專利名稱：：診斷或治療用途的靶向脂質(zhì)體構(gòu)建物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明通常涉及用于釋放具有生物活性的治療或診斷試劑的脂質(zhì)體構(gòu)建物。本發(fā)明尤其涉及含生物胺的高度完整的脂質(zhì)體構(gòu)建物及其藥用組合物，以及其用于治療疾病的方法。相關(guān)技術(shù)現(xiàn)有技術(shù)已經(jīng)記載了用于把藥理活性物質(zhì)釋放到宿主的各種脂類制劑及其制備方法。Geho和Lau在美國4,603,044號(hào)專利中記載了一種靶向脂質(zhì)體釋放系統(tǒng)，用于把藥物釋放到肝中的肝膽管受體。該系統(tǒng)的組成是以載體或脂質(zhì)體形式的脂類膜結(jié)構(gòu)包封的或者與該脂類膜結(jié)構(gòu)相連的藥物或診斷試劑；含有與載體壁相連的脂肪取代基和屬于膽汁引誘化學(xué)品如取代亞氨基二乙酸酯絡(luò)合物的靶取代基的分子。在I和II型糖尿病的治療中，該系統(tǒng)尤其分別用于胰島素和血清素的釋放。Geho在美國4,761,287號(hào)專利中記載了應(yīng)用肝細(xì)胞導(dǎo)向載體(HDV)把血清素釋放至肝中。該文不但表明了HDV-血清素構(gòu)建物可以把有效量的血清素釋放至肝，而且其效能比預(yù)料的高得多。Geho和Lau在美國4,836,896號(hào)專利中公開了以下內(nèi)容在供應(yīng)游離胰島素的同時(shí)，在肝細(xì)胞導(dǎo)向載體中胰島素的釋放可以使控制血糖所需要的胰島素每日總劑量非常明顯地降低。這些專利文獻(xiàn)的公開，以及所有關(guān)于這方面的其它專利文獻(xiàn)和出版物在此特別引入作為參考。發(fā)明概述本發(fā)明的一個(gè)目的是提供一些方法用于改善脂質(zhì)體形式中診斷和治療試劑例如生物胺的儲(chǔ)存穩(wěn)定性和釋放效率。因此，本發(fā)明提供一種用于把診斷或治療試劑給藥至哺乳動(dòng)物的脂質(zhì)體構(gòu)建物，包括脂質(zhì)體載體、由脂質(zhì)體載體包封的或與該載體結(jié)合的治療或診斷試劑和分布在所述脂質(zhì)體載體中有效量的螯合劑；其中有效量的螯合劑用于減少該診斷或治療試劑在釋放之前從脂質(zhì)體構(gòu)建物中漏出。優(yōu)選地，脂質(zhì)體構(gòu)建物的表面連有靶向部分用于指引該構(gòu)建物到達(dá)預(yù)定部位。本發(fā)明還提供一種含可藥用賦形劑的脂質(zhì)體構(gòu)建物的藥用組合物及用其治療哺乳動(dòng)物疾病的方法，特別優(yōu)選的是用血清素或血清素激動(dòng)劑治療生物胺反應(yīng)性疾病，尤其是治療II型糖尿病。發(fā)明詳述廣義地說，本發(fā)明提供一種用于把診斷或治療試劑給藥至哺乳動(dòng)物的脂質(zhì)體構(gòu)建物，包括脂質(zhì)體載體、由脂質(zhì)體載體包封的或與該載體結(jié)合的治療或診斷試劑和分散在所述脂質(zhì)體載體中有效量的螯合劑；其中有效量的螯合劑用于減少該診斷或治療試劑在釋放之前從脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)中漏出。此處所用的具體的診斷或治療試劑并不能對(duì)本發(fā)明的范圍加以任何限制。任何容易被脂質(zhì)體包封或與之結(jié)合的試劑，如果這種結(jié)合有助于該試劑的釋放，則這種試劑是可用的，例如抗生素、抗抑郁劑、抗腫瘤發(fā)生試劑、抗病毒劑、細(xì)胞因子、激素、造影劑、神經(jīng)遞質(zhì)和興奮劑等。在一個(gè)實(shí)施方案中，診斷或治療試劑為生物胺，包括擬交感神經(jīng)胺、天然的兒茶酚胺和其模擬物及自體有效物質(zhì)。具有代表性的生物胺包括但不限于L-β-3，4-二羥基苯丙氨酸(L-DOPA)、3-(2-氨乙基)-5-羥基吲哚(5-羥色胺或血清素)、2-(4-咪唑基)乙胺(組胺)、4-[1-羥基-2-(甲氨基)乙基]-1，2-二羥基苯(腎上腺素)、1-[3，4-二羥基苯基]-2-氨基乙醇(去甲腎上腺素)、γ-氨基正丁酸、乙酰膽堿、血清素激動(dòng)劑和氨基酸。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，生物胺為血清素或血清素激動(dòng)劑。此處所用的術(shù)語“血清素類似物”或“血清素激動(dòng)劑”是指具有擬血清素活性的化合物，特別是作用于肝細(xì)胞的5-HT2A/2C受體且該相互作用被美西麥角所阻滯的化合物。本發(fā)明基于這樣一個(gè)發(fā)現(xiàn)通過在脂質(zhì)體中心腔(corevolume)中加載核苷酸衍生物、磷酸酯和磷脂?；姿狨パ苌?、或氨基酸聚合體結(jié)構(gòu)(這些物質(zhì)包封靶向脂質(zhì)體釋放系統(tǒng)中的生物活性物質(zhì)或與之螯合直至其釋放至預(yù)定部位)，可以在儲(chǔ)存期間或者隨后體內(nèi)給藥至恒溫動(dòng)物期間把生物胺從脂質(zhì)體構(gòu)建物中的漏出降低至最低限度。為了達(dá)到本發(fā)明的目的，不需要消除漏出，只需將其降低至耐受量，根據(jù)活性成分類型、其起始濃度、最終用途和儲(chǔ)存變量的不同，該耐受量可以變化。給藥至宿主后，在該被包封的試劑到達(dá)預(yù)定部位之前，其足以引起生理反應(yīng)的量從上述結(jié)構(gòu)中逸出，此時(shí)才認(rèn)為漏出是不利的。該脂質(zhì)體構(gòu)建物含有螯合劑，該螯合劑選自核苷酸衍生物、多磷酸酯衍生物、磷脂酰基磷酸酯衍生物和氨基酸聚合物。一般地說，螯合劑包括非擴(kuò)散陰離子聚合物。核苷酸衍生物包括但不限于腺苷5′-三磷酸(ATP)、胞苷5′-三磷酸(CTP)、鳥苷5′-三磷酸(GTP)、胸苷5′-三磷酸(TTP)、鳥苷5′-三磷酸(UTP)、腺苷5′-二磷酸(ADP)、胞苷5′-二磷酸(CDP)、鳥苷5′-二磷酸(GDP)、胸苷5′-二磷酸(TDP)、尿苷5′-二磷酸(UDP)、腺苷5′-一磷酸(AMP)、胞苷5′-一磷酸(CMP)、鳥苷5′-一磷酸(GMP)、胸苷5′-一磷酸(TMP)、尿苷5′-一磷酸(UMP)、腺苷5′-四磷酸、鳥苷5′-四磷酸和胸苷5′-四磷酸。氨基酸聚合物可以是例如天冬氨酸和谷氨酸的共聚物。多磷酸酯衍生物包括但不限于植酸、肌醇六磷酸和卵黃高磷蛋白。在一個(gè)實(shí)施方案中，脂質(zhì)體載體膜的一種成分為磷脂酰磷酸酯衍生物例如磷脂酸、磷脂酰二磷酸酯、磷脂酰三磷酸酯和磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸酯。脂質(zhì)體構(gòu)建物任選地具有一個(gè)靶向部分，該靶向部分結(jié)合到脂質(zhì)體構(gòu)建物的表面，與靶部位連有的受體相結(jié)合，例如膽汁引誘分子(biliary-attractedmolecule)。該膽汁引誘分子可以是取代的亞氨基二乙酸、乙二胺-N，N-二乙酸(EDDA)的N′-取代衍生物、肝膽染料、肝膽造影劑、膽汁鹽、肝膽硫醇絡(luò)合物、和肝膽絡(luò)合物(包括肝膽胺絡(luò)合物)。特定的例子包括但不限于N-(2，6-二異丙基苯基氨甲酰基甲基)亞氨基二乙酸、N-(2，6-二乙基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(2，6-二甲基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(4-異丙基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(4-丁基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(2，3-二甲基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(3-丁基苯基氨甲酰基甲基)亞氨基二乙酸、N-(2-丁基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(4-叔丁基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(3-丁氧基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(2-己氧基苯基氨甲酰基甲基)亞氨基二乙酸、N-(4-己氧基苯基氨甲酰基甲基)亞氨基二乙酸、偶氮基取代的亞氨基二乙酸、亞氨基二羧甲基-2-萘基酮、酞類氨羧絡(luò)合劑、N-(5-孕烯-3-β-醇-2-?；被柞；谆?亞氨基二乙酸、3a∶7a∶12a三羥基-24-降膽烷基-23-亞氨基二乙酸、N-(3-溴-2，4，6-三甲基苯基氨基甲酰基甲基)亞氨基二乙酸、苯并咪唑基甲基亞氨基二乙酸、N-(3-氰基-4，5-二甲基-2-吡咯基-氨基甲?；谆?亞氨基二乙酸、N，N-雙(-2-羥基-5-溴苯基)乙酸乙二胺、N′酰基和N′-磺?；叶?N，N-二乙酸、N′-乙酰基EDDA、N′-苯甲?；鵈DDA、N′-(對(duì)甲苯磺酰基)EDDA、N′-(對(duì)叔丁基苯甲?；?EDDA、N′-(苯磺?；?-EDDA、N′-(對(duì)氯苯磺?；?-EDDA、N′-(對(duì)乙基苯磺?；?EDDA、N′-(對(duì)正丙基苯磺酰基)EDDA、N′-(萘-2-磺?；?EDDA、N′-(2，5-二甲基苯磺?；?EDDA、N-(2-乙?；粱?亞氨基二乙酸、N-(2-萘基)甲基)亞氨基二乙酸、玫瑰紅、剛果紅、四溴酚酞磺酸鈉、溴酚藍(lán)、酚酞、甲苯胺藍(lán)、吲哚菁綠、膽影酸、碘甘卡酸、膽紅素、膽酰甘氨酰碘組胺、甲狀腺素葡萄糖醛酸化物、青霉胺、β-巰基異丁酸、dihydroehiocticacid、6-巰基嘌呤、乙氧丁酮醛雙(縮氨基硫脲)、1-肼酞嗪(肼苯噠嗪)磺酰脲、吡哆辛亞基谷氨酸酯、吡哆辛亞基異亮氨酸、吡哆辛亞基苯丙氨酸、吡哆辛亞基色氨酸、吡哆辛亞基5-甲基色氨酸、3-羥基-4-甲酰基-pyridene谷氨酸、四環(huán)素、7-羧基-β-羥基喹啉、phenolphthalexon、曙紅和verograffin。任選地，提供的脂質(zhì)體構(gòu)建物還含有與之緊密相連的掩蔽劑用于保護(hù)該結(jié)構(gòu)免受免疫反應(yīng)的攻擊，例如巨噬細(xì)胞的攻擊。本發(fā)明一種優(yōu)選的實(shí)施方案是提供一種用于把血清素或其激動(dòng)劑釋放至哺乳動(dòng)物肝中的脂質(zhì)體構(gòu)建物，包括脂質(zhì)體載體、由所述脂質(zhì)體載體包封或與之相連的血清素或血清素激動(dòng)劑、結(jié)合到脂質(zhì)體載體表面用于結(jié)合肝中肝膽受體的膽汁引誘分子和以有效量存在于所述脂質(zhì)體載體中用于降低血清素或脂質(zhì)體膜的泄漏的螯合劑。任選地，脂質(zhì)體構(gòu)建物含有與之緊密相連的掩蔽劑用于保護(hù)該結(jié)構(gòu)免受免疫反應(yīng)的攻擊。本發(fā)明還提供用于誘導(dǎo)哺乳動(dòng)物肝中血清素反應(yīng)的脂質(zhì)體構(gòu)建物的藥物組合物，包括脂質(zhì)體載體；由所述脂質(zhì)體載體包封或與之相連的血清素或血清素激動(dòng)劑；結(jié)合到所述脂質(zhì)體載體表面的靶向部分，該靶向部分含有與肝中肝膽受體結(jié)合的膽汁引誘分子；分散在所述脂質(zhì)體構(gòu)建物中的螯合劑，所述螯合劑以有效量存在用于降低血清素或血清素激動(dòng)劑在釋放至肝中之前從脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)中漏出；用于保護(hù)所述脂質(zhì)體載體免受免疫反應(yīng)攻擊的掩蔽劑和可藥用賦形劑。本發(fā)明的脂質(zhì)體構(gòu)建物和藥用組合物用于治療生物胺反應(yīng)性疾病。這些疾病包括例如高血壓、休克、心力衰竭、心律失常、哮喘、變態(tài)反應(yīng)、過敏反應(yīng)和糖尿病。本發(fā)明對(duì)于生物胺的釋放特別有用，生物胺作為強(qiáng)效的神經(jīng)遞質(zhì)，為了最大限度地降低或基本上消除其與那些非該構(gòu)建物靶部位的器官或組織的受體相互作用，它必須緊密螯合在脂質(zhì)體構(gòu)建物中。生物胺包括擬交感神經(jīng)胺即天然兒茶酚胺或模擬其作用的藥物，和作用于血清素受體用于引起肝葡萄糖儲(chǔ)存反應(yīng)的自體有效物質(zhì)。參見Goodman和Gilman，治療學(xué)的藥理學(xué)基礎(chǔ)(PharmacologicalBasisofTherapeutics)，第9版，Macmillan出版公司(1995)。這些神經(jīng)遞質(zhì)是水溶性的，在保持透過脂質(zhì)體膜遷移的能力中顯示極性。同樣，非常重要的還有這樣一個(gè)事實(shí)季胺例如腎上腺素和乙酰膽堿在一個(gè)寬pH范圍內(nèi)顯示正電荷，而其它神經(jīng)遞質(zhì)歸類為伯胺，它們只在生理pH值及其該pH值以下才產(chǎn)生完全的正電荷。由于帶正電荷的季胺或生理pH值下帶正電荷的伯胺使生物胺具有明顯的極性，因此生物胺顯示不同尋常的水活性，能夠透過脂質(zhì)體膜。因此，它們很難在脂質(zhì)體中心腔(corevolume)中存留任意一段時(shí)間。由于生物胺的主要功能，以及它們?cè)隗w內(nèi)作為神經(jīng)遞質(zhì)起作用，因此需要生物胺存留在脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)中。許多不同類型細(xì)胞含有生物胺并與生物胺相互作用，這些細(xì)胞包括不必與那些釋放活性試劑到達(dá)的細(xì)胞或器官有關(guān)的細(xì)胞。這些細(xì)胞包括神經(jīng)細(xì)胞、血小板、肥大細(xì)胞和腸嗜鉻細(xì)胞等。因此，如果結(jié)合到脂質(zhì)體中的生物胺沒有牢固地與脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)螯合或沒有牢固地存留在該結(jié)構(gòu)中，它就有可能從脂質(zhì)體中漏出，然后與具有同樣受體的其它類型細(xì)胞產(chǎn)生不希望發(fā)生的藥理學(xué)反應(yīng)。本發(fā)明還需要應(yīng)用“靶向”脂質(zhì)體載體?？梢酝ㄟ^把抗體、凝集素、肽類、蛋白質(zhì)、糖、糖蛋白和肝膽特異性試劑等加到脂質(zhì)體的表面來達(dá)到這種“靶向”的目的。本發(fā)明提供了幾種方式用于使生物胺在一段延長的時(shí)間內(nèi)有效地存留在脂質(zhì)體構(gòu)建物中或與該構(gòu)建物結(jié)合，以便阻止生物胺在儲(chǔ)存和給藥至宿主期間泄漏到脂質(zhì)體外部環(huán)境中。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，可以應(yīng)用存留在脂質(zhì)體中心腔中的螯合劑。在一個(gè)供選擇的實(shí)施方案中，可以應(yīng)用作為脂質(zhì)體載體膜成分的螯合劑。合適的螯合劑為核苷酸衍生物、帶負(fù)電荷的二羧酸衍生物，例如聚氨基酸聚合物和共聚物如聚(谷氨酸-天冬氨酸)氨基酸共聚物。還可應(yīng)用多磷酸酯聚合物、磷酸酯衍生物和磷脂酰磷酸酯化合物來與脂質(zhì)體中心腔中的生物胺螯合。磷脂酰磷酸酯衍生物例如磷脂酸和磷脂酰多磷酸酯衍生物例如磷脂酰二和三磷酸酯和磷脂酰肌醇4，5-二磷酸酯，當(dāng)加入這些物質(zhì)作為磷脂脂質(zhì)體膜的必要成分時(shí)，它們可以使該膜的內(nèi)表面和外表面分布負(fù)電荷，這樣不但有助于生物胺的螯合，而且使相鄰脂質(zhì)體載體間具有表面電荷排斥作用。通過應(yīng)用離子交換色譜可以除去脂質(zhì)體外表面螯合的所有生物胺。還發(fā)現(xiàn)了多磷酸酯化合物類型的其它化合物可以用作脂質(zhì)體構(gòu)建物中生物胺的螯合劑，這些化合物包括植酸、肌醇六磷酸和卵黃高磷蛋白(一種用磷酸酯衍生的蛋白質(zhì)，在約每三個(gè)氨基酸中有一個(gè)用磷酸酯官能團(tuán)酯化的絲氨酸殘基)。本發(fā)明的一個(gè)具體應(yīng)用可以用激素和神經(jīng)遞質(zhì)血清素來說明。生物胺例如血清素從脂質(zhì)體載體中泄漏可以引起非所希望的生物化學(xué)和生理學(xué)副作用，因?yàn)檫@些未螯合的神經(jīng)遞質(zhì)能夠與那些沒有指定活化的細(xì)胞受體相互作用。因此血清素從脂質(zhì)體中的漏出提高了不需要的結(jié)合或攝取神經(jīng)激素以及神經(jīng)傳遞的可能性。在早期的研究中，例如US4,716,287中記載，已經(jīng)表明為了足夠?qū)е轮委煼且葝u素依賴性糖尿病(II型)，需要應(yīng)用靶向脂質(zhì)體構(gòu)建物把激素血清素釋放到肝細(xì)胞中。這種激素的釋放，連同胰島素一起，用信號(hào)通知肝儲(chǔ)存血糖作為糖原。這種作用導(dǎo)致葡萄糖高血濃度的降低，并且減少了體內(nèi)其它組織和器官與高濃度葡萄糖的接觸。如果該激素從載體中泄漏，很難把正確的劑量釋放至肝，將會(huì)危及靶向釋放系統(tǒng)本來的用途。因此，在優(yōu)選的實(shí)施方案中，本發(fā)明涉及靶向脂質(zhì)體構(gòu)建物中生物胺例如血清素或血清素激動(dòng)劑的停留。如果脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)中加入的外源性血清素不能牢固地與脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)螯合或不能穩(wěn)定地停留在該結(jié)構(gòu)中，則血清素有可能從脂質(zhì)體中漏出，并且與其它顯示血清素受體的細(xì)胞類型產(chǎn)生非所希望的藥理學(xué)反應(yīng)。在一個(gè)特別優(yōu)選的實(shí)施方案中，把核苷酸腺苷5′-三磷酸(ATP)加入到脂質(zhì)體核中心腔中，促進(jìn)并增加了生物胺的包嵌或螯合。特別相關(guān)的是ATP-血清素絡(luò)合物。由于脂質(zhì)體載體的多路傳輸結(jié)構(gòu)、生物胺、螯合劑和任選的靶分子的復(fù)雜性，包嵌核苷的試劑和帶正電荷的胺之間的特異性化學(xué)相互作用尚未弄清楚。據(jù)推測，在脂質(zhì)體構(gòu)建物中形成了一種絡(luò)合物，例如ATP-血清素絡(luò)合物。這種結(jié)合認(rèn)為是這樣形成的血清素中帶正電荷的末端氨基和ATP中帶負(fù)電荷的磷酸酯基團(tuán)之間離子性結(jié)合，在生理pH值條件下引起配對(duì)電荷的相互作用，形成一種含有每一個(gè)ATP分子與四個(gè)血清素結(jié)合的絡(luò)合物。還可應(yīng)用其它的核苷酸，如上面所述。除核苷酸化合物外，氨基酸聚合物，例如二羧酸天冬氨酸和谷氨酸的聚合物，也被證實(shí)能在脂質(zhì)體構(gòu)建物中與生物胺螯合。這種天冬氨酸與谷氨酸共價(jià)結(jié)合的共聚物結(jié)構(gòu)產(chǎn)生一種能夠結(jié)合生物胺如血清素的陰離子“凹槽”(anionicsink)。本發(fā)明的脂質(zhì)體構(gòu)建物提供有用的藥用試劑用于把活性試劑給藥至宿主。因此，本發(fā)明的構(gòu)建物可以用作與藥用載體混合在一起的藥物組合物。此處記載的構(gòu)建物可以通過所需給藥的生物活性物質(zhì)的任何一種可接受的給藥方式給藥。這些方式包括口服、局部給藥、非腸道給藥、眼給藥、透皮給藥、鼻腔給藥以及其它全身或氣霧劑給藥。根據(jù)預(yù)定的給藥方式，所用的組合物可以是固體制劑、半固體制劑或液體制劑，例如片劑、栓劑、丸劑、膠囊、粉劑、液體制劑或混懸劑等，優(yōu)選適于精確劑量單次給藥的單位劑量形式。藥物組合物包括所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物和可藥用賦形劑，以及任選地可以包括其它醫(yī)用試劑、藥用試劑、載體和輔料等。由脂質(zhì)體構(gòu)建物、穿透增強(qiáng)劑(penetrationenhancer)和其它生物活性藥物或藥品組成的局部制劑可以有許多給藥途徑?？梢詮暮线m的給藥設(shè)備中把溶液滴加到合適的皮膚區(qū)域或者病變皮膚或粘膜上然后用手摩擦或者簡單地風(fēng)干?？梢栽谌芤褐屑尤牒线m的凝膠劑，把該制劑應(yīng)用到合適部位并用力擦入。或者，可以把溶液制劑加入到噴霧設(shè)備中作為噴霧劑給藥。這種藥物釋放設(shè)備特別適合用藥于大面積皮膚區(qū)域、高敏感性皮膚或者鼻腔或口腔。非腸道給藥通常方式是注射，包括皮下注射、肌肉注射或靜脈注射。注射劑可以是傳統(tǒng)的制劑形式，如溶液劑和混懸劑液體制劑，在注射前適合配成溶液或懸浮液的固體制劑，或者乳劑。合適的賦形劑例如水、生理鹽水、葡萄糖、甘油或乙醇等。另外，如果需要，給藥的藥物組合物還可含有少量非毒性輔料物質(zhì)例如濕潤劑或乳化劑和pH緩沖劑等，例如乙酸鈉、山梨醇單月桂酸酯、油酸三乙醇胺酯等。所給藥的活性化合物的量將依據(jù)下列因素而定治療的對(duì)象、疾病類型及嚴(yán)重程度、給藥方式和處方醫(yī)師的判斷。另外，如果劑型是用于達(dá)到緩釋效果，為了計(jì)算出合適的劑量，需要在緩釋裝置的整個(gè)期間積分總劑量。盡管所討論的具體生物活性成分的有效劑量取決于多種因素，并對(duì)于本領(lǐng)域普通技術(shù)人員來說一般是已知的，但通?？梢源_定一些劑量指導(dǎo)原則。對(duì)于大多數(shù)給藥方式，脂類成分懸浮于水溶液中，通常不超過總制劑的30％(w/v)。制劑的藥物成分最可能小于制劑的20％(w/v)，通常大于0.01％(w/v)。一般來說，局部給藥制劑可以制成凝膠、膏霜或溶液，其中活性成分含量為0.001-10％(w/v)、優(yōu)選0.01-5％、最優(yōu)選約1-約5％。(當(dāng)然，根據(jù)生物胺效能的不同，上述范圍可以變化，在合適的狀況下，該含量可以落入一個(gè)寬的范圍，例如0.001％-20％)。在所有這些舉例說明的制劑中，以及其它局部制劑，給藥的總劑量將取決于受損皮膚區(qū)域的面積和每天給藥次數(shù)。這些制劑可以根據(jù)需要按任意頻率給藥，但優(yōu)選不超過約每天3次。如果是口服給藥，通過加入任意常用的賦形劑來制備可藥用非毒性組合物時(shí)，這些賦形劑例如甘露糖醇、乳糖、淀粉、硬脂酸鎂、糖精鈉、滑石、纖維素、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、葡萄糖、明膠、蔗糖和碳酸鎂等。這些組合物包括溶液劑、混懸劑、片劑、可分散片劑(dispersibletablets)、丸劑、膠囊、粉劑和緩釋制劑等。優(yōu)選地，該組合物為丸劑或片劑。因此，除含有活性成分外，該組合物還含有稀釋劑例如乳糖、蔗糖或磷酸二鈣等；潤滑劑例如硬脂酸鎂等，粘合劑例如淀粉、阿拉伯膠、明膠、聚乙烯吡咯烷酮、纖維素及其衍生物等。可以制備液體制劑組合物，例如其制備方法為把如上所述的活性化合物和任選藥物輔料溶解或分散(以及其它方式等等)在載體(例如水、生理鹽水、葡萄糖水溶液、甘油、乙二醇和乙醇等)中，從而得到溶液或懸浮液。如果需要，藥用組合物還可以含有少量非毒性輔料例如濕潤劑、乳化劑或增溶劑和pH緩沖劑等，例如乙酸鹽、檸檬酸鈉、環(huán)糊精衍生物、山梨醇單月桂酸酯、三乙醇胺乙酸鈉和油酸三乙醇胺酯等。對(duì)本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員來說，這種制劑的實(shí)際制備方法是已知的或顯而易見的，例如，參見制劑科學(xué)和實(shí)踐(TheScienceandPracticeofPharmacy)，第19版.，1995(Mack出版公司.，Easton，PA)。在所有情況下，所給藥的藥物組合物含有足夠量的活性化合物例如血清素用于有效地治療患者的疾病或障礙。可以制備含有0.005-5％活性成分和由非毒性載體組成的平衡物質(zhì)的劑型或組合物。在這些制劑組合物中，活性成分的精確含量可以有較大變化，這取決于所含藥物的具體特性。然而，對(duì)于強(qiáng)效的藥，活性成分含量通常為0.01-5％，優(yōu)選0.05-1％，對(duì)于中等活性藥，含量為2-4％。對(duì)于固體制劑，溶液或混懸液(例如在碳酸丙烯酯、植物油或甘油三酯中)優(yōu)選用明膠膠囊包封。這些溶液劑及其制備和膠囊包封方法公開在美國專利US4,328,245、US4,409,239和US4,410,545中。對(duì)于液體制劑，溶液(例如在聚乙二醇中)可以用足夠量的可藥用載體如水進(jìn)行稀釋，以便容易定量給藥?；蛘?，可以通過把活性化合物或鹽溶解或分散在植物油、二醇、甘油三酯和丙二醇酯例如(丙二醇碳酸脂)等物質(zhì)中，并把這些溶液或混懸液包封在硬或軟明膠膠囊殼中來制備液體或半固體口服制劑。其它有用的制劑包括記載在美國專利號(hào)Re.28,819和4,358,603中。非腸道給藥的通常特征為注射，如皮下注射、肌肉內(nèi)注射或靜脈注射。注射用藥可以是傳統(tǒng)的制劑形式，作為溶液劑或混懸劑液體制劑，在注射前適合配成溶液或懸浮液的固體制劑，或者作為乳劑。合適的賦形劑例如水、生理鹽水、葡萄糖、甘油或乙醇等。另外，如果需要，給藥的藥物組合物還可含有少量非毒性輔料物質(zhì)例如濕潤劑或乳化劑、pH緩沖劑和增溶劑等，例如乙酸鈉、山梨醇單月桂酸酯、油酸三乙醇胺酯和環(huán)糊精等。最近發(fā)明的非腸道給藥途徑應(yīng)用慢釋(slow-release)或緩釋(sustained-release)系統(tǒng)的植入劑，這樣可維持恒定的劑量水平。參見例如美國專利US3,710,795。在這些非腸道給藥組合物中，活性化合物的百分比含量高度依賴于其具體的特性以及化合物活性和治療對(duì)象的需要。然而，在溶液劑中可以應(yīng)用0.01-5％含量的活性成分，如果組合物是固體再稀釋成上述百分比后，活性成分含量會(huì)更高。在溶液劑中，組合物優(yōu)選含有0.2-2％的活性成分。還可以給藥只有脂質(zhì)體構(gòu)建物或者結(jié)合可藥用賦形劑的脂質(zhì)體構(gòu)建物的鼻腔給藥溶液。只含有脂質(zhì)體構(gòu)建物或者含惰性載體如乳糖與脂質(zhì)體構(gòu)建物的脂質(zhì)體制劑還可以給藥至呼吸道，給藥形式為氣霧劑或噴霧溶液、或者為吹入劑微粉。這樣制劑的粒徑小于50微米，優(yōu)選小于10微米。在含有生物胺和螯合劑的脂質(zhì)體中，可以通過常規(guī)穩(wěn)定性測試確定該脂質(zhì)體的泄漏，可以在類似于儲(chǔ)存條件的對(duì)照儲(chǔ)存環(huán)境中進(jìn)行，也可以在生理流體中進(jìn)行，這取決于預(yù)定的脂質(zhì)體構(gòu)建物的釋放方式。根據(jù)具體的應(yīng)用，制備或加載脂類可以根據(jù)此處公開的方法進(jìn)行，還可以按照美國專利US4,946,787；4,603,044和5,104,661記載的方法進(jìn)行，這些專利在此引入作為參考。本發(fā)明的含水脂質(zhì)體制劑一般含有0.01-10％(重量比，即每毫升含100mg藥物)的活性試劑、1-20％(重量比)的含有螯合劑的脂類(螯合劑為脂類重量的1-100％)和水溶液，任選含有鹽和緩沖液，其量為使制劑達(dá)到100％體積。特別優(yōu)選的制劑包括0.1-5％的活性試劑和含占其脂類重量50％或更多比例螯合劑的脂類成分。最優(yōu)選的制劑包括1-5％(重量比)的活性成分、高達(dá)20％(重量比)的脂類成分(同樣該脂類含有10-100％(重量比)的螯合劑)，和水溶液(適量)足以構(gòu)成100％體積。所有這些制劑中，螯合劑和生物胺的電荷之比至少需要1∶1。非常優(yōu)選地，相對(duì)于生物胺有至少50％以上的殘余電荷(聚合物和非聚合物)以確保足夠的螯合效率。實(shí)施例1、含血清素-ATP絡(luò)合物的肝細(xì)胞導(dǎo)向脂質(zhì)體的制備腺苷5′-三磷酸(ATP)作為血清素的脂質(zhì)體螯合劑，脂類膜的成分是69.0mg的1，2-二硬脂?；?sn-甘油-3-磷脂酰膽堿(二硬脂酰基卵磷脂)和14.0mg的三十二烷基磷酸酯(均來自AvantiBiochemicals)；1.0mgN-(2，6-二異丙苯基氨基甲?；谆?亞氨基二乙酸和5.0mg膽固醇(均來自SigmaChemicalCo.)。脂類成分用1.5ml的氯仿-甲醇(2∶1，v/v)(試劑購自AldrichChemicalCo.)溶解。把樣品置于Buchi旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)計(jì)(Buchirotoevaporator)中，在60℃溫度的吸氣器真空下緩慢旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至干。然后制備2.4ml含有4.2mg/ml人血清白蛋白、10mg/ml血清素和至少14.4mg/mlATP的新鮮制備且pH為7.4的40mM磷酸鈉溶液(所有試劑來自SigmaChemicalCo)，將該溶液加到干燥的脂類成分中。應(yīng)用裝有傳感器和杯形喇叭的熱系統(tǒng)超聲/細(xì)胞破壞器(HeatSystem/cellDisrupter)在60℃下以標(biāo)度4#對(duì)上述樣品進(jìn)行聲處理15分鐘。然后該樣品在60℃下慢速轉(zhuǎn)動(dòng)下退火處理15分鐘以使脂質(zhì)體膜變得更完整和更穩(wěn)定。用TriacClinicalCentrifuge在血標(biāo)度(bloodsetting)處于室溫下離心樣品15分鐘，然后用1.5×25.0cmSephadexG-100-120柱(預(yù)先用40mM的pH7.4磷酸鹽緩沖液平衡)對(duì)1.5ml上清液進(jìn)行色譜處理。第一次色譜處理用于除去未被包封的血清白蛋白和血清素-ATP絡(luò)合物。收集脂質(zhì)體，對(duì)于起始濃度的N-(2，6-二異丙苯基氨基甲?；谆?亞氨基二乙酸，它們與5倍摩爾過量的氯化鉻六水合物反應(yīng)。純化后含血清素-ATP絡(luò)合物的脂質(zhì)體再與5倍摩爾過量的N-(2，6-二異丙苯基氨基甲?；谆?亞氨基二乙酸靶分子反應(yīng)。然后應(yīng)用同樣的緩沖液對(duì)脂質(zhì)體再進(jìn)行色譜處理以除去未反應(yīng)的靶分子。在5℃用氮?dú)獗Ｗo(hù)下儲(chǔ)存該脂質(zhì)體。在給藥至恒溫宿主動(dòng)物之前，用40mMpH7.4的磷酸緩沖鹽溶液對(duì)這些含血清素-ATP絡(luò)合物的肝細(xì)胞導(dǎo)向脂質(zhì)體進(jìn)行稀釋。在給藥至宿主動(dòng)物前的正常儲(chǔ)存條件下，希望脂質(zhì)體不顯示血清素的泄漏。并且，當(dāng)在生理pH值溶液中維持脂質(zhì)體構(gòu)建物相當(dāng)于血清素在肝中顯示生理作用的時(shí)間期間(如美國專利4,603,044所述)，希望脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)不顯示明顯的泄漏?？梢园凑彰绹鴮＠鸘S4,603,044中記載的方法把該脂質(zhì)體構(gòu)建物釋放至宿主動(dòng)物，可以預(yù)期該脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)在所描述的試驗(yàn)中顯示活性。實(shí)施例2高壓液相色譜(HPLC)方法在下列色譜試驗(yàn)中，應(yīng)用AlltechHPLC系統(tǒng)，用紫外檢測器在230nm處檢測。移動(dòng)相為5mMpH為4.5的三乙胺，含乙酸90％(v/v)-乙腈10％(v/v)。流速為1.0ml/min。應(yīng)用10μl和100μl的注射量制成從0-100ppm到0-0.01ppm的標(biāo)準(zhǔn)曲線。所有曲線顯示線性響應(yīng)。實(shí)施例3在脂質(zhì)體中被動(dòng)加載5-羥色胺肌酸酐硫酸酯(5-HTCS)16小時(shí)，再進(jìn)行泄漏速率的研究。5-羥色胺肌酸酐硫酸酯(5-HTCS)原料配制成1.0mg/ml(2.58mM)。HDV-D198A是一種干燥成無定形殼皮的脂類成分混合物，其包括二硬脂?；蚜字?DSL)、膽固醇(CHOL)、三十二烷基磷酸酯(DCP)和鉻-雙-[N-(2，6-二異丙苯基氨基甲?；谆?亞氨基二乙酸](晶體)。(由HDV-D198A)形成的載體為肝細(xì)胞導(dǎo)向載體(HDV).)以1.3mg脂類/升的量把HDV-D198A加入到5-HTCS溶液中，被動(dòng)加載16小時(shí)。應(yīng)用20mMpH7.0的PO4緩沖液和PD10柱進(jìn)行四次色譜處理。合并各部分。將其進(jìn)行HPLC分析，用濃度最大的管子進(jìn)行研究。應(yīng)用#5號(hào)管，其具有連有脂質(zhì)體部分的24.7μg/ml的5-HTCS。結(jié)果顯示于下表實(shí)施例4用脂質(zhì)體主動(dòng)加載ATP3.6mg/mlATP(6.5mM)溶于20mM含14.15mg/mlHDV-D198A和50μl14CATP且pH為7.0的PO4緩沖液中，在60℃下經(jīng)30分鐘的水合作用后，在60℃下通過1.5分鐘的聲處理主動(dòng)加載該溶液。應(yīng)用SepharoseCL-6B柱對(duì)1.0ml樣品進(jìn)行色譜處理，收集1.5ml的組份。結(jié)果在11根含有脂類部分的管中發(fā)現(xiàn)有24.8μgATP。總ATP回收率為92.7％。連有脂質(zhì)體部分的ATP的百分比為0.7％。實(shí)施例5、在脂質(zhì)體中被動(dòng)加載5-羥色胺鹽酸鹽(5-HTHCl)，再應(yīng)用空白預(yù)先聲處理脂質(zhì)體在第2、16、40和60小時(shí)進(jìn)行泄漏速率研究。以28.3mg/ml的濃度制備10.0mlHDV-D198A儲(chǔ)備液，在60℃下進(jìn)行水合反應(yīng)30分鐘。然后，樣品分成1.0ml的等分試樣，在60℃下進(jìn)行聲處理1.0分鐘，大?。?9.6nm。制備6.0mg/ml5-羥色胺鹽酸鹽(5-HTHCl)的儲(chǔ)備液，加入到脂質(zhì)體制劑中。應(yīng)用等體積的5-HTHCl和脂類。因此，最終濃度為14.15mg/mlHDV和3mg/ml5-HTHCl(14.1mM)。該樣品被動(dòng)加載16小時(shí)。混合后大?。?32.5nm在總脂類部分中發(fā)現(xiàn)123.4μg或4.11％的5-HTHCl。合并#8號(hào)和#9號(hào)管用于泄漏速率研究，在#8號(hào)和#9號(hào)管合并后的樣品中發(fā)現(xiàn)55.7μg5-HTHCl/ml。應(yīng)用1.0ml等分試樣進(jìn)行4次色譜處理。用pH7.0的10mM4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸(HEPES)緩沖液平衡SephadexG25短柱。把由#8號(hào)和#9號(hào)管合并后得到的55.7μg5-HTHCl/ml用于研究作為時(shí)間函數(shù)的泄漏速率，結(jié)果列于下表中實(shí)施例6在含濃度為14.5mg脂類/ml的脂類的2.0mg5-HTHCl/ml(9.45mM)中，應(yīng)用pH7.0的10mM4-(2-羥乙基)-1-哌嗪乙烷磺酸(HEPES)緩沖液進(jìn)行5-HTHCl的泄漏速率研究。在60℃的溫度下，56.6mgHDV-D198A在2.0mlpH7.0的10mMHEPES緩沖液中水合30分鐘。脂類儲(chǔ)備液的濃度為28.8mg脂類/ml。8.0mg5-HTHCl溶解于1900μlpH7.0的10mMHEPES緩沖液中，加入100μl14C5-HTCS使總體積達(dá)到2.0ml。5-HTHCl儲(chǔ)備液的濃度為4.0mg5-HTHCl/ml。加入500μl等分試樣的脂類儲(chǔ)備液和500μl的5-HTHCl儲(chǔ)備液，混合，60℃溫度下在聚碳酸酯管中進(jìn)行聲處理1.0分鐘。最終濃度為2.0mg5-HTHCl/ml(9.4mM)和14.15mg脂類/ml。在SephadexG25短柱上對(duì)三份獨(dú)立的1.0等分試樣的聲處理后的樣品進(jìn)行色譜處理。合并小管，進(jìn)行放射化學(xué)分析。結(jié)果列于下表<</table></tables>用#4號(hào)管進(jìn)行泄漏速率研究，起始濃度為84.5mg5-HTHCl/ml。取1.0ml在SephadexG25短柱上進(jìn)行色譜處理，結(jié)果列表如下上表中從t＝20樣品的#4號(hào)管應(yīng)用SephadexG25短柱進(jìn)行色譜分析，以確定是否有5-HT存留在脂類中。對(duì)#4號(hào)管的起始分析顯示在該管中有19.2μg5-HTHCl/ml。色譜結(jié)果列于下表實(shí)施例7應(yīng)用M-110微流化器(microfluidizer)在脂質(zhì)體中加入5-HTHCl在60℃下，在37.5mlpH7.0的10mMHEPES緩沖液(28.3mg/ml)中，應(yīng)用Büchi旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)計(jì)(BüchiRotoelevaporator)對(duì)1.0613gmHDV-D198A進(jìn)行水化作用30分鐘。把150mg5-HTHCl溶于37.5mlpH為7.0的10mMHEPES緩沖液(4.0mg/ml)中。把5-HTHCl儲(chǔ)備液加入到脂類儲(chǔ)備液中，在60℃下攪拌5分鐘以達(dá)到所需溫度。在60℃，用150ml以0.2μm濾器過濾的milliQ去離子水預(yù)熱該流化器。剪切壓設(shè)置在14000psig。把5-HT脂類混合物通過流化器兩次，剪切壓和頭壓(headpressure)分別為12000psig和60psig。應(yīng)用無菌技術(shù)使該制劑濾過0.2μmacrocap過濾器。該樣品很容易透過該過濾器。5-HTHCl的最終濃度為2.0mg/ml(9.4mol/ml)。HDV的最終濃度為14.15mg/ml。該制劑為半透明狀，略微帶點(diǎn)藍(lán)色。該制劑的加載和存留特性列于下表應(yīng)用含80-82μg5-HTHCl/ml從開始色譜中合并的脂類進(jìn)行其它泄漏速率研究，研究結(jié)果列于下表實(shí)施例8在HDV脂質(zhì)體制劑中，用磷脂酸(PA)代替三十二烷基磷酸酯(DCP)實(shí)施例2高壓液相色譜(HPLC)方法在下列色譜試驗(yàn)中，應(yīng)用AlltechHPLC系統(tǒng)，用紫外檢測器在230nm處檢測。移動(dòng)相為5mMpH為4.5的三乙胺，含乙酸90％(v/v)-乙腈10％(v/v)。流速為1.0ml/min。應(yīng)用10μl和100μl的注射量制成從0-100ppm到0-0.01ppm的標(biāo)準(zhǔn)曲線。所有曲線顯示線性響應(yīng)。實(shí)施例3在脂質(zhì)體中被動(dòng)加載5-羥色胺肌酸酐硫酸酯(5-HTCS)16小時(shí)，再進(jìn)行泄漏速率的研究。5-羥色胺肌酸酐硫酸酯(5-HTCS)原料配制成1.0mg/ml(2.58mM)。HDV-D198A是一種干燥成無定形殼皮的脂類成分混合物，其包括二硬脂酰基卵磷脂(DSL)、膽固醇(CHOL)、三十二烷基磷酸酯(DCP)和鉻-雙-[N-(2，6-二異丙苯基氨基甲酰基甲基)亞氨基二乙酸](晶體)。(由HDV-D198A)形成的載體為肝細(xì)胞導(dǎo)向載體(HDV).)以1.3mg脂類/升的量把HDV-D198A加入到5-HTCS溶液中，被動(dòng)加載16小時(shí)。應(yīng)用20mMpH7.0的PO4緩沖液和PD10柱進(jìn)行四次色譜處理。合并各部分。將其進(jìn)行HPLC分析，用濃度最大的管子進(jìn)行研究。應(yīng)用#5號(hào)管，其具有連有脂質(zhì)體部分的24.7μg/ml的5-HTCS。結(jié)果顯示于下表實(shí)施例4用脂質(zhì)體主動(dòng)加載ATP3.6mg/mlATP(6.5mM)溶于20mM含14.15mg/mlHDV-D198A和50μl14CATP且pH為7.0的PO4緩沖液中，在60℃下經(jīng)30分鐘的pH為7.0的10mMHEPES水化30分鐘得到脂類儲(chǔ)備液A。把15.6mg卵黃高磷蛋白和20.0mg5-HTHCl溶于5mlpH為7.0的10mMHEPES緩沖液中制備儲(chǔ)備液B。500μl脂類儲(chǔ)備液A和500μl脂類儲(chǔ)備液B在60℃下進(jìn)行聲處理1.0分鐘。最終濃度脂類14.15mg/ml5-HTHCl2.0mg/ml(9.4mol/ml)卵黃高磷蛋白1.6mg/ml(9.4mol/ml)大?。?40.8nmpH＝6.5用10mMpH7.0的HEPES平衡PD-10柱，對(duì)1.0ml的最終制劑進(jìn)行色譜分離。實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于下表<實(shí)施例10應(yīng)用聚(α谷氨酸-α賴氨酸)摩爾比60∶40，MW23,000的實(shí)驗(yàn)。谷氨酸/賴氨酸殘基的分子量為293.3(用于計(jì)算Glu的克分子濃度)。在60℃下，用2.0mlpH7.0的10mMHEPES緩沖液對(duì)56.6mgHDV-D198A進(jìn)行水化30分鐘來制備脂類儲(chǔ)備液A。把4.0mg5-HTHCl和3.0mg聚(Glu-Lys)溶于2.0mlpH7.0的10mMHEPES緩沖液中用于制備儲(chǔ)備液B。在60℃下，用500μl脂類儲(chǔ)備液A和500μl儲(chǔ)備液B在聚碳酸酯管中用聲處理1.0分鐘。最終制劑脂類14.15mg/ml5-HTHCl9.4μmoles/ml5-HT2.0mg/mlPolyGlu1.5mg/mlPolyGlu5.1μmoles/ml大?。?17nmpH＝6.4用10mMpH7.0的HEPES緩沖液平衡PD-10柱，對(duì)1.0ml的最終制劑進(jìn)行色譜分離。實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于下表<5-HTHCl在脂類峰中的色譜帶是對(duì)稱的。將含106μg5-HTHCl/ml和聚(Glu-Lys)的初始色譜處理所得管4在室溫培養(yǎng)24小時(shí)后進(jìn)行色譜處理，將1.0ml管4樣本在室溫培養(yǎng)24小時(shí)后用在10mMpH為7.0的HEPEs緩沖液中平衡的PD-10柱進(jìn)行色譜分析。實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于下表<實(shí)施例116.5mM5-HTCS和6.5mMATPNa2的被動(dòng)加載。20mMpH7.0PO4緩沖液ATP濃度＝3.6mg/ml(6.5mM)5-HTCS濃度＝2.5mg/ml(6.5mM)HDV脂質(zhì)體濃度＝750μl濃度為14.15mg/ml的脂質(zhì)體溶液加到10ml緩沖液中＝1.06mg脂類/ml。把25mg5-HT和35.8mgATP加入到10mlpH7.0的20mMPO4緩沖液中。把750μl脂質(zhì)體加入到10ml溶液中，室溫下孵育97小時(shí)。在10DG柱(1.5×11.5cm)上對(duì)1ml溶液進(jìn)行色譜分離。按1ml的體積收集。保留最濃的部分(管5)用于進(jìn)一步的時(shí)間研究。在第0小時(shí)第一次色譜—加載的22.8μg5-HTCS或22.8μg5-HTCS÷2,500μg5-HTCS×100＝0.91％連有脂質(zhì)體部分第3.5小時(shí)第二次色譜—剩下87％(在管5的13.1μg中有11.4μg)第16小時(shí)剩下52％(在管5的13.1μg中剩下6.8μg)實(shí)施例12主動(dòng)加載1.0mMATP和主動(dòng)加載3.0mM5-HTHClpH7.0的10mMHEPES緩沖液ATP濃度＝0.55mg/ml(1mM)5-HTHCl濃度＝0.65mg/ml(3mM)脂質(zhì)體濃度＝14.15mg/ml膽固醇(14C)油酸酯濃度＝50μl28.3mgHDV-D198A加入到已經(jīng)在25ml圓底燒瓶中真空干燥以蒸發(fā)掉甲苯的50μl膽固醇(14C)油酸酯中。把脂類溶于1.0ml氯仿-甲醇(2∶1v∶v)中，然后用2mlHEPES緩沖液水化。脂類最終濃度為14.15mg/ml。把混合物按一次1毫升進(jìn)行聲處理30秒，慢慢加入1.0ml的ATP5-HT溶液，同時(shí)再進(jìn)行聲處理60秒。在CL-6BSepharose柱(2×20cm)上分離三份1.0ml的等分體積試樣。合并兩個(gè)最濃部分。在時(shí)間0時(shí)開始在PC-10柱(1.5×5.5cm)進(jìn)行色譜分離，按1.0ml的體積收集。時(shí)間0第1次色譜——18μg或2.8％(0.65mg/ml)加載的5-HTHCl，576μg游離的5-HTHCl在ATP部分中發(fā)現(xiàn)的1.5μg5-HTHCl(占92％)。第3.5小時(shí)第2次色譜——存留了108％(0.51μg的管中有0.55μg)顆粒大小1小時(shí)后為110nm此處用特定實(shí)施方案來描述的本發(fā)明，應(yīng)該明白本發(fā)明的修改、等價(jià)替換和修飾對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，這些都是本發(fā)明權(quán)利要求的權(quán)限保護(hù)范圍之內(nèi)。權(quán)利要求1.用于把診斷或治療試劑給藥至哺乳動(dòng)物的脂質(zhì)體構(gòu)建物，包括a)脂質(zhì)體載體；b)由脂質(zhì)體載體包封的或與該載體連結(jié)的治療或診斷試劑；和c)分布在所述脂質(zhì)體載體中有效量的螯合劑；其中螯合劑以能有效地減少該診斷或治療試劑在釋放之前從脂質(zhì)體構(gòu)建物中漏出的量存在。2.權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，還包括與所述脂質(zhì)體載體表面連結(jié)的靶向部分，其中所述靶向部分結(jié)合到與靶部位連結(jié)的受體上。3.權(quán)利要求1所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中診斷或治療試劑選擇生物胺。4.權(quán)利要求2所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中靶向部分包括膽汁引誘分子。5.用于把生物胺給藥至哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞的脂質(zhì)體構(gòu)建物，包括a)脂質(zhì)體載體；b)由脂質(zhì)體載體包封的或與該載體連結(jié)的生物胺；c)與所述脂質(zhì)體載體表面連結(jié)的靶向部分，其中所述靶向部分含有與肝細(xì)胞中的肝膽受體結(jié)合的膽汁引誘分子；和d)分布在所述脂質(zhì)體載體中有效量的螯合劑；其中螯合劑以能有效地減少生物胺在釋放之前從脂質(zhì)體構(gòu)建物中漏出的量存在。6.權(quán)利要求3或5的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中的生物胺包括擬交感神經(jīng)胺或自體有效物質(zhì)。7.權(quán)利要求3或5的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中生物胺選自L-β-3，4-二羥基苯丙氨酸(L-DOPA)、3-(2-氨乙基)-5-羥基吲哚(5-羥色胺或血清素)、2-(4-咪唑基)乙胺(組胺)、4-[1-羥基-2-(甲氨基)乙基]-1，2-二羥基苯(腎上腺素)、1-[3，4-二羥基苯基]-2-氨基乙醇(去甲腎上腺素)、γ-氨基正丁酸、乙酰膽堿、血清素激動(dòng)劑和氨基酸。8.權(quán)利要求3或5的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中生物胺選自血清素和血清素激動(dòng)劑。9.用于把血清素或血清素激動(dòng)劑釋放至哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞的脂質(zhì)體構(gòu)建物，包括a)脂質(zhì)體載體；b)由脂質(zhì)體載體包封的或與該載體連結(jié)的血清素或血清素激動(dòng)劑；c)與所述脂質(zhì)體載體表面連結(jié)的靶向部分，其中所述靶向部分含有與肝細(xì)胞中的肝膽受體結(jié)合的膽汁引誘分子；和d)分布在所述脂質(zhì)體載體中有效量的螯合劑；其中螯合劑以能有效地減少血清素或血清素激動(dòng)劑在釋放之前從脂質(zhì)體構(gòu)建物中漏出的量存在。10.權(quán)利要求1、5和9任意一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中螯合劑選自核苷酸衍生物、多磷酸酯衍生物、磷脂?；姿狨パ苌锖桶被峋酆衔?。11.權(quán)利要求10所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中的核苷酸衍生物選自腺苷5′-三磷酸(ATP)、胞苷5′-三磷酸(CTP)、鳥苷5′-三磷酸(GTP)、胸苷5′-三磷酸(TTP)、鳥苷5′-三磷酸(UTP)、腺苷5′-二磷酸(ADP)、胞苷5′-二磷酸(CDP)、鳥苷5′-二磷酸(GDP)、胸苷5′-二磷酸(TDP)、尿苷5′-二磷酸(UDP)、腺苷5′-一磷酸(AMP)、胞苷5′-一磷酸(CMP)、鳥苷5′-一磷酸(GMP)、胸苷5′-一磷酸(TMP)、尿苷5′-一磷酸(UMP)、腺苷5′-四磷酸、鳥苷5′-四磷酸和胸苷5′-四磷酸。12.權(quán)利要求10所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中的氨基酸聚合物包括天冬氨酸和谷氨酸的共聚物。13.權(quán)利要求10所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中的多磷酸酯衍生物包括植酸、肌醇六磷酸酯和卵黃高磷蛋白。14.權(quán)利要求4、5和9任意一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中的膽汁引誘分子選自N-(2，6-二異丙基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(2，6-二乙基苯基氨甲酰基甲基)亞氨基二乙酸、N-(2，6-二甲基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(4-異丙基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(4-丁基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(2，3-二甲基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(3-丁基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(2-丁基苯基氨甲酰基甲基)亞氨基二乙酸、N-(4-叔丁基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(3-丁氧基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(2-己氧基苯基氨甲?；谆?亞氨基二乙酸、N-(4-己氧基苯基氨甲酰基甲基)亞氨基二乙酸、偶氮基取代的亞氨基二乙酸、亞氨基二羧甲基-2-萘基酮、酞類氨羧絡(luò)合劑、N-(5-孕烯-3-β-醇-2-?；被柞；谆?亞氨基二乙酸、3a∶7a∶12a三羥基-24-降膽烷基-23-亞氨基二乙酸、N-(3-溴-2，4，6-三甲基苯基氨基甲?；谆?亞氨基二乙酸、苯并咪唑基甲基亞氨基二乙酸、N-(3-氰基-4，5-二甲基-2-吡咯基-氨基甲?；谆?亞氨基二乙酸、N，N-雙(-2-羥基-5-溴苯基)乙酸乙二胺、N′?；蚇′-磺?；叶?N，N-二乙酸、N′-乙?；鵈DDA、N′-苯甲?；鵈DDA、N′-(對(duì)甲苯磺?；?EDDA、N′-(對(duì)叔丁基苯甲?；?EDDA、N′-(苯磺?；?-EDDA、N′-(對(duì)氯苯磺?；?-EDDA、N′-(對(duì)乙基苯磺?；?EDDA、N′-(對(duì)正丙基苯磺酰基)EDDA、N′-(萘-2-磺?；?EDDA、N′-(2，5-二甲基苯磺?；?EDDA、N-(2-乙?；粱?亞氨基二乙酸、N-(2-萘基)甲基)亞氨基二乙酸、玫瑰紅、剛果紅、四溴酚酞磺酸鈉、溴酚藍(lán)、酚酞、甲苯胺藍(lán)、吲哚菁綠、膽影酸、碘甘卡酸、膽紅素、膽酰甘氨酰碘組胺、甲狀腺素葡萄糖醛酸化物、青霉胺、β-巰基異丁酸、dihydroehiocticacid、6-巰基嘌呤、乙氧丁酮醛雙(縮氨基硫脲)、1-肼酞嗪(肼苯噠嗪)磺酰脲、吡哆辛亞基谷氨酸酯、吡哆辛亞基異亮氨酸、吡哆辛亞基苯丙氨酸、吡哆辛亞基色氨酸、吡哆辛亞基5-甲基色氨酸、3-羥基-4-甲酰基-pyridene谷氨酸、四環(huán)素、7-羧基-β-羥基喹啉、phenolphthalexon、曙紅和verograffin。15.權(quán)利要求1、5和9任意一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中的脂質(zhì)體載體包括磷脂酰膽堿磷酸酯衍生物。16.權(quán)利要求15所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中磷脂酰磷酸酯衍生物選自磷脂酸、磷脂酰二磷酸酯、磷脂酰三磷酸酯和磷脂酰肌醇-4，5-二磷酸酯。17.用于把血清素或血清素激動(dòng)劑釋放至哺乳動(dòng)物肝細(xì)胞的脂質(zhì)體構(gòu)建物，包括a)脂質(zhì)體載體；b)由脂質(zhì)體載體包封的或與該載體連結(jié)的血清素或血清素激動(dòng)劑；c)與所述脂質(zhì)體載體表面連結(jié)的靶向部分，其中所述靶向部分含有與肝細(xì)胞中的肝膽受體結(jié)合的膽汁引誘分子；和d)分布在所述脂質(zhì)體載體中有效量的螯合劑；其中螯合劑以能有效地減少血清素或血清素激動(dòng)劑在釋放之前從脂質(zhì)體構(gòu)建物中漏出的量存在；所述螯合劑包括核苷酸衍生物，選自腺苷5′-三磷酸(ATP)、胞苷5′-三磷酸(CTP)、鳥苷5′-三磷酸(GTP)、胸苷5′-三磷酸(TTP)、鳥苷5′-三磷酸(UTP)、腺苷5′-二磷酸(ADP)、胞苷5′-二磷酸(CDP)、鳥苷5′-二磷酸(GDP)、胸苷5′-二磷酸(TDP)、尿苷5′-二磷酸(UDP)、腺苷5′-一磷酸(AMP)、胞苷5′-一磷酸(CMP)、鳥苷5′-一磷酸(GMP)、胸苷5′-一磷酸(TMP)、尿苷5′-一磷酸(UMP)、腺苷5′-四磷酸、鳥苷5′-四磷酸和胸苷5′-四磷酸。18.權(quán)利要求4、5、9和17任意一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，其中膽汁引誘分子選自取代的亞氨基二乙酸、乙二胺-N，N-二乙酸(EDDA)的N′-取代衍生物、肝膽染料、肝膽造影劑、膽汁鹽、肝膽硫醇絡(luò)合物、和肝膽絡(luò)合物(包括肝膽胺絡(luò)合物)。19.權(quán)利要求5、9和17任意一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物，還包括與之相連用于保護(hù)所述脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)免受免疫反應(yīng)攻擊的的掩蔽劑。20.藥物組合物，包括權(quán)利要求1、5、9和17任意一項(xiàng)所述的脂質(zhì)體構(gòu)建物和可藥用賦形劑。21.用于引起哺乳動(dòng)物肝中血清素反應(yīng)的藥用組合物，包括a)脂質(zhì)體載體；b)由脂質(zhì)體載體包封的或與該載體連結(jié)的血清素或血清素激動(dòng)劑；c)與所述脂質(zhì)體載體表面連結(jié)的靶向部分，其中所述靶向部分含有肝細(xì)胞中的肝膽受體結(jié)合的膽汁引誘分子；和d)分布在所述脂質(zhì)體載體中有效量的螯合劑；其中螯合劑以能有效地減少血清素或血清素激動(dòng)劑在釋放之前從脂質(zhì)體構(gòu)建物中漏出的量存在；e)與所述脂質(zhì)體構(gòu)建物緊密相連用于保護(hù)該脂質(zhì)體載體免受免疫反應(yīng)攻擊的掩蔽劑；和可藥用賦形劑。22.哺乳動(dòng)物生物胺治療反應(yīng)性疾病的治療方法，包括對(duì)哺乳動(dòng)物給藥治療上有效量的權(quán)利要求5的組合物。23.哺乳動(dòng)物II型糖尿病的治療方法，包括對(duì)哺乳動(dòng)物給藥治療上有效量的權(quán)利要求9、17或21任意一項(xiàng)權(quán)利要求中的藥物組合物。24.哺乳動(dòng)物II型糖尿病的治療方法，包括給藥治療上有效量的藥物組合物，該組合物包括a)脂質(zhì)體載體；b)由脂質(zhì)體載體包封的或與該載體連結(jié)的血清素或血清素激動(dòng)劑；c)與所述脂質(zhì)體載體表面連結(jié)的靶向部分，其中所述靶向部分含有肝細(xì)胞中的肝膽受體結(jié)合的膽汁引誘分子；和d)分布在所述脂質(zhì)體載體中有效量的螯合劑；其中螯合劑以能有效減少血清素或血清素激動(dòng)劑在釋放之前從脂質(zhì)體構(gòu)建物中漏出的量存在；e)與所述脂質(zhì)體構(gòu)建物緊密相連用于保護(hù)該脂質(zhì)體載體免受免疫反應(yīng)攻擊的掩蔽劑；和可藥用賦形劑。25.權(quán)利要求24的方法，血清素的用量約100-約200μg。全文摘要本發(fā)明提供一種用于把診斷或治療試劑給藥至哺乳動(dòng)物的脂質(zhì)體構(gòu)建物,包括:脂質(zhì)體載體、由脂質(zhì)體載體包封的或與該載體結(jié)合的治療或診斷試劑和分散在所述脂質(zhì)體載體中有效量的螯合劑;其中螯合劑以能有效減少該診斷或治療試劑在釋放之前從脂質(zhì)體結(jié)構(gòu)中漏出的量存在。文檔編號(hào)A61P3/10GK1261791SQ98806715公開日2000年8月2日申請(qǐng)日期1998年7月2日優(yōu)先權(quán)日1997年7月2日發(fā)明者B·W·格霍,J·R·勞申請(qǐng)人:Sdg有限公司