眾多人類基因疾病由無義突變引起(參見Keeling等人，WIREs RNA，2011，2，837至852；Linde等人，Trends in Genetics，2008，24(11)，552至563；及Rose等人，Pharmacology&Therapeutics，2012 136(2)，227至266)。
無義突變是基因突變，其導致有義密碼子轉(zhuǎn)化為提前終止密碼子(后文稱為PTC)，其位于正常終止密碼子的上游。
真核終止密碼子是UAA、UAG或UGA。
正常終止密碼子停止基因翻譯并能夠合成全長、野生型蛋白質(zhì)。PTC阻止此類野生型蛋白質(zhì)合成并導致截短(在多數(shù)情況下非活性)蛋白質(zhì)。產(chǎn)生的蛋白質(zhì)部分/全部缺乏導致由該無義突變引起的疾病病理。
無義突變可以是框內(nèi)突變(in-frame mutation)，例如將單一密碼子轉(zhuǎn)化為PTC的單一核酸交換，或移碼突變，例如將受影響密碼子轉(zhuǎn)化為PTC的單一核酸插入/缺失。
本文將能抑制無義突變作用的化合物稱為“無義突變抑制劑”。
一種用以抑制無義突變作用的機制是提升翻譯期間通讀事件率。本文將具有此作用機制的化合物稱為“通讀活化劑”。在通讀事件中，接近同源的胺?；鵷RNA用于將終止密碼子重新編碼為有義密碼子。在基礎(chǔ)情況下，PTC重新編碼為有義密碼子發(fā)生在低于1％翻譯事件中，同時抑制正常終止密碼子以＜0.1％頻率發(fā)生。藉由重新編碼插入的氨基酸并非必須與相應野生型蛋白質(zhì)的氨基酸一致；然而，很多氨基酸取代在功能上可以耐受。因此，由通讀活化產(chǎn)生的蛋白質(zhì)可具有非常近似野生型蛋白質(zhì)的活性。因此，通過提升PTC重新編碼率，可恢復充分功能的蛋白質(zhì)來為攜帶無義突變病人提供治療益處。
另一抑制無義突變作用的機制是抑制無義介導mRNA降解(NMD)。本文將具有此作用機制的化合物稱為“NMD抑制劑”。NMD調(diào)節(jié)帶PTC的轉(zhuǎn)錄本的總水平：其檢測及降解此類轉(zhuǎn)錄本，以防止由于顯性負調(diào)控或功能獲得效應而無功能或有害的截短蛋白質(zhì)的合成。抑制NMD增加可用轉(zhuǎn)錄本數(shù)量，這也可以是恢復充分功能的蛋白質(zhì)以具有治療益處的機制。
描述為無義突變抑制劑的化合物是特定氨基糖苷類抗生素(例如在WO2007113841中)，及特定1,2,4-噁二唑苯甲酸(如在WO2004091502中)及通常稱為氨來呫諾的化合物(WO2012016930)。WO2009086303描述用于增長壽命的活性劑。WO96/28444描述作為酪氨酸激酶抑制劑的二氫嘧啶并喹啉酮化合物。其他吡啶并嘧啶二酮衍生物在WO199208719，Synthetic Communications，1999，29(22)，3919至3937，Monatshefte fuer Chemie，1996，127(8/9)，917至925中描述。
無義突變抑制劑被認為可用于治療廣泛的由無義突變引起的疾病。由無義突變引起疾病的顯著實例為由溶酶體酶中的無義突變引起的疾病，例如，由α-L-艾杜糖醛酸酶中的無義突變引起的粘多糖沉積癥I型(胡爾勒綜合征(Hurler syndrome))；由凝血因子7、8或9中的無義突變引起的A型血友病或B型血友??；由氯離子通道CFTR中的無義突變引起的囊性纖維化；由結(jié)構(gòu)蛋白中的無義突變引起的疾病，例如由肌養(yǎng)蛋白中的無義突變引起的迪謝內(nèi)(Duchenne)或貝克爾肌營養(yǎng)不良(Becker Muscle Dystrophy)；或由APC或p53中的無義突變引起的癌癥。
需要提供為良好藥物候選的新穎的無義突變抑制劑。具體而言，優(yōu)選的化合物應是強效的無義突變抑制劑，同時在其他藥物目標檢測(例如GPCR或離子通道檢測)中顯示低效力。它們應顯示與血漿蛋白質(zhì)的低結(jié)合力。它們應該從胃腸道被良好吸收，為充分穩(wěn)定代謝且具有有利藥物動力學性質(zhì)。其應是無毒性的且證實幾乎無副作用。此外，理想的藥物候選應能以穩(wěn)定、非吸濕及易于調(diào)配的物理形式存在。
本發(fā)明化合物為無義突變抑制劑，且由此可潛在用于治療廣泛的由無義突變引起的疾病，具體而言其中該疾病選自A型血友病、B型血友病、囊性纖維化、粘多糖沉積癥I型、迪謝內(nèi)肌營養(yǎng)不良(Duchenne Muscle Dystrophy)、貝克爾肌營養(yǎng)不良(Becker Muscle Dystrophy)、APC缺失引起的癌癥及缺失p53引起的癌癥。
在第一個方面中，本發(fā)明涉及呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I')化合物
其中
a)R1是五至七元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R6取代一次或多于一次；
且
R2是C2-6烷基，其可由R7取代一次或多于一次；
或R2是-X1-R8；-X1-是-O-、-S-或-N(R9)-；R9是氫或C1-4烷基；且R8是C1-6烷基，其可由R10取代一次或多于一次；
或R2是三至七元單環(huán)芳族、飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R11取代一次或多于一次；
或
b)R1是
其中苯環(huán)經(jīng)由使用星號標記的鍵連接；
R12各自獨立地是氫、鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；或C3-6環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-6環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-6環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
且
R2是C2-7烷基，其可由R13取代一次或多于一次；
或R2是-X2-R14；-X2-是-O-、-S-或-N(R15)-；R15是氫或C1-4烷基；且R14是C1-6烷基，其可由R16取代一次或多于一次；
或R2是三至七元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R17取代一次或多于一次；
或
c)R1選自吡咯基、吡唑基、噻吩基(thiophenyl)或吡啶-2-基的環(huán)，該環(huán)可由C1-3烷基取代；
且
R2是C2-7烷基，其可由R13取代一次或多于一次；
或R2是-X2-R14；-X2-是-O-、-S-或-N(R15)-；R15是氫或C1-4烷基；且R14是C1-6烷基，其可由R16取代一次或多于一次；
或R2是三至七元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R17取代一次或多于一次；
R3是氫或-CH2R18；
R18是氫、C1-4烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基、C1-3烷氧基C1-3烷基、羥基C1-3烷基或氨基C1-3烷基；
R4及R5獨立地選自氫、C1-C3烷基；
或
R4及R5連同其連接的鍵形成選自以下的環(huán)
-5至7元單環(huán)非芳族碳環(huán)，其可由R19取代一次或多于一次；
-噻吩環(huán)，其可由R20取代一次；
-其通過使用兩個星號標記的鍵稠合至分子其余部分；
R19及R20獨立地選自鹵素、C1-C3烷基；
R21是氫、鹵素、羥基、氨基、氰基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
或三至七元單環(huán)芳族、飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，其中所述環(huán)系可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中所述環(huán)系可由R23取代一次或多于一次；
或
R3及R21一起為-CH2-CH2-；
R22是氫、鹵素、羥基、氰基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基、C1-4烷氧基或C1-4鹵代烷氧基；或C3-4環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-4環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-4環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
R6、R11、R17及R23各自獨立地是鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
或C3-6環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-6環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-6環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
或在相同環(huán)原子上的兩個R6、R11、R17及R23一起是氧代基；
或在相同環(huán)碳原子上的兩個R6、R11、R17及R23連同該碳原子形成C3-6環(huán)烷基；
R7、R10、R13及R16各自獨立地是鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
或C3-6環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-6環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-6環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
或在相同碳原子上的兩個R7、R10、R13或R16一起是氧代基；
或在相同碳原子上的兩個R7、R10、R13或R16連同該碳原子形成C3-6環(huán)烷基；
R24是氫或鹵素。
在一個方面中，本發(fā)明涉及呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)化合物
其中
a)R1是五至七元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R6取代一次或多于一次；
且
R2是C2-6烷基，其可由R7取代一次或多于一次；
或R2是-X1-R8；-X1-是-O-、-S-或-N(R9)-；R9是氫或C1-4烷基；且R8是C1-6烷基，其可由R10取代一次或多于一次；
或R2是三至七元單環(huán)芳族、飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R11取代一次或多于一次；
或
b)R1是
其中苯環(huán)經(jīng)由使用星號標記的鍵連接；
R12各自獨立地是氫、鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；或C3-6環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-6環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-6環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
且
R2是C2-7烷基，其可由R13取代一次或多于一次；
或R2是-X2-R14；-X2-是-O-、-S-或-N(R15)-；R15是氫或C1-4烷基；且R14是C1-6烷基，其可由R16取代一次或多于一次；
或R2是三至七元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R17取代一次或多于一次；
或
c)R1選自吡唑基、噻吩基或吡啶-2-基的環(huán)，該環(huán)可由C1-3烷基取代；
且
R2是C2-7烷基，其可由R13取代一次或多于一次；
或R2是-X2-R14；-X2-是-O-、-S-或-N(R15)-；R15是氫或C1-4烷基；且R14是C1-6烷基，其可由R16取代一次或多于一次；
或R2是三至七元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R17取代一次或多于一次；
R3是氫或-CH2R18；
R18是氫、C1-4烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基、C1-3烷氧基C1-3烷基、羥基C1-3烷基或氨基C1-3烷基；
R4及R5獨立地選自氫、C1-C3烷基；
或
R4及R5連同其連接的鍵形成選自以下的環(huán)
-5至7元單環(huán)非芳族碳環(huán)，其可由R19取代一次或多于一次；
-噻吩環(huán)，其可由R20取代一次；
-其通過使用兩個星號標記的鍵稠合至分子其余部分；
R19及R20獨立地選自鹵素、C1-C3烷基；
R21是氫、鹵素、羥基、氨基、氰基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
或三至七元單環(huán)芳族、飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，其中所述環(huán)系可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中所述環(huán)系可由R23取代一次或多于一次；
或
R3及R21一起為-CH2-CH2-；
R22是氫、鹵素、羥基、氰基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基、C1-4烷氧基或C1-4鹵代烷氧基；或C3-4環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-4環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-4環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
R6、R11、R17及R23各自獨立地是鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
或C3-6環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-6環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-6環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
或在相同環(huán)原子上的兩個R6、R11、R17及R23一起是氧代基；
或在相同環(huán)碳原子上的兩個R6、R11、R17及R23連同該碳原子形成C3-6環(huán)烷基；
R7、R10、R13及R16各自獨立地是鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
或C3-6環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-6環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-6環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
或在相同碳原子上的兩個R7、R10、R13或R16一起是氧代基；
或在相同碳原子上的兩個R7、R10、R13或R16連同該碳原子形成C3-6環(huán)烷基。
在另一個方面中，本發(fā)明涉及呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(Ia’)化合物，其是
其中R1、R2、R3、R21、R22、R24如本文關(guān)于式(I’)化合物所定義。
在另一個方面中，本發(fā)明涉及呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(Ia)化合物，其是
其中R1、R2、R3、R21及R22如本文關(guān)于式(I)化合物所定義。
在第三個方面中，本發(fā)明涉及呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(Ib)化合物，其是
其中R1、R2、R3、R4及R5如本文關(guān)于式(I)化合物所定義。
除非另作規(guī)定，否則術(shù)語“本發(fā)明化合物”指式(I)、(I’)、(Ia)、(Ia’)及(Ib)化合物；該化合物的鹽；該化合物和/或鹽的水合物或溶劑化物；以及全部立體異構(gòu)體(包括非對映異構(gòu)體)、互變異構(gòu)體及同位素標記化合物(包括氘取代)；以及固有形成的部分(例如多晶型物、溶劑化物和/或水合物)。
除非另作指明，否則在本發(fā)明中使用的表述具有以下含義：
“烷基”代表直鏈或支鏈烷基，且例如可以是甲基、乙基、正或異丙基或正、異、第二或叔丁基；C2-7烷基優(yōu)選地代表直鏈或支鏈C2-4烷基，特別優(yōu)選為乙基、正丙基、異丙基及叔丁基。C1-4烷基優(yōu)選地代表直鏈或支鏈C1-3烷基，特別優(yōu)選為甲基、乙基、正丙基或異丙基。
“烷氧基”、“鹵代烷基”、“羥烷基”、“氨基烷基”、“烷氧基烷基”等中的烷基結(jié)構(gòu)部分各自應具有如在上文提及的“烷基”定義中描述的相同含義，尤其是在有關(guān)直鏈支鏈及優(yōu)選原子數(shù)方面如此，除非另外規(guī)定了該原子數(shù)。
“C3-6環(huán)烷基”代表具有三至六個碳原子的飽和脂環(huán)部分。此術(shù)語指諸如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基及環(huán)己基的基團。
取代“一次或多于一次”的取代基，例如，如有關(guān)R1中所定義，優(yōu)選地是由一至三個取代基取代。由此，“一次或多于一次”包括但不限于一、二或三個取代基。
鹵素一般而言是氟、氯、溴或碘；優(yōu)選地是氟、氯或溴。鹵代烷基優(yōu)選地具有1至4個碳原子的鏈長，且是例如氟甲基、二氟甲基、三氟甲基、氯甲基、二氯甲基、三氯甲基、2,2,2-三氟乙基、2-氟乙基、2-氯乙基、五氟乙基、1,1-二氟-2,2,2-三氯乙基、2,2,2-三氯乙基、1,1,2,2-四氟乙基、2,2,3,3-四氟丙基、2,2,3,3,3-五氟丙基或2,2,3,4,4,4-六氟丁基。
在本發(fā)明語境中，定義為“五至七元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個雜原子”的R1包括五至七元單環(huán)非芳族烴基及相同尺寸的雜環(huán)系統(tǒng)。
在本發(fā)明語境中，定義為“三至七元單環(huán)芳族、飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個雜原子”的R2或R4包括三至七元單環(huán)芳族或非芳族烴基及相同尺寸的芳族或非芳族雜環(huán)系統(tǒng)。
雜環(huán)系統(tǒng)的實例是：吡咯、吡咯啉、吡咯烷、吡唑、吡唑啉、吡唑烷、咪唑、咪唑啉、咪唑烷、三唑、三唑啉、三唑烷、四唑、呋喃、二氫呋喃、四氫呋喃、噁二唑、二氧戊環(huán)、噻吩、二氫噻吩、四氫噻吩、噁唑、噁唑啉、噁唑烷、異噁唑、異噁唑啉、異噁唑烷、噻唑、噻唑啉、噻唑烷、異噻唑、異噻唑啉、異噻唑烷、噻二唑、噻二唑啉、噻二唑烷、吡啶、哌啶、噠嗪、吡嗪、嘧啶、哌嗪、三嗪、吡喃、四氫吡喃、噻喃、四氫噻喃、噁嗪、噻嗪、嗎啉。
式(I')、(I)、(Ia')、(Ia)或(Ib)可以光學活性形式或光學異構(gòu)體混合物形式，例如，以外消旋混合物或非對映異構(gòu)體混合物形式存在。具體而言，非對稱碳原子可存在于式(I')、(I)、(Ia')、(Ia)或(Ib)化合物及其鹽中。除非本文另作說明，否則全部光學異構(gòu)體及其混合物(包括外消旋混合物)被包含在本發(fā)明中。
本文使用的術(shù)語“異構(gòu)體”指具有相同分子式但不同原子排列及構(gòu)型的不同化合物。本文使用的術(shù)語“光學異構(gòu)體”或“立體異構(gòu)體”亦指所指定本發(fā)明化合物任何可能出現(xiàn)的各種不同立體異構(gòu)構(gòu)型，且包括幾何異構(gòu)體。應了解取代基可連接于碳原子手性中心。術(shù)語“手性”指具有與其鏡像配對物不重迭性質(zhì)的分子，而術(shù)語“非手性”指可與其鏡像配對物重迭的分子。由此，本發(fā)明包括化合物的對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體或外消旋物。“對映異構(gòu)體”是一對彼此不可重迭鏡像的立體異構(gòu)體。一對對映異構(gòu)體的1:1混合物是“外消旋”混合物。當適當時，該術(shù)語用于指定外消旋混合物?！胺菍τ钞悩?gòu)體”是具有至少兩個非對稱原子但彼此不為鏡像的立體異構(gòu)體。根據(jù)Cahn-Ingold-Prelog R-S系統(tǒng)指定絕對立體化學。當化合物是純對映異構(gòu)體時，各個手性碳上的立體化學可指定為R或S。絕對構(gòu)型未知的解析化合物是可根據(jù)其在鈉D線波長下使平面偏振光旋轉(zhuǎn)的方向(右旋或左旋)指定為(+)或(-)。本文描述的化合物可含有一或多個非對稱中心，并可由此產(chǎn)生對映異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、及其他立體異構(gòu)體形式，其可基于絕對立體化學定義為(R)-或(S)-。除非本文另作說明，否則本發(fā)明意在包括全部此類可能異構(gòu)體，包括外消旋混合物、純光學形式及中間體混合物?？墒褂檬中院铣勺踊蚴中栽噭﹣碇苽涔鈱W活性(R)-及(S)-異構(gòu)體，或使用常規(guī)技術(shù)解析。
如果化合物含有雙鍵，取代基可呈E或Z構(gòu)型。
如果化合物含有二取代環(huán)烷基，該環(huán)烷基取代基可具有順式或反式構(gòu)型。
本發(fā)明化合物的任何非對稱原子(例如，碳，等等)可呈外消旋的或富集對映異構(gòu)性的，例如(R)-、(S)-或(R,S)-構(gòu)型。在特定實施例中，各個非對稱原子在(R)或(S)構(gòu)型中具有至少50％對映異構(gòu)體過量，至少60％對映異構(gòu)體過量，至少70％對映異構(gòu)體過量，至少80％對映異構(gòu)體過量，至少90％對映異構(gòu)體過量，至少95％對映異構(gòu)體過量，或至少99％對映異構(gòu)體過量。如可能，具有不飽和鍵原子上的取代基可以以順-(Z)-或反-(E)-形式存在。
因此，如本文使用，本發(fā)明化合物可是以下形式之一：可能的異構(gòu)體、旋轉(zhuǎn)異構(gòu)體、阻轉(zhuǎn)異構(gòu)體、互變異構(gòu)體或其混合物，例如，基本純的幾何(順或反)異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、光學異構(gòu)體(對映體)、外消旋物或其混合物。
可依照成分物理化學差異，例如，通過色譜法和/或分級結(jié)晶，來將任何產(chǎn)生的異構(gòu)體混合物分為純或基本純的幾何或光學異構(gòu)體、非對映異構(gòu)體、消旋體。
可將任何產(chǎn)生的最終產(chǎn)物或中間體消旋體通過已知方法拆分為光學對映體，例如，通過分離其非對映異構(gòu)體鹽(使用光學活性酸或堿而獲得)，及釋放該光學活性酸或堿化合物。具體而言，可由此采用堿性結(jié)構(gòu)部分來將本發(fā)明化合物解析為其光學對映體，例如，通過使用光學活性酸形成的鹽分級結(jié)晶，所述酸是例如酒石酸、二苯甲酰酒石酸、二乙酰酒石酸、二-O,O'-對甲苯酰酒石酸、扁桃酸、蘋果酸或樟腦-10-磺酸。還可通過手性色譜法來拆分外消旋產(chǎn)物，例如，使用手性吸附劑的高壓液相色譜法(HPLC)。
依照取代基定義，式(I')、(I)、(Ia')、(Ia)或(Ib)化合物可以各種互變異構(gòu)形式出現(xiàn)。式(I)化合物的全部互變異構(gòu)形式被包含在本發(fā)明中。
例如，式(I)化合物(其中R1、R2、R4及R5如在式(I)定義，且R3是氫)可以互變異構(gòu)形式(I-1)、(I-2)或(I-3)存在：
如本文使用的術(shù)語“鹽”或“鹽類”指本發(fā)明化合物的酸加成鹽或堿加成鹽。“鹽類”具體而言包括“藥學上可接受的鹽”。術(shù)語“藥學上可接受的鹽”指保留本發(fā)明化合物的生物有效性與性質(zhì)、且通常不是生物學或其他方面不想要的鹽。由于存在氨基和/或羧基或類似基團，本發(fā)明化合物能夠形成酸和/或堿鹽。
本發(fā)明的藥學上可接受的鹽可通過常規(guī)化學方法從堿或酸部分合成。一般而言，可通過此類化合物游離酸形式與化學計量的適當堿反應或通過此類化合物游離堿形式與化學計量的適當酸反應來制備此類鹽。通常在水或有機溶劑、或二者混合物中進行此類反應。一般而言，若情況可行，希望使用非水性介質(zhì)如醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇、或乙腈。例如，可在“Remington's Pharmaceutical Sciences”，第20版，Mack Publishing Company，Easton，Pa.，(1985)；及在“Handbook of Pharmaceutical Salts:Properties,Selection,and Use”由Stahl與Wermuth(Wiley-VCH，Weinheim，德國，2002)中發(fā)現(xiàn)其他適宜鹽清單。
當堿基團與酸基團均存在于相同分子時，本發(fā)明化合物亦可形成內(nèi)鹽，例如，兩性離子分子。
本文中給定的式還旨在代表所述化合物的未標記形式以及同位素標記形式。除一或多個原子由具有選定的原子量或質(zhì)量數(shù)的原子替代外，同位素標記化合物具有由本文給定式描述的結(jié)構(gòu)。可結(jié)合至本發(fā)明化合物的同位素實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟、及氯的同位素，諸如分別為2H、3H、11C、13C、14C、15N、18F、31P、32P、35S、36Cl、125I。本發(fā)明包括如本文定義的各種同位素標記化合物，例如存在放射性同位素結(jié)合的彼等(諸如3H及14C)或非放射性同位素結(jié)合的彼等(諸如2H及13C)。此類同位素標記化合物可用于代謝研究(使用14C)、反應動力學研究(例如使用2H或3H)、檢測或攝影技術(shù)，諸如包括藥物或基質(zhì)組織分布檢測、或病人放射治療的正電子發(fā)射斷層成象術(shù)(PET)或單光子發(fā)射計算機斷層攝影法(SPECT)。具體而言，18F標記化合物可是特別期望用于PET或SPECT研究。一般而言可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的常規(guī)技術(shù)或通過類似于在隨附實例及制備中描述的方法，使用適當同位素標記試劑代替先前采用的非標記試劑來制備式(I')、(I)、(Ia')、(Ia)或(Ib)的同位素標記化合物。
此外，以較重同位素、特別是氘(即，2H或D)的取代可提供源自較好代謝穩(wěn)定性的某些治療益處，例如增長體內(nèi)半衰期或降低劑量需求或改善治療指數(shù)。應了解在本文中氘被認為是式(I')、(I)、(Ia')、(Ia)或(Ib)化合物的取代基。較重同位素(具體而言氘)的濃度可由同位素富集因子定義。本文使用的術(shù)語“同位素富集因子”意指在同位素豐度與及指定同位素自然豐度間的比率。如果在本發(fā)明化合物中取代基指氘，此化合物對于各個指定氘原子的同位素富集因子為至少3500(在各個指定氘原子52.5％氘摻入)、至少4000(60％氘摻入)、至少4500(67.5％氘摻入)、至少5000(75％氘摻入)、至少5500(82.5％氘摻入)、至少6000(90％氘摻入)、至少6333.3(95％氘摻入)、至少6466.7(97％氘摻入)、至少6600(99％氘摻入)、或至少6633.3(99.5％氘摻入)。
依照根據(jù)本發(fā)明藥學上可接受的溶劑化物包括結(jié)晶作用的溶劑可被同位素取代的那些，例如，D2O、d6-丙酮、d6-DMSO。
含有某些能用作氫鍵供體和/或受體的基團的本發(fā)明化合物可能能夠與適合的共晶體形成劑形成共晶體?？捎墒?I')、(I)、(Ia')、(Ia)或(Ib)化合物通過已知共晶體形成方法來制備此類共晶體。此類方法包括研磨、加熱、共升華、共熔融、或在式(I')、(I)、(Ia')、(Ia)或(Ib)化合物溶液中與該共晶體形成劑在結(jié)晶條件下接觸并分離由此形成的共晶體。適合的共晶體形成劑包括在WO 2004/078163中描述的那些。因此本發(fā)明進一步提供包含式(I')、(I)、(Ia')、(Ia)或(Ib)化合物的共晶體。
本發(fā)明還涉及在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為本發(fā)明化合物的本發(fā)明化合物前藥的用途。前藥是將前藥施用于個體后通過體內(nèi)生理作用(諸如水解、代謝等等)化學修飾而轉(zhuǎn)化為本發(fā)明化合物的活性或非活性化合物。本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知涉及制備與使用前藥的適用性及技術(shù)?？稍诟拍钌蠈⑶八幏譃閮蓚€非專有范疇：生物前體前藥及載體前藥。參見The Practice of Medicinal Chemistry，第31-32章(Wermuth編，Academic Press，加州圣地亞哥，2001)。
此外，還可獲得以其水合物形式的或包括其他用于其結(jié)晶作用的溶劑的本發(fā)明化合物(包括其鹽)。本發(fā)明化合物可天然或通過設計形成與藥學上可接受的溶劑(包括水)的溶劑化物；因此，本發(fā)明意欲包含溶劑化物與非溶劑化物形式。術(shù)語“溶劑化物”指本發(fā)明化合物(包括其藥學上可接受的鹽)與一或多個溶劑分子的分子復合物。此類溶劑分子是通常用于制藥技術(shù)且已知對接受者無害的那些，例如，水、乙醇等。術(shù)語“水合物”指其中該溶劑分子是水的復合物。本發(fā)明化合物(包括其鹽、水合物及溶劑化物)可天然或通過設計形成多晶型物。
本文描述了本發(fā)明的各種實施方案。應了解在各個實施方案中規(guī)定的特征可與其他指出的特征結(jié)合以提供本發(fā)明的另外的實施方案。
取代基的定義適用于式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')及(Ib)化合物。
取代基的定義應用于終產(chǎn)物及相應中間體。
實施方案1.如上文描述呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I')化合物。
實施方案2.如上文描述呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)化合物。
實施方案3.根據(jù)如上文描述的實施方案1的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(Ia')化合物。
實施方案4.根據(jù)如上文描述的實施方案2的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(Ia)化合物。
實施方案5.根據(jù)如上文描述的實施方案1或2的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(Ib)化合物。
實施方案6.根據(jù)實施方案4的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(Ia)化合物，其中
a)R1是五至六元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R6取代一次或多于一次；
且
R2是C2-6烷基，其可由R7取代一次或多于一次；
或R2是-X1-R8；-X1-是-O-、-S-或-N(R9)-；R9是氫或C1-4烷基；
且R8是C1-6烷基，其可由R10取代一次或多于一次；
或R2是三至五元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R11取代一次或多于一次；
或
b)R1是
其中苯環(huán)經(jīng)由使用星號標記的鍵連接；
R12各自獨立地是氫、鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；或C3-6環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-6環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-6環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
且
R2是C2-7烷基，其可由R13取代一次或多于一次；
或R2是-X2-R14；-X2-是-O-、-S-或-N(R15)-；R15是氫或C1-4烷基；且R14是C1-6烷基，其可由R16取代一次或多于一次；
或R2是三至五元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R17取代一次或多于一次；
c)R1選自吡唑基、噻吩基或吡啶-2-基的環(huán)，該環(huán)可由C1-3烷基取代；
且
R2是C2-7烷基，其可由R13取代一次或多于一次；
或R2是-X2-R14；-X2-是-O-、-S-或-N(R15)-；R15是氫或C1-4烷基；
且R14是C1-6烷基，其可由R16取代一次或多于一次；
或R2是三至五元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R17取代一次或多于一次；
R3是氫或-CH2R18；
R18是氫、C1-4烷基、C2-6鏈烯基、C3-6環(huán)烷基、C1-3烷氧基C1-3烷基、羥基C1-3烷基、或氨基C1-3烷基；
且
R21是氫、鹵素、羥基、氨基、氰基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
或三至五元單環(huán)芳族、飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，其中所述環(huán)系可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中所述環(huán)系可由R23取代一次或多于一次；
或
R3及R21一起為-CH2-CH2-；
R22是氫、鹵素、羥基、氰基、C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基或C1-4烷氧基；或C3-4環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-4環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接；
R6、R11、R17及R23各自獨立地是鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
或C3-6環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-6環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-6環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
或在相同環(huán)原子上的兩個R6、R11、R17或R23一起是氧代基；
或在相同環(huán)碳原子上的兩個R6、R11、R17或R23連同該碳原子形成C3-6環(huán)烷基；
R7、R10、R13及R16各自獨立地是鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；
或C3-6環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-6環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-6環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
或在相同碳原子上的兩個R7、R10、R13或R16一起是氧代基；
或在相同碳原子上的兩個R7、R10、R13或R16連同該碳原子形成C3-6環(huán)烷基。
實施方案7.根據(jù)實施方案1至5中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R1是
其中苯環(huán)經(jīng)由使用星號標記的鍵連接；
R12各自獨立地是氫、鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4羥烷基、C1-4烷氧基-C1-4烷基、氨基-C1-4烷基、C1-4烷基-氨基-C1-4烷基、二(C1-4烷基)-氨基-C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4鹵代烷氧基、C1-4烷基氨基或二(C1-4烷基)氨基；或C3-6環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中該C3-6環(huán)烷基可直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接，且其中該C3-6環(huán)烷基可由鹵素取代一次或多于一次；
且
R2是C2-7烷基，其可由R13取代一次或多于一次；
或R2是-X2-R14；-X2-是-O-、-S-或-N(R15)-；R15是氫或C1-4烷基；且R14是C1-6烷基，其可由R16取代一次或多于一次；
或R2是三至五元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R17取代一次或多于一次。
實施方案8.根據(jù)實施方案7的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R12各自獨立地是氫、鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4烷氧基；或C3-6環(huán)烷基。
實施方案9.根據(jù)實施方案8的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R12各自是氫。
實施方案10.根據(jù)實施方案1至6中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R1是五至六元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R6取代一次或多于一次；
且
R2是C2-6烷基，其可由R7取代一次或多于一次；
或R2是-X1-R8；-X1-是-O-、-S-或-N(R9)-；R9是氫或C1-4烷基；且R8是C1-6烷基，其可由R10取代一次或多于一次；
或R2是三至五元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R11取代一次或多于一次。
實施方案11.根據(jù)實施方案10的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R6各自獨立地是鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷基、C1-4鹵代烷基、C1-4烷氧基或C3-6環(huán)烷基。
實施方案12.根據(jù)實施方案1至6中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R1是吡唑基。
實施方案13.根據(jù)實施方案12的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R1是吡唑-3-基。
實施方案14.根據(jù)實施方案12或13的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R1由甲基取代。
實施方案15.根據(jù)實施方案12的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R1是吡唑-5-基。
實施方案16.根據(jù)實施方案15的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R1是未經(jīng)取代的吡唑-5-基。
實施方案17.根據(jù)實施方案1至6中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R1是噻吩基。
實施方案18.根據(jù)實施方案17的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R1是噻吩-3-基。
實施方案19.根據(jù)實施方案1至6中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R1是吡啶-2-基。
實施方案20.根據(jù)實施方案1至19中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R2是C2-6烷基。
實施方案21.根據(jù)實施方案20的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R2是正丙基。
實施方案22.根據(jù)實施方案20的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R2是異丙基。
實施方案23.根據(jù)實施方案1至19中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R2是-X1-R8；-X1-是-O-或-S-；及R8是C1-6烷基。
實施方案24.根據(jù)實施方案1至19的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R2是-X1-R8；-X1-是-N(R9)-；R9是C1-4烷基；且R8是C1-6烷基。
實施方案25.根據(jù)實施方案1至19中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R2是三至五元單環(huán)飽和或不飽和非芳族環(huán)系，其中所述環(huán)系可含有1至4個選自氮、氧及硫的雜原子，且其中所述環(huán)系可由R11取代一次或多于一次；R11各自獨立地是鹵素、羥基、氨基、氰基、硝基、C1-4烷基、C1-4烷氧基或C3-6環(huán)烷基。
實施方案26.根據(jù)實施方案25的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R2是環(huán)丙基。
實施方案27.根據(jù)實施方案25的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R2是環(huán)丁基。
實施方案28.根據(jù)實施方案25的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R2是環(huán)戊基。
實施方案29.根據(jù)實施方案1至28中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R3是氫或-CH2R18；R18是氫、C1-4烷基、C2-6鏈烯基或C3-6環(huán)烷基。
實施方案30.根據(jù)實施方案29的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R3是氫。
實施方案31.根據(jù)實施方案29的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R3是-CH2R18，且R18是氫。
實施方案32.根據(jù)實施方案1至28中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)或(Ia')化合物，其中R3及R21一起為-CH2-CH2-。
實施方案33.根據(jù)實施方案1至28中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)或(Ia')化合物，其中R21是氫。
實施方案34.根據(jù)實施方案1至33中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R22是氫、鹵素、羥基、氰基、C1-4烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基或C1-4烷氧基；或C3-4環(huán)烷基，其中一個碳原子可被置換為氧原子，其中C3-4環(huán)烷基直接或經(jīng)C1-2亞烷基連接。
實施方案35.根據(jù)實施方案34的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，其中R22是氫。
實施方案36.根據(jù)實施方案1至28中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成5至7元單環(huán)非芳族碳環(huán)，其可由R19取代一次或多于一次；R19選自鹵素或C1-C3烷基。
實施方案37.根據(jù)實施方案36的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成環(huán)戊基環(huán)。
實施方案38.根據(jù)實施方案36的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成環(huán)己基環(huán)。
實施方案39.根據(jù)實施方案38的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成由C1-C3烷基取代一次的環(huán)己基環(huán)。
實施方案40.根據(jù)實施方案36的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成環(huán)庚基環(huán)。
實施方案41.根據(jù)實施方案1至28中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成噻吩環(huán)。
實施方案42.根據(jù)實施方案41的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成連接至分子其余部分的噻吩環(huán)，以得到噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶二酮化合物。
實施方案43.根據(jù)實施方案41的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成連接至分子其余部分的噻吩環(huán)，以得到噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶二酮化合物。
實施方案44.根據(jù)實施方案41的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成連接至分子其余部分的噻吩環(huán)，以得到噻吩并[3,4-b][1,6]萘啶二酮化合物。
實施方案45.根據(jù)實施方案41至44中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成由C1-C3烷基取代一次的噻吩環(huán)。
實施方案46.根據(jù)實施方案41至44中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4及R5連同其連接的鍵形成未經(jīng)取代噻吩環(huán)。
實施方案47.根據(jù)實施方案1至28中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4是氫。
實施方案48.根據(jù)實施方案1至28中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R4是甲基。
實施方案49.根據(jù)實施方案47或48中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R5是氫。
實施方案50.根據(jù)實施方案47或48中任一項的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)、(I')或(Ib)化合物，其中R5是甲基。
實施方案51.根據(jù)實施方案1的呈游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I')化合物，其選自
3-環(huán)丁基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
8-氟-3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
8-氟-3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
8-氯-3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
8-氯-3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-異丙基-8-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-異丙基-5,8-二甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
9-異丙基-8-苯基-1H-吲哚并[1,7-ab][1,6]萘啶-6,7(2H,8H)-二酮；
7-異丙基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮；
7-異丙基-9-甲基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮；
7-異丙基-2-甲基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮；
7-異丙基-2,9-二甲基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮；
6-異丙基-7-苯基噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶-8,9(4H,7H)-二酮；
6-異丙基-4-甲基-7-苯基噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶-8,9(4H,7H)-二酮；
6-異丙基-2-甲基-7-苯基噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶-8,9(4H,7H)-二酮；
6-異丙基-2,4-二甲基-7-苯基噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶-8,9(4H,7H)-二酮；
6-異丙基-3-甲基-7-苯基噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶-8,9(4H,7H)-二酮；
6-異丙基-3,4-二甲基-7-苯基噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶-8,9(4H,7H)-二酮；
3-異丙基-2-苯基-6,7,8,9-四氫苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-異丙基-2-苯基-5,6,7,8-四氫-1H-環(huán)戊二烯并[b][1,6]萘啶-1,9(2H)-二酮；
3-環(huán)丁基-5-甲基-2-苯基-5,6,7,8-四氫-1H-環(huán)戊二烯并[b][1,6]萘啶-1,9(2H)-二酮；
7-環(huán)丁基-1,2,3-三甲基-6-苯基-1,6-萘啶-4,5(1H,6H)-二酮；
3-環(huán)丁基-2-苯基-5,6,7,8-四氫-1H-環(huán)戊二烯并[b][1,6]萘啶-1,9(2H)-二酮；
7-環(huán)丁基-2,3-二甲基-6-苯基-1,6-萘啶-4,5(1H,6H)-二酮；
3-環(huán)丁基-5-甲基-2-苯基-6,7,8,9-四氫苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
7-環(huán)丁基-9-甲基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮；
3-環(huán)丁基-2-苯基-6,7,8,9-四氫苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
7-環(huán)丁基-2,9-二甲基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮；
7-環(huán)丁基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮；
7-環(huán)丁基-2-甲基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮；
6-環(huán)丁基-4-甲基-7-苯基噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶-8,9(4H,7H)-二酮；
6-環(huán)丁基-7-苯基噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶-8,9(4H,7H)-二酮；
6-環(huán)丁基-2,4-二甲基-7-苯基噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶-8,9(4H,7H)-二酮；
6-環(huán)丁基-2-甲基-7-苯基噻吩并[3,2-b][1,6]萘啶-8,9(4H,7H)-二酮；
3-環(huán)丁基-5,8-二甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-8-氟-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
8-氯-3-環(huán)丁基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-8-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
8-氯-3-環(huán)丁基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-異丙基-6-甲氧基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-8-氟-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
9-環(huán)丁基-8-苯基-1H-吲哚并[1,7-ab][1,6]萘啶-6,7(2H,8H)-二酮；
3-環(huán)丁基-6-甲氧基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-異丙基-6-甲氧基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-6-甲氧基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-異丙基-8-甲氧基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-異丙基-8-甲氧基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
8-羥基-3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
6-羥基-3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-2-環(huán)戊基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-2-環(huán)戊基-5-甲基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
2-環(huán)戊基-3-異丙基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
2-環(huán)戊基-3-異丙基-5-甲基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-2-(吡啶-2-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-5-甲基-2-(吡啶-2-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-2-(吡咯烷-1-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
3-環(huán)丁基-5-甲基-2-(吡咯烷-1-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
4-氯-3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；
4-氯-3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮；和
4-溴-3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
可通過常規(guī)方法制備式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物，例如，如在實施例中描述，該方法是本發(fā)明進一步的方面。此外，式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物或其前體可獲自在實施例中描述的化合物，例如，通過所得的化合物的還原、氧化和/或其他官能化和/或通過切除任何任選地存在的保護基團，及回收，如此獲得的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物或預期前體?？筛鶕?jù)常規(guī)方法實現(xiàn)該反應，例如在實施例中描述的?？梢勒找阎椒ㄟM行反應混合物的處理及由此獲得的化合物的純化?？蓮挠坞x堿以已知方式生成酸加成鹽，反之亦然。起始材料，例如，如在實例中描述的起始材料，可以是已知的或根據(jù)從已知化合物起始的常規(guī)方法來制備。
本發(fā)明還預期可通過從前藥體內(nèi)生物轉(zhuǎn)化而形成式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物。
在另一個方面，本發(fā)明提供一種包括本發(fā)明化合物及藥學上可接受的載體的藥物組合物。可配制該藥物組合物以用于特定施用途徑諸如口服施用、腸胃外施用、及直腸施用等。此外，本發(fā)明藥物組合物可制成固體形式(包括膠囊、片劑、藥丸、顆粒劑、粉劑或栓劑)及液體形式(包括溶液劑、混懸劑或乳劑)。該藥物組合物可經(jīng)歷常規(guī)醫(yī)藥操作諸如滅菌，和/或可含有常規(guī)惰性稀釋劑、潤滑劑、或緩沖劑，以及佐助劑，諸如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑、乳化劑及緩沖劑等等。
通常，該藥物組合物是包括活性成分連同下列的片劑和膠囊：
a)稀釋劑，例如，乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露醇、山梨醇、纖維素和/或甘氨酸；
b)潤滑劑，例如，二氧化硅、滑石、硬脂酸、其鎂或鈣鹽和/或聚乙二醇；對于片劑還包含
c)粘合劑，例如，硅酸鎂鋁、淀粉糊、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧基甲基纖維素鈉和/或聚乙烯吡咯烷酮；若需要，包含
d)崩解劑，例如，淀粉、瓊脂、海藻酸或其鈉鹽，或泡騰混合物；和/或
e)吸收劑、著色劑、香料及甜味劑。
錠劑片劑可根據(jù)本領(lǐng)域已知的方法進行膜涂覆或者腸溶衣涂覆。
適宜用于口服施用的組合物包括有效量的片劑、錠劑、水性或油性混懸劑、可分散粉劑或顆粒劑、乳劑、硬或軟膠囊、或糖漿劑或酏劑形式的本發(fā)明化合物。根據(jù)任何在制造藥物組合物技術(shù)中已知的方法來制備意在口服使用的組合物，且該類組合物可含有一中或多種選自甜味劑、矯味劑、著色劑及防腐劑的物質(zhì)以提供制藥上精制及適口的制劑。片劑包含與適合用于制造片劑的非毒性藥學上可接受的賦形劑混合的活性成分。這些賦形劑是例如惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；造粒劑及崩解劑，例如，玉米淀粉，或海藻酸；結(jié)合劑，例如，淀粉、明膠或阿拉伯膠；及潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。該片劑是未涂覆的或通過已知技術(shù)涂覆以推遲崩解及在胃腸道中吸收及由此提供較長時間持續(xù)作用。例如，可采用諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油基酯的時間推遲材料?？诜褂门渲莆锟沙尸F(xiàn)為其中活性成分與惰性固體稀釋劑(例如，碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土)混合的硬明膠膠囊，或呈現(xiàn)為其中活性成分與水或油介質(zhì)(例如，花生油、液體石蠟或橄欖油)混合的軟明膠膠囊。
特定某些可注射組合物是水性等滲溶液或混懸液和從脂肪乳液或混懸液有利地制備的栓劑。所述組合物可經(jīng)歷滅菌和/或含有佐助劑，諸如防腐劑、穩(wěn)定劑、潤濕劑或乳化劑，增溶劑、用于調(diào)節(jié)滲透壓的鹽和/或緩沖劑。此外，其還可含有其他有治療價值的物質(zhì)。該組合物分別根據(jù)常規(guī)混合、造?；蛲扛卜椒▉碇苽?，且含有約0.1至75％的活性成分，或含有約1至50％的活性成分。
用于經(jīng)皮施用的適宜組合物包括有效量的具有載體的本發(fā)明化合物。載體包括可吸收的藥理上可接受的溶劑以促進通過宿主皮膚。例如，經(jīng)皮裝置為繃帶形式，其包含背襯層、含任選地具有載體的化合物的貯庫、任選的速率控制屏障(以在長時間以受控和預定速率輸送化合物至宿主皮膚)和將該裝置固定至皮膚的構(gòu)件。
用于局部應用(例如，于皮膚及眼睛)的適宜組合物包括水溶液劑、混懸劑、軟膏劑、乳膏劑、凝膠劑或可噴霧配制物，例如，用于通過氣霧劑等遞送。此類局部遞送系統(tǒng)可特別適宜用于皮膚施用，例如，用于治療皮膚癌，例如，用于在防曬霜、防曬乳、防曬噴霧等中預防應用。因此它們特別適宜用于本領(lǐng)域熟知的局部(包括化妝品)配制物。此類可含有增溶劑、穩(wěn)定劑、張力增強劑、緩沖劑及防腐劑。
如本文使用，局部施用還可涉及吸入或鼻內(nèi)施用。它們通常自使用或不使用適宜拋射劑的加壓容器、泵、噴霧器(spray)、霧化器(atomizer)或霧化吸入器從干粉吸入器或氣霧噴霧器以干燥粉末形式(單獨、作為混合物，例如與乳糖的干燥摻合物，或例如與磷脂的混合組分粒子)遞送。
由于水可促進某些化合物降解，本發(fā)明還提供了包括本發(fā)明化合物作為活性成分的無水藥物組合物及劑型。
可使用無水或含有低水分組分及低水分或低濕度條件來制備本發(fā)明的無水藥物組合物及劑型。可制備及貯藏一種無水藥物組合物使得可保持其無水性質(zhì)。由此，無水組合物可優(yōu)選地使用已知防止暴露于水的材料封裝使得其可包括在適宜處方套組中。適宜包裝的實例包括但不限于密封氣密式箔片、塑料、單位劑量容器(例如小瓶)、鼓泡包裝、及帶狀包。
本發(fā)明還提供了藥物組合物及劑型，其包含一種或多種降低作為活性成分的本發(fā)明化合物分解速率的物質(zhì)。此類物質(zhì)(本文稱為“穩(wěn)定劑”)包括但不限于抗氧化劑諸如抗壞血酸、pH緩沖劑、或鹽緩沖劑等。
本文使用的術(shù)語“藥學上可接受的載體”包括如本領(lǐng)域普通技術(shù)人員已知的任何及全部溶劑、分散介質(zhì)、包衣、表面活化劑、抗氧化劑、防腐劑(例如，抗細菌劑、抗真菌劑)、等滲劑、吸收推遲劑、鹽、防腐劑、藥物、藥物穩(wěn)定劑、粘合劑、賦形劑、崩解劑、潤滑劑、甜味劑、矯味劑、染料、此類的材料及其組合(參見，例如，Remington's Pharmaceutical Sciences，Mack Printing Company第18版，1990，第1289至1329頁)。除任何常規(guī)載體與活性成分不相容范圍外，預期其于治療或藥物組合物的用途。
式I化合物或其藥學上可接受的鹽顯示有價值藥理性質(zhì)且因此可用作藥物。
此外，式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物可用于關(guān)于由無義突變引起的疾病的研究，例如，作為工具化合物。
具體而言，式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物在常見PTC上，例如在囊性纖維化傳導調(diào)節(jié)蛋白(CFTR)的mRNA中的Y122X上，充當無義突變抑制劑。這可在體外測定，例如，使用如本文描述的表達GFP-CFTR-Y122X-海腎(Renilla)構(gòu)筑體的細胞株。
本發(fā)明化合物由此可用于預防、治療或推遲由無義突變引起的疾病進程。
術(shù)語“由無義突變引起的疾病”在本領(lǐng)域中是已知的。其涉及存在于疾病相關(guān)基因中攜帶無義突變病人體內(nèi)的疾病，其中無義突變引起部分/全部蛋白質(zhì)缺乏，其隨后引起疾病病理。
在一個實施方案中，該疾病選自A型血友病、B型血友病、囊性纖維化、粘多糖沉積癥I型、迪謝內(nèi)肌營養(yǎng)不良、貝克爾肌營養(yǎng)不良、缺失APC引起的癌癥及缺失p53引起的癌癥。
就先前提及的適應癥(病癥及障礙)而言，適當劑量將取決于例如采用的化合物、宿主、施用模式及治療的病癥的性質(zhì)及嚴重性而變化。然而，一般而言，顯示約0.01至約100mg/kg體重的每日劑量可在動物體內(nèi)獲得良好結(jié)果，優(yōu)選地約0.1至約10mg/kg體重，例如，1mg/kg。在較大型哺乳動物(例如人類)中，指示每日劑量為約0.1至約1000mg，優(yōu)選地約1至約400mg、最佳地約10至約100mg的范圍的方便施用的本發(fā)明化合物，例如，以至多每日四次的分份劑量。
對于根據(jù)本發(fā)明的用途而言，本發(fā)明化合物可作為單一活性劑或與其他活性劑結(jié)合以任何常用方式施用，例如，口服、例如以片劑或膠囊形式施用，或胃腸外、例如以注射溶液或混懸液形式施用。包含本發(fā)明化合物及另一種活性劑的組合可稱為“本發(fā)明的組合產(chǎn)品”。
本發(fā)明化合物，可與通讀活化劑組合，例如，負霉素(negamycin)、RT13、RT14、阿他盧侖(ataluren)或氨基糖苷類通讀活化劑，例如巴龍霉素(paromomycin)、阿米卡星(amikacin)、G418、NB30、NB54或NB84。
本發(fā)明化合物，可與無義介導的mRNA降解抑制劑(例如NMDI-1)結(jié)合。
負霉素、RT13、RT14、阿他盧侖、氨基糖苷類通讀活化劑及NMDI-1是，例如，在Keeling等人，WIREs RNA，2011，2，837-852中描述。
本發(fā)明化合物可用于預防由無義突變引起的疾病。
本發(fā)明化合物可用于治療由無義突變引起的疾病。
本發(fā)明化合物可用于推遲由無義突變引起的疾病進程。
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供一種治療由無義突變引起的疾病的方法，其包括施用治療有效量的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物或其藥學上可接受的鹽。在一個另外的實施例中，本發(fā)明提供一種治療由無義突變引起的疾病的方法，其包括施用治療有效量的式(I)、(I')、(Ia)、(Ia')或(Ib)化合物或其藥學上可接受的鹽，其中所述疾病選自先前提及的列表，適宜地為A型血友病、B型血友病、囊性纖維化及粘多糖沉積癥I型(胡爾勒綜合征胡爾勒綜合征(Hurler syndrome))。
術(shù)語本發(fā)明化合物的“治療有效量”指可引起個體生物或藥物反應(例如，改善癥狀、緩解病癥、減慢或推遲疾病進程、或預防疾病等)的本發(fā)明化合物的量。在一個非限制實施方案中，術(shù)語“治療有效量”指當施用于個體時對至少部分緩解、抑制、預防和/或改善由無義突變引起的疾病有效的本發(fā)明化合物的量。在另一非限制實施方案中，術(shù)語“治療有效量”指當施用于至細胞、或組織、或非細胞生物材料、或介質(zhì)時對于至少部分抑制無義突變作用有效的本發(fā)明化合物的量。
本文使用的術(shù)語“個體”指動物。優(yōu)選地，該動物是哺乳動物。個體亦指例如，靈長類動物(例如，人類)、牛、綿羊、山羊、馬、狗、貓、兔、大鼠、小鼠、魚、鳥等。在優(yōu)選的實施方案中，個體是人類。
本文使用的術(shù)語“抑制”指減少或抑制給定病癥、癥狀、或障礙、或疾病、或顯著降低在生物活性或過程的基線活性。
在一個實施方案中，本文中使用的術(shù)語任何疾病或障礙的“治療”在一個實施方案中是指改善疾病或障礙(即，減慢或抑制或減少疾病或其至少一個臨床癥狀的發(fā)展)。在另一個實施方案中，“治療”指緩解或改善包括患者無法察覺到的那些的至少一種身體參數(shù)。在又一個實施方案中，“治療”或“治療”指在身體方面(例如，穩(wěn)定可辨別癥狀)、生理方面(例如，穩(wěn)定身體參數(shù))或二者方面調(diào)整疾病或障礙。在又一個實施方案中，“治療”指預防或推遲疾病或障礙的發(fā)作或發(fā)展或進程。
發(fā)明的藥物組合物或組合可以約1至1000mg活性成分(等)的單位劑量用于約50至70kg個體，或約1至500mg或約1至250mg或約1至150mg或約0.5至100mg，或約1至50mg活性成分?；衔?、藥物組合物、或其組合的治療有效劑量取決于個體物種、體重、年齡及個體情況、待治療障礙或疾病或其嚴重性。具有一般技術(shù)的內(nèi)科醫(yī)師、臨床醫(yī)師或獸醫(yī)師可以容易地測定預防、治療或抑制的障礙或疾病進程所需的各活性成分的有效量。
上文列舉的劑量性質(zhì)可在有利地使用哺乳動物(例如，小鼠、大鼠、狗、猴或分離器官、組織及其制品)的體外及體內(nèi)測試予以論證。本發(fā)明化合物可在體外以溶液形式(例如，優(yōu)選地水溶液)施用，及在體內(nèi)經(jīng)腸、胃腸外、有利地靜脈內(nèi)(例如，作為混懸液或水溶液)施用。在體外劑量可在約10-3摩爾與10-9摩爾濃度間變化。在體內(nèi)治療有效量的范圍可取決于施用途徑為約0.1至500mg/kg，或約1至100mg/kg。
可通過本文描述的體外及體內(nèi)方法來評定本發(fā)明化合物活性。
本發(fā)明化合物可與至少一種其他治療劑同時或在其之前或之后施用。本發(fā)明化合物可通過相同或不同施用途徑分別、或在相同藥物組合物中一起施用。
以下實例闡明但不限制本發(fā)明。
實施例部分：
縮寫：
NMP 1-甲基吡咯烷-2-酮
HOAt 3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-酚
HATU 2-(3H-[1,2,3]三唑并[4,5-b]吡啶-3-基)-1,1,3,3-四甲基異脲鎓六氟磷酸鹽(V)
DMF 二甲基甲酰胺
DCM 二氯甲烷
ACN 乙腈
TFA 三氟乙酸
THF 四氫呋喃
TBME 叔丁基甲醚
r.t. 室溫
SFC 超臨界流體色譜法
RP 反相
HPLC 高壓液相色譜法
DIEA N,N-二異丙基乙胺
rac-BINAP 2,2'-雙(二苯膦基)-1,1'-聯(lián)萘消旋體
dba 二苯亞甲基丙酮
DMA 二甲基乙酰胺
LC-MS方法：
Waters Acquity UPLC-SQD系統(tǒng)；流動相：A：水(0.05％甲酸)B：甲醇(0.04％甲酸)；梯度：在0.1min內(nèi)2％B至8％B，在0.5min內(nèi)8％B至98％B，0.1min為98％B；流率1mL/min；柱Waters Acquity UPLC BEH C18，30x2.1mm，1.7mM；烘箱溫度60℃。
NMR裝置：
Bruker Avance 400MHz Ultrashield及Avance 600MHz
實施例：
實施例1.1：3-環(huán)丁基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
a)3-(環(huán)丁烷羰基)-6-環(huán)丁基-4-羥基-2H-吡喃-2-酮
在氬氣下將64.1g羰基二咪唑(396mmol)在10分鐘內(nèi)在室溫添加至在300mL THF中的31.5mL環(huán)丁烷甲酸中(330mmol)。25分鐘后接著添加226mL DCM、77g 3-甲氧基-3-氧代丙酸鉀(494mmol)及37.7g氯化鎂(396mmol)，在2.5小時內(nèi)加熱至56℃，并再攪拌3.5小時。將產(chǎn)生的混懸液冷卻至室溫，添加600mL 2N含水鹽酸以達到pH2，再添加800mL水和分離所得的兩相溶液。使用250mL DCM將水相萃取兩次，使用一半濃氯化鈉水溶液洗滌合并的有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)。將所得的3-環(huán)丁基-3-氧代丙酸甲酯(59g，不經(jīng)純化用于下一步驟)溶于10mL甲醇中，添加378mL 2M氫氧化鈉水溶液并攪拌該混合物一小時。添加100mL TBME，使用50mL TBME將水相萃取兩次，過濾合并的水相并冷卻至5℃。在該溶液中添加65.1mL濃鹽酸水溶液以達到pH＜1。添加167g固體氯化鈉，并使用100mL乙酸乙酯將該混合物萃取四次，使用水洗滌有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)以產(chǎn)生為微黃色油狀物的3-環(huán)丁基-3-氧代丙酸(43g，不經(jīng)純化用于下一步驟)。將該油狀物溶于508mL THF，小心添加53.1g羰基二咪唑(328mmol)，并攪拌6小時。在所得溶液中添加50mL水，在減壓下蒸發(fā)THF，添加200mL DCM，并使用400mL 2M含水鹽酸、200mL 0.5M含水鹽酸、200mL水洗滌。使用100mL DCM萃取水相，并將合并的有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾并蒸發(fā)。通過液體色譜法經(jīng)硅膠使用DCM/甲醇作為洗脫劑來純化所得的橘色油。合并目標級分，并蒸發(fā)，得到22g為緩慢結(jié)晶油的3-(環(huán)丁烷羰基)-6-環(huán)丁基-4-羥基-2H-吡喃-2-酮(89mmol，53％)。
ESI-MS[M+H]+249.2
1H-NMR(400MHz，CDCl3)：δ(ppm)＝16.91(s，1H)、5.94(s，1H)、4.36至4.26(m，1H)、3.35(五重峰，1H，J＝8.6Hz)、2.39至2.26(m，8H)、2.13至2.00(m，2H)、1.99至1.81(m，2H)。
b)6-環(huán)丁基-4-羥基-2H-吡喃-2-酮
在21.9g 3-(環(huán)丁烷羰基)-6-環(huán)丁基-4-羥基-2H-吡喃-2-酮(88mmol)中添加65.7mL濃硫酸(88mmol)，并加熱該混合物至105℃達20分鐘及隨后冷卻至0℃。在該混合物中小心傾倒600g冰，使用水稀釋至800mL體積，并使用200mL乙酸乙酯萃取三次。使用氯化鈉水溶液洗滌合并的有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，過濾，蒸發(fā)，并通過液體色譜法經(jīng)硅膠使用DCM/甲醇作為洗脫劑純化。合并目標級分，并蒸發(fā)，得到11.6g為灰米白固體的6-環(huán)丁基-4-羥基-2H-吡喃-2-酮(70mmol，79％)。
ESI-MS[M+H]+167.1
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝11.61(s，1H)、5.94(d，1H，J＝2.1Hz)、5.22(d，1H，J＝2.1)、3.36(五重峰，1H，J＝8.6Hz)、2.24至2.08(m，4H)、2.04至1.90(m，1H)、1.87至1.75(m，1H)。
c)6-環(huán)丁基-4-羥基-1-苯基吡啶-2(1H)-酮
向在231mL乙酸及462mL水中的11.5g的6-環(huán)丁基-4-羥基-2H-吡喃-2-酮(69mmol)的混懸液中添加6.33mL苯胺，并加熱至85℃達22小時。蒸發(fā)該混合物，兩次添加甲苯并蒸發(fā)，添加50mL甲苯，并在50℃攪拌。過濾該混懸液，使用甲苯和二乙醚洗滌固體，并干燥，得到8.5g為白色固體的6-環(huán)丁基-4-羥基-1-苯基吡啶-2(1H)-酮(35mmol，51％)。
ESI-MS[M+H]+242.2
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝10.59(s，1H)、7.50至7.39(m，3H)、7.19至7.12(m，2H)、5.86至5.81(m，1H)、5.55(d，1H，J＝2.4Hz)、3.09至2.99(m，1H)、1.96至1.84(m，2H)、1.67至1.50(m，4H)。
d)三氟甲磺酸6-環(huán)丁基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基酯
8.4g 6-環(huán)丁基-4-羥基-1-苯基吡啶-2(1H)-酮(35mmol)混懸于168mL DCM中，冷卻至-25℃，添加3.94mL吡啶接著15分鐘內(nèi)添加7.03mL三氟甲磺酸酐在35mL DCM中的溶液。攪拌該混懸液40分鐘，傾倒在250mL冰/水混合物上，并劇烈攪拌。分離水相，使用80mL DCM萃取兩次，使用水洗滌合并的有機相，經(jīng)硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)，得到13g為靜置后結(jié)晶的黃色油狀物的三氟甲磺酸6-環(huán)丁基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基酯(35mmol，100％)。
ESI-MS[M+H]+374.1
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝7.58至7.44(m，3H)、7.34至7.26(m，2H)、6.57至6.52(m，1H)、6.44至6.38(m，1H)、3.16(五重峰，1H，J＝8.8Hz)、2.09至1.95(m，2H)、1.71至1.53(m，4H)。
e)2-((6-環(huán)丁基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基)氨基)苯甲酸甲酯
向在3g三氟甲磺酸6-環(huán)丁基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基酯(8.1mmol)、1.26mL 2-氨基苯甲酸甲酯(9.7mmol)與3.7g碳酸銫(11.3mmol)在32mL甲苯中的混懸液中添加60mg rac-BINAP(0.1mmol)及44mg Pd2(dba)3(0.05mmol)，并加熱至85℃達16小時。冷卻該混懸液至室溫，使用60mL DCM稀釋，經(jīng)硅藻土Hyflo過濾，并蒸發(fā)濾液。通過液體色譜法經(jīng)硅膠使用DCM/甲醇為洗脫劑來純化所得的橘色油。合并目標級分，并蒸發(fā)，得到2.68g為靜置后結(jié)晶的橘色油狀物的2-((6-環(huán)丁基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基)氨基)苯甲酸甲酯(7.2mmol，88％)。
ESI-MS[M+H]+375.3
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝9.06(s，1H)、7.94(dd，1H，J＝7.9，1.6Hz)、7.66至7.54(m，2H)、7.51至7.39(m，3H)、7.21至7.15(m，3H)、6.09(d，1H，J＝2.5Hz)、5.79(d，1H，J＝2.3Hz)、3.87(s，3H)、3.11至3.03(m，1H)、2.01至1.89(m,，2H)、1.70至1.52(m，4H)。
f)3-環(huán)丁基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
在2.6g 2-((6-環(huán)丁基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基)氨基)苯甲酸甲酯(6.9mmol)中添加38g聚磷酸，并加熱至120℃達40分鐘。在該混合物中添加43g冰，使用440mL水稀釋，并緩慢添加152g碳酸氫鉀以達到pH7至8。添加100mL TBME及200mL甲醇、接著添加200mL水，并徹底攪拌30分鐘。過濾該混懸液，使用水及TBME洗滌固體并干燥，得到1.7g為類白色固體的3-環(huán)丁基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮(5mmol，72％)。
ESI-MS[M+H]+343.2；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.60。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝11.79(s，1H)、8.10(d，1H，J＝7.9)、7.67(t，1H，J＝7.6)、7.57至7.41(m，4H)、7.36至7.20(m，3H)、6.22(s，1H)、3.20至3.06(m，1H)、2.06至1.90(m，2H)、1.74至1.56(m，4H)。
實施例1.2：3-環(huán)丁基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
向在50mL DMF中的1.65g 3-環(huán)丁基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮(4.8mmol)(實施例1.1)的混懸液中添加4.7g碳酸銫(14.4mmol)及0.9mL碘甲烷(14.4mmol)，并在室溫攪拌2.5小時。在所得的混懸液中緩慢添加100mL水，冷卻至10℃，攪拌30分鐘，過濾，使用20mL DMF/水(1:2，v/v)、100mL水洗滌固體，并在真空下于60℃干燥，得到1.4g為類白色固體的3-環(huán)丁基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮(4mmol，84％)。
ESI-MS[M+H]+357.2；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.61。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝8.21(dd，1H，J＝7.8、1.8Hz)、7.84(d，1H，J＝8.6Hz)、7.81至7.73(m，1H)、7.58至7.46(m，3H)、7.38(t，1H，J＝7.4Hz)、7.28至7.23(m，2H)、6.43(s，1H)、3.92(s，3H)、3.22至3.12(m，1H)、2.22至2.10(m，2H)、1.73至1.56(m，4H)。
實施例1.3：3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
a)4-羥基-6-異丙基-1-苯基吡啶-2(1H)-酮
向在120mL水及60mL乙酸中3g(19.5mmol)4-羥基-6-異丙基-2H-吡喃-2-酮(CAS 220809-37-0，市售)的溶液中添加1.8mL(19.5mmol)苯胺，并在85℃攪拌16.5小時。蒸發(fā)所得的混合物，并通過液體色譜法經(jīng)硅膠使用DCM/甲醇作為洗脫劑純化。合并目標級分，并蒸發(fā)，得到1.5g(6.4mmol，33％)為白色固體的4-羥基-6-異丙基-1-苯基吡啶-2(1H)-酮。
b)三氟甲磺酸6-異丙基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基酯
在34mL DCM中的2.9g(12.8mmol)4-羥基-6-異丙基-1-苯基吡啶-2(1H)-酮的混懸液中添加1.87mL(23mmol)吡啶，冷卻該混合物至-25℃，以10分鐘時間逐滴添加含在11.4mL DCM中的2.7mL(16mmol)三氟甲磺酸酐溶液，并在-25℃再攪拌45分鐘。添加40mL及80mL水，使用80mL水及鹽水萃取有機相，使用80mL乙酸乙酯萃取水相兩次，將合并的有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)，得到4.6g(12.4mmol，97％)為黃色固體的三氟甲磺酸6-異丙基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基酯。
c)2-((6-異丙基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基)氨基)苯甲酸甲酯
向在71mL二噁烷中的4.6g(12.7mmol)三氟甲磺酸6-異丙基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基酯的溶液中添加1.8mL(14mmol)2-氨基苯甲酸甲酯及4.4mL(25mmol)DIEA。隨后添加0.63g(1mmol)rac-BINAP及0.46g(0.5mmol)Pd2(dba)3，并在90℃攪拌該混合物21小時。冷卻該混合物至室溫，蒸發(fā)，使用300mL乙酸乙酯稀釋，并使用水萃取三次，將有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)。通過液體色譜法經(jīng)硅膠使用庚烷/乙酸乙酯作為洗脫劑來純化所得的黑色油。合并目標級分，并蒸發(fā)，得到2.2g(6.1mmol，48％)為紅色油狀物的2-((6-異丙基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基)氨基)苯甲酸甲酯。
d)3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
將2.2g(6.1mmol)2-((6-異丙基-2-氧代-1-苯基-1,2-二氫吡啶-4-基)氨基)苯甲酸甲酯溶于24mL聚磷酸，并加熱至125℃達5小時。冷卻該反應混合物至室溫，通過緩慢添加500mL水來水解，并通過小心添加固體碳酸氫鉀調(diào)節(jié)至pH8。使用80mL DCM萃取所得的混懸液，使用80mL水及鹽水萃取有機相兩次，使用80mL DCM萃取合并的有機相兩次。過濾合并的水相，并在減壓下干燥余留固體，得到1.1g(3.3mmol，55％)為類白色固體的3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+331.2；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.60。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝11.74(s，1H)、8.10(dd，J＝8.1、1.5Hz，1H)、7.67(td，J＝7.7、7.1、1.6Hz，1H)、7.60至7.43(m，4H)、7.35至7.26(m，3H)、6.24(s，1H)、2.41(sep，J＝6.8Hz，1H)、1.10(d，J＝6.7Hz，6H)。
實施例1.4：3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
向在34mL DMF中的630mg(1.9mmol)3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮的溶液中添加1.86g碳酸銫(5.7mmol)及0.81g碘甲烷(5.7mmol)，并在室溫攪拌1小時。隨后添加80mL水及80mL DCM，使用水及鹽水萃取有機相兩次，使用DCM萃取合并的水相兩次，將合并的有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)。經(jīng)所得的殘留物混懸于5mL DCM中，過濾，蒸發(fā)濾液，在5mL二乙醚中懸浮，過濾，并在減壓下干燥合并的固體以產(chǎn)生441mg(1.3mmol，67％)為類白色固體的3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+345.3；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.61。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝8.20(dd，J＝7.9、1.6Hz，1H)、7.86至7.71(m，2H)、7.61至7.46(m，3H)、7.42至7.28(m，3H)、6.53(s，1H)、3.90(s，3H)、2.48至2.41(m，1H)、1.18(d，J＝6.8Hz，6H)。
可以類似實施例1.1至1.4的方式制備以下實施例。
*：能以類似實施例1.1及2.1的方式制備的化合物
以類似實施例1.1至1.4的方式制備以下實施例。
實施例2.1：3-環(huán)丁基-2-環(huán)戊基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
a)4-溴-6-環(huán)丁基-2H-吡喃-2-酮
向400mg(2.4mmol)6-環(huán)丁基-4-羥基-2H-吡喃-2-酮(根據(jù)實施例1.1b制備)、854mg(2.7mmol)溴化四丁銨和752mg(5.3mmol)五氧化二磷中添加8mL甲苯，并在劇烈攪拌下加熱該混合物至110℃。在室溫下將各相分離，使用4mL甲苯萃取水相兩次，使用15mL 20％(w/v)碳酸氫鉀水溶液和15mL鹽水洗滌合并的有機相，使用5mL甲苯萃取水相，將合并的有機相經(jīng)硫酸鈉干燥，并蒸發(fā)，得到507mg(2.2mmol，92％)為紅色油狀物的4-溴-6-環(huán)丁基-2H-吡喃-2-酮。
b)2-((6-環(huán)丁基-2-氧代-2H-吡喃-4-基)氨基)苯甲酸甲酯
在氬氣下將494mg(2.2mmol)4-溴-6-環(huán)丁基-2H-吡喃-2-酮及1054mg(3.2mmol)碳酸銫混懸于8mL甲苯中，隨后添加63L(424mg，2.8mmol)2-氨基苯甲酸甲酯、16mg(0.026mmol)rac-BINAP、及12mg(0.013mmol)Pd2(dba)3。加熱該混合物至110℃達23小時。在室溫下通過硅藻土hyflo過濾該混合物，蒸發(fā)該濾液，并通過液體色譜法經(jīng)硅膠使用環(huán)己烷/TBME為洗脫劑純化。合并目標級分，并蒸發(fā)，得到458mg(1.5mmol，71％)為黃色固體的2-((6-環(huán)丁基-2-氧代-2H-吡喃-4-基)氨基)苯甲酸甲酯。
c)3-環(huán)丁基-1H-吡喃并[4,3-b]喹啉-1,10(5H)-二酮
向0.4g(1.4mmol)2-((6-環(huán)丁基-2-氧代-2H-吡喃-4-基)氨基)苯甲酸甲酯中添加5g(1.4mmol)聚磷酸，并加熱至130℃達45分鐘。使用20mL水于不超過室溫下水解該反應混合物，使用40mL水稀釋，并通過小心添加固體碳酸氫鉀中和至pH7至8。過濾所得的固體，使用水洗滌并干燥，得到360mg(1.4mmol，98％)為類白色固體的3-環(huán)丁基-1H-吡喃并[4,3-b]喹啉-1,10(5H)-二酮。
d)3-環(huán)丁基-2-環(huán)戊基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
向在6.2mL三氟乙醇中的329mg(1.23mmol)3-環(huán)丁基-1H-吡喃并[4,3-b]喹啉-1,10(5H)-二酮中添加850μL(13.7mmol)環(huán)戊胺和141μL(5.5mmol)乙酸，并加熱至90℃達7小時。蒸發(fā)該混合物，將殘留物與4mL乙醚混合兩次及過濾，用7.5mL異丙基/二乙醚3:2(v/v)、用7mL二乙醚洗滌兩次，并用水徹底地洗滌八次。干燥余留固體，得到373mg(1.1mmol，91％)為類白色固體的3-環(huán)丁基-2-環(huán)戊基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+335.1；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.66；
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝11.58(s，1H)、8.09(dd，J＝8.0，1.2Hz，1H)、7.64(dt，1H)、7.41(dd，J＝8.1Hz，1H)、7.27(dt，J＝7.5Hz，1H)、6.08(s，1H)、4.43(p，1H)、3.71(p，1H)、2.41至2.26(m，2H)、2.26至2.07(m，4H)、2.07至1.89(m，3H)、1.89至1.63(m，3H)、1.63至1.41(m，2H)。
實施例2.2：3-環(huán)丁基-2-環(huán)戊基-5-甲基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
從129mg(0.38mmol)3-環(huán)丁基-2-環(huán)戊基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮(實施例2.1)起始根據(jù)實施例1.2制備，得到121mg(0.35,90％)為類白色固體的3-環(huán)丁基-2-環(huán)戊基-5-甲基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+349.2；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.70；
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝8.20(dd，J＝7.9，1.4Hz，1H)、7.78(dd，J＝8.3Hz，1H)、7.72(dt，J＝8.6、1.6Hz，1H)、7.35(dt，J＝7.3Hz，1H)、6.23(s，1H)、4.49(p，J＝8.6Hz，1H)、3.76(p，J＝8.6Hz，1H)、2.45至2.33(m，2H)、2.33至2.25(m，2H)、2.20(m，J＝14.8、7.4Hz，2H)、2.11至1.90(m，3H)、1.90至1.66(m，3H)、1.66至1.48(m，2H)。
實施例2.3：2-環(huán)戊基-3-異丙基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
使用243mg(0.95mmol)3-異丙基-1H-吡喃并[4,3-b]喹啉-1,10(5H)-二酮根據(jù)實施例2.1a)至d)制備，得到220mg(0.68mmol，72％)為白色固體的2-環(huán)戊基-3-異丙基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+323.2；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.64。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝11.55(s，1H)、8.09(dd，J＝7.9Hz，1H)、7.64(dt，J＝7.5Hz，1H)、7.41(dd，J＝8.1Hz，1H)、7.26(dt，J＝7.5Hz，1H)、6.13(s，1H)、4.74(p，1H)、3.24(七重峰，J＝6.5Hz，1H)、2.29至2.13(m，2H)、2.01(m，2H)、1.88至1.72(m，2H)、1.68至1.52(m，2H)、1.28(m，J＝6.5Hz，6H)
實施例2.4：2-環(huán)戊基-3-異丙基-5-甲基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
使用33mg(0.1mmol)2-環(huán)戊基-3-異丙基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮根據(jù)實施例2.2制備，得到26mg(0.08mmol，76％)為類白色固體的2-環(huán)戊基-3-異丙基-5-甲基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+337.1；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.64；
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝8.20(dd，1H)、7.77(dd，J＝8.1Hz，1H)、7.73(dt，1H)、7.35(dt，1H)、6.33(s，1H)、4.80(p，J＝8.5Hz，1H)、3.82(s，3H)、3.30(七重峰，1H)、2.28至2.13(m，2H)、2.09至1.95(m，2H)、1.88至1.74(m，2H)、1.68至1.53(m，2H)、1.34(m，J＝6.7Hz，6H)
實施例2.5：3-環(huán)丁基-2-(吡啶-2-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
根據(jù)實施例2.1制備，不使用溶劑于170℃下使219mg(0.82mmol)3-環(huán)丁基-1H-吡喃并[4,3-b]喹啉-1,10(5H)-二酮與769mg(8.2mmol)2-氨基吡啶反應17小時，得到209mg(0.61mmol，75％)為棕色固體的3-環(huán)丁基-2-(吡啶-2-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+344.3；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.57；
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝11.82(s，1H)、8.68至8.58(m，1H)、8.11(dd，1H)、8.01(dt，J＝7.7、1.9Hz，1H)、7.69(dt，1H)、7.53(dd，J＝6.7、5.0Hz，1H)、7.50至7.42(m，2H)、7.32(t，J＝7.5Hz，1H)、6.22(s，1H)、3.22(p，J＝9.0Hz，1H)、2.14至1.41(m，6H)。
實施例2.6：3-環(huán)丁基-5-甲基-2-(吡啶-2-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
根據(jù)實施例2.2制備，進行100mg(0.29mmol)3-環(huán)丁基-2-(吡啶-2-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮的反應，得到68mg(0.19mmol，66％)3-環(huán)丁基-5-甲基-2-(吡啶-2-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
ESI-MS[M+H]+：358.1；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.57；
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝8.64(dd，1H)、8.22(dd，J＝7.9、1.4Hz，1H)、8.03(dt，J＝7.7、1.8Hz，1H)、7.85(d，J＝8.6Hz，1H)、7.78(dt，1H)、7.55(dd，J＝7.1、5.2Hz，1H)、7.47(d，J＝7.9Hz，1H)、7.40(t，J＝7.4Hz，1H)、6.43(s，1H)、3.93(s，3H)、3.25(dt，J＝17.3、8.4Hz，1H)、2.15(s，2H)、1.78至1.47(m，4H)。
實施例2.7：3-環(huán)丁基-2-(吡咯烷-1-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
根據(jù)實施例2.1制備，使用在5mL DMA中的247mg(0.92mmol)3-環(huán)丁基-1H-吡喃并[4,3-b]喹啉-1,10(5H)-二酮和588mg(3.7mmol)1-氨基吡咯烷在170℃持續(xù)12小時，得到255mg(0.76mmol，82％)為類白色固體的3-環(huán)丁基-2-(吡咯烷-1-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+336.2；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.67
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝11.67(s，1H)、8.10(dd，1H)、7.66(dt，1H)、7.43(dd，J＝8.1Hz，1H)、7.29(dt，1H)、6.05(s，1H)、3.70(p，J＝8.8Hz，1H)、3.48(q，J＝7.1、6.7Hz，2H)、3.07(q，2H)、3.02至2.92(m，2H)、2.37至1.73(m，10H)。
實施例2.8：3-環(huán)丁基-5-甲基-2-(吡咯烷-1-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
根據(jù)實施例2.2制備，進行124mg(0.37mmol)3-環(huán)丁基-2-(吡咯烷-1-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮的反應，得到72.3mg(0.19mmol，52％)3-環(huán)丁基-5-甲基-2-(吡咯烷-1-基)苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
ESI-MS[M+H]+350.1；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.67。
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝8.20(dd，J＝7.9、1.4Hz，1H)、7.80(dd，J＝8.5Hz，1H)、7.74(dt，1H)、7.37(dt，J＝7.3Hz，1H)、6.22(s，1H)、3.85(s，3H)、3.77(p，J＝9.0Hz，1H)、3.49(q，J＝7.2Hz，2H)、2.98(q，J＝7.3Hz，2H)、2.37至1.74(m，10H)。
以類似實施例2.1至2.8方式制備以下實施例。
實施例3.1：4-氯-3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
向在1mL吡啶及0.43mL乙酸中的50mg(0.15mmol)3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮(實施例1.3)及1mg(7.6μmol)三氯化銨的混懸液中，在5分鐘內(nèi)分批添加20mg(0.15mmol)1-氯代吡咯烷-2,5-二酮，并在50℃攪拌該混合物3小時。
冷卻該反應混合物至室溫，使用3mL水稀釋并攪拌一小時。過濾掉該固體，使用水洗滌并干燥，得到40mg(0.1mmol，69％)為黃色粉末的4-氯-3-異丙基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+365.0；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.64；
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝10.90(s，1H)、8.14至8.05(m，2H)、7.75至7.68(m，1H)、7.60至7.50(m，3H)、7.40至7.31(m，3H)、2.81(bs，1H)、1.30(d，J＝7.1Hz，6H)。
實施例3.2：4-氯-3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
在實施例3.1中描述的反應條件下由100mg(0.29mmol)3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮(實施例1.4)起始制備該化合物，得到20mg(53μmol，18％)為類白色固體的4-氯-3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+379.2；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.66；
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝8.15至8.09(m，1H)、7.83至7.73(m，2H)、7.61至7.54(m，2H)、7.54至7.48(m，1H)、7.45至7.38(m，1H)、7.38至7.33(m，2H)、3.92(s，3H)、3.18(d，J＝3.8Hz，1H)、2.81(bs，1H)、1.30(d，J＝7.2Hz，6H)。
實施例3.3：4-溴-3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮
實施例3.1中描述的反應條件下由1.0g(2.9mmol)3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮(實施例1.4)起始、使用在20mL吡啶中的1.03g(5.8mmol)1-溴代吡咯烷-2,5-二酮、20mg(0.15mmol)三氯化銨及mL乙酸制備該化合物，得到1.05g(2.35mmol，81％)為類白色固體的4-溴-3-異丙基-5-甲基-2-苯基苯并[b][1,6]萘啶-1,10(2H,5H)-二酮。
ESI-MS[M+H]+423.1；LCMS Rt[分鐘]，方法A：0.67；
1H-NMR(400MHz，d6-DMSO)：δ(ppm)＝8.15至8.08(m，1H)、7.82至7.75(m，2H)、7.61至7.48(m，3H)、7.44至7.38(m，1H)、7.38至7.33(m，2H)、3.93(s，3H)、2.93(bs，1H)、1.30(bd，J＝7.5Hz，6H)。
生物測試
體外測試：CFTR-Y122X檢測
在重組雙重報道等基因Hek293細胞系(“CFTR-Y122X測定”)中檢查本發(fā)明化合物的活性。改造的報道構(gòu)建體包含18bp序列延伸，其相當于CFTR I類突變體患者中的常見Y122X PTC突變(參見Sermet-Gaudelus,BMC Medicine,2007,5(5))。TGA終止密碼子而非CFTR蛋白質(zhì)的122位上的酪氨酸(Y)打斷相應mRNA的開放讀碼框(Y122X)。這種TGA終止密碼子三聯(lián)體(后面是嘧啶堿基胞嘧啶)是被允許進行氨基糖苷介導的翻譯通讀，其用作高流通量篩選的陽性對照。相應的TAA終止密碼子變體和野生型非突變的構(gòu)建體用于確認和反向篩選。CFTR序列夾心在eGFP報道基因與融合全長Renilla報道基因的三聯(lián)myc標記序列之間。全部序列包括含有一個定位的前-eGFP的內(nèi)含子(b-珠蛋白內(nèi)含子)被框內(nèi)克隆。相應的表達構(gòu)建體在等基因HEK-R4細胞宿主(Invitrogen Incorp.)中被穩(wěn)定地表達，并且通過殺稻瘟素抗性篩選。該構(gòu)建體的等基因整合將基因劑量作用最小化并且改善了測定的再現(xiàn)性。選擇穩(wěn)定整合的單細胞衍生的克隆并且為氨基糖苷介導的通讀表征。具有最佳生長特征和對巴龍霉素具有強應答的克隆(EC50為1.5mM)進行HTS測定展開。Y122X的通讀蓄積約65.5kDa大小的胞內(nèi)定位的融合蛋白，如通過蛋白質(zhì)印跡分析和免疫熒光、使用抗-renilla抗體所控制的。eGFP報道前-PTC突變用作篩選克隆的遺傳穩(wěn)定性的視覺控制并且將小融合蛋白量的蛋白質(zhì)降解最小化。在本測定中，化合物濃度為10μM。在小型化1536孔格中，將2000個細胞以4μL/孔調(diào)配并且在37℃、5％CO2溫育24小時。將40nL化合物置于細胞上，對照孔包含1uL巴龍霉素和14.4mM終濃度。將化合物溫育24小時。加入Renilla Glo底物(2.5uL)并且將板離心，并且使用多種讀出器處理發(fā)光測量值。使用如下等式進行活性計算：A1(％)＝100*(S-NC)/(AC-NC)，其中AC、NC和S相當于活性對照(注射的刺激緩沖液＝100％刺激)、中性對照(緩沖液注射，伊洛前列素EC10)和篩選樣品(S)。NC相當于0％活性，而AC是100％活性(14mM巴龍霉素)。在確認和驗證篩選過程中使用相同測定方式除去假陽性偽跡，然后使用各自的野生型構(gòu)建體(w/o PTC突變)細胞模型進行反向篩選。試驗達100μM化合物濃度的化合物。
表2：在CFTR-Y122X檢測中的體外活性：
表2代表在CFTR-Y122X檢測中無義突變抑制的AC50值。
*：未測定
表2顯示式(I')化合物在功能性檢測中顯示活性，表明它們促進翻譯通讀。
在上文描述的CFTR-Y122X檢測中以上文劑量范圍測試了以下式(I')化合物，并觀察到達到僅低于5％巴龍霉素參比活性的抑制：
7-異丙基-3-甲基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮；
7-異丙基-3,9-二甲基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮。
在本發(fā)明的一個實施方案中，本發(fā)明化合物不是
7-異丙基-3-甲基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮
7-異丙基-3,9-二甲基-6-苯基噻吩并[2,3-b][1,6]萘啶-4,5(6H,9H)-二酮。
體外測試：源自Hurler患者的成纖維細胞培養(yǎng)物
檢測本發(fā)明化合物在源自患者的成纖維細胞中的活性?；蚍中偷募毎苌訡oriell Institute(#GM00798)并且包含導致W402X突變的外顯子9的1293位核苷酸上的框內(nèi)純合型TGG至TAG改變。W402X突變是引起最常見胡爾勒綜合征之一的失功能突變。60-70％的基因分型的患者包含突變中的Q70X和/或W402X并且被分類為嚴重MPSI患者。這種TAG終止密碼子三聯(lián)體允許進行氨基糖苷介導的翻譯通讀，其用作用于化合物試驗的活性對照。W402X的通讀恢復了α-L-艾杜糖醛酸酶活性，其導致溶酶體蓄積的糖胺聚糖的活性被除去。在沒有化合物刺激的情況下，艾杜糖醛酸酶表達既無法通過Taqman檢測，也無法通過酶活性或ELISA方法檢測。以濃度響應模式試驗化合物。因此，使用384孔板中的5000個患者細胞/40uL/孔?；衔锵♂屢貉苌孕迈r制備的10mM化合物儲備溶液。最高濃度為20uM并且隨后按照1:3.16稀釋(8點稀釋，n＝4)。最終DMSO濃度低于0.5％并且試驗為對細胞存活力、生長和通讀無影響。將細胞與一種細胞培養(yǎng)基一起溫育8天，并且在第3天進行化合物交換。此后，除去細胞培養(yǎng)基并且裂解細胞(0.4M甲酸鈉、0.1％NaN3、0.9％NaCl、0.2％Triton，pH 3.5)。48小時溫育后，使用熒光4-MU艾杜糖苷(iduronide)底物(5uL 0.4mM 4甲基形基(umbelliferyl)α-L-艾杜糖苷/孔)測定細胞裂解物中恢復的α-L-艾杜糖醛酸酶活性。將巴龍霉素用作參比對照(14mM＝100％對照)。結(jié)果如下表3中所示并且表明所述化合物可以用于治療胡爾勒綜合征。
表3
n.d.:未測定