專利名稱：用于治療的三唑衍生物的制作方法
該發(fā)明涉及用于治療的三唑衍生物(特別是用于人和其他哺乳類真菌感染的治療)，其應(yīng)用方法，含有它們的制劑和它們的生產(chǎn)方法。
許多三唑類抗真菌化合物是已知的。例如歐洲專利申請0440372，實施例7，披露了(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-丁-2-醇(也稱為voriconazole)在臨床上對重要的曲霉種屬真菌有特別好的抗菌活性。然而，該化合物水溶性低，必需應(yīng)用復(fù)合劑以達到滿意的水溶性制劑，如靜脈制劑。在歐洲專利申請0440372中建議與環(huán)狀糊精衍生物一起制成復(fù)方以提高溶解性，然而，人們總是期望減少配方的成分數(shù)以便減少病人可能產(chǎn)生的副反應(yīng)。
英國專利申請2,128,193披露了磷酸酯可用于植物的殺真菌劑和殺蟲劑。
目前已經(jīng)發(fā)現(xiàn)包含叔羥基類型的三唑抗真菌化合物，包括(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑基)-丁-2-醇，可以轉(zhuǎn)成溶解性有很大提高的前藥，其在體內(nèi)很容易轉(zhuǎn)變成具有期望的活性部分。
本發(fā)明提供了式Ⅰ的化合物或其藥用鹽，其中R1表示包含叔羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分。
R1-OP(O)(OH)2Ⅰ本發(fā)明的化合物可與先前的技術(shù)區(qū)分開，因為該類型的三唑抗真菌化合物中的叔羥基其自身預(yù)先沒被功能化。
可提到的藥用鹽包括磷酸基團的堿金屬鹽，例如二鈉或二鉀鹽，與胺相反離子成的鹽，如乙二胺，甘氨酸或膽堿鹽。
R1優(yōu)選是式Ⅰa的基團，
其中R2表示被一或多個鹵素取代的苯基，R3表示H或甲基，R3a表示H或與R3一起表示=CH2，R4表示一個5或6元的含氮雜環(huán)，該雜環(huán)可以被一或多個如下基團選擇取代鹵素，=O，苯基[可以被CN和(C6H4)-OCH2CF2CHF2選擇取代]或CH=CH-(C6H4)-OCH2CF2CHF2；或被一或多個鹵素和甲基吡唑基取代的苯基。
當R1代表如上所述式Ⅰa時，R2優(yōu)選是2,4-二氟苯基，R3優(yōu)選是H或甲基。
R4代表的含氮雜環(huán)包括三唑基，嘧啶基，和噻唑基。
R1代表的優(yōu)選具體基團包括
與上述基團(a)-(g)相對應(yīng)的三唑類抗真菌化合物是(a)D-0870(由Zeneca開發(fā)，參見歐洲專利申請042392，實施例19)；(b)氟康唑(由Pfizer銷售，參見英國專利申請2099818)；(c)歐洲專利申請0440372，實施例7，也稱為voriconazole；(d)美國專利4,952,232實施例35；(e)本申請實施例8化合物；(f)WO95/22973中化合物A，(見第29頁)，原披露在EP567982，實施例27化合物30中；(g)ER-30346(見藥物的未來，1996,21(1):20-24，四面體通訊，37卷，45，第8117-8210頁，1996和歐洲專利申請0667346，實施例88)。
本發(fā)明還提供了如上所述的式Ⅰ化合物及其藥用鹽的生產(chǎn)方法，其包括將式Ⅱ化合物磷酸化，R1OHⅡ其中R1如上所定義；如需要或必要的話可將所得化合物轉(zhuǎn)化成藥用鹽，反之亦然。
磷酸化可以按如下(1)-(3)步驟來完成(1)將式Ⅲ化合物與上述定義的式Ⅱ化合物反應(yīng)，RaRbN-P(ORc)(ORd)Ⅲ其中Ra和Rb分別代表C1-6烷基，苯基或取代的苯基，或與和它們相連的氮原子一起表示一個環(huán)，如嗎啉環(huán)；Rc和Rd分別代表羥基保護基團；從而得到式Ⅳ的亞磷酸鹽化合物，R1-O-P(ORc)(ORd)Ⅳ
其中R1,Rc和Rd如上定義。
該反應(yīng)可以在室溫或室溫以上，在弱酸(例如四唑，5-甲基四唑或吡啶鎓氫溴酸鹽)和選擇性的4-二甲基氨基吡啶存在下，于對反應(yīng)無副作用的溶劑(如二氯甲烷)中進行。
(2)將所得到的式Ⅳ亞磷酸鹽與氧化劑(如過酸類，如3-氯過氧苯甲酸，或過氧化氫)反應(yīng)得到式Ⅴ磷酸鹽，R1-OP(ORc)(ORd)Ⅴ其中R1,Rc和Rd如上定義。該反應(yīng)可以在低于室溫(如0-20℃)，于對反應(yīng)無副作用的溶劑(例如二氯甲烷或乙酸乙酯)中進行。
(3)除去式Ⅴ化合物中羥基保護基團，得到如上定義的式Ⅰ化合物。
作為步驟(1)的替換，式Ⅳ亞磷酸鹽也可以按照步驟(1A)和(1B)來制備(1A)將上述定義的式Ⅱ化合物在堿性存在下與PCl3反應(yīng)，得到以式Ⅵ表示的假定中間產(chǎn)物，R1-O-PCl2Ⅵ其中R1如上定義。該反應(yīng)可以在-20至+20℃溫度范圍內(nèi)(如0℃)，于對反應(yīng)無副作用的溶劑(例如二氯甲烷或乙酸乙酯)中進行。適宜的堿包括吡啶和N-甲基咪唑。
(1B)將式Ⅵ化合物與RcOH和/或RdOH(其中Rc和Rd如上定義)反應(yīng)，得到如上定義的式Ⅳ化合物。該反應(yīng)在室溫左右下進行，不需要將式Ⅵ化合物分離。
羥基保護基團Rc和Rd可以代表由一或多個鹵素選擇取代的芐基(例如2,6-二氯芐基或2-氯-6-氟芐基)，或C1-6烷基，如叔-丁基。芐基可以通過催化氫化而除去(例如Pearlman′s催化劑或鈀碳)或用溴三甲基甲硅烷而除去。C1-6烷基可以通過水解作用而除去。
當Rc和Rd代表芐基或取代芐基時，如果步驟(3)是在有乙酸鈉或氫氧化鈉存在時進行，則二鈉鹽可直接得到。
式Ⅱ和Ⅲ化合物均為已知的或可通過已知的技術(shù)而得到。
很明顯，對本領(lǐng)域技術(shù)人員講在合成本發(fā)明化合物時敏感官能團需保護和脫保護。這可以通過方便的技術(shù)而完成，例如T W Greene和P G MWuts,John Wiley和Sons Inc,1991，在有機合成的保護基團中所描述的。
本發(fā)明化合物是有用的，因為它們在包括人類的動物中具有藥理活性。特別是該化合物在治療或預(yù)防真菌感染方面有用。例如它們可用于人類局部真菌感染的治療，感染的微生物包括念珠菌屬，毛癬菌屬，小孢子菌屬，或表皮癬菌屬，或者用于白色念珠菌引起的粘膜感染(如鵝口瘡，和陰道念珠菌病)。它們也可用于由念珠菌屬(如白色念珠菌)，新型隱球菌，黃曲霉，煙曲霉，球孢子菌屬，巴西芽生菌，組織胞漿菌或芽生菌等引起的全身真菌感染的治療。
因此，本發(fā)明另一方面還提供了治療或預(yù)防真菌感染的方法，其包括給予患者治療有效量的本發(fā)明化合物。本發(fā)明還提供了本發(fā)明化合物作為藥物的用途及用于制備用于治療或預(yù)防真菌感染的藥物的用途。
本發(fā)明化合物體外抗真菌活性的評估可以通過測定其最小抑菌濃度(m.i.c)來完成，m.i.c指在適宜的介質(zhì)中，使某特定微生物出現(xiàn)不能生長時的受試化合物的濃度。實際操作如下準備一套摻有不同濃度的待測化合物的瓊脂盤，在標準培養(yǎng)條件下接種，如，白色念珠菌，每個盤在37℃孵育48小時，然后檢查盤中真菌是否生長，并得到m.i.c.值。用于該試驗的其他微生物可包括煙曲霉，毛癬菌屬，小孢子菌屬，絮狀表皮癬菌，粗球孢子菌和光滑的球擬酵母菌。
本發(fā)明一些化合物可能在體外測試中無活性，但在體內(nèi)卻有活性。
本發(fā)明化合物的體內(nèi)評估可以通過給接種了如白色念珠菌或煙曲菌的小鼠腹腔或靜脈注射，或口服一系列劑量的本發(fā)明化合物而進行。藥物活性基于非治療組的小鼠死亡而治療組小鼠幸免。藥物劑量包括50％抗感染致死量(PD50)。對曲菌種屬感染模型，一設(shè)定劑量的感染治愈的小鼠數(shù)目是對藥物活性的進一步評估。
在人用方面，本發(fā)明化合物可單獨服用，但通常是與藥物可接收的載體混合而服用，載體的選擇依據(jù)設(shè)計的給藥途徑和標準的藥物實踐。例如口服給藥可以用含有淀粉或乳糖等賦型劑的片劑劑型，或單獨或與賦型劑混和的膠囊或卵圓囊劑型，或酏劑，溶液或含有調(diào)味劑或著色劑的懸浮劑劑型。它們還可以非腸道注射給藥，例如靜脈，肌內(nèi)，皮下。對于非腸道給藥方式，最好是應(yīng)用無菌水溶液劑型，其可含其它物質(zhì)，如足夠的鹽或葡萄糖以使其與血液等滲。
人類患者在口服或非腸道給藥時，本發(fā)明化合物的日劑量為0.01-20mg/kg(單劑量或分開的劑量)。因此，本發(fā)明片劑或膠囊將含有5mg-0.5g活性化合物，按需要每次服一或二或多粒。實際上，醫(yī)生將根據(jù)病人的年齡，體重及個別病人的反應(yīng)來制定實際用藥劑量，以便最適于個體病人。上述劑量是一種平均情況，當然，也會有個別要用更高或更低的劑量，這些劑量也包括在該發(fā)明的范圍內(nèi)。
另外，該發(fā)明化合物還可以栓劑或陰道藥栓的方式給藥，或以洗劑，溶液，霜劑的方式局部給藥(例如含有聚乙二醇或液體石蠟的水性乳膠)；或以1-10％的濃度摻入到含有白蠟或白色軟石蠟基質(zhì)(必要時可加穩(wěn)定劑和防腐劑)的軟膏中。
因此，本發(fā)明另一方面還提供了藥物制劑，其包括將優(yōu)選低于50重量％的本發(fā)明化合物與藥物可接受的佐劑，稀釋劑或載體混合。特別有意義的是靜脈給藥的水性制劑。
本發(fā)明通過如下實施例說明。
實施例12-(2,4-二氟苯基)-1,3-雙(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙基磷酸二氫酯(a)2-(2,4-二氟苯基)-1,3-雙(1H-1,2,4-三唑基-1-基)-2-丙基磷酸二芐基酯方法A
將2-(2,4-二氟苯基)-1,3-雙(1H-1,2,4-三唑基)丙-2-醇(也稱為氟康唑，10.0g,32.6mmol),1H-四唑(6.85g,97.8mmol)，二芐基二異丙基氨基磷酸酯(22.55g,65.2mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液在室溫于氮氣氛中攪拌2小時。然后，冷卻混合物至0℃，維持0℃，加入3-氯過氧苯甲酸(13.5g,50-55％w/w,39.1mmol)的二氯甲烷(50ml)溶液。將反應(yīng)混合物溫熱至室溫1小時，之后用焦亞硫酸鈉和碳酸氫鈉水溶液洗，然后用MgSO4干燥，除去溶劑，用甲基異丁基酮(37ml)和叔丁基甲基醚(74ml)取代，在-10℃成粒1小時后，過濾，用冰冷的甲基異丁基酮和叔丁基甲基醚(1∶3,15ml)洗滌，然后在50℃真空條件下干燥18小時，得到小標題化合物(16.05g,87％),m.p.93℃。
實測值C,57.12；H,4.46；N,14.85.C27H25F2N6O4P理論值C,57.24；H,4.46；N,14.84％。
m/z567(MH+)1H NMR(300MHz,CDCl3)δ=4.90(d,2H),4.95(d,2H),5.05(d,2H),5.19(d,2H),6.58-6.73(m,2H),6.88-6.95(m,1H),7.20-7.30(m,4H),7.32-7.38(m,6H),7.80(s,2H),8.36(s,2H)方法B
將步驟(a)得到的化合物的漿狀物(9.80g,17.3mmol),5％鈀碳催化劑(50％濕度，1.0g)和氫氧化鈉(1.38g,34.6mmol)的水溶液(26ml)在室溫，414kPa(60p.s.i.)的條件下氫化20個小時。溶液經(jīng)硅藻土墊(商標名)過濾并用水(5ml)洗滌。分出甲苯相，水相加入硫酸(1.70g,17.3mmol)并冷卻到0℃。所得漿狀物于0℃成粒1小時。然后過濾，用水(2×5ml)洗滌，之后在50℃真空條件下干燥，得到標題化合物(5.80g,87％),m..p.223-224℃。
實測值C,40.28；H,3.39；N,21.63.C13H13F2N6O4P理論值C,40.43；H,3.39；N,21.76％。
1H NMR(300MHz,DMSO)δ=5.07(d,2H)5.24(d,2H),6.77-6.83(m,1H),7.00-7.18(m,2H),7.75(s,2H),8.53(s,2H)實施例22-(2,4-二氟苯基)-1,3-雙(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙基磷酸二鈉
實施例1(a)的化合物(10.0g,17.7mmol)和乙酸鈉(2.90g,35.3mmol)的乙醇(160ml)和水(20ml)溶液在室溫，345kPa(50p.s.i.)，在有Pearlman催化劑存在的條件下氫化16個小時。反應(yīng)液經(jīng)硅藻土墊(商標名)過濾，減壓除去溶劑得到粘稠的糖漿狀物。借助超聲將該糖漿狀物溶于乙醇(100ml)然后溫熱至回流，所得溶液緩慢冷卻然后于室溫成粒1小時，過濾產(chǎn)物，用乙醇(10ml)洗滌，在50℃真空條件下干燥，得到標題化合物(4.48g,59％),m..p.160-162℃。
1H NMR(300MHz,D2O)δ=5.01(d,2H),5.40(d,2H),6.60(m,1H),6.79(m,1H),7.11(m,1H),7.63(s,2H),8.68(s,2H)實施例3(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸二氫酯(a)(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸二芐基酯
(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丁-2-醇(歐洲專利0440372，實施例7化合物，也稱為voriconazole,17.0g,48.7mmol),4-二甲基氨基吡啶(10.2g,83.5mmol),1H-四唑(10.2g,146mmol)，二芐基二異丙基氨基磷酸酯(33.6g,97.4mmol)的二氮甲烷(100ml)攪拌回流2小時，然后繼續(xù)在室溫氮氣氛下反應(yīng)16小時。反應(yīng)混合物經(jīng)鹽酸，再經(jīng)碳酸氫鈉洗滌，之后干燥(MgSO4)，濃縮。粗產(chǎn)物亞磷酸鹽用層析柱(硅膠300g，用3∶1至1∶1的己烷∶乙酸乙酯梯度洗脫)純化，得到淺黃色的油狀物。將其溶解于二氯甲烷(100ml)中并冷卻至-10℃，之后在保持0℃以下加入3-氯過氧苯甲酸(14.8g,57％w/w,48.9mmol)的二氯甲烷溶液(100ml)，然后溫熱至室溫10分鐘，用焦亞硫酸氫鈉和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，濃縮，粗產(chǎn)物經(jīng)柱層析(硅膠，300g，用乙酸乙酯洗脫)純化，得到粘糖漿狀的小標題化合物(17.86g,60％)。
m/z610(MH+)1H NMR(300MHz,CDCl3)δ=1.39(d,3H),4.41(q,1H),4.79(d,2H),4.96(d,2H),5.34(d,1H),5.40(d,1H),6.59-6.66(m,1H),6.72-6.82(m,1H),7.02-7.18(m,3H),7.23-7.37(m,8H),7.79(s,1H),8.46(d,1H),8.52(s,1H),8.90(d,1H)(b)(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸二氫酯
步驟(a)的化合物(5.0g,8.83mmol)的甲醇(100ml)溶液在室溫，414kPa(60p.s.i.)，在Pearlmam催化劑(1.0g)上氫化16小時。反應(yīng)液經(jīng)celite墊(商標名)過濾，濃縮，再將粗產(chǎn)物溶于熱的甲醇(20ml)中，于0℃成粒1小時，過濾，并用甲醇(5ml)洗滌，50℃真空干燥，得到標題化合物(1.72g,49％),m.p.145-146℃。
1H NMR(300MHz,DMSO)δ=1.31(d,3H),4.01(q,1H),5.31(d,1H),5.42(d,1H),6.90-6.97(m,1H),7.04-7.14(m,1H),7.20-7.30(m,1H),7.95(s,1H),8.70(d,1H),8.73(s,1H),8.89(d,1H)實施例4(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑基)-2-丁基二氫磷酸酯(另一種制備方法)(a)(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸雙(2-氯-6-氟芐基)酯
將(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丁-2-醇(歐洲專利0440372，實施例7化合物，也稱為voriconazole,10.0g,28.6mmol)和1-甲基咪唑(9.40g,114mmol)的二氯甲烷(30ml)溶液冷卻到0℃，并在低于10℃的條件下加入三氯化磷(4.73g,34.4mmol)的二氯甲烷(20ml)溶液。15分鐘后，在0-10℃下，加入2-氯-6-氟芐基乙醇(12.0g,74.4mmol)的二氯甲烷(40ml)溶液，再過30分鐘，用冷卻的方法維持溫度在20℃以下，加入過氧化氫(25ml,30％水溶液)，1小時后，反應(yīng)混合物被分離，有機相用水(2×100ml)洗，干燥(MgSO4)，濃縮。粘稠的油狀產(chǎn)物用叔丁基甲基醚(60ml)在0℃成粒2個小時，過濾，用叔丁基甲基醚(20ml)洗滌，在50℃真空干燥18小時，得到白色結(jié)晶狀小標題化合物(18.1g,88％產(chǎn)率)，m.p.140-141℃。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ=1.39(d,3H),4.33(q,1H),5.08(d,1H),5.13(d,1H),5.27(d,1H),5.31(d,1H),5.32(d,1H),5.42(d,1H),6.60-6.75(m,2H),6.92-7.07(m,2H),7.11-7.37(m,5H),7.81(s,1H),8.44((d,1H),8.61(s,1H),8.91(s,1H)(b)(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸二氫酯
步驟(a)產(chǎn)物(50g,70mmol)，氫氧化鈉(8.40g,210mmol)和5％鈀碳催化劑(10g)的甲苯(450ml)和水(150ml)混合物在室溫和414kPa(60p.s.i.)條件下氫化24小時。反應(yīng)混合物經(jīng)celite(商標名稱)過濾，甲苯層被分離棄去，水相用二氯甲烷(2×75ml)和甲苯(2×75ml)洗，然后冷卻至0℃，再加入硫酸(10.3g,105mmol)，0℃成粒1小時后，過濾，用水(60ml)洗滌，50℃真空干燥16個小時得到標題化合物(20.5g,68％)，質(zhì)子NMR數(shù)據(jù)與實施例3(b)得到的數(shù)據(jù)一致。
實測值C,44.48；H,3.45；N,16.19.C16H15F3N5O4P理論值C,44.77；H,3.52；N,16.31％。
實施例5
(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基(2-羥乙基)三甲基銨磷酸氫鹽的二水化物
往攪拌的實施例3(b)產(chǎn)物(214.7g,500ml)的丙酮(2070ml)漿狀物中在至少10分鐘內(nèi)加入碳酸氫膽堿(75％w/w在水中，110g,500ml)溶液，漿狀物溫熱至回流20分鐘，經(jīng)celite墊(商標名)過濾，除去不溶物，冷卻至20℃然后成粒1小時，過濾收集所得產(chǎn)物，用丙酮(2×250ml)洗，20℃真空干燥18個小時，得到標題化合物(233.3g,74％)m.p.114-115℃。
1H NMR(300MHz,DMSO)δ=1.23(d,3H),3.07(s,9H),3.38(t,2H),3.60(q,1H),3.78(q,2H),5.50(s,2H),6.72-6.80(m,1H),6.94-7.02(m,1H),7.36-7.42(m,1H),7.82(s,1H),8.59(d,1H),8.78(d,1H),9.35(s,1H)實施例62-(2,4-二氟苯基)-1-{3-[(E)-4-(2,2,3,3-四氟丙氧基)苯乙烯基]-1H-1,2,4-三唑-1-基}-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙基磷酸二氫酯(a)2-(2,4-二氟苯基)-1-{3-[(E)-4-(2,2,3,3-四氟丙氧基)苯乙烯基]-1H-1,2,4-三唑-1-基}-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙基磷酸二芐基酯
將2-(2,4-二氟苯基)-1-{3-[(E)-4-(2,2,3,3-四氟丙氧基)苯乙烯基]-1H-1,2,4-三唑-1-基}-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丙-2-醇(歐洲專利0472392，實施例19的消旋化合物，475mg,0.88mmol),1H-四唑(185mg,2.64mmol)和二芐基二異丙基氨基磷酸酯(607mg,1.76mmol)在室溫氮氣氛下于二氯甲烷中攪拌20小時，然后將混合物冷卻至0℃，保持溫度在20℃以下滴加過氧化氫(1.0ml,30％的水溶液)，在20℃攪拌30分鐘后分離有機相，用水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)溶劑。得到的灰黃色油狀物經(jīng)柱層析(硅膠，洗脫液為乙酸乙酯/己烷)純化，得到粘稠的糖漿狀的小標題化合物(595mg,84％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ=4.37(t,2H),4.91(d,2H),4.97(d,2H),5.02(d,1H),5.07(d,1H),5.16(d,1H),5.18(d,1H),6.05(tt,1H),6.59-6.78(m,2H),6.82(d,1H),6.90(d,2H),6.91-7.00(m,1H),7.21-7.38(m,10H),7.42(d,1H),7.79(s,1H),8.82(s,1H),8.39(s,1H)(b)2-(2,4-二氟苯基)-1-{3-[(E)-4-(2,2,3,3-四氟丙氧基)苯乙烯基]-1H-1,2,4-三唑-1-基}-3-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙基磷酸二氫酯
將步驟(a)產(chǎn)物(298mg,0.37mmol)的二氯甲烷溶液(5ml)冷卻至0℃，然后用溴三甲基甲硅烷(254mg,1.66mmol)和吡啶(180mg,3.10mmol)處理。反應(yīng)混合物在0℃攪拌3個小時，之后用含有氫氧化鈉(96mg,2.41mmol)的水溶液(1ml)終止反應(yīng)，混合物再用稀硫酸酸化，用乙酸乙酯萃取產(chǎn)物，用飽和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)乙酸乙酯相，蒸發(fā)除去乙酸乙酯，得到淺黃色泡沫狀的標題化合物(202mg,88％)。
實施例7(2RS,3RS)-3-(4-[4-氰基苯基]噻唑-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸二氫酯(a)(2RS,3RS)-3-(4-[4-氰基苯基]噻唑-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸二芐基酯
3-(4-[4-氰基苯基]噻唑-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)丁-2-醇(歐洲專利0667336，實施例88,900mg,2.06mmol),1H-四唑(432mg,6.18mmol),4-二甲基氨基吡啶(100mg,0.28mmol)和二芐基二異丙基氨基磷酸酯(1.42g,4.12mmol)在氮氣氛中，在二氯甲烷(10ml)中回流20個小時，冷卻混合物至0℃，然后控制溫度在20℃以下，滴加過氧化氫(2.5ml,30％水溶液)，在20℃攪拌30分鐘，分離有機相，用水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)除去溶劑，得到的淺黃色油狀物經(jīng)柱層析(硅膠，洗脫液為乙酸乙酯/己烷)純化，得到粘稠的糖漿狀亞標題化合物(732mg,51％)。
1H NMR(300MHz,CDCl3)δ=1.40(d,3H),4.38(q,1H),4.81-4.96(m,4H),5.40(d,1H),5.43(d,1H),6.62-6.71(m,1H),6.74-6.82(m,1H),7.15-7.31(m,10H),7.58(s,1H),7.62(d,2H),7.73(s,1H),7.97(d,2H),8.48(s,1H)(b)(2RS,3RS)-3-(4-[4-氰基苯基]噻唑-2-基)-2-(2,4-二氟苯基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸二氫酯
將步驟(a)產(chǎn)物(310mg,0.44mmol)的二氯甲烷溶液(5ml)冷卻至0℃，然后用溴三甲基甲硅烷(303mg,1.98mmol)和吡啶(215mg,3.70mmol)處理，所得混合物在0℃攪拌3個小時，之后用含有氫氧化鈉(115mg,2.78mmol)的水溶液(1ml)終止反應(yīng)，得到黃色沉淀，過濾分離，再在稀硫酸和二氯甲烷兩相中重分配，有機相用飽和鹽水洗滌，干燥(MgSO4)，蒸發(fā)除去溶劑，得到淺黃色固體狀的標題化合物(80mg,35％)。
1H NMR(300MHz,DMSO)δ=1.38(d,3H),4.22(q,1H),5.37(d,1H),5.41(d,1H),6.88-6.97(m,1H),7.09-7.19(m,1H),7.31-7.40(m,1H),7.80(s,1H),7.87(d,2H),8.05(d,2H),8.32(s,1H),8.65(s,1H)
實施例8(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-[4-(1-甲基吡唑-5-基)苯基]-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸二鈉(a)O,N-二甲基-4-碘苯基異羥肟酸在0℃，將吡啶(104g,1.32mol)的二氯甲烷(150ml)溶液滴加到4-碘苯甲酰氯(251g,.94mol)和N,O-二甲基羥胺鹽酸鹽(97g,0.94mol)的二氯甲烷(850ml)混懸液中，將混合物溫熱至室溫，攪拌18個小時，減壓蒸發(fā)溶劑，殘留物溶于乙酸乙酯(1L)中，然后用稀鹽酸(2N,3×400ml)，和飽和碳酸氫鈉溶液(300ml)洗，干燥(Na2SO4)，減壓蒸發(fā)有機溶劑，殘留物經(jīng)蒸餾純化得到黃色油狀的亞標題化合物(241g,93％),b.p.130℃(0.1mm Hg)，并用1H NMR鑒定。
(b)2-(2,4-二氟芐基)-1-(4-碘苯基)乙基酮將2,4-二氟芐基溴(23.7ml,0.114mol)，在氮氣氛中，滴加到混有鎂屑的無水乙醚(300ml)的攪拌混合物中。在反應(yīng)開始之前，將該混合物溫熱，加溴化物的速度控制在反應(yīng)物能溫和地回流，一小時后，在-78℃，將這個反應(yīng)得到的Grignard試劑滴加到O,N-二甲基-4-碘苯基異羥肟酸[見步驟(a)](45.7g,0.157mol)的無水乙醚(300ml)溶液中，將混合物緩慢加熱至室溫，過夜，令混合物在飽和的氯化銨水溶液和乙酸乙酯之間分配，分離有機相，干燥(MgSO4)，減壓濃縮，得到白色固體狀的標題化合物38.71g(69％)，并用1H NMR波譜鑒定。
(c)2-(2,4-二氟苯基)-1-(4-碘苯基)丙-2-烯酮在室溫，將雙二甲基氨基甲烷(8.78ml,0.075mol)滴加到2-(2,4-二氟苯基)-1-(4-碘苯基)乙基酮[17.73g,0.04595mol，步驟(b)產(chǎn)物]的乙酸酐(23..1ml,0.248mol)攪拌懸浮液中。這是一個放熱反應(yīng)，混合物溫度可升到60℃。滴加完畢，在室溫繼續(xù)攪拌35分鐘，然后加入冰水以水解多余的乙酸酐，30分鐘后，用乙酸乙酯萃取產(chǎn)物，再依次用稀鹽酸，飽和碳酸氫鈉水溶液洗滌，干燥(MgSO4)，減壓濃縮，得到白色固體狀的標題化合物(17.03g,93％)，并用1H NMR波譜鑒定。
(d)2-(2,4-二氟苯基)-1-(4-碘苯甲酰基)環(huán)氧己烷在室溫，將氫氧化芐基三甲基銨(3.44ml,40％的水溶液，8.2mmol)一次加入2-(2,4-二氟苯基)-1-(4-碘苯基)-丙-2-烯酮[37.3g,100.8mmol，步驟(c)產(chǎn)物]和叔丁基過氧化氫(36.6ml,3M的三甲基戊烷溶液，109mmol)的甲苯(550ml)溶液中，2小時后，用水(2×500ml)洗，干燥(MgSO4)，減壓濃縮，得到白色固體狀的標題化合物(37.46g,96％)，并用1H NMR波譜鑒定。
(e)(2,4-二氟苯基)-2-[1-(4-碘苯基)乙烯基]環(huán)氧己烷在-70℃，氮氣下，至少用10分鐘將正-丁基鋰(50ml,2.5M的己烷溶液，125mmol)溶液滴加入溴化甲基三苯基膦(45.0g,126mmol)的無水THF(600ml)攪拌溶液中，將混合物溫熱至-20℃，至少20分鐘，然后至少用5分鐘，將2-(2,4-二氟苯基)-1-(4-碘苯甲酰基)環(huán)氧己烷[37.46g,97mmol,步驟(d)產(chǎn)物]的無水THF(200ml)溶液加入，混合物溫至室溫，攪拌84個小時，再加入10％的氯化銨水溶液(500ml)，減壓濃縮，用乙酸乙酯萃取，合并萃取液，干燥(MgSO4)，減壓濃縮，用煮沸的已烷(3×500ml)處理固體殘余物，棄去殘余固體，合并己烷溶液，用短的硅膠墊過濾，減壓濃縮，得到黃色油狀的標題化合物(34.3g,92％)，并用1H NMR波譜鑒定。
(f)2-(2,4-二苯基)-3-(4-碘苯基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-3-丁-2-醇在70℃，氮氣下，將1,2,4-三唑鈉(12.15g,133mmol)加到(2,4-二氟苯基)-2-[1-(4-碘苯基)乙烯基]環(huán)氧已烷[34.3g,89mmol，步驟(e)產(chǎn)物]的無水DMF(350ml)溶液中，混合物攪拌5個小時，冷卻，減壓除去溶劑，將殘留物在乙醚(800ml)和水(2×500ml)之間分配，分離有機相，干燥(MgSO4)，過濾，加入硅膠(60-200μ,75g)，減壓除去乙醚，用硅膠柱(40-60μ,300g)處理殘留固狀物，用已烷和增加的乙酸乙酯(0-75％)洗脫產(chǎn)物，得到白色泡沫狀產(chǎn)物(23.8g,61％)，并用1H NMR波譜鑒定。
(g)(R)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(4-碘苯基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-3-丁基-2-醇(+)-3-溴樟腦-10-磺酸鹽將(+)-3-溴樟腦-10-磺酸(36.3g,0.110mol)的IMS(40ml)溶液加入步驟(f)產(chǎn)物(50g,0.110mol)的IMS(300ml)溶液中，放入晶種后，在室溫放置20個小時使?jié){狀物成粒，再在低溫條件下成粒1小時，過濾收集白色固體(22g,0.03mol)。用ChiralcelTMOD柱進行手征性HPLC處理，手征性純度可達到95％ee，用乙醇/己烷(40∶60)洗脫。
(h)(R)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(4-碘苯基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-3-丁-2-醇將步驟(g)產(chǎn)物(206.5g,0.27mols)加到二氯甲烷(620ml)中，然后用40％的NaOH堿化，混合物在室溫攪拌15分鐘，分層，用二氯甲烷(310ml)萃取水相，用水(620ml)洗滌有機相，將體積濃縮到245ml，在室溫以恒速將己烷(2450ml)加到攪拌的且種入晶種的濃縮物中，所得漿狀物于5℃成粒1小時后，過濾得到白色固體(117.4g,0.26mols)，并用1H NMR波譜鑒定。
(i)(2R)-2-(2,4-二氟苯基)-3-[4-(1-甲基吡唑-5-基)苯基]-1-(1,2,4-三唑-l-基)-3-丁基-2-醇在-70℃，將正BuLi(1.6N,24.1ml,0.04mols)加到1-甲基吡唑(3.28g,0.04mols)的THF(370ml)溶液中，維持溫度在-60℃以下，攪拌30分鐘，在低于-40℃的條件下，加入氯化鋅(0.5N,77.1ml,0.04mols)溶液，然后用四(三苯基膦)鈀(15％w/w,0.9g)處理，仍在低于-40℃的條件下，以恒速加入步驟(h)產(chǎn)物(6g,0.013mols)的THF(36ml)溶液，溫熱反應(yīng)物至室溫，回流2小時，再冷卻至室溫，用乙酸(12ml)和水(120ml)終止反應(yīng)，保持溫度在25℃以下，減壓蒸發(fā)除去THF，用二氯甲烷(120ml)萃取產(chǎn)物，用二氯甲烷(50ml)進一步提取水相，合并有機萃取液，用水(2×120ml)洗，濃縮得到油狀物，往油狀物的乙酸乙酯(100ml)攪拌且過濾溶液中加入5-磺基水楊酸(3.3g,0.13mols)的IPA(10ml)溶液，室溫攪拌30分鐘，過濾收集固體產(chǎn)物，再將其置于乙酸乙酯(50ml)中，用IPA(60ml)重結(jié)晶，得到白色固體(7.2g,0.01mols)。將該固體加入二氯甲烷(35ml)和水中然后用40％NaOH堿化，室溫攪拌15分鐘，分層，水相用二氯甲烷(25ml)再萃取，合并有機相，用水(35ml)洗，有機相被濃縮，得到泡沫狀物，鑒定。D=-25.6°C22H19F2N5O.0.5 H2O理論值C,63.45；H,4.84；N,16.82。實測值C,63.92；H,4.86；N,16.64。
(j)(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-[4-(1-甲基吡唑-5-基)苯基]-1-(1,2,4-三唑-1-基)丁-2-醇
在50℃,50psi(333KPa)大氣壓條件下，在5％鈀碳存在下，將步驟(i)產(chǎn)物(2.0g,5mmol)的乙醇溶液(50ml)氫化18個小時，再投一次催化劑(0.2g)，繼續(xù)氫化18個時，用ArbocelTM過濾，濾液減壓蒸發(fā)，對殘留物進行硅膠柱層析，用乙酸乙酯/己烷/二乙胺(0∶95∶5→65∶33∶2)梯度洗脫，合并含有期望產(chǎn)物的組分，減壓蒸發(fā)，溶殘留物于乙酸乙酯中，然后再蒸發(fā)，反復(fù)三次，用乙醚同樣處理三次，得到無色固體，將該固體用含水乙醇重結(jié)晶，得到無色固狀的亞標題化合物(1.25g,62％),m.p.144-145℃,[α]D=-107°(c=0.1％,CH2Cl2,25℃)。
元素分析(％)實測值C,64.26；H,5.13；N,17.07C22H21F2N5O理論值C,64.54；H,5.17；N,17.10[該化合物也披露在共同未決的國際專利申請PCT/EP96/02470實施例67中]。
(k)(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-[4-(1-甲基吡唑-5-基)苯基]-1-(1,2,4-三唑-1-基)丁基磷酸二芐基酯
將步驟j)的產(chǎn)物(2.0g,4.4mmol)，二芐基二異丙基氨基磷酸酯(2.28g，6.6mmol)，四唑(0.92g,13.2mmol)和4-二甲基氨基吡啶(50mg)的二氯甲烷(30ml)溶液加熱回流13個小時，冷卻至0℃，加入間-氯過苯甲酸(1.52g,8.8mmol)，攪拌1小時，然后溫熱至室溫，用亞硫酸鈉水溶液(10％,30ml)，飽和碳酸氫鈉水溶液(30ml)和鹽水(30ml)依次洗滌，用(Na2SO4)干燥有機相，真空蒸發(fā)溶劑，得到油狀物。再用柱層析(硅膠，45g，洗脫液為從甲苯到3.5％二乙胺的甲苯溶液的梯度液)純化，得到無色油狀的所需產(chǎn)物(0.8g,27％),m/z671(M++1)。1H N.M.R.(CDCl3)δ=1.3(d,3H),3.8(s,3H),3.85(q,1H),4.8(m,2H),4.9(m,2H),5.2(s,2H),6.25(s,1H),6.6(m,1H),6.8(m,1H),7.05(m,1H),7.15(m,2H),7.2-7.35(m,12H),7.5(s,1H)；7.8(s,1H)；8.23(s,1H)。
(l)(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-[4-(1-甲基吡唑-5-基)苯基]-1-(1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸二鈉
在室溫，333Kpa(50p.s.i.)的條件下，將步驟(k)產(chǎn)物(0.5g,0.75mmol)和乙酸鈉(0.14g,1.65mmol)的乙醇(20ml)懸浮液在5％鈀碳(75mg)上氫化24小時，Tlc分析顯示反應(yīng)不完全，用濾器助墊(Arbacel，商標名)濾除催化劑，然后加入Pearlman催化劑(75mg)，繼續(xù)進行氫化反應(yīng)72個小時，用Arbacel墊濾除催化劑，真空除去溶劑，用二氯甲烷(20ml)溶解殘留物，濾器助墊(Hiflow，商品名)過濾以除去多余的乙酸鈉，真空蒸發(fā)溶劑，經(jīng)乙醚研磨后，得到白色固狀的標題化合物(0.250g,68％)。實測值C,46.66；H,4.87,N,11.82:C22H22F2N5Na2O4P.0.09 Et2O理論值C,46.62；H,4.36；N,12.16％。1H N.M.R.(DMSO)δ=1.2(d,3H),3.75(q,1H),3.8(s,3H),5.1,5.5(AB系統(tǒng)，2H),6.3(s,1H),6.6(m,1H),6.9(m,1H),7.2,7.4(AB系統(tǒng)，4H),7.4(m,3H),7.45(m,1H),7.6(s,1H)；9.1(s,1H)。
實施例9實施例1,3和8的化合物(其本身或其二鈉鹽)的水溶性與其相應(yīng)母體化合物(非磷酸化，游離堿型式)的水溶性的比較，結(jié)果見下表。
實施例10靜脈注射的水溶性制劑
*用足量的5M鹽酸調(diào)整終溶液的pH范圍在8.5-9.5。
權(quán)利要求
1．式Ⅰ化合物或其藥用鹽，R1-OP(O)(OH)2其中R1表示包含叔羥基類型的三唑抗真菌化合物的非羥基部分。
2．權(quán)利要求1要求的化合物，其中R1是式Ⅰa基團，
其中R2表示被一或多個鹵素取代的苯基；R3表示H或甲基；R3a表示H或與R3一起表示=CH2，且R4表示5或6元的含氮雜環(huán)，其可以被一或多個如下基團選擇取代鹵素，=O，苯基[可以被CN和(C6H4)-OCH2CF2CHF2選擇取代]或CH=CH-(C6H4)-OCH2CF2CHF2，或被一或多個選自鹵素和甲基吡唑基的基團取代的苯基。
3．權(quán)利要求2要求的化合物，其中R2為2,4-二氟苯基。
4．權(quán)利要求2或3要求的化合物，其中R3為H或甲基。
5．權(quán)利要求2-4任一要求的化合物，其中R4代表或包括三唑基，嘧啶基或噻唑基。
6．上述權(quán)利要求任一要求的化合物，其為2-(2,4-二氟苯基)-1,3-雙(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丙基磷酸二氫酯；或(2R,3S)-2-(2,4-二氟苯基)-3-(5-氟-4-嘧啶基)-1-(1H-1,2,4-三唑-1-基)-2-丁基磷酸二氫酯；或它們的藥用鹽。
7．含有權(quán)利要求1定義的式Ⅰ化合物或其藥用鹽及藥物可接受的賦型劑，稀釋劑或載體的藥物制劑。
8．權(quán)利要求1定義的式Ⅰ化合物或其藥用鹽用作藥物。
9．權(quán)利要求1定義的式Ⅰ化合物或其藥用鹽用于制備用于治療或預(yù)防真菌感染的藥物。
10．治療或預(yù)防真菌感染的方法，其包括給予需治療的患者權(quán)利要求1定義的式Ⅰ化合物或其藥用鹽。
11．權(quán)利要求1定義的式為Ⅰ化合物或其藥用鹽的生產(chǎn)方法，其包括將式Ⅱ的化合物磷酸化，R1OHⅡ其中R1如權(quán)利要求1定義；并且如需要或必要的話將所得化合物轉(zhuǎn)變成其藥用鹽，反之亦然。
12．權(quán)利要求11要求的方法，其包括從式Ⅴ化合物中去除羥基保護基的步驟，R1-OP(O)(ORc)(ORd)其中R1如權(quán)利要求1定義，Rc和Rd分別代表羥基保護基團。
13．權(quán)利要求12要求的方法，其中Rc和Rd分別代表由一或多個鹵原子選擇取代的芐基。
14．如權(quán)利要求12定義的式Ⅴ化合物。
15．改善包含叔羥基類型的三唑抗真菌化合物或其藥用鹽的水溶性的方法，其包括將叔羥基轉(zhuǎn)變成磷酸鹽。
全文摘要
本發(fā)明提供了式(Ⅰ)化合物或其藥用鹽:R
文檔編號C07D403/10GK1210540SQ97192005
公開日1999年3月10日 申請日期1997年1月27日 優(yōu)先權(quán)日1996年2月2日
發(fā)明者C·W·默蒂肖, S·格林, P·T·斯特菲森 申請人:輝瑞研究開發(fā)公司