本發(fā)明屬于醫(yī)藥領(lǐng)域，涉及一種吳茱萸五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：糖尿病是以持續(xù)高血糖為基本生化特征一種綜合病癥。主要是由于體內(nèi)胰島素相對或絕對不足所引起的糖代謝紊亂所致。糖尿病患者長期高血糖狀態(tài)可產(chǎn)生多種并發(fā)癥。臨床上用于治療ii型糖尿病的藥物主要分為(1)胰島素及類似物；(2)口服降血糖藥：主要有磺酰脲類、雙胍類、α-葡萄糖抑制劑和胰島素增敏劑等藥物。西藥治療糖尿病療效值得肯定。但各種西藥降糖藥物都有消化道反應(yīng)、肝腎損害等副作用，且不能有效控制并發(fā)癥。中醫(yī)治療糖尿病療效穩(wěn)定，作用溫和，不良反應(yīng)少，能有效預(yù)防并發(fā)癥。因此開發(fā)利用天然植物中藥成為糖尿病防治藥物研究中的熱點(diǎn)。吳茱萸五加為五加科五加屬植物，廣泛分布于我國長江流域以及長江以南地區(qū)，其根皮有祛風(fēng)除濕、理氣化痰作用。主治風(fēng)濕痹痛，腰膝酸痛、水腫，跌打損傷，勞傷咳嗽，哮喘，吐血。苗藥亦將其葉用于皮膚病的治療。由于其資源豐富，具有極大的開發(fā)潛力。吳茱萸五加葉的化學(xué)成分研究表明，其含有豐富的糖類、三萜類及黃酮類化合物。但至今未見有吳茱萸五加在降糖方面的應(yīng)用研究或用于制備降糖藥物的公開報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：針對上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之缺陷，本發(fā)明之目的是提供一種吳茱萸五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的用途，可有效解決高血糖治療用藥問題。本發(fā)明所述的吳茱萸五加提取物，采用本領(lǐng)域已知的常規(guī)化學(xué)提取方法制備得到總提取物或低極性的吳茱萸五加提取物。根據(jù)本發(fā)明，將吳茱萸五加粉碎，用有機(jī)溶劑或/和水提取制備得到總提取物，所用的有機(jī)溶劑可采用醇類，如乙醇、甲醇等，其中優(yōu)選95％乙醇。將總提取物用水分散后，用低極性有機(jī)溶劑萃取，取有機(jī)溶劑萃取相，回收溶劑后干燥即得吳茱萸五加總提取物。所用的低極性溶劑可以采用乙酸乙酯、石油醚、氯仿或二氯甲烷等，其中優(yōu)選石油醚。脂溶性部位也可以直接通過二氧化碳超臨界萃取獲得。所述的吳茱萸五加，為吳茱萸五加根、莖、葉或其混合物。本發(fā)明制備方法簡單，原材料豐富，所制備的吳茱萸五加提取物具有降糖作用，可有效用于制備治療高血糖藥物，實(shí)現(xiàn)吳茱萸五加提取物在制備降糖藥物中的應(yīng)用，開拓了吳茱萸五加在制備治療高血糖引起的糖尿病藥物中的新用途。本發(fā)明是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：本發(fā)明所述的吳茱萸五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述吳茱萸五加提取物與化學(xué)藥或中藥組成的治療糖尿病藥物。本發(fā)明所述的吳茱萸五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述的吳茱萸五加提取物通過加入藥劑學(xué)允許的各種輔料制成藥劑學(xué)上的片劑、顆粒劑、脂質(zhì)體、微囊、口服液或膠囊。本發(fā)明所述的吳茱萸五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，其特征在于所述吳茱萸五加提取物的制備方法為，將吳茱萸五加粉碎成粗粉(20-30目篩)，用6-12倍量溶劑提取2次，過濾，合并提取液，減壓濃縮得吳茱萸五加總提取物；再將總提取物用水混懸，采用石油醚等低極性有機(jī)溶劑萃取，合并萃取液，減壓濃縮，干燥，即得吳茱萸五加提取物。本發(fā)明所述的吳茱萸五加提取物在制備治療糖尿病藥物中的用途，其特征在于所述吳茱萸五加提取物是如下方法制備得到的：將吳茱萸五加用二氧化碳超臨界萃取獲得吳茱萸五加提取物。附圖說明圖1實(shí)施例1吳茱萸五加提取物不同濃度樣品α-葡萄糖苷酶的抑制率圖2實(shí)施例2吳茱萸五加提取物不同濃度樣品α-葡萄糖苷酶的抑制率圖3實(shí)施例3吳茱萸五加提取物不同濃度樣品α-葡萄糖苷酶的抑制率具體實(shí)施方式以下結(jié)合具體情況對本發(fā)明的具體實(shí)施方式做詳細(xì)說明。實(shí)施例1將吳茱萸五加粉碎成粗粉(20-30目篩)，用12倍量60％乙醇溶液回流提取2次，過濾，合并提取液，減壓濃縮得吳茱萸五加總提取物；再將總提取物用水混懸，采用石油醚萃取，合并萃取液，減壓濃縮，干燥，即得吳茱萸五加提取物。實(shí)施例2將吳茱萸五加粉碎成粗粉(20-30目篩)，用10倍量85％甲醇溶液冷浸提取2次，過濾，合并提取液，減壓濃縮得吳茱萸五加總提取物；再將總提取物用水混懸，采用乙酸乙酯萃取，合并萃取液，減壓濃縮，干燥，即得吳茱萸五加提取物。實(shí)施例3將吳茱萸五加粉碎成粗粉(20-30目篩)，用8倍量30％乙醇溶液閃式提取2次，過濾，合并提取液，減壓濃縮得吳茱萸五加總提取物；再將總提取物用水混懸，采用氯仿萃取，合并萃取液，減壓濃縮，干燥，即得吳茱萸五加提取物。實(shí)施例4吳茱萸五加提取物片劑的制備取實(shí)施例1吳茱萸五加提取物225g，加入淀粉38g，混勻，制粒，過篩，加微晶纖維素15g，硬脂酸鎂1.5g，混勻，壓制成1000片，即得吳茱萸五加提取物片劑。實(shí)施例5吳茱萸五加提取物顆粒劑的制備取實(shí)施例2吳茱萸五加提取物195g，加入糊精160g，混勻，制粒，干燥，整粒，即得吳茱萸五加提取物顆粒劑。實(shí)施例6吳茱萸五加提取物膠囊的制備取實(shí)施例3吳茱萸五加提取物235g，加入淀粉85g，混勻，制粒，干燥，整粒。裝膠囊1000粒，即得吳茱萸五加提取物膠囊。實(shí)施例7吳茱萸五加提取物對α-葡萄糖苷酶活性的體外抑制作用在bhandari方法基礎(chǔ)上進(jìn)行改進(jìn)：取ph6.8磷酸鹽緩沖溶液100μl，加入30μl的α葡萄糖苷酶(0.25u)和150μl待測樣品溶液，使用阿卡波糖作為陽性對照。充分混合后，將樣品在37℃下孵育15min，然后再向反應(yīng)體系中加入100μl5mm的4-硝基酚-α-d-吡喃葡萄糖苷(pnpg)溶液，并將混合物在37℃下進(jìn)一步孵育25min。通過加入300μl0.1mna2co3終止反應(yīng)。通過葡萄糖氧化酶法測定釋放的葡萄糖的量，并在405nm測量吸光度。取實(shí)施例1-3的吳茱萸五加提取物分別配制成待測樣品溶液，每個(gè)待測樣品溶液同時(shí)做3個(gè)平行，取平均值。抑制率(％)＝(a對照-a樣品)/(a對照-a空白)*100％實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖1-3所示，20μg/ml的吳茱萸五加提取物均能使α-葡萄糖苷酶的活性降低75.8％以上。實(shí)施例8吳茱萸五加提取物對自發(fā)性肥胖型糖尿病小鼠降血糖試驗(yàn)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：spf級，自發(fā)性肥胖型糖尿病小鼠(db/db小鼠)50只，6周齡，體重38±2g，隨機(jī)分組。由湖南斯萊克景達(dá)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物有限公司提供。實(shí)驗(yàn)藥物及儀器：吳茱萸五加提取物(分別由實(shí)施例4-6制備得到)；陽性對照藥為馬來酸羅格列酮(葛蘭素史克天津藥業(yè)有限公司)，onetouchii血糖儀(強(qiáng)生公司)。動(dòng)物分組：模型對照組：10只，給等量水；陽性對照組；10只，給陽性藥；實(shí)驗(yàn)藥物組：30只，共分為三組。給藥：分組后適應(yīng)一周開始給藥，連續(xù)給藥2周，給藥途徑為灌胃。提取物的給藥量換算為小鼠后為400mg/kg體重，羅格列酮的給藥量為5mg/kg體重。血糖測定：第7、14天給藥1小時(shí)后，尾靜脈取血用onetouchii血糖儀測定動(dòng)物隨即血糖。試驗(yàn)結(jié)果見表1。表1吳茱萸五加提取物藥物各劑型對db/db小鼠血糖濃度的影響動(dòng)物分組動(dòng)物數(shù)(只)7天后血糖濃度(mm)14天后血糖濃度(mm)模型對照組1026.3±2.328.7±2.7陽性對照組1012.3±2.2*10.8±2.4*吳茱萸五加提取物片劑1013.4±2.4*12.0±2.3*吳茱萸五加提取物顆粒劑1013.0±2.2*11.5±2.4*吳茱萸五加提取物膠囊1014.1±2.7*12.9±2.5*注：*p＜0.05，與模型組比較。表1結(jié)果表明各吳茱萸五加提取物藥物對db/db小鼠具有顯著的降血糖作用。以上實(shí)施例顯示和描述了本發(fā)明的基本原理和主要特征以及本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)。本行業(yè)的技術(shù)人員應(yīng)該了解，本發(fā)明不受上述實(shí)施例和實(shí)驗(yàn)例的限制，上述實(shí)施例和說明書中描述的只是說明本發(fā)明的原理，而不是以任何方式限制本發(fā)明的范圍，在不脫離本發(fā)明范圍的前提下，本發(fā)明還會(huì)有各種變化和改進(jìn)，這些變化和改進(jìn)都落入要求保護(hù)的范圍內(nèi)。當(dāng)前第1頁12