專利名稱：不對(duì)稱吲哚菁染料的固相合成方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及近紅外不對(duì)稱吲哚菁染料的固相合成方法。
背景技術(shù)：
吲哚菁染料(簡(jiǎn)稱Cy)是一類重要的菁染料。由于其具有摩爾消光系數(shù)大，熒光性能良好，與基質(zhì)結(jié)合后熒光效率增大，最大吸收波長可調(diào)協(xié)范圍大，且有相對(duì)較高的穩(wěn)定性等優(yōu)點(diǎn)，在紅外激光染料，光盤存儲(chǔ)材料，生物分析，核酸和蛋白質(zhì)標(biāo)記等方面得到了廣泛的應(yīng)用。常見的吲哚菁染料的基本結(jié)構(gòu)如式(1)所示。
根據(jù)分子中次甲基數(shù)目的多少可分為吲哚單菁(一甲川菁)，吲哚碳菁(三甲川菁)，吲哚二碳菁(五甲川菁)，吲哚三碳菁(七甲川菁)等；另外根據(jù)分子中兩個(gè)雜環(huán)及其雜環(huán)上取代基的相同與否，將其分為結(jié)構(gòu)對(duì)稱和不對(duì)稱吲哚菁染料。
目前合成吲哚菁染料的方法主要是液相合成法。對(duì)稱吲哚菁染料的制備通常是用1-位取代的2-甲基吲哚分子中2-位的親核性甲基與具有親電性的次甲基縮合劑進(jìn)行反應(yīng)實(shí)現(xiàn)的。不對(duì)稱吲哚菁染料的制備則是先用次甲基縮合劑與等摩爾的2-位上帶有親核活性甲基的1-取代吲哚反應(yīng)得到中間產(chǎn)物；然后再將中間產(chǎn)物與另一結(jié)構(gòu)不同的2-位上帶有活性甲基的1-取代吲哚反應(yīng)得到不對(duì)稱吲哚菁染料[RatnakarB.Mujumdar，Lauren A.Ernst，Swati R.Mujumdar，Christopher J.Lewis，andAlan S.Waggoner.Bioconjugate Chemistry，1993，4(2)，105-111]。這種液相合成方法操作復(fù)雜，產(chǎn)率低，最后得到的是對(duì)稱與不對(duì)稱吲哚菁染料的混合物，難以提純。尤其是對(duì)于以高純度不對(duì)稱吲哚菁染料為合成目標(biāo)的制備過程中，所得產(chǎn)物的分離純化十分困難，需要利用繁鎖的色譜分離才可得到較純的產(chǎn)品。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題在于克服上述不對(duì)稱吲哚菁染料液相制備方法的缺點(diǎn)，提供一種產(chǎn)品純度高、成本低、生產(chǎn)周期短、產(chǎn)品易于純化的不對(duì)稱吲哚菁染料的固相合成方法。
解決上述技術(shù)問題所采用的技術(shù)方案是以聚乙二醇共價(jià)負(fù)載的苯胺為起始反應(yīng)物，通過與原甲酸酯或1，1，3，3-四甲氧基丙烷反應(yīng)生成聚乙二醇負(fù)載的次甲基親電試劑；用該負(fù)載的親電試劑與親核性1-位取代2-甲基吲哚或其衍生物反應(yīng)形成聚乙二醇負(fù)載的半菁染料；而另一具有親核性的1-位取代2-甲基吲哚或其衍生物進(jìn)攻負(fù)載的半菁染料時(shí)，生成用化學(xué)結(jié)構(gòu)通式(1)表示的不對(duì)稱吲哚菁染料。
通式(1)中，R1、R2為-SO3H、-SO-3、-SO3K、-COOH、-COO-、-COOK、H的一種，R1、R2相同或不相同，R1、R2在吲哚結(jié)構(gòu)單元的4-、5-、6-、7-位中一處，R3、R4為C1～10烷基或m為0～8的-CH2(CH2)mCOOH基或m為0～8的-CH2(CH2)mSO3H基，R3與R4為不相同的基團(tuán)，n為1或2，該合成方法包括下述步驟步驟1制備聚乙二醇負(fù)載的次甲基親電試劑將結(jié)構(gòu)式為(2)的聚乙二醇負(fù)載的苯胺、原甲酸酯或1，1，3，3-四甲氧基丙烷按摩爾比為1∶15～50的配比加入其總量為1.4～3倍的冰醋酸中，攪拌下30～60℃反應(yīng)1～5.5小時(shí)，冷至0～30℃加入反應(yīng)液體積0.9～4倍量的乙醚，攪拌5分鐘，靜置10～20分鐘，過濾，得結(jié)構(gòu)式為(3)或(4)的聚乙二醇負(fù)載的次甲基親電試劑，化學(xué)反應(yīng)方程式如下 上反應(yīng)式中的PEG為聚乙二醇載體。
步驟2制備聚乙二醇負(fù)載的半菁染料將結(jié)構(gòu)式為(3)或(4)的聚乙二醇負(fù)載的次甲基親電試劑、結(jié)構(gòu)式為(5)吲哚化合物以1∶0.5～2的摩爾比溶于其總量1.0～10倍量的無水乙醇或冰醋酸中，通入氮?dú)猓獨(dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min，攪拌下70～110℃反應(yīng)1～5小時(shí)，冷至0～30℃加入反應(yīng)液體積2.5～10倍量的乙醚，攪拌5分鐘，靜置10～20分鐘，過濾，得結(jié)構(gòu)式為(6)的聚乙二醇負(fù)載的半菁染料；化學(xué)反應(yīng)方程式如下 上反應(yīng)式中R1、R3和n與通式(1)相同。
步驟3制備不對(duì)稱吲哚菁染料將結(jié)構(gòu)式為(6)的聚乙二醇負(fù)載的半菁染料、結(jié)構(gòu)式為(7)的吲哚化合物按摩爾比為1∶0.45～1溶于其總量為1.4～6倍的醋酸酐和吡啶的混合溶劑中，在混合溶劑中醋酸酐與吡啶的體積比為2∶1，通入氮?dú)?，氮?dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min，攪拌下20～110℃反應(yīng)15～60分鐘，冷至室溫，加入反應(yīng)液總體積7～15倍量的乙酸乙酯得沉淀物，用二氯甲烷洗滌沉淀物至二氯甲烷洗液為無色，得不對(duì)稱吲哚菁染料，化學(xué)反應(yīng)方程式如下 上述不對(duì)稱吲哚菁染料通式(1)中，R1、R2優(yōu)選為-SO-3，R1、R2在吲哚結(jié)構(gòu)單元的5-位，R3優(yōu)選為乙基，R4優(yōu)選為-CH2(CH2)4COOH基，n為1或2，為結(jié)構(gòu)式(8)所示的化合物 (8)式中n是1時(shí)為不對(duì)稱吲哚菁染料Cy3，n是2時(shí)為不對(duì)稱吲哚菁染料Cy5。
本發(fā)明所用的載體聚乙二醇的平均分子量為1000～8000。
本發(fā)明的工藝步驟1中，將結(jié)構(gòu)式為(2)的聚乙二醇負(fù)載的苯胺、原甲酸酯或1，1，3，3-四甲氧基丙烷優(yōu)選按摩爾比為1∶20～45的配比加入其總量為1.4～3倍的冰醋酸中。
本發(fā)明的工藝步驟2中，次甲基親電試劑優(yōu)選為一次甲基親電試劑或三次甲基親電試劑。
本發(fā)明利用聚乙二醇可溶于大多數(shù)有機(jī)溶劑，而在乙醚中不溶能以固體析出的特點(diǎn)，以其作為不對(duì)稱吲哚菁染料合成的載體，既兼顧了不溶性高分子材料做載體時(shí)產(chǎn)品易于分離純化、載體可循環(huán)使用的特點(diǎn)，又使反應(yīng)具有均相反應(yīng)的特點(diǎn)。反應(yīng)進(jìn)程可用常規(guī)分析方法，如紫外光譜、紅外光譜、核磁共振和薄層色譜等方法進(jìn)行檢測(cè)，無需將制備過程中的產(chǎn)物從聚乙二醇上解脫下來。在反應(yīng)的最后一步通過具有親核性甲基碳的吲哚雜環(huán)化合物的親核性進(jìn)攻，使半菁染料易于從負(fù)載物上裂解下來，生成結(jié)構(gòu)不對(duì)稱吲哚菁染料；在該步反應(yīng)中使用不足量的吲哚化合物進(jìn)行反應(yīng)，避免了副產(chǎn)物的生成，使最終所得不對(duì)稱吲哚菁染料的提純過程簡(jiǎn)化，產(chǎn)品純度增高。
具體實(shí)施例方式
下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步說明本發(fā)明，但并不是本發(fā)明內(nèi)容范圍的任何限制。
實(shí)施例中所用聚乙二醇負(fù)載的苯胺按文獻(xiàn)[Hongchao Guo，Zheng Wang，andKuiling Ding.Synthesis，2005，(7)，1061-1068]方法制備；1-乙基-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽和1-(ε-羧戊基)-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽按文獻(xiàn)[Ratnakar B.Mujumdar，Lauren A.Ernst，Swati R.Mujumdar，Christopher J.Lewis，and Alan S.Waggoner.Bioconjugate Chemistry，1993，4(2)，105-111]方法制備；其它化學(xué)試劑均為分析純。化合物結(jié)構(gòu)鑒定所用的核磁共振儀為BrukerAM-300超導(dǎo)核磁共振儀，TMS作為內(nèi)標(biāo)；紅外光譜采用Nicolet 170SX FT-IR紅外光譜儀測(cè)定；產(chǎn)品純度分析利用Agilent 1100LC高效液相色譜儀，檢測(cè)波長為280nm，250mm×4.6mm RP-C18柱。
制備實(shí)施例1不對(duì)稱吲哚菁染料Cy3的合成步驟如下步驟1.制備聚乙二醇-2000負(fù)載的一次甲基親電試劑聚乙二醇-2000負(fù)載的苯胺3.02g(1.35mmol)、原甲酸三乙酯10ml(60mmol)溶解在27ml冰醋酸中，電磁攪拌下55℃反應(yīng)5.5小時(shí)。冷至冷至室溫，向反應(yīng)液中加入50ml乙醚，電磁攪拌5分鐘后靜置10～20分鐘，過濾得淡黃色固體物聚乙二醇-2000負(fù)載的一次甲基親電試劑2.43g，收率80.1％。IR(KBr)v3446，2884，1701，1638，1604，1529cm-1.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.53(s，1H)，8.14(d，4H)，7.27(d，4H)，3.3-4.5(m，聚乙二醇)。反應(yīng)式如下 上反應(yīng)式中的PEG為聚乙二醇載體。
步驟2.制備聚乙二醇-2000負(fù)載的二次甲基半菁染料聚乙二醇-2000負(fù)載的一次甲基親電試劑2.35g(1.05mmol)，1-乙基-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽0.28g(1.05mmol)和原甲酸三乙酯0.34mL(2.08mmol)溶解在5mL無水乙醇中，通入氮?dú)?，氮?dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min。電磁攪拌下回流反應(yīng)2.5小時(shí)。冷至室溫加入50mL乙醚，電磁攪拌5分鐘，靜置10～20分鐘，過濾，得黃色固體物聚乙二醇-2000負(fù)載的二次甲基半菁染料1.83g，收率69.3％。IR(KBr)v3430，2881，1701，1638，1603，1534cm-1。反應(yīng)式如下 步驟3制備不對(duì)稱吲哚菁染料Cy3聚乙二醇-2000負(fù)載的二次甲基半菁染料0.592g(0.24mmol)、1-(ε-羧戊基)-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽0.038g(0.11mmol)溶解在由2mL醋酸酐和1mL吡啶形成的混合溶劑中，通入氮?dú)猓獨(dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min，電磁攪拌下110℃反應(yīng)15分鐘。冷至室溫后加入40mL乙酸乙酯得深紅色沉淀。該沉淀用二氯甲烷洗滌至二氯甲烷洗液為無色后得0.015g紅色固體不對(duì)稱吲哚菁染料Cy3，收率21.6％。高效液相色譜純度分析，流動(dòng)相甲醇，流速1.0mL/min，保留時(shí)間2.19min，純度大于98％。1H NMR(300MHz，D2O)δ8.31(dd，1H，次甲基橋上的β-H)，7.70(m，4H，4-H，4’-H，6-H，6’-H)，7.16(m，2H，7-H，7’-H)，6.19(m，2H，次甲基橋上的α-，α’-H)，3.91(m，4H，α-，α’-CH2)，2.03(t，2H，-CH2COOH)，1.15-1.64(m，21H，3CH2，1CH3和2(CH3)2).13C NMR(300MHz，D2O)δ183.5，175.8，175.5，151.9，144.1，143.7，141.7，141.5，139.7，139.60，126.8，119.8，111.5，111.3，103.4，49.3，44.3，39.6，37.3，27.1，27.0，26.6，26.1，25.6，11.9。反應(yīng)式如下
制備實(shí)施例2不對(duì)稱吲哚菁染料Cy5的合成步驟如下步驟1制備聚乙二醇-2000負(fù)載的三次甲基親電試劑聚乙二醇-2000負(fù)載的苯胺2.02g(0.90mmol)、1，1，3，3-四甲氧基丙烷3.7mL(22.2mmol)溶解在9mL冰醋酸中，電磁攪拌下55℃反應(yīng)5.5小時(shí)。冷至室溫后向反應(yīng)液中加入30mL乙醚，電磁攪拌5分鐘后靜置10～20分鐘，過濾得黃色固體物聚乙二醇-2000負(fù)載的三次甲基親電試劑1.56g，收率73.0％。IR(KBr)v3437，2886，1706，1639，1601，1465cm-1.1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.06(m，3H)，7.85(d，1H)，7.11(d，2H)，6.65(dd，1H)，3.3-4.5(m，聚乙二醇)。反應(yīng)方程如下 步驟2制備聚乙二醇-2000負(fù)載的四次甲基半菁染料聚乙二醇-2000負(fù)載的三次甲基親電試劑0.810g(0.34mmol)，1-乙基-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽0.090g(0.34mmol)加于7.5ml冰醋酸中，通入氮?dú)猓獨(dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min。在電磁攪拌下80℃反應(yīng)1小時(shí)。冷至室溫后加入30mL乙醚，電磁攪拌5分鐘，靜置10～20分鐘，過濾得褐色固體物聚乙二醇負(fù)載的四次甲基半菁染料0.812g，收率83.9％。IR(KBr)v3436，2886，1712，1638，1599，1463cm-1。反應(yīng)式如下 步驟3制備不對(duì)稱吲哚菁染料Cy5
聚乙二醇-2000負(fù)載的四次甲基半菁染料0.501g(0.18mmol)、1-(ε-羧戊基)-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽0.033g(0.09mmol)溶解在由2ml乙酸酐和1mL吡啶形成的混合溶劑中，通入氮?dú)?，氮?dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min，電磁攪拌下110℃反應(yīng)15分鐘。冷至室溫后加入40mL乙酸乙酯得藍(lán)色沉淀。該沉淀用二氯甲烷洗滌至二氯甲烷洗液為無色后得0.014g藍(lán)色固體不對(duì)稱吲哚菁染料Cy5，收率23.7％。高效液相色譜純度分析，流動(dòng)相甲醇∶水＝85∶15(V/V)，流速1.0ml/min，保留時(shí)間1.98min，純度大于98％。1H NMR(300MHz，D2O)δ7.70-7.86(m，6H，4-H，4’-H，6-H，6’-H，次甲基橋上的β-，β’-H)，7.26(m，2H，7-H，7’-H)，6.38(dd，1H，次甲基橋上的γ-H)，6.06(m，2H，次甲基橋上的α-，α’-H)，3.98(m，4H，α-，α’-CH2)，2.18(t，2H，-CH2COOH)，1.27-1.72(m，21H，3CH2，1CH3和2(CH3)2).13C NMR(300MHz，D2O)δ183.1，173.9，173.7，154.3，144.2，143.7，141.9，141.8，139.4，139.3，126.6，119.8，111.1，110.9，104.0，103.8，49.1，49.0，44.1，39.4，37.1，26.8，26.7，26.1，25.6，11.7。反應(yīng)式如下 制備實(shí)施例3不對(duì)稱吲哚菁染料Cy3的合成步驟如下步驟1制備聚乙二醇-1000負(fù)載的一次甲基親電試劑聚乙二醇-1000負(fù)載的苯胺1.67g(1.35mmol)、原甲酸三乙酯10mL(60mmol)溶解在27mL冰醋酸中，電磁攪拌下55℃反應(yīng)5.5小時(shí)。冰浴冷卻至0～5℃，再向反應(yīng)液中加入50mL乙醚，電磁攪拌5分鐘后繼續(xù)在冰浴中靜置10～20分鐘，過濾得淡黃色固體物聚乙二醇-1000負(fù)載的一次甲基親電試劑1.20g，收率71.2％。
步驟2制備聚乙二醇-1000負(fù)載的二次甲基半菁染料聚乙二醇-1000負(fù)載的一次甲基親電試劑1.31g(1.05mmol)，1-乙基-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽0.28g(1.05mmol)和原甲酸三乙酯0.34mL(2.08mmol)溶解在5mL無水乙醇中，通入氮?dú)?，氮?dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min。在電磁攪拌下加熱至回流，反應(yīng)2.5小時(shí)。反應(yīng)完畢后冰浴冷卻至0～5℃加入50mL乙醚，電磁攪拌5分鐘后繼續(xù)在冰浴中靜置10～20分鐘，過濾得黃色固體物聚乙二醇-1000負(fù)載的二次甲基半菁染料1.07g，收率67.2％。
步驟3制備不對(duì)稱吲哚菁染料Cy3聚乙二醇-1000負(fù)載的二次甲基半菁染料0.364g(0.24mmol)、1-(ε-羧戊基)-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽0.038g(0.11mmol)溶解在由2mL醋酸酐和1mL吡啶形成的混合溶劑中，通入氮?dú)?，氮?dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min，電磁攪拌下110℃反應(yīng)15分鐘。冷至室溫后加入40mL乙酸乙酯得深紅色沉淀。該沉淀用二氯甲烷洗滌至二氯甲烷洗液為無色后得0.014g紅色固體不對(duì)稱吲哚菁染Cy3，收率20.2％。
制備實(shí)施例4不對(duì)稱吲哚菁染料Cy3的合成步驟如下步驟1制備聚乙二醇-8000負(fù)載的一次甲基親電試劑聚乙二醇-8000負(fù)載的苯胺11.12g(1.35mmol)，原甲酸三乙酯10mL(60mmol)溶解在30mL冰醋酸中，電磁攪拌下55℃反應(yīng)5.5小時(shí)。冷至室溫向反應(yīng)液中加入50mL乙醚，電磁攪拌5分鐘后靜置10～20分鐘，過濾得淡黃色固體物聚乙二醇-8000負(fù)載的一次甲基親電試劑8.39g，收率75.3％。
步驟2制備聚乙二醇-8000負(fù)載的二次甲基半菁染料聚乙二醇-8000負(fù)載的一次甲基親電試劑8.66g(1.05mmol)，1-乙基-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽0.28g(1.05mmol)和原甲酸三乙酯0.34mL(2.08mmol)溶解在10mL無水乙醇中，通入氮?dú)?，氮?dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min。在電磁攪拌下加熱至回流，反應(yīng)2.5小時(shí)。冷至室溫加入50mL乙醚，電磁攪拌5分鐘后靜置10～20分鐘，過濾得黃色固體物聚乙二醇-8000負(fù)載的二次甲基半菁染料5.83g，收率65.2％。
步驟3制備不對(duì)稱吲哚菁染料Cy3聚乙二醇-8000負(fù)載的二次甲基半菁染料2.044g(0.24mmol)、1-(ε-羧戊基)-2，3，3-三甲基吲哚-5-磺酸鹽0.042g(0.12mmol)溶解在由2mL醋酸酐和1mL吡啶形成的混合溶劑中，通入氮?dú)?，氮?dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min，電磁攪拌下110℃反應(yīng)15分鐘。冷至室溫后加入40mL乙酸乙酯得深紅色沉淀。該沉淀用二氯甲烷洗滌至二氯甲烷洗液為無色后得0.016g紅色固體不對(duì)稱吲哚菁染料Cy3，收率21.2％。
權(quán)利要求
1.一種不對(duì)稱吲哚菁染料的固相合成方法，該不對(duì)稱吲哚菁染料的化學(xué)結(jié)構(gòu)通式為 通式(1)中，R1、R2為-SO3H、-SO-3、-SO3K、-COOH、-COO-、-COOK、H的一種，R1、R2相同或不相同，R1、R2在吲哚結(jié)構(gòu)單元的4-、5-、6-、7-位中一處，R3、R4為C1～10烷基或m為0～8的-CH2(CH2)mCOOH基或m為0～8的-CH2(CH2)mSO3H基，R3與R4為不相同的基團(tuán)，n為1或2，其特征在于該方法包括下述步驟步驟1制備聚乙二醇負(fù)載的次甲基親電試劑將結(jié)構(gòu)式為(2)的聚乙二醇負(fù)載的苯胺、原甲酸酯或1，1，3，3-四甲氧基丙烷按摩爾比為1∶15～50的配比加入其總量為1.4～3倍的冰醋酸中，攪拌下30～60℃反應(yīng)1～5.5小時(shí)，冷至0～30℃加入反應(yīng)液體積0.9～4倍量的乙醚，攪拌5分鐘，靜置10～20分鐘，過濾，得結(jié)構(gòu)式為(3)或(4)的聚乙二醇負(fù)載的次甲基親電試劑，化學(xué)反應(yīng)方程式如下 上反應(yīng)式中的PEG為聚乙二醇載體；步驟2制備聚乙二醇負(fù)載的半菁染料將結(jié)構(gòu)式為(3)或(4)的聚乙二醇負(fù)載的次甲基親電試劑、結(jié)構(gòu)式為(5)吲哚化合物以1∶0.5～2的摩爾比溶于其總量1.0～10倍量的無水乙醇或冰醋酸中，通入氮?dú)?，氮?dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min，攪拌下70～110℃反應(yīng)1～5小時(shí)，冷至0～30℃加入反應(yīng)液體積2.5～10倍量的乙醚，攪拌5分鐘，靜置10～20分鐘，過濾，得結(jié)構(gòu)式為(6)的聚乙二醇負(fù)載的半菁染料，化學(xué)反應(yīng)方程式如下 上反應(yīng)式中R1、R3和n與通式(1)相同；步驟3制備不對(duì)稱吲哚菁染料將結(jié)構(gòu)式為(6)的聚乙二醇負(fù)載的半菁染料、結(jié)構(gòu)式為(7)的吲哚化合物按摩爾比為1∶0.45～1溶于其總量為1.4～6倍的醋酸酐和吡啶的混合溶劑中，在混合溶劑中醋酸酐與吡啶的體積比為2∶1，通入氮?dú)猓獨(dú)獾牧魉贋?.2～0.3L/min，攪拌下20～110℃反應(yīng)15～60分鐘，冷至室溫，加入反應(yīng)液總體積7～15倍量的乙酸乙酯得沉淀物，用二氯甲烷洗滌沉淀物至二氯甲烷洗液為無色，得不對(duì)稱吲哚菁染料，化學(xué)反應(yīng)方程式如下
2.按照權(quán)利1所述的不對(duì)稱吲哚菁染料的固相合成方法，其特征在于所說的不對(duì)稱吲哚菁染料通式(1)中，R1、R2其中為-SO-3，R1、R2在吲哚結(jié)構(gòu)單元的5-位，R3其中為乙基，R4其中為-CH2(CH2)4COOH基，n為1或2，為結(jié)構(gòu)式(8)所示的化合物 (8)式中n是1時(shí)為不對(duì)稱吲哚菁染料Cy3，n是2時(shí)為不對(duì)稱吲哚菁染料Cy5。
3.按照權(quán)利1所述的不對(duì)稱吲哚菁染料的固相合成方法，其特征在于所說的載體聚乙二醇的平均分子量為1000～8000。
4.按照權(quán)利1所述的不對(duì)稱吲哚菁染料的固相合成方法，其特征在于在工藝步驟1中，將結(jié)構(gòu)式為(2)的聚乙二醇負(fù)載的苯胺、原甲酸酯或1，1，3，3-四甲氧基丙烷其中按摩爾比為1∶20～45的配比加入其總量為1.4～3倍的冰醋酸中。
5.按照權(quán)利1所述的不對(duì)稱吲哚菁染料的固相合成方法，其特征在于在工藝步驟2中，所說的次甲基親電試劑其中為一次甲基親電試劑或三次甲基親電試劑。
全文摘要
一種不對(duì)稱吲哚菁染料的固相合成方法，包括制備聚乙二醇為載體負(fù)載次甲基親電試劑；用該負(fù)載的親電試劑與親核性1－位取代2－甲基吲哚或其衍生物反應(yīng)制成負(fù)載的半菁染料；而另一具有親核性碳原子的1－位取代2－甲基吲哚或其衍生物進(jìn)攻負(fù)載的半菁染料時(shí)，發(fā)生親核反應(yīng)得到高純度的結(jié)構(gòu)不對(duì)稱吲哚菁染料。反應(yīng)中被聚乙二醇負(fù)載的各物質(zhì)，具有在多數(shù)有機(jī)溶劑中可溶，而在乙醚中不溶的特點(diǎn)，使得過程中的每一反應(yīng)，具有均相、易反應(yīng)的優(yōu)點(diǎn)，又具有固相反應(yīng)生成產(chǎn)物易于分離的特點(diǎn)。采用本發(fā)明所制備的不對(duì)稱吲哚菁染料成本低、生產(chǎn)周期短、產(chǎn)品易于純化、純度高，無需使用色譜方法分離純化。
文檔編號(hào)C09B23/00GK101029179SQ20071001732
公開日2007年9月5日 申請(qǐng)日期2007年1月30日 優(yōu)先權(quán)日2007年1月30日
發(fā)明者李寶林, 竇麗芳, 蔣林玲 申請(qǐng)人:陜西師范大學(xué)