本發(fā)明涉及三類(lèi)新化合物及其制備方法與應(yīng)用，具體是氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物及其在制備抗癌藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：holla等[eurmedchem,2003,38:313-318]描述了2-芳氨基-4-(2,4-二氯-5-氟苯基)噻唑類(lèi)化合物的制備與抗癌活性。胡艾希等描述了5-芐基-4-烷基-2-芳氨基噻唑氫溴酸鹽的抗癌活性[高等學(xué)校化學(xué)學(xué)報(bào)，2013，34(7)：1646～1652]；中國(guó)發(fā)明專(zhuān)利(cn102070556b；cn102319244b；cn101277692a)描述了5-芐基-4-烷基-2-芳氨基噻唑的制備和抗腫瘤活性。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：本發(fā)明解決的技術(shù)問(wèn)題是提供三類(lèi)氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物、其制備方法、藥物組合物和用途。為解決本發(fā)明的技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供如下技術(shù)方案：本發(fā)明技術(shù)方案的第一方面是提供一類(lèi)化學(xué)結(jié)構(gòu)式ⅰ所示的氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽：其中，r選自：c1～c2烷基；c3～c4直鏈烷基或c3～c4支鏈烷基；x1～x6選自：氫、氘、c1～c2烷基。結(jié)構(gòu)式ⅰ所示的氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物化學(xué)名為3-((4-烷基-2-(2-吡啶氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮衍生物。本發(fā)明技術(shù)方案的第一方面是還提供二類(lèi)化學(xué)結(jié)構(gòu)式ⅱ或ⅲ所示的氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽：其中，r選自：c1～c2烷基；c3～c4直鏈烷基或c3～c4支鏈烷基；x1～x8選自：氫、氘、c1～c2烷基。結(jié)構(gòu)式ⅱ所示的氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物化學(xué)名為3-((4-烷基-2-(2-喹啉氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮衍生物；結(jié)構(gòu)式ⅲ所示的氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物化學(xué)名為3-((4-烷基-2-(喹啉-8-氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮衍生物。進(jìn)一步的，優(yōu)選的化合物選自：3-((4-叔丁基-2-(2-吡啶氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮、3-((4-叔丁基-2-(2-喹啉氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮、3-((4-叔丁基-2-(2-甲基喹啉-8-氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮。本發(fā)明技術(shù)方案的第二方面是提供了第一方面所述的氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物的制備方法，其特征在于它的制備反應(yīng)如下：其中，r選自：c1～c2烷基；c3～c4直鏈烷基或c3～c4支鏈烷基；x1～x6選自：氫、氘、c1～c2烷基；x選自：氯、溴或碘。其中，r選自：c1～c2烷基；c3～c4直鏈烷基或c3～c4支鏈烷基；x1～x8選自：氫、氘、c1～c2烷基；x選自：氯、溴或碘。本發(fā)明技術(shù)方案的第三方面是提供含有第一方面所述化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的藥物組合物，該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明的氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽，以及任選的含有藥用載體。其中所述的藥用載體指藥學(xué)領(lǐng)域常用的藥用載體；該藥物組合物可根據(jù)本領(lǐng)域公知的方法制備?？赏ㄟ^(guò)將本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽與一種或多種藥學(xué)上可接受的固體或液體賦形劑和/或輔劑組合，制成適于人或動(dòng)物使用的任何劑型。本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽在其藥物組合物中的含量通常為0.1％～95％重量百分比。本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽或含有它的藥物組合物可以單位劑量形式給藥，給藥途徑可為腸道或非腸道，如口服、靜脈注射、肌肉注射、皮下注射、鼻腔、口腔粘膜、眼、肺和呼吸道、皮膚、陰道、直腸等。給藥劑型可以是液體劑型、固體劑型或半固體劑型。液體劑型可以是溶液劑(包括真溶液和膠體溶液)、乳劑(包括o/w型、w/o型和復(fù)乳)、混懸劑、注射劑(包括水針劑、粉針劑和輸液)、滴眼劑、滴鼻劑、洗劑和搽劑等；固體劑型可以是片劑(包括普通片、腸溶片、含片、分散片、咀嚼片、泡騰片、口腔崩解片)、膠囊劑(包括硬膠囊、軟膠囊、腸溶膠囊)、顆粒劑、散劑、微丸、滴丸、栓劑、膜劑、貼片、氣(粉)霧劑、噴霧劑等；半固體劑型可以是軟膏劑、凝膠劑、糊劑等。本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽可以制成普通制劑、也制成是緩釋制劑、控釋制劑、靶向制劑及各種微粒給藥系統(tǒng)。為了將本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽制成片劑，可以廣泛使用本領(lǐng)域公知的各種賦形劑，包括稀釋劑、黏合劑、潤(rùn)濕劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、助流劑。稀釋劑可以是淀粉、糊精、蔗糖、葡萄糖、乳糖、甘露醇、山梨醇、木糖醇、微晶纖維素、硫酸鈣、磷酸氫鈣、碳酸鈣等；濕潤(rùn)劑可以是水、乙醇、異丙醇等；粘合劑可以是淀粉漿、糊精、糖漿、蜂蜜、葡萄糖溶液、微晶纖維素、阿拉伯膠漿、明膠漿、羧甲基纖維素鈉、甲基纖維素、羥丙基甲基纖維素、乙基纖維素、丙烯酸樹(shù)脂、卡波姆、聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇等；崩解劑可以是干淀粉、微晶纖維素、低取代羥丙基纖維素、交聯(lián)聚乙烯吡咯烷酮、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、羧甲基淀粉鈉、碳酸氫鈉與枸櫞酸、聚氧乙烯山梨糖醇脂肪酸酯、十二烷基磺酸鈉等；潤(rùn)滑劑和助流劑可以是滑石粉、二氧化硅、硬脂酸鹽、酒石酸、液體石蠟、聚乙二醇等。還可以將片劑進(jìn)一步制成包衣片，例如糖包衣片、薄膜包衣片、腸溶包衣片，或雙層片和多層片。為了將給藥單元制成膠囊劑，可以將有效成分本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽與稀釋劑、助流劑混合，將混合物直接置于硬膠囊或軟膠囊中。也可將有效成分本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽先與稀釋劑、黏合劑、崩解劑制成顆?；蛭⑼?，再置于硬膠囊或軟膠囊中。用于制備本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽片劑的各稀釋劑、黏合劑、潤(rùn)濕 劑、崩解劑、助流劑品種也可用于制備本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽的膠囊劑。為將本發(fā)明化合物及其藥學(xué)上可接受的鹽制成注射劑，可以用水、乙醇、異丙醇、丙二醇或它們的混合物作溶劑并加入適量本領(lǐng)域常用的增溶劑、助溶劑、ph調(diào)劑劑、滲透壓調(diào)節(jié)劑。增溶劑或助溶劑可以是泊洛沙姆、卵磷脂、羥丙基-β-環(huán)糊精等；ph調(diào)劑劑可以是磷酸鹽、醋酸鹽、鹽酸、氫氧化鈉等；滲透壓調(diào)節(jié)劑可以是氯化鈉、甘露醇、葡萄糖、磷酸鹽、醋酸鹽等。如制備凍干粉針劑，還可加入甘露醇、葡萄糖等作為支撐劑。此外，如需要，也可以向藥物制劑中添加著色劑、防腐劑、香料、矯味劑或其它添加劑。為達(dá)到用藥目的，增強(qiáng)治療效果，本發(fā)明的藥物或藥物組合物可用任何公知的給藥方法給藥。本發(fā)明技術(shù)方案的第四方面是提供本發(fā)明第一方面所述氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽以及第三方面所述藥物組合物在制備抗癌藥方面的應(yīng)用。進(jìn)一步的，本發(fā)明第一方面所述氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽以及第三方面所述藥物組合物在制備抗人乳腺癌藥方面的應(yīng)用。有益技術(shù)效果：本發(fā)明的氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物是三類(lèi)新結(jié)構(gòu)類(lèi)型的具有抗癌活性的化合物。具體實(shí)施方式以下實(shí)施例旨在說(shuō)明本發(fā)明而不是對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步限定。實(shí)施例13-((4-叔丁基-2-(2-吡啶氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮的制備10mmol3-(2-溴代-4，4-二甲基-3-氧代戊基)喹啉-2(1h)-酮和15ml無(wú)水乙醇，溶解后加入10mmol2-吡啶氨基硫脲，回流3.0h，滴加氨水調(diào)ph＝8～9，再回流0.5h，旋除部分溶劑，冷卻，析出固體，過(guò)濾，95％乙醇洗滌，干燥得3-((4-叔丁基-2-((2-吡啶氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮，收率43.6％，熔點(diǎn)268～271℃。1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ：11.90(s，1h)，11.03(s，1h)，8.18(d，j＝4.6hz，1h)，7.67～7.60(m，2h)，7.46(t，j＝7.8hz，2h)，7.33(d，j＝8.2hz，1h)，7.12(t，j＝7.5hz，1h)，7.07(d，j＝8.4hz，1h)，6.85～6.81(m，1h)，4.05(s，2h，ch2)，1.34(s，9h，3×ch3)；13cnmr(101mhz，dmso-d6)δ：161.87，155.40，153.29，152.28，146.71，138.05，137.92，136.19，133.84，129.77，127.93，122.08，119.48，116.96，115.79，115.11，110.87，35.89，30.97，26.89。實(shí)施例23-((4-叔丁基-2-(2-喹啉氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮的制備10mmol3-(2-溴代-4，4-二甲基-3-氧代戊基)喹啉-2(1h)-酮和15ml無(wú)水乙醇，溶解后加入10mmol2-喹啉氨基硫脲，回流2.0h，滴加氨水調(diào)ph＝8～9，再回流0.5h，旋除部分溶劑，冷卻，析出固體，過(guò)濾，95％乙醇洗滌，干燥得3-((4-叔丁基-2-((2-喹啉氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮，收率79.0％，熔點(diǎn)210～213℃。1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ：12.01(s，1h，nh)，8.43(d，j＝8.6hz，1h)，7.95(d，j＝7.9hz，1h)，7.74(d，j＝3.4hz，2h)，7.65(d，j＝9.4hz，2h)，7.56～7.44(m，2h)，7.41～7.34(m，2h)，7.16(t，j＝7.5hz，1h)，4.17(s，2h)，1.45(s，9h，3×ch3)：13cnmr(100mhz，dmso-d6)δ：161.82，156.66，149.53，138.18，136.88，132.74，130.14，128.54，127.87，125.38，124.32，122.20，119.42，115.20，113.35，35.57，30.53，27.13。實(shí)施例33-((4-叔丁基-2-(2-甲基喹啉-8-氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮的制備10mmol3-(2-溴代-4，4-二甲基-3-氧代戊基)喹啉-2(1h)-酮和15ml無(wú)水乙醇，溶解后加入10mmol2-甲基喹啉-8-氨基硫脲，回流2.5h，滴加氨水調(diào)ph＝8～9，再回流0.5h，旋除部分溶劑，冷卻，析出固體，過(guò)濾，95％乙醇洗滌，干燥得3-((4-叔丁基-2-((2-甲基喹啉-8-氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮，收率85.9％，熔點(diǎn)260～264℃。1hnmr(400mhz，dmso-d6)δ：11.88(s，1h，nh)，10.01(s，1h，nh)，8.57(s，1h)，8.22(d，j＝8.4hz，1h)，7.64(d，j＝7.9hz，2h)，7.51–7.47(m，4h)，7.34(d，j＝8.2hz，1h)，7.14(t，j＝7.5hz，1h)，4.07(s，2h，ch2)，2.72(s，3h，ch3)，1.42(s，9h，3×ch3)；13cnmr(100mhz，dmso-d6)δ：161.85，158.23，157.04，138.16，137.03，136.77，136.55，136.42，133.40，129.99，127.84，126.55，126.36，123.00，122.13，119.49，118.99，117.10，115.13，112.71，36.10，31.00，27.16，25.03。實(shí)施例4氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物的抗腫瘤活性測(cè)定1.抗腫瘤活性原理mtt法生物活性測(cè)試又稱(chēng)mtt比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。mtt分析法以活細(xì)胞代謝物還原劑噻唑藍(lán)[3-(4，5-二甲基-2-噻唑)-2，5-二苯基溴化四氮唑；3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromide，mtt]為基礎(chǔ)。mtt是一種能接受氫原子的染料。活細(xì)胞線(xiàn)粒體中與nadp相關(guān)的脫氫酶在細(xì)胞內(nèi)可將黃色的mtt轉(zhuǎn)化成不溶性的藍(lán)紫色的甲瓚(formazon)，而死細(xì)胞則無(wú)此功能。用dmso溶解formazon 后，在一定波長(zhǎng)下用酶標(biāo)儀測(cè)定光密度值，既可定量測(cè)出細(xì)胞的存活率。根據(jù)光密度值的變化觀察樣品對(duì)腫瘤細(xì)胞的抑制作用。2.抗腫瘤活性實(shí)驗(yàn)試樣：實(shí)施例化合物細(xì)胞系：乳腺癌細(xì)胞系mcf-7(中南大學(xué)湘雅醫(yī)學(xué)院細(xì)胞庫(kù)提供)。試劑：噻唑藍(lán)(mtt)、rpmi1640培養(yǎng)液、新生牛血清、抗生素(美國(guó)英杰生命技術(shù)公司)；胰酶(美國(guó)amresco公司)；96孔培養(yǎng)板(美國(guó)英杰生命技術(shù)公司)；二甲基亞砜(美國(guó)sigma公司)。儀器：hfsafe-1500型超凈工作臺(tái)、hf151uv型co2培養(yǎng)箱(上海力申科學(xué)儀器有限公司)；xsp-15c型倒置顯微鏡(上海長(zhǎng)方光學(xué)儀器有限公司)；multiskanmk3型酶標(biāo)儀(美國(guó)thermo公司)；超純水制備儀(美國(guó)milli-q公司)。實(shí)驗(yàn)操作：試樣對(duì)mcf-7細(xì)胞的測(cè)試。每種細(xì)胞的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程相同，一次實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，每種試樣設(shè)置5個(gè)濃度梯度(0.010μmol/ml、0.030μmol/ml、0.100μmol/ml、0.300μmol/ml和1.000μmol/ml)，每個(gè)濃度四個(gè)平行試樣，每組實(shí)驗(yàn)平行3次，并通過(guò)空白組對(duì)照得出結(jié)論。酶標(biāo)儀檢測(cè)各孔o(hù)d值，檢測(cè)波長(zhǎng)570nm。3.抗腫瘤活性評(píng)價(jià)(1)細(xì)胞抑制率計(jì)算：(2)ic50值計(jì)算試樣濃度對(duì)數(shù)值與細(xì)胞抑制率線(xiàn)性回歸，利用軟件計(jì)算試樣對(duì)細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度ic50值。氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物對(duì)mcf-7細(xì)胞的ic50見(jiàn)表1。表1氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物對(duì)mcf-7細(xì)胞的抑制活性氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物ic50，μm3-((4-叔丁基-2-(2-吡啶氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮15.7±0.53-((4-叔丁基-2-(2-喹啉氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮10.9±0.33-((4-叔丁基-2-(2-甲基喹啉-8-氨基)噻唑-5-基)甲基)喹啉-2(1h)-酮20.2±2.0活性測(cè)試結(jié)果顯示，氮雜環(huán)氨基噻唑甲基喹啉酮衍生物及其藥學(xué)上可接受的鹽對(duì)人乳腺癌細(xì)胞(mcf-7細(xì)胞)具有良好的抑制活性，可用于制備抗腫瘤藥物。當(dāng)前第1頁(yè)12