一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒及其制備方法，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分：試劑R1：緩沖液、無機(jī)鹽離子、加速劑、防腐劑、抗人類風(fēng)濕因子抗體，試劑R2：緩沖液、助懸劑、防腐劑、穩(wěn)定劑、膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體，制備方法為：按照組分含量配制好試劑；將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應(yīng)；用全自動生化分析儀測定反應(yīng)后的吸光度差值；根據(jù)吸光度變化值計算出樣本中的纖維結(jié)合蛋白的濃度。本發(fā)明具有測定準(zhǔn)確度高、檢測方便等優(yōu)點。
【專利說明】
一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明涉及醫(yī)學(xué)及生物化學(xué)技術(shù)領(lǐng)域，具體來說是一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑 盒及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 纖維結(jié)合蛋白（Fn)是由二個亞基組成的一種高分子糖蛋白，可分CFn和PFn兩種形 式。由體內(nèi)成纖維細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞、肝細(xì)胞等合成分泌，存在于人體的血液、組織液和腦 脊液中，并存在于細(xì)胞表面，血液中的Fn絕大部分由肝細(xì)胞合成分泌，參與血凝過程，并對 單核一巨噬細(xì)胞的吞噬起調(diào)理素作用，主要功能之一是作為巨噬細(xì)胞及網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞吞噬 作用的一種遞質(zhì)，促進(jìn)網(wǎng)狀內(nèi)皮細(xì)胞對纖維蛋白、纖維蛋白原-纖維蛋白復(fù)合物、膠原碎片、 受損細(xì)胞碎征、細(xì)菌及非細(xì)菌性毒性物質(zhì)的調(diào)理與清除，CFn為結(jié)締組織的基質(zhì)蛋白質(zhì)，在 肝臟中和膠原纖維分布一起，肝纖維化時水平升高。
[0003] 早期肝硬化患者血漿的纖維結(jié)合蛋白（Fn)濃度明顯上升，失代償期肝炎后肝硬化 減低，尤以伴有腹水者更明顯，肝硬化病人的纖維結(jié)合蛋白（Fn)減低的可能原因是:①肝細(xì) 胞產(chǎn)生Fn減少;②Fn于纖維蛋白原精密結(jié)合，使大量血漿Fn沉積于肝臟纖維組織中。
[0004] 目前臨床上使用較為廣泛的纖維結(jié)合蛋白的檢測方法主要為單向免疫擴(kuò)散法、化 學(xué)發(fā)光，單向免疫擴(kuò)散法操作過程復(fù)雜，耗時長，對操作人員具有一定的專業(yè)技能要求，化 學(xué)發(fā)光檢測成本較高，臨床大規(guī)模標(biāo)本檢測普及有一定的限度，而市場上的其它檢測方法， 又普遍存在測定準(zhǔn)確度低的缺陷，需要進(jìn)行進(jìn)一步的改進(jìn)。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是為了克服現(xiàn)有技術(shù)操作復(fù)雜、測定準(zhǔn)確度低的缺 陷，而提供一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明解決上述技術(shù)問題提供的技術(shù)方案是:本發(fā)明公開了一種測定纖維結(jié)合蛋 白的試劑盒，包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 15~185 mmol/L 無機(jī)鹽離子 15CK450 mmol/L 加速劑 5~25 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 抗人類風(fēng)濕因子抗體 0.2~0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 50~150 mmol/L 助懸劑 5~35 mmol/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體 1~8 g/L 其溶劑為純化水。
[0007] 作為優(yōu)選，本發(fā)明公開了一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒，包括彼此獨立的試劑 R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 100 mmol/L 無機(jī)鹽離子 300 mmol/L 加速劑 15 g/L 防腐劑 〇.7g/L 抗人類風(fēng)濕因子抗體 0.5 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 100 mmol/L 助懸劑 20 mmol/L 防腐劑 0.7 g/L 穩(wěn)定劑 11 g/L 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體 5g/L 其溶劑為純化水。
[0008] 作為優(yōu)選，所述的試劑R1中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、MES緩沖液、磷酸鹽緩 沖液、M0PS0緩沖液中的一種或多種的組合，所述的無機(jī)鹽離子采用氯化鉀、硫酸鉀、氯化鈉 中的一種或多種的組合，所述的加速劑采用聚乙二醇-2000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷 酮中的一種或多種的組合，所述的防腐劑采用山梨酸鈉、苯甲酸鈉、疊氮鈉、硫柳汞、苯酚中 的一種或多種的組合，所述的抗人類風(fēng)濕因子抗體采用兔抗人多克隆抗體、羊抗人多克隆 抗體、兔抗人單克隆抗體、羊抗人單克隆抗體中的一種。
[0009] 作為優(yōu)選，所述的試劑R2中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、MES緩沖液、磷酸鹽緩 沖液、M0PS0緩沖液中的一種或多種的組合，所述的助懸劑采用乙二醇、丙三醇、麥芽糖中的 一種或多種的組合，所述的防腐劑采用山梨酸鈉、苯甲酸鈉、疊氮鈉、硫柳汞、苯酚中的一種 或多種的組合，所述的穩(wěn)定劑為牛血清白蛋白。
[0010] 作為優(yōu)選，所述的膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體的制備方法為：用50 mmol/L的 MES緩沖液將粒徑為80-500nm的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為 1%-5%的溶液，然后每毫升溶液中加入1.0 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺 鹽酸鹽，在20°C_37°C的條件下反應(yīng)1小時，使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30 分鐘，去上清，將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，使用超聲分散儀進(jìn)行超聲分散， 再使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，再將沉淀用50 mmol/L的 MES緩沖液進(jìn)行稀釋，超聲分散，邊分散邊加入抗人纖維結(jié)合蛋白抗體，直至聚苯乙烯微球 的質(zhì)量濃度為〇. 5%-2.0%時為止，最后加入牛血清白蛋白，直至牛血清白蛋白的濃度為25g/ L為止，4°C條件下封閉8-12小時，即可制備得到膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體。
[0011] 作為優(yōu)選，本發(fā)明還公開了上述測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒的制備方法和使用方 法，包括以下步驟： (a) 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: 緩沖液 15~185 mmol/L 無機(jī)鹽離子 150~450 mmol/L 加速劑 5~25 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 抗人類風(fēng)濕因子抗體 0.2~0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 50~150 mmol/L 助懸劑 5~35 mmol/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體 1~8 g/L 其溶劑為純化水； (b) 將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應(yīng)； (c) 用全自動生化分析儀測定反應(yīng)后的吸光度差值； (d) 根據(jù)吸光度變化值計算出樣本中的纖維結(jié)合蛋白的濃度。
[0012]作為優(yōu)選，步驟(b)中，所述的試劑R1和試劑R2的體積比為4山 作為優(yōu)選，步驟(b)中，所述的待測樣本與試劑R1和試劑R2的總體積的體積比在1:10到 1:200之間。
[0013]本發(fā)明的檢測原理是:本發(fā)明主要利用抗原抗體反應(yīng)原理，抗原(FN)和特異性抗 體相結(jié)合，形成不溶性免疫復(fù)合物，使反應(yīng)液產(chǎn)生混濁，其濁度高低反映血清樣品中FN的 濃度，可由校準(zhǔn)品所作的劑量。
式中：△ AT以空白管吸光度作對照的樣品管吸光度值 Δ As以空白管吸光度作對照的校準(zhǔn)管吸光度值 Cs校準(zhǔn)液中Fn的濃度。
[0015] 與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益優(yōu)點：本發(fā)明首先于試劑R1中添加了抗人 類風(fēng)濕因子抗體，在試劑R1和樣本孵育的時候，和樣本中的類風(fēng)濕因子發(fā)生特異性結(jié)合，去 除了類風(fēng)濕因子對檢測的干擾，有效的提高了檢測的準(zhǔn)確性，試劑R2中添加的助懸劑使得 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體均勻分散于試劑中，在試劑R1中加速劑的作用下，與樣本 中的纖維結(jié)合蛋白可迅速發(fā)生反應(yīng)，靈敏度高，易于檢測，檢測準(zhǔn)確度高，而且檢測比較方 便，無任何放射性污染。
【具體實施方式】
[0016] 以下結(jié)合具體實施例進(jìn)一步說明，但本發(fā)明并不僅限于這些實施例。
[0017] 實施例！ 本發(fā)明的試劑盒包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，其中 試劑R1: MES緩沖液 100 mmol/L 氯化鉀 300 mmol/L 聚乙二醇-8000 15 g/L 山梨酸鈉 〇.7g/L 兔抗人多克隆抗體 0.5 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: MES緩沖液 100 mmol/L 乙二醇 20 mmol/L 山梨酸鈉 0.7 g/L 牛血清白蛋白 11 g/L 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體5g/L 其溶劑為純化水。
[0018] 實施例2 本發(fā)明的試劑盒包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙液體組分，其中 試劑R1: Tris緩沖液 15 mmol/L 氯化鉀 150 mmol/L 聚乙二醇-2000 25 g/L 山梨酸鈉 0.9 g/L 羊抗人多克隆抗體 0.2 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: Tris緩沖液 50 mmol/L 乙二醇 5 mmol/L 山梨酸鈉 0.9 g/L 牛血清白蛋白 18 g/L 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體1 g/L 其溶劑為純化水。 實施例3 試劑盒的制備和使用方法 1、膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體的制備：用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為120nm 的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為5%的溶液，然后每毫升溶液中 加入1.0 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在25°C的條件下反應(yīng)1小 時，使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，將沉淀用50 mmol/L的MES 緩沖液進(jìn)行稀釋，使用超聲分散儀進(jìn)行超聲分散，再使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速 下離心30分鐘，去上清，再將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，超聲分散，邊分散邊 加入抗人纖維結(jié)合蛋白抗體，直至聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%時為止，最后加入牛血清 白蛋白，直至牛血清白蛋白的濃度為25g/L為止，4°C條件下封閉10小時，即可制備得到膠乳 包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體； 2、 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: MES緩沖液 100 mmol/L 氯化鉀 300 mmol/L 聚乙二醇-8000 15 g/L 山梨酸鈉 〇.7g/L 兔抗人多克隆抗體 0.5 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: MES緩沖液 100 mmol/L 乙二醇 20 mmol/L 山梨酸鈉 0.7 g/L 牛血清白蛋白 11 g/L 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體 5g/L 其溶劑為純化水； 3、 全自動生化分析儀參數(shù)設(shè)置 (a) 檢測溫度:37°C; (b) 檢測波長:主波長600nm; (c) 反應(yīng)時間：10min，其中，孵育時間5min，加入試劑R2后立即測定讀取吸光度 Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化ΔΑ = A2-A1 ; (d) 反應(yīng)方向：正反應(yīng)； 4、 檢測步驟 (a) 取200μ1試劑R1與2μ1待測樣本混勻； (b) 將混勻后的溶液在37°C的條件下孵育5min;
(c) 加入50μ1試劑R2,立即測定讀取吸光度Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化 ΔΑ = A2-A1; (d) 根據(jù)樣本中的纖維結(jié)合蛋白（Fn)的活性 計算出樣 本中的纖維結(jié)合蛋白的濃度。
[0019] 實施例4 試劑盒的制備和使用方法 1、膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體的制備：用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為120nm 的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為5%的溶液，然后每毫升溶液中 加入1.0 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在25°C的條件下反應(yīng)1小 時，使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，將沉淀用50 mmol/L的MES 緩沖液進(jìn)行稀釋，使用超聲分散儀進(jìn)行超聲分散，再使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速 下離心30分鐘，去上清，再將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，超聲分散，邊分散邊 加入抗人纖維結(jié)合蛋白抗體，直至聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%時為止，最后加入牛血清 白蛋白，直至牛血清白蛋白的濃度為25g/L為止，4°C條件下封閉10小時，即可制備得到膠乳 包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體； 2、 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: Tris緩沖液 15 mmol/L 氯化鉀 150 mmol/L 聚乙二醇-2000 25 g/L 山梨酸鈉 0.9 g/L 羊抗人多克隆抗體 0.2 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: Tris緩沖液 50 mmol/L 乙二醇 5 mmol/L 山梨酸鈉 0.9 g/L 牛血清白蛋白 18 g/L 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體 1 g/L 其溶劑為純化水； 3、 全自動生化分析儀參數(shù)設(shè)置 (a) 檢測溫度:37°C; (b) 檢測波長:主波長600nm; (c) 反應(yīng)時間：10min，其中，孵育時間5min，加入試劑R2后立即測定讀取吸光度 Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化ΔΑ = A2-A1 ; (d) 反應(yīng)方向：正反應(yīng)； 4、 檢測步驟 (a) 取200μ1試劑R1與2μ1待測樣本混勻； (b) 將混勻后的溶液在37°C的條件下孵育5min; (c) 加入50μ1試劑R2,立即測定讀取吸光度Al，5min后讀取吸光度A2,計算吸光度變化 ΔΑ = A2-A1; (d) 根據(jù)樣本中的纖維結(jié)合蛋白（Fn)的活性
計算出樣 本中的纖維結(jié)合蛋白的濃度。
[0020]表1為實施例1所制得的測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒以及實施例2所制得的測定纖 維結(jié)合蛋白的試劑盒分別對質(zhì)控品1進(jìn)行測定的結(jié)果，其中質(zhì)控品1中的纖維結(jié)合蛋白的濃 度為100 ug/mL，測定結(jié)果見表1: 表1
由表1可知，本發(fā)明所制得的測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒對質(zhì)控品1的測定結(jié)果偏差較 小，因此測定準(zhǔn)確度高，而且實施例1為最優(yōu)的選擇。
[0021] 表2為實施例1所制得的測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒以及實施例2所制得的測定纖維結(jié) 合蛋白的試劑盒分別對質(zhì)控品2進(jìn)行測定的結(jié)果，其中質(zhì)控品2中的纖維結(jié)合蛋白的濃度為 200 ug/mL，測定結(jié)果見表2:
由表2可知，本發(fā)明所制得的測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒對質(zhì)控品2的測定結(jié)果偏差較 小，因此測定準(zhǔn)確度高，而且實施例1為最優(yōu)的選擇。
[0022]表3為實施例3所制得的測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒對同一待測樣本進(jìn)行的多次 反復(fù)測定以及實施例4所制得的測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒對同一待測樣本進(jìn)行的多次反 復(fù)測定，對所得的結(jié)果進(jìn)行SD和CV的計算，結(jié)果如下： 表3
由表3可知本發(fā)明所制得的測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒的精密度比較好，而且由表3可 知，實施例3為最優(yōu)的選擇。
[0023]上述實施例僅例示性說明本發(fā)明的原理及其功效，而非用于限制本發(fā)明。任何熟 悉此技術(shù)的人士皆可在不違背本發(fā)明的精神及范疇下，對上述實施例進(jìn)行修飾或改變。因 此，舉凡所屬技術(shù)領(lǐng)域中具有通常知識者在未脫離本發(fā)明所揭示的精神與技術(shù)思想下所完 成的一切等效修飾或改變，仍應(yīng)由本發(fā)明的權(quán)利要求所涵蓋。
【主權(quán)項】
1. 一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒，其特征在于:包括彼此獨立的試劑R1和試劑R2雙 液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 15~185 mmol/L 無機(jī)鹽離子 150~450 mmol/L 加速劑 5~25 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 抗人類風(fēng)濕因子抗體 0.2~0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 50~150 mmol/L 助懸劑 5~35 mmol/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體 1~8 g/L 其溶劑為純化水。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒，其特征在于:包括彼此獨立 的試劑R1和試劑R2雙液體組分，包括的成分及相應(yīng)含量為： 試劑R1: 緩沖液 100 mmol/L 無機(jī)鹽離子 300 mmol/L 加速劑 15 g/L 防腐劑 〇.7g/L 抗人類風(fēng)濕因子抗體 0.5 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 100 mmol/L 助懸劑 20 mmol/L 防腐劑 0.7 g/L 穩(wěn)定劑 11 g/L 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體 5g/L 其溶劑為純化水。3. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒，其特征在于:所述的試 劑R1中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、MES緩沖液、磷酸鹽緩沖液、M0PS0緩沖液中的一種 或多種的組合，所述的無機(jī)鹽離子采用氯化鉀、硫酸鉀、氯化鈉中的一種或多種的組合，所 述的加速劑采用聚乙二醇-2000、聚乙二醇-8000、聚乙烯吡咯烷酮中的一種或多種的組合， 所述的防腐劑采用山梨酸鈉、苯甲酸鈉、疊氮鈉、硫柳汞、苯酚中的一種或多種的組合，所述 的抗人類風(fēng)濕因子抗體采用兔抗人多克隆抗體、羊抗人多克隆抗體、兔抗人單克隆抗體、羊 抗人單克隆抗體中的一種。4. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒，其特征在于:所述的試 劑R2中，所述的緩沖液采用Tris緩沖液、MES緩沖液、磷酸鹽緩沖液、MOPSO緩沖液中的一種 或多種的組合，所述的助懸劑采用乙二醇、丙三醇、麥芽糖中的一種或多種的組合，所述的 防腐劑采用山梨酸鈉、苯甲酸鈉、疊氮鈉、硫柳汞、苯酚中的一種或多種的組合，所述的穩(wěn)定 劑為牛血清白蛋白。5. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒，其特征在于:所述的膠 乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體的制備方法為：用50 mmol/L的MES緩沖液將粒徑為80-500nm 的聚苯乙烯微球稀釋成為所含的聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為1%-5%的溶液，然后每毫升溶 液中加入1.0 mg的1-乙基-3-(3-二甲基胺丙基)碳化二亞胺鹽酸鹽，在20°C_37°C的條件 下反應(yīng)1小時，使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，使用超聲分散儀進(jìn)行超聲分散，再使用離心機(jī)，在25000 rpm/min的轉(zhuǎn)速下離心30分鐘，去上清，再將沉淀用50 mmol/L的MES緩沖液進(jìn)行稀釋，超聲 分散，邊分散邊加入抗人纖維結(jié)合蛋白抗體，直至聚苯乙烯微球的質(zhì)量濃度為0.5%-2.0%時 為止，最后加入牛血清白蛋白，直至牛血清白蛋白的濃度為25g/L為止，4°C條件下封閉8-12 小時，即可制備得到膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體。6. 根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒的制備方法和使用方法， 其特征在于:包括以下步驟： (a) 按照下列組分含量配制好試劑： 試劑R1: 緩沖液 15~185 mmol/L 無機(jī)鹽離子 150~450 mmol/L 加速劑 5~25 g/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 抗人類風(fēng)濕因子抗體 0.2~0.8 g/L 其溶劑為純化水 試劑R2: 緩沖液 50~150 mmol/L 助懸劑 5~35 mmol/L 防腐劑 0.6~0.9 g/L 穩(wěn)定劑 4~18 g/L 膠乳包被抗人纖維結(jié)合蛋白抗體 1~8 g/L 其溶劑為純化水； (b) 將待測樣本與試劑R1和試劑R2混合，使其充分反應(yīng)； (c) 用全自動生化分析儀測定反應(yīng)后的吸光度差值； (d) 根據(jù)吸光度變化值計算出樣本中的纖維結(jié)合蛋白的濃度。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒的制備方法和使用方法，其 特征在于:步驟(b)中，所述的試劑R1和試劑R2的體積比為4:1。8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的一種測定纖維結(jié)合蛋白的試劑盒的制備方法和使用方法，其 特征在于：步驟(b)中，所述的待測樣本與試劑R1和試劑R2的總體積的體積比在1:10到1:
【文檔編號】G01N1/38GK106093417SQ201610358108
【公開日】2016年11月9日
【申請日】2016年5月26日
【發(fā)明人】蔡曉輝, 莊慶華, 吳錚, 徐運
【申請人】安徽伊普諾康生物技術(shù)股份有限公司