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包含免疫應(yīng)答增強(qiáng)基因的雙順反子LAMP構(gòu)建體及其使用方法與流程

文檔序號:40575260發(fā)布日期:2025-01-03 11:40閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.一種分離的核酸分子,其包含:

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的分離的核酸分子,其中所述lamp蛋白選自lamp-1、lamp2、lamp-3、溶酶體整合膜蛋白-2(“l(fā)imp?2”)、macrosailin、endolyn、lamp5或邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白(“l(fā)imbic”)。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的分離的核酸分子,其中所述lamp蛋白選自seq?id?no:1-113中的任一者。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的分離的核酸分子,其中所述lamp蛋白與seq?id?no:1-113具有至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%的同一性。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的分離的核酸分子,其中所述lamp蛋白是lamp-1,并且其中所述lamp-抗原構(gòu)建體的兩個同源結(jié)構(gòu)域包括lamp-1同源結(jié)構(gòu)域1和lamp-1同源結(jié)構(gòu)域2。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的分離的核酸分子,其中所述人lamp-1同源結(jié)構(gòu)域1包含seq?idno:1的第29-194位殘基的氨基酸序列,或包含seq?id?no:198的第29-195位殘基的氨基酸序列。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6所述的分離的核酸分子,其中所述人lamp-1同源結(jié)構(gòu)域2包含seqid?no:1的第228-381位殘基的氨基酸序列。

8.根據(jù)權(quán)利要求1-7中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述lamp-抗原構(gòu)建體在所述兩個同源結(jié)構(gòu)域中的至少一者與所述抗原結(jié)構(gòu)域之間包含接頭。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的分離的核酸分子,其中所述接頭包含gpgpg或pmglp的氨基酸序列。

10.根據(jù)權(quán)利要求1-9中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述lamp-抗原構(gòu)建體進(jìn)一步包含lamp蛋白的跨膜結(jié)構(gòu)域。

11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的分離的核酸分子,其中所述跨膜結(jié)構(gòu)域包含seq?id?no:1的第383-405位殘基。

12.根據(jù)權(quán)利要求1-11中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述lamp-抗原構(gòu)建體進(jìn)一步包含信號序列。

13.根據(jù)權(quán)利要求12所述的分離的核酸分子,其中所述信號序列源自lamp蛋白,例如包含seq?id?no:1的第1-28位殘基或seq?id?no:198的第1-28位殘基的信號序列。

14.根據(jù)權(quán)利要求1-13中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述lamp-抗原構(gòu)建體進(jìn)一步包含lamp蛋白的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域。

15.根據(jù)權(quán)利要求14所述的分離的核酸分子,其中所述胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域包含seq?id?no:1的第406-417位殘基。

16.根據(jù)權(quán)利要求1-15中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述ireg包含cd40l、cd80、ox40、flt3l、gm-csf、il-12、il-21、il-23、il-15、cd70、cd86、il-7、il-18或il-33或其胞外結(jié)構(gòu)域中的一者或多者,任選地其中所述cd40l、cd80、ox40、flt3l、gm-csf、il-12、il-21、il-23或il-15與免疫球蛋白的fc結(jié)構(gòu)域融合。

17.根據(jù)權(quán)利要求1-16中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述分泌信號序列與所述ireg異源。

18.根據(jù)權(quán)利要求17所述的分離的核酸分子,其中所述分泌信號序列源自igkviii、ig-κ、四連接素或il-2,和/或其中所述第二多肽進(jìn)一步包含肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白d(spd)。

19.根據(jù)權(quán)利要求18所述的分離的核酸分子,其中所述第二多肽在ef-1α核心啟動子例如seq?id?no:124的啟動子的控制下表達(dá)。

20.一種組合物,其包含根據(jù)權(quán)利要求1-18中任一項所述的分離的核酸分子。

21.一種宿主細(xì)胞,其包含根據(jù)權(quán)利要求1-18中任一項所述的分離的核酸。

22.一種組合物,其包含根據(jù)權(quán)利要求20所述的宿主細(xì)胞。

23.一種治療患有疾病或病癥的受試者或在患有疾病或病癥或具有發(fā)生疾病或病癥的風(fēng)險的受試者中誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的方法,其中所述方法包括以足以在所述受試者中治療所述疾病或病癥或誘導(dǎo)免疫應(yīng)答的量向所述受試者施用根據(jù)權(quán)利要求1-18中任一項所述的分離的核酸分子、根據(jù)權(quán)利要求19所述的組合物或根據(jù)權(quán)利要求20所述的宿主細(xì)胞。

24.根據(jù)權(quán)利要求22所述的方法,其中所述方法進(jìn)一步包括向所述受試者施用至少一種第二治療劑。

25.一種分離的核酸分子,其包含:

26.根據(jù)權(quán)利要求25所述的分離的核酸分子,其中所述lamp蛋白選自lamp-1、lamp2、lamp-3、溶酶體整合膜蛋白-2(“l(fā)imp?2”)、macrosailin、endolyn、lamp5或邊緣系統(tǒng)相關(guān)膜蛋白(“l(fā)imbic”)。

27.根據(jù)權(quán)利要求26所述的分離的核酸分子,其中所述lamp蛋白選自seq?id?no:1-113中的任一者。

28.根據(jù)權(quán)利要求25或26所述的分離的核酸分子,其中所述lamp蛋白與seq?id?no:1-113具有至少70%、至少75%、至少80%、至少85%、至少90%、至少95%、至少96%、至少97%、至少98%或至少99%的同一性。

29.根據(jù)權(quán)利要求26所述的分離的核酸分子,其中所述lamp蛋白是lamp-1,并且其中所述her2-lamp的兩個同源結(jié)構(gòu)域包括lamp-1同源結(jié)構(gòu)域1和lamp-1同源結(jié)構(gòu)域2。

30.根據(jù)權(quán)利要求29所述的分離的核酸分子,其中所述人lamp-1同源結(jié)構(gòu)域1包含seqid?no:1的第29-194位殘基或seq?id?no:198的第29-195位殘基的氨基酸序列。

31.根據(jù)權(quán)利要求29或30所述的分離的核酸分子,其中所述人lamp-1同源結(jié)構(gòu)域2包含seq?id?no:1的第228-381位殘基的氨基酸序列,或包含seq?id?no:202的氨基酸序列。

32.根據(jù)權(quán)利要求25-31中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述her2-lamp在所述兩個同源結(jié)構(gòu)域中的至少一者與所述抗原結(jié)構(gòu)域之間包含接頭。

33.根據(jù)權(quán)利要求32所述的分離的核酸分子,其中所述接頭包含gpgpg或pmglp的氨基酸序列。

34.根據(jù)權(quán)利要求25-33中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述her2-lamp進(jìn)一步包含lamp蛋白的跨膜結(jié)構(gòu)域。

35.根據(jù)權(quán)利要求34所述的分離的核酸分子,其中所述跨膜結(jié)構(gòu)域包含seq?id?no:1的第383-405位殘基。

36.根據(jù)權(quán)利要求25-35中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述her2-lamp進(jìn)一步包含信號序列。

37.根據(jù)權(quán)利要求36所述的分離的核酸分子,其中所述信號序列源自lamp蛋白,例如包含seq?id?no:1的第1-28位氨基酸殘基或seq?id?no:198的第1-28位殘基的信號序列。

38.根據(jù)權(quán)利要求25-37中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述her2-lamp進(jìn)一步包含lamp蛋白的胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域。

39.根據(jù)權(quán)利要求38所述的分離的核酸分子,其中所述胞質(zhì)結(jié)構(gòu)域包含seq?id?no:1的第406-417位殘基。

40.根據(jù)權(quán)利要求25-39中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述抗原結(jié)構(gòu)域包含seq?id?no:200的氨基酸序列或由seq?id?no:200的氨基酸序列組成。

41.根據(jù)權(quán)利要求25-40中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述her2-lamp包含seqid?no:1的第1-194位殘基或seq?id?no:198的氨基酸序列,隨后是seq?id?no:200的氨基酸序列,隨后是seq?id?no:1的第228-381位殘基或seq?id?no:202的氨基酸序列,或由所述氨基酸序列組成。

42.根據(jù)權(quán)利要求25-41中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述ireg包含cd40l、cd80、ox40、flt3l、gm-csf、il-12、il-21、il-23、il-15、cd70、cd86、il-7、il-18或il-33或其胞外結(jié)構(gòu)域中的一者或多者,任選地其中所述cd40l、cd80、ox40、flt3l、gm-csf、il-12、il-21、il-23或il-15與免疫球蛋白的fc結(jié)構(gòu)域融合。

43.根據(jù)權(quán)利要求25-42中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述分泌信號序列與所述ireg異源。

44.根據(jù)權(quán)利要求43所述的分離的核酸分子,其中所述分泌信號序列源自igkviii、ig-κ、四連接素或il-2。

45.根據(jù)權(quán)利要求25-44中任一項所述的分離的核酸分子,其中所述第二多肽包括spd和可溶性cd40l(scd40l)的融合體、spd和flt3l的融合體、il-12、il-21、與fc結(jié)構(gòu)域融合的ox40l、與fc結(jié)構(gòu)域融合的cd80、或il-15。

46.根據(jù)權(quán)利要求45所述的分離的核酸分子,其中所述第二多肽在ef-1α核心啟動子例如seq?id?no:124的啟動子的控制下表達(dá)。

47.一種組合物,其包含根據(jù)權(quán)利要求25-46中任一項所述的分離的核酸分子。

48.一種宿主細(xì)胞,其包含根據(jù)權(quán)利要求25-46中任一項所述的分離的核酸。

49.一種組合物,其包含根據(jù)權(quán)利要求48所述的宿主細(xì)胞。

50.一種治療患有癌癥的受試者的方法,其中所述方法包括以足以在所述受試者中治療所述癌癥或誘導(dǎo)針對所述癌癥的免疫應(yīng)答的量向所述受試者施用根據(jù)權(quán)利要求25-46中任一項所述的分離的核酸分子、根據(jù)權(quán)利要求47所述的組合物或根據(jù)權(quán)利要求48所述的宿主細(xì)胞。

51.根據(jù)權(quán)利要求50所述的方法,其中所述方法進(jìn)一步包括向所述受試者施用至少一種第二治療劑。

52.根據(jù)權(quán)利要求1-19或25-46中任一項所述的分離的核酸,其中所述分離的核酸包括dna、mrna或自擴(kuò)增rna。


技術(shù)總結(jié)
本公開提供了核酸分子(例如質(zhì)?;蜉d體),其包含:編碼雙順反子或多順反子LAMP構(gòu)建體的核酸序列,所述構(gòu)建體包含LAMP腔內(nèi)結(jié)構(gòu)域的特定片段和與所述LAMP蛋白異源的抗原結(jié)構(gòu)域以提供至少一個用于引發(fā)免疫應(yīng)答的抗原,其中由所述構(gòu)建體表達(dá)的抗原任選地被加工并呈遞給II類MHC分子;以及編碼免疫應(yīng)答增強(qiáng)多肽的核酸序列,所述免疫應(yīng)答增強(qiáng)多肽任選地從宿主細(xì)胞分泌。所述核酸分子可以例如用于治療疾病,特別是過敏、感染性疾病、糖尿病、過度增殖性病癥和/或癌癥。

技術(shù)研發(fā)人員:特瑞·海蘭,沈偉,高筠婷,徐人歡
受保護(hù)的技術(shù)使用者:免疫治療有限公司
技術(shù)研發(fā)日:
技術(shù)公布日:2025/1/2
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