一種離子型磷光銥配合物及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于有機光電功能材料技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種含氮氧自由基的憐光銀配 合物材料及其制備方法和應(yīng)用。 技術(shù)背景
[0002] 維生素C，又稱抗壞血酸（AA)，是一種具有抗氧化作用的有機酸，也是生命所必需 的一種水溶性營養(yǎng)物，它作用于多項人體機能。在人的生理環(huán)境中，抗壞血酸不僅作為一種 輔酶因子，也是與神經(jīng)遞質(zhì)相關(guān)酶的一種重要的組成成分，并且在維持正常細胞的生長W 及調(diào)控膽固醇和甘油=醋的合成等生理活動中發(fā)揮重要作用。缺乏維生素C將導致壞血病 或引發(fā)中風等屯、血管疾病，但是研究表明過量攝入維生素C也會導致腹瀉、胃酸過多癥和 腎臟結(jié)石。
[0003] 目前檢測抗壞血酸的方法眾多，液相色譜法、分光光度法、ESR光譜法W及電化學 的方法，但是W上的方法各自存在一些不足之處，比如液相色譜法的操作步驟復雜且時間 較長，分光光度法因其檢測中影響因素較多導致準確性差，ESR光譜法則存在成本較高，數(shù) 據(jù)處理難度大的問題，電化學的方法也因與抗壞血酸氧化還原電位類似的尿酸等物質(zhì)干擾 大，W致檢測的靈敏性較差。
[0004] 目前實現(xiàn)抗壞血酸檢測的探針多為巧光染料，然而，運些有機分子由于光穩(wěn)定性 差，背景巧光干擾大，細胞毒性大等缺點限制了其在生物成像領(lǐng)域的應(yīng)用。相比于巧光檢測 信號，憐光銀配合物除了能應(yīng)用其自旋一軌道禪合提高電致發(fā)光的量子效率外，其相對較 長的憐光壽命使之成為一種非常理想的生物巧光成像標記染料。由于不同于有機分子，憐 光過渡金屬銀配合物具有W下幾大特點：具有較大的Stokes位移和較長的發(fā)射壽命，長的 發(fā)射壽命有利于使用時間分辨技術(shù)使憐光信號與背景的巧光信號區(qū)分開，具有優(yōu)越的光穩(wěn) 定性便于長時間觀測。 陽0化]由此可見，找到一種穩(wěn)定性更好、細胞毒性更低的可用于生物體檢測的長壽命抗 壞血酸檢測探針是本領(lǐng)域亟待解決的問題。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 1、技術(shù)問題
[0007] 為了克服現(xiàn)存技術(shù)中，巧光探針光穩(wěn)定性差、細胞毒性大等問題，本發(fā)明提供了一 類可用于檢測抗壞血酸的憐光發(fā)射的銀配合物。
[0008] 本發(fā)明的另一目的在于給出所述憐光發(fā)射銀配合物的制備方法。
[0009] 本發(fā)明的再一目的在于提出所述憐光發(fā)射銀配合物在抗壞血酸檢測、生物標記與 細胞成像領(lǐng)域中的應(yīng)用。
[0010] 2、技術(shù)方案
[0011] 本發(fā)明提供了一種離子型憐光銀配合物，所述銀配合物的輔助配體上含有氮氧自 由基，該銀配合物具有如下結(jié)構(gòu)通式：
[0012] 陽013] 其中，C~N配體為下列結(jié)構(gòu)中的一個：
[0014]
- ?
[0015] 本發(fā)明還提供了一種所述離子型憐光銀配合物的制備方法，該制備方法包括W下 步驟：
[0016] (1)4,4'-二甲基-2,2'-聯(lián)化晚經(jīng)過氧化、甲氧基化、醋的還原、氨漠酸取代四步 反應(yīng)得到N~N輔助配體；
[0017] 似將所述步驟1得到的輔助配體與銀二氯橋（(C~N)2lr(ii-Cl)2lr((rN)2)通過 配位反應(yīng)制備得到配合物中間體，其中C~N為所述C~N配體中的一種； 陽01引 做將所述步驟2得到的配合物中間體與4-氨基-2, 2, 6, 6-四甲基贓晚氮氧自由 基W及碳酸鐘粉末溶解于N-甲基化咯燒酬溶液中反應(yīng)，得到目標銀配合物。
[0019] 本發(fā)明還提供了一種所述離子型憐光銀配合物在抗壞血酸檢測上的應(yīng)用。
[0020] 所述離子型憐光銀配合物還可用于細胞成像和時間分辨技術(shù)上。
[0021] 3、有益效果
[0022] 本發(fā)明合成的材料用作抗壞血酸檢測憐光探針，在抗壞血酸存在下憐光發(fā)射增 強，為化rn-on型憐光探針，檢測效果顯著。
[0023] 本探針材料具有低生物毒性，且容易進入細胞胞漿中，長的憐光發(fā)射壽命可使用 時間分辨技術(shù)與背景巧光信號相區(qū)分W降低信噪比，使得運類探針可通過壽命成像和時間 口技術(shù)成像實現(xiàn)細胞內(nèi)抗壞血酸檢測，提高檢測精度。
【附圖說明】
[0024]圖1為實施例2中配合物Ir-2 [Ir(卵y)2-bpy-NO]+PFe的MLDI-TOF譜圖；
[00巧]圖2為實施例3中憐光探針I(yè)r-2在PBS緩沖溶液中的憐光發(fā)射光譜對抗壞血酸(Vc)的響應(yīng)性； 陽0%] 圖3為實施例3中憐光探針I(yè)r-2在PBS緩沖溶液中的憐光發(fā)射強度與初始強度 比與不同當量抗壞血酸（Vc)的線性擬合曲線；
[0027] 圖4為實施例4中憐光探針I(yè)r-2在PBS緩沖溶液中的壽命對抗壞血酸的響應(yīng)性。
[002引圖5為實施例5中憐光探針I(yè)r-2應(yīng)用于活細胞抗壞血酸檢測的共聚焦成像照片。
【具體實施方式】
[0029] 為了更好地理解本發(fā)明專利的內(nèi)容，下面通過具體的實例來進一步說明本發(fā)明的 技術(shù)方案。但運些實施實例并不限制本發(fā)明。
[0030] 實施例1:配合物Ir-I [Ir(卵y)2-bpy-Br]中Fe的合成
陽0巧 （1)4, 4' -二漠甲基-2,2' -聯(lián)化晚的合成 陽03引 I)氧化：取4,4'-二甲基-2,2'-聯(lián)化晚5g加入帶攬拌子的250血單口瓶，加入 80血濃HzSO這于水浴條件下劇烈攬拌，緩慢（保證溫度不會劇烈上升）加入17gKzCrzO,， 然后將其置于65°C攬拌化，冷卻至室溫，加水抽濾，干燥得白色粉末。II)甲氧基化：取I 所得產(chǎn)物2g與IOmLH2S〇4，100mLCH3OH加入帶攬拌子的單口瓶中，105°C回流過夜，反應(yīng)結(jié) 束加至大量水中出現(xiàn)白色絮狀沉淀，加入化OH溶液調(diào)抑約9.0,用CH2CI2萃取保留有機相， 無水Na2S〇4干燥，旋盡溶劑得到白色晶體，產(chǎn)率88%。III)醋的還原：取II所得產(chǎn)物630mg 與NaBHJg加入帶攬拌子的250血單口瓶中，加入80血重蒸的乙醇溶液，80°C回流化，反應(yīng) 結(jié)束加入20mL飽和畑典1溶液，旋除乙醇，用乙酸乙醋與水進行萃取，保留乙酸乙醋層，加 無水Na2S〇4干燥，旋除溶劑，真空干燥得到白色粉末。IV)氨漠酸取代：取III中所得中間產(chǎn) 物lOOmg，6血48 %皿r溶液加至帶攬拌子的單口瓶，緩慢加入9血濃H2SO4,原料溶解，置于 l〇〇°C油浴攬拌鍋中回流化，反應(yīng)結(jié)束，加入少量水，邊攬拌邊加KOH調(diào)抑至7.