專利名稱：：包含(s)-2-氨基-1-(4-氯苯基)-1-[4-(1h-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇作為蛋白激酶調(diào)節(jié)劑...的制作方法第l/83頁包含(5)-2-絲-l-(4-氯苯基)-l-4-(lH-吡唑-4-基)-苯基卜乙醇作為蛋白激酶調(diào)節(jié)劑的組合物本發(fā)明涉及抑制或調(diào)節(jié)蛋白激酶B(PKB)、蛋白激酶A(PKA)、ROCK激酶或p70S6K激酶活性的含有吡唑的芳基-烷基胺化合物、所述化合物在治療或預(yù)防由所述激酶介導(dǎo)的疾病或病癥中的用途以及含有所述化合物的藥物組合物。更具體地講，本發(fā)明涉及2-氨基-1-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的單一對(duì)映異構(gòu)體、含有該對(duì)映異構(gòu)體的藥物組合物及其治療用途及其制備方法和新的加工中間體。
背景技術(shù)：
：蛋白激酶構(gòu)成在結(jié)構(gòu)上相關(guān)的酶的大家族，這些酶在細(xì)胞內(nèi)負(fù)責(zé)控制多個(gè)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程(Hardie，G.和Hanks,S.(1995)7TeFacteBooA;./朋d//，AcademicPress,SanDiego,CA)?？蓪⑦@些激酶按它們使之磷酸化的底物的類型歸類到各個(gè)家族(例如蛋白-酪氨酸、蛋白-絲氨酸/蘇氨酸、脂類等)。已經(jīng)鑒定出通常與這些激酶家族的每一個(gè)相對(duì)應(yīng)的序列模體(例如Hanks,S.K.,Hunter,T.,F^SS5丄，9:576-596(1995);Knighton等，6We"ce,253:407-414(1991);Hiles等，CW/:70:419-429(1992);Kunz等，Ce〃,73:585-596(1993);Garcia隱Bustos等,五M5(9丄，13:2352-2361(1994))。蛋白激酶可由它們的調(diào)節(jié)機(jī)理表征。這些機(jī)理包括例如自身磷酸化、其它激酶導(dǎo)致的轉(zhuǎn)磷酸化作用、蛋白-蛋白相互作用、蛋白-脂質(zhì)相互作用和蛋白-多核苷酸相互作用。單個(gè)蛋白激酶可受到一種以上機(jī)制的調(diào)節(jié)。激酶通過將磷S吏基團(tuán)加到靶蛋白上而調(diào)節(jié)許多不同的細(xì)胞過程，包括但不限于增殖、分化、細(xì)胞凋亡、活動(dòng)、轉(zhuǎn)錄、翻譯和其它信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程。這些磷酸化事件起分子開/關(guān)的作用，可調(diào)理或調(diào)節(jié)乾蛋白的生物功能。靶蛋白的磷酸化響應(yīng)多種細(xì)胞外信號(hào)(激素、神經(jīng)遞質(zhì)、生長(zhǎng)和分化因子等)、細(xì)胞周期事件、環(huán)境或營(yíng)養(yǎng)應(yīng)激等而發(fā)生。合適的蛋白激酶在信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑中的作用是激活或鈍化(直接或間接)例如代謝酶、調(diào)節(jié)蛋白、受體、細(xì)胞骨架蛋白、離子通道或離子泵或轉(zhuǎn)錄因子。由于蛋白磷酸化缺乏控制所致的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)不受控制涉及多種疾病，包括如炎癥、癌癥、變態(tài)反應(yīng)/哮喘、免疫系統(tǒng)疾病和病癥、中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病和病癥以及血管生成。細(xì)胞凋亡或程序性細(xì)胞死亡是重要的生理過程，它除去生物不再需要的細(xì)胞。該過程在胚胎生長(zhǎng)發(fā)育初期十分重要，使得細(xì)胞組分能夠進(jìn)行受控制的非壞死性分解、清除和回收。在維持生長(zhǎng)細(xì)胞群體染色體和基因組完整性方面，通過凋亡清除細(xì)胞也非常重要。在細(xì)胞生長(zhǎng)周期中，存在若干已知的關(guān)卡，DNA損傷和基因組完整性在此受到開始修復(fù)過程。如果損傷或異常不能得到修復(fù)，則由損傷細(xì)胞引起細(xì)胞凋亡，從而避免缺陷和錯(cuò)誤延續(xù)。癌細(xì)胞在其染色體DNA中總是包含許多突變、錯(cuò)誤或重排。普遍認(rèn)為這種情況部分是由于大多數(shù)腫瘤在負(fù)責(zé)引發(fā)細(xì)胞凋亡過程的一個(gè)或多個(gè)過程中存在缺陷所引起的。正常控制機(jī)制不能殺死癌細(xì)胞，并且編碼錯(cuò)誤的染色體或DNA繼續(xù)復(fù)制。因此，恢復(fù)這些促凋亡信號(hào)或者抑制不受調(diào)節(jié)的存活信號(hào)是治療癌癥的頗具吸引力的方法。PKB長(zhǎng)期以來已經(jīng)清楚了解到，包含酶即磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、PDK1和PKB等的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，在許多細(xì)胞中介導(dǎo)提高的抗細(xì)胞凋亡抗性或存活反應(yīng)。有大量數(shù)據(jù)表明，該途徑是許多生長(zhǎng)因子用來抑制細(xì)胞凋亡的重要存活途徑。PI3K家族的酶由各種生長(zhǎng)和存活因子(例如EGF、PDGF)激活，并通過產(chǎn)生聚磷脂酰肌醇引起下游信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)事件被激活，包括激酶PDK1和蛋白激酶B(PKB)(亦稱Akt)的活化。這在宿主組織中也是成立的，例如在血管內(nèi)皮細(xì)月包以及腫瘤形成中。PKB是由激酶結(jié)構(gòu)域與N端PH結(jié)構(gòu)域和C端調(diào)節(jié)域一起構(gòu)成的蛋白絲氨酸/蘇氨酸激酶。酶PKBa(aktl)本身在Thr308被PDK1磷酸化，在Ser473被'PDK2，磷酸化，目前一般認(rèn)為PDK2由雷帕霉素(rapamycin)靶(TOR)激酶及其相關(guān)蛋白rictor組成。完全激活作用需要同時(shí)在兩個(gè)位點(diǎn)上進(jìn)行磷酸化，同時(shí)PIP3與PH結(jié)構(gòu)域之間需要締合以將酶錨定在脂質(zhì)膜胞質(zhì)面上使酶以最優(yōu)的方式接近底物。研究表明至少10種激酶起Ser473激酶的作用，其中包括促分裂原活化蛋白激酶(MAP)激酶活化蛋白激酶-2(MK2)、整聯(lián)蛋白關(guān)聯(lián)性激酶(ILK)、p38MAP激酶、蛋白激酶Ca(PKCa)、PKC卩、NIMA相關(guān)激酶-6(NEK6)、哺乳動(dòng)物雷帕霉素靶(mTOR)、依賴雙鏈DNA的蛋白激酶(DNK-PK)和共濟(jì)失調(diào)-毛細(xì)血管擴(kuò)張突變(ATM)基因產(chǎn)物。可獲得的數(shù)據(jù)表明，細(xì)胞中可以使用多個(gè)系統(tǒng)調(diào)節(jié)PKB的活化。PKB的完全活化需要同時(shí)在兩個(gè)位點(diǎn)進(jìn)行磷酸化，同時(shí)PIP3與PH結(jié)構(gòu)域之間需要締合以將酶錨定在脂質(zhì)膜胞質(zhì)面上使酶以最優(yōu)的方式接近底物。最近已有研究報(bào)道了PH結(jié)構(gòu)域突變。作者通過結(jié)構(gòu)、生物化學(xué)和生物學(xué)研究，提供了AKT1參與人類癌癥的直接證據(jù)，并證實(shí)了Aktl的E17K突變的致癌潛力。在以下癌癥中鑒定出該突變61例乳腺癌中5例(8%)、51例結(jié)腸直腸癌中3例(6%)和50例卵巢癌(2%)中1例(7V^mw448,439-444(2007年7月26日)|doi:10.1038/nature05933;2007年3月8日收稿；2007年5月11日采納；2007年7月4日在線發(fā)表，AtransformingmutationinthepleckstrinhomologydomainofAKT1incancer(癌癥中AKT1血小板白細(xì)胞C激酶底物同系結(jié)構(gòu)域的轉(zhuǎn)化突變))。最近，有研究報(bào)道PI3K催化亞基即PIK3CA內(nèi)的體細(xì)胞突變?cè)诮Y(jié)腸直腸癌、胃癌、乳腺癌、卵巢癌和高級(jí)別腦腫瘤中常見(25-40%)。PIK3CA突變是普通事件，可能發(fā)生在膀胱癌發(fā)生早期。在侵襲性乳腺癌中，PIK3CA變異主要存在于小葉瘤和腺管瘤中。在子宮內(nèi)膜癌中PI3K途徑被廣泛激活，PIK3CA/PTEN變異的組合可在這些腫瘤的發(fā)生中起重要作用。被PI3激酶突變和PTEN喪失激活的腫瘤可維持PKB的活化作用，因此可能對(duì)PKA7PKB抑制劑抑制作用的每文感性不成比例。活化PKB進(jìn)而使促成整體存活反應(yīng)的一系列底物磷酸化。雖然我們無法確定我們了解所有負(fù)責(zé)介導(dǎo)PKB依賴性存活反應(yīng)的因子，但是我們認(rèn)為一些重要作用是促凋亡因子BAD和胱天蛋白酶9的磷酸化和鈍化、導(dǎo)致其從細(xì)胞核中排除的FKHR等分叉頭轉(zhuǎn)錄因子(Forkheadtranscriptionfactor)的磷酸化以及通過級(jí)聯(lián)中的上游激酶磷酸化〗吏NfkB途徑活化。除PKB途徑的抗凋亡和促存活作用以外，該酶還在促進(jìn)細(xì)胞增殖中發(fā)揮重要作用。這種作用可能再次是通過若干作用介導(dǎo)的，一般認(rèn)為其中一些是p21Cipl/WAF1的細(xì)胞周期蛋白依賴性激酶抑制劑的磷酸化和鈍化以及mTOR的璘酸化和活化，該mTOR是一種控制細(xì)胞大小、生長(zhǎng)和蛋白質(zhì)翻譯若干方面的的激酶。使磷脂酰肌醇去磷酸化和鈍化的磷酸酶PTEN是關(guān)鍵的腫瘤抑制蛋白，它通常起調(diào)節(jié)PI3K/PKB存活途徑的作用?？梢詮腜TEN是人類腫瘤突變最普通的靶標(biāo)之一的觀察結(jié)果判斷PI3K/PKB途徑在腫瘤發(fā)生中的重要性，已在50。/?；蛞陨系暮谒亓?Guldberg等，1997，CancerResearch57，3660-3663)以及在晚期前列腺癌(Cairns等，1997CancerResearch57,4997)中發(fā)現(xiàn)了這種磷酸酶的突變。這些觀察結(jié)果和其它觀察結(jié)果表明許多肺瘤類型依賴于適于生長(zhǎng)和存活的PKB活性的提高，并可對(duì)合適的PKB抑制劑作出治療性反應(yīng)。有3種密切相關(guān)的PKB同等型，稱為a、卩和y(AKT1、AKT2和AKT3)，遺傳學(xué)研究表明它們具有截然不同但重疊的功能。有證據(jù)表明它們所有都可以獨(dú)立地在癌癥中起作用。例如發(fā)現(xiàn)在10-40%卵巢癌和胰腺癌中PKBp過量表達(dá)或被激活(Bellacosa等，1995，Int.J.Cancer64，280-285;Cheng等，1996,PNAS93，3636-3641;Yuan等，2000，Oncogene19，2324-2330);在人類胃癌、前列腺和乳腺癌中，PKBa擴(kuò)增(Staal1987，PNAS84，5034-5037;Sun等，2001，Am.J.Pathol.159，431-437);以及在類固醇不依賴性乳腺和前列腺細(xì)胞系中觀察到PKBy活性增加(Nakatani等，1999，J.Biol.Chem.274，21528-21532)。PKB途徑還在正常組織的生長(zhǎng)和存活中起作用，并可在控制細(xì)胞和組織功能的正常生理過程中受到調(diào)節(jié)。因此，與正常細(xì)胞和組織不這類障礙的實(shí)例是與導(dǎo)致免疫應(yīng)答延長(zhǎng)或上調(diào)的細(xì)胞群增殖和存活延長(zhǎng)有關(guān)的免疫細(xì)胞障礙。例如，在免疫應(yīng)答期間響應(yīng)關(guān)聯(lián)抗原或生長(zhǎng)因子(例如干擾素力的T淋巴細(xì)胞和B淋巴細(xì)胞應(yīng)答激活PI3K/PKB途徑，并負(fù)責(zé)維持抗原特異性淋巴細(xì)胞克隆的存活。在其中淋巴細(xì)胞中其它異常情況導(dǎo)致活化作用延長(zhǎng)的情況下，PKB途徑促使重要存活信號(hào)阻止通過活化細(xì)胞群的細(xì)胞凋亡使免疫應(yīng)答終止的正常機(jī)制。有相當(dāng)多的證據(jù)表明，在自身免疫病(例如多發(fā)性硬化和關(guān)節(jié)炎)中響應(yīng)自身抗原的淋巴細(xì)胞群增殖。不當(dāng)響應(yīng)外源抗原的淋巴細(xì)胞群的增殖是另一類疾病(例如變態(tài)反應(yīng)和哞喘)的特征?？偟膩碚f，抑制PKB可為免疫障礙提供有益的治療。其中PKB可起作用的正常細(xì)胞的不當(dāng)擴(kuò)展、生長(zhǎng)、增殖、增生和存活的其它實(shí)例包括但不限于動(dòng)脈粥樣硬化、心肌病和腎小球性腎炎。除了在細(xì)胞生長(zhǎng)和存活中的作用外，PKB途徑在通過胰島素控制葡萄糖代謝中起作用?？蓮腜KB同等型PKBa和PKB卩缺陷型小鼠中獲取的證據(jù)表明，該作用主要由卩同等型介導(dǎo)。因此，PKB活性的調(diào)節(jié)劑還可用于其中存在葡萄糖代謝和能量貯存功能障礙的疾病中，例如糖尿病、代謝疾病和肥胖癥。PKA依賴cAMP的蛋白激酶(PKA)是使許多底物磷酸化的絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，參與調(diào)節(jié)許多細(xì)胞過程，包括細(xì)胞生長(zhǎng)、細(xì)胞分化、離子通道傳導(dǎo)性、基因轉(zhuǎn)錄和神經(jīng)遞質(zhì)的突觸釋放。在其鈍化形式中，PKA全酶是包含兩個(gè)調(diào)節(jié)亞基和兩個(gè)催化亞基的四聚體。PKA在介導(dǎo)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)事件的G蛋白與它們調(diào)節(jié)的細(xì)胞過程之間起連接作用。激素配體(例如胰高血糖素)與跨膜受體的結(jié)合激活G蛋白偶聯(lián)受體(GTP結(jié)合與水解蛋白)。G蛋白的a亞基被激活時(shí)解離，結(jié)合并激活腺苷酸環(huán)化酶，腺香酸環(huán)化酶進(jìn)而將ATP轉(zhuǎn)化成環(huán)狀A(yù)MP(cAMP)。如此產(chǎn)生的cAMP然后與PKA的調(diào)節(jié)亞基結(jié)合，導(dǎo)致締合的催化亞基解離。當(dāng)與調(diào)節(jié)亞基締合時(shí)是無活性的PKA的催化亞基在解離時(shí)變得具有活性，并參與其它調(diào)節(jié)蛋白的磷酸化作用。例如，PKA的催化亞基使激酶即磷酸化酶激酶磷酸化，該激酶參與磷酸化酶的磷酸化，而磷酸化酶負(fù)責(zé)分解糖原釋放出葡萄糖。PKA還通過使糖原合酶磷酸化并失活來參與調(diào)節(jié)葡萄糖水平。因此，PKA活性調(diào)節(jié)劑(該調(diào)節(jié)劑可提高或降低PKA活性)可用于治療或控制其中存在葡萄糖代謝和能量貯存功能障礙的疾病，例如糖尿病、代謝疾病和月巴胖癥。研究還證實(shí)PKA是T細(xì)胞活化靈敏的抑制劑。Anndahl等人在得自感染HIV患者的T細(xì)胞使cAMP水平增加且對(duì)受cAMP類似物抑制比正常T細(xì)胞的更敏感的基礎(chǔ)上，研究了PKAI型在HIV誘導(dǎo)的T細(xì)胞功能障礙中的可能作用。他們從研究中得出結(jié)論，PKAI型活化作用增加可能是HIV感染中進(jìn)行性T細(xì)胞功能障礙的原因之一，因此PKAI型可能是免疫調(diào)節(jié)療法的潛在靶標(biāo)(Aandahl,E.M.,Aukrust,P.，SkMhegg,B.S.，Miiller,F.,Fr0land,S.S.,Hansson，V.，Task6n，K.尸rato'wAz力aye妙e/wtogom.Wmy/o似^yo/Tce〃j/ram///K"w/e"^/(蛋白激酶AI型拮抗劑使受HIV感染患者的T細(xì)胞恢復(fù)免疫應(yīng)答)。12,855-862(1998))?，F(xiàn)還清楚認(rèn)識(shí)到PKA調(diào)節(jié)亞基的突變可導(dǎo)致內(nèi)分泌組織過度活化。因?yàn)镻KA作為信使在細(xì)胞調(diào)節(jié)中的多樣性和重要性，所以cAMP的異常反應(yīng)可能導(dǎo)致由此(例如細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖異常)而引起的各種人類疾病(Stratakis,C.A.;Cho扁Chung,Y.S，；ProteinKinaseAandhumandiseases(蛋白激酶A與人類疾病)。TVemfe五wAocn'.Metoh2002，13，50-52)。在多種人類癌細(xì)胞中，包括在得自卵巢癌、乳腺癌和結(jié)腸癌患者的細(xì)胞中觀察到PKA過量表達(dá)。因此抑制PKA可成為治療癌癥的方法(Li,Q.;Zhu,G-D.;CWrew/7b//cyAfei/c/wa/C^ewz、/"，2002，2,939-971)。有關(guān)人類疾病中PKA作用的綜述可參見例如Profe/wA:/w"w爿cwd//w柳awD^efiwe,ConstantineA.Stratakis纟扁著，AnnalsoftheNewYorkAcademyofSciences,第968巻，2002，ISBN1-57331-412-9。ROCK激酶ROCK激酶家族包括兩個(gè)已知成員ROCKl和ROCK2:ROCKl.同義詞Rho相關(guān)蛋白激酶l、pl60ROCK、P160ROK、p160ROCK-l、含有蛋白激酶1的Rho相關(guān)巻曲螺旋、Rho激酶l、ROK卩。ROCK2.同義詞Rho相關(guān)蛋白激酶2、pl64ROCK、pl64ROK、p164ROCK-2、含有蛋白激酶2的Rho相關(guān)巻曲螺旋、Rho激酶2、ROKa。轉(zhuǎn)移過程包括細(xì)胞骨架以及細(xì)胞之間和細(xì)胞-基質(zhì)之間粘附的重構(gòu)，使細(xì)胞能夠從肺瘤塊上脫離，侵入局部組織并最終在軀體內(nèi)擴(kuò)散。對(duì)細(xì)胞形態(tài)和粘附的這些作用由RhoGTP酶家族成員調(diào)節(jié)。RhoA被激活后能夠與若干效應(yīng)蛋白相互作用，效應(yīng)蛋白包括ROCK激酶ROCKl和ROCK2?？捎蒖hoA-GTP復(fù)合物通過物理締合激活ROCKl和ROCK2。ROCK^皮激活后使多種底物^l酸化，并在關(guān)鍵的細(xì)胞功能中起著重要作用。ROCK的底物包括肌球蛋白輕鏈磷酸酶的肌球蛋白結(jié)合亞基(MBS,亦稱MYPT1)、內(nèi)收蛋白、膜突蛋白、肌球蛋白輕鏈(MLC)、LIM激酶和轉(zhuǎn)錄因子FHL。這些底物的磷酸化調(diào)節(jié)所述蛋白質(zhì)的生物活性，并為改變細(xì)胞對(duì)外部刺激的反應(yīng)提供了手段。在人類癌癥中，包括在睪丸生殖細(xì)胞腫瘤、具有轉(zhuǎn)移能力的小乳腺癌、膀胱癌的侵襲和轉(zhuǎn)移、卵巢癌的胂瘤進(jìn)程中，普遍觀察到RhoA和RhoC以及Rho效應(yīng)蛋白R(shí)OCK1和ROCK2的表達(dá)升高。腫瘤轉(zhuǎn)向侵襲和轉(zhuǎn)移形式的進(jìn)程要求腫瘤細(xì)胞經(jīng)歷明顯的形態(tài)變化，這是受RhoGTP酶調(diào)節(jié)的過程。肌動(dòng)球蛋白收縮性是細(xì)胞向它們的環(huán)境施加運(yùn)動(dòng)力的機(jī)制。小GTP酶Rho的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)下游通過ROCK介導(dǎo)的對(duì)肌球蛋白-II輕鏈(MLC2)磷酸化的調(diào)節(jié)，來增加收縮性。一般認(rèn)為ROCK激酶參與誘導(dǎo)黏著斑和應(yīng)力纖維，通過提高肌球蛋白調(diào)節(jié)輕鏈的磷酸化來介導(dǎo)平滑肌收縮的鈣敏感性。體內(nèi)研究還表明，ROCK抑制降低了數(shù)個(gè)腫瘤細(xì)胞系的侵襲。ROCK抑制劑，例如Y-27632或WF-536,曾被用于證實(shí)這些性質(zhì)的一些研究中。研究指出ROCK抑制劑用于治療多種疾病。這些疾病包括心血管疾病例如高血壓、慢性和充血性心力衰竭、心臟肥大、再狹窄、慢性腎衰竭和動(dòng)脈粥樣硬化。同樣，由于其肌肉松弛性質(zhì)，抑制劑還可適用于哮喘、男性勃起功能障礙、女性性功能障礙和膀胱過度活動(dòng)綜合征。研究表明，ROCK抑制劑具有抗炎性質(zhì)。因此，它們可用作治療神經(jīng)炎癥性疾病例如中風(fēng)、多發(fā)性硬化、阿爾茨海默病(Alzheimer'sdisease),帕金森病(Parkinson'sdisease)、月幾萎縮性側(cè)索硬化和炎癥性疼痛以及其它炎癥性疾病，例如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、過敏性腸綜合征和炎性腸病。根據(jù)其神經(jīng)突長(zhǎng)出誘導(dǎo)作用，ROCK抑制劑可能是神經(jīng)元再生的有益藥物，能誘導(dǎo)新的軸突生長(zhǎng)和穿過CNS內(nèi)病變的軸突再接。因此，ROCK抑制劑很可能用于CNS疾病的再生治療，所述CNS疾病例如脊髓損傷、急性神經(jīng)元損傷(中風(fēng)、創(chuàng)傷性腦損傷)、帕金森病、阿爾茨海默病和其它神經(jīng)變性性疾病。因?yàn)镽OCK抑制劑降低細(xì)胞增殖和細(xì)胞遷移，因此它們可用于治療癌癥和腫瘤轉(zhuǎn)移。最后，有證據(jù)表明，在病毒侵襲時(shí)，ROCK抑制劑抑制細(xì)胞骨架重排，因此，它們?cè)诳共《竞涂辜?xì)菌應(yīng)用中也具有潛在的治療價(jià)值。ROCK抑制劑還用于治療胰島素抵抗和糖尿病。ROCK抑制劑Y-27632腫瘤細(xì)胞粘附到宿主細(xì)胞層及隨后的跨細(xì)胞遷移是癌侵襲和轉(zhuǎn)移的關(guān)鍵步驟。小GTP酶Rho通過重構(gòu)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架和調(diào)節(jié)肌動(dòng)球蛋白收縮性來控制細(xì)胞粘附和運(yùn)動(dòng)。培養(yǎng)的大鼠MM1肝細(xì)胞瘤細(xì)胞以血清依賴性Rho介導(dǎo)的方式，通過體外間皮單層細(xì)胞遷移。一般認(rèn)為在若干作為Rho的推定靶分子而分離的蛋白質(zhì)中，ROCK激酶在培養(yǎng)細(xì)胞中參與誘導(dǎo)黏著斑和應(yīng)力纖維，并通過提高肌球蛋白調(diào)節(jié)輕鏈的磷酸化介導(dǎo)平滑肌收縮的鈣敏感性。用編碼ROCK的顯性活性突變體的cDNA轉(zhuǎn)染MM1細(xì)胞，賦予了不依賴于血清和Rho的侵襲活性。相比之下，顯性陰性、激酶缺陷的ROCK突變型的表達(dá)基本上削弱了侵襲表型。一種特異性ROCK抑制劑(Y-27632)阻斷了Rho介導(dǎo)的肌動(dòng)球蛋白活化和這些細(xì)胞的侵襲活性。此外，用滲透泵連續(xù)遞送這一抑制劑明顯降低植入同系大鼠腹膜腔內(nèi)的MM1細(xì)胞的擴(kuò)散。這些結(jié)果表明ROCK在腫瘤細(xì)胞侵襲中起著必不可少的作用，并且證實(shí)其作為預(yù)防癌侵襲和轉(zhuǎn)移的治療靶的可能性。VEGF誘導(dǎo)RhoA的活化，并將RhoA募集到人EC的細(xì)胞膜上。這種RhoA活性的提高是VEGF誘導(dǎo)的F-肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架重構(gòu)所必需的，正如腺病毒轉(zhuǎn)染的顯性陰性RhoA所證實(shí)的一樣。Rho激酶介導(dǎo)的這種RhoA效應(yīng)，通過使用Rho激酶特異性抑制劑Y-27632而得到證實(shí)。抑制Rho激酶防止了在響應(yīng)機(jī)械創(chuàng)傷時(shí)VEGF提高的EC遷移(VEGF-enhancedECmigration),但是對(duì)基礎(chǔ)EC遷移沒有作用。此外，在血管生成的體外^^型中，抑制RhoA或Rho激酶的任一個(gè)均削弱VEGF介導(dǎo)的EC在三維血纖蛋白基質(zhì)中的向內(nèi)生長(zhǎng)。結(jié)論VEGF誘導(dǎo)的細(xì)胞骨架在EC中的變化需要RhoA和Rho激酶，RhoA/Rho激酶信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)的活化參與了體外VEGF誘導(dǎo)的EC遷移和血管生成。Y-27632可使平滑肌松弛并增加血管的血流量。Y-27632是可以進(jìn)入細(xì)胞的小分子，在大鼠中口服給予30mg/kg達(dá)10天后無毒性。使用這一化合物的有效劑量大約為30|iM。它降低高血壓大鼠的血壓，但不影響正常大鼠的血壓。這就使得可鑒定出治療高血壓的Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)拮抗劑(Somlyo，1997Nature389:908;Uehata等，1997Nature389:990)。使用ROCK特異性抑制劑Y-27632(Uehata等，Nature,389，990994,1997;Davies等，BiochemicalJournal.,351,95-105,2000和Ishizaki等，MolecularPharmacology.,57，976-983，2000)，證實(shí)了該酶在不依賴Ca"的多個(gè)組織收縮調(diào)節(jié)中的作用，這些組織包括血管平滑肌(Uehata等，Nature.,389，990-994，1997)、氣道平滑肌(Ilikuka等，EuropeanJournalof30Pharmacology.,406,273-279，2000)和生殖器平滑月幾(Chitaley等，NatureMedicine.,7(1)，119-122,2001)。另外，Jezior等人(Jezior等，BritishJournalofPharmacology"134,78-87，2001)證實(shí)，Y-27632在分離的兔泌尿35膀胱平滑肌中削弱氯貝膽堿(bethanechol)引起的收縮。已對(duì)Rho激酶抑制劑Y-27632在下列疾病中的應(yīng)用進(jìn)行了測(cè)試高血壓(Uehata等，1997IBID;Chitaley等，2001aIBID;Chrissobolis和15Sobey，2001C.Circ.Res88:774)哮喘(Iizuka等，2000Eur.J.Pharmacol406:273;Nakahara等，Eur.J.Pharmacol389:103,2000)肺血管收縮(Takamura等，2001Hepatology33:577)血管疾病(Miyata等，2000ThrombVaseBiol20:2351;Robertson等，2000Br.J.Pharmacol131:5)陰莖勃起功能障礙(Chitaley等，2001bNatureMedicine7:119;Mills等,2001J.Appl.Physiol.91:1269;Rees等，Br.J.Pharmacol133:4552001)青光眼(Honjo等，2001MethodsEnzymol42:137;Rao等，2001Invest.Opthalmol.Urs.Sci.42:1029)細(xì)胞轉(zhuǎn)化(Sahai等，1999Curr.Biol.9:136-5)前列腺癌轉(zhuǎn)移(Somlyo等，2000BBRC269:652)肝細(xì)胞癌和轉(zhuǎn)移(Imamura等，2000;Takamura等，2001)肝纖維變性(Tada等，2001J.Hepatol34:529;Wang等，2001Am.J.Respir.CellMolBiol,25:628)腎纖維變性(Ohlci等，J.HeartLungTransplant20:9562001)心臟保護(hù)和同種異體移植物存活(Ohlci等，2001IBID)腦血管痙攣(Sato等，2000Circ.Res87:195)。ROCK激酶和心血管疾病越來越多的證據(jù)表明，緊接小鳥苷三磷酸結(jié)合蛋白R(shí)ho的下游靶ROCK,可能是心血管疾病的原因之一。ROCK在不同的細(xì)胞功能(例如平滑肌收縮、應(yīng)力纖維形成和細(xì)胞遷移和增殖)中起著重要作用。在腦缺血、冠狀動(dòng)脈痙攣、高血壓、血管炎癥、動(dòng)脈硬化和動(dòng)脈粥樣硬化中觀察到ROCK過度活化。因此，ROCK可能十分重要，而且還可能是心血管疾病中相對(duì)未廣泛深入研究的治療靶。采用ROCK抑制劑(例如Y-27632和法舒地爾(fasudil))的最新實(shí)驗(yàn)和臨床研究表明，ROCK在胚胎發(fā)育、炎癥和腫瘤發(fā)生中的關(guān)4建作用。該綜述將集中在ROCK在細(xì)胞功能中的可能作用，并論述了ROCK抑制劑作為新出現(xiàn)的心血管疾病療法的前景。平滑肌收縮性異常可能是高血壓等疾病的主要原因，調(diào)節(jié)這一過程的平滑肌松弛劑可能是治療上有益的。平滑肌收縮由胞質(zhì)Ca"濃度和肌絲Ca"敏感性調(diào)節(jié)前者激活肌球蛋白輕鏈激酶，后者通過抑制肌球蛋白磷酸酶而部分獲得。高血壓是一種與包括再狹窄損傷和動(dòng)脈粥樣硬化在內(nèi)的多種血管疾病相關(guān)的疾病，在高血壓中，血管平滑肌細(xì)胞的Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑被高度激活。高血壓是以外周血管阻力和/或血管結(jié)構(gòu)重建增加為特征的心血管疾病。最近，來自高血壓動(dòng)物模型的快速增多的證據(jù)表明，小GTP酶Rho及其下游效應(yīng)物Rho激酶在高血壓發(fā)病機(jī)制中起著重要作用。Rho/Rho激酶途徑的活化對(duì)于高血壓的平滑肌收縮性是必不可少的。在高血壓大鼠(例如遺傳自發(fā)性高血壓大鼠和N(w)-硝基-L-精氨酸甲酯誘導(dǎo)的高血壓)主動(dòng)脈中觀察到RhoA表達(dá)增加，RhoA活性升高。ROCK激酶和神經(jīng)疾病在各種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病中觀察到Rho/ROCK途徑活化異常。成年脊推動(dòng)物腦和脊髓的損傷激活ROCK，從而抑制神經(jīng)突生長(zhǎng)和萌發(fā)。在哺乳動(dòng)物脊髓損傷之后，抑制ROCK導(dǎo)致再生加速，功能恢復(fù)加快，已經(jīng)證實(shí)抑制Rho/ROCK途徑在中風(fēng)、炎癥性疾病和脫髓鞘疾病、阿爾茨海默病及神經(jīng)病性疼痛的動(dòng)物模型中具有功效。因此，ROCK抑神經(jīng)元的發(fā)育需要一系列步驟，首先從其發(fā)生地遷移和突起長(zhǎng)出的S1發(fā)開始，最終導(dǎo)致能夠使之與合適耙標(biāo)溝通的連接點(diǎn)的形成和夯化。在過去的幾年里變得越來越清楚的是，GTP酶Rho家族和相關(guān)^子在神經(jīng)元發(fā)育的不同方面發(fā)揮重要作用，其中包括神經(jīng)突長(zhǎng)出和分化、軸突尋路(axonpathfinding)和樹突棘形成和維持。神經(jīng)突長(zhǎng)出抑制和神經(jīng)突排斥兩者的一個(gè)共同特性是生長(zhǎng)錐內(nèi)的肌動(dòng)蛋白重排。神經(jīng)元細(xì)胞和非神經(jīng)元細(xì)胞兩者中調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白細(xì)胞骨架的關(guān)鍵是小GTP酶的Rho家族。Rho家族成員在無活性的GDP結(jié)合形式和有活性的GTP結(jié)合形式之間循環(huán)。若干證據(jù)表明，操控RhoGTP酶的活性狀態(tài)可以調(diào)節(jié)生長(zhǎng)錐瓦解和神經(jīng)突長(zhǎng)出抑制。最近，在行為方面，Rho途徑的失活可引起運(yùn)動(dòng)的快速恢復(fù)和前肢-后肢協(xié)調(diào)的逐漸恢復(fù)。這些發(fā)現(xiàn)為Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑是脊髓損傷后治療性干預(yù)的潛在靶標(biāo)提供了證據(jù)。p70S6K激酶70kDa核糖體蛋白激酶p70S6K(亦稱SK6、p70/p85S6激酶、p70/p85核糖體S6激酶和pp70s6k)是蛋白激酶AGC亞家族的一個(gè)成員。p70S6K是絲氨酸-蘇氨酸激酶，是磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)/AKT途徑的組分。p70S6K是PI3K的下游，在響應(yīng)多種促分裂原、激素和生長(zhǎng)因子時(shí)在多個(gè)位點(diǎn)通過磷酸化作用而被激活。這一反應(yīng)可在mTOR控制之下，因?yàn)槔着撩顾仄鹨种苝70S6K活性的作用，并阻斷蛋白質(zhì)合成，尤其因此下調(diào)這些編碼核糖體蛋白的mRNA的翻譯。p70S6K還受PI3K及其下游靶AKT的調(diào)節(jié)。渥曼青霉素(Wortmannin)和雷帕霉素引起在PI3K途徑依賴性位點(diǎn)上p70S6K的磷酸化降低。突變型p70S6K受渥曼青霉素抑制，但卻不受雷帕霉素抑制，這就表明PI3K途徑可能對(duì)不依賴于mTOR活性調(diào)節(jié)的p70S6K具有作用。酶p70S6K通過S6核糖體蛋白的磷酸化來調(diào)節(jié)蛋白質(zhì)的合成。S6磷酸化與翻譯器(translationalapparatus)組分編碼mRNA翻譯的增加有關(guān)，這些組分包括核糖體蛋白和翻譯延伸因子，其表達(dá)的增加對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖是必不可少的。這些mRNA在其5'轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)(稱為5TOP)含有寡嘧啶束(oligopyrimidimetract),已經(jīng)證實(shí)這對(duì)于它們?cè)诜g水平上的調(diào)節(jié)是必不可少的。除了參與翻譯以外，p70S6K活化還涉及細(xì)胞周期控制、神經(jīng)元細(xì)胞分化、調(diào)節(jié)在腫瘤轉(zhuǎn)移中是十分重要的細(xì)胞運(yùn)動(dòng)和細(xì)胞反應(yīng)、免疫應(yīng)答和組織修復(fù)?？筽70S6K抗體完全破壞了促有絲分裂應(yīng)答所驅(qū)動(dòng)的大鼠成纖維細(xì)胞進(jìn)入S期，這就表明了p70S6K功能在細(xì)胞周期Gl期至S期的進(jìn)程中是必不可少的。此外，已經(jīng)鑒定出在細(xì)胞周期Gl期至S期通過雷帕霉素抑制細(xì)胞周期增殖是抑制產(chǎn)生過度磷酸化的p70S6K激活形式的結(jié)果。腫瘤抑制劑LKB1激活A(yù)MPK,AMPK在mTOR/p70S6K途徑中使TSC1/2復(fù)合物磷酸化，因此通過不依賴PKB的途徑提供p70S6K。LKB1的突變引發(fā)佩-吉綜合征(Peutz-Jegherssyndrome,PJS),而PJS患者更可能發(fā)展出癌癥，其可能性比普通人群高出15倍。另外，1/3的肺腺癌帶有失活LKB1突變。p70S6K在肺瘤細(xì)胞增殖和保護(hù)細(xì)胞免于凋亡中的作用得到支持，所根據(jù)的是其在腫瘤組織中參與生長(zhǎng)因子受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、過量表達(dá)和活化。例如，RNA印跡分析和蛋白質(zhì)印跡分析表明，PS6K基因的擴(kuò)增分別伴有mRNA和蛋白質(zhì)表達(dá)的相應(yīng)增加(CancerRes.(1999)59:1408-11-LocalizationofPS6KtoChromosomalRegion17q23andDeterminationofItsAmplificationinBreastCancer(PS6K在乳腺癌中定位于染色體區(qū)17q23及其擴(kuò)增的測(cè)定))。染色體17q23在以下腫瘤和癌癥中擴(kuò)增高達(dá)20%的原發(fā)性乳腺腫瘤、87%含有BRCA2突變的乳腺腫瘤和50%含有BRCA1突變的腫瘤以及其它癌癥類型，例如胰腺癌、膀胱癌和成神經(jīng)細(xì)胞瘤(參見MBarlund,OMonni,JKononen,RCornelison,JTorhorst，GSauter,O-PKallioniemi和KallioniemiA，Owceri&s.,2000,60:5340-5346)。研究表明，17q23在乳腺癌中的擴(kuò)增包括PAT1、RAD51C、PS6K和SIGMA1B基因(CancerRes.(2000):60，第5371-5375頁)。p70S6K基因已被鑒定為這些部位擴(kuò)增和過量表達(dá)的靶標(biāo)，并且觀察到擴(kuò)增和預(yù)后不良之間在統(tǒng)計(jì)上顯著相關(guān)。在用上游激酶mTOR的抑制劑CCI-779(雷帕霉素酯)治療的腎癌患者中，觀察到p70S6K活化的臨床抑制。據(jù)報(bào)道，疾病進(jìn)程和p70S6K活性抑制之間有顯著的線性相關(guān)性。p70S6K涉及代謝疾病和障礙。據(jù)報(bào)道，缺乏p70S6避免患年齡和飲食誘發(fā)的肥胖癥并同時(shí)提高胰島素敏感性。根據(jù)這些發(fā)現(xiàn)，p70S6K在肥胖癥、糖尿病、代謝綜合征、胰島素抵抗、高血糖癥、高氨基酸血癥和高脂血癥等代謝疾病和障礙中的作用得到支持。具有PKB和PKA抑制活性的吡唑化合物已經(jīng)公開了具有PKA和PKB抑制活性的若干類化合物。例如，WO2005/061463(Astex)公開了具有PKB和PKA抑制活性的吡唑化合物，所例舉的一種具體化合物是2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇。其結(jié)構(gòu)如下的這種化合物在標(biāo)有星號(hào)的碳原子上具有手性中心。ci、映異構(gòu)體的外消旋混合物。按照實(shí)施例106和實(shí)施例107，實(shí)施例84的這種化合物在體外PKA和PKB實(shí)驗(yàn)中的ICso值在各實(shí)例中分別小于1微摩爾濃度((imol)。WO2005/061463還公開和例舉了多個(gè)單一對(duì)映異構(gòu)體如下異構(gòu)體AWO2005/061463-實(shí)施例22<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>異構(gòu)體BWO2005/061463-實(shí)施例23<formula>formulaseeoriginaldocumentpage23</formula>H—N異構(gòu)體CN異構(gòu)體DWO2005/061463-實(shí)施例30WO2005/061463-實(shí)施例31異構(gòu)體A和B構(gòu)成一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體，異構(gòu)體C和D構(gòu)成另一對(duì)對(duì)映異構(gòu)體。由本發(fā)明申請(qǐng)人進(jìn)行的試驗(yàn)證實(shí)，在結(jié)合實(shí)驗(yàn)中，異構(gòu)體A針對(duì)PKB的活性比其對(duì)映異構(gòu)體B的大10倍。同樣在結(jié)合實(shí)驗(yàn)中，異構(gòu)體C比其對(duì)映異構(gòu)體D的大約10倍。然而，在機(jī)械性細(xì)胞ELISA實(shí)驗(yàn)中(mechanisticcellularELISAassay)中，異構(gòu)體C和異構(gòu)體D基本上是等效的。發(fā)明概述根據(jù)上述異構(gòu)體A、B、C和D的活性，可預(yù)期WO2005/061463中實(shí)施例84化合物的單一對(duì)映異構(gòu)體在活性方面也可能具有相對(duì)小的差異。然而，非常料想不到的是發(fā)現(xiàn)2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的S-對(duì)映異構(gòu)體針對(duì)PKB的活性(用放射性結(jié)合實(shí)驗(yàn)測(cè)定)比相應(yīng)的W-對(duì)映異構(gòu)體大100倍。此外，雖然上述異構(gòu)體C和異構(gòu)體D在機(jī)械性細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中是基本等效的，但是2-氨基-1-(4-氯-苯基)小[4-(m-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的S-對(duì)映異構(gòu)體在本實(shí)驗(yàn)中具有良好的活性，A-對(duì)映異構(gòu)體卻無可測(cè)量的活性。當(dāng)對(duì)已知的上述單一對(duì)映異構(gòu)體A、B、C和D的性質(zhì)進(jìn)行比較時(shí)，2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的5"-對(duì)映異構(gòu)體與i-對(duì)映異構(gòu)體之間活性的差異是非常料想不到的，而且也未曾預(yù)測(cè)過。由上述情況得出2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的S-對(duì)映異構(gòu)體顯著優(yōu)于其對(duì)映體即i-異構(gòu)體。因此，在第一個(gè)方面，本發(fā)明提供包含CS)2-氨基-l-(4-氯-苯基)-1-[4-(1&吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的組合物，其中該組合物基本不含(A)2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇，或者該組合物含有GS)和(7)對(duì)映異構(gòu)體的混合物，其中(5)對(duì)映異構(gòu)體占優(yōu)勢(shì)。本發(fā)明還提供包含2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物的組合物，其中至少75%為5"-對(duì)映異構(gòu)體的形式。本文所用術(shù)語"組合物"是指物質(zhì)的組合物，包括僅由2-氨基-1-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇組成的組合物以及含有額外組分的組合物。按照本發(fā)明，組合物中存在的所有2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l—[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的至少75。/。必須是S-對(duì)映異構(gòu)體的形式。出于方便可將該組合物稱為"本發(fā)明的組合物"或"本文定義的組合物"或"(該;)組合物"。在給定組合物中存在的(6>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的量相對(duì)于該組合物中存在的2-氨基-l-(4-氯-苯基》l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇兩種對(duì)映異構(gòu)體形式的總量可表示為"對(duì)映異構(gòu)體純度(enantiomericpurity)"。例如，如果存在于組合物中總的2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的75%以S-對(duì)映異構(gòu)體的形式存在，則對(duì)映異構(gòu)體純度為75%。(6V2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-p比唑-4-基)-苯基]-乙醇的對(duì)映異構(gòu)體純度優(yōu)選為至少80%,更優(yōu)選至少85%,或至少90%，或至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或99.5%。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，98%以上的2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇為S-對(duì)映異構(gòu)體的形式。在另一個(gè)實(shí)施方案中，至少99.9%的2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇為S-對(duì)映異構(gòu)體的形式。優(yōu)選基本上無(A)-2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-p比唑-4-基)-苯基]-乙醇存在于組合物中。本申請(qǐng)所使用的術(shù)語"基本上無(尺)-2-氨基小(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇存在于組合物中"是指采用本文所述分析方法無法^r測(cè)到7-對(duì)映異構(gòu)體。在一個(gè)實(shí)施方案中，組合物是含有(5>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物及藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。在另一個(gè)實(shí)施方案中，組合物由CS)-2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物以基本純的形式組成，即含有的雜質(zhì)小于0.5%，更優(yōu)選小于0.1%,最優(yōu)選小于0.01%。在一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，沒有一種雜質(zhì)存在于組合物中的量相當(dāng)于0.2%(重量)以上，優(yōu)選不超過0.1%(重量)。在另一個(gè)實(shí)施方案中，其中雜質(zhì)的性質(zhì)是已知的，優(yōu)選雜質(zhì)存在于組合物中的量不大于0.5%，或不大于0.4%,或不大于0.3%，或不大于0.2%，或不大于0.1%,或不大于0.05%,或不大于0.01%。(5)-2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-p比唑-4-基)-苯基]-乙醇由下式(1)表示，本文亦可稱為"式(I)化合物"或"S-對(duì)映異構(gòu)體"。出于方便，本文亦可將(/)-2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇稱為"i-對(duì)映異構(gòu)體"。本文所用術(shù)語"/T和"S"是指由Cahn、Ingold和Prelog開發(fā)的"R和S，，命名法,參見JerryMarch,^v朋ced(9rgwm'cCAew&^y，第4版，N—NH26JohnWiley&Sons,NewYork,1992,第109-114頁；也可參見Cahn,Ingold和Prelog，Jwg，.MM五"g/"1966，5,385-415?？梢酝ㄟ^部分或完全拆分2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的(5)和(A)對(duì)映異構(gòu)體的混合物，來制備本發(fā)明的組合物，例如采用下述的手性色譜法。(6)-2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-p比唑-4-基)-苯基]-乙醇(即式(1)化合物)具有蛋白激酶B(PKB)和/或蛋白激酶A(PKA)抑制或調(diào)節(jié)活性，因此可用于預(yù)防或治療由PKB和/或PKA介導(dǎo)的疾病或病癥。另一方面，本發(fā)明提供基本純形式的式(I)化合物即(5>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物，基本純的形式也就是說含有的雜質(zhì)小于0.5%,更優(yōu)選小于0.1%，最優(yōu)選小于0.01%。在一個(gè)實(shí)施方案中，化合物不是N-氧化物，而選自游離堿或其鹽、溶劑化物或互變異構(gòu)體。在另一個(gè)實(shí)施方案中，式(I)化合物或其互變異構(gòu)體為游離^^的形式。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，式(I)化合物或其互變異構(gòu)體為鹽的形式。按照本發(fā)明制備的一種具體的鹽是與鹽酸形成的鹽。在更多方面，本發(fā)明4是供本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物，用于預(yù)防或治療由蛋白激酶B介導(dǎo)的疾病或病癥。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于預(yù)防或治療由蛋白激酶B介導(dǎo)的疾病或病癥的藥物中的用途。一種預(yù)防或治療由蛋白激酶B介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括給予有需要的受治療者本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物，用于治療哺乳動(dòng)物的包括細(xì)胞生長(zhǎng)異常或細(xì)胞死亡異常停滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)死亡異常停滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的藥物中的用途。一種用于治療哺乳動(dòng)物的包括細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蛘哂杉?xì)胞生長(zhǎng)異常引起的疾病或病癥的方法，該方法包括以有效抑制細(xì)胞異常生長(zhǎng)或細(xì)胞死亡異常停滯的量給予哺乳動(dòng)物本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。匸-犯」病癥的發(fā)病率的方法，該方法包括以有效抑制細(xì)胞異常生長(zhǎng)的量給予哺乳動(dòng)物本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種用于治療哺乳動(dòng)物的包括細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常方法，該方法包括以有效抑制蛋白激酶B活性的量給予哺乳動(dòng)物本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種用于抑制蛋白激酶B的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種抑制蛋白激酶B的方法，該方法包括使激酶與抑制激酶的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物接觸。一種通過抑制蛋白激酶B和/或蛋白激酶A的活性用于調(diào)節(jié)細(xì)胞過程(例如細(xì)胞分裂)的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于通過抑制蛋白激酶B和/或蛋白激酶A的活性調(diào)節(jié)細(xì)胞過程(例如細(xì)胞分裂)的藥物中的用途。一種使用本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物，通過抑制蛋白激酶B和/或蛋白激酶A的活性來調(diào)節(jié)細(xì)胞過程(例如細(xì)胞分裂)的方法。一種用于預(yù)防或治療由蛋白激酶A介導(dǎo)的疾病或病癥的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于預(yù)防或治療由蛋白激酶A介導(dǎo)的疾病或病癥的藥物中的用途。一種用于預(yù)防或治療由蛋白激酶A介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括給予有需要的受治療者本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種用于治療哺乳動(dòng)物的包括細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的方法，該方法包括以有效抑制蛋白激酶A活性的量給予哺乳動(dòng)物本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種用于抑制蛋白激酶A的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種抑制蛋白激酶A的方法，該方法包括使激酶與抑制激酶的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物接觸。一種使用本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物，通過抑制蛋白激酶A的活性來調(diào)節(jié)細(xì)胞過程(例如細(xì)胞分裂)的方法。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于預(yù)防或治療包括細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的藥物中的用途。一種藥物組合物，該藥物組合物包含本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物及藥學(xué)上可接受的載體。用于醫(yī)學(xué)的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于預(yù)防或治療本文所述的任一種疾病或病癥的藥物中的用途。一種用于治療或預(yù)防本文所述的Y壬一種疾病或病癥的方法，該方法包括給予患者(例如有需要的患者)本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物的化合物(例如治療有效量)。一種減輕或降低本文所述疾病或病癥的發(fā)病率的方法，該方法包括給予患者(例如有需要的患者)本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物的化合物(例如治療有效量)。一種用于診斷和治療由蛋白激酶B介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括(i)篩選患者以確定患者所患或可能患上的疾病或病癥是否是對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶B活性的化合物治療^t感的疾病或病癥；(ii)如果表明患者所患疾病或病癥對(duì)此敏感，則隨后給予患者本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于治療或預(yù)防患者的疾病或病癥的藥物中的用途，該患者已經(jīng)過篩選并確定為患有可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶B活性的化合物治療^:感的疾病或病癥或者有患該疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)。30一種用于治療或預(yù)防患者的疾病或病癥的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物，該患者已經(jīng)過篩選并確定為患有可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶B活性的化合物治療壽丈感的疾病或病癥或者有患該疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)。一種診斷和治療由蛋白激酶A介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括(i)篩選患者以確定患者所患或可能患上的疾病或病癥是否是可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶A活性的化合物治療敏感的疾病或病癥；(ii)如果表明患者所患疾病或病癥對(duì)此敏感，則隨后給予患者本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種用于治療或預(yù)防患者的疾病或病癥的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物，該患者已經(jīng)過篩選并確定為患有可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶A活性的化合物治療壽丈感的疾病或病癥或者有患該疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于治療或預(yù)防患者的疾病或病癥的藥物中的用途，該患者已經(jīng)過篩選并確定為患有可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶A活性的化合物治療敏感的疾病或病癥或者有患該疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)。一種用作蛋白激酶B和/或蛋白激酶A調(diào)節(jié)劑(例如抑制劑)的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶B和/或蛋白激酶A的藥物中的用途。一種調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶B和/或蛋白激酶A的方法；該方法包括使蛋白激酶B和/或蛋白激酶A(例如在細(xì)胞環(huán)境中-例如在體內(nèi))與本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物4妾觸。溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物(a)治療或預(yù)防其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)ROCK激酶的疾病或病癥；和/或(b)治療其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)ROCK激酶的受治療者或患者群。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于以下方面的藥物中的用途(a)治療或預(yù)防其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)ROCK激酶的疾病或病癥；和/或(b)治療其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)ROCK激酶的受治療者或患者群。一種預(yù)防或治療由ROCK激酶介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括給予有需要的受治療者本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種用于治療哺乳動(dòng)物的包括細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常方法，該方法包括以有效抑制ROCK激酶活性的量給予哺乳動(dòng)物本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種抑制ROCK激酶的方法，該方法包括使激酶與抑制激酶的本文定義的組合物或4b合物，接觸。一種使用本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物，通過抑制ROCK激酶的活性來調(diào)節(jié)細(xì)胞過程(例如細(xì)胞分裂)的方法。一種用于預(yù)防或治療由ROCK激酶介導(dǎo)的疾病或病癥的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于預(yù)防或治療由ROCK激酶介導(dǎo)的疾病或病癥的藥物中的用途。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于預(yù)防或治療由ROCK激酶介導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)異常或細(xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的藥物中的用途。一種用于減輕或降^f氐哺乳動(dòng)物的包括由ROCK激酶介導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯或者由ROCK激酶介導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的發(fā)病率的方法，該方法包括以有效抑制細(xì)胞異常生長(zhǎng)的量給予哺乳動(dòng)物本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于預(yù)防或治療本文所述的任一種疾病或病癥的藥物中的用途。一種用于治療或預(yù)防本文所述的〗壬一種疾病或病癥的方法，該方法包括給予患者(例如有需要的患者)本文定義的組合物或式(I)化合物(例如治療有效量)。一種減輕或降〗氐本文所述疾病或病癥的發(fā)病率的方法，該方法包括給予患者(例如有需要的患者)本文定義的組合物或式(I)化合物(例如治療有效量)。一種用于診斷和治療由ROCK激酶介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括(i)篩選患者以確定患者所患或可能患上的疾病或病癥是否是可能對(duì)用具有針對(duì)ROCK激酶活性的化合物治療敏感的疾病或病癥；(ii)如果表明患者所患疾病或病癥對(duì)此敏感，則隨后給予患者本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于治療或預(yù)防患者的疾病或病癥的藥物中的用途，該患者已經(jīng)過篩選并確定為患有可能對(duì)用具有針對(duì)ROCK激酶用于以下方面的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物(a)治療或預(yù)防其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶p70S6K的疾病或病癥；和/或(b)治療其中需要調(diào)節(jié)(例如33抑制)蛋白激酶p70S6K的受治療者或患者群。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于以下方面的藥物中的用途(a)治療或預(yù)防其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶p70S6K的疾病或病癥；和/或(b)治療其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶p70S6K的受治療者或患者群。一種用于預(yù)防或治療由蛋白激酶p70S6K介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括給予有需要的受治療者本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種用于治療哺乳動(dòng)物的包括細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的方法，該方法包括以有效抑制蛋白激酶p70S6K活性的量給予哺乳動(dòng)物本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。一種抑制蛋白激酶p70S6K的方法，該方法包括使激酶與抑制激酶的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物接觸。一種使用本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物，通過抑制蛋白激酶p70S6K活性來調(diào)節(jié)細(xì)胞過程(例如細(xì)胞分裂)的方法。用于預(yù)防或治療由蛋白激酶p70S6K介導(dǎo)的疾病或病癥的本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于預(yù)防或治療由蛋白激酶p70S6K介導(dǎo)的疾病或病癥的藥物中的用途。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于預(yù)防或治療由蛋白激酶p70S6K介導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)異常或細(xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的藥物中的用途。一種用于減輕或降低哺乳動(dòng)物的包括由蛋白激酶p70S6K介導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯或者由蛋白激酶p70S6K介導(dǎo)的細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的發(fā)病率的方法，該方法包括以有效抑制細(xì)胞異常生長(zhǎng)的量給予哺乳動(dòng)物本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于預(yù)防或治療本文所述的任一種疾病或病癥的藥物中的用途。一種用于治療或預(yù)防本文所述的〗壬一種疾病或病癥的方法，該方法包括給予患者(例如有需要的患者)本文定義的組合物或式(I)化合物(例如治療有效量)。一種減輕或降^f氐本文所述疾病或病癥的發(fā)病率的方法，該方法包括給予患者(例如有需要的患者)本文定義的組合物或式(I)化合物(例如治療有效量)。一種用于診斷和治療由蛋白激酶p70S6K介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括(i)篩選患者以確定患者所患或可能患上的疾病或病癥是否是對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶p70S6K活性的化合物治療敏感的疾病或病癥；(ii)如果表明患者所患疾病或病癥對(duì)此敏感，則隨后給予患者本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物。本文定義的組合物或式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物在制備用于治療或預(yù)防患者的疾病或病癥的藥物中的用途，該患者已經(jīng)過篩選并確定為患有可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶p70S6K活性的化合物治療壽文感的疾病或病癥或者有患該疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)。本發(fā)明還提供隨附權(quán)利要求書中所述的更多的組合、用途、方法、化合物和步驟。一般的優(yōu)先選擇和定義應(yīng)用于激酶活性中的本文所用術(shù)語"調(diào)節(jié)"，是指蛋白激酶生物活性水平的變化。因此，調(diào)節(jié)包括引起有關(guān)蛋白激酶活性增加或減少的生理變化。在后一種情況下，調(diào)節(jié)可稱為"抑制"。調(diào)節(jié)可以直接或間接發(fā)生，可在任何生理水平上由任何機(jī)制介導(dǎo)，生理水平包括例如基因表達(dá)水平(包括例如轉(zhuǎn)錄、翻譯和/或翻譯后修飾)、直接或間接對(duì)激酶活性水平起作用的調(diào)節(jié)元件編碼基因的表達(dá)水平。因此，調(diào)節(jié)可能意味著激酶的表達(dá)升高/抑制或者過量表達(dá)或表達(dá)不足，包括基因擴(kuò)增(即多個(gè)基因拷貝)和/或由轉(zhuǎn)錄作用引起的表達(dá)增加或降低，以及活性過高(或不足)和激酶活化(鈍化)(包括由突變引起的活化(鈍化))。術(shù)語"調(diào)節(jié)的"和"調(diào)節(jié)"也照此解釋。與本文所述激酶例如4關(guān)用(并且用于例如各種生理過程、疾病、狀況、病癥、療法、治療或干預(yù))的本文所用術(shù)語"介導(dǎo)(的)"，是指有限制的操控使得該術(shù)語適用的各種過程、疾病、狀況、病癥、治療或干預(yù)是其中所述激酶發(fā)揮生物學(xué)作用的過程、疾病、狀況、病癥、治療或干預(yù)。在該術(shù)語適用的疾病、狀況或病癥的情況下，激酶所起的作用可以是直"l妄或間接的，并且對(duì)于疾病、狀況或病癥(或其病因或進(jìn)程)的癥狀表現(xiàn)應(yīng)是必需和/或足夠的。因此，激酶活性(特別是激酶活性水平異常，例如激酶過量表達(dá))不必是該疾病、狀況或病癥的近因相反，預(yù)期激酶介導(dǎo)的疾病、狀況或病癥包括具有多因素病因并且其中所述激酶4義是部分參與的復(fù)雜進(jìn)程的疾病、狀況或病癥。在該術(shù)語適用的治療、預(yù)防或干預(yù)的情況下，激酶所起的作用可以是直接或間接的，并且對(duì)于治療、預(yù)防的實(shí)施或干預(yù)的結(jié)果應(yīng)是必需和/或足夠的。因此，由激酶介導(dǎo)的疾病或病癥包括對(duì)任何具體的癌癥藥物或治療產(chǎn)生抗性。本文所用術(shù)語"ROCK激酶"和"ROCK"是同義的通用術(shù)語，包括ROCK激酶家族的所有成員，因此包括R0CK1和ROCK2作為該上位概念中的下位概念。此外還提及的ROCK激酶抑制劑、ROCK激酶調(diào)節(jié)和ROCK激酶活性也照此解釋。術(shù)語"Rho蛋白"用來定義參與調(diào)節(jié)肌動(dòng)蛋白組構(gòu)的GTP結(jié)合蛋白大家族的專門術(shù)語，包括RhoA和RhoC。本文所用術(shù)語"Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑"是指涉及Rho蛋白一個(gè)或多個(gè)成員的任何細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。與本發(fā)明特別有關(guān)的是Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，其中ROCK激酶(例如ROCK1和/或ROCK2)是一種或多種Rho蛋白的鄰近效應(yīng)物(proximateeffector)(例如結(jié)合配偶體)，當(dāng)特別提及Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑時(shí)，本發(fā)明所限定的實(shí)施方案優(yōu)選這類Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑。應(yīng)用于本文所述ROCK中的本文所用術(shù)語"調(diào)節(jié)"，是指ROCK生物活性水平的變化。因此，調(diào)節(jié)包括引起ROCK活性增加或減少的生理變化。在后一種情況下，調(diào)節(jié)可稱為"抑制"。調(diào)節(jié)可以直接或間接發(fā)生，可在任何生理水平上由任何機(jī)制介導(dǎo)，生理水平包括例如基因表達(dá)水平(包括例如轉(zhuǎn)錄、翻譯和/或翻譯后修飾)、直接或間接對(duì)ROCK活性水平起作用的調(diào)節(jié)元件編碼基因的表達(dá)水平、或酶(例如ROCK)活性(例如變構(gòu)機(jī)制、竟?fàn)幰种?、活性部位失活、反饋抑制途徑干擾等)的水平。因此，調(diào)節(jié)可能意味著ROCK的表達(dá)升高/抑制或者過量表達(dá)或表達(dá)不足，包括基因擴(kuò)增(即多個(gè)基因拷貝)和/或由轉(zhuǎn)錄作用引起的表達(dá)增加或降低，以及活性過高(或不足)和ROCK活化(鈍化)(包括由突變引起的活化(鈍化))。術(shù)語"調(diào)節(jié)的，，和"調(diào)節(jié)，，也照此解釋。與本文所述ROCK^:用(并且用于例如各種生理過程、疾病、狀況、病癥、療法、治療或干預(yù))的本文所用術(shù)語"介導(dǎo)(的)"，是指有限制的操控使得該術(shù)語適用的各種過程、疾病、狀況、病癥、治療或干預(yù)是其中ROCK發(fā)揮生物學(xué)作用的過程、疾病、狀況、病癥、治療或干預(yù)。在該術(shù)語適用的疾病、狀況或病癥的情況下，ROCK所起的作用可以是直接或間接的，并且對(duì)于疾病、狀況或病癥(或其病因或進(jìn)程)的癥狀表現(xiàn)應(yīng)是必需和/或足夠的。因此，ROCK活性(特別是ROCK活性水平異常，例如ROCK過量表達(dá))不必是該疾病、狀況或病癥的37近因相反，預(yù)期ROCK介導(dǎo)的疾病、狀況或病癥包括具有多因素病因并且其中ROCK僅是部分參與的復(fù)雜進(jìn)程的疾病、狀況或病癥。在該術(shù)語適用的治療、預(yù)防或干預(yù)(例如本發(fā)明的"ROCK介導(dǎo)的治療"、"ROCK介導(dǎo)的預(yù)防")的情況下，ROCK所起的作用可以是直接或間接的，并且對(duì)于治療、預(yù)防的實(shí)施或干預(yù)的結(jié)果應(yīng)是必需和/或足夠的。本發(fā)明的多種ROCK介導(dǎo)的生理過程、疾病、狀況、病癥、療法、治療或干預(yù)包括Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑(如本文中定義)，因此，通過延伸可稱為"Rho介導(dǎo)的"生理過程、疾病、狀況、病癥、療法、治療或干預(yù)。本文所用與疾病、病癥、受治療者或患者群體有關(guān)的術(shù)語"需要(的)"是指與該疾病、病癥、受治療者或患者群體有關(guān)的特別干預(yù)的臨床需求或需要的專門術(shù)語。因此，本文提及"其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)ROCK激酶的"疾病、病癥、受治療者或患者群體是指其中調(diào)節(jié)ROCK激酶是臨床上需要的或必需的這類疾病等。可能出現(xiàn)這樣的情況，例如其中ROCK激酶的調(diào)節(jié)可能是治標(biāo)性的、預(yù)防性的或(至少部分)治療性的。應(yīng)用于本文所述蛋白激酶p70S6K中的本文所用術(shù)語"調(diào)節(jié)"，是指P70S6K生物活性水平的變化。因此，調(diào)節(jié)包括引起P70S6K活性增加或減少的生理變化。在后一種情況下，調(diào)節(jié)可稱為"抑制"。調(diào)節(jié)可以直接或間接發(fā)生，可在任何生理水平上由任何機(jī)制介導(dǎo)，生理水平包括例如基因表達(dá)水平(包括例如轉(zhuǎn)錄、翻譯和/或翻i斧后修飾)、直接或間接對(duì)P70S6K活性水平起作用的調(diào)節(jié)元件編碼基因的表達(dá)水平、或酶(例如p70S6K)活性(例如變構(gòu)機(jī)制、竟?fàn)幰种?、活性部位失活、反饋抑制途徑干擾等)的水平。因此，調(diào)節(jié)可能意味著P70S6K的表達(dá)升高/抑制或者過量表達(dá)或表達(dá)不足，包括基因擴(kuò)增(即多個(gè)基因拷貝)和/或由轉(zhuǎn)錄作用引起的表達(dá)增加或降低，以及活性過高(或不足)和P70S6K活化(鈍化)(包括由突變引起的活化(鈍化))。術(shù)語"調(diào)節(jié)的"和"調(diào)節(jié)"也照此解釋。與本文所述p70S6K聯(lián)用(并且用于例如各種生理過程、疾病、狀38況、病癥、療法、治療或干預(yù))的本文所用術(shù)語"介導(dǎo)(的)"，是指有限制的操控使得該術(shù)語適用的各種過程、疾病、狀況、病癥、治療或干預(yù)是其中P70S6K發(fā)揮生物學(xué)作用的過程、疾病、狀況、病癥、治療或干預(yù)。在該術(shù)語適用的疾病、狀況或病癥的情況下，P70S6K所起的作用可以是直接或間接的，并且對(duì)于疾病、狀況或病癥(或其病因或進(jìn)程)的癥狀表現(xiàn)應(yīng)是必需和/或足夠的。因此，P70S6K活性(特別是P70S6K活性水平異常，例如P70S6K過量表達(dá))不必是該疾病、狀況或病癥的近因相反，預(yù)期P70S6K介導(dǎo)的疾病、狀況或病癥包括具有多因素病因并且其中P70S6K僅是部分參與的復(fù)雜進(jìn)程的疾病、狀況或病癥。在該術(shù)語適用的治療、預(yù)防或干預(yù)(例如本發(fā)明的"p70S6K介導(dǎo)的治療"和"p70S6K介導(dǎo)的預(yù)防")的情況下，p70S6K所起的作用可以是直接或間接的，并且對(duì)于治療、預(yù)防的實(shí)施或干預(yù)的結(jié)果應(yīng)是必需和/或足夠的。術(shù)語"干預(yù)"是指本文所用的在任何水平上實(shí)現(xiàn)生理變化的任何手段的專門術(shù)語。因此，干預(yù)可包括誘導(dǎo)或抑制任何生理過程、事件、生化途徑或細(xì)胞/生化事件。本發(fā)明的干預(yù)通常促進(jìn)(或有助于)疾病或病癥的療法、治療或預(yù)防。除非文中另外指明，否則本文提及(5>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇或式(I)化合物或S-對(duì)映異構(gòu)體時(shí)，包括游離堿及其離子形式、鹽、溶劑化物、N-氧化物、互變異構(gòu)體形式和保護(hù)形式，例如正如下面"i侖述的一樣。該化合物可以不是N-氧化物。例如，在一個(gè)實(shí)施方案中，式(I)化合物不是N-氧化物，而是游離堿形式。在另一個(gè)實(shí)施方案中，式(I)化合物不是N-氧化物，而是鹽形式。可才艮據(jù)下述文獻(xiàn)選才奪和制備鹽形式尸/wwwcet^ca/Sa/te:Se/ec"ow,朋J仏e,P.HeinrichStahl(主編)，CamilleG.Wermuth(主編)，ISBN:3-90639-026-8,Hardcover,第388頁，2002年8月。例如，可如下制備酸加成鹽將游離堿溶于給定的鹽形式在其中不溶解或難溶解的有機(jī)溶劑中，然后加入合適溶劑中的所需酸以使鹽從溶液中沉淀出來?？膳c各種各樣的酸(無酸機(jī)和有機(jī)酸兩者)形成酸加成鹽。酸加成鹽的實(shí)例包括與選自以下的酸形成的鹽乙酸、2,2-二氯乙酸、己二酸、海藻酸、抗壞血酸(例如L-抗壞血酸)、L-天冬氨酸、苯^黃酸、苯曱酸、4-乙酰氨基苯曱酸、丁酸、(+)樟腦酸、樟腦磺酸、(+)-(15)-樟腦-10-磺酸、癸酸、己酸、辛酸、肉桂酸、檸檬酸、環(huán)拉酸、十二烷基硫酸、乙烷-l,2-二磺酸、乙磺酸、2-羥基乙烷磺酸、甲酸、富馬酸、半乳糖二酸、龍膽酸、葡庚糖酸、D-葡糖酸、葡糖醛酸(例如D-葡糖醛酸)、谷氨酸(例如L-谷氨酸)、a-氧代戊二酸、乙醇酸、馬尿酸、氫溴酸、鹽酸、氬碘酸、羥乙磺酸、乳酸(例如(+)-L-乳酸和(土)-DL-乳酸)、乳糖酸、馬來酸、蘋果酸、(-)-L-蘋果酸、丙二酸、(土)-DL-扁桃酸、曱磺酸、萘磺酸(例如萘-2-磺酸)、萘-l，5-二磺酸、l-羥基-2-萘?xí)跛帷熕?、硝酸、油酸、乳清酸、草酸、棕櫚酸、雙羥萘酸、磷酸、丙酸、L-焦谷氨酸、水楊酸、4-氨基-水楊酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸、硫酸、鞣酸、(+)-L-酒石酸、硫氰酸、曱苯磺酸(例如對(duì)曱苯磺酸)、十一碳烯酸和戊酸，以及?；被岷完栯x子交換樹脂。一組具體的酸加成鹽包括與下列酸形成的鹽鹽酸、氫碘酸、磷酸、硝酸、硫酸、杵檬酸、乳酸、琥珀酸、馬來酸、蘋果酸、羥乙磺酸、富馬酸、苯磺酸、甲苯磺酸、甲磺酸、乙磺酸、萘磺酸、戊酸、乙酸、丙酸、丁酸、丙二酸、葡糖醛酸和乳糖酸。在這組鹽內(nèi)，一個(gè)分組的鹽由與鹽酸或乙酸形成的鹽組成。另一組酸加成鹽包括與下列酸形成的鹽乙酸、己二酸、抗壞血酸、天冬氨酸、檸檬酸、DL-乳酸、富馬酸、葡萄糖酸、葡糖醛酸、馬尿酸、鹽酸、谷氨酸、DL-蘋果酸、曱磺酸、癸二酸、硬脂酸、琥珀酸和酒石酸。式(I)化合物可以單鹽或或二鹽存在，這取決于與其形成鹽的酸的pKa。在較強(qiáng)的酸中，堿性的吡唑氮以及氨基上的氮原子，可參與鹽形成。例如，如果pKa小于約3的酸(例如鹽酸、斬u酸或三氟乙酸等酸)，則式(I)化合物通?？膳c2摩爾當(dāng)量的酸形成鹽。式(I)化合物的鹽形式通常是藥學(xué)上可接受的鹽，藥學(xué)上可接受的鹽的實(shí)例的有關(guān)論述參見Berge等，1977，"PharmaceuticallyAcceptableSalts",尸A固.5W"第66巻，第1-19頁。但是，也可將非藥學(xué)上可接受的鹽制成中間體形式，然后將其轉(zhuǎn)化為藥學(xué)上可接受的鹽。這些可用于例如純化或分離式(I)化合物的非藥學(xué)上可接受的鹽形式也構(gòu)成本發(fā)明的組成部分。式(I)化合物還可形成N-氧化物，這類N-氧化物也落入式(I)化合物的定義范圍內(nèi)。在一個(gè)通用的實(shí)施方案中，式(I)化合物不是N-氧化物。可用氧化劑例如過氧化氫或過酸(例如過氧羧酸)處理相應(yīng)的母體胺形成N-氧4匕凈勿，參見例長(zhǎng)口JerryMarch,爿c/vawce^O^am'cCAem^^y,第4版，WileyInterscience,pages。更特別地，N-氧化物可用L.W.Deady的方法(&".Comm.1977,7,509-514)制備，其中在例如二氯曱烷等惰性溶劑中，使胺化合物與間氯過氧苯曱酸(MCPBA)反應(yīng)?？梢圆捎煤线m的分離技術(shù)例如手性色譜法(手性載體上的色譜法)，由5"-對(duì)映異構(gòu)體和i-對(duì)映異構(gòu)體的外消旋混合物制備式(I)化合物，這類技術(shù)為本領(lǐng)域技術(shù)人員所熟知。作為手性色語法的替代方案，對(duì)映異構(gòu)體可如下分離與手性酸例如(+)-酒石酸、(-)-焦谷氨酸、(-)-二-曱苯曱?；?L-酒石酸((陽)-di-toluloyl-L-tartaricacid)、(+)-扁桃酸、(-)-蘋果酸和(-)-樟腦磺酸形成非對(duì)映異構(gòu)的鹽，通過優(yōu)先結(jié)晶分離非對(duì)映異構(gòu)體，然后將鹽解離，得到游離堿的單一對(duì)映異構(gòu)體。式(I)化合物包括具有一個(gè)或多個(gè)同位素取代的化合物變體，提及具體元素時(shí)將該元素所有同位素都包括在內(nèi)。例如提及氫時(shí)將111、2h(d)和sh(t)都包括在內(nèi)。同樣，提及碳和氧時(shí)分別將12。"c和"c及160和180都包括在內(nèi)。同位素可以是放射性或非放射性的。在本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案中，這些化合物不含放射性同位素。此類化合物優(yōu)選用于治療用途。然而，在另一個(gè)實(shí)施方案中，化合物可含有一種或多種放射性同位素。含有這類放射性同位素的化合物可用于診斷方面。式(I)還包括化合物的任何多晶型物、溶劑化物(例如水合物)、化合物的絡(luò)合物(例如與化合物(例如環(huán)糊精)的包合配合物或籠形包合物，或與金屬的絡(luò)合物)和化合物的前藥。術(shù)語"前藥"是指例如可在體內(nèi)轉(zhuǎn)化為本文定義的生物活性成分的任何化合物。例如，某些前藥是活性化合物的酯(例如生理上可接受的易代謝的酯)。在代謝期間，酯基(-C(K))OR)裂解，得到活性藥物?？赏ㄟ^例如使母體化合物中的任何幾基(-C(O)OH)酯化來形成這類酯，適當(dāng)時(shí)，先將母體化合物中存在的任何其它反應(yīng)基團(tuán)保護(hù)起來，隨后在需要時(shí)脫去保護(hù)。這類易代謝酯的實(shí)例包括其中R為以下基團(tuán)的式-C—0)OR的酯C,-7烷基(例如-Me、-Et、-nPr、-iPr、-nBu、-sBu、-iBu、-tBu);Cw氨基烷基(例如氨基乙基、2-(N,N-二乙基氨基)乙基、2-(4-嗎啉代)乙基)；酰氧基-Cw烷基(例如酰氧基曱基；酰氧基乙基；新戊酰氧基曱基；乙酰氧基曱基；l-乙酰氧基乙基；1-(1-甲氧基-1-甲基)乙基-羰基氧基乙基；l-(苯曱酰氧基)乙基；異丙氧基-羰基氧基曱基；l-異丙氧基-羰基氧基乙基；環(huán)己基-羰基氧基曱基；42l-環(huán)己基-羰基氧基乙基；環(huán)己基氧基-羰基氧基曱基；1-環(huán)己基氧基-羰基氧基乙基；(4-四氫吡喃基氧基)羰基氧基曱基；l-(4-四氫吡喃基氧基)羰基氧基乙基；(4-四氫吡喃基)羰基氧基曱基；和1-(4-四氫吡喃基)羰基氧基乙基)。同樣，一些前藥被酶激活得到活性化合物，或者化合物當(dāng)進(jìn)一步進(jìn)行化學(xué)反應(yīng)時(shí)得到活性化合物(例如抗體導(dǎo)向酶一前藥療法(Antibody-directedEnzymeProdrugTherapy,ADEPT)、基因?qū)蛎敢磺八幆煼?Gene-directedEnzymeProdrugTherapy，GDEPT)、聚合物導(dǎo)向酶一前藥療法(Polymer-directedEnzymeProdrugTherapy,PDEPT)、酉己體導(dǎo)向酶一前藥療法(Ligand-directedEnzymeProdrugTherapy,LIDEPT)，等等)。例如，所述的前藥可以是糖書f生物或其它糖苷綴合物，或可以是氨基酸酯衍生物。合成方法式(I)化合物及其i-對(duì)映異構(gòu)體及其混合物可通過流程1所示方法制備。流程1中，在堿(例如氫化鈉等氫化物堿)存在下，在二曱亞砜溶液中，通過與三曱基碘化锍反應(yīng)，使取代的二苯曱酮(IO)轉(zhuǎn)化為環(huán)氧化物(ll)。然后環(huán)氧化物(ll)通常在加熱時(shí)與氨的醇(例如甲醇)溶液反應(yīng)，得到胺(12),為i-對(duì)映異構(gòu)體和&對(duì)映異構(gòu)體的外消旋混合物?？稍赟uzuki偶合條件下，在鈀催化劑(例如四(三苯基膦)合鈀(O))存在時(shí)，使胺(12)直接與吡唑硼酸酯(例如4-(4，4,5,5-四甲基-[l,3,2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-lH-吡唑)反應(yīng)，得到外消旋化合物(15)。然而，現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)使未保護(hù)的胺在Suzuki偶合條件下反應(yīng)，得到相對(duì)較差的產(chǎn)物收率，且產(chǎn)物由于其溶解度低而相對(duì)難以純化?？朔@一問題的方法是，首先將氨基保護(hù)起來(例如用Boc基團(tuán)，其中PG-Boc),得到被保護(hù)的中間體(13),然后使中間體(13)進(jìn)行Suzuki偶合得到被保護(hù)的化合物(14)。纟皮保護(hù)的化合物(14)然后用眾所周知的方法脫保護(hù)(例如當(dāng)PG:Boc時(shí)，使用HCl的乙醚/曱醇溶液)，得到產(chǎn)物(15)，為外消旋混合物。流程1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>可通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法，例如采用手性色譜方法和本文所述的其它方法，拆分外消旋混合物(15)。另一方面，本發(fā)明提供式(15)化合物的制備方法，該方法包括從化合物(14)的化合物上脫去保護(hù)基PG，之后任選對(duì)化合物(15)的旋光異構(gòu)體進(jìn)行分離，分離出其S-對(duì)映異構(gòu)體。本發(fā)明還提供可通過前述方法制備的化合物，以及不論何時(shí)通過所述方法制備的式(15)化合物。又一方面，本發(fā)明提供式(15)化合物的制備方法，該方法包括(i)在Suzuki偶合條件下，在鈀催化劑(例如四(三苯基膦)合鈀(O))存在時(shí)，使式(13)化合物與下式(16)的吡唑衍生物反應(yīng)，得到式(14)化合物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage44</formula>其中X為基團(tuán)B(OH)2或硼酸酯基團(tuán)(例如4，4,5,5-四曱基-[l,3^]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)；(ii)從化合物(14)的化合物上脫去保護(hù)基PG，之后(iii)任選對(duì)化合物(15)的旋光異構(gòu)體進(jìn)行分離，分離出其S-對(duì)映異構(gòu)體。式(13)的中間體，特別是其中PG為Boc基團(tuán)的式(13)的中間體,構(gòu)成本發(fā)明的又一個(gè)方面。其中PG不是2-羧基-苯甲?；氖?14)的新的中間體，同樣構(gòu)成本發(fā)明的又一個(gè)方面。優(yōu)選的中間體(14)是其中PG為Boc基團(tuán)的化合物。作為上述方法和流程1所示方法的替代方法，式(I)化合物可以根據(jù)WO2005/061463(Astex)實(shí)施例84中所述方法制備，然后采用上述和本文其它部分所述的分離方法分離出S-對(duì)映異構(gòu)體。制備中間體化合物(12)的一種改進(jìn)方法如流程2中所示。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula>在流程2中，如上文流程l中所述，在石威存在下，在二甲亞石風(fēng)溶液中，通過與三曱基碘化锍反應(yīng)，使取代的二苯曱酮(10)轉(zhuǎn)化為環(huán)氧化物(ll)，只是氬化鈉堿用叔丁醇鉀替換。通常在室溫下，將叔丁醇鉀加到二苯甲酮(10)和三曱基碘化锍快速攪拌的混合物中。使用叔丁醇鉀而不是氳化鈉作為堿提供了重要的優(yōu)勢(shì)。首先，堿與DMSO反應(yīng)不形成曱基亞磺酰負(fù)碳離子(dimsylanion)，然后加入其它反應(yīng)物，正如當(dāng)使用氫化鈉作為堿時(shí)的情況，可將叔丁醇鹽加到預(yù)制成的二苯曱酮(IO)、三曱基碘化锍和二甲亞砜混合物中。這就意味著甲基亞磺酰負(fù)碳離子在形成后很快被消耗掉，因此在任何指定時(shí)間只有少量甲基亞磺酰負(fù)碳離子存在于反應(yīng)混合物中。因此使用叔丁醇鉀避免了形成高濃度的相對(duì)粘滯并稍有危險(xiǎn)的曱基亞磺酰鈉(dimsylsodium)。除了改善該方法的安全性以外，缺少高濃度粘滯的曱基亞磺酰鈉意味著反應(yīng)混合物更易攪拌，使得反應(yīng)物的混合更有效，避免了未反應(yīng)或不完全反應(yīng)原料的局部空穴(pocket),這是一種由在反應(yīng)期間形成的叔丁醇對(duì)于反應(yīng)物和產(chǎn)物均是良好溶劑的事實(shí)而放大的優(yōu)勢(shì)。當(dāng)大規(guī)模進(jìn)行反應(yīng)時(shí)，這些益處尤其明顯(例如制備50克以上量的環(huán)氧化物(ll),其中已經(jīng)發(fā)現(xiàn)使用叔丁醇鉀產(chǎn)生基本上更好的環(huán)氧化物(ll)收率和更好的純度(與使用氫化鈉為堿的反應(yīng)相比))。在流程1所示反應(yīng)順序中，在加熱時(shí)使環(huán)氧化物(ll)與氨的醇(例如曱醇)溶液反應(yīng)，得到胺(12)。這一類型的反應(yīng)可在微波反應(yīng)器中進(jìn)行，通常減壓進(jìn)行，在相對(duì)較小規(guī)模的反應(yīng)中得到良好收率和純度。然而，對(duì)于較大規(guī)模的反應(yīng)(例如生產(chǎn)50克以上量的胺(12))，則發(fā)現(xiàn)使環(huán)氧化物(ll)與疊氮化鈉反應(yīng)，然后使疊氮化物中間體(17)還原成胺(12),得到更好的收率和更高的純度。環(huán)氧化物(ll)與疊氮化鈉的反應(yīng)通常在極性溶劑中進(jìn)行，例如包含水的水性溶劑和水混溶性溶劑，例如丙酮。反應(yīng)通常在加熱時(shí)進(jìn)行，例如加熱至溶劑系統(tǒng)的回流溫度。疊氮基醇(17)向氨基醇(12)的轉(zhuǎn)化可通過與三苯基膦反應(yīng)后用含水酸溶液處理來實(shí)現(xiàn)，含水酸溶液特別是取代》黃酸的水溶液，優(yōu)選烷基磺酸或芳基磺酸，例如曱磺酸、乙磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸或樟腦磺酸。特別優(yōu)選使用4-曱苯磺酸。雖然不希望受任何理論的束縛，但是我們認(rèn)為該反應(yīng)如下進(jìn)行最初環(huán)化形成氮雜環(huán)丙烷后，在酸存在下通過開環(huán)作用，得到氨基醇。通過使用酸(特別是4-曱苯石黃酸)，可將氨基-醇分離成穩(wěn)定易處理的鹽，并易于純化。如果使用樟腦磺酸(例如d-樟腦磺酸)的旋光形式，則可以進(jìn)行鹽的分步結(jié)晶以將氨基醇(12)的兩個(gè)對(duì)映異構(gòu)體分成單獨(dú)的鹽。然后鹽用堿處理，得到氨基醇(12)的單一對(duì)映異構(gòu)體。我們認(rèn)為疊氮化物化合物(17)、氨基-醇(12)及其單一對(duì)映異構(gòu)體和氨基-醇(12)的S吏加成鹽及其對(duì)映異構(gòu)體是新的，因此，構(gòu)成本發(fā)明進(jìn)一步的方面。因此，在一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供本文定義的2-氨基-1-(4-氯-苯基)-l-[4-碘-苯基]-乙醇及其酸加成鹽。在另一個(gè)實(shí)施方案中，本發(fā)明提供本文定義的(W)2-氨基-1-(4-氯-笨基》1_[4-碘-苯基]-乙醇及其酸力。成鹽。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中，本發(fā)明提供本文定義的CS)2-氨基-1-(4-氯-苯基)-l-[4-碘-苯基]-乙醇及其S臾加成鹽。在前述三個(gè)實(shí)施方案的每一個(gè)中，優(yōu)選的酸加成鹽是與曱磺酸、乙磺酸、苯磺酸、曱苯磺酸或樟腦磺酸(例如d-樟腦磺S吏)形成的鹽。特別優(yōu)選的鹽是與4-曱苯磺酸形成的鹽。除了可用作合成中間體以外，式(12)化合物及其酸加成鹽具有針對(duì)激酶PKB的活性，因此可用于治療，特別是本文所述的式(I)化合物的用途(例如抗癌用途)。含有本文定義的式(12)化合物或其酸加成鹽的藥物組合物及藥學(xué)上可接受的載體、式(12)化合物或其酸加成鹽的治療用途構(gòu)成本發(fā)明的又一方面。另一方面，本發(fā)明提供式(12)化合物旋光形式的制備方法，該方法包括式(12)化合物酸加成鹽的分步結(jié)晶，其中所述鹽衍生自旋光酸(例如J-樟腦磺酸)。另一方面，本發(fā)明提供本文定義的式(12)化合物的制備方法，該方法包括在室溫以上的溫度(例如溶劑的回流溫度)下，在極性非質(zhì)子溶劑(例如四氬呋喃)中，使式(17)化合物與叔膦(例如三苯基膦)反應(yīng)后，用含水酸溶液(例如4-曱苯磺酸等取代磺酸)處理。作為三苯基膦的替代物，可以使用其它叔膦，這些包括其它三芳基膦(例如三曱苯基膦)、三烷基膦(例如三丁基膦)、三環(huán)烷基膦(例如三環(huán)己基膦)和含有芳基和/或烷基和/或環(huán)烷基的混合物的叔膦。然而，優(yōu)選三苯基膦。作為4-甲苯磺酸的替代物，可以使用其它取代磺酸；例如上文所述的烷基磺酸和芳基磺酸，例如曱磺酸、乙磺酸、苯磺酸和樟腦磺酸。另一方面，本發(fā)明提供式(17)化合物的制備方法，該方法包括在極性溶劑(例如含水丙酮等含水有機(jī)溶劑)中，優(yōu)選加熱(例如加熱到溶劑的回流溫度)時(shí)，使式(ll)環(huán)氧化物與堿金屬疊氮化物(例如疊氮化鈉)或三曱基，疊氮基甲硅烷(TMS-疊氮化物)反應(yīng)。又一方面，本發(fā)明提供式(12)化合物的制備方法，該方法包括下列步驟(a)使本文定義的式(11)化合物與4^金屬疊氮化物(例如疊氮化鈉)或三曱基.疊氮基曱硅烷反應(yīng)，得到式(17)化合物；(b)使式(17)化合物與(i)叔膦(例如三苯基膦)反應(yīng)，接著與(ii)酸反應(yīng)，例如取代磺酸，優(yōu)選烷基磺酸或芳基磺酸，例如曱磺酸、乙磺酸、苯磺酸或曱苯磺酸，最優(yōu)選4-甲^黃酸。在涉及使用疊氮化物的每一上述方法中，優(yōu)選堿金屬疊氮化物(例如疊氮化鋰、疊氮化鉀和疊氮化鈉)，最優(yōu)選疊氮化鈉。另一方面，本發(fā)明提供式(15)化合物即2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的制備方法；該方法包括(1)通過本文規(guī)定的方法制備式(12)化合物；(2)通過本文規(guī)定的方法，將式(12)化合物的氨基保護(hù)起來，得到式(13)化合物；(3)在Suzuki偶合條件下，在釔催化劑(例如四(三苯基膦)合鈀(O))存在時(shí)，使式(13)化合物與本文定義的式(16)吡唑衍生物反應(yīng)，得到式(14)化合物；(4)脫去式(14)化合物的保護(hù)基PG;任選之后(5)對(duì)化合物(15)的旋光異構(gòu)體進(jìn)行分離，分離出其S-對(duì)映異構(gòu)體。藥物制劑雖然可以單獨(dú)給予式(I)化合物，但是優(yōu)選本發(fā)明的組合物是藥物組合物(例如制劑)，所述藥物組合物包含至少一種本發(fā)明的活性化合物以及一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、輔料、賦形劑、稀釋劑、填充劑、緩沖劑、穩(wěn)定劑、防腐劑、潤(rùn)滑劑或本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的其它物質(zhì)和任選其它治療藥或預(yù)防藥。因此，本發(fā)明還提供如上定義的藥物組合物和藥物組合物的制備方法，該方法包括將式(I)化合物與一種或多種藥學(xué)上可接受的載體、賦形劑、緩沖劑、輔料、穩(wěn)定劑或本文所述的其它物質(zhì)相混合。本文所用術(shù)語"藥學(xué)上可接受的"涉及化合物、物質(zhì)、組合物和/或劑型，這些都在合理醫(yī)學(xué)判斷的范圍內(nèi)，適用于與受治療者(例如人)的組織接觸，而無過度的毒性、刺激性、變態(tài)反應(yīng)或其它問題或復(fù)雜情況，與合理的利益/風(fēng)險(xiǎn)比率相稱。各種載體、賦形劑等在與制劑其它成分相配伍的意義上也必須是"可接受的"?？砂凑找阎夹g(shù)配制含有本文定義的組合物的藥物組合物，參見例^口Remington'sPharmaceuticalSciences,MackPublishingCompany,Easton,PA,USA。因此，又一方面，本發(fā)明以藥物組合物的形式提供本文定義的組合物。藥物組合物可以是適合于口服、胃腸外、局部、鼻內(nèi)、目艮、耳、直腸、陰道內(nèi)或經(jīng)皮給藥的任何形式。當(dāng)組合物欲用于胃腸外給藥時(shí)，可將其配制成靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、腹膜內(nèi)、皮下給藥形式，或通過注射、輸注或其它遞藥方式直接遞送到耙器官或靶組織。可以通過推注、短期輸注或長(zhǎng)期輸注來遞藥，并且可通過纟皮動(dòng)遞藥或通過4吏用合適的輸注泵遞藥。適于胃腸外給藥的藥物制劑包括水性無菌注射溶液劑和非水性無菌注射溶液劑，其中可以含有抗氧化劑、緩沖劑、抑菌劑、助溶劑、有機(jī)溶劑混合物、環(huán)糊精絡(luò)合劑、乳化劑(用于形成和穩(wěn)定乳劑)、用于形成脂質(zhì)體的脂質(zhì)體組分、用于形成聚合凝膠的可膠凝聚合物、冷凍干燥防護(hù)劑及與特別用于穩(wěn)定可溶形式的活性組分并使制劑與既定接受治療者的血液等滲的成分的組合。用于胃腸外給藥的藥物制劑還可呈水性無菌混懸劑和非水性無菌混懸劑的形式，其中可以含有懸浮劑和增稠劑(R.G.Strickly，SolubilizingExcipientsinoralandinjectableformulations(口服制劑和注射制劑中的增溶賦形劑)，PharmaceuticalResearch,第21(2)巻，2004,第201-230頁)。脂質(zhì)體是封閉的球形小泡，由外部脂雙層膜和內(nèi)部水性核組成，其總體直徑〈10(MVI。根據(jù)疏水性程度，如果將適度疏水的藥物封裝或置入脂質(zhì)體內(nèi)，該藥物則可以通過脂質(zhì)體增溶。如果藥物分子變成脂雙層膜的組成部分，那么疏水藥物也可通過脂質(zhì)體增溶，在這種情況下，疏水藥物溶于脂雙層的脂質(zhì)部分。制劑可以單位劑量或多劑量容器提供，例如密封的安瓿和小瓶，并且可以保存在冷凍干燥(凍干)條件下，僅需要在臨用前加入無菌液體載體，例如注射用水?？梢酝ㄟ^將式(I)化合物凍干來制備藥物制劑。凍干是指將組合物冷凍干燥的方法。因此，冷凍千燥和凍干在本文中用作同義詞?？梢杂蔁o菌粉針劑、顆粒劑和片劑制備臨用時(shí)配制的注射溶液劑和混懸劑。用于胃腸外注射的本發(fā)明的藥物組合物還可包含藥學(xué)上可接受的無菌水性或非水性溶液劑、分散體、混懸劑或乳劑以及在臨用前復(fù)溶成無菌注射溶液劑或分散體的無菌粉針劑。合適的水性和非水性載體、稀釋劑、溶劑或溶媒的實(shí)例包括水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)、羧曱基纖維素及其合適的混合物、植物油(例如橄欖油)和注射用有機(jī)酯例如油酸乙酯?？赏ㄟ^例如使用包衣材料(例如卵磷脂)，在分散體的情況下通過維持所需粒徑以及通過使用表面活性劑，來維持適當(dāng)?shù)牧鲃?dòng)性。本發(fā)明的組合物還可含有輔料，例如防腐劑、潤(rùn)濕劑、乳化劑和分散劑。可通過加入各種抗細(xì)菌藥和抗真菌藥，例如對(duì)羥基苯甲酸酯、三氯叔丁醇、苯酚、山梨酸等，來確保防止微生物的作用。還可能需要包括等滲劑，例如糖、氯化鈉等?？赏ㄟ^加入延緩吸收的成分例如單硬脂酸鋁和明膠，來延長(zhǎng)注射用藥物形式的吸收。在本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施方案中，藥物組合物為適于靜脈內(nèi)給藥的形式，例如通過注射或輸注。對(duì)于靜脈內(nèi)給藥，可以照原樣給予溶液劑，或者可在給藥前注入輸注袋(含有藥學(xué)上可接受的賦形劑，例如0.9%鹽水或5%右旋糖)。在另一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案中，藥物組合物為適于皮下(s.c.)給藥的形式。適于口服給藥的藥物劑型包括片劑、膠嚢劑、嚢片劑、丸劑、糖錠劑、糖漿劑、溶液劑、散劑、顆粒劑、酏劑和混懸劑、舌下片劑、糯米紙嚢劑或貼劑和口腔貼劑。因此，片劑組合物可以含有單位劑量的活性化合物以及惰性稀釋劑或載體例如乳糖、蔗糖、山梨糖醇或甘露醇等糖或糖醇；和/或如碳酸鈉、磷酸釣、碳酸4丐等非糖衍生的稀釋劑，或者如甲基纖維素、乙基纖維素、羥丙基曱基纖維素等纖維素或其衍生物及淀粉如玉米淀粉。片劑還可以含有標(biāo)準(zhǔn)成分例如粘合劑和制粒劑(例如聚乙烯吡咯烷酮)、崩解劑(例如可溶脹的交聯(lián)聚合物，例如交聯(lián)羧曱基纖維素)、潤(rùn)51滑劑(例如硬脂酸酯)、防腐劑(例如對(duì)羥基苯曱酸酯)、抗氧化劑(例如BHT)、緩沖劑(例如磷酸鹽或檸檬酸鹽緩沖劑)和泡騰劑(例如檸檬酸鹽/碳酸氬鹽混合物)。這些賦形劑是眾所周知的，無需在此詳加論述。膠嚢劑可以是硬明膠或軟明膠類并且可以含有固體、半固體或液體形式的活性組分。明膠膠嚢劑可以由動(dòng)物明膠或其合成或植物衍生的等同物進(jìn)行制備。固體劑型(例如片劑、膠嚢劑等)可以是包衣的或未包衣的，但是通常是包衣的，例如保護(hù)性薄膜包衣(例如石蠟或清漆)或控釋包衣?？梢詫?duì)包衣材料(例如EudragitTM型聚合物)進(jìn)行設(shè)計(jì)，以^^在胃腸道所需部位釋放活性組分。因此，可以選擇包衣材料以便在胃腸道內(nèi)特定的pH條件下降解，從而在胃或回腸或十二指腸中選擇性地釋放出化合物。代替包衣或除包衣以外，藥物可以存在于固體基質(zhì)中，固體基質(zhì)包含控釋劑，例如在胃腸道酸性或堿性發(fā)生改變的條件下適于選擇性地釋放化合物的遲釋劑?；蛘?，骨架材料或遲釋包衣材料可以呈易蝕聚合物(例如馬來酐聚合物)的形式，當(dāng)劑型通過胃腸道時(shí)受到基本上連續(xù)的侵蝕。作為又一個(gè)替代品，所述的活性化合物可以配制成提供化合物滲透控釋的遞藥系統(tǒng)。可以按照本領(lǐng)域技術(shù)人員熟知的方法制備滲透釋放制劑和其它遲釋或緩釋制劑。藥物組合物包含約1%至約95%、優(yōu)選約20%至約90%的活性成分。本發(fā)明的藥物組合物可為例如單位劑量形式，例如安瓿劑、小瓶劑、栓劑、錠劑、片劑或膠嚢劑的形式。可通過將活性成分與固體載體相混合，如有需要，將所得混合物制成粒，并且如有需要或必需，在加入合適的賦形劑后，將混合物加工成片劑、錠劑芯(drageecores)或膠嚢劑，從而得到用于口服給藥的藥物組合物。還可以將其摻入塑性載體(plasticscarrier)中，該塑性載體供活性成分以精確的量擴(kuò)散或釋放。本發(fā)明的化合物還可配制成固體分散體。固體分散體是兩種或更多種固體極微細(xì)的均勻分散相。固體分散體的一種類型即固溶體(分子分散系統(tǒng))是眾所周知的制藥技術(shù)(參見Chiou和Riegelman,J.Pharm,Sci.,60,1281-1300(1971)),可用于提高溶出速率，并且提高水溶性差的藥物的生物利用度。本發(fā)明還提供包含上述固溶體的固體劑型。固體劑型包括片劑、膠嚢劑和咀嚼片?？蓪⒁阎馁x形劑與固溶體混合以提供所需劑型。例如，膠嚢劑可含有與以下成分混合的固溶體(a)崩解劑和潤(rùn)滑劑，或(b)崩解劑、潤(rùn)滑劑和表面活性劑。片劑可含有與崩解劑、潤(rùn)滑劑、表面活性劑和助流劑的至少一種相混合的固溶體。咀嚼片可含有與填充劑、潤(rùn)滑劑相混合，如有需要還與額外的甜味劑(例如人造甜味劑)和合適的矯味劑相混合的固溶體?？梢詥蝹€(gè)包裝(一般為泡罩包裝)中包括整個(gè)療程的"患者包裝(patientpack)",向患者提供藥物制劑?；颊甙b具有優(yōu)于藥劑師從批量供應(yīng)中分出患者藥物供應(yīng)量的傳統(tǒng)處方藥的優(yōu)點(diǎn)，因?yàn)榛颊呖偰芾醚b在患者包裝中的包裝說明書，在患者處方藥中通常沒有包裝說明書。已經(jīng)證實(shí)裝入包裝說明書改善了患者對(duì)醫(yī)師醫(yī)囑的順應(yīng)性。局部使用的組合物包括軟膏劑、乳膏劑、噴霧劑、貼劑、凝膠劑、液體滴劑和插入物(例如眼內(nèi)插入物(intraocularinsert))。這些組合物可以按照已知方法配制。用于直腸或陰道內(nèi)給藥的劑型的實(shí)例包括陰道栓劑和栓劑，這類劑型可以由例如含有活性化合物的可模壓成形材料或蠟狀材料制備。通過吸入給藥的組合物可呈可吸入粉末組合物或者液體或粉末噴霧劑的形式，可用粉末吸入裝置或氣霧劑分散裝置,按標(biāo)準(zhǔn)形式給藥。這類裝置是眾所周知的。對(duì)于吸入給藥，粉末劑通常含有活性化合物與惰性固體粉末稀釋劑，例如乳糖。組合物一般呈單位劑型，因此，通常含有足夠的化合物以提供所需要的生物活性水平。例如，制劑可含有1納克至2克的活性成分，例如1納克至2毫克的活性成分。在這個(gè)范圍內(nèi)，具體細(xì)分的化合物為0.1毫克至2克的活性成分(更通常10毫克至1克，例如50毫克至500毫克)，或1微克至20毫克(例如1微克至10毫克，例如0.1毫克至2毫克的活性成分)。對(duì)于口服組合物，單位劑型可含有1毫克至2克，更通常10毫克至l克，例如50毫克至1克，例如100毫克至1克的活性化合物?？梢宰阋赃_(dá)到所需治療效果的量給予有需要的患者(例如人或動(dòng)物患者)活性化合物。蛋白激酶抑制活性可以采用下面實(shí)施例中所述實(shí)驗(yàn)測(cè)定作為蛋白激酶A和蛋白激酶B抑制劑的式(I)化合物的活性，給定化合物所具有的活性水平可由ICso值確定。治療用途增殖性病癥的預(yù)防或治療式(I)化合物是蛋白激酶A和蛋白激酶B的抑制劑。因此，可用于提供防止腫瘤生長(zhǎng)或誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的手段。因此，可以證實(shí)本發(fā)明的組合物可用于治療或預(yù)防增殖性病癥，例如癌癥。特別是具有PTEN缺失或失活突變或者在(T-細(xì)胞淋巴細(xì)胞)TCL-1基因中喪失PTEN表達(dá)或重排的腫瘤可能對(duì)PKB抑制劑尤其敏感。具有導(dǎo)致PKB途徑信號(hào)上調(diào)的其它異常情況的腫瘤也可能對(duì)PKB抑制劑尤其每文感。這類異常情況的實(shí)例包括但不限于一個(gè)或多個(gè)PI3K亞基過量表達(dá)、一種或多種PKB同等型過量表達(dá)、或?qū)е滤雒富A(chǔ)活性增加的PI3K、PDK1或PKB突變、或生長(zhǎng)因子受體上調(diào)過量表達(dá)或突變活化，所述生長(zhǎng)因子受體例如選自以下的生長(zhǎng)因子受體表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(FGFR)、血小板衍生生長(zhǎng)因子受體(PDGFR)、胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(VEGFR)家族。本發(fā)明的組合物還可用于治療由增殖或存活障礙(例如病毒感染)以及例如神經(jīng)變性性疾病所引起的其它病癥。PKB在免疫應(yīng)答期間在維持免疫細(xì)胞的存活中起重要作用，因此PKB抑制劑可能特別有益于免疫障礙，包括自身免疫病。因此，PKB抑制劑可用于治療其中存在增殖、細(xì)胞凋亡或分化障礙的疾病。PKB抑制劑還可用于由胰島素抵抗和胰島素不敏感以及葡萄糖、能量和脂肪貯存遭破壞引起的疾病，例如代謝疾病和肥胖癥?？?皮抑制的癌癥的實(shí)例包括但不限于癌，例如膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸癌(例如結(jié)腸直腸癌，例如結(jié)腸腺癌和結(jié)腸腺瘤)、腎癌、表皮癌、肝癌、肺癌(例如腺癌、小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌)、食道癌、膽嚢癌、卵巢癌、胰腺癌(例如外分泌源性胰腺癌)、胃癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、曱狀腺癌、前列腺癌或皮膚癌(例如鱗狀細(xì)胞癌)、淋巴系造血系統(tǒng)腫瘤(例如白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、B細(xì)胞淋巴瘤、多發(fā)性骨髓廇、T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤(Hodgkin，slymphoma),非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤(Burkitt'slymphoma))、髓系造血系統(tǒng)腫瘤(例如急性和慢性髓細(xì)胞白血病、骨髓增生性異常綜合征或前髓細(xì)胞白血病)、骨髓增生綜合征、甲狀腺濾泡性癌、間充質(zhì)起因的腫瘤(例如纖維肉瘤或^f黃紋fl肉瘤)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤(例如星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤或神經(jīng)鞘瘤)、黑素瘤、4青原細(xì)月包瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、著色性干皮病(xenoderomapigmentosum),角化,束皮瘤(keratoctanthoma)、曱狀l^濾泡性癌或卡波西肉瘤(Kaposi'ssarcoma)。因此，在用于治療包括細(xì)胞生長(zhǎng)異常的疾病或病癥的本發(fā)明的藥物組合物、用途或方法中，在一個(gè)實(shí)施方案中包括細(xì)胞生長(zhǎng)異常的疾病或病癥是癌癥。癌癥的具體分組包括乳腺癌、卯巢癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、食道癌、鱗狀細(xì)胞癌和非小細(xì)胞肺癌。癌癥的又一分組包括乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌和神經(jīng)月交質(zhì)瘤。本發(fā)明的組合物還可與其它抗癌藥組合使用。這類組合的實(shí)例如下。免疫障礙疾病和慢性炎癥性疾病，例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫介導(dǎo)的腎小球性腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、炎性腸病和自身免疫糖尿病、濕滲過l丈反應(yīng)(Eczemahypersensitivityreaction),譯喘、COPD、鼻炎和上呼p及道疾病。其它治療用途PKB在細(xì)胞凋亡、增殖、分化中起作用，因此式(I)化合物還可用于治療癌癥以外的下列疾病和與免疫功能障礙有關(guān)的疾??；病毒感染，例如皰滲病毒、痘病毒、埃巴病毒、新培斯病毒、腺病毒、HIV、HPV、HCV和HCMV;防止HIV感染個(gè)體的AIDS發(fā)展；心血管疾病，例如心臟肥大、再狹窄、動(dòng)^K粥樣卩哽化；神經(jīng)變性性疾病，例如阿爾茨海默病、AIDS相關(guān)性癡呆、帕金森病、肌萎縮性側(cè)索硬化、色素性視網(wǎng)膜炎、脊髓性肌萎縮和小腦變性；腎小球性腎炎；骨髓增生性異常綜合征；與心肌梗死、中風(fēng)和再灌注損傷有關(guān)的缺血性損傷；肌肉骨骼系統(tǒng)變性疾病，例如骨質(zhì)疏爭(zhēng)>癥和關(guān)節(jié)炎；阿司匹林敏感性鼻竇炎；嚢性纖維變性；多發(fā)性硬化；腎病。與ROCK激酶抑制活性有關(guān)或由其產(chǎn)生的用途式(I)化合物調(diào)節(jié)(例如抑制)ROCK激酶的活性。因此，該化合物可用于(a)治療或預(yù)防其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)ROCK激酶的疾病或病癥；和/或(b)治療其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)ROCK激酶的受治療者或患者群；和/或(c)治療或預(yù)防其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的疾病或病癥。因此，本發(fā)明可用于與選自以下的有關(guān)疾病和病癥(a)腫瘤轉(zhuǎn)移；(b)腫瘤侵襲；(c)腫瘤進(jìn)程；(d)腫瘤粘附(例如腫瘤細(xì)胞粘附)；(e)依賴ii線菌素收縮小生的月中瘤4爭(zhēng)移(actinomycincontractility-dependenttumourmetastasis),侵襲或進(jìn)程；(f)細(xì)胞轉(zhuǎn)化；(g)ROCK介導(dǎo)的腫瘤轉(zhuǎn)移、侵襲、進(jìn)程或粘附；(h)ROCK介導(dǎo)的依賴放線菌素收縮性的腫瘤轉(zhuǎn)移、侵襲或進(jìn)程；(i)ROCK介導(dǎo)的細(xì)胞轉(zhuǎn)化。本發(fā)明還用于有關(guān)癌癥(例如ROCK介導(dǎo)的癌)，尤其是選自以下的癌癥(例如為ROCK介導(dǎo)的癌癥)(a)睪丸生殖細(xì)胞腫瘤；(b)具有轉(zhuǎn)移能力的小乳腺癌；(c)膀胱癌；(d)卵巢癌；(e)前列腺癌和(f)肝細(xì)胞癌。其它適用的疾病和病癥包括本文所界定的任何癌癥的侵襲、轉(zhuǎn)移和腫瘤進(jìn)程。本發(fā)明還用于有關(guān)心血管疾病或病癥，特別是選自以下的疾病或病癥(a)高血壓；(b)心臟功能障礙(例如慢性和充血性心力衰竭)；(c)心臟肥大；(d)再狹窄；(e)腎功能障礙(例如慢性腎衰竭)；(f)動(dòng)脈粥樣硬化(動(dòng)脈硬化)；(g)心臟保護(hù)；(h)同種異體移植物存活；(i)腦缺血；(j)冠狀血管痙攣；(k)血管炎癥。其它適用的疾病和病癥包括肌肉(例如平滑肌)功能障礙，例如選自(a)哮喘；(b)陰莖勃起功能障礙；(c)女性性功能障礙；(d)膀胱過度活動(dòng)綜合征；(e)平滑肌異常(例如與高血壓相關(guān)的異常)。其它適用的疾病和病癥包括炎癥，其中例如炎癥包括或表現(xiàn)為(a)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎；(b)過敏性腸綜合征；(c)炎性腸??；(d)血管炎癥；(e)神經(jīng)炎癥性疾病或病癥。在有關(guān)神經(jīng)炎癥性疾病或病癥的實(shí)施方案中，這些可以選自(a)中風(fēng)；(b)多發(fā)性硬化；(c)阿爾茨海默病；(d)帕金森??；(e)肌萎縮性側(cè)索硬化；(f)炎癥性疼痛。其它適用的疾病和病癥包4舌CNS疾病或病癥，包4舌選自以下的疾病或病癥(a)脊髓損傷或創(chuàng)傷；(b)腦損傷或創(chuàng)傷；(c)急性神經(jīng)元損傷(例如中風(fēng)或創(chuàng)傷性腦損傷)；(d)帕金森病；(e)阿爾茨海默病；(f)神經(jīng)變性性病癥或疾?。?g)中風(fēng)(例如與高血壓相關(guān)的中風(fēng))；(h)腦血管痙攣；(i)神經(jīng)突生長(zhǎng)和萌發(fā)受抑制；(j)神經(jīng)突再生受抑制；(k)創(chuàng)傷后功能恢復(fù)受損；(l)脫髓鞘疾病或病癥；(m)炎癥性CNS疾病或病癥；(n)神經(jīng)病性疼痛；(o)神經(jīng)變性。其它適用的CNS疾病或病癥包括選自以下的疾病或病癥唐氏綜合征(Downssyndrome)和P-淀粉樣血管病，例如但不限于腦淀粉樣血管病、遺傳性腦出血、認(rèn)知減退相關(guān)性疾病，例如但不限于MCI("輕度認(rèn)知減退")、阿爾茨海默病、記憶喪失、與阿爾茨海默病相關(guān)的注意力缺陷癥狀、與以下疾病相關(guān)的神經(jīng)變性例如阿爾茨海默病或癡呆，包括血管性和退變性起因混合型癡呆、早老性癡呆、老年性癡呆和帕金森病相關(guān)性癡呆、進(jìn)行性核上性麻痹或皮質(zhì)基底節(jié)變性(corticalbasaldegeneration)、帕金森病、額顳癡呆帕金森型、關(guān)島型帕金森癡呆復(fù)征、HIV癡呆、神經(jīng)原纖維纏結(jié)病理相關(guān)性疾病、拳擊運(yùn)動(dòng)員癡呆、肌萎縮性側(cè)索硬化、皮質(zhì)基底節(jié)變性、唐氏綜合征、亨廷頓舞蹈病、腦炎后帕金森病、進(jìn)行性核上性麻痹、皮克病(Pick'sDisease)、尼曼-皮克病(Niemann-Pick'sDisease)、中風(fēng)、頭部創(chuàng)傷和其它慢性神經(jīng)變性性疾病、雙相性神經(jīng)疾病(BipolarDisease)、情感障礙、抑郁癥、焦慮癥、精神分裂癥、認(rèn)知障礙、脫發(fā)、避孕療法、癡呆前期(predementedstate)、年齡相關(guān)性記憶缺損(Age-AssociatedMemoryImpairment),年齡相關(guān)性認(rèn)知減退、非癡呆型i人知缺損(CognitiveImpairementNoDementia)、輕度認(rèn)知減退、輕度神經(jīng)認(rèn)知減退、晚年健忘、記憶缺陷和認(rèn)知減退、血管性癡呆、具有路易體的癡呆、額顳癡呆和雄激素性脫發(fā)。仍有其它適用的疾病和病癥包括(a)胰島素抵抗；(b)移植物保護(hù)(例如心血管或炎癥性移才直物保護(hù)(inflammatorygraftprotection));(c)糖尿病；(d)哮喘；(e)肺血管收縮；(f)青光眼；(g)纖維變性(例如肝纖維變性和腎纖維變性)。其它適用的疾病和病癥包4舌感染性疾病或病癥，包4舌后生動(dòng)物、原生動(dòng)物、真菌、朊病毒、病毒或細(xì)菌4曼染、疾病或感染。在這類實(shí)施方案中，感染性疾病或病癥可包括病原體介導(dǎo)的細(xì)胞骨架重排。增殖性病癥(包括癌癥)本發(fā)明還用作防止腫瘤生長(zhǎng)或誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的手段。因此預(yù)期本發(fā)明將證實(shí)可用于治療或預(yù)防增殖性病癥，例如癌癥。這類異常情況的實(shí)例包括但不限于一個(gè)或多個(gè)Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑成員過量表達(dá),或?qū)е翿OCK激酶或Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑基礎(chǔ)活性增加的所述成員的突變(Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑或可能與例如選自以下的生長(zhǎng)因子受體上調(diào)或過量表達(dá)或突變活化有關(guān)表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)、成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(FGFR)、血小板4汙生生長(zhǎng)因子受體(PDGFR)、胰島素樣生長(zhǎng)因子1受體(IGF-1R)和血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體(VEGFR)家族)。另預(yù)期本發(fā)明可用于治療由增殖或存活障礙(例如病毒感染)和例如神經(jīng)變性性疾病引起的其它病癥。因此，本發(fā)明廣泛用于治療其中存在增殖、細(xì)胞凋亡或分化障礙的疾病?？杀灰种频陌┌Y的實(shí)例包括但不限于癌，例如膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸癌(例如結(jié)腸直腸癌，例如結(jié)腸腺癌和結(jié)腸腺瘤)、腎癌、表皮癌、肝癌、肺癌(例如腺癌、小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌)、食道癌、膽嚢癌、卵巢癌、胰腺癌(例如外分泌源性胰腺癌)、胃癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、曱狀腺癌、前列腺癌或皮膚癌(例如鱗狀細(xì)胞癌)、淋巴系造血系統(tǒng)腫瘤(例如白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、B細(xì)胞、淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤)、髓系造血系統(tǒng)腫瘤(例如急性和慢性髓細(xì)胞白血病、骨髓增生性異常綜合征或前髓細(xì)胞白血病)、曱狀腺濾泡性癌、間充質(zhì)起因的腫瘤(例如纖維肉瘤或橫紋肌肉瘤)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤(例如星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤或神經(jīng)鞘瘤)、黑素瘤、精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、著色性干皮病、角化棘皮瘤、甲狀腺濾泡性癌或卡波西肉瘤。淋巴系造血系統(tǒng)腫瘤的又一個(gè)實(shí)例是多發(fā)性骨髓廇。癌癥的具體分組包括乳腺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、食道癌、鱗狀細(xì)胞癌和非小細(xì)胞肺癌。癌癥的又一分組包括乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌和神經(jīng)膠質(zhì)瘤。增殖障礙的另一個(gè)實(shí)例是骨髓增生綜合征。免疫障礙本發(fā)明可對(duì)其有益的免疫障礙包括但不限于自身免疫疾病和慢性炎癥性疾病，例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫介導(dǎo)的腎小球性腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、炎性腸病、自身免疫糖尿病、濕滲過4文反應(yīng)、哮喘、COPD、鼻炎和上呼吸道疾病。其它治療用途ROCK介導(dǎo)的生理過程在細(xì)胞凋亡、增殖、分化中起作用，因此，本發(fā)明還可用于治療癌癥以外的下列疾病和與免疫功能障礙有關(guān)的疾??；病毒感染，例如皰疹病毒、痘病毒、埃巴病毒、新培斯病毒、腺病毒、HIV、HPV、HCV和HCMV;防止HIV感染個(gè)體的AIDS發(fā)展；心血管疾病，例如心臟肥大、再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化；神經(jīng)變性性疾病，例如阿爾茨海默病、AIDS相關(guān)性癡呆、帕金森病、肌萎縮性側(cè)索硬化、色素性視網(wǎng)膜炎、脊髓性肌萎縮和小腦變性；腎小球性腎炎；骨髓增生性異常綜合征；與心肌梗死、中風(fēng)和再灌注損傷有關(guān)的缺血性損傷；肌肉骨骼系統(tǒng)變性疾病，例如骨質(zhì)疏松癥和關(guān)節(jié)炎；阿司匹林敏感性鼻竇炎；嚢性纖維變性；多發(fā)性硬化；腎病。本發(fā)明還可用于由胰島素抵抗和胰島素不敏感以及葡萄糖、能量和脂肪貯存遭^皮壞引起的疾病，例如代i射疾病和肥胖癥。本發(fā)明包括ROCK介導(dǎo)的任何類型疾病的干預(yù)、治療或預(yù)防。因此，本發(fā)明可用于有關(guān)治療或預(yù)防，包括(a)調(diào)節(jié)(例如抑制)ROCK激酶；或(b)在ROCK激酶活性水平進(jìn)行干預(yù)；或(c)在Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑水平(例如RhoA和/或RhoC水平)上進(jìn)行干預(yù)。其它適用的方法包括達(dá)到以下效果的干預(yù)法(a)肌肉(例如平滑肌)松弛；(b)血管肌肉松弛(例如以增加血管的血流量)；(c)神經(jīng)細(xì)胞調(diào)節(jié)；(d)減少細(xì)胞增殖；(e)減少細(xì)胞遷移；(f)在病原體侵襲或感染時(shí)抑制細(xì)胞骨架重排；(g)加快組織再生；(h)加快創(chuàng)傷后功能恢復(fù)。在這類實(shí)施方案中，神經(jīng)細(xì)胞調(diào)節(jié)可包括(a)神經(jīng)元再生；(b)新軸突生長(zhǎng)誘導(dǎo)；(c)穿過CNS內(nèi)病變的軸突再接；(d)神經(jīng)突長(zhǎng)出；(e)神經(jīng)突分化；(f)軸突尋路；(g)樹突棘形成；(h)樹突棘維持；(i)神經(jīng)突生長(zhǎng)錐瓦解的調(diào)節(jié)；(j)神經(jīng)突長(zhǎng)出抑制的調(diào)節(jié)。其它適用的治療包括移植療法(例如包含移植物保護(hù))。另外其它適用的方法包4舌疾病或病癥的i貪斷和治療方法，該方法包括(i)篩選患者以確定患者所患或可能患上的疾病或病癥是否是對(duì)用具有針對(duì)ROCK激酶活性的化合物治療敏感的疾病或病癥；(ii)如果表明患者所患疾病或病癥對(duì)此敏感，則隨后給予患者本發(fā)明的化合物。受治療者或患者群可以選自(a)其中ROCK激酶發(fā)生功能障礙(例如活性過高)的受治療者或患者群；(b)已進(jìn)行ROCK功能障礙(例如ROCK活性過高)診斷試驗(yàn)的受治療者或患者群；(c)其中Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑發(fā)生功能障礙的受治療者或患者群；(d)已進(jìn)行Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑功能障礙診斷試驗(yàn)的受治療者或患者群。與。70S6K激酶抑制活性有關(guān)或由其產(chǎn)生的用途式(I)化合物調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶p70S6K活性。因此化合物可用于(a)治療或預(yù)防其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶p70S6K的疾病或病癥；和/或(b)治療其中需要調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶p70S6K的受治療者或患者群。因此本發(fā)明用于選自以下的有關(guān)病癥(a)癌癥(例如p70S6K介導(dǎo)的癌癥)；(b)腫瘤轉(zhuǎn)移；(c)免疫功能障礙；(d)組織損傷(例如由炎癥引起的組織損傷)；(e)染色體17q23擴(kuò)增(或由其引起或與之有關(guān)的病癥)；(f)佩-吉綜合征(或由其引起或與之有關(guān)的病癥)；(g)LKBl突變(或由其引起或與之有關(guān)的病癥)；(h)BRCA1突變(或由其引起或與之有關(guān)的病癥)；(i)BRCA2突變(或由其引起或與之有關(guān)的病癥)；(j)細(xì)胞凋亡程序功能障礙；(k)腫瘤組織中的生長(zhǎng)因子受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、過量表達(dá)和活化；(l)代謝疾病或障礙；(m)與細(xì)胞增殖和/或代謝異常有關(guān)的病癥S(n)神經(jīng)元病癥。在這類實(shí)施方案中，由染色體17q23擴(kuò)增引起或與之有關(guān)的疾病或病癥可以選自(a)原發(fā)性乳腺腫瘤；(b)含有BRCA2突變的腫瘤(例如乳腺肺瘤)；(c)含有BRCAl突變的腫瘤(例如乳腺腫瘤)；(d)胰腺腫瘤；(e)膀胱腫瘤；(f)成神經(jīng)細(xì)胞瘤。由LKB1突變引起或與之有關(guān)的疾病或病癥可為含有LKB1突變(例如失活LKB1突變)的肺腺癌。由BRCA1/2突變引起或與之有關(guān)的疾病或病癥可為乳腺癌。代謝疾病或障礙可以選自(a)肥胖癥(例如年齡誘發(fā)的肥胖癥或飲食誘發(fā)的肥胖癥)；(b)糖尿??；(c)代謝綜合征；(d)胰島素抵抗；(e)高血糖癥；(f)高氨基酸血癥；(g)高脂血癥。增殖性病癥(包括癌癥)本發(fā)明還用作防止腫瘤生長(zhǎng)或誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的方法。因此預(yù)期本發(fā)明將證實(shí)可用于治療或預(yù)防增殖性病癥，例如癌癥。這類異常情況的實(shí)例包括但不限于p70S6K過量表達(dá)(或本文所述的其它綜合征)。另還預(yù)期本發(fā)明可用于治療由增殖或存活障礙(例如病毒感染)和例如神經(jīng)變性性疾病引起的其它病癥。因此本發(fā)明廣泛用于治療其中存在增殖、細(xì)胞凋亡或分化障礙的疾病?？蓛羝ひ种频陌┌Y的實(shí)例包括〗旦不限于癌，例如膀胱癌、乳腺癌、結(jié)腸癌(例如結(jié)腸直腸癌，例如結(jié)腸腺癌和結(jié)腸腺瘤)、腎癌、表皮癌、肝癌、肺癌(例如腺癌、小細(xì)胞肺癌和非小細(xì)胞肺癌)、食道癌、膽嚢癌、卵巢癌、胰腺癌(例如外分泌源性胰腺癌)、胃癌、宮頸癌、子宮內(nèi)膜癌、曱狀腺癌、前列腺癌或皮膚癌(例如鱗狀細(xì)胞癌)、淋巴系造血系統(tǒng)腫瘤(例如白血病、急性淋巴細(xì)胞白血病、B細(xì)胞淋巴瘤、T細(xì)胞淋巴瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、毛細(xì)胞淋巴瘤或伯基特淋巴瘤)、髓系造血系統(tǒng)腫瘤(例如急性和慢性髓細(xì)胞白血病、骨髓增生性異常綜合征或前髓細(xì)胞白血病)、曱狀腺濾泡性癌、間充質(zhì)起因的腫瘤(例如纖維肉瘤或橫紋肌肉瘤)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)和外周神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤(例如星形細(xì)胞瘤、成神經(jīng)細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤或神經(jīng)鞘瘤)、黑素瘤、精原細(xì)胞瘤、畸胎瘤、骨肉瘤、著色性干皮病、角化棘皮瘤、曱狀腺濾泡性癌或卡波西肉瘤。淋巴系造血系統(tǒng)腫瘤的又一個(gè)實(shí)例是多發(fā)性骨髓廇。癌癥的具體分組包括乳腺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌、前列腺癌、食道癌、鱗狀細(xì)胞癌和非小細(xì)胞肺癌。癌癥的又一分組包括乳腺癌、卵巢癌、前列腺癌、子宮內(nèi)膜癌和神經(jīng)膠質(zhì)瘤。增殖障礙的另一個(gè)實(shí)例是骨髓增生綜合征。免疫障礙本發(fā)明對(duì)其可能是有益的免疫障礙包括但不限于自身免疫疾病和慢性炎癥性疾病，例如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、自身免疫介導(dǎo)的腎小球性腎炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、炎性腸病、自身免疫糖尿病、濕滲過敏反應(yīng)、哞喘、COPD、鼻炎和上呼吸道疾病。其它治療用途p70S6K介導(dǎo)的生理過程在細(xì)胞凋亡、增殖、分化中起作用，因此本發(fā)明還可用于治療癌癥以外的下列疾病和與免疫功能障礙有關(guān)的疾病病毒感染，例如皰滲病毒、痘病毒、埃巴病毒、新培斯病毒、腺病毒、HIV、HPV、HCV和HCMV;防止HIV感染個(gè)體的AIDS發(fā)展；心血管疾病，例如心臟肥大、再狹窄、動(dòng)脈粥樣硬化；神經(jīng)變性性疾病，例如阿爾茨海默病、AIDS相關(guān)性癡呆、帕金森病、肌萎縮性側(cè)索硬化、色素性視網(wǎng)膜炎、脊髓性肌萎縮和小腦變性；腎小球性腎炎；骨髓增生性異常綜合征，與心肌梗死、中風(fēng)和再灌注損傷有關(guān)的缺血性損傷；肌肉骨骼系統(tǒng)變性疾病，例如骨質(zhì)疏松癥和關(guān)節(jié)炎；阿司匹林敏感性鼻竇炎；嚢性纖維變性；多發(fā)性硬化；腎病。本發(fā)明還可用于由胰島素抵抗和胰島素不敏感以及葡萄糖、能量和脂肪貝i存遭破壞引起的疾病，例如代謝疾病和肥胖癥。本發(fā)明包括蛋白激酶p70S6K介導(dǎo)的任何類型疾病的干預(yù)、治療或預(yù)防方法。因此，本發(fā)明用于有關(guān)治療或預(yù)防，包括(a)調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶p70S6K;(b)在蛋白激酶p70S6K活性水平上進(jìn)行干預(yù)；(b)體內(nèi)抑制細(xì)胞周期Gl期至S期的進(jìn)程；(c)抑制細(xì)胞周期Gl期至S期的細(xì)胞周期增殖；(d)將式(I)化合物用作雷帕霉素替代品；(e)將式(I)化合物用作渥曼青霉素替代品；(f)重建合適的細(xì)胞凋亡程序；(g)抑制腫瘤組織中生長(zhǎng)因子受體信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)、過量表達(dá)和活化；(h)調(diào)節(jié)神經(jīng)元細(xì)胞分化；(i)調(diào)節(jié)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)；(j)調(diào)節(jié)細(xì)胞反應(yīng)；和(k)提高胰島素敏感性。治療或預(yù)防還可包括疾病或病癥的診斷和治療方法，該方法包括(i)篩選患者以確定患者所患或可能患上的疾病或病癥是否是對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶p70S6K活性的化合物治療敏感的疾病或病癥；(ii)如果表明患者所患疾病或病癥對(duì)此壽文感，則隨后^^予患者本文定義的式(I)化合物。受治療者或患者群可以選自(a)其中蛋白激酶p70S6K發(fā)生功能障礙(例如過度活化)的受治療者或患者群；(b)已進(jìn)行p70S6K發(fā)生功能障礙(例如對(duì)于p70S6K活性過高)診斷試驗(yàn)的受治療者或患者群；(c)其中染色體17q23擴(kuò)增的受治療者或患者群；(d)已進(jìn)行染色體17q23擴(kuò)增診斷試驗(yàn)的受治療者或患者群；(e)其中存在BRCAl突變的受治療者或患者群；(f)已進(jìn)行BRCAl突變?cè)\斷試驗(yàn)的受治療者或患者群；(g)其中存在BRCA2突變的受治療者或患者群；(h)已進(jìn)行BRCA2突變?cè)\斷試驗(yàn)的受治療者或患者群(s);(i)其中存在LKBl突變的受治療者或患者群；(j)已進(jìn)行LKBl突變i貪斷試驗(yàn)的受治療者或患者群；(k)已按照本文規(guī)定進(jìn)行篩選的受治療者或患者群。本發(fā)明組合物的優(yōu)勢(shì)本發(fā)明的組合物可能具有適于口服暴露的生理化學(xué)性質(zhì)。相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)的化合物，本文定義的組合物可具有改進(jìn)的口服生物利用度?？诜锢枚瓤啥x為當(dāng)通過口服途徑給藥時(shí)化合物的血漿暴露量與當(dāng)通過靜脈內(nèi)(i.V.)途徑給藥時(shí)化合物的血漿暴露量的比率(F)，用百分比表示。口服生物利用度(F值)大于30%、更優(yōu)選大于40%的組合物特別有利，因?yàn)樗鼈兛梢钥诜o藥而不是胃腸外給藥，或者也可通過胃腸外給藥。此外，式(I)化合物在其針對(duì)不同激酶的活性方面更有效也更有選擇性，并且特別是針對(duì)PKB時(shí)，顯示出選擇性和功效提高。在體外和在細(xì)胞內(nèi)，式(I)化合物在抑制PKB時(shí)比其i-對(duì)映異構(gòu)體明顯更有效。在體外放射性實(shí)驗(yàn)中，式(I)化合物針對(duì)分離PKB酶的ICso為O.OlfiM,與/-對(duì)映異構(gòu)體的0.96pM形成對(duì)照。在基于細(xì)^^的機(jī)械性實(shí)驗(yàn)中也觀察到這種在功效上接近IOO倍的差異，該實(shí)驗(yàn)測(cè)量的是PKB的直接下游底物GSK3(3的磷酸化。式(I)化合物的ICso為l.lpM,與A-對(duì)映異構(gòu)體〉50^iM的值形成對(duì)照。兩個(gè)對(duì)映異構(gòu)體之間的其它差異是它們針對(duì)密切相關(guān)的激酶PKA的功效，其中式(1)化合物在0.03一下抑制分離酶達(dá)44%,與在0.25(iM下抑制PKA的i-對(duì)映異構(gòu)體形成對(duì)照。式(I)化合物優(yōu)于現(xiàn)有技術(shù)化合物，因?yàn)樗鼘?duì)P450酶具有不同的敏感性，并且因?yàn)橛嘘P(guān)藥物代謝和藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)得到改進(jìn)。例如，式(I)化合物針對(duì)細(xì)胞色素P450酶1A2、2C9、2C19、3A4和2D6中每一個(gè)的IC5。值均大于10pM。此外，式(I)化合物將降低劑量需求。式(I)化合物可能比現(xiàn)有技術(shù)的化合物具有較小的毒性。hERG在1990年代末期，經(jīng)美國(guó)FDA批準(zhǔn)的多種藥物在發(fā)現(xiàn)涉及由心臟機(jī)能障礙引起的死亡時(shí)，不得不在美國(guó)退出銷售。隨后發(fā)現(xiàn)，這些藥物的副作用是發(fā)生心律失常，這是通過阻斷心臟細(xì)胞內(nèi)的hERG通道所引起的。hERG通道是鉀離子通道家族之一，在1980年代末期在突變型果蠅(Drasop/u'/awe/awogaWe。中鑒定出它的第一個(gè)成員(參見Jan,L.Y.和Jan，Y.N.(1990),ASuperfamilyofIonChannels(離子通道超家族)，Mm/",345(6277):672)。hERG鉀離子通道的生物生理性質(zhì)參見Sanguinetti,M.C，Jiang,C.,Curran，M.E.和Keating,M.T.(1995》AMechanisticLinkBetweenanInheritedandanAcquiredCardiacArrhythmia:HERGencodestheIkrpotassiumchannel(遺傳性與獲得性心源性心律失常之間的機(jī)械性連接HERG編碼Ikr鉀通道),Ce〃，81:299-307，以及Trudeau,M.C.,Warmke，J.W,,Ganetzky,B.和Robertson,G.A.(1995),HERG，aHumanInwardRectifierintheVoltage-GatedPotassiumChannelFamily(HERG，人類電壓門控鉀通道家族中的內(nèi)向整流器)。6We"ce,269:92-95。hERG阻斷活性的消除在任何新藥物的開發(fā)中依然都是重要的考慮事項(xiàng)。式(I)化合物的hERG離子通道阻斷活性可忽略不計(jì)。治療方法本文定義的組合物可用于預(yù)防或治療一系列由蛋白激酶A和/或蛋白激酶B和/或ROCK激酶和/或p70S6K激酶介導(dǎo)的疾病或病癥。這類疾病和病癥的實(shí)例如上所述。一般可將組合物給予需要這類給藥的受治療者，例如人或動(dòng)物患者；優(yōu)選為人o通常按治療或預(yù)防有益且一般是無毒的量給予組合物。然而，在某些情況下(例如在危及生命的疾病的情況下)，給予本文定義的組合物的益處可超過任何毒性作用或副作用的劣勢(shì)，在這種情況下，可考慮按與毒性程度相關(guān)的量適當(dāng)給予化合物?？梢蚤L(zhǎng)期給予組合物以維持有益的治療效果，或者僅短期內(nèi)給予?；蛘?，它們可以間斷方式或連續(xù)方式給予。通常的式(I)化合物日劑量的范圍可為每千克體重100皮克至100毫克，更通常為每千克體重5納克至25毫克，更常常每千克體重10納克至15毫克(例如10納克/千克至10毫克/千克，更通常1微克/千克至20毫克/千克，例如1微克/千克至10毫克/千克)，盡管需要時(shí)，可以給予較高或較低的劑量?？砂疵咳栈A(chǔ)或在重復(fù)基礎(chǔ)上給予本文定義的組合物，例如每2天、或每3天、或每4天、或每5天、或每6天、或每7天、或每IO、或每14天、或每21天或每28天?？梢栽趧┝糠秶鷥?nèi)口服給予式(I)化合物，例如l-1500mg，2-800mg，或5-500mg,例如2-200mg或10-1000mg,劑量的具體實(shí)例包括10mg、20mg、50mg和80mg。可以每天一次或每天一次以上給予化合物?；衔锟梢赃B續(xù)給予(即在治療方案期間每天無間斷給予)?；蛘?，可以間歇給予化合物，即連續(xù)服藥一定時(shí)間(例如一周)，然后中斷一定時(shí)間(例如一周)，然后再連續(xù)服藥一定時(shí)期(例如一周)，在治療方案期間如此進(jìn)行。涉及間歇性給藥的治療方案的實(shí)例包括其中是給藥一周停藥一周的周期；或給藥兩周，停藥一周；或給藥三周，停藥一周；或給藥兩周，停藥兩周；或給藥四周停藥兩周；或給藥一周停藥三周_-達(dá)一個(gè)或多個(gè)周期，例如2、3、4、5、6、7、8、9個(gè)或IO個(gè)以上周期。在一個(gè)具體的劑量方案中，可以給患者輸注本文定義的組合物每天1小時(shí)的時(shí)間長(zhǎng)達(dá)10天，特別是一周內(nèi)多達(dá)5天，按所需要的間隔(例如二周至四周，特別是每三周)重復(fù)治療。更具體的是，可以給患者輸注本文定義的組合物每天1小時(shí)的時(shí)間達(dá)5天，每三周重復(fù)治療。在另一個(gè)具體的劑量方案中，給患者輸注30分鐘至1小時(shí)后，在可變時(shí)間內(nèi)維持輸注，例如1-5小時(shí)，例如3小時(shí)。在又一個(gè)具體的劑量方案中，^^患者連續(xù)^^注12小時(shí)至5天的時(shí)間，特別是連續(xù)輸注24小時(shí)至72小時(shí)。然而，最終所給予的化合物的量和所使用的組合物的類型應(yīng)與待治療的疾病性質(zhì)或生理狀況相稱，并由醫(yī)師做出決定。式(I)化合物可作為單獨(dú)的治療藥給予，或者與一種或多種治療特定疾病(例如胂瘤性疾病，例如前述界定的癌癥)的化合物的療法聯(lián)用?？膳c式(I)化合物一起(不論同時(shí)還是按不同的時(shí)間間隔)給予的其它治療藥或治療的實(shí)例包括但不限于拓樸異構(gòu)酶I抑制劑抗代謝藥微管蛋白靶向藥DNA結(jié)合劑和拓樸異構(gòu)酶II抑制劑烷化劑單克隆抗體抗激素信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制劑蛋白酶體抑制劑DNA曱基轉(zhuǎn)移酶細(xì)胞因子和類一見色素染色質(zhì)導(dǎo)向療法放射療法，和其它治療藥或預(yù)防藥；例如減輕或緩解與化學(xué)療法相關(guān)的某些副作用的藥物。這些藥物的具體實(shí)例包括止吐藥和防止或減少與化療期相關(guān)的中性粒細(xì)胞減少以及防止由紅細(xì)胞或白細(xì)胞水平降低？1起的并發(fā)癥的藥物，例如促紅細(xì)胞生成素(EPO)、粒細(xì)胞巨噬細(xì)胞集落刺激因子(GM-CSF)和粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)。還包括抑制骨吸收的藥物，例如二膦酸鹽藥物例如唑來膦酸鹽(zoledronate)、帕米膦酸鹽(pamidronate)和伊班膦酸鹽(ibandronate);抑制炎癥反應(yīng)的藥物(例如地塞米松(dexamethazone)、潑尼松(prednisone)和潑尼松龍(prednisolone))以及用于降低肢端肥大癥患者的生長(zhǎng)激素和IGF-I血液水平的藥物，例如合成形式的腦激素促生長(zhǎng)素抑制素，包括醋酸奧曲肽(octreotideacetate),這是一種長(zhǎng)效八肽，具有模擬天然激素促生長(zhǎng)素抑制素特性的藥理特性。還包括亞葉酸(leucovorin)等藥物，其用作降低葉酸水平藥物的解毒藥，或亞葉酸(folinicacid)本身及可用于治療副作用(包括水腫和血栓栓塞性發(fā)作(thromoembolicepisode))的醋酸曱地孕酮等藥物。過不同的途徑給予。如果式(I)化合物與一種、兩種、三種、四種以上(優(yōu)選一種或兩種，更優(yōu)選一種)其它治療藥按聯(lián)合療法給予時(shí)，化合物可同時(shí)或序貫給予。當(dāng)序貫給予時(shí)，可按密集的間隔(例如5-10分鐘時(shí)間內(nèi))或較長(zhǎng)的間隔(例如間隔1小時(shí)、2小時(shí)、3小時(shí)、4小時(shí)以上或需要時(shí)甚至更長(zhǎng)時(shí)間)給予，精確的劑量方案應(yīng)與治療藥的性質(zhì)相稱。式(I)化合物還可與例如放射療法、光動(dòng)力療法、基因療法等非化療治療、手術(shù)和飲食控制聯(lián)用。對(duì)于與其它化療藥物的聯(lián)合療法，可將式(I)化合物與一種、兩種、三種、四種以上的其它治療藥配制成例如含有兩種、三種或四種以上的治療藥的劑型。在一個(gè)替代方法中，各治療藥可單獨(dú)配制并以藥盒的形式提供，任選附有藥物使用說明書。本領(lǐng)域技術(shù)人員可根據(jù)常識(shí)清楚地了解將要使用的給藥方案和聯(lián)合療法。診斷方法給予本文定義的組合物之前，可對(duì)患者進(jìn)行篩選，以確定患者所患或可能患上的疾病或病癥是否是對(duì)治療壽文感的疾病或病癥，所述治療用具有針對(duì)特定靶激酶(例如蛋白激酶A和/或蛋白激酶B和/或ROCK激酶和/或P70S6K激酶)活性的化合物進(jìn)行。例如，可以對(duì)采自患者的生物樣品進(jìn)行分析以確定患者所患或可能患上的病癥或疾病(例如癌癥)是否是以遺傳異?；虻鞍踪|(zhì)表達(dá)異常為特征的病癥或疾病，其中所述異常導(dǎo)致PKA和/或PKB上調(diào)，或者使通向正常PKA和/或PKB活性的途徑敏化，或者PKA和/或PKB上游的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)組分上調(diào)，例如在PKB、P13K、GF受體、PDK1和PDK2的情況下?；蛘?，可以分析采自患者的生物樣品的PKB途徑(例如PTEN)負(fù)調(diào)節(jié)因子或抑制劑的喪失。在本文中，術(shù)語"喪失"包括調(diào)節(jié)因子或抑制劑編碼基因的缺失、基因的截短(例如通過突變)、基因轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的截短、或轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物的鈍化(例如通過點(diǎn)突變)或通過其它基因產(chǎn)物的螯合。又或者，可篩選出ROCK活性功能障礙(例如ROCK表達(dá)升高或上調(diào)、ROCK基因或ROCK基因調(diào)節(jié)元件突變)或Rho信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)功能障礙(如本文界定)的患者。術(shù)語上調(diào)包括表達(dá)升高或過量表達(dá)，包括基因擴(kuò)增(即多個(gè)基因拷貝)和通過轉(zhuǎn)錄作用使表達(dá)增加以及過度活性和活化，包括通過突變的活化。因此，可以對(duì)患者進(jìn)行診斷試驗(yàn)以;險(xiǎn)測(cè)激酶(例如PKA和/或PKB和/或ROCK激酶和/或P70S6K激酶)上調(diào)的標(biāo)記特征。術(shù)語診斷包括篩選。所謂標(biāo)記包括遺傳標(biāo)記，包括例如測(cè)定DNA組成以鑒定激酶(例如PKA和/或PKB和/或ROCK激酶和/或P70S6K激酶)的突變。術(shù)語標(biāo)記還包括以激酶(例如PKA和/或PKB和/或ROCK激酶和/或P70S6K激酶)上調(diào)和/或?qū)е孪嚓P(guān)途徑上調(diào)的其它因子為特征的標(biāo)記，相關(guān)途徑包括酶活性、酶水平、酶狀態(tài)(例如磷酸化與否)和前述蛋白質(zhì)的mRNA水平。上述診斷試驗(yàn)和篩選通常用生物樣品進(jìn)行，生物樣品選自腫瘤活檢樣品、血樣(分離和富集的脫落腫瘤細(xì)胞)、糞便活檢樣品、痰液、染色體分析、胸膜液、腹膜液、骨髓或尿液。70鑒定出在PKA和/或PKB中攜帶突變或TCL-1重排或PTEN表達(dá)喪失的個(gè)體，可能意味著該患者特別適于用PKA和/或PKB抑制劑治療?？稍谥委熐皟?yōu)先篩選出存在PKA和/或PKB變體的腫瘤。篩選方法通?？砂ㄖ苯訙y(cè)序、寡核苷酸微陣列分析或突變體特異性抗體。蛋白質(zhì)突變和上調(diào)的鑒定和分析方法為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知。篩選方法可包括但不限于標(biāo)準(zhǔn)方法例如反轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)或原位雜交。在RT-PCR篩選中，通過建立mRNA的cDNA拷貝，隨后通過PCR擴(kuò)增cDNA來評(píng)1介腫瘤中mRNA的水平。PCR擴(kuò)增的方法、引物的選擇和擴(kuò)增的條件為本領(lǐng)域技術(shù)人員所知。通過標(biāo)準(zhǔn)方法進(jìn)行核酸操作和PCR,參見例如Ausubel,F.M.等編輯，CurrentProtocolsinMolecularBiology,2004,JohnWiley&SonsInc.或Innis,M.A.等編輯，PCRProtocols:aguidetomethodsandapplications,1990,AcademicPress,SanDiego。涉及核酸技術(shù)的反應(yīng)和操作還可參見Sambrook等,2001,第3版，MolecularCloning:ALaboratoryManual,ColdSpringHarborLaboratoryPress?；蛘?，可以使用市售RT-PCR試劑盒(例如RocheMolecularBiochemicals)，或者有關(guān)方法參見美國(guó)專利4,666,828、4，683，202、4,801,531、5，192，659、5，272，057、5,882,864和6,218,529,這些專利均通過引用結(jié)合到本文中。評(píng)價(jià)mRNA表達(dá)的原位雜交技術(shù)的一個(gè)實(shí)例是熒光原位雜交(FISH)(參見Angerer，1987Meth.Enzymol.，152:649)。通常，原位雜交包括以下主要步驟(l)將待分析的組織進(jìn)行固定；(2)對(duì)樣品進(jìn)行預(yù)雜交處理以增加靶核酸的可接近性并減少非特異性結(jié)合；(3)使核酸混合物與生物結(jié)構(gòu)或組織中的核酸雜交；(4)雜交后洗滌以除去在雜交中未結(jié)合的核酸片段，(5)檢測(cè)雜交的核酸片段。用于選的探針足夠長(zhǎng)，例如約50、100或200個(gè)核香酸至約1000個(gè)以上71的核苷酸，以便在嚴(yán)格條件下與靶核酸進(jìn)行特異性雜交。進(jìn)行FISH的標(biāo)準(zhǔn)方法參見Ausubel,F.M.等編輯，CurrentProtocolsinMolecularBiology,2004,JohnWiley&SonsInc和JohnM.S.Bartlett的技術(shù)綜述，F(xiàn)luorescenceInSituHybridization:TechnicalOverview(熒光y^、4立雜交技術(shù)綜述)，載于MolecularDiagnosisofCancer,MethodsandProtocols,第2版；ISBN:1-59259-760-2;2004年3月，第077-088頁；系歹寸叢書MethodsinMolecularMedicine?；蛘撸蒻RNA表達(dá)的蛋白產(chǎn)物可通過以下方法評(píng)價(jià)腫瘤樣本的免疫組織化學(xué)法、使用微量滴定板的固相免疫測(cè)定法、蛋白質(zhì)印跡法、二維SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳、ELISA、流式細(xì)胞術(shù)和其它本領(lǐng)域中已知的特異性蛋白質(zhì)的檢測(cè)方法。檢測(cè)方法包括使用位點(diǎn)特異性抗體(sitespecificantibodies)。技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)了解的是，所有這些用于檢測(cè)激酶(例如PKB和/或PKA和/或ROCK激酶和/或P70S6K激酶)上調(diào)或者檢測(cè)激酶變體的眾所周知的技術(shù)都可適用于本發(fā)明情況。因此，所有的這些技術(shù)還可用來鑒定特別適于用PKA和/或PKB和/或ROCK激酶和/或P70S6K激酶抑制劑治療的腫瘤。例如，如上所述，研究發(fā)現(xiàn)PKB卩在10-40%的卵巢癌和胰腺癌中上調(diào)(Bellacosa等，1995，Int.J.Cancer64，280-285;Cheng等，1996，PNAS93,3636-3641;Yuan等，2000，Oncogene19,2324-2330)。因此預(yù)期PKB抑制劑，特別是PKB卩抑制劑可用于治療卯巢癌和胰腺癌。PKBa在人類胃癌、前列腺癌和乳腺癌中擴(kuò)增(Staal1987，PNAS84，5034-5037;Sun等，2001，Am.J.Pathol.159，431-437)。因此預(yù)期PKB抑制劑，特別是PKBa抑制劑可用于治療人的胃癌、前列腺癌和乳腺癌。在類固醇非依賴性乳腺癌和前列腺癌細(xì)胞系中發(fā)現(xiàn)PKBy活性增加(Nakatani等，1999，J.Biol.Chem.274,21528-21532)。因此預(yù)期PKB抑制劑，特別是PKBy抑制劑可用于治療類固醇非依賴性乳腺癌和前列&i癌?？稍趍RNA水平或蛋白質(zhì)水平進(jìn)行ROCK的才企測(cè)。臨床樣品中測(cè)定出Rho和ROCK水平的方法的具體實(shí)例包括AmericanJournalofPathology.2002;160:579-584。該論文描述了對(duì)福爾馬林固定的組織進(jìn)行免疫組織化學(xué)法以表征RhoC在人乳腺組織中的表達(dá)。ClinicalCancerResearch第9巻，2632-2641,2003年7月。該論文描述了在得自連續(xù)107名日本膀胱癌患者的成對(duì)腫瘤和非腫瘤手術(shù)樣品中，應(yīng)用蛋白質(zhì)印跡法定量測(cè)定Rho和ROCK蛋白的表達(dá)。Pancreas.24(3):251-257，2002年4月。該i侖文描述了通過免疫印跡法和免疫組織化學(xué)法測(cè)定人胰腺組織中ROCK-1的表達(dá)。WorldJGastroenterol2003年9月；9(9):1950-1953。該"i侖文描述了通過反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(RT-PCR)測(cè)定肝細(xì)胞癌(HCC)中RhoC基因的mRNA表達(dá)水平。包括在上述出版物中的有關(guān)定量測(cè)定Rho和/或ROCK活性水平或表達(dá)水平的方法內(nèi)容通過引用結(jié)合到本文中?？梢栽趍RNA或蛋白質(zhì)水平上進(jìn)行p70S6K的4企測(cè)。示例性的方法參見例如JNaltlCancerInst(2000):92，第1252-9頁(它描述了應(yīng)用鑒定基因擴(kuò)增和過量表達(dá)的比較基因組雜交(CGH)及cDNA和組織微陣列分析，通過互補(bǔ)DNA和組織微陣列分析來檢測(cè)核糖體蛋白S6激酶的活化)。p70S6K過量表達(dá)的檢測(cè)參見IntJOncol(2004):24(4),第893-900頁。該論文應(yīng)用免疫組織化學(xué)法描述了普通人腫瘤中的PI3K/PTEN-Akt-mTOR途徑的藥物基因組譜，以比較p70S6K、AKT高表達(dá)與腫瘤敏感性。實(shí)驗(yàn)現(xiàn)在參照以下方法和實(shí)施例中所述具體實(shí)施方案對(duì)本發(fā)明進(jìn)行說明，但并不局限于參照以下方法和實(shí)施例。下述各種方法中的原料是市售產(chǎn)品，除非另有說明。用在27°C、400.13MHz下，在Me-d3-OD中操作的BrukerAV400儀記錄質(zhì)子磁共振('HNMR)語，除非另有說明，否則如下報(bào)告化學(xué)位移S/ppm(質(zhì)子數(shù)，多重性中s二單峰，d-雙峰，t-三重峰，q-四重峰，m-多重峰，bF寬峰)。殘余的質(zhì)子溶劑MeOH(SH=3.31ppm)用作內(nèi)標(biāo)。實(shí)施例中，所制備的化合物應(yīng)用下述系統(tǒng)和操作條件，通過液相色譜法和質(zhì)譜法表征。如果存在氯，所引用的化合物質(zhì)量為35C1。所用操作條件如下。平臺(tái)系統(tǒng)HPLC系統(tǒng)質(zhì)譜檢測(cè)器:PDA檢測(cè)器:酸性分析條件2:洗脫劑A:洗脫劑B:流速柱堿性分析條件5:洗脫劑A:洗脫劑B:梯度流速柱MS條件Waters2795MicromassPlatformLCWaters2996PDAH20(0.1%甲酸)CH3CN(0.1%曱酸)5-95。/o洗脫劑B，3.5分鐘內(nèi)0.8ml/分鐘PhenomenexSynergi4(aMax-RP80A，50x2.0mmH20(10mMNH4HCCM爰沖液，用NH4OH調(diào)節(jié)至pH=9.2)CH3CN05-95%洗脫劑B，3.5分鐘內(nèi)0.8ml/分鐘PhenomenexGemini5|a2.0x50mm毛細(xì)管電壓3.5kV或3.6kV錐電壓30V源溫度120°C掃描范圍165-700amu電離方式-、+或+/-電噴霧在以下實(shí)施例中，使用下列關(guān)^T建詞識(shí)別所用的LCMS條件:PS-A2平臺(tái)系統(tǒng)-酸性分析條件2PS-B5平臺(tái)系統(tǒng)-堿性分析條件5實(shí)施例1(5V2-氨基-l"4-氯-苯基)-l-4-(lH-吡唑-4-基)-苯基l-乙醇的制備1A.2"4-氯-苯基)-2-f4-碘-苯基)-氣雜環(huán)丙烷將氫化鈉(60%的油分散體，128mg，3.2mmol)置于氮?dú)夥障拢缓蠹尤隓MSO(5ml)。15分鐘后，加入三曱基碘化锍(0.66g,3.2mmo1)固體，30分鐘后再加入(4-氯-苯基)-(4-碘-苯基)-曱酮(lg,2.9mmo1)。將混合物在室溫下攪拌24小時(shí)后，用乙酸乙酯稀釋，用l:2水/鹽水、水和鹽水洗滌(2次)。有機(jī)相經(jīng)干燥(MgS04)，過濾后濃縮，得到標(biāo)題化合物(1.01g，97%)，無需進(jìn)一步純化便可使用。LCMS(PS-A2)Rt4.07分鐘，[M-H]355。IB.2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-4-碘-苯基1-乙酵f環(huán)氣化物開環(huán)反應(yīng))75將2-O氯-苯基)-2-(t碘-苯基)-氧雜環(huán)丙烷(500mg，1.卯mmol)溶于2MNH3的曱醇(5ml，10.0mmol)溶液中，將溶液在130。C下用微波加熱60分鐘。冷卻后，真空除去溶劑，得到所需產(chǎn)物。進(jìn)行三次同一反應(yīng)，得到1.55g(98%)的產(chǎn)物2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-碘-苯基]-乙醇。粗產(chǎn)物是純的，無需步純化便可用于下一步驟。1C.2-(4-氯-苯基)-2-羥基-2-"-捵-苯基)-乙基l-氨基甲酸叔丁酯(BOC保護(hù))NH已OC將步驟1B的氨基醇產(chǎn)物(9.55g,25.56mmol)懸浮于1，4-二氧六環(huán)(220ml)，加入2MNaOH(16.6ml，33.24mmo1)。將混合物劇烈攪拌直到均勻。加入二碳酸二叔丁酯(6.14g,28.11mmo1),將反應(yīng)混合物在45。C下攪拌20小時(shí)。冷卻后，使反應(yīng)混合物濃縮，在EtOAc(150ml)和水(150ml)之間分配。分離出有機(jī)層，用鹽水(150ml)洗滌，干燥(MgS04)后濃縮，得到黃色油狀物(14.08g)。粗產(chǎn)物用快速色i普法純化(采用BiotageSP4(65i柱)，用乙酸乙酉旨-石油溶劑油(petrol)(梯度5%-40%EtOAc)洗脫)，得到標(biāo)題化合物(10.0g，83%，白色固體)。Rt3.73分鐘，[M+H]473.96。1D,〖2-(4-氯-苯基)-2-羥基-2-4-(111-吡唑-4-基)-笨基1-乙基l-氨基曱酸叔丁酯(Suzuki偶合反應(yīng))<formula>formulaseeoriginaldocumentpage77</formula>將[2-(4-氯-苯基)-2-羥基-2-(4-碘-苯基)-乙基]-氨基曱酸叔丁酯(5g，10.6mmol)與4-(4,4,5，5-四曱基-[l,3,2]二氧雜硼雜環(huán)戊烷-2-基)-lH-吡唑(4.1g,2Ulmmol)和磷酸鉀(三堿價(jià)，7.88g，37.10mmo1)在圓底燒瓶中混合。然后將這些固體溶于乙醇、曱醇、甲苯和水的1:1:1:1溶劑混合物(每種溶劑33ml)中。該溶液用氮?dú)饷摎猓尤胨?三苯基膦)合鈀(0)(0.612g，0.53mmo1)?；旌衔镉玫?dú)饷摎猓缓笤诘獨(dú)夥铡?5。C下加熱2小時(shí)。然后使反應(yīng)混合物冷卻至室溫。然后再加入一批試劑磷酸鉀(7.88g,37.10mmol)和硼酸吡唑(4.1g，21.11mmo1)。反應(yīng)混合物用氮?dú)饷摎夂?，加入又一批?三苯基膦)合鈀(O)(0.101g，0.087mmo1)。使反應(yīng)混合物脫氣，然后在氮?dú)夥铡?5。C下加熱17小時(shí)。再次加入另一批試劑(參照上述用量)后，再在氮?dú)夥铡?5。C下繼續(xù)加熱6.5小時(shí)。然后使反應(yīng)混合物冷卻至室溫，真空蒸發(fā)除去有機(jī)溶劑。殘余水層用2NNaOH水溶液(150ml)稀釋后，用乙酸乙酯(150ml)萃取。分離出有機(jī)層，依次用2NNaOH水溶液(150ml)和鹽水(150ml)洗滌。分離出有機(jī)層，干燥(MgS04)后真空濃縮。殘余物用乙醚研磨。真空過濾固體后干燥，得到標(biāo)題化合物(2.55g,58%,白色固體)。LC/MS:(PS-B5)Rt3.05,[M+H]十414.18。NMR(Me-d3-OD)7.95(2H,brs),7.55(2H，d),7.48-7.41(4H,m)，7.31(2H,d)，3.87(2H,q)，1.35(9H,s)。1E.2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-4-(111-吡唑-4-基)-苯基1-乙醇(BOC脫保護(hù)步驟)將BOC胺(2.55g,6.16mmol)的含飽和HC1的Et20(50ml)和曱醇(50ml)的懸浮液在室溫下攪拌20小時(shí)。反應(yīng)混合物經(jīng)真空濃縮后，用2MNaOH(150ml)稀釋，用EtOAc(200ml)萃取(注意(NB):需要長(zhǎng)時(shí)間振蕩以完全溶解固體物質(zhì))。有機(jī)層用lNHCl(100ml)洗滌。然后分離水層后，用2MNaOH堿化至pH12。所需產(chǎn)物從溶液中沉淀出來后，經(jīng)真空過濾收集，干燥數(shù)天(1.89g，98%)。'HNMR(Me-d3-0D)S3.29-3.38(2H,m),7.32(2H，d)，7.41-7.46(4H，m),7.55(2H,d),7.94(2Rs)。1F.單一對(duì)映異構(gòu)體的手性分離采用下述手性LC方法，將化合物(5)-2-氨基-l-(4-氯-苯基H-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇與i-對(duì)映異構(gòu)體分離開來。手性分析條件洗脫劑MeOH+0.1%DEA，室溫下流速0.7ml/分鐘總時(shí)間25分鐘注射體積5(il樣品濃度lmg/ml(流動(dòng)相中)柱DAICELChiralpakAD-H;250x4.6mm波長(zhǎng)230nm或257nm手性制備條件洗脫劑MeOH+0.1%DEA，室溫下流速13ml/分鐘78總時(shí)間注射體積樣品濃度柱波長(zhǎng):29分鐘250^1100mg/ml(流動(dòng)相中)DAICELChiralpakAD畫H;250x20mm230或257nm所得到的(5>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇用旋光測(cè)定法、手性色譜法和晶體學(xué)表征。旋光測(cè)定法S對(duì)映異構(gòu)體和A對(duì)映異構(gòu)體兩者的旋光性用AA-10自動(dòng)旋光儀(OpticalActivityLimited)測(cè)定。S-對(duì)映異構(gòu)體22.42mg化合物溶于2mlMeOH,測(cè)定池長(zhǎng)度=20cm,讀數(shù)=+0.31，20D=+13.8。Z-對(duì)映異構(gòu)體20.14mg溶于10mlMeOH(較大稀釋度由旋光儀測(cè)定池氣泡問題所致)，讀數(shù)=-0.03，測(cè)定池長(zhǎng)度-10cm[a20D=-14.8o手性色譜法采用上述手性分析條件和5ial注射體積，6"-對(duì)映異構(gòu)體的保留時(shí)間為15.283分鐘。采用文獻(xiàn)所述方法，采用文獻(xiàn)方法，在5"-對(duì)映異構(gòu)體的bPKA-PKB溶液中進(jìn)行晶體學(xué)分析(ThomasG.Davies等，"AStructural晶體學(xué)ComparisonofInhibitorBindingtoPKB，PKAandPKA-PKBChimera(結(jié)合PKB、PKA和PKA-PKB嵌合體的抑制劑的結(jié)構(gòu)比較)"Mo/,所o/.2007年1月/775W7。分析表明存在與蛋白質(zhì)結(jié)合的S-對(duì)映異構(gòu)體。實(shí)施例22-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-4-碘-苯基l-乙醇的替代合成法本實(shí)施例描述了實(shí)施例1中的中間體化合物IB即2-氨基-1-(4-氯-苯基)-l-[4-碘-苯基]-乙醇的制備。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage80</formula>2A.(及5)-2-(4-氯苯基)-2-(4-碘苯基)氧雜環(huán)丙烷將叔丁醇鉀(18.48g，165.0mmol)加到快速攪拌的4-氯-4'-碘二苯曱酮(51.38g,150.0mmol)和三甲基碘化锍(33.66g，165.0mmol)的二曱亞砜(200ml)懸浮液中，將所得混合物在室溫下攪拌3小時(shí)。混合物用乙酸乙酯(500ml)稀釋，依次用水(3x500ml)和鹽水(500ml)洗滌。分離出有機(jī)層，真空除去溶劑，得到(^S)-2-(4-氯苯基)-2-(4-碘苯基)氧雜環(huán)丙烷(53.48g，100%),為淺黃色油狀物，靜置時(shí)固化，得到類白色固體。&畫R(DMSO-^)7.76(2H,d)，7.45(2H，d),7.34(2H,d),7.12(2H,d),3.32(2H，m)。MS:,町355。2B.W5V2-疊氮基-:U4-氯苯基)-W4-碘苯基)乙醇將疊氮化鈉(13.86g，213.2mmol)加到(i5)-2-(4-氯苯基)-2-(4-碘苯基)氧雜環(huán)丙烷(50.66g，142.1mmol)與丙酮(400ml)和水(40ml)的混合物中，攪拌混合物并在回流下保持4天。冷卻至室溫，真空除去丙酮，將殘余物溶于乙酸乙酯(500ml),依次用水(250ml)和鹽水(250ml)洗滌，分離出有機(jī)層，真空除去溶劑，得到(/5>2-疊氮基-1-(4-氯苯基)-1-(4-碘苯基)乙醇(56.77g,100%)，為淺黃色油狀物，靜置時(shí)慢慢固化，得到類白色固體。&NMR(DMSO-A)7.68(2H,d),7.44(2H，d),7.38(2H,d)，7.24(2H，d)，6.38(lH，brs),3.99(2H，s)。MS:[M-H]—398。2C.(i5V2-銨基小(4-氯苯基)-l-"-碘苯基)乙醇甲苯-4-磺酸鹽將三苯基膦(31.44g，120.0mmo1)加到(^5>2-疊氮基-1-(4-氯苯基)-l-(4-碘苯基)乙醇(47，94g，120.0mmol)的四氫呋喃(400ml)溶液中，攪拌混合物并在回流下保持5小時(shí)后，加入甲苯-4-磺酸一水合物(22.8g，120.0mmol)和水(40ml)，攪拌混合物并在回流下再保持16小時(shí)。冷卻至室溫，混合物經(jīng)真空蒸發(fā)至干。加入乙酸乙酯(600ml)，將混合物在室溫下快速攪拌30分鐘以使固體重新懸浮。通過吸濾收集固體，用乙酸乙酯(3x250ml)漂洗，減壓吸干后，在真空爐中于50。C干燥過夜，得到(75)-2-銨基-1-(4-氯苯基)-1-(4-碘苯基)乙醇曱苯-4-磺酸鹽(51.37g，78%),為無色固體。&NMR(DMSO-A)7.73(2H,d),7.68(3H,brs),7.47(4H，m),7.43(2H,d),7.28(2H,d)，7.12(2H，d),6.60(1H:brs),3.67(2H,s),2.30(3H,s)。MS:[M+H]+374?？赏ㄟ^實(shí)施例1C方法(但使用多一當(dāng)量的氫氧化鈉以將曱苯石黃酸鹽考慮在內(nèi))，將實(shí)施例2C的產(chǎn)物轉(zhuǎn)化為N-Boc衍生物，然后如實(shí)施例ID和實(shí)施例IE中所述，進(jìn)行Suzuki偶合反后脫去Boc保護(hù)基，所得到的對(duì)映異構(gòu)體的混合物通過實(shí)施例1F的方法拆分，得到(5>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇。生物活性以下實(shí)施例中描述了式(I)化合物的生物活性。另外，式(I)化合物的生物學(xué)性質(zhì)可參見JohnF.Lyons等人的海報(bào)，第3512頁，海報(bào)B部分，摘要B251,AACR-NCI-EORTCInternationalConference:MolecularTargetsandCancerTherapeutics(AACR-NCI-EORTC國(guó)際會(huì)議分子靶標(biāo)和癌癥治療藥)，2007年10月22-26日，SanFrancisco，CA(可由AstexTherapeutics網(wǎng)站獲耳又拷貝www.astex-therapeutics.com或www.astex-therapeutics.com/investorsandmedia/publications)。實(shí)施例3PKA激酶抑制活性(IC^)的測(cè)量可以采用得自UpstateBiotechnology的PKA催化域(弁14-440)來測(cè)定式(I)化合物的PK抑制活性，同樣得自UpstateBiotechnology(#12-257)9個(gè)殘基的PKA特異性肽(GRTGRRNSI)作為底物。使用在緩沖液中終濃度為lnM的酶，緩沖液包括20mMMOPS(pH7.2)、40|iMATP/3P-ATP和50mM底物。在二曱亞砜(DMSO)溶液中加入化合物至DMSO終濃度為2.5%。使反應(yīng)繼續(xù)20分鐘后，加入過量的正磷酸猝滅活性。然后在MilliporeMAPH濾板上將未摻入的3P-ATP從磷酸化蛋白中分離出來。洗滌各板，加入閃爍液后，將濾板在PackardTopco皿t上進(jìn)行計(jì)數(shù)。計(jì)算出PKA活性的。/。抑制并繪制曲線以確定抑制50。/。PKA活性所需的試驗(yàn)化合物的濃度(IC50)。根據(jù)下迷方案，發(fā)現(xiàn)提供PKA的44%抑制的(。-2-氨基-1-(4-氯-82苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的濃度為0.03pM,而(A)-2-氨基-1_(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的IC5o值0.25fiM。結(jié)果表明在PKA實(shí)驗(yàn)中，S-對(duì)映異構(gòu)體比i-對(duì)映異構(gòu)體明顯更有效。實(shí)施例4PKB激酶抑制活性(ICgg)的測(cè)量可基本按Andjelkovic等人所述方法測(cè)定化合物對(duì)蛋白激酶B(PKB)活性的抑制(Mol.Cell.Biol.19,5061-5072(1999)),但使用被稱為PKB-PIF的融合蛋白，參見Yang等人的全文(NatureStructuralBiology9,940-944(2002))。蛋白質(zhì)按Yang等人所述進(jìn)行純化用PDK1激活。獲自Calbiochem(#123900)的肽AKTide-2T(H-A-R-K-R-E-R-T-Y-S-F-G-H-H-A-OH)用作底物。使用在緩沖液中終濃度為0.6nM的酶，緩沖液包括20mMMOPS(pH7.2)、30|jMATP/y33P-ATP和25底物。在DMSO溶液中加入化合物至DMSO終濃度為2.5%。使反應(yīng)進(jìn)行20分鐘后，加入過量的正磷酸猝滅活性。將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到磷酸纖維素濾板上，肽在該^反上結(jié)合，洗去未利用的ATP。洗滌后，加入閃爍液，通過閃爍計(jì)數(shù)法測(cè)定摻入的活性。計(jì)算出PKB活性的％抑制并繪制曲線以確定抑制PKB活性50%所需要的試驗(yàn)化合物的濃度(ICso)。根據(jù)上述方案，發(fā)現(xiàn)(5)-2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的ICso值為0.01jaM，而(i)-2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的ICso值為0.96(xM。結(jié)果表明在PKB實(shí)驗(yàn)中，S-對(duì)映異構(gòu)體的功效大約為i-對(duì)映異構(gòu)體的100倍。實(shí)施例5hERG活性可按照M.H.Bridgland-Taylor等人文章中所述的實(shí)驗(yàn)法，測(cè)定式(I)化合物針對(duì)hERGK+離子通道的活性C/owm"/o/尸力"rwcflo/og7'cfl/朋d7bjaco/og/ca/if"Aocfe,54(2006),189-199)。實(shí)施例6測(cè)定針對(duì)細(xì)胞色素P450的功效采用可獲自Invitrogen(Paisley,UK)的PanVeraVividCyp450篩選盒，來測(cè)定實(shí)施例1的化合物針對(duì)細(xì)胞色素P450(CYP450)酶1A2、2C9、2C19、3A4和2D6的功效。CYP450以含有CYP450和NADPH還原酶的baculosomes形式供應(yīng)，所使用的底物為焚光Vivid底物。最終的反應(yīng)混合物如下1A2lOOmM磷酸鉀(pH8)、1%乙腈、2pM1A2Bluevivid底物、100|nMNADP+、4nMCYP4501A2、2.66mM葡糖隱6-磷酸、0.32U/ml葡糖畫6-磷酸脫氫酶。2C950mM磷酸鉀(pH8)、1%乙腈、2(iMGreenvivid底物、lOOpMNADP+、8nMCYP4502C9、2，66mM葡糖-6-磷酸、0.32U/ml葡糖-6-磷酸脫氬酶。2C1950mM磷酸鉀(pH8)、1%乙腈、8|iMBluevivid底物、100pMNADP+、4nMCYP4502C19、2.66mM葡糖-6-磷酸、0.32U/ml葡糖-6-磷酸脫氬酶。3A4100mM磷酸鉀(pH8)、1%乙腈、IOjiM3A4Bluevivid底物、lOOpMNADP+、2.5nMCYP4503A4、2.66mM葡糖-6-磷酸、0.32U/ml葡糖-6-磷酸脫氫酶。842D6100mM磷酸鉀(pH8)、1%乙腈、5pM2D6Bluevivid底物、100pMNADP+、16nMCYP4502D6、2.66mM葡糖-6-磷酸、0.32U/ml葡糖-6-磷酸脫氬酶。在Fluoroskan熒光讀板儀上以30秒鐘的間隔監(jiān)測(cè)熒光20分鐘。激發(fā)波長(zhǎng)和發(fā)射波長(zhǎng)對(duì)于1A2、2C19和3A4為390nm和460nm,對(duì)于2D6為390nm和485nm，對(duì)于2C9為485nm和530nm。由發(fā)展曲線確定初速度。將試驗(yàn)化合物溶于乙腈，并以1(VM的濃度針對(duì)CYP450進(jìn)行測(cè)定。實(shí)施例1化合物針對(duì)1A2、2C9、2C19、3A4和2D6的IC5o大于10juM。實(shí)施例7針對(duì)pSer9GSK3(3的基于細(xì)胞的磷酸-Ser9Gsk3BELISA實(shí)驗(yàn)通過化合物抑制直接下游底物GSK3P絲氨酸9磷酸化的能力，測(cè)定了抑制U87MG細(xì)胞中PKB的作用。將細(xì)胞接種到96孔板上，使之復(fù)原過夜后加入抑制劑化合物1小時(shí)。1小時(shí)后，細(xì)胞用3%低聚曱醛、0.25%戊二醛、0.25。/o曲通(Triton)X100和5o/oMarvel/TBS-T固定并封閉。在此之后，使細(xì)胞與針對(duì)磷酸化形式的GSK3(3(細(xì)胞信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo))的第一抗體在4°C下孵育過夜。洗滌后，使用DELFIA試劑(Eu-Nl抗兔IgG抗體)，使細(xì)胞與第二抗體孵育1小時(shí)，在激發(fā)340nm和發(fā)射640nm下，在時(shí)間分辨熒光讀數(shù)器上對(duì)下列增強(qiáng)板進(jìn)行讀數(shù)。所有細(xì)胞均獲自ECACC(歐洲細(xì)胞培養(yǎng)物保藏中心(EuropeanCollectionofCellCultures))。方案1.U87MG細(xì)胞以12,500細(xì)胞/孔接種在96孔板上160fil培養(yǎng)基/孔中2.在37。C下孵育24小時(shí)3.細(xì)胞用抑制劑和DMSO對(duì)照處理4.在37。C下孵育1小時(shí)5.從板中輕彈出培養(yǎng)基，并用紙吸干6.將100^1固定溶液加到各孔中(3%低聚曱醛、0.25%戊二醛、0.25。/。曲通X100)7.在37。C下孵育30分鐘8.用水/0.1。/。吐溫(Tween)20洗滌1次9.用100(il5。/o牛奶/TBS-T封閉10.在37。C下孵育30分鐘11.將稀釋于5。/。牛奶/TBS-T的100pl第一抗體加到各孔中(CST#9336磷酸-Ser9GSK3p抗體，按1:250使用)包括無一抗-僅5。/o牛奶/TBS-T的柱對(duì)照如有需要，還可包括稀釋于5。/。牛奶/TBS-T至與磷酸-Ser9GSK3P相同濃度的Zymed兔IgG(02-6102-5mg/ml)對(duì)照的柱12.在4。C下孵育過夜13.用水/0.1%吐溫20洗滌3次14.將稀釋于Delfia實(shí)^r緩沖液中的100^1第二抗體加到各孔中(DelfmEu-Nl抗兔IgG抗體，按0,30pg/ml終濃度使用)15.在37。C下孵育1小時(shí)16.用水/0.1%吐溫20洗滌3次17，將10OjilDelfia增強(qiáng)溶液力0到各孔中18.在板振蕩器上振蕩15分鐘19.用0^￡^程序讀數(shù)(激發(fā)340腦-發(fā)射64011111)=銪計(jì)數(shù)20.用水/0.1%吐溫20洗滌1次21.將200^1BCA溶液加到每孔中(含1:50硫酸銅II的BCA)22.在37。C下孵育30分鐘23.在562咖下讀取吸光度=蛋白質(zhì)濃度在上述機(jī)械性實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)化合物(5)-2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的ICso為UpM,而(i)-2-氨基小(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的IC5o但〉50mM，即對(duì)映異構(gòu)體基本上無活性。實(shí)施例8ROCK-II(h)實(shí)驗(yàn)方案在下述ROCK-II實(shí)驗(yàn)中，對(duì)化合物(5>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(1&吡唑-4-基)-苯基]-乙醇進(jìn)行了測(cè)定。在25[xl最終反應(yīng)體積中，ROCK-II(h)(5-10mU)與50mMTris(pH7.5)、O.lmMEGTA、30(iMKEAKEKRQEQIAKRRRLSSLRASTSKSGGSQK、10mM乙酸鎂和[Y-33P-ATP](比活約500cpm/pmol，濃度按需要)一起孵育。通過添加MgATP混合物啟動(dòng)反應(yīng)。在室溫下孵育40分鐘后，加入5pl3。/。磷酸酸溶液終止反應(yīng)。然后將lO(il反應(yīng)物點(diǎn)到P30濾膜(filtermat)上，在75mM磷酸中洗滌三次達(dá)5分鐘，在曱醇中洗滌一次后，干燥，進(jìn)行閃爍計(jì)凄t。在本實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)(5>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的ICso小于上述實(shí)驗(yàn)中的10nM，即低于該實(shí)驗(yàn)的極限值。實(shí)施例9D70S6K放射性實(shí)驗(yàn)在下述p70S6K放射性實(shí)驗(yàn)中，對(duì)化合物(5>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇進(jìn)行了測(cè)定。概況P70S6酶購(gòu)自Upstate,在本實(shí)驗(yàn)中按2nM使用。底物S6混合物(AKRRRLSSLRA)按25|iM使用(未測(cè)定Km)。在磷酰基轉(zhuǎn)移反應(yīng)中，ATP的"P-Y磷酸被轉(zhuǎn)移到絲氨酸殘基上。將反應(yīng)混合物轉(zhuǎn)移到肽結(jié)合的磷酸纖維素濾板上，洗去未利用的ATP。洗滌后，加入閃爍液，通過閃爍計(jì)數(shù)測(cè)定#^入的活性。試劑P70S6激酶(T412E)活性物質(zhì)得自Upstate(#14-486)S6激酶底物混合物得自Upstate(#20-122)實(shí)-驗(yàn)緩沖液10mMMOPS(pH7.0)O.lmg/mlBSA0.001。/。千澤(Brij)-350.5%甘油0.2mMEDTA10mMMgCl20.01%卩-疏基乙醇制成10X母液，按2ml等分量貯存于20。C下15pMATP濃母液中新鮮加入ATP(10mM母液)。ATP隨時(shí)間分解，盡可能保持在冰上，使用小的等分量以確保母液新鮮。Y33P-ATPAPBiotech(BF1000)12.5%正磷酸0.5%正磷酸Microscint20(Packard)實(shí)驗(yàn)準(zhǔn)備酶混合物(每lml-100實(shí)驗(yàn)點(diǎn))743.75|ilH20250^110x實(shí)驗(yàn)緩沖液3.75^11OmMATP2.5^1酶底物混合物(每lml-100實(shí)驗(yàn)點(diǎn))88250^1S6混合物底物750^1H203.5(il33P-ATP(BF1000，得自APBiotech)加入33P-ATP的量假定是在參考日期的量。確切量需要隨時(shí)間調(diào)節(jié)?；衔?在聚丙烯96孔板上，在DMSO中制備稀釋曲線至40x最終實(shí)驗(yàn)濃度(最終DMSO2.5%)。1:8稀釋于水中(將？W化合物加到35(il水中便足夠)。實(shí)驗(yàn)沒置在聚丙烯96孔板按下列順序添加5|Lll化合物lOpl底物混合物10pl酶混合物ATP終濃度約為15|iM。計(jì)算出放射性ATP的KM為47pM。對(duì)照是"無化合物"(僅DMSO)和"無酶"(使用lO^il酶混合物后加入酶)。用板密封器(plateseal)(TopSealA-Packard)或?yàn)V板塑料蓋(中等輻射屏障)覆蓋。輕輕振蕩混合。在室溫下孵育50分鐘。通過加入20|112%正磷酸終止反應(yīng)。過濾步驟MilliporeMAPHNOB板各孔用50^10.5%正石岸酸洗滌鄉(xiāng)爰沖液預(yù)濕潤(rùn)。使液體通過Millipore真空過濾裝置過濾。將停止反應(yīng)的整個(gè)反應(yīng)物轉(zhuǎn)移到各孔。過濾。用20p)al0.5%正磷酸洗滌緩沖液洗滌兩次。抽真空至近干。移開板支架，使濾器在紙巾上進(jìn)一步干燥。將板扣到PackardTopCount的托才反架上。加入2P)ilMicroscint20閃爍液，用一張TopsealA密封，在TopCount中計(jì)數(shù)30秒鐘。在本實(shí)驗(yàn)中，發(fā)現(xiàn)(6>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙S享的ICso為12nM。藥物制劑實(shí)施例10(i)片劑將50mg化合物與作為稀釋劑的197mg乳糖(BP)、作為潤(rùn)滑劑的3mg硬脂酸鎂混合，按已知方式壓制成片，來制備含有本文定義的組合物的片劑組合物。膠嚢劑將100mg本文定義的組合物與100mg乳糖混合，將所得到的混合物裝填到標(biāo)準(zhǔn)不透明的硬明膠膠嚢中，來制備月交嚢劑。注射劑I將本文定義的組合物(例如鹽形式)溶于含有10%丙二醇的水中，來制備通過注射給藥的胃腸外組合物，得到1.5%(重量)的活性化合物濃度。然后將溶液過濾除菌，裝入安瓿中后密封。注射劑II將本文定義的組合物(例如鹽形式)(2mg/ml)和甘露醇(50mg/ml)溶于水，將溶液過濾除菌，裝入可密封的lml小瓶或安瓿中，來制備注射用胃腸外組合物。v)注射劑III將20mg/ml式(I)化合物(例如鹽形式)溶于水來制備通過注射或輸注用于靜脈內(nèi)遞送的制劑。然后將小瓶密封，用壓熱器滅菌。vi)注射劑IV將20mg/ml式(I)化合物(例如鹽形式)溶于含有緩沖液(例如0.2M乙酸pH4.6)的水中，來制備通過注射或輸注用于靜脈內(nèi)遞送的制劑。然后將小瓶密封，用壓熱器滅菌。(vii)皮下注射劑通過將本文定義的組合物與藥用級(jí)玉米油混合，來制備用于皮下給藥的組合物，得到的濃度為5mg/ml。將組合物滅菌后裝入合適的容90器中。viii)凍干制劑將配好的等量式(I)化合物裝入50ml小瓶中后凍干。在凍千期間，采用一步凍干方案在-45。C下將組合物冷凍。把溫度升到-10°C用于退火，然后降低至-45。C冷凍，接著在+25。C進(jìn)行初步干燥約3400分鐘，隨后如果溫度升到50°C,則隨升溫步驟進(jìn)行二期干燥。初步干燥和二期干燥的壓力設(shè)為80毫托。等同實(shí)施方案本文所4是供的上述實(shí)施例用于說明本發(fā)明的目的，不得解釋為對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。顯而易見的是，在不偏離本發(fā)明的基本原則的情況下，可以對(duì)上述本發(fā)明和實(shí)施例中所列舉的具體實(shí)施方案進(jìn)行各種各樣的修改和變動(dòng)。所有這樣的修改和變動(dòng)均包括在本申請(qǐng)內(nèi)。權(quán)利要求1.一種組合物，所述組合物包含(S)2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇，其中所述組合物基本不含(R)2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇，或者所述組合物含有(S)和(R)對(duì)映異構(gòu)體的混合物，其中(S)對(duì)映異構(gòu)體占優(yōu)勢(shì)。2.權(quán)利要求1的組合物，所述組合物包含2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物，其至少75%為S-對(duì)映異構(gòu)體的形式。3.權(quán)利要求2的組合物，其中(5)-2-氨基-l-(4-氯-苯基H-[4-(lH-吡唑_4-基)-苯基]-乙醇的對(duì)映異構(gòu)體純度至少為80%。4.權(quán)利要求3的組合物，其中(5)-2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑_4-基)-苯基]-乙醇的對(duì)映異構(gòu)體純度為至少85%,或至少90%,或至少91%、92%、93%、94%、95%、96%、97%、98%、99%或99.5%。5.權(quán)利要求4的組合物，其中(5)-2-氨基-H4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的對(duì)映異構(gòu)體純度大于98%。6.權(quán)利要求5的組合物，其中至少99.9%的2-氨基-l-(4-氯-苯基)-l-[4-(lH-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇為S-對(duì)映異構(gòu)體的形式。7.權(quán)利要求6的組合物，其中基本上沒有(i)-2-氨基-l-(4-氯-苯基)-1-[4-(1&吡唑-4-基)-苯基]-乙醇存在于組合物中。8.上述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組合物，其為含有(5)-2-氨基-l-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇及藥學(xué)上可接受的載體的藥物組合物。9.權(quán)利要求1的組合物，所述組合物由CS)-2-氨基-l-(4-氯-苯基)-1-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的基本純的形式組成，即所含有的雜質(zhì)小于0.5%,更優(yōu)選小于0.1%，最優(yōu)選小于0.01%。10.權(quán)利要求9的組合物，其中沒有一種雜質(zhì)存在的量大于0.2%、更優(yōu)選沒有一種雜質(zhì)存在的量大于0.1%。11.權(quán)利要求10的組合物，其中如果已知，則沒有一種已知雜質(zhì)存在的量大于0.5%，或大于0.4%,或大于0.3%，或大于0.2%，或大于0.1%，或大于0.05%，或大于0.01%。12.上述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組合物，其中(6>2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇為游離堿的形式。13.權(quán)利要求1-11中任一項(xiàng)的組合物，其中(5)-2-氨基-1-(4-氯-苯基)_1-[4-(111-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇為酸加成鹽的形式。14.一種下式(I)化合物或其鹽、溶劑化物、互變異構(gòu)體或N-氧化物其中所述化合物為基本純的形式。15.權(quán)利要求14的式(I)化合物，所述化合物為游離堿或其鹽、溶劑化物或互變異構(gòu)體的形式。16.用于醫(yī)學(xué)的上述權(quán)利要求中任一項(xiàng)的組合物或化合物。17.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物，所述組合物或化合物用于預(yù)防或治療由蛋白激酶B介導(dǎo)的疾病或病癥。18.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物在制備用于預(yù)防或治療由蛋白激酶B介導(dǎo)的疾病或病癥的藥物中的用途。19.一種用于預(yù)防或治療由蛋白激酶B介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括給予有需要的受治療者權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物。20.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物，所述組合物N-NH滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥。21.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物在制備用于治療哺乳動(dòng)物的包括細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的藥物中的用途。22.—種用于治療哺乳動(dòng)物的包括細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蛘哂杉?xì)胞生長(zhǎng)異常引起的疾病或病癥的方法，該方法包括以有效抑制細(xì)胞異常生長(zhǎng)或細(xì)胞死亡異常停滯的量給予哺乳動(dòng)物權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物。23.—種用于減輕或降j氐哺乳動(dòng)物的包括細(xì)力包生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的發(fā)病率的方法，該方法包括以有效抑制細(xì)胞異常生長(zhǎng)的量給予哺乳動(dòng)物權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物。24.—種用于治療哺乳動(dòng)物的包括細(xì)胞生長(zhǎng)異常或細(xì)胞死亡異常停滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的方法，該方法包括以有效抑制蛋白激酶B活性的量給予哺乳動(dòng)物權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物。25.用于抑制蛋白激酶B的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物。26.—種抑制蛋白激酶B的方法，該方法包括使激酶與抑制激酶的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物接觸。27.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物，所述組合物或化合物通過抑制蛋白激酶B和/或蛋白激酶A的活性用于調(diào)節(jié)細(xì)胞過程(例如細(xì)胞分裂)。28.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物在制備用于通過抑制蛋白激酶B和/或蛋白激酶A活性來調(diào)節(jié)細(xì)胞過程(例如細(xì)胞分裂)的藥物中的用途。29.—種調(diào)節(jié)細(xì)胞過程(例如細(xì)胞分裂)的方法，該方法通過使用權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物來抑制蛋白激酶B和/或蛋白激酶A的活性。30.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物，所述組合物或化合物用于預(yù)防或治療由蛋白激酶A介導(dǎo)的疾病或病癥。31.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物在制備用于預(yù)防或治療由蛋白激酶A介導(dǎo)的疾病或病癥的藥物中的用途。32.—種用于預(yù)防或治療由蛋白激酶A介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括給予有需要的受治療者權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或4b合物。33.—種用于治療哺乳動(dòng)物的包括細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的方法，該方法包括以有效抑制蛋白激酶A活性的量給予哺乳動(dòng)物權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物。34.用于抑制蛋白激酶A的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物。35.—種抑制蛋白激酶A的方法，該方法包括使激酶與抑制激酶的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物接觸。36.—種調(diào)節(jié)細(xì)胞過程(例如細(xì)胞分裂)的方法，該方法使用權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物來抑制蛋白激酶A的活性。37.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物在制備用于預(yù)防或治療包括細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯或者由細(xì)胞生長(zhǎng)異?；蚣?xì)胞死亡異常停滯引起的疾病或病癥的藥物中的用途。38.—種藥物組合物，所述藥物組合物包含權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物及藥學(xué)上可接受的載體。39.用于醫(yī)學(xué)的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物。40.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物在制備用于預(yù)防或治療權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)所述的任一種疾病或病癥的藥物中的用途。41.一種用于治療或預(yù)防權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)所述的任一種疾病或病癥的方法，該方法包括給予患者(例如有需要的患者)權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物的化合物(例如治療有效量)。42.—種減輕或降低權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)所述的任一種疾病或病癥的發(fā)病率的方法，該方法包括給予患者(例如有需要的患者)權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物的化合物(例如治療有效量)。43.—種用于診斷和治療由蛋白激酶B介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包4舌(i)篩選患者以確定患者所患或可能患上的疾病或病癥是否是對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶B活性的化合物治療敏感的疾病或病癥；和(ii)如果表明患者所患疾病或病癥對(duì)此敏感，則隨后給予患者權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物。44.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物在制備用于治療或預(yù)防患者的疾病或病癥的藥物中的用途，所述患者已經(jīng)過篩選并確定為患有可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶B活性的化合物治療敏感的疾病或病癥或者有患該疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)。45.用于治療或預(yù)防患者的疾病或病癥的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物，所述患者已經(jīng)過篩選并確定為患有可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶B活性的化合物治療^:感的疾病或病癥或者有患該疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)。46.—種診斷和治療由蛋白激酶A介導(dǎo)的疾病或病癥的方法，該方法包括(i)篩選患者以確定患者所患或可能患上的疾病或病癥是否是可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶A活性的化合物治療敏感的疾病或病癥；和(ii)如果表明患者所患疾病或病癥對(duì)此敏感，則隨后給予患者權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物。47.用于治療或預(yù)防患者的疾病或病癥的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物，所述患者已經(jīng)過篩選并確定為患有可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶A活性的化合物治療敏感的疾病或病癥或者有患該疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)。48.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物在制備用于治療或預(yù)防患者的疾病或病癥的藥物中的用途，該患者已經(jīng)過篩選并確定為患有可能對(duì)用具有針對(duì)蛋白激酶A活性的化合物治療敏感的疾病或病癥或者有患該疾病或病癥的風(fēng)險(xiǎn)。49.用作蛋白激酶B和/或蛋白激酶A調(diào)節(jié)劑(例如抑制劑)的權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物。50.權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物在制備用于調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶B和/或蛋白激酶A的藥物中的用途。51.—種調(diào)節(jié)(例如抑制)蛋白激酶B和/或蛋白激酶A的方法；該方法包括使蛋白激酶B和/或蛋白激酶A(例如在細(xì)胞環(huán)境中-例如在體內(nèi))與權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物接觸。52.—種用于制備權(quán)利要求1-15中任一項(xiàng)限定的組合物或化合物的方法，該方法包括部分或完全拆分2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(11^-吡唑_4-基)-苯基]-乙醇的(5)和(/)對(duì)映異構(gòu)體的混合物。53.權(quán)利要求52的方法，其中(6)和(A)對(duì)映異構(gòu)體采用手性色譜法拆分。54.—種下式(12)化合物或其酸加成鹽<formula>formulaseeoriginaldocumentpage7</formula>55.權(quán)利要求54的酸加成鹽，所述酸加成鹽是4-曱苯磺酸鹽。56.—種下式(17)化合物(12)。(17)。57.—種制備權(quán)利要求54中限定的式(12)化合物的方法，該方法包括使權(quán)利要求56限定的式(17)化合物與叔膦例如三苯基膦在極性非質(zhì)子溶劑中反應(yīng)后用含水酸溶液處理。58.權(quán)利要求57的方法，其中所述含水酸溶液包括選自曱磺酸、乙磺酸、苯磺酸、曱苯磺酸和樟腦磺酸的烷基磺酸或芳基磺酸，最優(yōu)選為4-曱苯磺酸。59.—種制備權(quán)利要求56中限定的式(17)化合物的方法；該方法包括在極性溶劑中，優(yōu)選在加熱時(shí)，使下式(ll)的環(huán)氧化物與選自堿金屬疊氮化物和三甲基*疊氮基曱硅烷的疊氮化物反應(yīng)60.權(quán)利要求59的方法，其中疊氮化物是堿金屬疊氮化物。61.權(quán)利要求60的方法，其中所述堿金屬疊氮化物是疊氮化鈉。62.—種用于制備權(quán)利要求54中限定的式(12)化合物的方法；該方法包括權(quán)利要求59-61中任一項(xiàng)的方法及其后的權(quán)利要求57或權(quán)利要求58的方法。(11)。全文摘要本發(fā)明提供包含(S)2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的組合物，其中該組合物基本不含(R)2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇，或者該組合物含有(S)和(R)對(duì)映異構(gòu)體的混合物，其中(S)對(duì)映異構(gòu)體占優(yōu)勢(shì)。本發(fā)明還提供(S)2-氨基-1-(4-氯-苯基)-1-[4-(1H-吡唑-4-基)-苯基]-乙醇的制備方法、新的加工中間體和新的加工中間體的制備方法。文檔編號(hào)C07D301/00GK101686965SQ200880015813公開日2010年3月31日申請(qǐng)日期2008年3月14日優(yōu)先權(quán)日2007年3月14日發(fā)明者D·C·里斯,K·M·格林肖,M·弗里德里克森,S·J·伍德赫德申請(qǐng)人:阿斯特克斯治療有限公司;癌癥研究所皇家癌癥醫(yī)院;癌癥研究科技有限公司