專利名稱：一種用吡嗪類小分子化合物誘導(dǎo)干細(xì)胞分化的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種用吡嗪類小分子化合物誘導(dǎo)干細(xì)胞分化 的方法。
背景技術(shù)：
川彎嗪(Ligustrazine)來(lái)源于傘形科植物川彎的干燥根莖,為批嗪類生物堿。川芎辛香行散，溫通血脈，上行頭顛，下走血海，功能活血行氣，祛風(fēng)止痛，被前人譽(yù)為血中之氣藥?，F(xiàn)代研究表明川芎嗪有解痙、降低血管阻力和強(qiáng)烈抑制血小板聚集的作用，對(duì)已聚集的血小板有解聚作用，能明顯降低全血粘度；還能增加冠脈流量、有改善心肌供氧、降低心肌耗氧的作用，治療缺血性腦血管及冠心病效果良好，還可以治療偏頭痛和重癥肺心病。川芎嗪的分子量為136. 20，分子式=C8H12N2，化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下
權(quán)利要求
1.川芎嗪在制備促進(jìn)離體干細(xì)胞定向分化為特定組織細(xì)胞產(chǎn)品中的應(yīng)用；或川芎嗪在制備用于離體干細(xì)胞移植治療神經(jīng)退行性疾病的產(chǎn)品和/或在制備修復(fù)重建損傷神經(jīng)組織產(chǎn)品中的應(yīng)用；或JI丨芎嗪在促進(jìn)離體干細(xì)胞定向分化為特定組織細(xì)胞中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的應(yīng)用，其特征在于所述產(chǎn)品為藥物；所述干細(xì)胞為胚胎干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞中的任意一種；所述特定組織細(xì)胞為神經(jīng)細(xì)胞和骨細(xì)胞中的任意一種；所述離體干細(xì)胞定向分化為特定組織細(xì)胞為如下1)-4)中的任意一種1)離體胚胎干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞；2)離體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞；3)離體神經(jīng)干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞；4)離體骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化為成骨細(xì)胞；所述促進(jìn)干細(xì)胞定向分化為特定組織細(xì)胞通過(guò)提高分化率體現(xiàn)。
3.—種由胚胎干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)基，按照如下方法制備將川芎嗪、N2添加劑、B27添加劑、胎牛血清、非必需氨基酸和DMEM/F12培養(yǎng)液混合，得到分化培養(yǎng)基，所述川芎嗪在所述分化培養(yǎng)基中的濃度為10_6mOl/L-10_8mOl/L ;所述N2添加劑在所述分化培養(yǎng)基中的百分濃度為1% (質(zhì)量百分含量)；所述B27添加劑在所述分化培養(yǎng)基中的百分濃度為1% (質(zhì)量百分含量)；所述胎牛血清在所述分化培養(yǎng)基中的濃度為I% (體積百分含量)；所述非必需氨基酸在所述分化培養(yǎng)基中的濃度為O. lmmol/L ;所述川芎嗪在分化培養(yǎng)基中的濃度具體為I(T6moI/L、l(TmoI/L或IΟΛιοI/L。
4.一種由胚胎干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞的方法，包括如下步驟將胚胎干細(xì)胞在權(quán)利要求3所述的分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到神經(jīng)細(xì)胞；所述培養(yǎng)時(shí)間為6-10天，所述培養(yǎng)時(shí)間具體為10天。
5.一種由骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)基，按照如下方法制備將川芎嗪、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胎牛血清和L-DMEM培養(yǎng)液混合，得到分化培養(yǎng)基，所述川芎嗪在分化培養(yǎng)基中的濃度為10_6mOl/L-10_8mOl/L ;所述堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子在分化培養(yǎng)基中的濃度為10ng/mL ;所述胎牛血清在分化培養(yǎng)基中的濃度為20% ;所述川芎嗪在分化培養(yǎng)基中的濃度具體為10-6mol/L、l(Tmol/L*10-8mol/L。
6.一種由骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞的方法，包括如下步驟將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在權(quán)利要求5所述的分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到神經(jīng)細(xì)胞；所述培養(yǎng)時(shí)間為6-10天，所述培養(yǎng)時(shí)間具體為7天。
7.一種由神經(jīng)干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞的培養(yǎng)基，按照如下方法制備將川芎嗪和DMEM/F12培養(yǎng)液混合，得到分化培養(yǎng)基，所述川芎嗪在分化培養(yǎng)基中的濃度為10_6mol/L-IO^moI/L ;所述川芎嗪在分化培養(yǎng)基中的濃度具體為10-6mol/L、10-7mol/L或10_8mol/L。
8.一種由神經(jīng)干細(xì)胞定向分化為神經(jīng)細(xì)胞的方法，包括如下步驟將神經(jīng)干細(xì)胞在權(quán)利要求7所述的分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到神經(jīng)細(xì)胞；所述培養(yǎng)時(shí)間為7-10天，所述培養(yǎng)時(shí)間具體為7天或10天。
9.一種由骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化為成骨細(xì)胞的培養(yǎng)基，按照如下方法制備將川芎嗪、堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子、胎牛血清和DMEM培養(yǎng)液混合，得到分化培養(yǎng)基，所述川芎嗪在分化培養(yǎng)基中的濃度為10_8-10_6mol/L ;所述堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子在分化培養(yǎng)基中的濃度為10ng/mL;所述胎牛血清在分化培養(yǎng)基中的濃度為20% ;所述川芎嗪在分化培養(yǎng)基中的濃度具體為I(T6moI/L、l(TmoI/L或IΟΛιοI/L。
10.一種由骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞定向分化為成骨細(xì)胞的方法，包括如下步驟將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在權(quán)利要求9所述的分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)，得到成骨細(xì)胞；所述培養(yǎng)時(shí)間6-21天，所述培養(yǎng)時(shí)間具體為21天。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種用吡嗪類小分子化合物誘導(dǎo)干細(xì)胞分化的方法。本發(fā)明提供的一種川芎嗪在促進(jìn)干細(xì)胞定向分化為特定組織細(xì)胞中的應(yīng)用，所述干細(xì)胞為胚胎干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和神經(jīng)干細(xì)胞中的任意一種；所述特定組織細(xì)胞為神經(jīng)細(xì)胞和成骨細(xì)胞中的任意一種。本發(fā)明的實(shí)驗(yàn)證明，本發(fā)明提供吡嗪類小分子化合物川芎嗪的一種新用途，是由川芎嗪誘導(dǎo)干細(xì)胞(包括胚胎干細(xì)胞、神經(jīng)干細(xì)胞、骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞)體外定向分化為多種單一類型細(xì)胞，包括神經(jīng)細(xì)胞、成骨細(xì)胞、胰島細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等，可以提高分化率和縮短分化時(shí)間。
文檔編號(hào)C12N5/0775GK102952778SQ20111025044
公開(kāi)日2013年3月6日 申請(qǐng)日期2011年8月29日 優(yōu)先權(quán)日2011年8月29日
發(fā)明者田杰 申請(qǐng)人:北京清美聯(lián)創(chuàng)干細(xì)胞科技有限公司