專利名稱：一種蛹蟲草黃豆及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于食品制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蛹蟲草黃豆及其制備方法。
背景技術(shù)：
蛹蟲草(Cordyceps militaris)是子囊菌亞門，核菌綱，肉座菌目，麥角菌科,蟲草屬一個種，與冬蟲夏草(Cordyceps sinensis)為同屬異種真菌,通常稱為北蟲草。由于與冬蟲夏草具有相同的藥用和滋補(bǔ)功能，而且比冬蟲夏草更易于進(jìn)行人工栽培，因此蛹蟲草被選為冬蟲夏草的最佳替代品而進(jìn)行大量的人工培育，并作為新資源食品和一類新藥已獲衛(wèi)生部和國家食品藥品監(jiān)督管理局的批準(zhǔn)進(jìn)入市場。蛹蟲草的活性成分包括蟲草菌素、腺苷、蟲草多糖和蟲草酸等，其中對蟲草菌素的研究，成為近年國內(nèi)外的焦點(diǎn)。蟲草菌素(Cordycepin)又稱蟲草素，即3'-脫氧腺苷(3' -Deoxyadenosine),是一種核苷類抗生素,具有多種生理活性,如抑菌、抗腫瘤、抑制病毒作用，以及增強(qiáng)免疫功能和防治心腦血管疾病等作用。蟲草菌素的特殊醫(yī)療保健功能已經(jīng)引起國內(nèi)外專家的高度重視，已有不少以蟲草素為主的保健品、保健食品、化妝品、藥品投放市場。據(jù)報道，在美國已將蟲草素作為抗癌抗病毒新藥進(jìn)入臨床試用。在我國也已將由蟲草素合成的治療白血病的新藥進(jìn)入一期臨床試用。人工培養(yǎng)的蛹蟲草的純子實(shí)體，作為食品用于人體，經(jīng)研究是完全的，可廣泛用于保健食品、保健膳食和其它滋補(bǔ)類食品，例如做成蛹蟲草飲料、保健酒、營養(yǎng)保健醋等，但大都是以子實(shí)體或固體培養(yǎng)基浸提液為原料，工藝相對復(fù)雜，成本較高。隨著食品加工技術(shù)的進(jìn)步和人們對蟲草研究的不斷深入，蟲草功能食品應(yīng)向多元化的方向發(fā)展，加工更精細(xì)、配方更科學(xué)、功能更明確、效果更顯著。而通過生物轉(zhuǎn)化的途徑，使原來食品中沒有的蟲草菌素產(chǎn)生出來，且對其進(jìn)行加工成食品，符合21世紀(jì)人們對食品的要求，發(fā)展前景廣闊。專利CN101171968A公開了通過谷類固態(tài)發(fā)酵冬蟲夏草和靈芝產(chǎn)品及其制造方法，是利用薏仁、米、小麥、燕麥等不同的谷類或飼料作為冬蟲夏草或靈芝固態(tài)發(fā)酵的發(fā)酵產(chǎn)物，將該發(fā)酵產(chǎn)物干燥磨成粉狀，另外可再加入谷粉及調(diào)味劑，即可制成富含膳食纖維、多糖等保健成分，而且方便消費(fèi)者沖泡飲用的冬蟲夏草或靈芝薏仁粉、米粉、小麥粉或燕麥粉。目前，以蛹蟲草真菌對黃豆進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化，即在黃豆的固體發(fā)酵中產(chǎn)生蟲草菌素的研究，在國內(nèi)外未見有報道。在中國全面建設(shè)小康社會之時，如果通過黃豆的生物轉(zhuǎn)化及其系列加工產(chǎn)品的途徑攝取蟲草菌素等功效成分，對提高人類健康，具有重要意義，前景十分廣闊。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種蛹蟲草黃豆及其制備方法，從而彌補(bǔ)現(xiàn)有技術(shù)的不足。本發(fā)明的蛹蟲草黃豆是以黃豆作為固體培養(yǎng)基，接種蛹蟲草菌培養(yǎng)制備的。
本發(fā)明的蛹蟲草黃豆，其一種制備方法如下:將黃豆用水進(jìn)行浸泡，浸泡后的黃豆進(jìn)行滅菌，冷卻后接入蛹蟲草菌的種子液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，再發(fā)酵結(jié)束后風(fēng)干得到蛹蟲草黃豆。本發(fā)明的蛹蟲草菌的種子液，其制備用的種子培養(yǎng)基組成如下:馬鈴薯18 22%,葡萄糖I 3%，蛋白胨0.1 0.5%，磷酸二氫鉀0.03 0.1%，硫酸鎂0.05 0.5%，余量為水。上述的種子液，還添加有中華真地鱉肽混合物,添加的濃度為0.005%。所述的中華真地鱉肽混合物，是將中華真地鱉粉加入蒸餾水后，用木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解，酶解液過濾干燥制備的。上述的發(fā)酵培養(yǎng)，是在22 °C下暗室培養(yǎng)5 8天后，接著在明室培養(yǎng)3 6天完成發(fā)酵。為了獲得更好的發(fā)酵效果，對浸泡的黃豆在滅菌前用酶進(jìn)行了處理；所述的用酶進(jìn)行處理，是對浸泡的黃豆加入添加有纖維素酶的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液(pH為4.5)進(jìn)行酶解；所述的纖維素加酶量為8000 12000U/g黃豆，50°C下進(jìn)行酶處理I 3小時。本發(fā)明還提供一種蛹蟲草培養(yǎng)混合物，為蛹蟲草黃豆和蛹蟲草花生混合物。蛹蟲草在黃豆中進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化時,黃豆的種皮對其有抑制作用。因此,對浸泡黃豆進(jìn)行去皮處理，能夠提高其發(fā)酵后的蟲草菌素含量。故通過纖維素酶處理，達(dá)到黃豆去皮的目的，從而提高蛹蟲草黃豆中的蟲草菌素轉(zhuǎn)化量。
具體實(shí)施例方式本發(fā)明的蛹蟲草菌(Cordyceps militaris)可選用任一食品領(lǐng)域中應(yīng)用的蛹蟲草菌的菌種。而且，為了使蛹蟲草菌在培養(yǎng)基中的活力更高，本發(fā)明對培養(yǎng)基的組分進(jìn)行了長期的研究，提供一種能明顯增強(qiáng)蛹蟲草菌活力的培養(yǎng)基。下面結(jié)合實(shí)施例對本發(fā)明的蛹蟲草黃豆及其制備方法進(jìn)行詳細(xì)的描述。實(shí)施例1I)黃豆浸泡稱取250g的黃豆,加入了 500g的水,在室溫下浸泡12h,使浸泡后的黃豆含水量控制在100 120%范圍內(nèi)。2)滅菌將浸泡后的黃豆浙干后，分裝到三角瓶中，蓋好塞子，在121°C溫度下，滅菌30分鐘，冷卻后待接種。3)蛹蟲草菌種斜面培養(yǎng)將保存好的蛹蟲草菌種在斜面培養(yǎng)基上接種，在23°C的溫度下，培養(yǎng)7 9天，其斜面培養(yǎng)基的組成為:馬鈴薯18 22%，葡萄糖I 3%，蛋白胨0.1 1.0%，磷酸二氫鉀0.1 0.5%，硫酸鎂0.1 0.3%，維生素B1 0.008 0.02%,瓊脂I 3%。其中具體的一種配方如下:馬鈴薯20%，葡萄糖2%，蛋白胨0.5%，磷酸二氫鉀0.3%，硫酸鎂0.25%，維生素B10.01%,瓊脂2%。配制的方法，是將20g馬鈴薯切塊，添加IOOmL水，煮沸20分鐘，在煮沸和冷卻過程中不斷補(bǔ)水，最終調(diào)至IOOmL后進(jìn)行過濾。將2g葡萄糖、0.5g蛋白胨、0.3g磷酸二氫鉀、0.25g硫酸鎂，0.0lg維生素B1, 2g瓊脂溶于IOOmL馬鈴薯濾液。4)蛹蟲草液體種子液的培養(yǎng)取面積達(dá)10 30 mm 2的斜面蛹蟲草菌種，接到種子液培養(yǎng)基中，在20 25°C的溫度下，培養(yǎng)2 6天得到種子液。其液體種子培養(yǎng)基的質(zhì)量百分比組成為:馬鈴薯18 22%，葡萄糖I 3%，蛋白胨0.1 0.5%，磷酸二氫鉀0.03 0.1%，硫酸鎂0.05 0.5%。其中具體的一種配方如下:馬鈴薯20%，葡萄糖2%，蛋白胨0.2%,磷酸二氫鉀
0.05%，硫酸鎂0.1%。配制的方法，是將20g馬鈴薯切塊，添加IOOmL水，煮沸20分鐘，在煮沸和冷卻過程中不斷補(bǔ)水，最終調(diào)至IOOmL后進(jìn)行過濾。將2g葡萄糖、0.2g蛋白胨、0.05g磷酸二氫鉀、0.1g硫酸鎂，溶于IOOmL馬鈴薯濾液。為了更好的提高培養(yǎng)的蛹蟲草菌的發(fā)酵活力，在種子液培養(yǎng)基中添加中華真地鱉肽混合物，添加質(zhì)量體積百分比濃度0.005%,即IOOml培養(yǎng)基中添加0.005g的中華真地鱉肽混合物。其中中華真地鱉肽混合物的一種制備方法如下:取20g經(jīng)冷凍干燥后的中華真地鱉粉，加入400ml蒸餾水，用10%Na0H調(diào)節(jié)pH值至
8.2，再按300U/g原料加入木瓜蛋白酶，在37°C下酶解5h。將酶解液在80°C下，滅酶15min后，以10000r/min的轉(zhuǎn)速離心15min，取上清液，得到中華真地鱉酶解液。為獲得低分子量肽混合物，將酶解液的上清液用2500Da分子量超濾膜進(jìn)行過濾，除去大分子蛋白質(zhì)，收集濾過液，再用250Da分子量超濾膜進(jìn)行過濾，除去小分子鹽類，收集截留液進(jìn)行濃縮，冷凍干燥，獲得分子量小于2500Da的中華真地鱉多肽混合物。5)蛹蟲草液體種子液的擴(kuò)大培養(yǎng)將上述蛹蟲草液體種子液，按8 15%的體積比接到擴(kuò)大液體種子液培養(yǎng)基中，在20 25°C的溫度下，進(jìn)行蛹蟲草擴(kuò)大培養(yǎng)2 6天。6)蛹蟲草黃S 的固體培養(yǎng)將培養(yǎng)好的蛹蟲草液體擴(kuò)大種子液，按10 25% (v/w)的接種量接到滅菌后冷卻好的黃豆上，在22°C下暗室培養(yǎng)5 8天后，接著在明室培養(yǎng)3 6天；所述的明室的光亮度就是IS-RDU3型號恒溫震蕩器中設(shè)置的白熾燈功率16瓦。在明室培養(yǎng)過程中適當(dāng)進(jìn)行攪拌。7)干燥發(fā)酵結(jié)束后的蛹蟲草黃豆，呈黃色 橙黃色，用自然風(fēng)進(jìn)行陰干，得到蛹蟲草黃豆成品。8)蟲草菌素含量測定方法采用高效液相色譜法。蟲草菌素的提取:將粉碎好的蛹蟲草黃豆，過篩(60目)后，按1:20的料液比添加20%的乙醇，在超聲器(40KHz，40°C)中進(jìn)行提取30 60分鐘。蟲草菌素提取結(jié)束后，在IOOOOrpm轉(zhuǎn)速下離心10分鐘。將利用0.22um濾膜過濾后的上清液作為測定蟲草菌素的待測樣品。液相條件為柱子使用KnauerC18 ;柱溫，室溫；檢測波長，260nm ;流動相，乙腈:水=10:90 ;流速:0.4mL/min。本實(shí)施例制備的蛹蟲草黃豆中的蟲草菌素含量在10 13g/kg，與大米蛹蟲草和蠶蛹冬蟲夏草中的蟲草菌素含量相比分別提高至2 5倍 和15 20倍。
而通過添加中華真地鱉肽混合物，使后續(xù)制備的黃豆中的蟲草菌素得到增加，檢測結(jié)果表明，添加中華真地鱉肽混合物比不添加的情況下，黃豆中的蟲草菌素的含量有25 40%的提升。培養(yǎng)基中氮源的種類、濃度及其分解代謝產(chǎn)物均會顯著影響次級代謝，而且許多次級代謝產(chǎn)物的分子結(jié)構(gòu)中含有氮原子，因此氮源除了作為構(gòu)成菌體細(xì)胞的物質(zhì)外，還可直接作為次級代謝產(chǎn)物的前體。無機(jī)氮源因其成分單一，明顯不利于細(xì)胞生長和代謝產(chǎn)物合成，采用復(fù)合氮源時，因其成分的復(fù)雜性和可變性，對蟲草菌素的合成代謝具有重要的意義。實(shí)施例2I)黃豆浸泡稱取250g的黃豆，按1:2 1:5的比例加水，在室溫下浸泡10 16h，使黃豆含水量控制在100 120%。2)黃豆纖維素酶處理將浸泡好的黃豆，浙干后裝入到三角瓶中按1:3 5料液比添加檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液，在50°C下進(jìn)行纖維素酶處理I 3小時，加酶量為8000 12000U/g黃豆，用流水沖洗10 20分鐘后浙干，在陰干處干燥5 8小時。纖維素酶來源于綠色木酶，活力為 11000U/mg。3)滅菌10 15目去皮黃豆顆粒，分裝到三角瓶中，蓋好塞子，在121 °C溫度下，滅菌30分鐘，冷卻后待接種。4)蛹蟲草菌種斜面培養(yǎng)將保存好的蛹蟲草菌種在斜面培養(yǎng)基上接種，在23°C的溫度下，培養(yǎng)7 9天，其斜面培養(yǎng)基的組成為:馬鈴薯18 22%，葡萄糖I 3%，蛋白胨0.1 1.0%，磷酸二氫鉀
0.1 0.5%，硫酸鎂0.1 0.3%，維生素B1 0.008 0.02%,瓊脂I 3%。其中具體的一種配方如下:馬鈴薯20%，葡萄糖2%，蛋白胨0.5%，磷酸二氫鉀0.3%，硫酸鎂0.25%，維生素B10.01%,瓊脂2%。配制的方法，是將20g馬鈴薯切塊，添加IOOmL水，煮沸20分鐘，在煮沸和冷卻過程中不斷補(bǔ)水，最終調(diào)至IOOmL后進(jìn)行過濾。將2g葡萄糖、0.5g蛋白胨、0.3g磷酸二氫鉀、0.25g硫酸鎂，0.0lg維生素B1, 2g瓊脂溶于IOOmL馬鈴薯過濾液。5)蛹蟲草液體種子液的培養(yǎng)取面積達(dá)10 30 mm 2的斜面蛹蟲草菌種，接到種子液培養(yǎng)基中，在20 25°C的溫度下，培養(yǎng)2 6天得到種子液。其液體種子培養(yǎng)基的質(zhì)量百分比組成為:馬鈴薯18 22%，葡萄糖I 3%，蛋白胨0.1 0.5%，磷酸二氫鉀0.03 0.1%，硫酸鎂0.05 0.5%。其中具體的一種配方如下:馬鈴薯20%，葡萄糖2%，蛋白胨0.2%，磷酸二氫鉀
0.05%，硫酸鎂0.1%。配制的方法，是將20g馬鈴薯切塊，添加IOOmL水，煮沸20分鐘，在煮沸和冷卻過程中不斷補(bǔ)水，最終調(diào)至IOOmL后進(jìn)行過濾。將2g葡萄糖、0.2g蛋白胨、0.05g磷酸二氫鉀、0.1g硫酸鎂，溶于IOOmL馬鈴薯過濾液。6)蛹蟲草液體種子液的擴(kuò)大培養(yǎng)將上述蛹蟲草液體種子液，按8 15%的體積比接到擴(kuò)大液體種子液培養(yǎng)基中，在20 25°C的溫度下，進(jìn)行蛹蟲草擴(kuò)大培養(yǎng)2 6天。
為了更好的提高培養(yǎng)的蛹蟲草菌的發(fā)酵活力，在種子液培養(yǎng)基中添加中華真地鱉肽混合物，添加質(zhì)量百分比濃度0.005%,即IOOml培養(yǎng)基中添加0.005g的中華真地鱉肽混合物。其中中華真地鱉肽混合物的一種制備方法如下:取20g經(jīng)冷凍干燥后的中華真地鱉粉，加入400ml蒸餾水，用10%Na0H調(diào)節(jié)pH值至
8.2，再按300U/g原料加入木瓜蛋白酶，在37°C下酶解5h。將酶解液在80°C下，滅酶15min后，以10000r/min的轉(zhuǎn)速離心15min，取上清液，得到中華真地鱉酶解液。為獲得低分子量肽混合物，將酶解液的上清液用2500Da分子量超濾膜進(jìn)行過濾，除去大分子蛋白質(zhì)，收集濾過液，再用250Da分子量超濾膜進(jìn)行過濾，除去小分子鹽類，收集截留液進(jìn)行濃縮，冷凍干燥，獲得分子量小于2500Da的中華真地鱉多肽混合物。7)蛹蟲草黃S 的固體培養(yǎng)將培養(yǎng)好的蛹蟲草液體擴(kuò)大種子液，按10 25% (v/w)的接種量接到滅菌后冷卻好的黃豆上，在22°C下暗室培養(yǎng)5 8天后，接著在明室培養(yǎng)3 6天；所述的明室的光亮度就是IS-RDU3型號恒溫震蕩器中設(shè)置的白熾燈功率16瓦。在明室培養(yǎng)過程中適當(dāng)進(jìn)行攪拌。8)干燥發(fā)酵結(jié)束后的蛹蟲草黃豆，呈黃色 橙黃色，用自然風(fēng)進(jìn)行陰干，得到蛹蟲草黃豆成品。利用去皮黃豆制備的蛹蟲草黃豆中的蟲草菌素含量在15 17g/kg,與未去皮黃豆相比，蟲草菌素含量提升30 50%。實(shí)施例3
I)黃豆浸泡稱取250g的黃豆，按1:2 1:5的比例加水，在室溫下浸泡10 16h，使黃豆含水量控制在100 120%。2)黃豆纖維素酶處理將浸泡好的黃豆，浙干后裝入到三角瓶中按1:3 5料液比添加檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液，在50°C下進(jìn)行纖維素酶處理I 3小時，加酶量為8000 12000U/g黃豆，用流水沖洗10 20分鐘后浙干，在陰干處干燥5 8小時。3)兩種成分固體培養(yǎng)基的匹配將經(jīng)纖維素酶處理后的黃豆和剝皮后的花生按1:0.1 1.0的比例混合后，再按2:0.5 2.5的比例加水混勻，待滅菌。4)滅菌將按一定比例匹配好的兩種成分固體培養(yǎng)基，蓋好塞子，在121°C溫度下，滅菌30分鐘，冷卻后待接種。5)蛹蟲草菌種斜面培養(yǎng)將保存好的蛹蟲草菌種在斜面培養(yǎng)基上接種，在23°C的溫度下，培養(yǎng)7 9天，其斜面培養(yǎng)基的組成為:馬鈴薯18 22%，葡萄糖I 3%，蛋白胨0.1 1.0%，磷酸二氫鉀
0.1 0.5%，硫酸鎂0.1 0.3%，維生素B1 0.008 0.02%,瓊脂I 3%。其中具體的一種配方如下:馬鈴薯20%，葡萄糖2%，蛋白胨0.5%，磷酸二氫鉀0.3%，硫酸鎂0.25%，維生素B10.01%,瓊脂2%。配制的方法，是將20g馬鈴薯切塊，添加IOOmL水，煮沸20分鐘，在煮沸和冷卻過程中不斷補(bǔ)水，最終調(diào)至IOOmL后進(jìn)行過濾。將2g葡萄糖、0.5g蛋白胨、0.3g磷酸二氫鉀、0.25g硫酸鎂，0.0lg維生素B1, 2g瓊脂溶于IOOmL馬鈴薯過濾液。6)蛹蟲草液體種子液的培養(yǎng)取面積達(dá)10 30 mm 2的斜面蛹蟲草菌種，接到種子液培養(yǎng)基中，在20 25°C的溫度下，培養(yǎng)2 6天得到種子液。其液體種子培養(yǎng)基的質(zhì)量百分比組成為:馬鈴薯18 22%，葡萄糖I 3%，蛋白胨0.1 0.5%，磷酸二氫鉀0.03 0.1%，硫酸鎂0.05 0.5%。其中具體的一種配方如下:馬鈴薯20%，葡萄糖2%，蛋白胨0.2%，磷酸二氫鉀
0.05%，硫酸鎂0.1%。配制的方法，是將20g馬鈴薯切塊，添加IOOmL水，煮沸20分鐘，在煮沸和冷卻過程中不斷補(bǔ)水，最終調(diào)至IOOmL后進(jìn)行過濾。將2g葡萄糖、0.2g蛋白胨、0.05g磷酸二氫鉀、0.1g硫酸鎂，溶于IOOmL馬鈴薯過濾液。7)蛹蟲草液體種子液的擴(kuò)大培養(yǎng)將上述蛹蟲草液體種子液，按8 15%的體積比接到擴(kuò)大液體種子液培養(yǎng)基中，在20 25°C的溫度下，進(jìn)行蛹蟲草擴(kuò)大培養(yǎng)2 6天。為了更好的提高培養(yǎng)的蛹蟲草菌的發(fā)酵活力，在種子液培養(yǎng)基中添加中華真地鱉肽混合物，添加質(zhì)量百分比濃度0.005%。其中添加的中華真地鱉肽混合物的制備方法如下:取20g經(jīng)冷凍干燥后的脫脂中華真地鱉粉，按1:20料水比加入蒸餾水，用10%Na0H調(diào)節(jié)pH值至8.2，再按300U/g原料，加入木瓜蛋白酶，在37°C下酶解5h。將酶解液在80°C下，滅酶15min后，以10000r/min的轉(zhuǎn)速離心15min,取上清液,得到中華真地鳘酶解液。為獲得低分子量肽混合物，將酶解液離心得到的上清液用2500Da分子量超濾膜進(jìn)行過濾，除去大分子蛋白質(zhì)，收集濾過液，再用250Da分子量超濾膜進(jìn)行過濾，除去小分子鹽類，收集截留液進(jìn)行濃縮，冷凍干燥，獲得分子量小于2500Da的中華真地鱉多肽混合物。8)以花生為輔料的蛹蟲草黃丑固體培養(yǎng)將培養(yǎng)好的蛹蟲草液體擴(kuò)大種子液，按10 25% (v/w)的接種量接到滅菌后冷卻好的黃豆上，在22°C下暗室培養(yǎng)5 8天后，接著在明室培養(yǎng)3 6天；所述的明室的光亮度就是IS-RDU3型號恒溫震蕩器中設(shè)置的白熾燈功率16瓦。在明室培養(yǎng)過程中適當(dāng)進(jìn)行攪拌。8、干燥發(fā)酵結(jié)束后的蛹蟲草黃豆，呈黃色 橙黃色，用自然風(fēng)進(jìn)行陰干，得到蛹蟲草黃豆成品。本發(fā)明制備的蛹蟲草黃豆提高免疫及抗氧化效果檢測:小鼠分別喂食含有O (基礎(chǔ)日糧)、3%、6%、12%蛹蟲草黃豆(實(shí)施例2制備的)以及12%普通黃豆的日糧，以小鼠血漿和肝臟中MDA含量，CAT、GSH-Px、T-SOD活力及抑制羥自由基能力為指標(biāo)，研究其體內(nèi)抗氧化活性(小鼠注射D-半乳糖建立衰老模型)；測定血漿和肝臟組織中免疫球蛋白G、M含量及細(xì)胞因子白細(xì)胞介素4、Y-干擾素含量，研究小鼠免疫功能。結(jié)果表明，添加蛹蟲草黃豆可以顯著提高小鼠血漿和肝臟中CAT、GSH-Px、T-SOD (P< 0.05)活力，抑制羥自由基能力以及IgG、IgM、IL-4、IFN-Y (P < 0.05)的含量，能夠顯著提高小鼠脾臟和肝臟指數(shù)以及顯著降低MDA (P < 0.05)含量，具有延緩衰老以及提高機(jī)體免疫功能的作用。
權(quán)利要求
1.一種蛹蟲草黃豆，所述的蛹蟲草黃豆是以黃豆作為固體培養(yǎng)基，再接種蛹蟲草菌培養(yǎng)制備的。
2.權(quán)利要求1所述的蛹蟲草黃豆的制備方法，是將黃豆用水進(jìn)行浸泡，浸泡后的黃豆進(jìn)行滅菌，接入蛹蟲草菌的種子液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，再風(fēng)干得到的。
3.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于所述的蛹蟲草菌的種子液，其制備用的種子培養(yǎng)基組成如下:馬鈴薯18 22%，葡萄糖I 3%，蛋白胨0.1 0.5%，磷酸二氫鉀0.0l 0.06%，硫酸鎂0.1 0.3%，余量為水。
4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，所述的種子培養(yǎng)基添加有中華真地鱉肽混合物，添加的濃度為0.005%。
5.如權(quán)利要求4所述的制備方法，其特征在于所述的中華真地鱉肽混合物，是將中華真地鱉粉加入蒸餾水后，用木瓜蛋白酶進(jìn)行酶解，酶解液過濾干燥制備的。
6.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于所述的發(fā)酵培養(yǎng)，是在22°C下暗室培養(yǎng)5 8天后，接著在明室培養(yǎng)3 6天完成的。
7.如權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于所述的浸泡的黃豆在滅菌前用酶進(jìn)行了處理。
8.如權(quán)利要求7所述的制備方法，其特征在于所述的用酶進(jìn)行處理，是對浸泡的黃豆加入添加有纖維素酶的檸檬酸-磷酸氫二鈉緩沖液進(jìn)行酶解。
9.如權(quán)利要求8所述的制備方法，其特征在于所述的纖維素加酶量為8000 12000萬U/g黃豆；50°C下進(jìn)行酶處理I 3小時。
10.一種蛹蟲草培養(yǎng)混合物,所述的混合物為權(quán)利要求1所述的蛹蟲草黃豆和蛹蟲草花生的混合物。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種蛹蟲草黃豆，是將黃豆用水進(jìn)行浸泡，浸泡后的黃豆進(jìn)行滅菌，冷卻后接入蛹蟲草菌的種子液進(jìn)行發(fā)酵培養(yǎng)，再發(fā)酵結(jié)束后風(fēng)干得到蛹蟲草黃豆。蛹蟲草在黃豆中進(jìn)行生物轉(zhuǎn)化時，黃豆的種皮對其有適當(dāng)?shù)囊种谱饔?。因此，對浸泡黃豆進(jìn)行去皮處理，能夠提高其發(fā)酵后的蟲草菌素含量。另外，增大而均勻接種面積，可以提高蛹蟲草蟲草菌素的生物轉(zhuǎn)化量。故通過纖維素酶處理，提高對浸泡黃豆的去皮率，并將去皮后的黃豆，提高蛹蟲草黃豆中的蟲草菌素轉(zhuǎn)化量。
文檔編號A23L1/20GK103190576SQ20131015026
公開日2013年7月10日 申請日期2013年4月27日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月27日
發(fā)明者樸美子, 王鳳舞, 金玉蘭 申請人:青島農(nóng)業(yè)大學(xué)