專利名稱：三孢布拉氏霉菌中胡蘿卜素的提取方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明是已知菌株三孢布拉氏霉菌中胡蘿卜素的提取方法，屬生化工程領(lǐng)域。
本發(fā)明以前，從三孢布拉氏霉菌中提取胡蘿卜素的方法，均局限于少量的實(shí)驗(yàn)室手工操作階段，用干燥的菌絲或菌絲體粉末，采用植物油或有機(jī)溶劑萃取。干燥過(guò)程對(duì)胡蘿卜素的穩(wěn)定性及產(chǎn)量有影響，同時(shí)菌絲體粉末增加固液分離的難度，無(wú)法工業(yè)化生產(chǎn)，有機(jī)溶劑的殘留無(wú)法達(dá)到國(guó)家食品添加劑的衛(wèi)生要求，更不適宜做藥品和營(yíng)養(yǎng)保健品。
本發(fā)明為克服上述缺點(diǎn)。發(fā)明了利用極性有機(jī)溶劑進(jìn)行預(yù)處理，用低沸點(diǎn)有機(jī)溶劑從三孢布拉氏霉菌中提取胡蘿卜素其目的是適合于工業(yè)化生產(chǎn)，可生產(chǎn)出大量的胡蘿卜素。
本發(fā)明的技術(shù)方案首先將未干燥的菌絲體用極性有機(jī)溶劑(甲醇、乙醇、丙酮)，按1∶1～10的重量體積比混合進(jìn)行處理，可以溶解非胡蘿卜素色素和其它油性雜質(zhì)，增加有機(jī)溶劑的滲透性，加快提取速度，還可以起到脫水作用。第二步是經(jīng)上述處理過(guò)濾收集菌絲體，用石油系有機(jī)溶劑(戊烷、己烷)以1∶1～10的重量體積比在浸提罐中40℃～70℃萃取30～60分鐘，反復(fù)進(jìn)行二次，所收到的萃取液在長(zhǎng)管蒸發(fā)器中的間接蒸汽加熱到80～100℃濃縮至終體積與菌絲體含量為1∶1。第三步將濃縮后的提取液泵入結(jié)晶罐中，加入1/5～1/2體積的無(wú)水乙醇，在0～10℃條件下結(jié)晶，攪拌速度為30～60rpm，時(shí)間為10～120小時(shí)。晶體經(jīng)抽濾收集，然后進(jìn)入第二長(zhǎng)管蒸發(fā)器，加熱溫度為90～110℃，進(jìn)一步濃縮。第四步將進(jìn)一步濃縮的母液泵入水化鍋，加入1/10體積3％的鹽溶液，加熱攪拌至70～90℃，持續(xù)10～30分鐘，靜置冷卻4～24小時(shí)，撇出上層油，將油泵入脫溶鍋中，直接通入120～140℃蒸汽，間接蒸汽3～5大氣壓，真空度-650～-700mmHg，得終產(chǎn)品油，油中殘溶≤50ppm。所得晶體用少量無(wú)水乙醇洗滌，干燥得到85～95％的胡蘿卜素晶體。
實(shí)施例20kg含水60％的菌絲體，用100升95％乙醇浸泡2小時(shí)后濾去乙醇，分兩次各加入60升正己烷，在50℃浸提1小時(shí)，收集萃取液，萃取液在長(zhǎng)管蒸發(fā)器中，間接蒸汽加熱濃縮至20升，在上述濃縮液中加入5升無(wú)水乙醇，在4℃、攪拌30rpm條件下結(jié)晶96小時(shí)，抽濾所得晶體用無(wú)水乙醇洗滌，干燥后可得400g以上85％的胡蘿卜素晶體，結(jié)晶母液進(jìn)入第二長(zhǎng)管蒸發(fā)器，間接蒸汽加熱濃縮至9升以下，泵入水化鍋加熱至70℃，加入0.9升3％NaCl溶液，攪拌20分鐘，冷卻靜置24小時(shí)，撇出上層油，泵入脫溶鍋，真空度-700mmHg，通以130℃直接蒸汽，最后可得殘留溶劑為50ppm以下的油溶品8.5升。
權(quán)利要求
1．一種從三孢布拉氏霉菌中提取胡蘿卜素的方法，其特征是材料是一種霉菌，用極性溶劑浸泡處理后，用低沸點(diǎn)石油系有機(jī)溶劑與菌絲在40～70℃分兩次靜置萃取30～60分鐘過(guò)濾分離、蒸發(fā)、濃縮、結(jié)晶、脫膠、脫溶收到胡蘿卜素晶體和油溶品。
2．按權(quán)利要求1一種從三孢布拉氏霉菌中提取胡蘿卜素的方法所述，用于處理材料的極性有機(jī)溶劑可以是甲醇、乙醇、丙酮或兩種以上的混合物，用量為霉菌體的1～10倍。用于萃取的石油系有機(jī)溶劑可以是正戊烷、正己烷或其異構(gòu)體，或兩種以上的混合物，用量為霉菌體的1～10倍。
3．按權(quán)利要求1一種從三孢布拉氏霉菌中提取胡蘿卜素的方法所述，其特征是萃取液的濃縮，使用長(zhǎng)管蒸發(fā)器，或其它類型的薄膜蒸發(fā)器，溫度為80～110℃。
4．按權(quán)利要求1一種從三孢布拉氏霉菌中提取胡蘿卜素的方法所述，其特征是，脫膠后的油溶液脫去溶劑的條件為120～140℃的直接蒸汽，3～5大氣壓的間接蒸汽，真空度為-650～-750mmHg。
全文摘要
一種從三孢布拉氏霉菌中提取胡蘿卜素的方法。所述方法是用極性有機(jī)溶劑與三孢布拉氏霉菌體積比為1～10∶1混合,去除菌絲中非胡蘿卜素的雜色素和其它膠質(zhì)。采用低沸點(diǎn)的石油系有機(jī)溶劑萃取菌中的胡蘿卜素。萃取溶劑與菌體積比為1～10∶1,溫度為40～70℃,每次為0.5～1小時(shí),萃取二次,然后過(guò)濾分離萃取液再經(jīng)長(zhǎng)管蒸發(fā)器蒸去大部分溶劑,所得混合油溶液加1/5～1/2體積的無(wú)水乙醇，在0～10℃結(jié)晶,用少量無(wú)水乙醇對(duì)晶體洗滌,收得85～95%的胡蘿卜素晶體。結(jié)晶母液經(jīng)脫膠和脫溶可收到0.1%～1%的油溶胡蘿卜素產(chǎn)品,經(jīng)配制可生產(chǎn)10～30%的胡蘿卜素懸液,可供藥物及保健品用。
文檔編號(hào)C07C403/24GK1221737SQ9710935
公開(kāi)日1999年7月7日 申請(qǐng)日期1997年12月31日 優(yōu)先權(quán)日1997年12月31日
發(fā)明者陳濤, 童驍, 宋冬林, 朱湘民, 陳宗勝, 馬國(guó)華 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院武漢病毒研究所