分子的其余部分，例如，吡啶基、吡嗪基、嘧啶基、吡咯基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、噁唑基、異噁唑基、噻二唑基、噁二唑基、噻吩基、呋喃基、喹啉基、異喹啉基及類似基團。應了解，芳基及雜芳基(包括二環(huán)芳基)可未經(jīng)取代或經(jīng)取代，其中取代包括獨立地用任一或多個括(但不限于)下列的以下部分替換其上的一、二或三個氫原子脂肪族基團；雜脂肪族基團；芳基；雜芳基；芳基烷基；雜芳基烷基；烷氧基；芳氧基；雜烷氧基；雜芳氧基；烷硫基；芳硫基；雜烷硫基；雜芳硫基；F；Cl；Br；I；-OH；-NO2；-CN；-CF3；-CH2CF3；-CHCl2；-CH2OH；-CH2CH2OH；-CH2NH2；-CH2SO2CH3；-C(O)Rx；-CO2(Rx)；-CON(RX)2；-OC(O)RX；-OCO2Rx；-OCON(RX)2；-N(RX)2；-S(O)2RX；-NRx(CO)Rx，其中所出現(xiàn)的Rx皆獨立地包括(但不限于)脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中上文及此處所闡述的任一脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基烷基或雜芳基烷基取代基可經(jīng)取代或未經(jīng)取代、具支鏈或不具支鏈、環(huán)狀或非環(huán)狀，且其中上文及此處所闡述的任一芳基及雜芳基取代基皆可經(jīng)取代或未經(jīng)取代。通?？捎萌〈钠渌麑嵗杀疚乃鰧嵗兴镜奶囟▽嵤├U述。本文所用術(shù)語“環(huán)烷基”特定地指具有三至七個(較佳三至十個)碳原子的基團。適宜環(huán)烷基包括(但不限于)環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基及類似基團，如同在其他脂肪族、雜脂肪族或雜環(huán)部分的情況，其可視情況經(jīng)取代基取代，該些取代基包括(但不限于)脂肪族基團；雜脂肪族基團；芳基；雜芳基；芳基烷基；雜芳基烷基；烷氧基；芳氧基；雜烷氧基；雜芳氧基；烷硫基；芳硫基；雜烷硫基；雜芳硫基；F；Cl；Br；I；-OH；-NO2；-CN；-CF3；-CH2CF3；-CHCl2；-CH2OH；-CH2CH2OH；-CH2NH2；-CH2SO2CH3；-C(O)Rx；-CO2(Rx)；-CON(RX)2；-OC(O)RX；-OCO2Rx；-OCON(RX)2；-N(RX)2；-S(O)2RX；-NRx(CO)Rx，其中所出現(xiàn)的Rx獨立包括(但不限于)脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中上文及此處所闡述的任一脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基烷基或雜芳基烷基取代基可經(jīng)取代或未經(jīng)取代、具支鏈或不具支鏈、環(huán)狀或非環(huán)狀，且其中上文及此處所闡述的任一芳基及雜芳基取代基可經(jīng)取代或未經(jīng)取代。通?？捎萌〈钠渌麑嵗杀疚乃鰧嵗兴镜奶囟▽嵤├U述。本文所用術(shù)語“雜脂肪族”指含有一或多個(例如)代替碳原子的氧、硫、氮、磷或硅原子的脂肪族部分。雜脂肪族部分可具支鏈、不具支鏈、環(huán)狀或非環(huán)狀且包括飽和或不飽和雜環(huán)，例如，嗎啉基、吡咯烷基等。在某些實施例中，雜脂肪族部分可通過用包括(但不限于)下列的部分獨立替換其上的一或多個氫原子來取代脂肪族基團；雜脂肪族基團；芳基；雜芳基；芳基烷基；雜芳基烷基；烷氧基；芳氧基；雜烷氧基；雜芳氧基；烷硫基；芳硫基；雜烷硫基；雜芳硫基；F；Cl；Br；I；-OH；-NO2；-CN；-CF3；-CH2CF3；-CHCl2；-CH2OH；-CH2CH2OH；-CH2NH2；-CH2SO2CH3；-C(O)Rx；-CO2(Rx)；-CON(RX)2；-OC(O)RX；-OCO2Rx；-OCON(RX)2；-N(RX)2；-S(O)2RX；-NRx(CO)Rx，其中所出現(xiàn)的Rx獨立包括(但不限于)脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中上文及此處所闡述的任一脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基烷基或雜芳基烷基取代基可經(jīng)取代或未經(jīng)取代、具支鏈或不具支鏈、環(huán)狀或非環(huán)狀，且其中上文及此處所闡述的任一芳基及雜芳基取代基可經(jīng)取代或未經(jīng)取代。通常可用取代基的其他實例由本文所述實例中所示的特定實施例闡述。本文所用術(shù)語“鹵代”及“鹵素”指一選自氟、氯、溴及碘的原子。術(shù)語“鹵代烷基”指上文所定義的具有1、2或3個鍵結(jié)至其的鹵素原子的烷基且可由諸如氯甲基、溴乙基、三氟甲基及類似基團等基團例示。本文所用術(shù)語“雜環(huán)烷基”或“雜環(huán)”指一非芳族5-、6-或7-元環(huán)或一多環(huán)基團，其包括(但不限于)二或三環(huán)基團，該基團包含具有1至3個獨立選自氧、硫及氮的雜原子的稠合六元環(huán)，其中(i)每一5元環(huán)皆具有0至1個雙鍵且每一6元環(huán)皆具有0至2個雙鍵，(ii)氮及硫雜原子可視情況經(jīng)氧化，(iii)氮雜原子可視情況經(jīng)季銨化，及(iv)任一上述雜環(huán)皆可稠合至一苯環(huán)。代表性雜環(huán)包括(但不限于)吡咯烷基、吡唑啉基、吡唑烷基、咪唑啉基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、噁唑烷基、異噁唑烷基、嗎啉基、噻唑烷基、異噻唑烷基及四氫呋喃基。在某些實施例中，使用一“經(jīng)取代雜環(huán)烷基或雜環(huán)”且如本文所用指一其上1、2或3個氫原子被以下基團(但不限于這些基團)獨立替換來取代的如上所定義雜環(huán)烷基或雜環(huán)基團脂肪族基團；雜脂肪族基團；芳基；雜芳基；芳基烷基；雜芳基烷基；烷氧基；芳氧基；雜烷氧基；雜芳氧基；烷硫基；芳硫基；雜烷硫基；雜芳硫基；F；Cl；Br；I；-OH；-NO2；-CN；-CF3；-CH2CF3；-CHCl2；-CH2OH；-CH2CH2OH；-CH2NH2；-CH2SO2CH3；-C(O)Rx；-CO2(Rx)；-CON(RX)2；-OC(O)RX；-OCO2Rx；-OCON(RX)2；-N(RX)2；-S(O)2RX；-NRx(CO)Rx，其中每一存在的Rx獨立包括(但不限于)脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基，其中上文及此處所闡述的任一脂肪族、雜脂肪族、芳基烷基或雜芳基烷基取代基可經(jīng)取代或未經(jīng)取代、具支鏈或不具支鏈、環(huán)狀或非環(huán)狀，且其中上文及此處所闡述的任一芳基及雜芳基取代基可經(jīng)取代或未經(jīng)取代。通?？捎萌〈钠渌麑嵗杀疚乃鰧嵗兴镜奶囟▽嵤├U述?！皹擞洝北疚乃眯g(shù)語“標記”意欲指一化合物連接有至少一個使得能夠檢測該化合物的元素、同位素或化學物。一般而言，標記物分為三類a)同位素標記物，其可為放射性或重同位素，其包括(但不限于)2H、3H、32P、35S、67Ga、99mTc(Tc-99m)、111In、123I、125I、169Yb及186Re；b)免疫標記物，其可為抗體或抗原；及c)有色或熒光染料。應了解，該些標記物可在任一不干擾正被檢測化合物的生物活性或特性的位置處納入該化合物中。在本發(fā)明的某些實施例中，光親和性標記用于直接解釋生物系統(tǒng)中的分子間相互作用(例如，用以探測微管蛋白二聚體中埃坡霉素結(jié)合位置)?？墒褂酶鞣N已知發(fā)光團，多數(shù)是依賴于重氮化合物、疊氮化物或重氮甲烷光轉(zhuǎn)化為氮烯或碳烯(參見，Bayley，H.，PhotogeneratedReagentsinBiochemistryandMolecularBiology(1983)，Elsevier，Amsterdam.，其整體內(nèi)容以引用的方式并入本文中)。在本發(fā)明的某些實施例中，所用光親和性標記物為經(jīng)一或多個鹵素部分取代的鄰、間及對-疊氮苯甲?；?，其包括(但不限于)4-疊氮基-2，3，5，6-四氟苯甲酸。“聚合物”本文所用術(shù)語“聚合物”指一包含由相同或不同重復單元(單體)構(gòu)成的開放、閉合、線性、具支鏈或經(jīng)交聯(lián)的鏈的化合物。應了解，在某些實施例中，術(shù)語聚合物指生物聚合物，如本文所用其意欲指在自然界中發(fā)現(xiàn)的聚合材料或基于自然界中發(fā)現(xiàn)的聚合材料的聚合材料，其包括(但不限于)核酸、肽及其類似物。在某些其他實施例中，術(shù)語聚合物指合成聚合物，例如可生物降解聚合物或其他聚合材料。應了解，固態(tài)聚合載體亦涵蓋于本發(fā)明聚合物的范圍中。本發(fā)明化合物可鍵結(jié)至聚合載體，且因此可在固相上實施某些合成修飾。本文所用術(shù)語“固態(tài)載體”意欲包括(但不限于)小球、碟狀物、毛細管、中空纖維、探針、定位針、實心纖維、纖維素珠、微孔-玻璃珠、硅膠、視情況與二乙烯基苯交聯(lián)的聚苯乙烯珠、經(jīng)接枝共聚的珠、聚丙烯酰胺珠、乳膠珠、視情況與N-N′-二-丙烯酰乙二胺交聯(lián)的二甲基丙烯酰胺珠及涂覆有一疏水性聚合物的玻璃粒。所屬領域的技術(shù)人員應了解，具體固態(tài)載體的選擇受限于該載體與所用反應化學物質(zhì)的相容性。一實例性固態(tài)載體為Tentagel氨基樹脂，其為1)與二乙烯基苯交聯(lián)的聚苯乙烯珠與2)PEG(聚乙二醇)的復合物。由于Tentagel可提供用于珠上或珠外分析的通用載體，且其在甲苯至水的溶劑中亦具有極佳的溶脹性，故其為一特別有用的載體。具體實施例方式由于認識到需要開發(fā)新穎及有效癌癥療法，本發(fā)明提供能夠獲得具有寬廣生物及藥理活性范圍的大環(huán)的新穎合成方法，以及具有該活性的新穎化合物、新穎治療組合物及使用該些化合物及組合物的方法。在某些實施例中，本發(fā)明化合物可用于治療癌癥。本發(fā)明的某些化合物對癌細胞株展示細胞毒性或生長抑制作用，顯示出聚合微管蛋白及穩(wěn)定微管裝配的能力，及/或在癌細胞異種移植物模型中導致腫瘤收縮或消失。在某些實施例中，該些化合物的副作用降低或最小化，這些副作用其包括對重要器官的毒性、惡心、嘔吐、腹瀉、脫發(fā)、體重減輕、體重增加、肝臟毒性、皮膚病等等。由于該些化合物的水溶性增加、毒性降低、治療范圍擴大、療效增加等，其亦更易于調(diào)配。本發(fā)明化合物概述本發(fā)明化合物包括如以下進一步定義的具通式(0)及(0’)的化合物及其醫(yī)藥上可接受的衍生物其中R0為一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；在某些實施例中，R0為一芳基烷基、芳基烯基、雜芳基烷基或雜芳基烯基部分；在其他實施例中，R0為一雜芳基烯基部分；在某些實施例中，R0為一雜芳基烷基部分；在某些實施例中，R0為一5-至7元芳基或雜芳基部分；在另外實施例中，R0為一8至12元的二環(huán)芳基或雜芳基部分；在其他實施例中，R0為一其中一苯環(huán)稠合至一雜芳基或芳基部分的二環(huán)部分；在另外的實施例中，R0為一其中一苯環(huán)稠合至一噻唑、噁唑或咪唑部分的二環(huán)部分；在其他實施例中，R0為一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的苯基部分；R3及R4獨立為氫；或經(jīng)取代或未經(jīng)取代、線性或具支鏈、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分(視情況經(jīng)一或多個羥基取代)、經(jīng)保護的羥基、烷氧基、羧基、甲醛(carboxaldehyde)、線性或具支鏈烷基或環(huán)狀縮醛、氟、氨基、經(jīng)保護的氨基、經(jīng)一或兩個烷基或芳基部分取代的氨基、N-肟基或N-烷氧基亞氨基；在某些實施例中，R3及R4獨立為氫、氟或低碳烷基；在某些實施例中，R3及R4獨立為氫或甲基；在其他實施例中，R3為甲基且R4為氫；R5及R6獨立為氫或一保護基團；在某些實施例中，R5及R6二者為氫；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中所出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；在某些實施例中，X為O；在某些實施例中，X為NH；Y為O、S、NH、C(R7)2、CH2、N(R7)或NH，其中所出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；在某些實施例中，Y為O；在某些實施例中，Y為NH；在另外的實施例中，Y為CH2；每一R8獨立為氫；鹵素、羥基、烷氧基、氨基、二烷基氨基、烷基氨基、氟代基、氰基或經(jīng)取代或未經(jīng)取代、線性或具支鏈、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基或雜芳基烷基、雜芳基烯基、雜芳基炔基部分(視情況經(jīng)一或多個羥基取代)、經(jīng)保護的羥基、烷氧基、羧基、甲醛、線性或具支鏈烷基或環(huán)狀縮醛、氟、氨基、經(jīng)保護的氨基、經(jīng)一或兩個烷基或芳基部分取代的氨基、N-肟基或N-烷氧基亞氨基；在某些實施例中，R8為氫；在某些實施例中，R8為羥基；在其他實施例中，R8為氟；在另外的其他實施例中，R8為低碳烷基，例如甲基；在其他實施例中，R8為-CF3、-CF2H或-CFH2；在某些實施例中，R8為全氟代或氟代烷基；在另外的實施例中，R8為鹵代或全鹵代烷基；R9及R10獨立為氫；或經(jīng)取代或未經(jīng)取代、線性或具支鏈、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分(視情況經(jīng)一或多個羥基取代)、經(jīng)保護的羥基、烷氧基、羧基、甲醛、線性或具支鏈烷基或環(huán)狀縮醛、氟、氨基、經(jīng)保護的氨基、經(jīng)一或兩個烷基或芳基部分取代的氨基、N-肟基或N-烷氧基亞氨基；在某些實施例中，R9及R10中之一為甲基；在某些實施例中，R9及R10為甲基；在另外的其他實施例中，R9及R10中之一為甲基，且另一個為氫；在某些實施例中，R9及R10為氫；所出現(xiàn)RB獨立為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)或B’-；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’-；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個氫取代；鹵素；-ORB’-；-SRB’-；-N(RB’)2；-C(O)ORB’-；-C(O)RB’-；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’-；-O(C＝O)ORB’-；-NRB’(C＝O)RB-；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或為放射性標記物；在某些實施例中，RB為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基，每一未經(jīng)取代或視情況經(jīng)一或多個鹵素、-OH、-或B’、NH2或N(RB’)2或其任一組合取代，其中所出現(xiàn)的RB’獨立為氫、烷基、芳基或一保護基團，在某些實施例中，RB為氫、甲基或乙基，在其他的實施例中，RB為甲基，在某些實施例中，為-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；在另外的其他實施例中，RB為-CF3、-CH2F或CHF2；在某些實施例中，RB為全氟代或氟代烷基；在其他實施例中，RB為鹵代或全鹵代烷基；所出現(xiàn)的RB’獨立為氫；一保護基團；線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；m為1、2、3或4，在某些實施例中，m為1或2，在其他實施例中，m為1。本發(fā)明化合物包括下文進一步定義的通式(I)或(I’)的化合物及其醫(yī)藥上可接受的衍生物其中R1為氫或低碳烷基；在某些實施例中，R1為甲基；在某些實施例中，R1為-CF3、-CF2H或CH2F；在其他實施例中，R1為全氟代或氟代烷基；在另外的其他實施例中，R1為鹵代或全鹵代烷基；R2為一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分；在某些實施例中，R2為經(jīng)取代或未經(jīng)取代的噁唑；在其他實施例中，R2為經(jīng)取代或未經(jīng)取代的噻唑；R3及R4每一獨立為氫；或經(jīng)取代或未經(jīng)取代、線性或具支鏈、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分(視情況經(jīng)一或多個羥基取代)、經(jīng)保護的羥基、烷氧基、羧基、甲醛、線性或具支鏈烷基或環(huán)狀縮醛、氟、氨基、經(jīng)保護的氨基、經(jīng)一或兩個烷基或芳基部分取代的氨基、N-肟基或N-烷氧基亞氨基；在某些實施例中，R3及R4每一獨立為氫、氟或低碳烷基；在其他實施例中，R3及R4每一獨立為氫或甲基；在另外的其他實施例中，R3為甲基且R4為氫；R5及R6每一獨立為氫或保護基團；在某些實施例中，R5及R6二者為氫；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中所出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；在某些實施例中，X為O；在其他實施例中，X為NH；所出現(xiàn)的RB獨立為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個氫取代；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；在某些實施例中，RB為氫、甲基、乙基、丙基、丁基、戊基、己基、環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基或環(huán)己基，每一未經(jīng)取代或視情況經(jīng)一或多個鹵素、-OH、-ORB’或-N(RB’)2或其任一組合取代，其中所出現(xiàn)的RB’獨立為氫、烷基、芳基或保護基團，在其他實施例中，RB為氫、甲基或乙基，在另外的其他實施例中，RB為甲基，在另外的其他實施例中，RB為-CF3、-CH2F或CHF2。在某些實施例中，本發(fā)明化合物包括所示的具有所定義立體化學結(jié)構(gòu)的通式(II)或(II’)化合物或其中X、R1、R2、R3、R4、R5、R6、RB及X皆如上文所定義之。在某些實施例中，X為O。在其他實施例中，X為NH。在其他實施例中，X為CH2。在某些實施例中，R2為經(jīng)取代或未經(jīng)取代的噻唑。在某些實施例中，R2為2-甲基-噻唑-4-基。在其他實施例中，R2為2-羥甲基-噻唑-4-基。在另外的其他實施例中，R2為2-氨甲基-噻唑-4-基。在其他實施例中，R2為2-硫甲基-噻唑-4-基。在某些實施例中，R2為經(jīng)取代或未經(jīng)取代的噁唑。在某些實施例中，R2為2-甲基-噁唑-4-基。在其他實施例中，R2為2-羥甲基-噁唑-4-基。在另外的其他實施例中，R2為2-氨甲基-噁唑-4-基。在其他實施例中，R2為2-硫甲基-噁唑-4-基。在某些實施例中，RB為氫、甲基、乙基、-CF3、-CH2F、-CF2H。在某些實施例中，RB為甲基。在另外的其他實施例中，RB為-CF3。在某些實施例中，RB為氫。在其他實施例中，RB為乙基。某些較佳化合物包括(例如)本發(fā)明化合物包括那些上文具體陳述及此處所闡述的化合物，且部分地由本文其他地方所揭示的各類、亞屬及物種來加以圖解說明。所屬領域的技術(shù)人員應了解，本發(fā)明的化合物中可存在不對稱中心。因此，本發(fā)明化合物及其醫(yī)藥組合物可呈單一對映異構(gòu)體、非對映體或幾何異構(gòu)體形式，或可呈立體異構(gòu)體混合物形式。在某些實施例中，本發(fā)明化合物可為對映異構(gòu)純化合物。在某些其他實施例中，提供立體異構(gòu)體或非對映體的混合物。應了解，上述化合物的某些類及次類可存在各種同分異構(gòu)形式。本發(fā)明涵蓋呈實質(zhì)上不含其他異構(gòu)體的單一異構(gòu)體形式及或者呈各種異構(gòu)體的混合物形式(例如，立體異構(gòu)體的外消旋混合物)的化合物。此外，除非特別說明，否則本發(fā)明涵蓋(Z)及(E)兩種雙鍵異構(gòu)體。因此，通常以(O)、(O’)、(I)、(I’)、(II)及(II’)結(jié)構(gòu)繪示的本發(fā)明化合物涵蓋彼等其中雙鍵為(Z)或(E)的結(jié)構(gòu)。在某些較佳實施例中，C12-C13位置處的雙鍵為順式或Z構(gòu)型。在某些實施例中，C9-C10位置處的雙鍵為反式或E構(gòu)型。在另外的其他實施例中，C12-C13位置處的雙鍵為順式或Z構(gòu)型，且C9-C10位置處的雙鍵為反式或E構(gòu)型。本發(fā)明亦涵蓋上文所述特定化合物的互變異構(gòu)體。此外，本發(fā)明提供本發(fā)明化合物的醫(yī)藥上可接受衍生物，及使用這些化合物、其醫(yī)藥組合物或兩者中的任一種與一或多種附加治療劑的組合治療一患者的方法。本文所用習語“醫(yī)藥上可接受衍生物”表示該化合物的任一醫(yī)藥上可接受鹽、酯或該酯的鹽，或任一投與一患者時能夠提供(直接或間接)本文另外所述化合物或其代謝物或殘余物的其他加合物或衍生物。因此，醫(yī)藥上可接受衍生物尤其包括前藥。前藥是一化合物的衍生物，其通常具有顯著降低的藥理活性，其包含一易于在體內(nèi)去除從而產(chǎn)生作為藥理活性物質(zhì)的母體分子的附加部分。一前藥的實例是在體內(nèi)解離產(chǎn)生一相關化合物的酯。各種化合物的前藥及用于衍生該些母體化合物以產(chǎn)生該些前藥的材料及方法已為人熟知且適用于本發(fā)明。下文將更詳細的闡述某些實例性醫(yī)藥組合物及醫(yī)藥上可接受衍生物。尤其令人感興趣的本發(fā)明化合物是具以下性質(zhì)的化合物●對維持在體外的癌細胞株或在使用一科學上可接受癌細胞異種移植物模型的動物研究中展現(xiàn)細胞毒性或生長抑制作用；●展示一聚合微管蛋白及穩(wěn)定微管裝配的能力；●對重要器官具有最低水平的毒性；●在科學上可接受的癌細胞異種移植物模型中導致腫瘤消失；●在科學上可接受的癌細胞異種移植物模型中導致腫瘤收縮；●在科學上可接受的癌細胞異種移植物模型中導致腫瘤消失且停止治療后使腫瘤的復發(fā)延遲/或不再復發(fā)；●在科學上可接受的癌細胞異種移植物模型中展示暫時且可逆的體重減輕并顯示治療作用；●展示優(yōu)于埃坡霉素A、B、C或D或紫杉醇的增強的水溶性，或另外或者展示足夠高溶解性以致使用比例降低的chremophor即可在一水性介質(zhì)中調(diào)配；及/或●展示優(yōu)于埃坡霉素B、埃坡霉素D或紫杉醇的治療曲線(例如，最佳安全及治療效果)。上文所述各種埃坡霉素類似物已如本文所例示制備、表征及測試。人們發(fā)現(xiàn)9，10-去氫-埃坡霉素類似物可用于治療癌癥，且尤其是已制備該些化合物并發(fā)現(xiàn)其具有上述一或多種期望的特性。合成方法先前已闡述某些埃坡霉素、去氧埃坡霉素及其類似物的合成(參見，美國專利第6,242,469號、第6,284,781號、第6,300,355號、第6,204,388號、第6,316,630號及第6,369,234號；美國專利申請案第09/797,027號、第09/796,959號及第10/236,135號；及PCT公開案WO99/01124、WO99/43653及WO01/64650，其整體內(nèi)容以引用的方式并入本文中)。由于認識到人們需要經(jīng)改良或其他合成方法以大規(guī)模且高效地產(chǎn)生埃坡霉素、去氧埃坡霉素及其類似物，因而本發(fā)明提供一用于合成埃坡霉素、去氧埃坡霉素及其類似物的有效且模式化途徑。盡管本文的實例中闡述某些實例性化合物的合成，但應了解，該方法通常適用于產(chǎn)生上述本文所述每一類及次類化合物的類似物及結(jié)合物。特別是，本發(fā)明的9，10-去氫埃坡霉素化合物可使用用于合成埃坡霉素的合成方法以各種方式來制備。在某些實施例中，該些化合物使用一匯集合成途徑制備。舉例而言，埃坡霉素可通過制備兩個或三個可結(jié)合在一起獲得預期化合物的中間體來合成。在一實施例中，該些中間體之一是一包含1至9個碳的?；糠?，且另一中間體包含10至15個碳，且亦可包含噻唑側(cè)鏈。埃坡霉素的該等兩個大體相等部分可首先利用C-1與脫氧C-15之間的酯化反應結(jié)合在一起。然后，該大環(huán)可利用碳-碳偶合反應(例如鈴木(Suzuki)偶合)或閉環(huán)置換反應來閉環(huán)。在一實施例中，該最終閉環(huán)步驟利用閉環(huán)置換反應形成9，10-雙鍵并關閉該大環(huán)來完成。閉環(huán)置換反應可使用一有機金屬催化劑(例如下文示意圖8中所示Grubbs催化劑)來完成。在某些實施例中，將該9，10-雙鍵還原或氧化，或?qū)?，10-雙鍵進一步官能化以制備其他埃坡霉素衍生物。在其他實施例中，最終的閉環(huán)步驟利用閉環(huán)置換反應形成12，13-雙鍵并閉合該大環(huán)來實施。在某些實施例中，將12，13-雙鍵還原或氧化。在其他實施例中，可用大環(huán)醛醇縮合反應或大環(huán)內(nèi)酯化反應形成該大環(huán)。附圖及實例中提供本發(fā)明化合物的某些實例性合成方法。所屬領域的技術(shù)人員應了解，可利用本文所述的合成程序制備各種類似物及衍生物。舉例而言，人們可利用16元環(huán)上的不同保護基團或不同取代基完成諸多合成步驟。醫(yī)藥組合物本發(fā)明亦提供一包括上文及此處所闡述化合物中至少之一或其醫(yī)藥上可接受的衍生物的醫(yī)藥制劑，其中該些化合物能抑制癌細胞的生長或殺死癌細胞，且在某些相關實施例中能抑制多抗藥性癌細胞的生長或殺死多抗藥性癌細胞。在某些實施例中，該醫(yī)藥制劑亦包含增溶劑或乳化劑，例如氫化蓖麻油(polyoxyl35蓖麻油)或Solutol(聚乙二醇66012-羥基硬脂酸酯)。如上所述，本發(fā)明提供具有抗腫瘤及抗增生活性的新穎化合物，且因此本發(fā)明化合物可用于治療癌癥。因此，本發(fā)明另一方面提供醫(yī)藥組合物，其中該些組合物包括本文所述該些化合物中任一種，且視情況包括一醫(yī)藥上可接受的載劑。在某些實施例中，該些組合物視情況進一步包括一或多種附加治療劑。在某些其他實施例中，該附加治療劑可為一抗癌劑，如下文更詳細討論。亦應了解，本發(fā)明的某些化合物可呈游離治療用形式或視需要呈其醫(yī)藥上可接受的衍生物形式。根據(jù)本發(fā)明，一醫(yī)藥上可接受之衍生物包括(但不限于)醫(yī)藥上可接受的鹽、酯、此等酯的鹽、或任一投與有其需要的患者時能夠直接或間接提供一本文所述化合物或其代謝物或殘余物的其他加合物或衍生物，例如一前藥。本文所用術(shù)語“醫(yī)藥上可接受之鹽”指那些在合理的醫(yī)學判斷范圍內(nèi)適于接觸人類及低級動物的組織而不會產(chǎn)生過度毒性、刺激、過敏反應及類似反應且具有合理效益/風險比的鹽。此項技術(shù)中已熟知各種醫(yī)藥上可接受的鹽。舉例而言，S.M.Berge等人在J.PharmaceuticalSciences(661-19(1977)，其以引用的方式并入本文)中詳細闡述醫(yī)藥上可接受的鹽。該些鹽可在本發(fā)明化合物的最后分離及純化期間就地制備，或通過游離堿官能團與適宜有機酸反應來分離。醫(yī)藥上可接受的無毒酸加成鹽的實例為與無機酸(例如，鹽酸、氫溴酸、磷酸、硫酸及高氯酸)或與有機酸(例如，醋酸、草酸、馬來酸、酒石酸、檸檬酸、琥珀酸或丙二酸)或通過使用該項技術(shù)中所用其他方法(例如離子交換)形成的氨基鹽。其他醫(yī)藥上可接受的鹽包括己二酸鹽、藻酸鹽、抗壞血酸鹽、天冬氨酸鹽、苯磺酸鹽、苯甲酸鹽、硫酸氫鹽、硼酸鹽、丁酸鹽、樟腦酸鹽、樟腦磺酸鹽、檸檬酸鹽、環(huán)戊烷丙酸鹽、二葡萄糖酸鹽、十二烷基硫酸鹽、乙磺酸鹽、甲酸鹽、富馬酸鹽、葡庚糖酸鹽、甘油磷酸鹽、葡萄糖酸鹽、半硫酸鹽、庚酸鹽、己酸鹽、氫碘酸鹽、2-羥基-乙磺酸鹽、乳糖酸鹽、乳酸鹽、月桂酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、馬來酸鹽、丙二酸鹽、甲磺酸鹽、2-萘磺酸鹽、煙堿酸鹽、硝酸鹽、油酸鹽、草酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、果膠酸鹽、過硫酸鹽、3-苯基丙酸鹽、磷酸鹽、苦味酸鹽、新戊酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、硫氰酸鹽、對-甲苯磺酸鹽、十一烷酸鹽、戊酸鹽及類似的鹽。代表性堿金屬或堿土金屬鹽包括鈉、鋰、鉀、鈣、鎂鹽及類似物。其他醫(yī)藥上可接受的鹽包括(如適用)使用諸如鹵化物、氫氧化物、羧酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、硝酸鹽、低碳烷基磺酸鹽及芳基磺酸鹽等平衡離子形成的無毒銨、季銨及胺陽離子。此外，本文所用術(shù)語“醫(yī)藥上可接受的酯”是指在體內(nèi)水解的酯且包括那些在人體內(nèi)易于分解獲得母體化合物或其鹽的酯。適宜的酯基包括(例如)那些衍生自醫(yī)藥上可接受的脂肪族羧酸的酯基，尤其是衍生自鏈烷酸、鏈烯酸、環(huán)烷酸及烯二酸，其中每一烷基或烯基部分較佳不超過6個碳原子。特定酯的實例包括甲酸酯、醋酸酯、丙酸酯、丁酸酯、丙烯酸酯及丁二酸乙酯。而且，本文所用術(shù)語“醫(yī)藥上可接受的前藥”指本發(fā)明化合物的那些在合理的醫(yī)學判斷范圍內(nèi)適合用于接觸人類及低等動物的組織而不具有過度毒性、刺激、過敏反應等、效益/風險比合理且對其預期用途有效的前藥及本發(fā)明化合物可能的兩性離子形式。術(shù)語“前藥”指可(例如)通過在血液中水解在體內(nèi)迅速轉(zhuǎn)化產(chǎn)生上式母體化合物的化合物。全面的討論提供于T.Higuchi及V.Stella的Pro-drugsasNovelDeliverySystems(A.C.S.SymposiumSeries的第14卷)及EdwardB.Roche編輯的BioreversibleCarriersinDrugDesign(AmericanPharmaceuticalAssociationandPergamonPress，1987)中，二者皆以引用的方式并入本文中。如上所述，本發(fā)明的醫(yī)藥組合物另外包含一醫(yī)藥上可接受的載劑，本文所用醫(yī)藥上可接受的載劑包括適于所期望特定劑型的任一及所有溶劑、稀釋劑、或其他液體媒劑、分散或懸浮助劑、表面活性劑、等滲劑、增稠或乳化劑、防腐劑、固體粘結(jié)劑、潤滑劑及類似物。Remington′sPharmaceuticalSciences(第15版，E.W.Martin，MackPublishingCo.，Easton，Pa.，1975)揭示各種用于調(diào)配醫(yī)藥組合物的載劑及用于制備其的熟知技術(shù)。任一常用載劑介質(zhì)的使用皆涵蓋于本發(fā)明范疇內(nèi)，除非(例如)該常用載劑介質(zhì)因產(chǎn)生任何不期望的生物效應或以有害方式與該醫(yī)藥組合物的任一其他組分互相作用而與本發(fā)明抗癌化合物不相容?？捎米麽t(yī)藥上可接受載劑的材料的某些實例包括(但不限于)碳水化合物，例如，乳糖、葡萄糖及蔗糖；淀粉，例如，玉米淀粉及馬鈴薯淀粉；纖維素及其衍生物，例如，羧甲基纖維素鈉、乙基纖維素及醋酸纖維素；粉末狀黃蓍膠；麥芽；明膠；滑石粉；氫化蓖麻油；Solutol；賦形劑，例如，可可油及栓劑蠟；油，例如，花生油、棉籽油、紅花油、芝麻油、橄欖油、玉米油及大豆油；二醇，例如，丙二醇；酯，例如，油酸乙酯及月桂酸乙酯；瓊脂；緩沖劑，例如，氫氧化鎂及氫氧化鋁；海藻酸；無致熱原的水；等滲鹽水；林格(Ringer)溶液；根據(jù)配方設計師的判斷，該組合物中亦可含有乙醇及磷酸鹽緩沖液及其他無毒相容潤滑劑(例如，月桂基硫酸鈉及硬脂酸鎂)及著色劑、釋放劑、涂布劑、甜味劑、矯味劑及加香劑、防腐劑及抗氧化劑?；衔锛搬t(yī)藥組合物的用途本發(fā)明進一步提供用于抑制腫瘤生長及/或腫瘤轉(zhuǎn)移的方法。在某些相關實施例中，本發(fā)明提供一種通過抑制腫瘤多抗藥性癌細胞的腫瘤生長及/或腫瘤轉(zhuǎn)移治療癌癥的方法。該方法涉及將一治療有效量的該化合物或其醫(yī)藥上可接受的衍生物投與一有其需要的患者(包括但不限于人類或動物)。在某些實施例中，尤其是關于治療包括多抗藥性癌細胞的癌癥的實施例中，該治療有效劑量為足以殺死多抗藥性癌細胞或抑制其生長的量。在某些實施例中，本發(fā)明化合物可用于治療實體腫瘤。本發(fā)明化合物及醫(yī)藥組合物可用于治療或預防包括增生性疾病(例如，癌癥)、自身免疫性疾病(例如，類風濕性關節(jié)炎)及傳染病(例如，細菌、真菌等)在內(nèi)的任何疾病或狀況。該些化合物及醫(yī)藥組合物可投予動物，較佳哺乳動物(例如，馴養(yǎng)家畜、貓、狗、小鼠、大鼠)，且更佳為人類?？墒褂萌我煌杜c方法將醫(yī)藥組合物的化合物投遞給動物。在某些實施例中，該化合物或醫(yī)藥組合物可以非經(jīng)腸方式投與。另一方面，根據(jù)本發(fā)明的治療方法，通過用本發(fā)明化合物或組合物接觸腫瘤細胞可殺死腫瘤細胞或抑制其生長，如本文所闡述。因此，本發(fā)明又一方面提供一種治療癌癥的方法，該方法包括以達成期望結(jié)果所需量及時間將一治療有效量的本發(fā)明化合物或包含一本發(fā)明化合物的醫(yī)藥組合物投予有其需要的患者。在本發(fā)明的某些實施例中，本發(fā)明化合物或醫(yī)藥組合物的“治療有效量”是指可有效殺死腫瘤細胞或抑制其生長的量。根據(jù)本發(fā)明的方法，該些化合物及組合物可使用能有效殺死腫瘤細胞或抑制其生長的任一量及任一投與途徑來投與。因此，本文所用表達法“有效殺死腫瘤細胞或抑制其生長的量”是指足以殺死腫瘤細胞或抑制其生長的藥劑量。視受治療者物種、年齡及全身狀況、感染嚴重程度、具體抗癌劑、其投與模式及等而受治療者與受治療者之間所需確切量將有所不同。本發(fā)明的抗癌化合物較佳調(diào)配成易于投與且劑量一致的單位劑型形式。本文所用表達法“單位劑型”是指適用于欲治療患者的抗癌劑的物理離散單位。然而，應了解，本發(fā)明化合物及組合物的總?cè)沼昧繎芍髦吾t(yī)生在合理的醫(yī)學判斷范圍內(nèi)決定。任一具體患者或有機體的特定治療有效劑量水平應根據(jù)各種因素而定，包括所治療疾病及疾病嚴重程度；所用特定化合物的活性；所用特定組合物；患者的年齡、體重、一般健康狀況、性別及飲食；所用特定化合物的投與時間、投與途徑及排泄速度；治療持續(xù)時間；與所用特定化合物組合或同時使用的藥物；及醫(yī)療技術(shù)中熟知的類似因素。此外，以期望劑量與一適宜醫(yī)藥上可接受的載劑調(diào)配后，根據(jù)所治療傳染病的嚴重程度，本發(fā)明的醫(yī)藥組合物可以下列方式投與人類及其他動物經(jīng)口、經(jīng)直腸、非經(jīng)腸、腦池內(nèi)、陰道內(nèi)、腹膜腔內(nèi)、外敷(以粉劑、軟膏或滴劑形式)、經(jīng)口腔(以經(jīng)口或鼻噴霧形式)或類似投與方式。在本發(fā)明的某些實施例中，本文所述的本發(fā)明化合物可通過與水溶性鰲合劑或水溶性聚合物(例如，聚乙二醇、聚(1-谷氨酸)或聚(1-天冬氨酸))結(jié)合來調(diào)配，如美國專利第5,977,163號中所闡述，其整體內(nèi)容以引用的方式并入本文中。在某些實施例中，本發(fā)明化合物可以每天足以遞送下列的劑量水平以經(jīng)口或非經(jīng)腸方式一天一次或多次投與以獲得期望治療效果約0.001mg/Kg至約100mg/Kg受治療者體重，自約0.01mg/kg至約50mg/kg，較佳自約0.1mg/kg至約40mg/kg，較佳自約0.5mg/kg至約30mg/kg，自約0.01mg/kg至約10mg/kg，自約0.1mg/kg至約10mg/kg，且更佳自約1mg/kg至約25mg/kg。所期望劑量可以每隔一天、每隔兩天、每周、每兩周、每三周或每四周遞送一次來遞送。在某些實施例中，所期望劑量可用多次投與(例如，兩次、三次、四次、五次、六次、七次、八次、九次或十次投與)來遞送。用于口服投與的液體劑型包括(但不限于)醫(yī)藥上可接受的乳液、微乳液、溶液、懸浮液、漿液及酏劑。除該些活性化合物之外，該些液體劑型可包含該項技術(shù)中常用的惰性稀釋劑例如水或其他溶劑、增溶劑及乳化劑例如，乙醇、異丙醇、碳酸乙酯、醋酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸芐酯、丙二醇、1，3-丁二醇、二甲基甲酰胺、油(特別是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄欖油、蓖麻油及芝麻油)、甘油、四氫糠醇、聚乙二醇及山梨糖醇酐脂肪酸酯及其混合物。除惰性稀釋劑之外，該口服組合物亦可包括佐劑，例如，潤濕劑、乳化及懸浮劑、甜味劑、矯味劑及加香劑?？筛鶕?jù)熟知技術(shù)用適宜分散或潤濕劑及懸浮劑來調(diào)配可注射制劑，例如，無菌可注射水性或油性懸浮液。該無菌可注射制劑亦可為于無毒的醫(yī)藥上可接受的稀釋劑或溶劑中的無菌可注射溶液、懸浮液或乳液，例如溶于1，3-丁二醇中的溶液。該些可使用的可接受媒劑及溶劑尤其為水、林格溶液、U.S.P.及等滲氯化鈉溶液。此外，通常使用無菌固定油作為溶劑或懸浮媒介。為此，可使用包括合成甘油單酯或甘油二酯在內(nèi)的任一溫和固定油。此外，在可注射制劑中可使用諸如油酸等脂肪酸。該些可注射調(diào)配物可(例如)通過經(jīng)由細菌截留過濾器過濾或通過納入殺菌劑來滅菌，該些殺菌劑呈可在使用前溶于或分散于無菌水或其他無菌可注射媒介中的無菌固體組合物形式。為了延長藥物的作用，通常自皮下或肌肉注射來減緩藥物的吸收較為理想。此可通過使用水溶性差的晶體或無定形材料的液態(tài)懸浮液來達成。于是，藥物的吸收速度取決于其溶解速度，而其溶解速度又取決于晶體大小及晶形。或者，可通過將該藥物溶解或懸浮于一油媒劑中來達成非經(jīng)腸投與藥物的延時吸收?？赏ㄟ^在生物可降解聚合物(例如，聚交酯-聚乙醇酸交酯)中形成藥物的微囊基質(zhì)來制備可注射儲積形式。根據(jù)藥物與聚合物的比例及所用特定聚合物的性質(zhì)，可控制藥物釋放的速度。其他生物可降解聚合物的實例包括聚(原酸酯)及聚酐類。亦可通過將藥物截留于與身體組織相容的脂質(zhì)體或微乳液中來制備儲積可注射調(diào)配物。用于直腸或陰道投與的組合物較佳為栓劑，其可通過將本發(fā)明化合物與適宜無刺激性賦形劑或載劑(例如可可油、聚乙二醇或栓劑蠟)進行混合來制備，該些賦形劑或載劑在室溫下為固體但在體溫下為液體，因而其可在直腸或陰道腔內(nèi)融化并釋放該活性化合物。用于口服投與的固體劑型包括膠囊、片劑、丸劑、粉末及顆粒。在該些固體劑型中，活性化合物與至少一惰性且醫(yī)藥上可接受的賦形劑或載劑(例如，檸檬酸鈉或磷酸氫鈣)及/或以下混合a)填充劑或擴充劑，例如，淀粉、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇及硅酸，b)粘合劑，例如，羧甲基酸纖維素、藻酸鹽、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖及阿拉伯膠，c)保濕劑，例如甘油，d)崩解劑，例如，瓊脂、碳酸鈣、馬鈴薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸鹽及碳酸鈉，e)溶液阻滯劑，例如，石蠟，f)吸收促進劑，例如，季銨化合物，g)潤濕劑，例如，鯨蠟醇及甘油單硬脂酸酯，h)吸收劑，例如，高嶺土及膨潤土及i)潤滑劑，例如，滑石粉、硬脂酸鈣、硬脂酸鎂、固體聚乙二醇、月桂基硫酸鈉，及其混合物。在為膠囊、片劑及丸劑的情況下，該劑型亦可包括緩沖劑。在使用諸如乳糖(lactose或milksugar)及高分子量聚乙二醇等賦形劑的軟及硬質(zhì)填充明膠膠囊中，亦可使用類似類型的固體成份作為填充劑。固體劑型的片劑、糖衣丸、膠囊、丸劑及顆?？捎冒ぜ鞍鼩ぶ苽?，例如腸溶包膜及醫(yī)藥調(diào)配技術(shù)中熟知的其他包膜。其可視情況包括遮光劑且亦可為視情況以一延遲方式僅(或優(yōu)先)在腸道的某一部分釋放活性成份的組合物。可使用的包埋成份的實例包括聚合物質(zhì)及蠟。在使用諸如乳糖(lactose或milksugar)及高分子量聚乙二醇等賦形劑的軟及硬質(zhì)填充明膠膠囊中亦可使用類似類型的固體成份作為填充劑。該些活性化合物亦可為含有一或多種上述賦形劑的微囊形式。固體劑型的片劑、糖衣丸、膠囊、丸劑及顆粒可用包膜及包殼制備，例如腸溶包膜、釋放控制包膜及醫(yī)藥調(diào)配技術(shù)中熟知的其他包膜。在該些固體劑型中，活性化合物可與至少一諸如蔗糖、乳糖或淀粉的惰性稀釋劑混合。除惰性稀釋劑之外，在正常情況下該些劑型亦可包含除惰性稀釋劑以外的額外物質(zhì)，例如，片劑潤滑劑及其他片劑助劑(例如，硬脂酸鎂及微晶纖維素)。在為膠囊、片劑及丸劑的情況下，該些劑型亦可包含緩沖劑。其可視情況包含遮光劑且亦可為視情況以一延遲方式僅(或優(yōu)先)在腸道的某一部分釋放該些活性成份釋放的組合物。可利用的包埋成份的實例包括聚合物質(zhì)及蠟。用于外敷或經(jīng)皮投與本發(fā)明化合物的劑型包括軟膏、膏劑、乳霜、乳液、凝膠、粉末、溶液、噴霧劑、吸入劑或貼片。該活性組份可在無菌條件下與一醫(yī)藥上可接受載劑及任一所需防腐劑及所需緩沖劑混合。眼用調(diào)配物、滴耳劑及滴眼劑亦涵蓋于本發(fā)明范疇內(nèi)。此外，本發(fā)明涵蓋使用皮膚貼片，其具有以控制方式將一化合物遞送至身體的附加優(yōu)點。該些劑型可通過將化合物溶解或分散于適宜媒介中來制備。亦可使用吸收促進劑來增加該化合物穿過皮膚的通量。速率可通過提供一速率控制膜或通過將該化合物分散于一聚合物基質(zhì)或凝膠中來控制。如上所述，本發(fā)明化合物可用作抗癌劑，且因此可通過使腫瘤細胞死亡或抑制腫瘤細胞的生長用于治療癌癥。一般而言，本發(fā)明抗癌劑可用于治療癌癥及其他增生性疾病，包括(但不限于)乳腺癌、腦癌、皮膚癌、子宮頸癌、結(jié)腸及直腸癌、白血病、肺癌、黑素瘤、多發(fā)性骨髓瘤、非霍杰金氏淋巴瘤(non-Hodgkin’slymphoma)、卵巢癌、胰癌、前列腺癌及胃癌，僅列舉少數(shù)例子。在某些實施例中，本發(fā)明抗癌劑可有效抵抗白血病細胞及黑素瘤細胞，且因此可用于白血病(例如，骨髓性、淋巴細胞、前髓細胞、骨髓細胞及淋巴母細胞白血病，無論為急性或為慢性形式)及惡性黑素瘤的治療。在另外的實施例中，本發(fā)明抗癌劑可有效抗實體腫瘤并亦可殺死多抗藥性細胞(MDR細胞)及/或抑制其生長。在某些實施例中，本發(fā)明抗癌劑可有效抵抗對其他熟知抗腫瘤藥產(chǎn)生抗性或發(fā)現(xiàn)對其他熟知抗腫瘤藥在臨床上不響應的癌癥。在其他實施例中，本發(fā)明抗癌劑可有效抵抗對其他熟知抗腫瘤微管穩(wěn)定劑(例如，紫杉醇)具有抗性的癌癥。亦應了解，本發(fā)明化合物及醫(yī)藥組合物可用于組合治療，換言之，該些化合物及醫(yī)藥組合物可與一或多種其他期望的療法或醫(yī)療程序同時、先于其或在其之后實施。在一組合療法中采用的特定療法組合(療法或程序)應考慮預期療法及/或程序的相容性及欲達成的期望治療效果。亦應了解，所用療法對于同一疾病可達成期望效果(例如，本發(fā)明化合物可與另一抗癌劑同時投與)，或其可達成不同的效果(例如，控制任何副作用)。舉例而言，可與本發(fā)明抗癌劑組合使用的其他療法及抗癌劑包括外科手術(shù)、放射療法(僅舉幾個實例，γ-放射療法、中子束放射療法、電子束放射療法、質(zhì)子療法、近距放射療法及全身放射性同位素療法)、內(nèi)分泌療法、生物反應調(diào)節(jié)劑(干擾素、介白素及腫瘤壞死因子(TNF)，僅舉幾個例子)、高溫療法及冷凍療法、消弱任何副作用的試劑(例如，止吐藥)及其他批準的化療藥物，包括(但不限于)烷基化藥物(氮芥、苯丁酸氮芥、環(huán)磷酰胺、美法侖(Melphalan)、異環(huán)磷酰胺)、抗代謝藥物(甲氨蝶呤(Methotrexate))、嘌呤拮抗劑及嘧啶拮抗劑(6-巰基嘌呤、5-氟尿嘧啶、阿糖胞苷、二氟胞嘧啶)、紡錘體毒素(長春堿(Vinblastine)、長春新堿(Vincristine)、長春瑞賓(Vinorelbine)、紫杉醇、多西他賽)、鬼臼毒素(podophyllotoxin)(表鬼臼毒素(Etoposide)、伊立替康(Irinotecan)、拓撲替康(Topotecan))、抗生素(阿霉素(Doxorubicin)、博萊霉素(Bleomycin)、)絲裂霉素(Mitomycin))、亞硝基脲(亞硝基脲氮芥(Carmustine)、羅氮芥(Lomustine))、無機離子(順鉑、卡鉑)、酶(天冬酰胺酶)及激素(他莫昔芬(Tamoxifen)、亮丙瑞林(Leuprolide)、氟利坦(Flutamide)及甲地孕酮(Megestrol))，僅舉幾個例子。關于最新療法的更全面討論參見http//www.nci.nih.gov/、http//www.fda.gov/cder/cancer/druglistframe.htm上的FDA認可的腫瘤藥物列表及TheMerckManual(第17版，1999年)，其整體內(nèi)容皆以引用的方式并入本文中。本發(fā)明另一方面提供一藥物封包或套組，其包括一或多個填充有本發(fā)明醫(yī)藥組合物的一或多種成份的容器，且在某些實施例中包括用作一組合療法的額外經(jīng)批準治療劑。視情況，該(些)容器可附帶有一監(jiān)管藥物制造、使用及銷售的政府機構(gòu)所規(guī)定形式的公告，該公告反映出政府機構(gòu)已批準該藥物的制造、使用及銷售用于人類。等效物下文的代表性實例意欲幫助闡述本發(fā)明，而不欲且不應解釋為限制本發(fā)明范疇。實際上，除那些所示及本文所闡述實施例外，所屬領域的技術(shù)人員自本文獻的全部內(nèi)容(包括下文實例及本文所引用的科學參考文獻及專利文獻)可容易地看出本發(fā)明的各種修改形式及其若干其他實施例。應進一步了解，所引用參考文獻的內(nèi)容皆以引用的方式并入本文中以有助于闡述此項技術(shù)的狀況。以下實例包含適合實踐本發(fā)明各種實施例及其等效內(nèi)容的重要的額外信息、范例及指導原則。實例實例1合成9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素該實施例闡述反-9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B、26-三氟-反-9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B、26-三氟-12，13-去氧埃坡霉素B及12，13-去氧埃坡霉素B的合成及該些化合物的生物檢驗。在已知經(jīng)氟取代的其他藥物的藥物動力學及化療指數(shù)增加的情況下，制備并測試埃坡霉素的氟化衍生物(Ojima，I.；Inoue，T.；Chakravarty，S.；J.FluorineChem.1999，97；Newman，R.A.；Yang，J.；Finlay，M.R.V.；Cabral，F(xiàn).，Vourloumis，D.；Stephens，L.C；Troncoso，P.；Wu，X.；Logothetis，C.J.；Nicolaou，K.C；Navone，N.M.CancerChemother.Pharmacol.2001，48，319-326；每一皆以引用的方式并入本文中)。1[16]dEpoB226-F3-[16]dEpoB為獲得化合物2，我們設法利用我們實驗室最近報導的高度匯集方法通過先合成埃坡霉素490(6，去氫去氧EpoB)來合成dEpoB(1，示意圖3)(Biswas，K.；Lin，H.；Njardarson，J.T；Chappell，M.D.，Chou，T.C.，Guan，Y.；Tong，W.P.，He，L.；Horwitz，S.B.，Danishefsky，S.J.J.Am.Chem.Soc2002，124(33)；9825-9832；Rivkin，A.；Njardarson，J.T.；Biswas，K；Chou，T.C.；Danishefsky，S.J.J.Org.Chem.2002，67，7737-7740；每一皆以引用的方式并入本文中)。在此合成中，通過乙烯基碘化物前體3與三-正丁基乙烯基錫烷的Stille立體定向偶合將一側(cè)接乙烯基引入化合物4。閉環(huán)置換后去保護，獲得化合物6，然后化合物6可通過區(qū)域選擇性二酰亞胺還原轉(zhuǎn)變?yōu)閐EpoB(I)。示意圖3.埃坡霉素490的合成首先關注15的合成(示意圖4)。先前報導的烯醇化鋰7(Chappell，M.D.；Stachel，S.J.；Lee，C.B.；Danishefsky，S.J.Org.Lett.(2000，2(11)，1633-1636)；以引用的方式并入)與碘化物8(用在二氯甲烷中的TMSI自已知醇16合成)的烷基化反應生成9，其產(chǎn)率為78％且具有高非鏡像立體選擇性(＞25∶1de)?；衔?通過三個步驟變成所示的10。人們曾試圖將甲基溴化鎂加成至10的Weinreb酰胺鍵上，但未能成功。該反應之所以失敗是由于存在亞碘烷基鍵。然而，可通過改變該兩個C-C鍵形成步驟的順序來達到我們的目標。因此，可在10與乙烯基三丁基錫在Stille條件下反應后，添加甲基格氏試劑(Grignardreagent)，獲得所期望的酮11。在酮11與氧化膦12縮合后，隨后將三乙基甲硅烷醚去保護，獲得高產(chǎn)率的片段13。所獲得的13與C1-C10酸片段進行酯化反應(Biswas，K.；Lin，H.；Njardarson，J.T.；Chappell，M.D.，Chou，T.C.，Guan，Y.；Tong，W.P.，He，L.；Horwitz，S.B.，Danishefsky，S.J.J.Am.Chem.Soc.2002，124(33)；9825-9832；Rivkin，A.；Njardarson，J.T.；Biswas，K；Chou，T.C.；Danishefsky，S.J.J.Org.Chem.2002，67，7737-7740；以引用的方式并入本文中)，獲得期望的15，產(chǎn)率為75％(示意圖4)。示意圖4.RCM前體15的合成遺憾的是，當試圖在二氯甲烷中用第二代Grubbs催化劑(ReviewsGrubbs，R.H.；Miller，S.J.；Fu，G.C.Acc.Chem.Res.1995，28，446；Tmka，T.M；Grubbs，R.H.Acc.Chem.Res.2001，34，18；AlkeneMetathesisinOrganicChemistry(編輯Fürstner，A.；Springer，Berlin，1998)；Fürstner，A.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.2000，39，3012；Schrock，R.R.Top.Organomet.Chem.(1998，1，1)；每一皆以引用的方式并入本文中)實施15的閉環(huán)置換反應時，主要導致起始材料發(fā)生明顯的二聚反應(方程式1)。由于已知RCM極適合5→6的相關環(huán)境，因此我們自然地將15情況下的失敗歸因于C12上三氟甲基的存在。人們預測，所存在26-三氟取代基對期望反應的不利影響可通過在RCM反應中心與三氟甲基之間添加一個碳間隔基來緩解。因此，我們通過18的閉環(huán)置換合成19(方程式2)，此會在將該三氟甲基置于一含有一船型(1，4)-二烯的17元環(huán)環(huán)境中。關于19的合成程序從制備化合物21開始，21對應于我們所提出RCM底物的O-烷基部分(示意圖5)。從10的烯丙基化開始，這次是在所示的游離基反應條件下實施(Keck，G.E.；Yates，J.B.J.Am.Chem.Soc.1982，104，5829；reviewCurran，D.P.Synthesis，1988，第1部分，第417-439頁；第2部分，第489頁；每一皆以引用的方式并入本文中)。在該轉(zhuǎn)化后，使烷基化產(chǎn)物與甲基溴化鎂反應，由此獲得所需的酮20。使該化合物與氧化膦12縮合，隨后將三乙基甲硅烷醚去保護，以高產(chǎn)率獲得21。示意圖5.醇片段21的合成(a)i)烯丙基三丁基錫AIBN，苯，80℃，3h74％；ii)MeMgBr，0℃，93％；(b)i)12，n-BuLi，THF，-78℃，30min.，ii)20，-78℃tort.85％；iii)HOAc∶THF∶H2O(3∶1∶1)，98％；(c)TMSI，CH2Cl2，0℃，92％21與C1-C10酸片段14發(fā)生酯化反應，獲得產(chǎn)率為75％的所提出RCM前體18(示意圖6)。令人高興的是，在該情況下，可使用第二代Grubbs催化劑在二氯甲烷中完成18的閉環(huán)置換反應。如同5→6的轉(zhuǎn)換，該反應只提供反式異構(gòu)體22，產(chǎn)率為57％。最后，用鋅及醋酸以還原方式斷開三氯乙氧羰基保護基團，隨后將TES醚用HF-吡啶去保護，獲得在C12上含有一個三氟甲基官能團的期望化合物19，盡管是在17元環(huán)系列的環(huán)境中。示意圖6.27-F3-ddEpoB(19)的合成評價所合成19的細胞毒性活性。如下表1-1所示，先前所報導[17]ddEpoB(23)與27-F3-[17]ddEpoB(19)的直接比較表明，該新穎的全氟化化合物具有同樣高的細胞毒性效能。表1-1.對腫瘤細胞株α的體外細胞毒性(IC50)72小時抑制后實施αXTT分析。CCRF-CEM是人類T-細胞急性淋巴性白血病細胞株。CCRF-CEM/VBL100、CCRF-CEM/VM1及CCRF-CEM/Taxol細胞株皆超表達P-糖蛋白并對MDR相關的抗癌劑展示一多重抗藥性表現(xiàn)型(Ojima，I.；Inoue，T.；Chakravarty，S.；J.FluorineChem.1999，97；Newman，R.A.；Yang，J.；Finlay，M.R.V.；Cabral，F(xiàn).，Vourloumis，D.；Stephens，L.C；Troncoso，P.；Wu，X.；Logothetis，C.J.；Nicolaou，K.C.；Navone，N.M.cancerChemotherPharmacol.2001，48，319-326；每一皆以引用的方式并入本文中)。盡管三氟甲基等比容取代(isostericsubstitution)對總的細胞毒性活性幾乎沒有影響，但在小鼠血漿中的代謝性降解研究初步數(shù)據(jù)表明19明顯比母體23更穩(wěn)定。將埃坡霉素19及23暴露于裸鼠及人血漿中，23在30分鐘內(nèi)降解，而埃坡霉素19則大部分保持完整。由于藥物動力學問題可能在使用任何埃坡霉素作為藥物的實際應用中皆是關鍵所在，因此認為該發(fā)現(xiàn)相當鼓舞人心。可通過與27-F3-[17]ddEpoB(19)的合成中所用方法有關的高度匯集方法完成26-F3-dEpoB(2)的合成。因此，具類似組成的片段可作為關鍵的結(jié)構(gòu)單元(示意圖7)。預計酰基部分25可作為聚丙酸酯結(jié)構(gòu)域且烷基部分21或24可如先前在開始處所述來制備。兩個片段21(24)與25的結(jié)合可通過酯化反應開始并通過隨后的閉環(huán)置換反應結(jié)束。最后，斷開保護基團可提供所期望的類似物28及29。以化學選擇性方式還原28及29的9，10-烯烴將提供dEpoB(1)及所期望的26-F3-12，13-去氧EpoB(2)。示意圖7反-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB(28)26-F3-12，13-去氧EpoB(1)反-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB(29)26-F3-12，13-去氧EpoB(2)1與2的合成從制備?；糠?5開始。將先前報導的酮30與易于獲得的醛3l進行醛醇縮合反應。當用31將“鋰化”30去質(zhì)子化并反應時，平穩(wěn)的縮合反應獲得5.3∶1的醛醇產(chǎn)物32與33的混合物。大部分非對映異構(gòu)體32可容易地通過快速層析法分離并作為TBS甲硅烷醚保護起來。二異丙基縮醛基團在酸催化下水解，獲得酮醛34，為第二個醛醇縮合反應創(chuàng)造條件。用新的醛34作為偶合配偶體實施上述“鈦化”特丁酯方法后，以高非鏡像立體體選擇性(dr＞20∶1)及產(chǎn)率(86％)獲得所期望的醛醇產(chǎn)物35。用TES甲硅烷基保護35的C3醇后，實施二芐醚的去保護。氧化產(chǎn)物伯羥基，獲得相應的醛，然后將所得醛通過魏悌希反應(Wittigreaction)轉(zhuǎn)化成端部烯烴，以高產(chǎn)率獲得36。最后，用TEOSTf水解36的特丁基酯，獲得?；糠?5(82％)及副產(chǎn)物37(14％)，副產(chǎn)物37可以高產(chǎn)率轉(zhuǎn)化為?；糠?8。38的光譜及色譜性質(zhì)與先前在Dr.Sinha的實驗室(Scripps)中自其他程序所獲得材料的相同。示意圖8.烯丙基醇21及24與C1-C9酸片段25發(fā)生酯化反應，分別獲得相應的RCM環(huán)化前體26及27(示意圖9)。示意圖9.然后，用第二代Grubbs催化劑在甲苯中對26、27及54實施閉環(huán)置換反應，如同早期研究，僅生成反式異構(gòu)體39a、40a和55及相應的副產(chǎn)物39b、40b與56。最后，用HF-吡啶將甲硅烷基醚去保護，獲得所期望的化合物28、29及57。28的光譜及色譜性質(zhì)與先前在Dr.JamesD.White的實驗室(OregonStateUniversity)中自埃坡霉素程序所獲得材料的并不相同。Dr.JamesD.White認為其已合成了28，然而卻因疏忽而合成12，13E異構(gòu)體41，此可解釋為什么他觀察到的生物活性較差。因此，我們首先合成28并檢驗該化合物的抗腫瘤活性。已就各種細胞類型對評價全合成性28、29及2進行評價以確定其抗腫瘤效能。如表1-2中所示，三種化合物皆展示抗各種敏感性及抗性腫瘤細胞株的高細胞毒性活性。28與先前所報導dEpoB(1)的直接比較表明，該新化合物具有幾乎三倍的效能。表1-2.對腫瘤細胞株α的體外細胞毒性(IC50)72小時抑制后實施αXTT分析。CCRF-CEM是人類T-細胞急性淋巴性白血病細胞株。CCRF-CEM/VBL100、CCRF-CEM/VM1及CCRF-CEM/Taxol細胞株皆超表達P-糖蛋白并對MDR相關抗癌劑展示一多重抗藥性表現(xiàn)型(Prié，G.；Thibonnet，J.；Abarbri，M.；Duchêne，A.；Parrain，J.Synlett(1998，839)；以引用的方式并入本文中)。為提高合成28、29及2的總產(chǎn)率，我們決定在不存在經(jīng)噻唑取代烯烴的情況下實施RCM反應，如此以避免形成不希望的副產(chǎn)物39b及40b。對先前所報導42及20的甲硅烷醚實施去保護，獲得羥基酮43及44。產(chǎn)物羥基酮43及44與C1-C9酸部分25進行酯化反應，分別獲得相應的RCM環(huán)化前體45及46(示意圖10)。然后，用第二代Grubbs催化劑在甲苯中實施45及46的閉環(huán)置換反應，此如同先前研究只以高產(chǎn)率生成反式異構(gòu)體47及48。插入噻唑部分，獲得高產(chǎn)率的39a、40a及55。用HF-吡啶將兩種甲硅烷醚去保護，獲得28及29。最后，選擇性還原C9-C10烯烴獲得相應的埃坡霉素1及2。28的結(jié)構(gòu)通過其以高產(chǎn)率轉(zhuǎn)化為1嚴格地證明。相對于先前實踐途徑，1的全合成上已相當簡化。因此，相對于依靠于其合成需要手性助劑參與的(S)-2-甲基-4-戊烯醛，使用自手性源獲得且易于利用的31無疑是一大改進。示意圖10對于所掌握的其結(jié)構(gòu)已嚴格證明的化合物28，我們驚奇地發(fā)現(xiàn)，其光譜性質(zhì)與先前報導推測為相同實體的化合物的性質(zhì)并不相同。然而，回顧過去很清楚先前并沒有制備出28，實際上，此處所報導的(E)-9，10-去氫埃坡霉素的整個家族是一類新穎的化合物。在細胞培養(yǎng)環(huán)境中對合成性類似物(2、28及29)的試驗揭示，其對各種敏感性及MDR腫瘤細胞株的抑制效果比我們的臨床項dEpoB(1)要強(表1-3)。注意到，Epo3(28)是首個相對于dEpoB(1)具有實質(zhì)上經(jīng)改良細胞毒性的12，13-去氧埃坡霉素化合物。表1-3.對腫瘤細胞株α的體外細胞毒性(IC50)72小時抑制后實施αXTT分析。CCRF-CEM是人類T-細胞急性淋巴性白血病細胞株。CCRF-CEM/VBL100細胞株對長春堿有抗性且CCRF-CEM/紫杉醇對紫杉醇有抗性。埃坡霉素2、28及29(Epo2-4)所展現(xiàn)對多種抗藥性腫瘤的明顯細胞生長抑制作用促進對這些新(E)-9，10-同類物的血漿穩(wěn)定性的確定。舉例而言，就內(nèi)酯打開而言，最近所闡述的(E)-10，11-去氫-dEpoB(1，在C-12處具有CH3基團)展示極差的血漿穩(wěn)定性。該血漿不穩(wěn)定性抑制對(E)-10，11-去氫-dEpoB的發(fā)展。相反，與dEpoB(1)相比，當2、28及29(Epo2-4)暴露于鼠血漿時，觀察到藥物降解程度降低至1/7。從藥物可利用觀點來看，相對于dEpoB該穩(wěn)定性構(gòu)成了一實質(zhì)性改進(參見圖9)。細胞毒性與血漿穩(wěn)定性數(shù)據(jù)的組合促使我們合成大量28(Epo3)以確定其在具有人類腫瘤異種移植物的裸鼠中的體內(nèi)效能。埃坡霉素28(Epo3)相對于dEpoB在抑制移植腫瘤的生長方面具有明顯改進的效能(參見圖10)。該經(jīng)改進的效能及血漿穩(wěn)定性極大地降低了28(Epo3)在異種移植物環(huán)境下的藥物劑量(一個數(shù)量級)。我們在早期的研究中發(fā)現(xiàn)，埃坡霉素B(12，13-環(huán)氧化物)相比其12，13-去氧類似物(dEpoB)具有更顯著的細胞毒性。無論如何，從治療指數(shù)的觀點來看，該去氧化合物更合意。最近，我們報導了用立體選擇性閉環(huán)置換方法全合成(E)-9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B(28)。結(jié)果顯示，在普通Z-12，13-烯烴(參見化合物1)中使E-9，10不飽和可大大增強體外效能。更確切的說，此可轉(zhuǎn)移至在異種移植小鼠中的體內(nèi)環(huán)境。而且，化合物28相對于dEpoB(1)具有較多的醫(yī)藥優(yōu)點。此使得在異種移植試驗中28的劑量水平相對于1可降低一個數(shù)量級。因此，我們想知道在埃坡霉素B(51，EpoB)中納入C9-C10烯烴是否會在相同方面改變其生物性質(zhì)。(E)-9，10-去氫-dEpoB(28)(E)-9，10-去氫EpoB(49)用2，2’-二甲基雙環(huán)氧乙烷(DMDO)以高化學選擇性在較多取代的C12-C13烯烴處環(huán)氧化28，獲得產(chǎn)率為87％的比例為1∶2.6的(E)-9，10-去氫埃坡霉素B(49)及其非對映異構(gòu)體(50)。通過C9-C10雙鍵的選擇性二酰亞胺還原來確定該環(huán)氧化物的立體化學結(jié)構(gòu)。該些產(chǎn)物的光譜性質(zhì)試驗揭示，次要產(chǎn)物(49)為dEpoB。在28中優(yōu)先進行α-環(huán)氧化與dEpoB的高立體選擇性環(huán)氧化形成鮮明對比，后者在β面發(fā)生，生成EpoB(Meng，D.；Bertinato，P.；Balog，A.；Su，D.-S.；Kamenecka，T.；Sorensen，E.J.；Danishefsky，S.J.J.Am.Chem.Soc.1997，119，10073；以引用的方式并入本文中)。示意圖11評價(E)-9，10-去氫埃坡霉素B(51)抗各種類型細胞的活性以確定其抗腫瘤效能。如表1-4所示，(E)-9，10-去氫埃坡霉素B(49)展示抗各種敏感性及抗性腫瘤細胞株的高細胞毒性活性。49與EpoB(51)的直接比較表明，該新穎的類似物具有幾乎3倍于EpoB(51)的效能，此使得其成為迄今為止所報導的最有效的埃坡霉素之一。令人感興趣的是，α-環(huán)氧化物系列(50、52)展示比EpoB(51)低得多的活性。下表展示化合物49的體內(nèi)研究發(fā)現(xiàn)。表1-4.對腫瘤細胞株α的體外細胞毒性(IC50)72小時抑制后實施αXTT分析。CCRF-CEM是人類T-細胞急性淋巴性白血病細胞株。所有CCRF-CEM/VBL及CCRF-CEM/紫杉醇細胞株皆超表達P-糖蛋白并對MDR-相關抗癌劑展示一多重抗藥性表現(xiàn)型。9，10-de-H-EpoB在具有MX-1異種移植物的裸鼠中的治療效果(6小時靜脈內(nèi)輸注，n＝4)總之，上文闡述了28(Epo3)的有效立體選擇性全合成，并在實施位置選擇性二酰亞胺還原后合成dEpoB(1)自身。于是，本文所述方法可直接用于制備相應三氟類似物2及29(Epo4)。此外，28的環(huán)氧化可生成49及50，后者在經(jīng)位置選擇性二酰亞胺還原后生成埃坡霉素B(51)及52。上文所報導的數(shù)據(jù)表明出現(xiàn)了一種適合于經(jīng)進一步的中間性評價后可能前進至人類臨床環(huán)境評價的最有希望的新穎抗癌藥物家族。此外，該新合成方法包括dEpoB及埃坡霉素B的全合成中的顯著實用性改進。實驗一般方法除非另有說明，否則使用自商業(yè)供應商購得的試劑而不進一步純化。下述溶劑自一溶劑干燥系統(tǒng)(通過一預填充氧化鋁柱)獲得且使用時未經(jīng)進一步干燥四氫呋喃、二氯甲烷、乙醚、苯及甲苯。所有對空氣及水敏感的反應皆在預凈化氬氣的正壓下在烘干的玻璃器件中進行。NMR(1H及13C)譜圖如一個一個單獨所注明在BrokerAMX-400MHz或BrukerAdvanceDRX-500MHz上記錄，參照CDCl3(1H為7.27ppm且13C為77.0ppm)。在Perkin-ElmerFT-IR型1600光譜儀上獲得紅外光譜圖(IR)。于22±2℃下在JASCO型DIP-370數(shù)字旋光儀上獲得旋光度。在E.Merck硅膠60F254板上實施分析性薄層層析。通過將該些板浸漬于鉬酸鈰銨或?qū)钕闳┤芤褐胁⒓訜醽盹@現(xiàn)不具有UV活性的化合物。在Davisil(等級1740，60A型，170-400網(wǎng)目)硅膠上用規(guī)定溶劑實施硅膠層析。簡稱及縮寫TES，三乙基甲硅烷基；TBS，二甲基特丁基甲硅烷基；EDCI，1-乙基-3-(3-二甲氨基丙基)碳化二亞胺；HF-PY，氟化氫于吡啶中；DMAP，4-N，N-二甲氨基吡啶；DCM，二氯甲烷；DMF，N，N-二甲基甲酰胺；THF，四氫呋喃?；衔?2在-78℃下向新制備的LDA(11.6mmol)溶于THF(25mmol)的溶液中滴加酮30(2.4g，10.4mmol)溶于THF(6.8mL)中的溶液。在-40℃下攪拌0.5小時后，將混合物冷卻至-90℃。滴加醛31(1.38g，7.72mmol)溶于THF(6.8mL)中的溶液。在-90℃下攪拌35分鐘后，用飽和NH4Cl(15mL)水溶液使反應停止并用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有機萃取物用Na2SO4干燥并濃縮。通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝15∶1至12∶1)純化，獲得32(2.09g，66％)及異構(gòu)體33(0.39g，12％)，二者皆為黃色油狀物。32[α]D2513.1(c1.22，CHCl3)；IR(薄膜)v3494、2972、2932、1708、1454、1380、1329，1120、1038、998、734cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.98(3H，d，J＝6.9Hz)，1.06(3H，d，J＝6.9Hz)，1.10(3H，d，J＝6.1Hz)，1.14(3H，d，J＝6.9Hz)，1.15(3H，s)，1.17(3H，d，J＝6.2Hz)，1.18(3H，s)，1.20(3H，d，J＝6.2Hz)，1.81-1.92(1H，m)，3.33(1H，qd，J＝7.0，2.2.Hz)，3.51(1H，dd，J＝8.9，6.3Hz)，3.64(1H，d，J＝1.8Hz)，3.66-3.71(2H，m)，3.78-3.86(2H，m)，4.51(1H，d，J＝12.0Hz)，4.54(1H，d，J＝12.0Hz)，4.58(1H，s)，7.25-7.35(5H，m)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ10.0、14.3、20.5、21.3、21.9、22.5、23.5、23.6、36.4、42.1、54.1、69.8、71.2、72.8、73.3、73.4、103.8、127.6、127.7(2C)、128.5(2C)、138.9、221.6；C24H40O5Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]431.3，實驗值431.4?；衔?2a(未圖示)向醇32(1.01g，2.47mmol)及2，6-二甲基吡啶(691μL，5.93mmol)的冷(-40℃)溶液中添加TBSOTf(681μL，3.00mmol)，并將混合物經(jīng)3.5小時加熱至-20℃。用飽和NaHCO3(10mL)水溶液使反應停止。用己烷(50mL×3)萃取后，將合并的有機萃取物用Na2SO4干燥并濃縮。通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝50∶1)純化，獲得無色油狀物32a(1.25g，2.39mmol，97％)；[α]D25-19.7(c0.58，CHCl3)；IR(薄膜)v2966、2931、1696、1455、1378、1320、1255、1091、1044、991、873、838、773cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(6H，s)，0.89(9H，s)，0.99(3H，d，J＝7.0Hz)，1.04(3H，d，J＝7.0Hz)，1.07(3H，d，J＝7.0Hz)，1.07(3H，s)，1.14(3H，d，J＝6.1Hz)，1.17(3H，s)，1.17(3H，d，J＝6.0Hz)，1.20(3H，d，J＝6.2Hz)，1.76-1.85(1H，m)，3.21(1H，dd，J＝9.2、7.3Hz)，3.32(1H，五重峰，J＝7.4Hz)，3.62(1H，dd，J＝9.2、5.7Hz)，3.78-3.85(2H，m)，3.87(1H，dd，J＝7.7、2.0Hz)，4.46(1H，d，J＝12.1Hz)，4.50(1H，d，J＝12.1Hz)，4.73(1H，s)，7.24-7.37(5H，m)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.6、-3.3、15.6、16.8、18.7、18.8、21.8、22.1、22.5、23.5、23.7、26.4(3C)、39.0、46.2、54.0、69.7、70.9、72.1、73.4、76.7、103.1、127.6、127.8(2C)、128.5(2C)、139.0、218.9；C30H54O5SiNa的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]545.4，實驗值545.4。化合物34將32a(3.03g，5.79mmol)與對-TsOH·H2O(286mg)在水性THF(64mL，THF/H2O＝4∶1)中的混合物在回流下加熱6.5小時。將反應混合物冷卻至室溫并傾倒至飽和NaHCO3(25mL)水溶液中。用EtOAc(100mL+50mL×2)萃取后，將合并的有機層用鹽水洗滌、用Na2SO4干燥并濃縮。通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝50∶1至30∶1)純化，獲得無色油狀物34(2.37g，5.64mmol，98％)[α]D25-25.8(c0.515，CHCl3)；IR(薄膜)v2955、2931、1731、1696、1455、1360、1255、1091、1026、873、826、767cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.06(3H，s)，0.07(3H，s)，0.90(9H，s)，0.95(3H，d，J＝7.1Hz)，1.03(3H，d，J＝7.0Hz)，1.28(3H，s)，1.33(3H，s)，1.73-1.82(1H，m)，3.16(1H，dd，J＝9.2、6.1Hz)，3.28(1H，五重峰，J＝7.3Hz)，3.55(1H，dd，J＝9.2，6.7Hz)，3.91(1H，dd，J＝7.8、2.1Hz)，4.46(2H，s)，7.27-7.36(5H，m)，9.58(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.6、-3.5、15.7、16.3、18.6、19.8、20.1、26.3(3C)、39.1、47.0、61.1、71.9、73.4、75.8、127.7、128.0(2C)、128.5(2C)、138.6、201.3、213.3；C24H40O4SiNa的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]443.3，實驗值443.2?；衔?5于-78℃下向新制備的LDA(18mL于Et2O的0.5M溶液，9.0mmol)溶于Et2O(20mL)中的溶液添加醋酸特丁酯(1.16mL，8.61mmol)。攪拌50分鐘后，通過注射泵經(jīng)65分鐘滴加CpTiCl(OR)2(100mL于Et2O中的0.1M溶液，10.0mmol)。攪拌20分鐘，將反應混合物加熱至-30℃，攪拌50分鐘并重新冷卻至-78℃。經(jīng)10分鐘滴加34(2.42g，5.75mmol)溶于Et2O(9mL)中的溶液，并在-78℃下攪拌所得混合物。攪拌2小時后，用THF(5MH2O，37mL)水溶液使反應停止并于室溫下攪拌2小時。添加水(40mL)后，將混合物再攪拌1小時。通過Celite(Et2O清洗)濾除所形成的沉淀物，并用水(40mL)洗滌濾液。水層用Et2O(100mL×2)萃取，將合并后的有機層用鹽水(40mL)洗滌、Na2SO4干燥并濃縮。通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝10∶1)純化，獲得淺黃色油狀物35(2.65g，4.94mmol，86％)；[α]D25-20.3(c1.0，CHCl3)；IR(薄膜)v3523、2957、2930、2856、1732、1700、1472、1368、1252、1152、1091、1042、986、834、774cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.07(3H，s)，0.07(3H，s)，0.90(9H，s)，0.99(3H，d，J＝7.0Hz)，1.07(3H，d，J＝7.0Hz)，1.10(3H，s)，1.14(3H，s)，1.47(9H，s)，1.77-1.83(1H，m)，2.26(1H，dd，J＝16.0，10.0Hz)，2.34(1H，dd，J＝15.9，2.7Hz)，3.23(1H，dd，J＝9.2、7.1Hz)，3.35(1H，d，J＝2.7Hz，-OH)，3.36(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.61(1H，dd，J＝9.2、5.9Hz)，3.88(1H，dd，J＝7.6、2.0Hz)，4.17(1H，dt，J＝10.0，2.7Hz)，4.48(2H，s)，7.27-7.36(5H，m)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.5、-3.4、16.3、16.7、18.7、20.1、21.6、26.4(3C)、28.3(3C)、38.0、39.1、45.8、51.8、72.2、72.9、73.5、76.7、81.4、127.7、128.0(2C)、128.5(2C)、138.8、172.7、219.6；C30H52O6SiNa的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]559.3，實驗值559.4。化合物35a(未圖示)于0℃下向醇35(10.2g，8.9mmol)與咪唑(2.70g，39.7mmol)在DMF(25mL)中的混合物添加TESCl(3.3mL，19.8mmol)，并于室溫下將混合物攪拌2小時。然后用飽和NaHCO3(50mL)水溶液使反應停止。用己烷(500mL+120mL×2)萃取后，合并的有機萃取物依次用水(30mL×2)及鹽水(30mL)洗滌、Na2SO4干燥并濃縮。通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝40∶1)純化，獲得無色油狀物35a(12.1g，18.5mmol，98％)[α]D25-38.0(c0.46，CHCl3)；IR(薄膜)v2955、2877、1733、1697、1456、1367、1298、1251、1155、1099、988、835、742cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.05(6H，s)，0.57-0.68(6H，m)，0.89(9H，s)，0.95(9H，t，J＝7.9Hz)，0.99(3H，d，J＝7.0Hz)，1.02(3H，d，J＝6.8Hz)，1.04(3H，s)，1.18(3H，s)，1.45(9H，s)，1.70-1.79(1H，m)，2.16(1H，dd，J＝17.0、7.0Hz)，2.40(1H，dd，J＝17.0、3.1Hz)，3.22(1H，dd，J＝9.1、7.5Hz)，3.31(1H，五重峰，J＝6.9Hz)，3.61(1H，dd，J＝9.1、5.4Hz)，3.83(1H，dd，J＝7.3、2.3Hz)，4.30(1H，dd，J＝6.9、3.1Hz)，4.48(2H，s)，7.27-7.36(5H，m)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.5、-3.4、5.3(3C)、7.3(3C)、15.3、16.9、18.7、20.1、23.4、26.4(3C)、28.3(3C)、39.1、41.1、46.2、53.4、72.2、73.4、74.3、76.7、80.6、127.6、127.9(2C)、128.5(2C)、138.9、171.5、218.4；C36H66O6Si2Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]673.4，實驗值673.5?；衔?5b(未圖示)向35a(4.37g，6.72mmol)溶于THF(67mL)中的攪動溶液中添加Pd/C(自Acros購得，10％wt，437mg)并在H2氣氛下攪拌該混合物。攪拌2.2小時后，用Celite墊過濾該混合物，用THF(120mL)洗滌Celite墊。濃縮濾液并通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝30∶1至10∶1)純化，獲得無色油狀物35b(3.53g，6.28mmol，94％)；[α]D25-16.1(c0.62，CHCl3)；IR(薄膜)v3543、2956、1732、1696、1472、1368、1299、1252、1155、1100、988、837、775、742cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.10(3H，s)，0.12(3H，s)，0.60-0.68(6H，m)，0.93(9H，s)，0.96(9H，t，J＝8.0Hz)，0.99(3H，d，J＝7.1Hz)，1.10(3H，d，J＝6.9Hz)，1.14(3H，s)，1.20(3H，s)，1.45(9H，s)，1.46-1.55(1H，m)，2.21(1H，dd，J＝17.2、7.1Hz)，2.39(1H，dd，J＝17.2、2.8Hz)，2.54(1H，t，J＝5.8Hz，-OH)，3.30(1H，五重峰，J＝6.9Hz)，3.58(1H，dt，J＝11.5、5.5Hz)，3.66(1H，dt，J＝11.3，5.4Hz)，3.92(1H，dd，J＝8.0，2.1Hz)，4.32(1H，dd，J＝7.1、2.9Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.6、-3.5、5.3(3C)、7.2(3C)、16.0、16.1、18.6、20.0、23.4、26.4(3C)、28.3(3C)、40.0、40.9、46.9、53.7、64.8、73.3、78.1、80.9、171.7、218.5；C29H60O6Si2Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]583.4，實驗值583.5。化合物35c(未圖示)向醇35b(3.53g，6.28mmol)與粉末狀MS4A(新活化的，2.50g)在CH2Cl2(32mL)的攪拌混合物中添加NMO(1.17g，10.0mmol)，隨后添加TPAP(132mg，0.377mmol)。于室溫下攪拌35分鐘后。通過硅膠柱(己烷/Et2O＝8∶1)過濾混合物，獲得無色油狀物35c(3.34g，5.98mmol，95％)；[α]D25-69.6(c0.25，CHCl3)；IR(薄膜)v2955、2878、1732、1696、1472、1368、1253、1155、1097、989、837cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.09(3H，s)，0.10(3H，s)，0.59-0.68(6H，m)，0.89(9H，s)，0.95(9H，t，J＝8.0Hz)，1.08(3H，s)，1.11(3H，d，J＝6.9Hz)，1.14(3H，d，J＝7.1Hz)，1.24(3H，s)，1.45(9H，s)，2.19(1H，dd，J＝17.0，6.7Hz)，2.33(1H，qt，J＝7.1、2.2Hz)，2.41(1H，dd，J＝17.0、3.3Hz)，3.28(1H，五重峰，J＝7.5Hz)，4.07(1H，dd，J＝7.9、2.2Hz)，4.32(1H，dd，J＝6.7、3.2Hz)，9.74(1H，d，J＝2.0Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.8、-3.5、5.3(3C)、7.2(3C)、12.6、15.6、18.5、20.5、23.3、26.2(3C)、28.3(3C)、41.1、46.9、51.1、53.5、74.0、76.5、80.7、171.1、204.3、218.0；C29H58O6Si2Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na4]581.3，實驗值581.3?；衔?6于0℃下用t-BuOK(6.57mL于THF中的1.0M溶液，6.57mmol)處理THF(40.0mL)中的MePPh3I(2.56g，7.18mmol)。于0℃攪拌20分鐘后，將所得懸浮液冷卻至-78℃，并添加醛35c(3.34g，5.98mmol)溶于THF(14mL)中的溶液。于-78℃下攪拌15分鐘后，將混合物于0℃下攪拌15分鐘并于室溫下攪拌15分鐘。用飽和NH4Cl(20mL)水溶液使反應停止并用Et2O(120mL+50mL×2)萃取。合并后的有機萃取物用鹽水(20mL)洗滌、Na2SO4干燥并濃縮。通過快速柱層析(SiO2約80g，己烷/Et2O＝40∶1)純化殘余物，獲得無色油狀物36(125.3mg，0.225mmol，78％)；[α]D25-33.6(c0.250，CHCl3)；IR(薄膜)v2956、2878、1733、1696、1472、1367、1299、1253、1156、1100、988、837、774cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.08(3H，s)，0.60-0.68(6H，m)，0.93(9H，s)，0.96(9H，t，J＝8.0Hz)，1.04(6H，d，J＝7.0Hz)，1.09(3H，s)，1.20(3H，s)，1.45(9H，s)，2.08-2.15(1H，m)，2.29(1H，dd，J＝17.0、7.0Hz)，2.41(1H，dd，J＝17.0、3.1Hz)，3.08(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.84(1H，dd，J＝7.0、2.1Hz)，4.32(1H，dd，J＝7.0、3.1Hz)，5.02(1H，dd，J＝17.9，1.0Hz)，5.06(1H，dd，J＝10.5、1.0Hz)，5.93(1H，ddd，J＝17.9、10.5、7.7Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.6、-3.3、5.4(3C)、7.2(3C)、15.2、18.7、19.0、20.2、23.6、26.4(3C)、28.3(3C)、41.1、43.8、46.4、53.5、73.9、76.6、80.6、115.5、140.2、171.5、218.5；C30H60O5Si2Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]579.4，實驗值579.4。化合物25于0℃下向特丁基酯36(4.87g，8.74mmol)與2，6-二甲基吡啶(新蒸餾的，4.1mL，35.0mmol)溶于CH2Cl2(58mL)中的溶液中添加TESOTf(4.0mL，17.5mmol)。于0℃下攪拌25分鐘后，將混合物于室溫下攪拌3.2小時。將混合物用Et2O(600mL)稀釋，依次用5％KHSO4(60mL×2)水溶液及鹽水(60mL)洗滌、Na2SO4干燥并濃縮。將殘余物在高真空下干燥1.5小時，獲得粗產(chǎn)物酸25(6.30g，含有TESOH雜質(zhì))。將粗產(chǎn)物(6.30g)溶于水性THF(87.5mL，THF/H2O＝6∶1)中并用飽和NaHCO3(12.5mL)水溶液處理。于室溫下攪拌20分鐘后，所得懸浮液用Et2O(500mL)稀釋并用5％KHSO4(55mL)水溶液酸化。分層后，水層用Et2O(100mL×2)萃取，且合并的有機層用鹽水(50mL×2)洗滌、Na2SO4干燥并濃縮。將殘余物在高真空下干燥過夜，獲得無色油狀粗產(chǎn)物酸(5.60g，含有TESOH雜質(zhì))，其可不經(jīng)進一步純化用于下一反應。通過快速柱層析(在硅膠上，用己烷/EtOAc＝4/1洗脫)純化以進行定性。D25-30.7(c0.985，CHCl3)；IR(薄膜)v2956、2936、2879、1712、1472、1417、1303、1253、1107、1046、1003、988、872、837、775、741cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.09(3H，s)，0.59-0.67(6H，m)，0.93(9H，s)，0.96(9H，t，J＝8.1Hz)，1.05(3H，d，J＝7.0Hz)，1.05(3H，d，J＝7.0Hz)，1.20(3H，s)，1.21(3H，s)，2.06-2.13(1H，m)，2.34(1H，dd，J＝16.4、7.4Hz)，2.50(1H，dd，J＝16.4、3.0Hz)，3.06(1H，五重峰，J＝7.3Hz)，3.87(1H，dd，J＝7.5、1.8Hz)，4.40(1H，dd，J＝7.3、2.9Hz)，5.01(1H，dd，J＝18.0、0.9Hz)，5.07(1H，dd，J＝10.4、1.2Hz)，5.93(1H，ddd，J＝18.0、10.4、7.8Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.6、-3.3、5.3(3C)、7.1(3C)、15.6、18.7、19.1、19.2、24.1、26.4(3C)、39.8、43.6、46.4、53.5、73.7、76.6、115.6、140.0、177.9、218.7；C26H52O5Si2Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na1]523.3，實驗值522.9?；衔?5將3-O-TES-6-O-TBS保護的酸25通過與苯共沸蒸餾干燥。將新干燥的醇43(200mg，1.19mmol)溶于DCM(10mL)中并冷卻至0℃，此時添加固體DMAP(167mg，1.37mmol)及固體EDCI(261mg，1.37mmol)。將反應混合物于0℃攪拌15分鐘后，滴加酸25(425mg，0.85mmol)溶于DCM(2mL)中的溶液。去除冷浴并繼續(xù)攪拌2小時。用DCM(10mL)稀釋粗反應混合物，并用10％EtOAC/己烷作為洗脫液通過硅膠層析純化該混合物，獲得澄清的油狀酯45(380mg，81％產(chǎn)率，兩步，自36開始)[α]D-15.1(c1.2，CDCl3)；IR(純)2955、2932、2877、1743、1732、1694、1474、1461、1417、1380、1360、1295、1252、1169、1094、1043、988.3、912.9、871.4、836.5、774.8、741.6cm-1；1HNMR(500MHz，CDCl3)0.08(3H，s)，0.08(3H，s)，0.60-0.68(6H，m)，0.93(9H，s)，0.95(9H，t，J＝8.0Hz)，1.04(3H，d，J＝6.9Hz)，1.05(3H，d，J＝6.9Hz)，1.10(3H，s)，1.25(3H，s)，1.69(3H，s)，2.08-2.15(2H，m)，2.16(3H，s)，2.38(1H，dd，J＝17.0、7.0Hz)，2.48(2H，t，J＝6.5Hz)，2.57(1H，dd，J＝17.0、2.7Hz)，2.71-2.76(2H，m)，3.07(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.83(1H，d，J＝7.2Hz)，4.36(1H，dd，J＝7.0、2.7Hz)，4.97-5.07(4H，m)，5.19(1H，t，J＝7.0)，5.73(1H，td，J＝15.4、5.9Hz)，5.92(1H，dd，J＝15.7、8.0Hz)；13CNMR(500MHz，CDCl3)δ218.4、205.4、172.1、140.1、137.4、135.4、119.1、115.8、115.6、78.7、76.5、73.9、53.3、46.3、43.7、39.6、36.6、29.2、26.7、26.4、23.8、23.7、19.9、18.9、18.7、15.4、7.06、5.30、-3.29、-3.62；C36H66O6Si2Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]673.4，實驗值673.5。化合物47于回流下向化合物45(20mg，0.031mmol)溶于干燥甲苯(60mL)的溶液中添加一份三環(huán)己基膦[1，3-雙(2，4，6-三甲基苯基)-4，5-二氫咪唑-2-基亞基][亞芐基]二氯化釕(IV)(5.2mg，0.0061mmol)溶于干燥甲苯(2mL)的溶液，并將混合物加熱10分鐘。立即在冰浴中將反應混合物冷卻，放置于二氧化硅上，用梯度為4-10％的EtOAc/戊烷作為洗脫液用硅膠層析純化，獲得油狀化合物47(15mg，產(chǎn)率78％)[α]-28.6(c1.2，CHCl3)；IR(純)2955、2933、2878、1745、1731、1695、1471、1462、1380、1361、1251、1159、1104、1080、1019、985.0、876.1、835.5、774.7、743.1、670.1cm-1；1HNMR(500MHz，CDCl3)0.07(3H，s)，0.10(3H，s)，0.59-0.68(6H，m)，0.91(9H，t，J＝8.0Hz)，0.93(9H，s)，1.04(3H，d，J＝7.0Hz)，1.10(3H，s)，1.11(3H，d，J＝7.0Hz)，1.17(3H，s)，1.71(3H，s)，2.21(3H，s)，2.27-2.32(1H)，2.38(1H，dd，J＝14.6、6.8Hz)，2.51-2.61(2H，m)，2.57(1H，dd，J＝15.5、3.3Hz)，2.93-3.1(3H，m)，3.94(1H，4J＝8.5Hz)，4.28(1H，dd，J＝8.6、3.0Hz)，5.04(1H，dd，J＝8.7、2.4)，5.16(1H，t，J＝7.5)，5.73(1H，tdd，J＝12.8、9.94、6.9Hz)，5.92(1H，ddd，J＝18.0、10.3、7.8Hz)；13CNMR(125MHz，CDCl3)δ215.9、204.8、171.3、140.0、132.7、129.2、118.6、79.1、78.2、75.4、54.0、48.2、41.7、40.3、35.0、29.2、26.6、26.5、23.5、22.8、20.6、18.8、17.5、14.3、7.19、5.53、-3.36；C34H62O6Si2的LRMS(ESI)計算值645.4，實驗值645.4(M+Na+)。化合物39a于0℃下向魏悌希試劑(19.1mg，54.7μmol)的THF(0.4mL)溶液中添加KHMDS(109μL溶于甲苯中的0.5M溶液，54.7μmol)。將混合物于0℃攪拌0.5小時，然后冷卻至-78℃。向該混合物滴加酮47(5.7mg，9.12μmol)的THF(0.3mL)溶液，并將所得混合物經(jīng)1.5小時加熱至-20℃。用飽和NH4Cl(2mL)水溶液使反應停止，并用EtOAc(7mL×3)萃取。合并的有機層用Na2SO4干燥并濃縮。通過快速柱層析(SiO2，己烷/Et2O＝10∶1)純化殘余物，獲得5.6mg不能分離的E/Z烯烴混合物(ElZ＝9∶1)。通過制備型TLC(己烷/Et2O＝4∶1)純化該混合物，獲得無色油狀純39a(5.0mg，6.96μmol，76％)；[α]D25-41.5(c0.715，CHCl3)；IR(薄膜)v2955、2884、1737、1690、1467、1378、1249、1179、1102、1014、979、879、826、773cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.12(3H，s)，0.57(6H，q，J＝7.8Hz)，0.89(9H，t，J＝8.0Hz)，0.93(9H，s)，1.04(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.17(3H，d，J＝7.1Hz)，1.68(3H，s)，2.15(3H，d，J＝0.8Hz)，2.14-2.27(2H，m)，2.45(1H，dd，J＝14.0、4.8Hz)，2.50(1H，dd，J＝14.9、3.2Hz)，2.64-2.74(2H，m)，2.72(3H，s)，3.02(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.10(1H，dd，J＝14.4、7.3Hz)，3.96(1H，d，J＝8.7Hz)，4.43(1H，dd，J＝8.3、2.9Hz)，5.22(1H，dd，J＝9.8、5.7Hz)，5.33-5.42(2H，m)，5.69(1H，dd，J＝15.8、8.2Hz)，6.57(1H，s)，6.96(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.3、-3.2、5.6(3C)、7.1(3C)、15.0、17.2、18.8、19.4、21.4、21.7、23.8、24.3、26.5(3C)、33.2、35.6、41.3、41.8、48.2、54.0、74.4、77.4、79.3、116.4、120.5、121.0、129.3、132.1、137.8、138.0、152.7、164.8、170.7、216.8；C39H68NO5SSi2的LRMS(ESI)計算值[M+H+]718.4，實驗值718.3?；衔?8(Epo3)于0℃下向39a(298.8mg，0.416mmol)的THF(6.5mL)溶液中添加HF.吡啶(3.2mL)，并將該混合物于室溫下攪拌3小時。于0℃下滴加TMSOMe(30mL)使反應停止。在高真空下濃縮并干燥后，通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝1∶1)純化殘余物，獲得白色固體狀28(196.6mg，0.402mmol，97％)；[α]D25-96.6(c0.235，CHCl3)；IR(薄膜)v3502、2970、2927、1733、1685、1506、1456、1375、1251、1152、1040、977cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.06(3H，s)，1.11(3H，d，J＝7.0Hz)，1.22(3H，d，J＝6.8Hz)，1.28(3H，s)，1.72(3H，s)，2.10(3H，s)，2.31-2.40(2H，m)，2.43(1H，dd，J＝16.0、3.7Hz)，2.49(1H，dd，J＝16.0、9.2Hz)，2.55-2.68(2H，m)，2.71(3H，s)，2.98(1H，dd，J＝14.4、6.4Hz)，3.16(1H，五重峰，J＝6.2Hz)，3.76(1H，dd，J＝5.9、3.2Hz)，4.30(1H，dd，J＝9.2、3.7Hz)，5.18(1H，brt，J＝7.3Hz)，5.32(1H，dd，J＝8.4、2.5Hz)，5.63(1H，dd，J＝15.7、6.4Hz)，5.60(1H，ddd，J＝15.7、6.9、5.1Hz)，6.60(1H，s)，6.98(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.1、16.0、17.7、19.2、19.5、22.5、23.6、32.0、35.0、39.6、40.3、44.8、53.3、71.8、75.6、78.3、116.1、119.6、120.5、129.9、131.3、137.5、138.2、152.2、165.0、170.7、218.8；C27H40NO5S的LRMS(ESI)計算值[M+H+]490.3，實驗值490.2。dEpoB(1，Epo1)于50℃下向28(1.2mg，2.5μmol)及TrisNHNH2(29.3mg，98μmol)的ClCH2CH2Cl(0.7mL)溶液中添加Et3N(13.7μL，98μmol)。由HPTLC(己烷/EtOAc/CH2Cl2＝1/1/2)監(jiān)視該反應。攪拌7小時后，將該混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋并通過硅膠墊過濾，硅膠墊用EtOAc洗滌。濃縮后，用制備型TLC(己烷/EtOAc/CH2Cl2＝1/1/2)純化殘余物，獲得白色固體1(1.1mg，2.2μmol，91％)。1的光譜數(shù)據(jù)與所報導dEpoB的數(shù)據(jù)相同?；衔?7在反應前將酸25及醇24與無水苯(5mL×2)共沸并在高真空下干燥。于0℃下向醇24(639mg，2.63mmol)的CH2Cl2(13mL)溶液中添加EDCI(576mg，3.09mmol)及DMAP(366mg，3.09mmol)。于0℃下經(jīng)16分鐘向該混合物中滴加酸25(1.11g，1.88mmol)的CH2Cl2(5mL+2mL洗滌)。于0℃下攪拌1.5小時后，將混合物于室溫下攪拌3.5小時。濃縮后，殘余物通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝30∶1至20∶1)純化，獲得無色油狀27(1.20g，1.61mmol，86％，自特丁基酯開始)；[α]D24-25.1(c1.30，CHCl3)；IR(薄膜)v2955、2925、2872、1732、1696、1461、1378、1290、1243、1173、1091、985、873、773cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.06(3H，s)，0.06(3H，s)，0.58-0.66(6H，m)，0.92(9H，s)，0.95(9H，t，J＝8.0Hz)，1.02(3H，d，J＝6.5Hz)，1.03(3H，d，J＝6.5Hz)，1.07(3H，s)，1.21(3H，s)，1.67(3H，s)，2.07(3H，s)，2.05-2.12(1H，m)，2.30(1H，dd，J＝16.9、7.5Hz)，2.39(1H，dt，J＝14.8、6.7Hz)，2.49(1H，dd，J＝17.0、3.0Hz)，2.50(1H，dt，J＝14.8、6.7Hz)，2.70(3H，s)，2.74-2.30(2H，m)，3.07(1H，dd，J＝7.0Hz)，3.83(1H，dd，J＝7.1、2.0Hz)，4.35(1H，dd，J＝7.4、2.8Hz)，4.98-5.07(4H，m)，5.16(1H，brt，J＝7.0Hz)，5.23(1H，t，J＝6.9Hz)，5.74(1H，ddt，J＝16.7、10.2、6.5Hz)，5.91(1H，ddd，J＝17.8、10.5、7.8Hz)，6.50(1H，s)，6.95(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.7、-3.3、5.3(3C)、7.2(3C)、14.8、15.2、18.7、18.9、19.4、20.3、23.6、23.7、26.4(3C)、31.7、36.7、40.1、43.8、46.4、53.3、74.2、76.5、79.6、115.5、115.6、116.5、120.5、121.3、135.8、136.1、137.4、140.2、152.9、164.7、171.5、218.4；C41H71NO5SSi2的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]768.5，實驗值768.5?；衔?9a將27(26.9mg，36.1μmol)的甲苯(70mL)溶液加熱至回流并用Grubbs催化劑(3.1mg，3.61μmol)的甲苯(2mL)溶液處理。將混合物攪拌25分鐘，冷卻至0℃并通過硅膠墊過濾，硅膠墊用己烷/EtOAc＝2/1洗滌。將合并的濾液過濾、濃縮并通過快速柱層析(SiO2，己烷/Et2O＝40∶1至5∶1)純化，獲得無色油狀39a(9.9mg，13.8μmol，38％)；[α]D25-41.5(c0.715，CHCl3)；IR(薄膜)v2955、2884、1737、1690、1467、1378、1249、1179、1102、1014、979、879、826、773cm-1；]HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.12(3H，s)，0.57(6H，q，J＝7.8Hz)，0.89(9H，t，J＝8.0Hz)，0.93(9H，s)，1.04(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.17(3H，d，J＝7.1Hz)，1.68(3H，s)，2.15(3H，d，J＝0.8Hz)，2.14-2.27(2H，m)，2.45(1H，dd，J＝14.0、4.8Hz)，2.50(1H，dd，J＝14.9、3.2Hz)，2.64-2.74(2H，m)，2.72(3H，s)，3.02(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.10(1H，dd，J＝14.4、7.3Hz)，3.96(1H，d，J＝8.7Hz)，4.43(1H，dd，J＝8.3、2.9Hz)，5.22(1H，dd，J＝9.8、5.7Hz)，5.33-5.42(2H，m)，5.69(1H，dd，J＝15.8、8.2Hz)，6.57(1H，s)，6.96(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.3、-3.2、5.6(3C)、7.1(3C)、15.0、17.2、18.8、19.4、21.4、21.7、23.8、24.3、26.5(3C)、33.2、35.6、41.3、41.8、48.2、54.0、74.4、77.4、79.3、116.4、120.5、121.0、129.3、132.1、137.8、138.0、152.7、164.8、170.7、216.8；C39H68NO5SSi2的LRMS(ESI)計算值[M+H+]718.4，實驗值718.3?；衔?8于0℃下向39a(298.8mg，0.416mmol)的THF(6.5mL)溶液中添加HF-吡啶(3.2mL)，并于室溫下將混合物攪拌3小時。于0℃下滴加TMSOMe(30mL)使反應停止并于室溫下將該混合物攪拌3小時。于高真空下濃縮并干燥后，殘余物通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝1∶1)純化，獲得白色固體28(196.6mg，0.402mmol，97％)；[α]D25-96.6(c0.235，CHCl3)；IR(薄膜)v3502、2970、2927、1733、1685、1506、1456、1375、1251、1152、1040、977cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.06(3H，s)，1.11(3H，d，J＝7.0Hz)，1.22(3H，d，J＝6.8Hz)，1.28(3H，s)，1.72(3H，s)，2.10(3H，s)，2.31-2.40(2H，m)，2.43(1H，dd，J＝16.0、3.7Hz)，2.49(1H，dd，J＝16.0、9.2Hz)，2.55-2.68(2H，m)，2.71(3H，s)，2.98(1H，dd，J＝14.4、6.4Hz)，3.16(1H，五重峰，J＝6.2Hz)，3.76(1H，dd，J＝5.9、3.2Hz)，4.30(1H，dd，J＝9.2、3.7Hz)，5.18(1H，brt，J＝7.3Hz)，5.32(1H，dd，J＝8.4、2.5Hz)，5.63(1H，dd，J＝15.7、6.4Hz)，5.60(1H，ddd，J＝15.7、6.9、5.1Hz)，6.60(1H，s)，6.98(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.1、16.0、17.7、19.2、19.5、22.5、23.6、32.0、35.0、39.6、40.3、44.8、53.3、71.8、75.6、78.3、116.1、119.6、120.5、129.9、131.3、137.5、138.2、152.2、165.0、170.7、218.8；C27H40NO5S的LRMS(ESI)計算值[M+H+]490.3，實驗值490.2?；衔?6在反應前將酸25及醇21與無水甲苯(5mL×2)共沸并于高真空下干燥。于0℃下向醇21(240mg，0.756mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液添加EDCI(192.7mg，1.01mmol)及DMAP(122.8mg，1.01mmol)。于0℃下經(jīng)15分鐘向該混合物中滴加酸25(314.6mg，0.628mmol)的CH2Cl2(2mL+1mL洗滌)溶液。于0℃下攪拌2小時后，再將混合物于室溫下攪拌2小時。濃縮后，殘余物通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝20.1至15∶1)純化，獲得無色油狀26(340.1mg，0.425mmol，以酸計為68％)；[α]D24-27.5(c0.28，CHCl3)；IR(薄膜)v2956、2878、1740、1692、1472、1378、1317、1253、1174、1118、988、915、872、837、775cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.06(6H，s)，0.57-0.65(6H，m)，0.92(9H，s)，0.94(9H，t，J＝7.9Hz)，1.02(3H，d，J＝6.9Hz)，1.03(3H，d，J＝6.8Hz)，1.07(3H，s)，1.22(3H，s)，2.07-2.10(1H，m)，2.09(3H，s)，2.31(1H，dd，J＝16.9、7.3Hz)，2.51(1H，dd，J＝16.8、3.0Hz)，2.49-2.65(2H，m)，2.71(3H，s)，2.96-2.99(2H，m)，3.06(1H，五重峰，J＝7.1Hz)，3.83(1H，dd，J＝7.3、2.1Hz)，4.35(1H，dd，J＝7.2、3.0Hz)，4.98-5.12(4H，m)，5.30(1H，t，J＝6.7Hz)，5.76(1H，ddt，J＝16.7、10.2、6.2Hz)，5.92(1H，ddd，J＝17.8、9.9、7.8Hz)，6.19(1H，t，J＝7.0Hz)，6.51(1H，s)，6.97(1H，s)；C41H68F3NO5SSi2Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]822.4，實驗值822.4。化合物40a(通過26的RCM)將26(57.6mg，72.0μmol)的甲苯(142mL)溶液加熱至回流并用Grubbs催化劑(6.1mg，7.20μmol)的甲苯(2mL)溶液處理。將混合物攪拌28分鐘，冷卻至0℃并用硅膠墊過濾，硅膠墊用己烷/EtOAc＝2/1(300mL)沖洗。將合并的濾液濃縮并通過快速柱層析(SiO2，己烷/Et2O＝40∶1至15∶2)純化，獲得無色油狀40a(12.0mg，15.5μmol，22％)；IR(薄膜)v2955、2884、1743、1690、1472、1320、1173、1114、1038、1008、873、832、773cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.09(3H，s)，0.12(3H，s)，0.55(6H，q，J＝7.7Hz)，0.88(9H，t，J＝8.0Hz)，0.96(9H，s)，1.01(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.20(3H，d，J＝7.1Hz)，2.07-2.17(1H，m)，2.19(3H，s)，2.38(1H，dd，J＝14.3、3.5Hz)，2.39-2.49(1H，m)，2.50(1H，dd，J＝14.3、7.3Hz)，2.73(3H，s)，2.77-2.91(2H，m)，2.96-3.09(2H，m)，3.98(1H，dd，J＝8.9Hz)，4.54(1H，dd，J＝7.3、3.4Hz)，5.28-5.38(1H，m)，5.63(1H，dd，J＝9.6、2.3Hz)，5.77(1H，dd，J＝15.9、8.5Hz)，6.21-6.28(1H，m)，6.60(1H，s)，6.99(1H，s)；C39H65F3NO5SSi2的LRMS(ESI)計算值[M+H+]772.4，實驗值772.4?；衔?9于0℃下緩慢向40a(1.78g，2.31mmol)的THF(25mL)溶液中添加HF-吡啶(12.5mL)，并于室溫下將該混合物攪拌4小時。通過于0℃下經(jīng)10分鐘滴加TMSOMe(80mL)使反應停止。于室溫下將混合物劇烈攪拌2.5小時。于高真空下濃縮并干燥2小時后，殘余物通過快速柱層析(SiO2約50g，己烷/EtOAc＝1∶1)純化，獲得無色粉末29(1.20g，2.21mmol，96％)；[α]D25-54.6(c0.28，CHCl3)；IR(薄膜)v3478、2974、2929、1736、1689、1449、1381、1318、1247、1169、1113、1039、983、867、736cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.23(3H，d，J＝6.8Hz)，1.37(3H，s)，2.04(1H，brd，J＝3.8Hz，-OH)，2.12(3H，s)，2.25-2.33(1H，m)，2.38(1H，dd，J＝15.3、3.0Hz)，2.48(1H，dd，J＝15.4、9.8Hz)，2.54-2.61(1H，m)，2.66-2.76(1H，m)，2.71(3H，s)，2.96(1H，dd，J＝16.5、4.5Hz)，3.02(1H，dd，J＝16.3，6.5Hz)，3.11(1H，五重峰，J＝6.7Hz)，3.19(1H，brs，＝OH)，3.74(1H，brs)，4.35(1H，brd，J＝9.5Hz)，5.42(1H，dd，J＝6.2、4.1Hz)，5.60(1H，ddd，J＝15.8、5.6、4.5Hz)，5.66(1H，dd，J＝15.8、5.8Hz)，6.24(1H，t，J＝7.2Hz)，6.64(1H，s)，7.00(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.1、16.1、17.7、18.5、19.3、22.5、28.8、31.1、39.6、39.7、45.0、53.7、71.4、75.3、76.8、116.7、120.2、124.3[q，1J(C，F(xiàn))＝273.4Hz]、127.9、130.2[q，3J(C，F(xiàn))＝6.0Hz]、130.6[q，2J(C，F(xiàn))＝28.4Hz]、132.5、136.7、152.0、165.4、170.2、218.4；C27H37F3NO5S的LRMS(ESI)計算值[M+H4]544.2，實驗值544.1?；衔?于50℃下向29(1.22mg，2.24μmol)及TrisNHNH2(26.7mg，89.6μmol)的ClCH2CH2Cl(1mL)的溶液中添加Et3N(12.5μL，89.6μmol)。通過HPTLC(己烷/EtOAc/CH2Cl2＝1/1/2)監(jiān)視反應。攪拌6.5小時后，再次將TrisNHNH2(26.7mg，89.6μmol)及Et3N(12.5μL，89.6μmol)添加至該混合物。攪拌14小時后，將混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋并通過硅膠墊過濾，硅膠墊用EtOAc沖洗。濃縮后，殘余物用制備型TLC(己烷/EtOAc/CH2Cl2＝1/1/2)純化，獲得白色固體2(1.16mg，2.13μmol，94％)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.03(3H，d，J＝7.0Hz)，1.08(3H，s)，1.19(3H，d，J＝6.8Hz)，1.25-1.35(2H，m)，1.37(3H，s)，1.42-1.55(2H，m)，1.65-1.82(2H，m)，2.10(3H，d，J＝0.8Hz)，2.21-2.47(2H，m)，2.27(1H，dd，J＝14.2、2.6Hz)，2.48(1H，dd，J＝14.3、10.8Hz)，2.70(3H，s)，2.70-2.28(1H，m)，3.02(1H，d，J＝2.0Hz，-OH)，3.19(1H，qd，J＝6.9、2.2Hz)，3.65(1H，d，J＝6.2Hz，-OH)，3.69-3.72(1H，m)，4.34(1H，ddd，J＝10.8、6.2、2.6Hz)，5.28(1H，dd，J＝10.2、2.2Hz)，6.12(1H，dd，J＝10.2、5.2Hz)，6.61(1H，s)，6.98(1H，s)；C27H39F3NO5S的LRMS(ESI)計算值[M+H+]546.3，實驗值546.2?；衔?4在反應前將酸25及醇53與無水甲苯(3mL×2)共沸并于高真空下干燥。于0℃下向醇53(68.0mg，0.173mmol)的CH2Cl2(1.3mL)溶液中添加EDCI(37.8mg，0.197mmol)及DMAP(24.1mg，0.197mmol)。于0℃下經(jīng)5分鐘向該混合物滴加酸25(72.6mg，0.123mmol)的CH2Cl2(0.7mL)溶液。于0℃下攪拌1小時后，將混合物于室溫下攪拌2小時。濃縮后，殘余物通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝30∶1)純化，獲得無色油狀54(99.5mg，0.114mmol，自特丁基酯開始92％)；[α]D25-23.4(c0.56，CHCl3)；IR(薄膜)v2955、2931、2880、1735、1696、1506、1472、1386、1362、1294、1254、1174、1104、988、878、776、742cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.06(3H，s)，0.06(3H，s)，0.14(6H，s)，0.63(6H，q，J＝8.0Hz)，0.92(9H，s)，0.94(9H，t，J＝8.0Hz)，0.97(9H，s)，1.02(3H，d，J＝6.6Hz)，1.05(3H，d，J＝6.5Hz)，1.07(3H，s)，1.21(3H，s)，1.67(3H，s)，2.06(3H，d，J＝0.8Hz)，2.05-2.14(1H，m)，2.30(1H，dd，J＝16.9、7.5Hz)，2.33-2.53(2H，m)，2.50(1H，dd，J＝16.9、2.7Hz)，2.76-2.80(2H，m)，3.07(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.83(1H，dd，J＝7.0、2.2Hz)，4.35(1H，dd，J＝7.4、2.8Hz)，4.97(2H，s)，4.97-5.07(4H，m)，5.16(1H，t，J＝7.2Hz)，5.24(1H，t，J＝6.9Hz)，5.74(1H，ddt，J＝16.6、10.0、6.5Hz)，5.91(1H，ddd，J＝17.6、9.9、7.7Hz)，6.50(1H，s)，7.06(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDl3)δ-5.2(2C)、-3.7、-3.3、5.3(3C)、7.2(3C)、14.7、15.2、18.5、18.7、18.9、20.3、23.6、23.7、26.0(3C)、26.4(3C)、31.7、36.7、40.1、43.8、46.4、53.3、63.4、74.2、76.5、79.6、115.5、115.6、116.6、120.5、121.3、135.8、136.1、137.4、140.1、153.0、171.5、172.2、218.4；C47H86NO6SSi3的LRMS(ESI)計算值[M+H+]876.6，實驗值876.5?；衔?5將54(69.7mg，79.5μmol)的甲苯(158mL)溶液加熱至回流并用Grubbs催化劑(6.7mg，7.95μmol)的甲苯(2mL)溶液處理。將混合物攪拌11分鐘，冷卻至0℃并用硅膠墊過濾，硅膠墊用己烷/EtOAc＝3/1(280mL)沖洗。將合并的濾液濃縮并通過快速柱層析(SiO2，己烷/Et2O＝20∶1至15∶1)純化，獲得無色油狀55(18.4mg，21.7μmol，27％)；[α]D24-40.4(c0.26，CHCl3)；IR(薄膜)v2955、2930、2879、1740、1694、1472、1387、1362、1253、1200、1107、1007、838、776、742cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.12(3H，s)，0.15(6H，s)，0.57(6H，q，J＝7.9Hz)，0.88(9H，t，J＝8.0Hz)，0.95(9H，s)，0.97(9H，s)，1.04(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.17(3H，d，J＝7.0Hz)，1.69(3H，s)，2.06-2.30(2H，m)，2.14(3H，s)，2.45(1H，dd，J＝15.6、3.6Hz)，2.50(1H，dd，J＝14.9、3.1Hz)，2.63-2.75(2H，m)，2.97-3.06(1H，m)，3.10(1H，dd，J＝14.6、7.7Hz)，3.97(1H，d，J＝8.5Hz)，4.44(1H，dd，J＝8.4、2.9Hz)，4.97(2H，s)，5.22(1H，dd，J＝8.7、5.2Hz)，5.33-5.44(2H，m)，5.70(1H，dd，J＝15.6、8.1Hz)，6.57(1H，s)，7.07(1H，s)；C45H82NO6SSi3的LRMS(ESI)計算值[M+H+]848.5，實驗值848.5?；衔?7于0℃下向55(61.8mg，72.8μmol)的THF(2mL)溶液中添加HF-吡啶(1mL)，并于室溫下將混合物攪拌3.2小時。通過于0℃下滴加TMSOMe(15mL)使反應停止。將混合物于室溫下攪拌2小時。于高真空下濃縮并干燥后，殘余物通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝1∶3)純化，獲得白色固體57(32.4mg，64.1μmol，88％)；[α]D25-108.4(c0.285，CHCl3)；IR(薄膜)v3422、2968、2919、2729、1689、1449、1377、1252、1152、1064、978cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝6.9Hz)，1.22(3H，d，J＝6.8Hz)，1.32(3H，s)，1.72(3H，s)，2.08(3H，s)，2.31-2.40(3H，m)，2.43(1H，dd，J＝15.5、3.5Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.5、9.5Hz)，2.55-2.67(2H，m)，2.95(1H，dd，J＝14.6、6.3Hz)，3.13(1H，五重峰，J＝6.6Hz)，3.34(1H，brs，-OH)，3.75(1H，dd，J＝6.6、2.4Hz)，4.06(1H，brs，-OH)，4.33(1H，dd，J＝9.4、3.0Hz)，4.92(2H，s)，5.18(1H，t，J＝6.9Hz)，5.33(1H，dd，J＝8.0、2.5Hz)，5.52(1H，dd，J＝15.8、6.4Hz)，5.59(1H，ddd，J＝15.8、6.6、5.0Hz)，6.63(1H，s)，7.13(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.3、16.3、17.8、19.2、22.8、23.7、31.9、35.1、39.7、40.2、45.0、53.4、61.8、71.7、75.8、78.1、116.7、119.0、120.5、130.0、131.2、137.6、138.9、152.5、170.0、170.7、218.7；C27H39NO6SNa的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]528.2，實驗值528.0?；衔?6在反應前將粗制酸25(4.65g，7.27mmol)及醇44(2.18g，9.84mmol)與無水苯共沸并于高真空下干燥。于0℃下向醇44(2.18g，9.84mmol)的CH2Cl2(65mL)溶液中添加EDCI(2.09g，10.9mmol)及DMAP(1.33g，10.9mmol)。于0℃下經(jīng)20分鐘向該混合物中滴加粗制酸25(4.65g，7.27mmol)的CH2Cl2(20mL+5mL沖洗)溶液。于0℃下攪拌40分鐘后，再于室溫下將混合物攪拌4小時。濃縮后，殘余物通過快速柱層析(SiO2約160g，己烷/EtOAc＝20∶1)純化，獲得無色油狀46(4.85g，6.87mmol，自特丁酯開始94％)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H，s)，0.08(3H，s)，0.60(6H，q，J＝7.SHz)，0.93(9H，s)，0.94(9H，t，J＝8.0Hz)，1.04(3H，d，J＝7.0Hz)，1.04(3H，d，J＝7.0Hz)，1.11(3H，s)，1.23(3H，s)，2.05-2.14(1H，m)，2.17(3H，s)，2.40(1H，dd，J＝16.9、7.0Hz)，2.59(1H，dd，J＝17.0、3.6Hz)，2.56-2.64(2H，m)，2.90-3.01(2H，m)，3.06(1H，五重峰，J＝7.0Hz)，3.85(1H，dd，J＝7.3、2.0Hz)，4.38(1H，d，J＝7.0、3.4Hz)，4.97-5.14(5H，m)，5.75(1H，ddt，J＝16.0、9.9、6.2Hz)，5.92(1H，ddd，J＝17.8、10.5、7.8Hz)，6.21(1H，td，J＝7.2、1.5Hz)；C36H63F3O6Si2Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]727.4，實驗值727.3?；衔?8將46(510.0mg，0.723mmol)的甲苯(500mL)溶液加熱至回流并用Grubbs催化劑(92.1mg，0.109mmol)的甲苯(10mL)溶液處理。在回流下將混合物攪拌17分鐘并立即冷卻至0℃，在用硅膠墊過濾之前保持在0℃。以同樣方式同時處理第二批二烯(510.0mg，0.723mmol)。用硅膠墊(100g)過濾合并的反應混合物，硅膠墊用己烷/EtOAc＝3/1(1.4L)沖洗。將合并的濾液濃縮并通過快速柱層析(SiO2約65g，己烷/Et2O＝10∶1至5∶1)純化，獲得無色油狀48(742.4mg，1.10mmol，76％)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.08(3H)，0.10(3H，s)，0.60(6H，q，J＝7.8Hz)，0.93(9H，s)，0.94(9H，t，J＝7.8Hz)，1.03(3H，d，J＝7.1Hz)，1.08(3H，s)，1.13(3H，d，J＝7.0Hz)，1.17(3H，s)，2.26(3H，s)，2.25-2.34(1H，m)，2.64(1H，dd，J＝15.5、5.0Hz)，2.68-2.75(2H，m)，2.76(1H，dd，J＝15.6，6.4Hz)，2.85(1H，dd，J＝15.6，5.7Hz)，2.97(1H，dq，J＝8.3、6.9Hz)，3.04(1H，dd，J＝15.6、6.3Hz)，3.92(1H，dd，J＝8.3、1.2Hz)，4.36(1H，t，J＝5.3Hz)，5.30-5.39(2H，m)，5.58(1H，dd，J＝15.5、8.0Hz)，6.13(1H，bit，J＝7.2Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.6、-3.6、5.4(3C)、7.0(3C)、17.5、18.5、19.0、21.6、23.5、26.3(3C)、26.5、28.6、29.1、41.0、42.3、47.3、54.1、74.2、76.8、77.7、124.0[1J(C，F(xiàn))＝273.7Hz]，126.0、128.7[3J(C，F(xiàn))＝5.9Hz]、132.2[2J(C，F(xiàn))＝28.1Hz]、133.8、170.5、204.1、216.1；C34H59F3O6Si2Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]699.4，實驗值699.4?；衔?0a(通過酮48的魏悌希反應)將酮48與苯共沸，然后于高真空下干燥0.5小時。于0℃下經(jīng)5分鐘向魏悌希鹽(907mg，2.59mmol)的THF(19mL)溶液中滴加t-BuOK(2.4mL于THF的1.0M溶液，2.43mmol)。將混合物于0℃下攪拌0.5小時，然后冷卻至-78℃。經(jīng)10分鐘向該混合物中滴加酮48(1.10g，1.62mmol)的THF(13mL)溶液，并經(jīng)2小時將混合物加熱至-20℃。用飽和NH4Cl(15mL)水溶液使反應停止并用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有機層用鹽水(20mL)洗滌、Na2SO4干燥并濃縮。殘余物通過快速層析(SiO2，己烷/Et2O＝20∶1至10∶1)純化，獲得所期望的16(E)-異構(gòu)體40a(940mg，1.22mmol，75％)及不希望的16(Z)-異構(gòu)體40b(140.9mg，0.182mmol，11％)，二者皆為無色油狀物；[α]D26-17.1(c0.14，CHCl3)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.09(3H，s)，0.12(3H，s)，0.55(6H，q，J＝7.7Hz)，0.88(9H，t，J＝8.0Hz)，0.96(9H，s)，1.01(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.20(3H，d，J＝7.1Hz)，2.07-2.17(1H，m)，2.19(3H，s)，2.38(1H，dd，J＝14.3、3.5Hz)，2.39-2.49(1H，m)，2.50(1H，dd，J＝14.3、7.3Hz)，2.73(3H，s)，2.77-2.91(2H，m)，2.96-3.09(2H，m)，3.98(1H，dd，J＝8.9Hz)，4.54(1H，dd，J＝7.3、3.4Hz)，5.28-5.38(1H，m)，5.63(1H，dd，J＝9.6、2.3Hz)，5.77(1H，dd，J＝15.9、8.5Hz)，6.21-6.28(1H，m)，6.60(1H，s)，6.99(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.4、-3.3、5.5(3C)、7.0(3C)、14.6、17.1、18.7、19.4、19.9、21.3、24.8、26.4(3C)、29.6、32.8、42.0、42.1、48.2、54.1、73.4、76.9、77.8、117.0、121.6、124.3[1J(C，F(xiàn))＝273.5Hz]、127.2、130.6[2J(C，F(xiàn))＝28.2Hz]、130.8[3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]、133.2、136.5、152.3、165.0、170.1、217.1；C39H65F3NO5SSi2的HRMS(ESI)計算值[M+H+]772.4074，實驗值772.4102。[α]D2562.7(c0.33，CHCl3)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.09(3H，s)，0.13(3H，s)，0.49(6H，q，J＝7.8Hz)，0.85(9H，t，J＝7.8Hz)，0.97(9H，s)，0.99(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.11(3H，s)，1.20(3H，d，J＝7.1Hz)，2.00(3H，s)，2.03-2.13(1H，m)，2.35(1H，dd，J＝14.3、3.0Hz)，2.46(1H，dd，J＝14.3、7.8Hz)，2.41-2.50(1H，m)，2.73(3H，s)，2.71-2.90(2H，m)，2.98-3.12(2H，m)，3.99(1H，d，J＝9.2Hz)，4.56(1H，dd，J＝7.7、2.8Hz)，5.33(1H，ddd，J＝15.6、8.9、4.1Hz)，5.82(1H，dd，J＝15.6、8.4Hz)，6.29(1H，s)，6.33-6.40(1H，m)，6.94(1H，m)，7.09(1H，brd，J＝8.4Hz)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-3.2、-3.2、5.5(3C)、7.0(3C)、17.2、18.7、19.3、19.6、20.0、22.3、24.9、26.4(3C)、29.7、32.9、41.9、42.0、48.6、54.0、72.2、73.3、77.0、116.7、120.7、124.5[1J(C，F(xiàn))＝273.3Hz]、127.9、129.7[2J(C，F(xiàn))＝28.0Hz]、131.9[3J(C，F(xiàn))＝6.1Hz]、132.9、136.6、152.1、165.4、170.2、217.4；C39H65F3NO5SSi2的HRMS(ESI)計算值[M+H+]772.4，實驗值772.4?；衔?8(通過酮48的魏悌希反應)將酮48與苯(5mL×2)共沸，然后于高真空下干燥0.5小時。于0℃下經(jīng)5分鐘向魏悌希鹽(1.19g，2.27mmol)的THF(18mL)溶液中滴加t-BuOK(2.2mL溶于THF的1.0M溶液，2.20mmol)。將混合物于0℃下攪拌20分鐘，然后冷卻至-78℃。經(jīng)10分鐘向該混合物中滴加酮(1.06g，1.51mmol)的THF(10mL+2mL沖洗)溶液，并經(jīng)2小時將混合物加熱至-20℃。用飽和NH4Cl(15mL)水溶液使反應停止并用EtOAc(50mL×3)萃取。合并的有機層用鹽水(20mL)洗滌、Na2SO4干燥并濃縮。殘余物通過快速柱層析(SiO2約65g，己烷/Et2O＝30∶1至20∶1)純化，獲得所期望的16(E)-異構(gòu)體58(1.01g，1.11mmol，74％)及不希望的16(Z)-異構(gòu)體58a(154.5mg，0.182mmol，11％)，二者皆為無色油狀物；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.09(3H，s)，0.12(3H，s)，0.15(6H，s)，0.55(6H，q，J＝7.8Hz)，0.87(9H，t，J＝8.0Hz)，0.96(9H，s)，0.97(9H，s)，1.01(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.12(3H，s)，1.20(3H，d，J＝7.1Hz)，2.07-2.16(1H，m)，2.18(3H，d，J＝1.0Hz)，2.38(1H，dd，J＝14.4、3.3Hz)，2.34-2.46(1H，m)，2.49(1H，dd，J＝14.4、7.4Hz)，2.78-2.90(2H，m)，2.97-3.09(2H，m)，3.98(1H，d，J＝8.9Hz)，4.54(1H，dd，J＝7.3、3.3Hz)，4.97(2H，s)，5.33(1H，ddd，J＝15.8、8.6、4.9Hz)，5.63(1H，dd，J＝9.6、2.4Hz)，5.78(1H，dd，J＝15.8、8.2Hz)，6.22-6.27(1H，m)，6.60(1H，s)，7.09(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ-5.3(2C)、-3.4、-3.3、5.5(3C)、7.0(3C)、14.6、17.1、18.4、18.7、19.8、21.3、24.8、25.9(3C)、26.4(3C)、29.6、32.9、42.0、42.1、48.2、54.1、63.4、73.4、76.9、77.8、117.2、121.7、124.3[q，1J(C，F(xiàn))＝273.6Hz]、127.2、130.7[q，2J(C，F(xiàn))＝27.5Hz]、130.8[q，2J(C，F(xiàn))＝6.2Hz]、133.2、136.4、152.6、170.1、172.4、217.1；C45H78F3NO6SSi3Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]924.5，實驗值924.5。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.07(3H，s)，0.13(3H，s)，0.16(6H，s)，0.48(6H，q，J＝7.8Hz)，0.84(9H，t，J＝7.9Hz)，0.97(18H，s)，0.98(3H，s)，1.06(3H，d，J＝7.1Hz)，1.11(3H，s)，1.20(3H，d，J＝7.2Hz)，2.00(3H，s)，2.03-2.11(1H，m)，2.33(1H，dd，J＝14.1、2.8Hz)，2.43(1H，dd，J＝14.0、7.8Hz)，2.40-2.48(1H，m)，2.76-2.89(2H，m)，2.97-3.10(2H，m)，3.99(1H，d，J＝93Hz)，4.57(1H，dd，J＝7.8、2.6Hz)，4.95(1H，d，J＝14.6Hz)，5.00(1H，d，J＝14.6Hz)，5.33(1H，ddd，J＝15.6、9.1、3.8Hz)，5.82(1H，dd，J＝15.6、8.3Hz)，6.30(1H，s)，6.32-6.38(1H，m)，7.04(1H，s)，7.11(1H，dd，J＝11.0，2.3Hz)；C45H78F3NO6SNa的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]924.5，實驗值924.5?；衔?9于0℃下向58(1.04g，2.25mmol)的THF(22mL)溶液中緩慢添加HF·吡啶(11mL)，并于室溫下將混合物攪拌4.3小時。于0℃下經(jīng)10分鐘滴加TMSOMe(75mL)使反應停止。于室溫下將該混合物劇烈攪拌4.2小時。于高真空下濃縮干燥1小時后，殘余物通過快速柱層析(SiO2約25g，己烷/EtOAc＝3∶4至1∶2)純化，獲得無色固體59(615.7mg，1.00mmol，96％)；[α]D25-57.7(c1.20，CHCl3)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.04(3H，s)，1.12(3H，d，J＝6.9Hz)，1.25(3H，d，J＝6.8Hz)，1.36(3H，s)，1.90(1H，d，J＝6.6Hz，OH)，2.08(3H，s)，2.23-2.32(1H，m)，2.34(1H，dd，J＝15.7、2.4Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.7、10.1Hz)，2.59-2.69(2H，m)，2.95-3.01(2H，m)，3.04(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.72(1H，td，J＝7.0、3.0Hz)，3.78(1H，d，J＝5.7Hz，OH)，4.38(1H，ddd，J＝10.1、5.7、2.4Hz)，4.90(2H，d，J＝6.1Hz)，5.10(1H，t，J＝6.1Hz，OH)，5.44(1H，t，7＝4.7Hz)，5.60(1H，dd，J＝15.9、4.4Hz)，5.66(1H，dd，J＝15.9、5.0Hz)，6.28(1H，t，J＝6.7Hz)，6.73(1H，s)，7.16(1H，s)；C27H37F3NO6SNa的LRMS(ESI)計算值[M+H+]560.2，實驗值560.1?；衔?9及50將28(12.2mg，24.9μmol)的CH2Cl2(1.25mL)溶液冷卻至-78℃，并用DMDO(-78℃，0.06M溶于丙酮中，914μL，54.8μmol)的冷溶液處理。將混合物加熱至-50℃并于-50℃下攪拌2.7小時。通過在-50℃下添加二甲硫醚(117μL)使過量DMDO停止反應，并在該溫度下將混合物攪拌0.5小時。在真空中去除溶劑。通過制備型薄層層析(己烷/EtOAc＝1/2)純化，獲得β-環(huán)氧化物49(3.0mg，5.93μmol，24％)及α-環(huán)氧化物50(7.9mg，15.6μmol，63％)，二者皆為無色固體?；衔?91HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.03(3H，s)，1.11(3H，d，J＝7.0Hz)，1.14(3H，d，J＝6.9Hz)，1.34(3H，s)，1.36(3H，s)，2.00(1H，ddd，J＝15.1、7.3、4.0Hz)，2.14(1H，dt，J＝15.1、5.2Hz)，2.14(3H，s)，2.21(1H，dd，J＝14.6、8.0Hz)，2.33(1H，dd，J＝14.7、4.8Hz)，2.47(1H，dd，J＝13.8、3.3Hz)，2.59(1H，dd，J＝13.8、9.4Hz)，2.73(3H，s)，2.77(1H，brs，OH)，2.93(1H，dd，J＝7.3、4.8Hz)，3.34(1H，qd，J＝6.9、3.7Hz)，3.75-3.82(1H，m)，4.12-4.24(2H，m，包括OH)，5.54(1H，ddd，J＝15.7、7.4、5.0Hz)，5.54-5.60(1H，m)，5.64(1H，dd，J＝15.7、5.6Hz)，6.94(1H，s)，7.01(1H，s)；C27H40NO6S的LRMS(ESI)計算值[M+H+]506.3，實驗值506.3?；衔?01HHMR(400MHz，CDCl3)δ1.00(3H，s)，1.04(3H，d，J＝6.9Hz)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.35(3H，s)，1.35(3H，s)，1.87(1H，dt，J＝15.0、9.2Hz)，2.03(1H，dd，J＝13.9、9.2Hz)，2.13(3H，s)，2.13-2.19(1H，m)，2.36(1H，dd，J＝13.9、3.4Hz)，2.39(1H，dd，J＝12.2、2.1Hz)，2.42-2.51(1H，m)，2.49(1H，dd，J＝12.4、10.9Hz)，2.69(1H，d，J＝2.7Hz)，2.72(3H，s)，3.06(1H，dd，J＝9.7、3.1Hz)，3.54(1H，qd，J＝7.0、2.0Hz)，3.76-3.80(1H，m)，4.07-4.14(1H，m)，4.31(1H，d，J＝4.1Hz)，5.52(1H，dd，J＝15.5、8.7Hz)，5.60(1H，ddd，J＝15.1、9.4、3.4Hz)，5.71(1H，d，J＝8.4Hz)，6.63(1H，s)，6.99(1H，s)；C27H39NO6SNa的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]528.2，實驗值528.2?；衔?2于50℃下向50(1.7mg，3.4μmol)及TrisNHNH2(40.1mg，0.134mmol)溶于ClCH2CH2Cl(0.8mL)的溶液中添加Et3N(18.7μL，0.134mmol)。通過HPTLC(己烷/EtOAc＝1/2)監(jiān)測該反應。攪拌4小時后，將混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋并通過硅膠墊過濾，硅膠墊用EtOAc沖洗。濃縮后，殘余物通過制備型TLC(己烷/EtOAc＝1/2)純化，獲得白色固體52(1.2mg，2.4μmol，70％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.95(3H，d，J＝7.1Hz)，1.04(3H，s)，1.11(3H，d，J＝7.0Hz)，1.28(3H，s)，1.37(3H，s)，1.35-1.44(1H，m)，1.45-1.59(4H，m)，1.71-1.82(2H，m)，1.86(1H，dt，J＝15.3、9.5Hz)，2.10(1H，dd，J＝15.3、3.6Hz)，2.13(3H，s)，2.40(1H，dd，J＝12.5、2.5Hz)，2.49(1H，dd，J＝12.5、11.0Hz)，2.74(3H，s)，2.80(1H，brs，OH)，3.07(1H，dd，J＝10.3、3.3Hz)，3.34(1H，qd，J＝7.0、1.0Hz)，3.89(1H，brs，OH)，4.03-4.09(1H，m)，4.12-4.17(1H，m)，5.69(1H，d，J＝9.1Hz)，6.63(1H，s)，7.00(1H，s)；C27H41NO6SNa的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]530.3，實驗值530.2?；衔?1于50℃下向49(0.7mg，1.38μmol)及TrisNHNH2(20.6mg，69μmol)于ClCH2CH2Cl(0.4mL)的溶液中添加Et3N(9.6μL，69μmol)。由HPTLC(己烷/EtOAc＝1/2)監(jiān)測該反應。攪拌6小時后，將混合物冷卻至室溫，用EtOAc稀釋并通過硅膠墊過濾，硅膠墊用EtOAc沖洗。濃縮后，殘余物通過制備型TLC(己烷/EtOAc＝1/2)純化，獲得白色固體51(0.5mg，0.985μmol，71％)。51的光譜數(shù)據(jù)與所報導的EpoB的數(shù)據(jù)相同。實例2用于合成埃坡霉素中間體的替代合成方法以下實例提供制備在埃坡霉素類似物的合成中的各種中間體的方法。9，10-去氫埃坡霉素合成的優(yōu)化實例1實例3Noyori還原實例4關鍵二酮的替代合成實例5方法1.甲硅烷基遷移-脫羧反應方法2.脫羧-納入甲硅烷基實例6Evans輔助方法合成2-羥基酮實例7Kowalsky-Sharpless方法合成2-羥基酮試驗碳酸l-(2-芐氧基-l-甲基乙基)-5，5-二異丙氧基-2，4，4-三甲基-3-氧代戊基酯2，2，2-三氯乙酯(32a)于0℃下向7-芐氧基-5-羥基-1，1-二異丙氧基-2，2，4，6-四甲基-庚-3-酮32(1.0g，2.4mmol)與吡啶(0.8mL，7.3mmol)溶于CH2Cl2(10.0mL)的溶液中添加氯甲酸2，2，2-三氯乙酯(668.0μL，4.9mmol)，然后將混合物加熱至室溫。1小時后，用鹽水使反應混合物停止反應，然后用CH2Cl2萃取。合并的有機層用MgSO4干燥并于減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過快速層析(梯度∶己烷至己烷/EtOAc93∶7)純化，獲得澄清油狀物32a(1.285g，92％)1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.03-1.09(m，12H)，1.15(d，J＝1.8Hz，3H)，1.17(d，J＝1.9Hz，3H)，1.19-1.21(m，6H)，1.97-2.11(m，1H)，3.2(dd，J＝6.2及9.0Hz，1H)，3.54(dd，J＝4.8及9.1Hz，1H)，3.57-3.60(m，1H)，3.82(qd，J＝3.6及5.9Hz，2H)，4.47(s，2H)，4.57(s，1H)，4.72(d，J＝11.9Hz，1H)，4.81(d，J＝11.9Hz，1H)，5.08(t，J＝6.0Hz，1H)，7.29-7.35(m，5H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ11.9、15.0、18.8、21.4、21.7、22.3、23.2、23.4、35.7、42.5、53.4、53.9、69.4、70.9、71.4、73.3、81.3、94.7、103.4、127.5、127.6、128.2、138.2、154.0、215.6；IR(薄膜，NaCl，cm-1)2966、1760、1698、1247；C27H41O7Cl3Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]605.2，實驗值605.2；[α]23D＝-20.4(c＝1.0，CHCl3。碳酸l-(2-芐氧基-l-甲基乙基)-2，4，4-三甲基-3，5-二氧代戊基酯2，2，2-三氯乙酯(67)向32a(1.28g，2.25mmol)于4∶1的THF/H2O(25mL)溶液中添加p-TsOH(111.0mg，0.6mmol)。于70℃下加熱5小時后，將反應混合物傾倒至冷(0℃)飽和NaHCO3水溶液(12mL)中，然后用EtOAc萃取。合并的有機層用鹽水洗滌、MgSO4干燥并于減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過快速層析(梯度∶己烷至己烷/BtOAc84∶16)純化，獲得清澈油狀物67(793.2mg，76％)1HNMR(400MHz，CDCl3)□0.90(d，J＝5.8Hz，3H)，1.0(d，J＝6.9Hz，3H)，1.24(s，6H)，1.97-2.04(m，1H)，3.24(dd，J＝4.8及9.2Hz，1H)，3.34(m，1H)，3.42(dd，J＝5.8及9.2Hz，1H)，4.35(d，J＝11.9Hz，1H)，4.39(d，J＝11.9Hz，1H)，4.64(d，J＝11.9Hz，1H)，4.69(d，J＝11.9Hz，1H)，4.96(t，J＝6.0Hz，1H)，7.19-7.28(m，5H)，9.49(s，1H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)-12.0、14.8、19.5、19.6、35.4、43.3、60.9、71.1、73.3、80.37、94.5、127.7、127.8、128.3、137.9、154.1、201.0、210.1；IR(薄膜，NaCl，cm-1)2973、2880、1758、1701、1453、1380、1248；C21H27O6Cl3Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]503，0，實驗值503.0；[α]23D＝-18.5(c＝0.8，CHCl3)。9-芐氧基-4，4，6，8-四甲基-3，5-二氧代-7-(2，2，2-三氯乙氧基甲酰氧基)-壬酸特丁基酯(69)于-78℃下向LDA(1.17mmol，0.3M于Et2O中)的溶液中添加醋酸特丁基酯(1.0mmol，135.0μL)。30分鐘后，經(jīng)15分鐘緩慢添加67(464.0mg，1mmol)于Et2O(2mL)的溶液。攪拌1小時后，用飽和NH4Cl水溶液使反應停止，然后用EtOAc萃取。合并的有機層用鹽水洗滌、MgSO4干燥并于減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過快速層析(梯度∶己烷至己烷/EtOAc86∶14)純化，獲得清澈油狀68(1∶1的差向異構(gòu)體混合物，461.4mg，80％)1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.87(d，J＝5.3Hz，3H)，0.89(d，J＝5.5Hz，3H)，1.02-1.10(m，18H)，1.38(s，18H)，1.97-2.2(m，2H)，2.27-2.31(m，2H)，3.22-3.27(m，3H)，3.39-3.48(m，5H)，4.03-4.06(m，1H)，4.11-4.14(m，1H)，4.38-4.45(m，4H)，4.58-4.73(m，4H)，4.97(t，J＝5.8Hz，1H)，5.02(t，J＝5.8Hz，1H)，7.18-7.27(m，10H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ11.9、12.7、14.9、15.2、18.7、19.3、21.4、21.6、28.0、35.6、37.4、41.7、42.0、51.8、51.9、71.3、71.3、72.5、73.0、73.3、73.3、80.6、81.2、81.3、94.6、127.5、127.7、127.8、128.3、138.0、138.1、154.0、154.1、172.3、172.4、216.0、216.3；IR(薄膜，NaCl，cm-1)3509、2975、1759、1707、1368、1248、1152；C27H39O8Cl3Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]619.1，實驗值619.2。向68(350.0mg，0.6mmol)于CH2Cl2(10mL)的0℃溶液中添加Dess-Martinperiodinane(398.0mg，0.9mmol)。于室溫下將混合物攪拌1小時，然后傾倒至充分攪拌的1∶1的飽和Na2S2O2/飽和NaHCO3的混合物中。30分鐘后分層，水層用Et2O萃取三次，合并的有機萃取物用飽和NaHCO3、鹽水洗滌、MgSO4干燥并于真空下濃縮。粗產(chǎn)物通過快速層析(梯度∶己烷至己烷/EtOAc91∶9)純化，獲得澄清油狀物69(258.4mg，74％)1HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.80(d，J＝6.9Hz，3H)，0.87(d，J＝6.9Hz，3H)，1.13(s，3H)，1.19(s，3H)，1.23(s，9H)，2.04-2.12(m，1H)，3.09-3.28(m，5H)，4.23(s，2H)，4.48(d，J＝11.9Hz，1H)，4.55(d，J＝11.9Hz，1H)，4.79(dd，J＝4.6及7.3Hz，1H)，7.04-7.13(m，5H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ11.7、14.6、20.7、21.5、27.9、35.5、42.2、43.4、63.3、71.3、73.3、79.9、81.5、90.5、94.5、127.6、127.7、128.2、138.0、154.0、166.2、202.9、210.0；IR(薄膜，NaCl，cm-1)2977、1758、1697、1368、1248、1154；C27H37O8Cl3Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]617.1，實驗值617.1；[α]23D＝-49.1(c＝0.9，CHCl3。9-芐氧基-3-羥基-4，4，6，8-四甲基-5-氧代-7-(2，2，2-三氯乙氧基甲酰氧基)-壬酸特丁基酯(70)向一彈形高壓容器(bombliner)加入(R)-RuBINAP催化劑(16.8mg，10.0μmol)，于其中添加HCl(555μL，0.2N于MeOH中)，然后將混合物超聲波處理15秒。然后添加69(59.4mg，0.1mmol)于MeOH(555μL)中的溶液，然后將該混合物轉(zhuǎn)移至一Parr裝置。該容器用H2吹掃5分鐘，然后加壓至1200psi。17小時后，反應物恢復至大氣壓并傾倒至飽和NaHCO3水溶液中。水層用EtOAc萃取三次。合并的有機萃取物用MgSO4干燥并于減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過快速層析(梯度∶己烷至己烷/EtOAc88∶12)純化，獲得清澈油狀物70(通過1HNMR分析判斷dr＞20∶1)(47.6mg，80％)1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.06(d，J＝6.9Hz，3H)，1.11(d，J＝6.8Hz，3H)，1.14(s，3H)，1.18(s，3H)，1.47(s，9H)，2.05-2.12(m，1H)，2.35-2.40(m，1H)，3.31-3.37(m，2H)，3.51-3.54(m，2H)，4.11-4.14(m，1H)，4.46(s，2H)，4.72(d，J＝11.9Hz，1H)，4.80(d，J＝11.9Hz，1H)，5.05(dd，J＝5.0及6.7Hz，1H)，727-7.35(m，5H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ12.0、15.0、19.3、21.7、28.0、35.6、37.5、41.7、51.8、71.3、73.0、73.3、80.6、81.3、94.7、127.5、127.7、128.3、138.2、154.1、172.4、216；IR(薄膜，NaCl，cm-1)3849、2974、2879、1758、1701、1454、1368、1248、1152、926、734；C27H39O8Cl3Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]619.1，實驗值619.2；[α]23D＝-13.0(c＝0.4，ooCHCl3)。9-芐氧基-4，4，6，8-四甲基-5-氧代-7-(2，2，2-三氯乙氧基甲酰氧基)-3-(三乙基硅烷氧基)-壬酸特丁基酯(71)于0℃下向70(37.6mg，6.3μmol)與咪唑(9.4mg，13.8pmol)于DMF(0.4mL)的溶液中添加TESC1(11.6μL，69.3μmol)。3小時后，混合物用飽和NaHCO3水溶液稀釋。水層用己烷萃取三次。合并的有機萃取物用鹽水洗滌、MgSO4干燥并于減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過快速層析(梯度∶己烷至己烷/EtOAc93∶7)純化，根據(jù)洗脫順序獲得71(22.9mg，51％)，并回收清澈油狀物70(12.9mg，34％)。71HNMR(400MHz，CDCl3)δ0.66(q，J＝7.9Hz，6H)，0.96(t，J＝7.9Hz，9H)，1.01(s，3H)，1.05(d，J＝5.2Hz，3H)，1.07(d，J＝5.3Hz，3H)，1.35(s，3H)，1.44(s，9H)，2.05-2.11(m，2H)，2.50(dd，J＝3.5及17.2Hz，1H)，3.35(dd，J＝5.9及9.0Hz，1H)，3.49(dd，J＝4.0及9.0Hz，1H)，3.53(dd，J＝3.8及6.7Hz，1H)，4.18(dd，J＝3.5及6.5Hz，1H)，4.45(s，2H)，4.65(d，J＝11.9Hz，1H)，4.79(d，J＝11.9Hz，1H)，4.97(dd，J＝3.7及8.1Hz，1H)，7.29-7.52(m，5H)；13CNMR(125MHz，CDCl3)δ5.3、7.3、10.9、14.9、21.3、22.6、28.4、35.9、41.1、42.7、53.7、71.9、73.7、75.7、80.1、80.9、95.1、127.9、128.0、128.7、138.6、154.3、171.7、215.7；IR(薄膜，NaCl，cm-1)2956、2876、1732、1694、1456、1366、1257、1154、1098、988、835、774、741；C33H53O8SiCl3Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]733.2，實驗值733.3。[α]23D＝-16.1(c＝0.1，CHCl3)。9-芐氧基-3-(二乙基甲基硅烷氧基)-7-羥基-4，4，6，8-四甲基-5-氧代-壬酸特丁基酯(71a)向71(22.9mg，3.2μmol)于1∶1的THF/AcOH(1.4mL)的溶液中添加Zn(5.0mg，7.8μmol，納米級)。將混合物超聲波處理15分鐘。再次添加Zn(5.0mg，7.8μmol，納米級)，隨后再超聲波處理15分鐘。懸浮液用硅藻土墊過濾，硅藻土墊用EtOAc洗滌數(shù)次。濾液用飽和NaHCO3、鹽水洗滌、MgSO4干燥并于真空下濃縮。粗殘余物通過一短硅膠塞用4∶1的己烷/EtOAc洗脫，獲得17.1mg(99％產(chǎn)率)無色油狀71a1HNMR(400MHz，CDCl3)δ(m，6H)，0.96(t，J＝7.9Hz，9H)，0.97(d，J＝6.8Hz，3H)，1.05(d，J＝6.8Hz，3H)，1.11(s，3H)，1.26(s，3H)，1.44(s，9H)，1.84-1.90(m，1H)，2.21(dd，J＝6.7及17.0Hz，1H)，2.36(dd，J＝6.7及17.0Hz，1H)，3.24-3.29(m，1H)，3.44-3.52(m，2H)，3.67(dd，J＝3.9及8.9Hz，1H)，4.36(dd，J＝3.5及6.5Hz，1H)，4.50(d，J＝12.0Hz，1H)，4.54(d，J＝12.0Hz，1H)，7.32-7.36(m，5H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ5.0、6.9、9.7、13.9、20.2、21.8、28.0、36.3、40.8、41.5、53.7、72.5、72.9、73.2、73.6、80.7、127.4、127.5、128.2、138.6、171.0、221.4；IR(薄膜，NaCl，cm-1)3502、2959、2875、1731、1683、1456、1366、1154、1098、996、739；C30H52O6SiCl3Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]559.3，實驗值559.3；[α]23D＝-41.0(c＝0.4，CHCl3)。9-芐氧基-7-(特-丁基二甲基硅烷氧基)-3-(二乙基甲基硅烷氧基)-4，4，6，8-四甲基-5-氧代-壬酸特丁基酯(36)于-78℃下向71a(4.1mg，7.6μmol)與2，6-二甲基吡啶(10.0μL，43.5mmol)于CH2Cl2(0.2mL)的溶液中添加TBSOTf(10.0μL，85.8mmol)。2小時后，再次添加2，6-二甲基吡啶(10.0μL，43.5mmol)及TBSOTf(10.0μL，85.8mmol)。6小時后，混合物用飽和NaHCO3水溶液稀釋。水層用EtOAc萃取三次。合并的有機萃取物用鹽水洗滌、MgSO4干燥并于減壓下濃縮。粗產(chǎn)物通過快速層析(梯度∶己烷至己烷/EtOAc91∶9)純化，獲得清澈油狀物36(5.4mg，82％)。光譜數(shù)據(jù)與所報導的值一致。醇83.于室溫下向4，4，4-三氟乙酰醋酸乙酯(24.0mL，0.164mol)于THF-水(3∶1＝V∶V，320mL)的溶液中添加烯丙基溴(20.0mL，1.4當量)及銦(粉末，-100網(wǎng)目，25g，1.3當量)，并將所得混合物于48℃下攪拌15小時。將反應混合物冷卻至室溫，用2NHCl(400mL)水溶液使反應停止并用CH2Cl2(400mL，2×200mL)萃取。將合并的有機物干燥(MgSO4)、過濾并于真空中濃縮?？焖賹游?己烷-＞己烷-乙醚為10∶1-＞8∶1-＞6∶1-＞4∶1)獲得清澈油狀醇83(31.64g，85％產(chǎn)率)IR(薄膜)3426(brm)，2986(m)，1713(s)，1377(m)，1345(m)，1301(m)，1232(m)，1173(s)，1095(m)，1023(m)，927(m)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ5.82(m，1H)，5.15(m，3H)，4.17(m，2H)，2.59(m，1H)，2.58(d，J＝3.4Hz，2H)，2.29(dd，J＝14.2、8.6Hz，1H)，1.24(t，J＝7.2Hz，3H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ172.08、130.89、125.65(q，J＝280Hz)、120.27、73，79(q，J＝28Hz)、61.55、38.97、35.65、13.82；高分辨率質(zhì)譜m/z227.0895[(M+H)+；C9H14O3F3的計算值227.0895]。酯84.將醇83(16.71g，0.07386mol)與吡啶(15.0mL，2.5當量)的混合物冷卻至-10℃，并經(jīng)11分鐘用亞硫酰氯(11.3mL，2.1當量)緩慢處理。將所得混合物加熱至55℃并攪拌12小時。將反應混合物冷卻至-5℃，用水(200mL)使反應停止并用CH2Cl2(2×200mL，2×150mL)萃取。合并的有機物用飽和NaHCO3(2×200mL)及鹽水(200mL)洗滌、干燥(MgSO4)并在真空中濃縮?？焖賹游?戊烷∶乙醚為15∶1)獲得黃色油狀酯84(11.90g，77％產(chǎn)率)IR(薄膜)2986(w)，1731(s)，1308(s)，1265(w)，1227(m)，1197(s)，1133(s)，1025(m)，920(w)，896(w)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.36(s，1H)，5.79(ddt，J＝16.9、10.2、6.6Hz，1H)，5.15(dd，J＝17.1、1.5Hz，1H)，5.08(dd，J＝10.0、1.4Hz，1H)，4.22(q，J＝7.1Hz，2H)，3.44(d，J＝6.5Hz，2H)，1.29(t，7＝7.1Hz，3H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ164.22、143.37(q，J＝29Hz)、132.71、12321(q，J＝274Hz)、122.60(q，J＝6Hz)、117.32、60.85、30.54、13.85；高分辨率質(zhì)譜m/z209.0788[(M+H)+；C9H12O2F3的計算值209.0789]。醇85.向酯84(7.12g，0.0342mol)于CH2Cl2(120mL)的冷(-75℃)溶液中添加DIBAL-H(75mL，2.2當量)于CH2Cl2(1.0M)的溶液，并將所得混合物經(jīng)3小時加熱至室溫。將反應混合物冷卻至0℃，用飽和NH4Cl(12mL)使反應停止并于室溫下攪拌20分鐘。反應混合物用乙醚(200mL)稀釋、干燥(MgSO4)并于真空中濃縮?？焖賹游?戊烷∶乙醚為3∶1-＞1∶1)獲得清澈油狀醇85(5.68g，99％)IR(薄膜)3331(brs)，2929(m)，1642(m)，1445(m)，1417(w)，1348(s)，1316(s)，1217(s)，1175(s)，1119(s)，1045(m)，985(s)，921(m)，831(w)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.33(td，J＝6.1、1.6Hz，1H)，5.75(ddt，J＝17.2、10.0、6.2Hz，1H)，5.07(m，2H)，4.29(ddd，J＝6.3、4.3、2.1Hz，2H)，2.95(d，J＝6.2Hz，2H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ134.45(q，J＝6Hz)，133.38，127.97(q，J＝29Hz)，123.76(q，J＝271Hz)，116.25，57.87，29.79。碘化物86.醇85(5.97g，0.0358mol)于CH2Cl2(50mL)的冷(0℃)溶液用PPh3(11.17g，1.2當量)、咪唑(3.55g，1.5當量)及I2(9.10g，1.1當量)處理，并將所得混合物于0℃下攪拌10分鐘。反應混合物用飽和Na2S2O3-飽和NaHCO3(1∶1＝V∶V，200mL)來停止反應并用戊烷(3×200mL)萃取。合并的有機物用飽和Na2S2O3-飽和NaHCO3(1∶1＝V∶V，200mL)及鹽水(100mL)洗滌、干燥(MgSO4)并在真空中濃縮?？焖賹游?戊烷)獲得淺紅色油狀碘化物86(6.69g，68％)(IRI薄膜)3083(w)，2982(w)，1636(w)，1558(w)，1456(w)，1367(w)，1317(s)，1216(m)，1181(s)，1151(s)，1120(s)，989(m)，921(m)，896(m)cm-1;1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.45(td，J＝8.9、1.5Hz，1H)，5.79(ddt，J＝16.8、10.3、6.2Hz，1H)，5.12(m，2H)，3.85(ddd，J＝8.9、2.9、1.4Hz，2H)，3.00(dt，7＝6.1、1.4Hz，2H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ132.42，131.64(q，J＝6Hz)，129.63(q，J＝29Hz)，123.64(q，J＝272Hz)，117.00，29.32，-4.27；低分辨率質(zhì)譜m/z298.7[(M+Na)+；C7H8F3INa的計算值299.0]。α-羥基噁唑烷酮88.經(jīng)51分鐘向TES保護的4-芐基-3-羥基乙?；?噁唑烷-2-酮7(16.28g，1.92當量)于THF(160mL)的冷(-78℃)溶液中滴加LHMDS(42.0mL，1.73當量)于THF(1.0M)中的溶液，并將所得混合物于-78℃下攪拌35分鐘。反應混合物用碘化物86(6.69g，24.2mmol)的THF(10mL)溶液處理并將所得混合物緩慢加熱至室溫過夜。反應混合物用飽和NaHCO3(200mL)來停止反應并用EtOAc(3×200mL)萃取。合并的有機物用飽和NH4Cl(150mL)、鹽水(150mL)洗滌，干燥(MgSO4)，并在真空中濃縮?？焖賹游?己烷-EtOAc為6∶1-＞3∶1)獲得一烷基化產(chǎn)物的混合物(13.6g)，其不經(jīng)進一步純化即可用于下一反應。將該些烷基化產(chǎn)物于HOAc-水-THF(3∶1∶1＝V∶V∶V，200mL)中的溶液于室溫下攪拌4小時。將反應混合物在真空中濃縮以去除HOAc，用飽和NaHCO3(400mL)使反應停止并用EtOAc(3×200mL)萃取。將合并的有機物干燥(MgSO4)并在真空中濃縮。快速層析(己烷∶EtOAc為3∶1-＞2∶1)獲得清澈油狀α-羥基噁唑烷酮88(7.55g，兩步的產(chǎn)率81％)[α]D25-48.2(c1.08，CHCl3)；IR(薄膜)3486(brs)，3030(m)，2983(s)，2925(m)，1790(s)，1682(s)，1481(m)，1393(m)，1360(m)，1217(m)，1171(m)，1113(m)，992(m)，919(m)，847(w)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.32(m，3H)，7.17(m，2H)，6.33(td，J＝7.2、1.5Hz，1H)，5.77(ddt，J＝16.6、10.1、6.2Hz，1H)，5.08(m，3H)，4.74(ddt，J＝4.8、3.7、4.4Hz，1H)，4.33(dd，J＝8.6、8.6Hz，1H)，4.26(dd，J＝9.2、3.4Hz，1H)，3.42(brd，J＝6.4Hz，1H)，3.24(dd，J＝13.5、3.4Hz，1H)，2.99(m，2H)，2.79(dd，J＝13.5、9.4Hz，1H)，2.70(m，1H)，2.50(m，1H)；13CNMR(125MHz，CDCl3)δ173.93、153.05、134.43、133.64、129.98(q，J＝6Hz)、129.82(q，J＝28Hz)、129.29、120.01、127.58、124.00(q，J＝272Hz)、116.34、69.60、67.31、54.95、37.78、32.29、29.84；高分辨率質(zhì)譜m/z384.1421[(M+H)+；C19H21NO4F3的計算值384.1423]。α-羥基酰胺89.下向(MeO)NHMe·HCl(10.1g，5.25當量)于THF(100mL)中的0℃溶液中滴加AlMe3(50mL，5.1當量)的甲苯(2.0M)溶液來處理，并于室溫下將所得清澈溶液攪拌34分鐘，然后添加至α-羥基噁唑烷酮88(7.55g，19.7mmol)于THF(70mL)中的冷(0℃)溶液中。將所得混合物加熱至室溫并攪拌12小時。將反應混合物冷卻至0℃，通過緩慢添加1N酒石酸(100mL)水溶液來使反應停止，于室溫下攪拌25分鐘，并用EtOAc(3×200mL)萃取。將合并的有機物干燥(MgSO4)，并在真空中濃縮?？焖賹游?己烷∶EtOAc為2∶1-＞1∶1)獲得清澈油狀α-羥基酰胺89(5.12g，97％產(chǎn)率)[α]D25-57.2(c1.03，CHCl3)；IR(薄膜)3432(brs)，3084(w)，2980(m)，2943(m)，1652(s)，1464(m)，1373(m)，1318(m)，1214(m)，1171(m)，1112(m)，991(m)，919(m)，818(w)cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ6.32(td，J＝7.3、1.5Hz，1H)，5.74(ddt，J＝16.9、10.3、6.1Hz，1H)，5.05(m，2H)，4.43(dd，J＝7.6、3.5Hz，1H)，3.70(s，3H)，3.35(brs，1H)，3.24(s，3H)，2.94(d，J＝6.1Hz，2H)，2.59(m，1H)，2.36(m，1H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ173.43，133.68，13059(q，J＝6Hz)，129.25(q，J＝28Hz)，124.05(q，J＝271Hz)，116.17，67.57，61.44，32.56，32.38，29.75；高分辨率質(zhì)譜m/z268.1161[(M+H)+；C11H17NO3F3的計算值268.1161]。α-羥基酮90.向α-羥基酰胺89(4.87g，18.2mmol)于THF(150mL)的冷(0℃)溶液中添加MeMgBr(75mL，12當量)的乙醚(3.0M)溶液。5分鐘后，將反應混合物用飽和NH4Cl(250mL)停止反應，并用EtOAc(5×200mL)萃取。將合并的有機物干燥(MgSO4)，并在真空中濃縮。快速層析(己烷∶EtOAc為4∶1-＞2∶1-＞1∶2)獲得清澈油狀α-羥基酮90(2.16g，53％產(chǎn)率，以所回收的起始材料計為73％)及起始材料α-羥基酰胺89(1.30g，27％產(chǎn)率)[α]D25+58.5(c1.30，CHCl3)；IR(薄膜)3460(brs)，3085(w)，2984(m)，2926(m)，1716(s)，1679(m)，1641(m)，1417(m)，1361(m)，1319(s)，1247(m)，1216(s)，1172(s)，1113(s)，1020(m)，994(m)，968(w)，919(m)cm-1；1HNMR(500MHz，CDCl3)δ6.21(t，J＝7.0Hz，1H)，5.75(ddt，J＝16.7、10.4、6.2Hz，1H)，5.07(m，2H)，4.26(dt，J＝7.1，4.5Hz，1H)，3.51(d，J＝4.7Hz，1H)，2.96(d，J＝6.1Hz，2H)，2.66(m，1H)，2.42(m，1H)，2.19(s，3H)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ208.53、133.43、129.80(q，J＝28Hz)、129.76(q，J＝6Hz)、123.85(q，J＝271Hz)、116.32、75.36、31.22、29.81、25.11；高分辨率質(zhì)譜m/z223.0945[(M+H)+；C10H14NO2F3的計算值223.0946]。實例8催化不對稱氧化方法實例9合成21-氨基-26-三氟-(E)-9，10-去氫-dEpoB化合物98于0℃下向59(50.4mg，90.1μmol)于THF(1mL)的溶液中添加(PhO)2PON3(27.2μL，126μmol)。于0℃下攪拌5分鐘后，添加DBU(16.2μL，108μmol)。于0℃下攪拌2小時后，將混合物于室溫下攪拌20.5小時。反應混合物用EtOAc稀釋并添加水(2mL)來停止反應。分層后，水層用EtOAc萃取(三次)，并將合并的有機層用Na2SO4干燥。濃縮后，殘余物在高真空下干燥10分鐘以去除DBU。通過快速柱層析(SiO2，己烷/EtOAc＝3∶2)純化，獲得無色固體疊氮化物98(45.6mg，78.0μmol，87％)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.23(3H，d，J＝6.8Hz)，1.33(3H，s)，2.01(1H，d，J＝5.5Hz，OH)，2.17(3H，s)，2.25-2.35(1H，m)，2.41(1H，dd，J＝15.5、3.2Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.5、9.5Hz)，2.54-2.60(1H，m)，2.66(1H，d，J＝6.0Hz)，2.65-2.76(1H，m)，2.96(1H，dd，J＝16.0、4.2Hz)，3.03(1H，dd，J＝16.1、6.7Hz)，3.11(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.71-3.76(1H，m)，4.31(1H，ddd，J＝9.2、5.9、3.2Hz)，4.65(2H，s)，5.43(1H，dd，J＝6.0、4.3Hz)，5.58(1H，ddd，J＝15.8、6.4、4.6Hz)，5.66(1H，dd，J＝15.8、6.1Hz)，6.23(1H，t，J＝7.3Hz)，6.63(1H，3)，7.18(1H，s)；C27H35F3N4O5SNa的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]607.2，實驗值607.2?；衔?6向疊氮化物98(21.0mg，35.9μmol)的THF(0.6mL)溶液中添加PMe3(1.0M于THF中，43.1μL，43.1μmol)。于室溫下攪拌2分鐘后，添加水(0.1mL)并將混合物于室溫下攪拌3小時。添加PMe3(1.0M于THF中，7.2μL，7.2μmol)并將混合物于室溫下攪拌1.5小時。向該混合物中添加28％的NH4OH(水溶液)(54.5μL)。攪拌1小時后，混合物直接通過制備型TLC(CH2Cl2/MeOH＝100∶7.5)純化，獲得無色固體狀胺96(15.9mg，28.5μmol，79％)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.23(3H，d，J＝6.8Hz)，1.34(3H，s)，2.12(3H，d，J＝0.7Hz)，2.24-2.35(1H，m)，2.39(1H，dd，J＝15.4、3.0Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.4、9.8Hz)，2.54-2.63(1H，m)，2.66-2.76(1H，m)，2.97(1H，dd，J＝16.2、4.2Hz)，3.03(1H，dd，J＝16.3、6.5Hz)，3.10(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.74(1H，dd，J＝6.7、3.5Hz)，4.18(2H，s)，4.34(1H，dd，J＝9.8、2.9Hz)，5.43(1H，dd，J＝6.0、4.3Hz)，5.55-5.64(1H，m)，5.67(1H，dd，J＝15.9，5.8Hz)，6.24(1H，brt，J＝7.3Hz)，6.66(1H，s)，7.10(1H，s)；C27H38F3N2O5S的LRMS(ESI)計算值[M+H+]559.2，實驗值559.2?；衔?7向胺96(15.9mg，28.5μmol)的CH3CN(0.78mL)溶液中添加37％的HCHO(水溶液)(31.4μL，0.143mmol)，隨后添加NaBH3CN(1.0M于THF中，85.5μL，85.5μmol)，并將混合物于室溫下攪拌20分鐘。添加AcOH(1滴)，并將混合物于室溫下攪拌40分鐘。混合物直接通過制備型TLC(CH2Cl2/MeOH＝100∶8)純化，獲得無色固體狀產(chǎn)物97(15.6mg，26.6μmol，93％)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝6.9Hz)，1.23(3H，d，J＝6.8Hz)，1.33(3H，s)，2.17(3H，s)，2.24-2.35(1H，m)，2.43(1H，dd，J＝15.7、3,6Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.6、9.1Hz)，2.55-2.64(2H，m，包括OH)，2.68-2.77(1H，m)，2.80(3H，s)，2.81(3H，s)，2.92-3.06(2H，m)，3.10(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.69-3.76(1H，m)，4.25-4.34(1H，m)，4.33(2H，s)，5.42(1H，t，J＝5.5Hz)，5.57(1H，dt，J＝15.8，6.3Hz)，5.66(1H，dd，J＝15.7、6.4Hz)，6.22(1H，brt，J＝7.2Hz)，6.64(1H，s)，7.30(1H，s)；C29H42F3N2O5S的LRMS(ESI)計算值[M+H+]580.2，實驗值580.2?；衔?4及95于0℃下向59(18.9mg，33.8mol)與Et3N(18.8μL，0.135mmol)于CH2Cl2(1mL)的溶液中添加TsCl(12.9mg，67.5μmol)及DMAP(2.1mg，16.9μmol)。于室溫下攪拌1.5小時后，混合物用EtOAc稀釋并用硅膠墊過濾(EtOAc沖洗)。濃縮后，殘余物通過制備型TLC(己烷/EtOAc＝1∶1)純化，獲得甲苯磺酸酯94(8.5mg，11.9μmol，35％)及氯化物95(4.3mg，7.44μmol，22％)；二者皆為無色固體；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.06(3H，s)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.23(3H，d，J＝6.1Hz)，1.33(3H，s)，1.99(1H，d，J＝5.5Hz)，2.10(3H，s)，2.25-2.34(1H，m)，2.41(1H，dd，J＝15.5、3.3Hz)，2.47(3H，s)，2.48(1H，dd，J＝15.7、9.4Hz)，2.51-2.63(1H，m)，2.63(1H，d，J＝6.1Hz，OH)，2.64-2.75(1H，m)，2.91-3.05(2H，m)，3.10(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.70-3.75(1H，m)，4.30(1H，ddd，J＝9.3、6.1、3.2Hz)，5.32(2H，s)，5.41(1H，dd，J＝5.8、4.5Hz)，5.57(1H，ddd，J＝15.8、6.4、4.6Hz)，5.65(1H，dd，J＝15.8、6.0Hz)，6.21(1H，t，J＝7.1Hz)，6.59(1H，s)，7.18(1H，s)，7.37(2H，d，J＝8.1Hz)，7.84(2H，d，J＝8.3Hz)；C34H43F3NO8S2Na的LRMS(ESI)計算值[M+Na+]736.2，實驗值736.3。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.06(3H，s)，1.12(3H，d，J＝6.9Hz)，1.23(3H，d，J＝6.7Hz)，1.34(3H，s)，2.00(1H，d，J＝5.6Hz，OH)，2.15(3H，s)，225-2.35(1H，m)，2.41(1H，dd，J＝15.5、3.2Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.5、9.4Hz)，2.53-2.62(1H，m)，2.69(1H，d，J＝6.1Hz，OH)，2.66-2.76(1H，m)，2.92-3.05(2H，m)，3.11(1H，五重峰，J＝6.4Hz)，3.70-3.76(1H，m)，4.32(1H，ddd，J＝9.2、5.9、3.1Hz)，4.85(2H，s)，5.43(1H，dd，J＝6.0、4.4Hz)，5.59(1H，ddd，J＝15.9、6.4、4.5Hz)，5,66(1H，dd，J＝15.9、6.1Hz)，6.23(1H，t，J＝6.8Hz)，6.63(1H，s)，7.20(1H，s)；C27H35ClF3NO5SNa的LRMS(ESI)計算值[M+Na4]600.2，實驗值600.2?；衔?9向59(6.9mg，12.3μmol)于CH2Cl2(0.4mL)的溶液中添加經(jīng)活化的MnO2(自Acros購得，26.8mg，0.308mmol)。于室溫下劇烈攪拌4小時后，混合物用硅藻土墊過濾，硅藻土墊用EtOAc沖洗。濃縮后，殘余物通過制備型TLC(己烷/EtOAc＝1∶1)純化，獲得無色固體醛99(2.7mg，4.84μmol，39％)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1,06(3H，s)，1.13(3H，d，J＝7.2Hz)，1.24(3H，d，J＝6.9Hz)，1.35(3H，s)，1.96(1H，d，J＝5.6Hz，OH)，2.22(3H，d，J＝0.7Hz)，2.25-2.35(1H，m)，2.44(1H，dd，J＝15.4、3.5Hz)，2.46(1H，d，J＝5.9Hz，OH)，2.51(1H，dd，J＝15.7、9.3Hz)，2.57-28(1H，m)，2.68-2.79(1H，m)，2.96-3.03(2H，m)，3.10(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.71-3.76(1H，m)，4.31(1H，ddd，J＝9.4、6.3、3.5Hz)，5.45(1H，t，J＝5.0Hz)，5.53-5.63(1H，m)，5.67(1H，dd，J＝15.7、6.2Hz)，6.24(1H，t，J＝6.6Hz)，6.72(1H，s)，7.57(1H，d，J＝0.9Hz)，10.01(1H，d，J＝1.2Hz)?；衔?00于0℃下向醛99(4.6mg，8.25μmol)于CH3CN(0.5mL)的溶液中添加MeNH2(2.0M于THF中，41.3μL，41.3μmol)。于0℃下攪拌15分鐘后，添加NaBH3CN(1.0M于THF中，25μL，25μmol)。于0℃下攪拌0.5小時后，添加AcOH(3滴)。于0℃下攪拌2小時后，添加28％的NH4OH(水溶液)(40μL)，并將混合物于室溫下攪拌10分鐘。將混合物直接通過制備型TLC(CH2Cl2/MeOH＝100∶9)純化兩次，獲得無色固體100(2.4mg，4.19μmol，51％)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.23(3H，d，J＝6.8Hz)，1.34(3H，s)，2.13(3H，s)，2.25-2.34(1H，m)，2.39(1H，dd，J＝15.3、3.0Hz)，2.49(1H，dd，J＝15.3、9.7Hz)，2.56(3H，s)，2.54-2.64(1H，m)，2.66-2.75(1H，m)，2.89(1H，d，J＝5.1Hz)，2.94-3.05(2H，m)，3.11(1H，五重峰，J＝6.8Hz)，3.74(1H，dd，J＝6.6、3.5Hz)，4.08(2H，s)，4.34(1H，dd，J＝9.6、2.9Hz)，5.43(1H，dd，J＝6.2、4.1Hz)，5.56-5.63(1H，m)，5.66(1H，dd，J＝15.9、5.7Hz)，6.24(1H，t，J＝7.3Hz)，6.66(1H，s)，7.11(1H，s)；C28H40F3N2O5S的LRMS(ESI)計算值[M+H+]573.3，實驗值573.3。實例10將異種移植腫瘤消除至一不復發(fā)狀態(tài)的埃坡霉素類似物通過化學合成、分子模型及光譜分析的組合，我們發(fā)現(xiàn)，在抗藥性MX-1腫瘤的異種移植物試驗中，E-9，10-雙鍵(參見下文化合物28)的引入可使藥物效能提高至約10倍(A.Rivkin等人，J.Am.Chem.Soc.2003，125，2899；以引用的方式并入本文中)。根據(jù)針對MX-1腫瘤類型的體外與體內(nèi)試驗的相關性，可明顯看出28本質(zhì)上比2b更具有細胞毒性。然而，另一影響因素在于，9，10-去氫系列中的內(nèi)酯部分在小鼠及人血漿中明顯比9，10-去氫同類物的穩(wěn)定。該等兩種互補效應的總和使得28能夠以3mg/Kg(與1的30mg/Kg相比)在各種異種移植物中達成對腫瘤的完全抑制。12，13-去氧EpoB(1)E)-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB(28)6-F3-12，13-去氧EpoB(2)26-F3-(E)-9，10-去氫-12，13-去氧EpoB(29)暫停治療時，動物的某些部分中重新出現(xiàn)可觸摸的腫瘤。因此，至少在目前，全合成28還沒有完全達到高度有利的有效治療指數(shù)及消除腫瘤至一不復發(fā)狀態(tài)的嚴格標準。該些發(fā)現(xiàn)使人們將注意力集中于用三個氟原子取代28的26-甲基的三個氫上。在該位置納入該些氟原子使12，13-雙鍵對氧化作用的穩(wěn)定性提高(Smart，B.E.J.FluorineChem.(2001，109，3)；以引用的方式并入本文中)。先前試驗已通過在C12-C13雙鍵區(qū)域布置極性基團來消弱部分細胞毒性(A.Rivkin等人，J.Am.Chem.Soc.(2003，125，2899)；以引用的方式并入本文中)。在本揭示內(nèi)容中，我們通過9，10-去氫-26-三氟埃坡霉素的全化學合成報導了該發(fā)現(xiàn)，尤其集中于母體結(jié)構(gòu)29的獨特生物性能上。我們仔細研究了dEpoB(30mg/Kg)、紫杉醇(20mg/Kg)及F3-deH-dEpoB(29，20及30mg/Kg)在腫瘤消除及復發(fā)方面抗人類乳腺癌MX-1異種移植物的治療效能，且該些結(jié)果顯示在表10-1中。每一劑量組由四只或以上的裸鼠組成。體重是指總體重減去腫瘤重量。所有三種化合物皆使腫瘤消失。暫停治療后第10天，5/10(dEpoB)、2/7(紫杉醇)及0/4(化合物29)的小鼠復發(fā)。暫停用29以20mg/Kg劑量治療后的延長觀察顯示，腫瘤長時間消失，直至第27天4只小鼠中有2只小鼠的腫瘤復發(fā)。非常明顯，用29以30mg/Kg的劑量治療可使腫瘤完全消失且停止治療后兩個月以上不會出現(xiàn)任何復發(fā)。表10-1.dEpoB、紫杉醇與F3-deH-dEpoB抗裸鼠中MX-1異種移植物的治療效能[a]在第0天皮下植入人類乳腺癌MX-1異種移植組織50mg。第8天開始Q2D×6小時靜脈內(nèi)輸注的治療并在第18天停止。停止治療后在第27天觀察到2/4的小鼠中到重新出現(xiàn)可觸摸的腫瘤。停止治療后第28天至第64天期間沒有再出現(xiàn)腫瘤。試驗結(jié)束時停止治療后在64天期間沒有再次出現(xiàn)腫瘤。將藥劑29的劑量降低至10mg/Kg(Q2D)亦可使MX-1腫瘤消失，但需要9次服藥才能達到該結(jié)果(圖57、58及59A)。作為一附加要求，需將化療延遲至腫瘤大小達到0.5g(約體重的2.3％)為止。用25mg/Kg(Q2D×7)劑量的29治療，使4/4小鼠的腫瘤消失。相反對于dEpoB，需要30mg/Kg(Q2D×8)劑量才能使3/4小鼠的腫瘤消失。然而，不象29的情況，用dEpoB治療后出現(xiàn)的表面消失隨時間流逝而復發(fā)。(圖59B)。藥劑29完全抑制人類乳腺癌MX-1異種移植物生長、使腫瘤縮小并使其在長達64天的時間內(nèi)消失的事實給人以深刻印象。而且，用29(20mg/kg或30mg/kgQ2D×6，6小時靜脈內(nèi)輸注，表1，上文)治愈后，停止治療后12至18天內(nèi)異種移植物的體重恢復至預處理的對照水平。該發(fā)現(xiàn)表明沒有損傷重要器官。在10mg/KgQ2D×12的低治療劑量(圖59B)下，最大體重下降僅為12％，同時在最后三次給藥期間體重增加6％。停止治療后僅三天體重即恢復至預處理的對照水平。上表1顯示該些動物在體重損失高達27％時仍可存活。在本文中所達成的治療安全系數(shù)對于一有療效的癌癥治療劑而言相當寬。亦評價了29抗人類肺癌異種移植物(A549)及紫杉醇抗人類肺癌A549/紫杉醇異種移植物的治療效能(圖59C及59D)。用29(25mg/kg，Q2D×6，兩次，間隔八天)治療緩慢生長的肺癌異種移植物A549，此使得99.5％的腫瘤受到抑制，再給藥兩次后4個腫瘤最后完全根除(圖59C)。令人感興趣的是，小鼠體重減少了35％而沒有任何致死現(xiàn)象，且停止治療后使體重迅速恢復至接近預處理的對照水平(圖59C)。相反，用dEpoB(30mg/Kg，Q2D×6)進行的平行研究可抑制97.6％的腫瘤，但不能根除腫瘤。在29(20mg/Kg劑量)抗A549/紫杉醇異種移植物的附加試驗(圖59D)中，腫瘤生長完全受到抑制且腫瘤最終比預處理對照組減少24.4％。在該研究中，體重最多減輕24％，然而，停止藥物治療后體重恢復至預處理對照組的90％。在(E)-9，10-去氫-dEpoB(28，每組4mg/Kg)的對比研究中，41.6％的腫瘤生長受到抑制。表10-2中提供了用于分析賦予化合物29顯著治療指數(shù)的因素的相應數(shù)據(jù)及與密切相關的同類物有關的比較數(shù)據(jù)?？勺⒁獾剑訣poB(2b)至dEpoB(1)固有的細胞毒性降低了一個完整的數(shù)量級。對于9，10-去氫-dEpoB(28)而言，該降低約恢復60％。對于29，該固有細胞毒性部分喪失，其至少在細胞中為基準化合物dEpoB細胞毒性的約1.8倍。我們注意到，在該些12，13-去氫埃坡霉素中，目前29在小鼠血漿中展示最佳的穩(wěn)定性且在人肝臟S9血漿中亦是最穩(wěn)定的。亦注意到，在12，13-去氫異構(gòu)體的2-位置，其含有的26-三氟結(jié)構(gòu)使親脂性降低并使水溶性稍微增加(下表10-2)。目前看來29的巨大優(yōu)點在于在血清穩(wěn)定性及生物利用度方面的改進。表10-2.dEpoB衍生物的性質(zhì)IC50值是對于CCRF-CEM白血病細胞的IC50值。該些值是兩次試驗的范圍。所有值皆自七個濃度點獲得；ND＝未測定。MTD(最大容許劑量)時的相對治療指數(shù)(TI)分類+25至50％的腫瘤生長受到抑制。++50至100％的腫瘤生長受到抑制。+++腫瘤縮小但未出現(xiàn)腫瘤消失。++++在某些或所有裸鼠中腫瘤消失，停止治療后一周內(nèi)某些小鼠體重緩慢恢復及/或舊病復發(fā)。+++++所有的裸鼠中腫瘤消失，體重迅速恢復及/或沒有復發(fā)。Chou，T.C.等人(Proc.Natl.AcadSci.USA.1998，95，15798及2001，98，8113)研究了埃坡霉素抗裸鼠中人類異種移植物(例如，MX-1)的治療試驗。通過總合成初次發(fā)現(xiàn)了1-2及28-29的所有藥劑。先前文獻已闡述1的實際合成(Rivkin等人，J.Am.Chem.Soc.(2003，125，2899)；White等人，J.Am.Chem.Soc.(2001，123，5407)；Yoshimura等人，Angew.Chem.(2003，42，2518)；Rivkin等人，J.Org.Chem.2002，124，7737；每一皆以引用的方式并入本文中)。亦已闡述獲得28及29的第一代發(fā)現(xiàn)級途徑。選擇性還原29的9，10-雙鍵獲得2。對于目前最有希望的化合物29，上述異種移植物研究獲得的顯著結(jié)果清楚表明，需對化合物29在更高級動物中進行更詳細的毒理學及藥物動力學研究，并由此適當?shù)剡M一步用于人體臨床試驗。該些前景將合成挑戰(zhàn)的性質(zhì)完全自制備試探樣品變成制備多克數(shù)量的該些新穎埃坡霉素藥劑。對在發(fā)明背景中最初設想并表明的先前途徑的主要修改已達成。特別是，我們的新方案在碳3及26的立體選擇性設計方面實現(xiàn)重大簡化。醇32如先前所述(Rivkin等人，J.Am.Chem.Soc.(2003，125，2899)；以引用的方式并入本文中)來制備。應注意，在該新穎合成中，立體中心6、7及8皆衍生自易于獲得的酮30及醛31。在醇保護及縮醛水解后，將相應的醛與醋酸特丁基酯縮合，獲得一醇醛樣產(chǎn)物。由于該縮合反應在立體異構(gòu)方面不受控制，需要并已達成一補救措施。氧化C3差向異構(gòu)體的該1∶1的混合物，獲得酮69。在所示條件下實施一非常成功的Noyori還原(Noyori等人，J.Am.Chem.Soc.(1987，109，5856)；以引用的方式并入本文中)之后，獲得醇70。然后，如所示以幾個附加簡單步驟完成酸25的制備。示意圖12.合成?；糠?5試劑及條件(a)(i)TrocCl，吡啶，92％；(ii)p-TsOH·H2O，76％；(m)LDA，醋酸特丁基酯，THF，80％；(iv)Dess-Martinperiodinane，74％；(b)Noyori催化劑(10mol％)，MeOH/HCl，H2，1200psi，80％。(c)(i)TESCl，咪唑，77％；(ii)Zn，AcOH，THF，99％；(iii)TBSOTf，2，6-二甲基吡啶，82％；其余步驟參見Rivkin等人J.Am.Chem.Soc.2003，125，2899。亦已研究出一種新的簡單且易于縮放的合成90的方法(示意圖13)。該合成以市售三氟酮酯82與溴化烯丙基銦的反應開始。合成中的關鍵步驟是所得叔醇的位置特異性及立體選擇性脫氫以生成產(chǎn)物84(兩步的總產(chǎn)率為65％)。該反應的立體控制源自“偶極效應”，其中強吸電子CF3與CO2Et基團相對于形成的雙鍵最佳以反式存在。自84以兩步獲得所需碘化物86。先前所報導的烯醇化鋰7與碘化物86于THF中烷基化，獲得88，其產(chǎn)率為81％且具有高非鏡像立體選擇性(＞25∶1de)。仲醇去保護后，自化合物88以三步獲得所示90。示意圖13.合成烷基部分17試劑及條件(a)(i)烯丙基溴，In，THF-水(3∶1)48℃，85％；SOCl2，吡啶55℃，77％；(b)(i)DIBAL-H，CH2Cl2，-78℃至室溫，99％；(ii)I2，PPh3，咪唑，CH2Cl2，74％；(c)(i)LHMDS，THF，-78℃至室溫；(ii)HOAc-THF-H2O(3∶1∶1)，兩步產(chǎn)率81％；(d)(i)AlMe3，MeONHMe，THF，0℃至室溫，97％；(ii)MeMgBr，THF，0℃，53％(73％borsm)在手頭上有了通過易處理化學反應獲得的25及90的情況下，根據(jù)先前在發(fā)現(xiàn)階段開發(fā)出藥物配制報告(A.Rivkin等人，J.Am.Chem.Soc.2003，125，2899；以引用的方式并入本文中)即知曉了制備29的途徑。關鍵的25的閉環(huán)置換反應是在甲苯中用第二代Grubbs催化劑來實施(Grubbs，R.H.；Miller，S.J.；Fu，G.C.Acc.Chem.Res.1995，28，446；Trnka，T.M.；Grubbs，R.H.Acc.Chem.Res.2001，34，18；AlkeneMetathesisinOrganicChemistry編輯Fürstner，A.；Springer，Berlin，(1998))；Fürstner，A.Angew.Chem.Int.Ed.Engl.2000，39，3012；Schrock，R.R.Top.Organomet.Chem.1998，1，1；其每一皆以引用的方式并入本文中)。該反應僅獲得反式異構(gòu)體48，產(chǎn)率為71％。通過示意圖14中所示方法插入噻唑部分后，用HF-吡啶去除兩個甲硅烷保護基團，由此獲得29，然后將29通過9，10-烯烴的還原以高產(chǎn)率轉(zhuǎn)化為2。已通過在研究院規(guī)模的實驗室環(huán)境中的總合成制得克數(shù)量級的結(jié)構(gòu)新穎的埃坡霉素。示意圖14.合成26-CF3-(E)-9，10-去氫-dEpoB(29)的最后步驟試劑及條件(a)EDCI，DMAP，CH2Cl2，25，0℃至室溫，86％，自特丁基酯開始；(b)Grubb催化劑，甲苯，110℃，20分鐘，71％；(c)(i)KHMDS，101，THF，-78℃至-20℃，70％；(ii)HF-吡啶，THF，98％。實驗一般方法除非另有說明，否則使用自商業(yè)供應商購得的試劑而不進一步純化。自一溶劑干燥系統(tǒng)(通過一預填充氧化鋁柱)獲得二氯甲烷且使用時未經(jīng)進一步干燥。所有對空氣及水敏感的反應皆在預凈化氬氣的正壓下在烘干的玻璃器件中進行。NMR(1H及13C)譜圖如一個一個單獨所注明在BrokerAMX-400MHz或BrukerAdvanceDRX-500MHz上記錄，參照CDCl3(1H為7.27ppm且13C為77.0ppm)或CD2Cl2(1H為5.32ppm且13C為53.5ppm)。在Perkin-ElmerFT-IR型1600光譜儀上獲得紅外光譜圖(IR)。在JASCO型DIP-370數(shù)字旋光儀上獲得旋光度。在E.Merck硅膠60F254板上實施分析性薄層層析。通過將該些板浸漬于鉬酸鈰銨或?qū)钕闳┤芤褐胁⒓訜醽盹@現(xiàn)不具有UV活性的化合物。在Whatman(LK6F硅膠60A)TLC板上用規(guī)定溶劑實施制備型薄層層析。化學藥品所有埃坡霉素皆內(nèi)部合成(C.R.Harris，S.J.Danishefsky，J.Org.Chem.1999，64，8434；D.-S.Su等人，Angew.Chem.Iht.Ed.Engl.1997，36，2093；Smart，B.E.J.FluorineChem.2001，109，3；F.Yoshimura等人，Angew.Chem.2003，42，2518；Rivkin等人，J.Org.Chem.(2002，124，7737)每一皆以引用的方式并入本文中)。紫杉醇(Taxol)及硫酸長春堿(VBL)皆自Sigma購得。將所有該些化合物溶于二甲亞砜中用于體外分析(VBL溶于鹽水中)。對于體內(nèi)研究，將所有埃坡霉素及紫杉醇皆溶于氫化蓖麻油/乙醇(1∶1)媒劑中，然后用鹽水稀釋，使用特定設計的微型導管通過尾部靜脈進行6小時靜脈內(nèi)輸注(T.-C.Chou等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.2001，98，8113-8118；T.-C.Chou等人，Proc.NatlAcadSci.U.S.A.1998，95，15798-15802；每一皆以引用的方式并入本文中)。腫瘤及細胞株.自UniversityofIllinois(Chicago)的Dr.WilliamBeck獲得CCRF-CEM人類淋巴性白血病細胞。人類乳腺癌(MX-1)及人類肺癌細胞(A549)皆自AmericanTypeCultureCollection(ATCC，Rockville，MD)獲得。用上述方法形成紫杉醇-抗性A549/紫杉醇細胞(44-倍抗性)(T.-C.Chou等人，Proc.NatlAcadSci.USA.2001，98，8113-8118；以引用的方式并入本文中)。實驗動物.自NCI(Frederick，MD)獲得具有nu/nu基因的無胸腺裸鼠并用于所有人類腫瘤異種移植物。使用6周齡或以上且體重20至22g或以上的雄性裸鼠。使用自制輸注微型導管及貯容管(containmenttube)進行6小時的尾部靜脈內(nèi)輸注來投與藥物(T.-C.Chou等人，Proc.Natl.Acad.Sci.USA.2001，98，8113-8118；以引用的方式并入本文中)。使用多道可編程HarvardPHD2000注射泵進行靜脈內(nèi)輸注。每一溶于氫化蓖麻油/乙醇(1∶1)中藥物的典型6小時輸注體積為100ml于2.0ml鹽水中。通過用卡尺測量長×寬×高(或?qū)?估計腫瘤體積。對于試驗過程期間有腫瘤的裸鼠而言，體重是指總重量減去腫瘤的重量。所有動物研究皆根據(jù)美國衛(wèi)生署動物照料及使用守則(NationalInstituteofHealthGuidefortheCareandUseofAnimals)中的指導原則及由斯隆-凱特林紀念癌癥中心(theMemorialSloan-KetteringCancerCenter)的實驗動物管理及使用委員會批準的協(xié)議來實施。細胞毒性分析.在準備體外細胞毒性分析時，以2至5×104細胞/毫升的初始密度培養(yǎng)細胞。將該些細胞在RPMI媒介1640(GIBCO/BRL)中于37℃下在5％CO2-濕潤氣氛下保持，RPMI媒介1640包含青霉素(100單位/mL)、鏈霉素(100μg/mL，GIBCO/BRL)及5％熱滅活FBS。對于以單層生長的實體腫瘤細胞(例如A549)而言，在96孔微量滴定板中通過磺酰羅丹明B(sulforhodamineB)方法測定藥物的細胞毒性(P.Skehan等人，J.NatlCancer.Inst.1990，82，1107-1112；以引用的方式并入本文中)。對于在懸浮液中生長的細胞(例如，CCRF-CEM及其亞系)，在96孔微量滴定板中用2，3-雙-(2-甲氧基4-硝基-5-磺苯基)-5-苯胺基甲酰)-2H-四唑鎓氫氧化物(XTT)微量培養(yǎng)方法測定細胞毒性(D.A.Scudiero等人，CancerRes.(1988，48，4827-4833)；以引用的方式并入本文中)，用同樣的方法測定兩次。對于兩種方法，皆用微孔板閱讀器(PowerWaveXS，Bio-Tek，Winooski，VT)測量每一孔的吸光度。通過計算機程序利用中位數(shù)-效果曲線自每一藥物6至7個濃度點分析劑量-效果關系數(shù)據(jù)(T.-C.Chou，M.Hayball.CalcuSynforWindows，Multiple-drugdoseeffectanalyzerandmanual.Biosoft，CambridgePlace，Cambridge，UK(1997)；以引用的方式并入本文中)，用同樣的方法測定兩次。埃坡霉素在小鼠及人肝臟S9部分中的穩(wěn)定性.利用一全自動HPLC系統(tǒng)進行穩(wěn)定性研究，全自動HPLC系統(tǒng)由Prospekt-2(SparkHolland，Netherlands)樣品制備系統(tǒng)及一Agilent1100HPLC系統(tǒng)組成。簡言之，Prospekt2選取一C8萃取管并用乙腈和水洗滌。Agilent自動取樣器設定在37℃，其采集20μl的樣品，將其裝于該管中，用水洗滌，然后Prospekt-2將流動相流通過該萃取管引導至分析柱上(帶有保護柱的RelianceStableBondC8，4×80mm(MacMod，ChaddsFord，PA))且監(jiān)測250nm處的洗脫液。流動相由53或65％乙腈/0.1％甲酸組成，流速為0.4ml/min，因此所研究化合物的保留時間約為6分鐘。樣品制備涉及將等體積的血漿添加至PBS中使總體積為300-400μl，過濾并添加0.5-2μl的底物(20mM)，以在HPLC分析中在250nm處達成約30-50mAU。對于所收集的人類肝臟微粒體S9部分(XenoTech，Lenex，KS)，將20μl(400μg)的S9部分與280μl的PBS混合，然后如上所述繼續(xù)進行研究。取樣周期由自動取樣器控制，并收集峰面積數(shù)據(jù)以比較母體化合物消失的速率。辛醇-水分配常數(shù)(POW)的測定.使用HPLC方法估計辛醇-水的分配常數(shù)。使用一帶有eclipseXDBC18柱(4.6×250mm)的Agilent1100HPLC系統(tǒng)，其中流動相為60％乙腈/40％的25mM磷酸鉀緩沖液(pH7.4)，其流率為0.8ml/min，在250nm處監(jiān)測洗脫液。所用標準液為已知POW分別為1.1、1.7、3.2、4.2及4.8的芐醇、苯乙酮、二苯甲酮、萘、二苯醚及二芐醚。使用重鉻酸鈉估計時間零點，時間零點為2.5分鐘，且該些標準液的保留時間分別為3.9、5.4、10.6、14.18.7及19.8分鐘。通過公式k＝(trt-to)/to計算k值。logk對logPOW線性回歸，獲得r2＝0.966的直線。使用該曲線圖估計埃坡霉素類似物的POW值。29(26-三氟-(F)-9，10-去氫-dEpoB)的光譜數(shù)據(jù)[α]D25-54.6(c0.28，CHCl3)；IR(薄膜)v3478，2974，2929，1736，1689，1449，1381，1318，1247，1169，1113，1039，983，867，736cm-1；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ1.05(3H，s)，1.12(3H，d，J＝7.0Hz)，1.23(3H，d，J＝6.8Hz)，1.37(3H，s)，2.04(1H，brd，J＝3.8Hz，-OH)，2.12(3H，s)，2.25-2.33(1H，m)，2.38(1H，dd，J＝15.3及3.0Hz)，2.48(1H，dd，J＝15.4及9.8Hz)，2.54-2.61(1H，m)，2.66-2.76(1H，m)，2.71(3H，s)，2.96(1H，dd，J＝16.5及4.5Hz)，3.02(1H，dd，J＝16.3及6.5Hz)，3.11(1H，五重峰，J＝6.7Hz)，3.19(1H，brs，＝OH)，3.74(1H，brs)，4.35(1H，brd，J＝9.5Hz)，5.42(1H，dd，J＝6.2及4.1Hz)，5.60(1H，ddd，J＝15.8、5.6及4.5Hz)，5.66(1H，dd，J＝15.8及5.8Hz)，6.24(1H，t，J＝7.2Hz)，6.64(1H，s)，7.00(1H，s)；13CNMR(100MHz，CDCl3)δ15.1，16.1，17.7，18.5，19.3，22.5，28.8，31.1，39.6，39.7，45.0，53.7，71.4，75.3，76.8，116.7，1202，124.3[q，1J(C，F(xiàn))＝273.4Hz]，127.9，130.2[q，3J(C，F(xiàn))＝6.0Hz]，130.6[q，2J(C，F(xiàn))＝28.4Hz]，132.5，136.7，152.0，165.4，170.2，218.4；C27H37F3NO5S的LRMS(ESI)計算值[M+H+]544.2，試驗值544.1。實例11體外研究典型的試驗涉及以2至5×104細胞/ml的初始密度培養(yǎng)細胞(例如，CCRF-CEM)。該些細胞在RPMI媒介1640(GIBCO/BRL)中于37℃下在5％CO2-濕潤氣氛下保持，RPMI媒介1640包含青霉素(100單位/mL)、鏈霉素(100μg/mL，GIBCO/BRL)及5％熱滅活胎牛血清。對于在懸浮液中生長的細胞(例如，CCRF-CEM及其亞系)，在96孔微量滴定板中用2，3-雙-(2-甲氧基4-硝基-5-磺苯基)-5-苯胺基甲酰)-2H-四唑鎓氫氧化物(XTT)微量培養(yǎng)四唑鎓法測定細胞毒性，用同樣的方法測定兩次。對于兩種方法，皆用微孔板閱讀器(PowerWaveXS，Bio-Tek，Winooski，VT)測量每一孔的吸光度。每一試驗需要測試藥物的6或7個濃度點。利用中位數(shù)-效果曲線分析劑量-效果關系數(shù)據(jù)。CCRF-CEM人類T細胞、急性淋巴性白血病細胞、其抗替尼泊甙(teniposide)亞系(CCRF-CEM/VM1)及抗長春堿亞系(CCRF-CEM/VBL100)皆自W.T.Beck(UniversityofIllinois，Chicago，II)獲得。在一典型試驗中，如上所概述，本發(fā)明的某些化合物(例如，9，10-去氫-EpoD)在CCRF-CEM細胞株中及抗紫杉醇的CCRF-CEM細胞株中展示活性。該些化合物中的某些對CCRF-CEM細胞株展示在0.0015至約0.120范圍內(nèi)的IC50。某些其他化合物展示0.0015至約10.5的IC50。該些化合物中的某些亦對CCRF-CEM/紫杉醇抗性細胞株展示在0.011至約0.80范圍內(nèi)的IC50，且某些其他化合物展示0.011至約13.0μM范圍內(nèi)的IC50。在某些實施例中，26F-EpoD對CCRF-CEM細胞株展示在0.0015μM范圍內(nèi)的活性且對CCRF-CEM/紫杉醇抗性細胞株細胞株展示在0.011μM范圍內(nèi)的活性(圖11)。實例12體內(nèi)研究通常用具有nu/nu基因的無胸腺裸鼠用于腫瘤異種移植。遠系雜交瑞士小鼠自CharlesRiverLaboratories獲得。大多數(shù)試驗使用8周齡或以上且體重22g或以上的雄性小鼠。通過尾部靜脈6小時靜脈內(nèi)輸注來投與藥物。每一個小鼠皆限制在一個帶孔的Falcon聚丙烯管限制器中投與藥物。通過用卡尺測量長×寬×高(或?qū)?估計腫瘤體積。使用多道可編程HarvardPHD2000注射泵(HarvardApparatus)進行靜脈內(nèi)輸注。所有動物研究皆根據(jù)美國衛(wèi)生署“動物照料及使用守則”中的指導原則及由斯隆-凱特林紀念癌癥中心的實驗動物管理及使用委員會批準的協(xié)議來實施。為符合該委員會關于具有腫瘤的動物的人道治療政策，當腫瘤達到小鼠總體重的≥10％時使其安樂死。如圖8中所示，在具有人類乳腺癌MX-1的裸鼠中測試9，10-去氫-EpoB。一般而言，9，10-去氫-EpoB可如下配制將9，10-去氫-EpoB溶于乙醇中并添加濃度為20mg/ml的氫化蓖麻油(1∶1)。該溶液用鹽水稀釋用于靜脈內(nèi)輸注。經(jīng)稀釋的溶液用于在1小時內(nèi)靜脈內(nèi)輸注。然后，經(jīng)15天后用10mg/Kg、20mg/Kg及30mg/Kg的劑量測量腫瘤大小及體重。亦可用0.4mg/KgQ3D×2、0.5mg/KgQ3D×2及0.6mg/KgQ3D×5的給藥方案來測量腫瘤大小及體重(參見圖33、34、55及56)。使用每三天投與一次的給藥方案以降低毒性。其他關于9，10-去氫-EpoB的療效研究展示于圖70和71(CCRF-CEM/紫杉醇Q3D×5)及圖23和24(HCT-116，Q2D×7)中?；衔?，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B(異-490埃坡霉素)的效力是dEpoB的三倍。已證實，9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素D以10mg/Kg或20mg/Kg兩至三次輸注(每種皆每隔一天投與一次)后，可抑制腫瘤生長。采用30mg/kg劑量的9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B以兩次6小時靜脈內(nèi)輸注(每隔一天一次)的方式在小鼠中獲得更佳結(jié)果。以5mg/kg，Q3D×9，6小時靜脈內(nèi)輸注投與9，10-去氫-dEpoB，亦使具有MX-1異種移植物的裸鼠中的腫瘤消失，沒有小鼠死亡且體重僅適度減輕(圖74與75)。這似乎已通過每隔兩天投與埃坡霉素類似物以降低毒性來達成(參見圖53與54)?？傊c其他埃坡霉素相比，9，10-去氫-12，13-去氧埃坡霉素B的毒性降低、更有效地抑制腫瘤生長且具有更佳的血清穩(wěn)定性。其他治療研究展示于圖17及18(HCT-116，Q2D×5及Q3D×5)中；圖19及20(A549/紫杉醇，Q3D×7)中；及圖21和22(A549/紫杉醇，Q2D×7)中。當將9，10-去氫-EpoB以0.4至0.6mg/Kg的劑量以每三天一次的頻率投與9至11次(6小時靜脈內(nèi)輸注)時，導致在具有經(jīng)移植人類乳腺癌MX-1異種移植物的小鼠中的腫瘤收縮及消失(圖68及69)。以每隔一天的頻率投與8次后可抑制腫瘤生長但不縮小腫瘤。當以每隔一天的頻率投與9次9，10-去氫-EpoB時，經(jīng)移植的腫瘤自第二天至第8天持續(xù)適度縮小，同時體重極緩慢地自對照組的76％恢復至82％。第十天，1/4的腫瘤消失。當將9，10-去氫-EpoB以0.6mg/kg的劑量(Q2W×6，6小時輸注)投與具有HCT-116異種移植物的裸鼠時，第六次給藥后四只小鼠在三天內(nèi)死于中毒。將9，10-去氫-EpoB以0.6mg/kg(Q3D×5、×2)的給藥方案給藥使抗CCRF-CEM/紫杉醇的腫瘤停止生長(圖70及71)。如圖中所示，在移植有人類乳腺癌MX-1異種移植物的裸鼠模型中，將26-三氟-9，10-去氫-12，13-去氧-埃坡霉素B(F3-deH-dEpoB)以20mg/kg及30mg/kg(Q2D×6，6小時輸注)給藥時具有療效。數(shù)據(jù)亦表明30mg/kgQ2D×6是近似的最大容許劑量。以20mg/kg，Q2D×6，6小時輸注26-三氟-9，10-去氫-12，13-去氧-埃坡霉素B使四只具有人類乳腺癌MX-1異種移植物的裸鼠的腫瘤皆縮小并消失。停止治療后第20天沒有再次出現(xiàn)腫瘤。停止治療后第27天，2/4的小鼠再次出現(xiàn)腫瘤。停止治療后第28-64天期間再沒有出現(xiàn)更多腫瘤。相比而言，dEpoB以30mg/kg在相同的小鼠模型中可使7只小鼠的腫瘤皆消失；然而，停止治療后第8天2/5的小鼠中再次出現(xiàn)腫瘤。以20mg/kg，Q2D×6，6小時靜脈內(nèi)輸注投與26-三氟-9，10-去氫-12，13-去氧-埃坡霉素B使小鼠體重暫時下降高達26％。此體重下降并不會導致死亡，此表明沒有對重要器官產(chǎn)生嚴重中毒。最后治療后的兩天，體重開始恢復。治療后第16天，體重恢復至預處理對照組的109％，此表明毒性(若有)已完全消除。相比而言，以30mg/kg投與dEpoB導致體重下降31％，但沒有致死。當以30mg/kg，Q2D×6，6小時靜脈內(nèi)輸注投與26-三氟-9，10-去氫-12，13-去氧-埃坡霉素B時，比以20mg/kg的劑量投與早2至3天出現(xiàn)腫瘤消失。在該較高劑量下體重下降27％且持續(xù)4天而沒有導致死亡，此證明對重要器官沒有劇烈毒性。以30mg/kg最后治療后四天，體重開始恢復。治療后第16天時，體重恢復至預處理對照組的98％，再次證明毒性的可逆性。用26-三氟-9，10-去氫-dEpoB以20mg/kg及30mg/kg治療導致所有腫瘤消失，且以30mg/kg劑量治療，62天后沒有出現(xiàn)復發(fā)。以10mg/kg的劑量給藥9次并追加給藥三次后亦可實現(xiàn)腫瘤消失(圖57)。以10mg/kg投與26-三氟-9，10-去氫-dEpoB僅觀察到較少的體重損失(圖58)。繼續(xù)治療沒有看到進一步的體重損失。圖59概括了26-F3-9，10-deH-dEpoB(及其他埃坡霉素)抗MX-1異種移植物的效果，A.低劑量；B.抗大腫瘤；C.抗A549肺癌異種移植物；及D.抗紫杉醇抗性肺癌A549/紫杉醇異種移植物。圖61列出了C-21經(jīng)修飾的埃坡霉素抗CCRF-CEM、CCRF-CEM/VBL及CCRF-CEM/紫杉醇的體外效能。圖62展示了26-F3-9，10-deH-dEpoB(15mg/kg及30mg/kg)和紫杉醇(20mg/kg)(Q2D×8，6小時靜脈內(nèi)輸注)抗人類T-細胞淋巴性白血病CCRF-CEM異種移植物的治療效果。在所用三組治療中觀察到類似的體重下降(圖63)。用26-F3-9，10-deH-dEpoB以15mg/kg治療CCRF-CEM/紫杉醇異種移植物(抗紫杉醇)可達成1/3腫瘤消失，且30mg/kg達成3/4腫瘤消失。用20mg/kg紫杉醇進行相同的治療僅部分抑制腫瘤生長且未達成腫瘤縮小(圖64)。在該試驗期間體重的變化顯示于圖65中。用26-F3-9，10-deH-dEpoB(20mg/kg)治療人類結(jié)腸癌HCT-116異種移植物可達成與紫杉醇(20mg/kg)類似的效果。然而，30mg/kg的F3-deH-dEpoB可獲得更佳的治療效果，5次給藥后2/4腫瘤消失(圖66)。該試驗期間體重的變化示于圖67中。不同劑量(5至30mg/kg)的F3-9，10-去氫-dEpoF(6小時靜脈內(nèi)輸注及靜脈內(nèi)注射)抗MX-1異種移植物的治療效果展示于圖76和77中。結(jié)論.對dEpoB進行9，10-去氫修飾、26-三氟代修飾或同時進行兩種修飾可導致體外細胞毒性增加至原來的1.5至5倍且在體外小鼠血漿中的半衰期增加至原來的2至5倍。通過使用裸鼠中的人類實體腫瘤異種移植物模型且以最大容許劑量通過尾部靜脈使用Q2D×5～9，6小時靜脈內(nèi)輸注技術(shù)來評價9，10-去氫-埃坡霉素的抗腫瘤效能及毒性。對達成完全的腫瘤生長抑制、腫瘤縮小及消失的能力進一步研究，以確定停止治療后的復發(fā)率及治愈率。盡管已知在體外最有效的埃坡霉素9，10-去氫-EpoB極為有效，但其在體內(nèi)展示一窄的治療安全系數(shù)。4mg/kg的9，10-去氫-dEpoB、0.4mg/kg的9，10-去氫-EpoB及3mg/kg的21-羥基-9，10-去氫-dEpoB皆能長時間強烈抑制腫瘤生長并達成某些腫瘤的縮小，且某些達成腫瘤的消失。在所有受試小鼠中，30mg/kg的dEpoB、20mg/kg的26-三氟-9，10-去氫-dEpoB及20mg/kg的紫杉醇皆顯示出對腫瘤生長的強抑制作用并實現(xiàn)了腫瘤縮小及消失(人類乳腺癌MX-1異種移植物)。與dEpoB或紫杉醇相比，26-三氟-9，10-去氫-dEpoB達成長期治愈而不出現(xiàn)腫瘤復發(fā)，且顯示體重同樣迅速地恢復至預處理對照水平。實例13合成環(huán)丙基-埃坡霉素類似物權(quán)利要求1.一種具有下式的化合物其中R1為氫或低碳烷基；R2為一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分；R5及R6皆獨立為氫或一保護基團；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中所出現(xiàn)的R7皆獨立為氫或低碳烷基；各個出現(xiàn)的RB獨立為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；及m為1、2、3或4。2.一種具有下式的化合物及其醫(yī)藥上可接受的衍生物其中X為O、S、C(R7)2或NR7，其中各個出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；R5及R6各獨立為氫或一保護基團；RB為氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)0RB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；R8獨立為氫、鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′；、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-0(C＝0)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-O(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，其中各個出現(xiàn)的R9獨立為氫；一保護基團；環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的V獨立為氫、鹵素、羥基、硫、氨基、烷基氨基或經(jīng)保護的羥基、硫或氨基；各個出現(xiàn)的t為0、1或2；且各個出現(xiàn)的n獨立為0至10。3.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中RB為甲基。4.如權(quán)利要求2所述的化合物，其中RB為-CF3。5.如權(quán)利要求2、3或4所述的化合物，其中R8為甲基。8.如權(quán)利要求2、3或4所述的化合物，其中R8為-CH2OH。9.如權(quán)利要求2、3或4所述的化合物，其中R8為-CH2NH2。10.一種具有下式的化合物及其醫(yī)藥上可接受的衍生物其中X為O、S、C(R7)2或NR7，其中各個出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；R5及R6各獨立為氫或一保護基團；RB為氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；R8獨立為氫、鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-0(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-O(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，其中各個出現(xiàn)的R9獨立為氫；一保護基團；一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的V獨立為氫、鹵素、羥基、硫、氨基、烷基氨基或經(jīng)保護的羥基、硫或氨基；各個出現(xiàn)的t為0、1或2；且各個出現(xiàn)的n獨立為0至10。11.如權(quán)利要求10所述的化合物，其中RB為甲基。12.如權(quán)利要求10所述的化合物，其中RB為-CF3。13.如權(quán)利要求10、11或12所述的化合物，其中R8為甲基。14.如權(quán)利要求10、11或12所述的化合物，其中R8為-CH2OH。15.如權(quán)利要求10、11或12所述的化合物，其中R8為-CH2NH2。16.一種具有下式的化合物及其醫(yī)藥上可接受的衍生物其中R5及R6獨立為氫或一保護基團；R8獨立為氫、鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-0(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-O(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-O(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，其中各個出現(xiàn)的R9獨立為氫；一保護基團；一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的V獨立為氫、鹵素、羥基、硫、氨基、烷基氨基或經(jīng)保護的羥基、硫或氨基；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中各個出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；各個出現(xiàn)的RB獨立為氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分。17.如權(quán)利要求16所述的化合物，其中RB為甲基。18.如權(quán)利要求16所述的化合物，其中RB為-CF3。19.如權(quán)利要求16、17或18所述的化合物，其中R8為甲基。20.如權(quán)利要求16、17或18所述的化合物，其中R8為-CH2OH。21.如權(quán)利要求16、17或18所述的化合物，其中R8為-CH2NH2。22.一種具有下式的化合物其中R1為氫或低碳烷基；R2為一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分；R5及R6獨立為氫或一保護基團；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中各個出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；各個出現(xiàn)的RB獨立為氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分。23.一種具有下式的化合物及其醫(yī)藥上可接受的衍生物其中RB為氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)0RB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫、烷基、芳基或一保護基團；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；R5及R6獨立為氫或一保護基團；R8獨立為氫、鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-O(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，視情況經(jīng)一或多個以下所出現(xiàn)的基團取代鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-O(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，其中各個出現(xiàn)的R9獨立為氫；一保護基團；一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的V獨立為氫、鹵素、羥基、硫、氨基、烷基氨基或經(jīng)保護的羥基、硫或氨基；各個出現(xiàn)的t獨立為0、1或2；且各個出現(xiàn)的n獨立為0至10。24.如權(quán)利要求23所述的化合物，其中RB為甲基。25.如權(quán)利要求23所述的化合物，其中RB為-CF3。26.如權(quán)利要求23、24或25所述的化合物，其中R8為甲基。27.如權(quán)利要求23、24或25所述的化合物，其中R8為-CH2OH。28.如權(quán)利要求23、24或25所述的化合物，其中R8為-CH2NH2。29.一種具有下式的化合物及其醫(yī)藥上可接受的衍生物其中RB為氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；R5及R6獨立為氫或一保護基團；R8獨立為氫、鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB′、NHRB′、N(RB′)2或SRB′；-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-0(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，視情況經(jīng)一或多個以下所出現(xiàn)的基團取代鹵素、-OR9、-SR9、-N(R9)2、-(CV2)nOR9、-(CV2)nN(R9)2、-(CV2)nSR9、-(C＝O)R9、-O(C＝O)R9、-(C＝O)OR9、-O(C＝O)OR9；-NH(C＝O)R9、-NH(C＝O)OR9、-(C＝O)NHR9、或一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分，其中各個出現(xiàn)的R9獨立為氫；一保護基團；一環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的V獨立為氫、鹵素、羥基、硫、氨基、烷基氨基或經(jīng)保護的羥基、硫或氨基；各個出現(xiàn)的t獨立為0、1或2；且各個出現(xiàn)的n獨立為0至10。30.如權(quán)利要求29所述的化合物，其中RB為甲基。31.如權(quán)利要求29所述的化合物，其中RB為-CF3。32.如權(quán)利要求29、30或31所述的化合物，其中R8為甲基。33.如權(quán)利要求29、30或31所述的化合物，其中R8為-CH2OH。34.如權(quán)利要求29、30或31所述的化合物，其中R8為-CH2NH2。35.一種具有下式的化合物36.一種具有下式的化合物37.一種具有下式的化合物38.一種具有下式的化合物38a.一種具有下式的化合物38b.一種具有下式的化合物39.一種反-9，10-去氫-順-12，13-去氧埃坡霉素類似物。40.一種反-9，10-去氫-順-12，13-去氫埃坡霉素類似物，其中所述類似物的特征為在一CCRF-CEM細胞株中IC50小于0.01。41.一種反-9，10-去氫-順-12，13-去氫埃坡霉素類似物，其中所述類似物的特征為在一CCRF-CEM細胞株中IC50小于0.05。42.一種反-9，10-去氫-順-12，13-去氫埃坡霉素類似物，其中所述類似物的特征為在一抗紫杉醇的CCRF-CEM細胞株中IC50小于0.01。43.一種反-9，10-去氫-順-12，13-去氫埃坡霉素類似物，其中所述類似物的特征為在一抗紫杉醇的CCRF-CEM細胞株中IC50小于0.05。44.一種包含一反-9，10-去氫-順-12，13-去氫埃坡霉素類似物及一醫(yī)藥上可接受賦形劑的醫(yī)藥組合物。45.一種用于治療癌癥的醫(yī)藥組合物，其包含如權(quán)利要求1至32中任一項所述的化合物及一醫(yī)藥上可接受的賦形劑。46.如權(quán)利要求44或45所述的醫(yī)藥組合物，其進一步包含氫化蓖麻油。47.如權(quán)利要求44或45所述的醫(yī)藥組合物，其進一步包含氫化蓖麻油及乙醇。48.如權(quán)利要求44或45所述的醫(yī)藥組合物，其中所述化合物懸浮于1∶1的氫化蓖麻油/EtOH中。49.如權(quán)利要求44或45所述的醫(yī)藥組合物，其進一步包含一附加細胞毒性劑。50.一種用于治療癌癥的醫(yī)藥組合物，其包括一治療有效劑量的如權(quán)利要求1至43任一項所述的化合物或其醫(yī)藥上可接受的鹽；及一醫(yī)藥上可接受的載劑或稀釋劑，其中所述化合物的治療有效劑量為一足以遞送每Kg患者體重約0.001至約40mg化合物的量。51.一種治療癌癥的方法，其包括將一治療有效量的如權(quán)利要求1至32任一項的化合物投與一有其需要的患者。52.如權(quán)利要求51所述的方法，其中所述化合物的治療有效劑量為一足以遞送每Kg患者體重約0.001mg至約40mg化合物的量。53.如權(quán)利要求51所述的方法，其中所述化合物的治療有效劑量為一足以遞送每Kg患者體重約0.1mg至約25mg化合物的量。54.一種制備一具有下式的化合物的方法其中R1為氫或低碳烷基；R2為一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分；R5及R6獨立為氫或一保護基團；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中各個出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；各個出現(xiàn)的RB獨立為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；及m為1、2、3或4，所述方法包括以下步驟使具有下式的化合物經(jīng)受一閉環(huán)置換反應條件55.一種制備一具有下式的化合物的方法其中R1為氫或低碳烷基；R2為一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分；R5及R6獨立為氫或一保護基團；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中各個出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；各個出現(xiàn)的RB獨立為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；及m為1、2、3或4，所述方法包括以下步驟使具有下式的化合物經(jīng)受一閉環(huán)置換反應條件56.如權(quán)利要求54所述的方法，其中一閉環(huán)置換反應的條件包括一Grubbs催化劑。57.如權(quán)利要求565所述的方法，其中所述Grubbs催化劑為三環(huán)己基膦[1，3-雙(2，4，6-三甲基苯基)-4，5-二氫咪唑-2-基亞基][亞芐基]氯化釕(IV)。58.一種制備一具有下式的化合物的方法其中R1為氫或低碳烷基；R2為一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分；R5及R6獨立為氫或一保護基團；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中各個出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；各個出現(xiàn)的RB獨立為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；及m為1、2、3或4，所述方法包括以下步驟還原一具有下式的化合物59.一種制備一具有下式的化合物的方法其中R1為氫或低碳烷基；R2為一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分；R5及R6獨立為氫或一保護基團；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中各個出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；各個出現(xiàn)的RB獨立為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；及m為1、2、3或4，所述方法包括以下步驟氧化一具有下式的化合物60.一種制備一具有下式的化合物的方法其中R1為氫或低碳烷基；R2為一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的芳基、雜芳基、芳基烷基或雜芳基烷基部分；R5及R6獨立為氫或一保護基團；X為O、S、C(R7)2或NR7，其中各個出現(xiàn)的R7獨立為氫或低碳烷基；各個出現(xiàn)的RB獨立為氫；鹵素；-ORB’；-SRB’；-N(RB’)2；-CY3、-CHY2、-CH2Y，其中Y為F、Br、Cl、I、ORB’、NHRB’、N(RB’)2或SRB’；-C(O)ORB’；-C(O)RB’；-CONHRB’；-O(C＝O)RB’；-O(C＝O)ORB’；-NRB’(C＝O)RB’；N3；N2RB’；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基，視情況經(jīng)一或多個以下基團取代氫；鹵素；-ORB′；-SRB′；-N(RB′)2；-C(O)ORB′；-C(O)RB′；-CONHRB′；-O(C＝O)RB′；-O(C＝O)ORB′；-NRB′(C＝O)RB′；N3；N2RB′；環(huán)狀縮醛；或環(huán)狀或非環(huán)狀、線性或具支鏈經(jīng)取代或未經(jīng)取代的脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基或雜芳基部分；或為一埃坡霉素、去氧埃坡霉素或其類似物；或為一聚合物；碳水化合物；光親和性標記物；或放射性標記物；其中各個出現(xiàn)的RB′獨立為氫；一保護基團；一線性或具支鏈、經(jīng)取代或未經(jīng)取代的、環(huán)狀或非環(huán)狀脂肪族基團、雜脂肪族基團、芳基、雜芳基、芳基烷基、芳基烯基、芳基炔基、雜芳基烷基、雜芳基烯基或雜芳基炔基部分；及m為1、2、3或4，所述方法包括以下步驟將具有以下結(jié)構(gòu)的一氧化膦或魏悌希試劑與一具有以下結(jié)構(gòu)的酮縮合其中R′及R″獨立為C1-8線性或具支鏈的鏈烷基、或一經(jīng)取代或未經(jīng)取代的苯基、芳基、烷氧基或芳氧基；及X為諸如氯化物或溴化物等的平衡離子。全文摘要本發(fā)明提供式(I)化合物如本文中一般所述及以類及次類形式所述。本發(fā)明另外提供包含式(I)化合物的醫(yī)藥組合物，并提供治療癌癥的方法，該些方法包括投予一式(I)化合物。文檔編號C07D313/00GK1759115SQ03822561公開日2006年4月12日申請日期2003年8月22日優(yōu)先權(quán)日2002年8月23日發(fā)明者賽繆爾·J·達尼謝夫斯凱,亞力克西·里夫金,吉村文彥,安娜·以斯貼·加瓦爾達·奧爾特加,朝永新,舒定朝,董華金申請人:索隆-基特林癌癥研究協(xié)會