專利名稱：在工業(yè)規(guī)模上純化α－羥基酸的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及在工業(yè)規(guī)模上純化α-羥基酸、尤其是乳酸或乙醇酸的方法以及通過該方法得到的最大手性純度的產(chǎn)物及其應(yīng)用。
乳酸通常以稀溶液或濃溶液的形式銷售，因為乳酸非常趨于形成分子間的酯(二聚乳酸和多聚乳酸)。另外，乳酸(甚至是非常純的乳酸)具有很強的吸濕性。根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)，在工業(yè)規(guī)模上純化乳酸(外消旋混合物、尤其是乳酸的對映體)是一個復(fù)雜、困難的過程。
如何以發(fā)酵方式生產(chǎn)乳酸或2-羥基丙酸已是公知的。乳酸的發(fā)酵生產(chǎn)通常首先包括在其中將含碳水化合物的底物諸如葡萄糖或蔗糖通過適當(dāng)?shù)奈⑸镛D(zhuǎn)化成乳酸的發(fā)酵步驟。生產(chǎn)(S)-乳酸的已知微生物是各種乳酸桿菌屬的細(xì)菌諸如干酪乳桿菌。另外，選擇性地生產(chǎn)(R)-乳酸的微生物也是公知的。然后將水性發(fā)酵產(chǎn)物進(jìn)行加工處理以得到乳酸。常用的工業(yè)加工處理途徑通常由生物質(zhì)的分離、隨后的酸化、純化和濃縮組成。
在(S)-乳酸的情況下，所得到的乳酸足夠純，可以用于人類消費的食品中。通過該常規(guī)方法最終得到的(S)-或(R)-乳酸可以達(dá)到98％的對映體純度甚至更高(即存在由98％或更高的(S)或(R)對映體組成的乳酸)。但是，產(chǎn)物仍含有殘余糖類。產(chǎn)物的顏色也是黃色的，一旦受熱，其通過雜質(zhì)分解而變成褐色至黑色。此外，在(S)-乳酸的情況下，在感官性能方面經(jīng)常有某些缺陷。因此，乳酸對映體在一定程度上適于在食物中的應(yīng)用，但基本上不適于藥物應(yīng)用以及手性化合物的合成。
產(chǎn)物的純度可以通過酯化及隨后的水解來提高，從而適于藥物應(yīng)用。但是，作為該酯化/水解的結(jié)果，對映體純度降低，并且乳酸仍含有少量的用于酯化的醇。純化乳酸的其它方法的例子包括將乳酸水溶液進(jìn)行一個或多個萃取、(蒸汽)蒸餾和/或蒸發(fā)步驟、電滲析步驟和結(jié)晶(例如，參見Ullmans Encyklopdie der Technischen Chemie，Verlag Chemie GmbH，Weinheim，第四版，第17部分，第1-7頁(1979)；H.Benninga，“乳酸的制造史”，Kluwer AcademicPublishers，Dordrecht-Boston-London(1990)；C.H.Holten，“乳酸、乳酸及衍生物的性質(zhì)和化學(xué)過程”，Verlag Chemie GmbH，Weinheim(1971)；The Merck Index，Merck & Co.，Inc.，第11版，第842頁(1989)；Rmmp Chemie Lexicon，G.Thieme Verlag，Stuttgart和New York，第9版，第4部分，第2792-2893頁(1991)和荷蘭專利申請1013265和1013682)。
在德國專利593,657(1934年2月15日授權(quán))中記載了實驗室的實驗，其中將含有過量S成分和幾乎沒有乳酸酐的乳酸水溶液通過薄膜蒸發(fā)技術(shù)濃縮，如果需要可以在減壓下濃縮。然后將濃乳酸溶液快速冷卻以形成晶體。將晶體與母液相分離，然后用乙醚洗滌并用乙酸乙酯或氯仿或可比溶劑反復(fù)重結(jié)晶，直到晶體的快速熔點為53℃。沒有報道手性純度或?qū)τ丑w過量以及顏色。
在H.Borsook，H.M.Huffman，Y-P.Liu，J.Biol.Chem.102，449-460(1933)中記載了實驗室的實驗，其中在大約0.13毫巴和105℃下將含有50％包含過量(S)-乳酸的乳酸、30％乳酸酐和乳酸二聚體和15％水的水性混合物進(jìn)行分餾。將中間餾分再次蒸餾，然后在冰/鹽浴中冷卻以形成固態(tài)結(jié)晶物質(zhì)。據(jù)報道，蒸餾必須以少量形式進(jìn)行，因為以大量形式進(jìn)行將因加熱時間變長而導(dǎo)致產(chǎn)物的大量損失。然后將該固態(tài)晶體物質(zhì)用等體積等量的二乙醚和二異丙醚重結(jié)晶三次，然后分離出晶體并在室溫下在真空干燥器中干燥。按照該方法可以得到熔點為52.7-52.8℃的(S)-乳酸，其含有小于0.1％的雜質(zhì)諸如水、乳酸酐或乳酸二聚體。沒有報道手性純度或?qū)τ丑w過量以及(S)-乳酸的顏色。
在L.B.Lockwood，D.E.Yoder，M.Zienty，Ann.N.Y.Acad.Sci.119，854(1965)中還記載了實驗室規(guī)模的乳酸蒸餾和結(jié)晶，所得到的光學(xué)純?nèi)樗岬娜埸c為54℃。沒有報道顏色。
在1934，Boehringer Ingelheim研究了乳酸的結(jié)晶，但是發(fā)現(xiàn)該方法因純化和進(jìn)一步處理的問題而沒有給出良好結(jié)果。但是，第二次世界大戰(zhàn)以后，才發(fā)現(xiàn)Boehringer Ingelheim能夠以約12至15噸/月的規(guī)模生產(chǎn)用于藥物應(yīng)用的乳酸，收率約為77至86％。在該方法中，將乳酸水溶液通過蒸汽蒸餾在減壓下(約13毫巴)進(jìn)行純化，接著在-25℃結(jié)晶，然后將晶體溶于水并將溶液用亞鐵氰化鉀(以除去重金屬)和活性炭處理。所生產(chǎn)的(S)-乳酸的手性純度或?qū)τ丑w過量或其它性能諸如顏色以及氣味都是未知的(參見H.Benninga，“乳酸的制造史”，Kluwer Academic Publishers，Dordrecht-Boston-London，第347-350頁(1990))。
結(jié)晶狀(S)-乳酸可以通過例如Fluka和Sigma銷售，其純度大于99％(參見例如M.L.Buszko，E.R.Andrew，Mol.Phys.76，83-87(1992)和T.S.Ing，A.W.Yu，V.Nagaraja，N.A.Amin，S.Ayache，V.C.Gandhi，J.T.Daugirdas，Int.J.Artif.Organs 17，70-73(1994))。水含量小于1重量％的結(jié)晶狀S-乳酸公開于EP A 563,455(參見實施例1)。乳酸的晶體結(jié)構(gòu)記載于A.Schouten，J.A.Kanters，J.van Krieken，J.Mol.Struct.323，165-168(1994)中。
乳酸還可以以合成的方式得到。這一點是公知的。但是，合成型生產(chǎn)方法的產(chǎn)物是含有等量(S)-乳酸和(R)-乳酸的外消旋混合物。盡管對映體的分開可以通過公知技術(shù)諸如非對映異構(gòu)體分離技術(shù)來進(jìn)行，其中對映體中的一種以鹽的形式結(jié)晶出來、然后將該鹽轉(zhuǎn)化回到對映體乳酸，但是最終得到的對映體產(chǎn)物將不可避免地仍含有大量的另一種對映體。
在歐洲專利申請552，255中報道了將工業(yè)品質(zhì)的乙醇酸通過將其溶液放入冷凍器中而進(jìn)行結(jié)晶以生成被濾出的晶體?？梢悦黠@地看出該方法不適于在工業(yè)規(guī)模上進(jìn)行。該方法也被申請在DE A2,810,975中。
在WO 00/56693中記載了在工業(yè)規(guī)模上純化乳酸的方法，該方法包括(a)減壓蒸餾濃乳酸溶液，該濃乳酸溶液的總酸含量至少為95重量％，單體乳酸含量至少為80重量％，按照濃乳酸溶液計算，乳酸對映體的比率不等于1，和(b)將所蒸餾的乳酸溶液進(jìn)行結(jié)晶以形成純?nèi)樗?，其中純?nèi)樗岬目偹岷恐辽贋?9重量％，單體乳酸含量至少為98重量％，手性純度為99％或更高，按照純?nèi)樗岬目偭坑嬎悖伾淮笥?0個APHA單位并具有可接受的氣味。
WO 00/56693的方法的缺點在于盡管收率相對來說不低，但還可以提高，該方法需要大量的能量并且必須蒸餾相對大量的酸。
本發(fā)明的目的在于解決這些問題并因此涉及在工業(yè)規(guī)模(即每年至少1000噸的規(guī)模)上純化α-羥基酸的方法，其中將其顏色(新制備的)不大于10,000個APHA的α-羥基酸進(jìn)行(a)結(jié)晶步驟以及隨后的(b)蒸餾步驟。
本領(lǐng)域的專家可以清楚地看出，本發(fā)明的方法可以包括兩個或多個結(jié)晶步驟和/或兩個或多個蒸餾步驟。但是，本發(fā)明優(yōu)選僅僅進(jìn)行一個結(jié)晶步驟，因為不然的話在能量方面的優(yōu)點將減少。
本發(fā)明的方法的優(yōu)點在于相對低的能耗。這主要是因為在結(jié)晶過程中除去相對大量的雜質(zhì)并且得到含有少量水(通常小于1重量％)的產(chǎn)物(按照全部產(chǎn)物計算)，所以易于蒸餾(僅在熔化之后)。此外，為得到等量終產(chǎn)物而必須進(jìn)行蒸餾的進(jìn)料量大大減少。
α-羥基酸是指在碳原子上被羥基取代的碳酸。因此，α-羥基酸的通式如下
其中R可以是氫原子、C1-C5烷基(優(yōu)選甲基)、C6-C12芳基或雜環(huán)環(huán)烷基或-芳基。本發(fā)明的α-羥基酸優(yōu)選為乳酸(R是甲基)或乙醇酸(R是氫)，特別是乳酸。
該方法的進(jìn)料的優(yōu)選特征在于顏色(新制備的)不大于7500APHA、特別是不大于5000APHA，相對于全部進(jìn)料的總酸含量至少為70重量％，相對于全部進(jìn)料的游離酸含量至少為60重量％。如果α-羥基酸是乳酸，進(jìn)料優(yōu)選具有的總酸含量至少為80重量％、游離酸含量至少為70重量％。進(jìn)料的特征還在于總氮含量不大于10,000ppm、優(yōu)選不大于5,000ppm，殘余糖類(主要是多糖)的總量不大于20,000ppm，優(yōu)選不大于10,000ppm，其中在本文中表示的所有含量均相對于全部進(jìn)料。如果可應(yīng)用的話，進(jìn)料的手性純度至少為90％且優(yōu)選至少為95％。
總酸含量(TA)是分子間的酯鍵與過量堿進(jìn)行皂化后的酸含量，采用返滴定法用酸測定。因此，總酸含量給出了單體、二聚體和多聚體乳酸的量。游離酸含量(FA)通過直接滴定法用堿測定，也就是在分子間酯基團(tuán)的皂化之前。在本文中將單體乳酸(MM)的含量定義為MM＝TA-2×(TA-FA)只要TA-FA＜10％。這意味著不存在非常多的二聚體或多聚體乳酸。還假定了非單體乳酸以乳酰乳酸(二聚體)的形式存在。
在本文中將手性純度(對于過量的(S)-異構(gòu)體)定義為手性純度＝100％×{((S)-異構(gòu)體)/((R)-異構(gòu)體+(S)-異構(gòu)體)}公知的結(jié)晶技術(shù)原則上可應(yīng)用于本發(fā)明的方法。該技術(shù)的例子是熔化結(jié)晶(或者冷卻結(jié)晶)，其中將例如含有熔化態(tài)的(S)-乳酸或(R)-乳酸的濃縮的液體濃縮液或蒸餾液直接冷卻，以便結(jié)晶出(S)-或(R)-乳酸。優(yōu)選將溫度維持在發(fā)生結(jié)晶的盡可能低的溫度(結(jié)晶溫度)，以便盡可能地限制α-羥基酸的低聚體和高聚體的形成。本發(fā)明優(yōu)選使用濃縮液，因為從工藝過程能量方面考慮，蒸餾液的制備是不利的。
熔化結(jié)晶是從被結(jié)晶物質(zhì)的熔化物中得到結(jié)晶狀物質(zhì)的過程。例如，該技術(shù)詳細(xì)地記載于Kirk-Othmer，Encyclopedia of ChemicalTechnology，第四版，第7部分，第723-727頁(1993)、J.W.Mullin，“結(jié)晶”，第三修訂版，Butterworth-Heinemann Ltd.，第309-323頁(1993)和J.Ullrich和B.Kallies，Current Topics in CrystalGrowth Research，1(1994)，在本文中記載上述文獻(xiàn)作為參考。熔化結(jié)晶相對于蒸餾的主要優(yōu)點在于需要非常少的能量，因為有機化合物的熔化焓通常低于蒸發(fā)焓。該優(yōu)點也出現(xiàn)在其它的結(jié)晶技術(shù)中，因為結(jié)晶焓通常低于蒸發(fā)焓。此外，熔化結(jié)晶相對于蒸餾的另一個優(yōu)點是該過程通常在非常低的溫度下進(jìn)行，當(dāng)有機化合物對熱不穩(wěn)定時，這是有利的。
熔化結(jié)晶可以借助于懸浮結(jié)晶或分層結(jié)晶進(jìn)行，如果需要還可以與洗滌塔或離心機或另一種純化技術(shù)相組合。適當(dāng)?shù)脑O(shè)備和工藝過程的例子記載于Kirk-Othmer，Encyclopedia of Chemical Technology，第四版，第7部分，第723-727頁(1993)、J.W.Mullin，“結(jié)晶”，第三修訂版，Butterworth-Heinemann Ltd.，第309-323頁(1993)和J.Ullrich和B.Kallies，Current Topics in Crystal GrowthResearch，1(1994)中，在本文中記載了上述文獻(xiàn)的內(nèi)容作為參考。
還已發(fā)現(xiàn)，水溶液的結(jié)晶給出了非常好的結(jié)果。在該結(jié)晶處理過程中，將濃乳酸溶液用水稀釋，然后將其進(jìn)行一個或多個冷卻和/或蒸發(fā)結(jié)晶步驟。在這些技術(shù)中，將濃縮液或蒸餾液直接冷卻(冷卻結(jié)晶)或通過蒸發(fā)水分濃縮(蒸發(fā)結(jié)晶)。在冷卻結(jié)晶技術(shù)中，結(jié)晶的驅(qū)動力是通過降低濃乳酸溶液的溫度而引起的濃乳酸溶液內(nèi)的過飽和。作為溶液溫度降低的結(jié)果，溶解度降低并發(fā)生過飽和。
在蒸發(fā)結(jié)晶技術(shù)中，結(jié)晶的驅(qū)動力是通過蒸發(fā)水分而引起的例如濃乳酸溶液內(nèi)的過飽和，因為必須供應(yīng)熱量以將濃乳酸溶液的溫度保持恒定。因此，分別通過冷卻和蒸發(fā)水分可以有效地除去結(jié)晶的熱量。然后分別在冷卻和蒸發(fā)水分的過程中發(fā)生乳酸的結(jié)晶。
另一種非常適當(dāng)?shù)慕Y(jié)晶技術(shù)是絕熱結(jié)晶，其中結(jié)晶的驅(qū)動力是在沒有供給熱量的條件下通過蒸發(fā)水分而引起的例如濃乳酸溶液內(nèi)的過飽和。水分的蒸發(fā)具有兩個效果(a)濃乳酸溶液的溫度降低和(b)酸的濃度增加。這兩個效果引起溶解度的降低以及過飽和程度的增加。
本發(fā)明的結(jié)晶步驟優(yōu)選通過絕熱結(jié)晶或冷卻結(jié)晶、特別是通過絕熱結(jié)晶進(jìn)行。在結(jié)晶過程中將晶種優(yōu)選加入到進(jìn)料中。如果在結(jié)晶過程使用溶劑，則溶劑優(yōu)選為水。
然后通過已知的固-液分離法將結(jié)晶出的α-羥基酸與剩余液體或母液相分離。
用于從母液中分離α-羥基酸晶體的適當(dāng)分離技術(shù)是離心分離、傾析、過濾、利用一個或多個洗滌塔的分離，或者是這些技術(shù)中的兩個或多個的組合。在本發(fā)明的上下文中，已發(fā)現(xiàn)離心分離和利用一個或多個洗滌塔的分離是特別適當(dāng)?shù)摹?br> 所得到的母液仍含有大量的α-羥基酸。為了實現(xiàn)最佳的工藝過程管理，因此優(yōu)選將這些母液進(jìn)料回到工藝過程。
蒸餾步驟在減壓下進(jìn)行，利用總酸含量至少為95重量％、單體α-羥基酸含量至少為80重量％、水含量至多為2重量％的α-羥基酸，按照α-羥基酸計算。如果可應(yīng)用的話，α-羥基酸對映體之間的比率優(yōu)選不等于1。
在本發(fā)明的蒸餾步驟中，所形成的α-羥基酸的總酸含量至少為98重量％，優(yōu)選至少為99重量％，其中α-羥基酸含有至少95重量％的單體α-羥基酸，按照乳酸濃縮液和蒸餾殘余物計算。蒸餾的a羥基酸優(yōu)選含有至少98.5重量％的單體α-羥基酸。如果可應(yīng)用的話，α-羥基酸的手性純度優(yōu)選為90％或更高，更優(yōu)選95％或更高，特別是99％或更高。
在本發(fā)明的上下文中，“減壓”是指0.1至20毫巴、特別是0.2至10毫巴的壓力。在減壓下的蒸餾過程中，溫度優(yōu)選為100至200℃，特別是110至140℃。
高沸點雜質(zhì)在減壓下通過蒸餾除去，因為α-羥基酸是作為塔頂產(chǎn)物得到的。根據(jù)本發(fā)明，所述減壓蒸餾特別是借助于短程蒸餾器進(jìn)行。減壓下的蒸餾也可以在0.1至20毫巴、特別是2至10毫巴的壓力下在100至200℃、特別是在110至140℃的溫度下進(jìn)行，其中將α-羥基酸優(yōu)選通過膜蒸發(fā)而被帶入氣相，然后將蒸汽傳送至蒸餾塔。在該過程中，在回流下分成兩種餾分，塔頂產(chǎn)物含有至少98重量％的總酸類，優(yōu)選至少99重量％，殘余物含有殘余糖類和多聚α-羥基酸。塔頂產(chǎn)物含有至少95重量％的單體α-羥基酸，按照α-羥基酸濃縮液計算。塔頂產(chǎn)物優(yōu)選含有至少99.5重量％的單體α-羥基酸。該塔頂產(chǎn)物的手性純度優(yōu)選為90％或更高，更優(yōu)選95％或更高，特別是99％或更高。根據(jù)該優(yōu)選實施方案，膜蒸發(fā)優(yōu)選通過涂膜蒸發(fā)、薄膜蒸發(fā)和/或降膜蒸發(fā)進(jìn)行，蒸餾塔的塔板數(shù)為1至10。蒸餾步驟(a)保證α-羥基酸與諸如殘余糖類和多聚α-羥基酸的成分以及使得不純的α-羥基酸產(chǎn)生顏色的成分相分離。這些成分或污染物的沸點高于α-羥基酸的沸點。
分離后，將通過本發(fā)明的方法得到的α-羥基酸晶體直接溶于適當(dāng)?shù)娜軇ǔＪ撬苑乐拱l(fā)生吸濕性α-羥基酸晶體的凝結(jié)。所得到的乳酸溶液的濃度在原則上具有任何所需要的濃度。實際上其濃度通常從30％變化至95％。在市場上通常出現(xiàn)的濃度為80-90％。
本發(fā)明還涉及手性純度至少為99％、顏色不大于10個APHA單位的α-羥基酸或α-羥基酸溶液，α-羥基酸或α-羥基酸溶液具有可接受的氣味，特別是對于藥物應(yīng)用。在α-羥基酸溶液的情況下，溶劑優(yōu)選為水。手性純度優(yōu)選至少為99％，特別是至少為99.5％，這相當(dāng)于99％或更高的對映體過量(ee)。最優(yōu)選的是手性α-羥基酸或其溶液，它的手性純度至少為99.8％(也就是至少為99.6％的ee)。
α-羥基酸或α-羥基酸溶液還滿足如下要求□醇含量不大于250ppm(所述的醇是甲醇、乙醇或其它的醇，以醇自身的形式或以乳酸鹽的形式)。
□總氮含量不大于5ppm。
□總糖類含量不大于100ppm。
□有機酸(除了乳酸)含量不大于250ppm。
關(guān)于氣味，α-羥基酸或α-羥基酸溶液為應(yīng)用于食物而具有相當(dāng)大的改善，并且比現(xiàn)有技術(shù)的產(chǎn)品具有更高的化學(xué)純度。
根據(jù)發(fā)酵所用的微生物的不同，當(dāng)它是手性的時，本發(fā)明的α-羥基酸可以是(S)-α-羥基酸和(R)-α-羥基酸。
由于它們的手性純度高，所以(S)-α-羥基酸和(R)-α-羥基酸或其溶液都非常適用于手性合成。手性純的(S)-α-羥基酸或其溶液也非常適用于藥物制劑。
因此，本發(fā)明還涉及含有上述的(S)-α-羥基酸或(S)-α-羥基酸溶液的藥物制劑?，F(xiàn)通過如下實施例解釋說明本發(fā)明。
實施例將具有如下性質(zhì)的(S)-乳酸用作原料
在第一結(jié)晶步驟中，將雙壁2.7升容器與恒溫浴連接并將2045g上述原料放入容器中。在攪拌下將酸冷卻至40℃并用0.4g含有晶種的懸浮液接種。然后按照線性冷卻程序在5小時內(nèi)將酸從40℃冷卻至30℃。所形成的晶體是桿型并形成許多小微粒。5小時后，恒溫浴的溫度為30℃，酸的晶體懸浮液的溫度為31.9℃。將懸浮液離心分離(Sieva實驗室離心機，Hermle)。得到831g晶體和1061g母液(收率為46％，按照乳酸計算)。將結(jié)晶的一些晶體溶于水(90％溶液)并分析溶液。結(jié)果表示在下表中。
將以上得到的125g晶體在微波爐中熔化并將液體放入短程蒸餾器(KDL-4)中。條件如下油浴溫度120℃，進(jìn)料速率15ml/min，壓力1毫巴，轉(zhuǎn)速250r.p.m，冷卻水是自來水。
得到94.4g蒸餾液和13.3g殘余物。將蒸餾液用水稀釋，直至得到90％溶液，并分析該溶液的顏色。顏色(新制備的)6APHA。顏色(加熱后)5APHA。
權(quán)利要求
1.在工業(yè)規(guī)模上純化α-羥基酸的方法，其中將顏色(新制備的)不大于10,000個APHA單位的α-羥基酸進(jìn)行(a)結(jié)晶步驟以及隨后的(b)蒸餾步驟。
2.權(quán)利要求1所述的方法，其中α-羥基酸是乳酸或乙醇酸。
3.權(quán)利要求2所述的方法，其中α-羥基酸是乳酸。
4.前述權(quán)利要求中的任何一項所述的方法，其中步驟(a)包括兩個結(jié)晶步驟。
5.權(quán)利要求4所述的方法，其中結(jié)晶步驟在一個裝置中進(jìn)行。
6.前述權(quán)利要求中的任何一項所述的方法，其中步驟(a)在冷卻結(jié)晶裝置、熔化結(jié)晶裝置、蒸發(fā)結(jié)晶裝置和/或絕熱結(jié)晶裝置中進(jìn)行。
7.前述權(quán)利要求中的任何一項所述的方法，其中通過固-液分離法，優(yōu)選離心分離法或借助于一個或多個洗滌塔將步驟(a)的產(chǎn)物物流分離成母液和α-羥基酸晶體。
8.前述權(quán)利要求中的任何一項所述的方法，其中步驟(b)在一個或多個降膜蒸發(fā)器和/或薄膜蒸發(fā)器和/或涂膜蒸發(fā)器中進(jìn)行。
9.前述權(quán)利要求中的任何一項所述的方法，其中步驟(b)在短程蒸餾器中進(jìn)行。
全文摘要
本發(fā)明涉及在工業(yè)規(guī)模上純化α－羥基酸的方法，其中將顏色(新制備的)不大于10,000個APHA單位的α－羥基酸進(jìn)行(a)結(jié)晶步驟以及隨后的(b)蒸餾步驟。
文檔編號C07C59/08GK1630628SQ01818873
公開日2005年6月22日 申請日期2001年9月14日 優(yōu)先權(quán)日2000年9月15日
發(fā)明者揚·范克里肯 申請人:普拉克生化公司