專利名稱：：去鐵硫辛聚醚類似物的制作方法去鐵硫辛聚醚類似物政府支持本發(fā)明完全或部分地得到國(guó)立衛(wèi)生研究所(theNationalInstituteofHealth,NIH)的國(guó)立糖尿病和消化系統(tǒng)與腎病咨詢委員會(huì)(theNationalDiabetesandDigestiveandKidneyDiseasesAdvisoryCouncil,NIDDK)的支持，授予號(hào)DK49108。美國(guó)政府在本發(fā)明中具有確定的權(quán)利。相關(guān)申請(qǐng)本申請(qǐng)要求2007年3月15日提交的臨時(shí)申請(qǐng)?zhí)?0/966,539的優(yōu)先權(quán)。所述臨時(shí)申請(qǐng)的全部?jī)?nèi)容和公開以及其中引用的每個(gè)專利、專利申請(qǐng)、參考文獻(xiàn)、文本、手稿、論文或其它材料的全部?jī)?nèi)容和公開都被并入本文作為參考。
背景技術(shù)：
：人類已經(jīng)進(jìn)化出高效的鐵管理系統(tǒng)，其中我們每天僅吸收和排泄約1mg的該金屬；但是沒有用于排泄過量鐵的機(jī)制[Brittenham，G.M.DisordersofIronMetabolism:IronDeficiencyandOverload.(鐵代謝紊舌L:鐵缺乏禾口過載)Hematology:BasicPrinciplesandPractice,《血液學(xué)基本原理和實(shí)踐》第三版，Hoffman,R.、Benz，E.J.、Shattil,S.J.、Furie,B,、Cohen,H.J.等人編著；ChurchillLivingstone:NewYork,2000，第397-428頁(yè)]。無論是來源于輸血的血紅細(xì)胞[Olivieri,N.F.和Brittenham,G.M.Iron-chelatingTherapyandtheTreatmentofThalassemia.(鐵螯合療法和治療地中海貧血)Blood1997,89,739-761;Vichinsky,E.P.CurrentIssueswithBloodTransfusionsinSickleCellDisease.(當(dāng)前對(duì)鐮刀狀細(xì)胞病中輸血的爭(zhēng)議)Semin.Hematol.2001,38,14-22;Kersten,M.J.、Lange，R.、Smeets，M.E.、Vreugdenhil，G.、Roozendaal,K.J,、Lameijer，W.和Goudsmit，R.Long-TermTreatmentofTransfusionalIronOverloadwiththeOralIronChelatorDeferiprone(Ll):ADutchMulticenterTrial.(長(zhǎng)期口服鐵螯合劑去鐵酮(Ll)治療輸血型鐵過載)Ann.Hematol.1996,73,247-252]或源于膳食鐵的吸收增加[Conrad,M.E.、Umbreit,J.N.、Moore,E.G.IronAbsorptionandTransport.(鐵口及收禾口轉(zhuǎn)運(yùn))Am.J.Med.Sci.1999,318,213-229;Lieu,P.T.、Heiskala,M.、Peterson,P.A;Yang,Y.TheRolesofIroninHealthandDisease(鐵在健康和疾病狀態(tài)下的作用),Mol.AspectsMed.2001,22，1-87]，未經(jīng)有效的處理，身體的鐵逐漸增加，沉積在肝臟、心臟、胰腺、和其它地方。鐵蓄積最終產(chǎn)生(i)肝臟疾病，其可以進(jìn)展為肝硬化[Angelucci，E.、Brittenham，G.M.、McLaren,C.E.、Ripalti,M.、Baronciani，D.、Giardini，C、Galimberti，M.、Polchi,P.、Lucarelli,G.HepaticIronConcentrationandTotalBodyIronStoresinThalassemiaMajor.(重型地中海貧血中的肝臟鐵濃度和身體總鐵儲(chǔ)存)N.Engl.J.Med.2000,343,327-331;Bonkovsky,H.L.、Lambrecht，R.W.Iron-InducedLiverInjury.(鐵引起的肝損害)Clin.LiverDis.2000，4，409429,vi-vii;Pietrangelo，AMechanismofIronToxicity.(鐵毒性機(jī)理)Adv.Exp.Med.Biol.2002,509，19-43];ii)糖尿病，其與鐵引起的胰腺e細(xì)胞分泌減少以及與肝臟的胰島素抗性增加都有關(guān)[Cario,H.、Holl,R.W.、Debatin,K.M.、Kohne，E.InsulinSensitivityandp-CellSecretioninThalassaemiaMajorwithSecondaryHaemochromatosis:AssessmentbyOralGlucoseToleranceTest.(伴繼發(fā)性血色沉著病的重型地中海貧血中胰島素敏感性和p-細(xì)胞分泌)Eur.J.Pediatr.2003,162，139-146;Wojcik,J.P.、Speechley,M.R.、Kertesz,AE.、Chakrabarti，S.、Adams,P.C.NaturalHistoryofC282YHomozygotesforHemochromatosis.(C282Y純合體對(duì)血色沉著病的自然史)Can.J.Gastroenterol.2002,16,297-302]、和(iii)心臟病，其仍是重型地中海貧血和相關(guān)形式的輸血型鐵過載中死亡的主要原因[Brittenham,G.M.DisordersofIronMetabolism:IronDeficiencyandOverload.((鐵4戈i射紊舌L:鐵缺乏和過載))InHematology:BasicPrinciplesandPractice《血液學(xué)基本原理和實(shí)踐》，第三版，Hoffman,R.、Benz，E.J.、Shattil,S.J.、Furie，B,、Cohen,H丄等人編著；ChurchillLivingstone:NewYork,2000;pp397-428;Brittenham，G.M.、Griffith,P.M.、Nienhuis,AW.、McLaren,C.E.、Young,N.S.、Tucker,E.E.、Allen,C.J.、Farrell,D.E.、Harris,J.W.EfficacyofDeferoxamineinPreventingComplicationsofIronOverloadinPatientswithThalassemiaMajor.(去鐵胺在重型地中海貧血患者中預(yù)防鐵過載并發(fā)癥的療效)N.Engl.J.Med.1994,331,567-573;Zurlo，M.G.、DeStefano,P.、Borgna-Pignatti,C、DiPalma，A.、Piga,A.、Melevendi，C、DiGregorio，F(xiàn).、Burattini，M.G.、Terzoli,S.SurvivalandCausesofDeathinThalassaemiaMajor(重型地中海貧血的存活率和死亡原因).Lancet1989,2,27-30]。盡管鐵占地殼的5%，但是生物系統(tǒng)在獲取和管理這種重要的微量營(yíng)養(yǎng)素時(shí)還有很大的困難。該金屬在生物圈中的主要形式氫氧化鐵(III)的溶解度低(Ksp二1x10-39)[Raymond,K.N.、Carrano，C.丄CoordinationChemistryandMicrobialIronTransport.(配i立j七學(xué)禾口微生物的鐵轉(zhuǎn)運(yùn))Ace.Chem.Res.1979,12,183-190],已經(jīng)引起在自然界中發(fā)展出復(fù)雜的鐵儲(chǔ)存和轉(zhuǎn)運(yùn)系統(tǒng)。微生物利用低分子量、實(shí)質(zhì)上是鐵離子特異性配體的鐵載體[Byers,B.R、Arceneaux,J.E.MicrobialIronTransport:IronAcquisitionbyPathogenicMicroorganisms.(微生物的鐵轉(zhuǎn)運(yùn)病原性微生物獲取鐵)Met.IonsBiol.Syst.1998,35,37-66;Kalinowski,D.S.、Richardson,D.R.TheEvolutionofIronChelatorsfortheTreatmentofIronOverloadDiseaseandCancer.(鐵整合齊廿治療鐵過載病和癌癥的進(jìn)展)PharmacolRev.2005，57，547-583.];更高級(jí)的真核生物傾向于利用蛋白質(zhì)來轉(zhuǎn)運(yùn)和儲(chǔ)存鐵(例如，分別為轉(zhuǎn)鐵蛋白和鐵蛋白)[Bergeron,R.J.Iron:AControllingNutrientinProliferativeProcesses.TrendsBiochem.(鐵生殖過程中的控制性營(yíng)養(yǎng)素)Sci.1986,11,133-136;Theil,E.c;Huynh,B.H.FerritinMineralization:FerroxidationandBeyond.(鐵蛋白礦化鐵氧化及其他)J.Inorg.Biochem.1997,67,30;Ponka,P.、Beaumont,c、Richardson,D.R.FunctionandRegulationofTransferrinandFerritin(轉(zhuǎn)鐵蛋白禾口鐵蛋白的功能和調(diào)節(jié))，Semin.Hematol.1998,35,35-54]。在人類中，非轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合的血漿鐵是該金屬在循環(huán)中的異質(zhì)庫(kù)，看來是鐵介導(dǎo)的器官損害的主要來源。與鐵過量有關(guān)的毒性，無論是全身或是局部問題，均來自它與活性氧物類例如內(nèi)源性過氧化氫(H202))的相互作用[Graf，E.、Mahoney,i.R、Bryant,R.G.、Eaton,J.W.Iron-CatalyzedHydroxylRadicalFormation.StringentRequirementforFreeIronCoordinationSite.(鐵〖崔4七的茅圣基自由基形成.對(duì)有力鐵配位位置的迫切需要)J.Biol.Chem.1984，259,36203624;Halliwell,B.FreeRadicalsandAntioxidants:APersonalView.(自由基和抗氧化劑個(gè)人觀點(diǎn))Nutr.Rev.1994,52,253-265;Halliwell,B.Iron,OxidativeDamage,andChelatingAgents(鐵，氧化性損害和螯合劑).TheDevelopmentofIronChelatorsforClinicalUse《臨床應(yīng)用鐵螯合劑的進(jìn)展》；Bergeron,R.J.、Brittenham,G.M.編輯，CRC:BocaRaton,1994,pp3356;Koppenol,W.KineticsandMechanismoftheFentonReaction:ImplicationsforIronToxicity(費(fèi)頓反應(yīng)的動(dòng)力學(xué)和機(jī)理牽涉鐵毒性).IronChelators:NewDevelopmentStrategies《鐵螯合劑新發(fā)展的策略》；Badman，D.G.、Bergeron,R.J.、Brittenham,G.M.編著，Saratoga:PonteVedraBeach,FL,2000;pp3-10]。在鐵(II)的存在下，H202被還原為羥自由基(HO')，一種極具反應(yīng)性的物類，和HO一，這個(gè)過程被稱為費(fèi)頓(Fenton)反應(yīng)。釋放的鐵(III)可以經(jīng)由各種生物學(xué)還原劑(例如，抗壞血酸)被還原回到鐵(II)，這是一個(gè)有問題的循環(huán)。所述羥自由基非?？焖俚嘏c各種細(xì)胞組分反應(yīng)，并且可以引發(fā)自由基和自由基介導(dǎo)的鏈?zhǔn)竭^程，損害DNA和膜，以及產(chǎn)生致癌物質(zhì)[Halliwell，B.FreeRadicalsandAntioxidants:APersonalView(自由基禾口抗氧化齊U:個(gè)人觀點(diǎn)).Nutr.Rev.1994,52,253-265;Babbs，C.F.OxygenRadicalsinUlcerativeColitis(潰瘍性大腸炎中的氧自由基).FreeRadic.Biol.Med.1992,13,169-181;Hazen,S.L.、d，Avig謹(jǐn)，A、Anderson,M.M.、Hsu,F.F.、Heinecke，J.W.HumanNeutrophilsEmploytheMyeloperoxidase-HydrogenPeroxide-ChlorideSystemtoOxidize9a-AminoAcidstoaFamilyofReactiveAldehydes.MechanisticStudiesIdentifyingLabileIntermediatesalongtheReactionPathway.(人類嗜中性粒細(xì)胞利用髓過氧化酶-過氧化氫-氯化物體系將氨基酸氧化成反應(yīng)性醛家族——鑒別反應(yīng)路徑中易變中間體的機(jī)理研究)J.Biol.Chem.1998,273,4997-5005]。問題的解決方案在于除去過量的不受管理的鐵[Bergeron,R.J.、McManis,J.S.、Weimar，W.R、Wiegand,J.、Eiler陽(yáng)McManis，E.IronChelatorsandTherapeuticUses(鐵螯合齊U禾口治療用途).Burger'sMedicinalChemistry《伯格藥物化學(xué)》，第6版，Abraham,D.A編輯，Wiley:NewYork,2003，pp479-561]。在大部分重型地中海貧血或其它輸血依賴型頑固性貧血患者中，貧血的嚴(yán)重性排除了靜脈切開術(shù)治療作為去除鐵毒性蓄積的方法。用能夠螯合鐵的螯合劑治療并允許其從身體排泄掉則是唯一可用的治療途經(jīng)?，F(xiàn)在應(yīng)用的或處于臨床評(píng)價(jià)下的鐵螯合劑[Brittenham,G.M.IronChelatorsandIronToxicity(鐵螯合劑和鐵毒性).Alcohol2003，30，151-158]包括去鐵胺B甲磺酸鹽(DFOa)、l,2-二甲基-3-羥基吡啶-4-酮(去鐵酮，Ll)、4-[3，5-雙(2-羥基苯基)-l,2，4-三唑-l-基]苯甲酸(地拉羅司(deferasirox)，ICL670A)、和去鐵硫辛(desferrithiocin，DFT)類似物、(S)-2-(2，4-二羥基苯基)-4，5-二氫-4-甲基-4-噻唑甲酸[deferitrin，(S)-4，-(HO)-DADFT,1;表1]。去鐵胺B(DFO)是由叢毛鏈霉菌(Streptomycespilosus)產(chǎn)生的六配位氧肟酸鹽鐵螯合劑，其皮下(sc)輸注[Bickel,H.、Hall，G.E.、Keller-Schierlein,W,、Prelog,V.、Vischer,E.禾BWettstein,A.MetabolicProductsofActinomycetes.XXVII.ConstitutionalFormulaofFerrioxamineB.(放線菌的代謝產(chǎn)物.XXVII.鐵胺B的結(jié)構(gòu)式)Helv.Chim.Acta1960,43,2129-2138]仍被認(rèn)為是處理輸血引起的鐵過載的可靠治療方法[Olivieri,N.F.和Brittenham,G.M.Iron-chdatingTherapyandtheTreatmentofThalassemia(鐵螯合療法禾口治療地中海貧血).Blood1997,89,739-761;Giardina,P.J.和Grady,R.W.ChelationTherapyin(3-Thalassemia:AnOptimisticUpdate(P-地中海貧血的螯合治療樂觀的更新).Semin.Hematol.2001,38,360-366]。DFO口服無活性，并且在SC給藥時(shí)具有非常短的體內(nèi)半衰期，因此必需通過長(zhǎng)時(shí)間的連續(xù)輸注給予[Olivieri,N.F.和Brittenham,G.M.Iron-chelatingTherapyandtheTreatmentofThalassemia(鐵螯合療法禾口治療地中海貧血).Blood1997,89,739-761;Pippard，M.J.Desferrioxamine-InducedIronExcretioninHumans(去鐵胺弓l起人類鐵排泄).Bailliere，sClin.Haematol.1989,2,323-343]。由于這些原因，患者順從性是一個(gè)嚴(yán)重的問題[Olivieri，N.F.和Brittenham，G.M.Iron-chelatingTherapyandtheTreatmentofThalassemia((鐵螯合療法禾口治療地中海貧血)).Blood1997,89,739-761;Giardina，P.J.和Grady,R.W.ChelationTherapyinp-Thalassemia:AnOptimisticUpdate([3-地中海貧血的螯合治療樂觀的更新).Semin.Hematol.2001,38,360-366]?？诜钚缘亩X合(bidentate)螯合劑，去鐵酮，在歐洲和一些其它國(guó)家被許可作為DFO的二線治療[Hoffbrand,AV.、Al-Refaie，F(xiàn).、Davis,B.、Siritanakatkul,N.、Jackson,B.F.A、Cochrane,J.、Prescott，E.、Wonke,B.Long-termTrialofDeferipronein51Transfusion-DependentIronOverloadedPatients(去鐵酮在51位輸血依賴型鐵過載患者中的長(zhǎng)期試驗(yàn)).Blood1998,91,295-300;Olivieri,N.F.Long-termTherapywithDeferiprone.ActaHaematoi.1996,95,37-48;Olivieri,N.F.、Brittenham,G.M.、McLaren,C.E.、Templeton,D.M.、Cameron,R.G.、McClelland,R.A、Burt，AD.、Fleming,K.ALong-TermSafetyandEffectivenessofIron-ChelationTherapywithDeferiproneforThalassemiaMajor.(用去鐵酮對(duì)重型地中海貧血進(jìn)行鐵螯合治療的長(zhǎng)期安全性和有效性)N.Engi.J.Med.1998,339,417-423;Richardson,D.R.TheControversialRoleofDeferiproneintheTreatmentofThalassemia(去鐵酮在治療地中海貧血中有爭(zhēng)議的作用).J.Lab.Clin.Med.2001,137,324-329]。令人遺憾的是，盡管它是口服活性的，但是其除去鐵的效率低于scDFO。盡管口服活性的三齒合(tridentate)螯合劑地拉羅司現(xiàn)在已經(jīng)被FDA批準(zhǔn)，但是其沒能顯示出不比DFO差。此外，其顯然具有稍微窄的治療窗口，是由于其在臨床前毒性研究期間在動(dòng)物中觀察到的潛在腎毒性[Nisbet-Brown,E.、Olivieri,N.F.、Giardina，P.J.、Grady,R.W.、Neufeld,11E.J.、Sechaud，R;Krebs-Brown,AJ.、Anderson,J.R、Alberti,D.、Sizer，K.c、Nathan,D.G.EffectivenessandSafetyofICL670inIron-LoadedPatientswithThalassaemia:aRandomised,Double-Blind,Placebo-Controlled,Dose-EscalationTrial(ICL670在鐵過載的地中海貧血患者中的有效性和安全性隨機(jī)雙盲、安慰劑對(duì)照的劑量遞增試驗(yàn)).Lancet2003，361,1597-1602;Galanello，R、Piga，A、Alberti，D.、Rouan，M.-C、Bigler,H.、Sechaud,R.Safety,Tolerability,andPharmacokineticsofICL670,aNewOrallyActivelron-ChelatingAgentinPatientswithTransfusion-DependentIronOverloadDuetoThalassemia.(新型口月艮f舌性鐵螯合劑ICL670，在患有地中海貧血引起的輸血依賴型鐵過載患者中的耐受性和藥代動(dòng)力學(xué))J.Clin.Pharmacol.2003,43,565-572;Cappellini,M.D.Iron-chelatingtherapywiththeneworalagentICL670(Exjade)(用新型口服劑ICL670(Exjade)的鐵螯合療法).BestPractResClinHaematol2005，18，289-298]。另夕卜，Novartis最近(2007年4月)更新了地拉羅司的處方信息"在Exjade⑧(地拉羅司)的上市后使用中已經(jīng)報(bào)告了急性腎衰竭的病例，有一些產(chǎn)生致命的后果。大部分死亡出現(xiàn)在患有多種共存疾病并且處于其血液病晚期階段的患者中(Casesofacuterenalfailure,somewithafataloutcome,havebeenreportedfollowingthepostmarketinguseofExjade⑧(地拉羅司).Mostofthefatalitiesoccurredinpatientswithmultipleco-morbiditiesandwhowereinadvancedstagesoftheirhematologicaldisorders)"[ExjadePrescribingInformation(Exjade處方信息)，http:〃www.pharma.us.novartis.com/product/pi/pdf/exjade.pdf(May2007訪問)]。最后，配體1是口服活性的三齒合DFT類似物，現(xiàn)在處于在患者中進(jìn)行的I/II期試驗(yàn)階段。盡管1的臨床前毒性特征是相對(duì)良好，即，在高劑量時(shí)沒有遺傳或生殖毒性并只有輕微的腎毒性，但是其臨床結(jié)果仍有待闡明。本發(fā)明的目的是提供可用于治療哺乳動(dòng)物的鐵過載和與其相關(guān)疾病的新的去鐵硫辛(desferrithiocin)類似物。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明實(shí)現(xiàn)了上述和其它目的，本發(fā)明的一個(gè)實(shí)施方案涉及下式的相對(duì)無毒的脫氮雜去鐵硫辛(desazadesferrithiocin)類似物，或其鹽、水合物、或溶劑合物其中Ri、R2、R4和Rs可以相同或不同，并且可為H;具有最多14個(gè)碳原子的直鏈或支鏈垸基，例如甲基、乙基、丙基和丁基；或芳基垸基，其中芳基部分是烴基并且烷基部分是直鏈或支鏈的，所述芳基烷基具有最多14個(gè)碳原子，R2任選地為具有最多14個(gè)碳原子的垸氧基；R3為[(CH2)n-0]x-[(CH2VO]y-烷基；n獨(dú)立地為1-8的整數(shù)；X為1-8的整數(shù)；y為0-8的整數(shù)，和R30可以占據(jù)苯基環(huán)上除4-位之外的任何位置。本發(fā)明另一個(gè)實(shí)施方案涉及治療對(duì)象對(duì)三價(jià)金屬的螯合或多價(jià)螯合有響應(yīng)的病理狀態(tài)的方法，包括給所述對(duì)象施用治療有效量的上述類似物。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及用于治療對(duì)三價(jià)金屬的螯合或多價(jià)螯合有響應(yīng)的病理狀態(tài)的藥物組合物，包括有效量的至少一種上述類似物及其可藥用的載體。本發(fā)明的另一個(gè)實(shí)施方案涉及一種制品，其包括包裝材料和在所述包裝材料內(nèi)包含的藥劑，其中所述藥劑物對(duì)于治療罹患三價(jià)金屬過載的對(duì)象是有效的，并且其中所述包裝材料包括標(biāo)簽，指示所述藥劑可用于改善與三價(jià)金屬過載有關(guān)的癥狀，并且其中所述藥劑是上述的類似物。由此，相當(dāng)寬泛地概括了本發(fā)明更重要的特征，以便可以更好地理解隨后對(duì)其的詳細(xì)說明，以及以便可以更好地理解對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的貢獻(xiàn)。當(dāng)然，本發(fā)明具有另外的特征，將在下文進(jìn)一步描述。實(shí)際上，應(yīng)該理解，前面的概述和隨后的詳細(xì)說明只是示例性的和說明性的，意在為所要求權(quán)利的本發(fā)明提供進(jìn)一步的解釋。在這方面，在詳細(xì)地闡明本發(fā)明的至少一個(gè)實(shí)施方案之前，應(yīng)該理解，本發(fā)明的應(yīng)用不限于以下說明中闡述的和附圖中說明的構(gòu)造細(xì)節(jié)以及組分安排。本發(fā)明可以具有其它實(shí)施方案并可以以多種方式來實(shí)踐和實(shí)施。另外，應(yīng)該理解，本文中所用的措辭和術(shù)語只是用于說明的目的，而不應(yīng)當(dāng)作限制性的。因而，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，作為本公開基礎(chǔ)的概念可以容易地被用作設(shè)計(jì)用于實(shí)施本發(fā)明的幾個(gè)目的的其它結(jié)構(gòu)、方法和系統(tǒng)的基礎(chǔ)。因此，重要的是，不脫離本發(fā)明的精神實(shí)質(zhì)和范圍的等效構(gòu)造都被包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。包括附圖是為了提供對(duì)本發(fā)明的進(jìn)一步理解，并被并入本說明書并且作為其一部分，說明了本發(fā)明的幾個(gè)實(shí)施方案，并與說明書合起來用于闡明本發(fā)明的原理。附圖簡(jiǎn)述圖1.(S)-3，-(HO)-DADFT-PE(9)的&共振和相關(guān)的同核NOE相關(guān)性；NOE百分率緊鄰虛線表示。14圖2.(S)-5，-(HO)-DADFT-PE-iPrE(12)的！H共振和相關(guān)的同核NOE相關(guān)性；NOE百分率緊鄰虛線表示。圖3.用po給予劑量為300umol/kg的DADFT類似物1、3、6和9處理的大鼠的膽汁鐵動(dòng)力學(xué)。鐵清除(y軸)報(bào)告為每千克體重的鐵yg數(shù)。圖4.用sc給予劑量為300umol/kg的DADFT類似物1、3、6和9處理的大鼠的血漿、腎臟、肝臟、心臟和胰腺中的組織分布。濃度(y軸)報(bào)告為每g組織濕重的化合物的uM數(shù)(血漿)或nmol數(shù)。對(duì)于所有的時(shí)間點(diǎn)，n=3。圖5—合成路線1.(S)國(guó)5，-(OH)-DADFT-PE(6)禾口(S)-3，-(OH)-DADFT-PE(9)的合成。圖6—合成路線1&2.分別是(S)-4,5-二氫-2-[2-羥基-4-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(8)-4，-(110)-0八01^^]和[(8)-4,5-二氫-2-[2-羥基-3-(3，6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-3，-(HO)-DADFT-PE]的合成。發(fā)明詳述本發(fā)明基于如下發(fā)現(xiàn)，即，上述的脫氮雜去鐵硫辛類似物在哺乳動(dòng)物中是三價(jià)金屬特別是鐵的非常有效且相對(duì)無毒的螯合劑。更具體地，本發(fā)明基于如下的發(fā)現(xiàn)，S卩，在脫氮雜去鐵硫辛(DADFT)芳族環(huán)的不同位置引入聚醚基團(tuán)大大地增強(qiáng)了所得類似物的鐵清除和器官分布性能。評(píng)價(jià)了三種DADFT聚醚(S)-4，5-二氫-2-[2-羥基-4-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-4，-(HO)-DADFT-PE，3]、(S)-4，5-二氫-2-[2-羥基-5-(3,6，9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-5，-(HO)-DADFT-PE，6]、和(S)-4,5-二氫-2-[2-羥基-3-(3,6，9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-3'-(HO)-DADFT-PE,9]。在嚙齒類動(dòng)物和靈長(zhǎng)類動(dòng)物中的鐵清除效力(ICE)表現(xiàn)出對(duì)所評(píng)價(jià)的位置異構(gòu)體是非常敏感的，在嚙齒類動(dòng)物中的器官分布也是這樣。在嚙齒類動(dòng)物中，所述聚醚均具有比它們的相應(yīng)母體配體更高的ICE,與體內(nèi)配體-血清白蛋白結(jié)合研究相符。在嚙齒類動(dòng)物中，配體9是活性最大的聚醚類似物并且在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中也是非常有效，提示在人類中會(huì)有較高的成功系數(shù)。另外，這個(gè)類似物還表現(xiàn)出比許多其它螯合劑更多地清除靈長(zhǎng)類動(dòng)物尿中的鐵。如果在患者中也觀察到這一傾向，則在臨床情況下實(shí)施鐵平衡研究會(huì)容易得多。配體1是口服活性的三齒合DFT類似物，現(xiàn)在處于在患者中進(jìn)行的I/II期試驗(yàn)階段。盡管1的臨床前毒性特征是相對(duì)良好，即，在高劑量時(shí)沒有遺傳或生殖毒性并只有輕微的腎毒性，但是其臨床結(jié)果仍有待闡明。以前的研究顯示，在去鐵硫辛類似物家族內(nèi)，親脂性更大的螯合劑具有更好的鐵清除效力，也就是說，化合物的l0gPapp值越大，則鐵清除效力(ICE)越好[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis，J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao，H.、Bharti，N.和Rocca,J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783;Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Bussenius,J.、Smith,R.E.和Weimar，W.R.MethoxylationofDesazadesferrithiocinAnalogues:EnhancedIronClearingEfficiency.(脫氮雜去鐵硫辛類似物的甲氧基化提高鐵清除效力)J.Med.Chem.2003,46,1470-1477;Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.禾卩Bharti，N.TheDesign,Synthesis,andEvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med.Chem.2006,49,7032-7043]。還存在有第二個(gè)、雖然稍具妨礙的關(guān)系在所有的配體組中，親脂性較大的螯合劑總是毒性也較大[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.、Rocca，J.R.(S)-4，5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-16噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。以前的研究集中于設(shè)計(jì)在親油性/毒性關(guān)系之間找到平衡同時(shí)保持鐵清除效力的配體。所述研究始于如下的觀察結(jié)果，艮卩，(S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-甲氧基苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-4，-(CH30)-DADFT,2],—種4'-甲基-醚，在嚙齒類動(dòng)物和靈長(zhǎng)類動(dòng)物中都具有優(yōu)異的鐵清除效力；然而，它具有不可接受的毒性[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis，J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.禾卩Rocca,J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783;Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis，J.S.、Bussenius，J.、Smith,R.E.和Weimar,W.R.MethoxylationofDesazadesferrithiocinAnalogues:EnhancedIronClearingEfficiency.(脫氮雜去鐵硫辛類似物的甲氧基化提高鐵清除效力)J.Med.Chem.2003，46，1470-1477]。然而，其確定了(S)-4，-(HO)-DADFT(l)的4'-(HO)官能度的烷基化與鐵清除功能相容?；谶@些觀察結(jié)果，裝配了比2親脂性更低、水溶性更大的配體，聚醚(S)-4,5-二氫-2-[2-羥基-4-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-4，陽(yáng)(HO)-DADFT陽(yáng)PE,3][Bergeron,R.J,、Wiegand,J.、McManis，J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti，N.和Rocca,J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4，5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem,2006,49，2772-2783]。在l被4'-甲氧基化以提供2時(shí)，在嚙齒動(dòng)物模型中口服(po)給藥之后，ICE從1.1±0.8%顯著地提高到6.6±2.8%(p<0.02)[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.禾卩Bharti,N.TheDesign,Synthesis,andEvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med.Chem.2006,49,7032-7043]。其中3,6，9-氧雜癸基基團(tuán)被固定在1的4'-(HO)上的聚醚(3)的表現(xiàn)也很好，在po給藥時(shí)具有5.5±1.9%的ICE(相對(duì)于1，p0.003)[Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis，J.S,、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.和Rocca，J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。對(duì)鐵過載的靈長(zhǎng)類動(dòng)物po給予1的效力是16.8土7.2。/o[Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis,J.S.禾卩Bharti,N.TheDesign,Synthesis,andEvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med.Chem.2006,49,7032-7043]，而po給予的4，-(0130)類似物(2)的ICE是24.4±10.8%[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Bussenius,J.、Smith,R.E.禾卩Weimar，W.R.MethoxylationofDesazadesferrithiocinAnalogues:EnhancedIronClearingEfficiency.(脫氮雜去鐵硫辛類似物的甲氧基化提高鐵清除效力)J.Med.Chem.2003,46,1470-1477]。po給予的相應(yīng)聚醚(3)在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中的表現(xiàn)非常好，效力為25.4±7.40/o[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.和Rocca,J.R.(S)-4，5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。在嚙齒類動(dòng)物中進(jìn)行的較早研究明確地顯示，聚醚(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)的腎毒性有比相應(yīng)的(S)-4，-(CH30)-DADFT類似物(2)或母體藥物(S)-4，-(HO)-DADFT(l)小[Bergeron，R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S,、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.和Rocca,J.R.(S)-4，5-Dihydro隱2-(2曙hydroxy畫4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4曙thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。為了試圖理解毒性的這種差異，3和l在嚙齒類動(dòng)物的肝臟、腎臟、胰腺、和心臟中的組織水平于單次sc給予300umol/kg劑量螯合劑后，在暴露后的2、4、6、和8小時(shí)測(cè)量[Bergeron,R,J.、Wiegand,J.、McManis，J.S.、Vinson，J.R.T.、Yao，H.、Bharti,N.和Rocca，J.R.(S)-4，5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。有兩個(gè)值得注意的觀察結(jié)果。在每個(gè)時(shí)間點(diǎn)，在肝臟中的聚醚3的水平比母體藥物1的水平高得多。在腎臟中，在2小時(shí)的時(shí)間點(diǎn)，聚醚濃度比母體藥物低，在后面的時(shí)間點(diǎn)是類似的[Bergeron，R.J.、Wiegand，J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti，N.和Rocca，J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2國(guó)(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。這看起來與腎毒性降低相符合。R.此外，在將1和3以237ymol/kg/劑的劑量每天兩次對(duì)大鼠po給予(474"mol/kg/天)，為期7天的實(shí)驗(yàn)中[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti，N.和Rocca,J.R.(S)-4,5國(guó)Dihydro-2-(2勿droxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4，5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]，在光學(xué)顯微鏡檢査時(shí)，得自聚醚(3)治療的嚙齒類動(dòng)物的腎的近球小管與得自對(duì)照動(dòng)物的沒有區(qū)別，而遠(yuǎn)球小管呈現(xiàn)偶發(fā)的空泡形成，但是其他方面是正常的[Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.和Rocca，J.R.(S)-4，5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4陽(yáng)hydroxyphenyl)-4-methyl-4國(guó)thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。然而，用1治療的動(dòng)物在近球小管中顯現(xiàn)出區(qū)域性的、中等到嚴(yán)重的空泡形成，刷狀緣消失，并且小管向內(nèi)腔擠出；遠(yuǎn)球小管表現(xiàn)出中等到嚴(yán)重的空泡形成。這些發(fā)現(xiàn)，與聚醚3的提高ICE相結(jié)合，促使我們進(jìn)一步繼續(xù)研究另外的聚醚以及在另外(更早)的時(shí)間點(diǎn)評(píng)價(jià)藥物組織水平。去鐵硫辛，(S)-4,5-二氫-2-(3-羥基-2-吡啶基)-4-甲基-4-噻唑甲酸(DFT)，是一種三齒合鐵載體[Naegeli，H.-D.、Zahner,H.MetabolitesofMicroorganisms.Part193.Ferrithiocin.(微生物代謝物.193部分.鐵硫辛)Helv.Chim.Acta1980,63,1400-1406]，其與Fe(III)形成穩(wěn)定的2:1復(fù)合物；累計(jì)形成常數(shù)是4x1029M"[Hahn,F.E.、McMurry,T.J.、Hugi,A;Raymond,K.N.CoordinationChemistryofMicrobialIronTransport.42.StructuralandSpectroscopicCharacterizationofDiastereomericCr(Hl)andCo(IU)ComplexesofDesferriferrithiocin(微生物鐵轉(zhuǎn)運(yùn)的配位化學(xué).42.去鐵硫辛非對(duì)映異構(gòu)的Cr(Hl)和Co(IU)復(fù)合體的結(jié)構(gòu)和分光光度特征).J.Am.Chem.Soc.1990，112，1854-1860;Anderegg,G.、Raber,M.MetalComplexFormationofaNewSiderophoreDesferrithiocinandofThreeRelatedLigands.(新型鐵載體去鐵硫辛和三種相關(guān)配體的金屬?gòu)?fù)合體形成)J.Chern.Soc.Chem.Cornrnun.1990,1194-1196]。其在口服(po)給予時(shí)，在膽管插管的嚙齒動(dòng)物模型(ICE,5.5%)[Bergeron，R.J.、Wiegand,J.、Dionis，J.B.、Egli-Karmakka,M.、Frei,J.、Huxley-Tencer，A.、Peter,H.H.EvaluationofDesferrithiocinandItsSyntheticAnaloguesasOrallyEffectiveIronChelators.(去鐵硫辛及其合成類似物作為口服有效的鐵螯合劑的評(píng)價(jià))J.Med.Chern.1991,34,2072-2078]以及在鐵過載的巻尾猴(Cebus叩ella)靈長(zhǎng)類動(dòng)物中(ICE,16%)[Bergeron，R.J.、Streiff，R.R;Creary，E.A;Daniels,R.D.、Jr.、King,W,、Luchetta,G.、Wiegand,J.、Moerker,T,、Peter,H.H.AComparativeStudyoftheIron-ClearingPropertiesofDesferrithiocinAnalogueswithDFOinaCebusMonkeyModel.(去鐵硫辛類似物與DFO在巻尾猴模型中鐵螯合性質(zhì)的比較研究)Blood1993，81,21662173;Bergeron,R.J,、Streiff,R.R;Wiegand,J.、Vinson,J.R.T,、Luchetta,G.、Evans,K.M.、Peter，H.、Jenny，H.-B.AComparativeEvaluationofIronClearanceModels.(鐵清除模型的比較評(píng)價(jià))Ann.N.Y.Acad.Sci.1990,612，378-393]都具有很好的表現(xiàn)。令人遺憾的是，DFT具有嚴(yán)重的腎毒性[Bergeron,R.J.、Streiff,R.R.、Creary,E.A.、Daniels,R.D.、Jr.、King,W.、Luchetta,G.、Wiegand，J.、Moerker，T.禾口Peter,H.H.AComparativeStudyoftheIron-ClearingPropertiesofDesferrithiocinAnalogueswithDesferrioxamineBinaCebusMonkeyModel.(去鐵硫辛類似物與去鐵胺B在巻尾猴模型中鐵螯合性質(zhì)的比較研究)Blood1993,81,2166-2173]。然而，出色的口服活性鼓舞了結(jié)構(gòu)-活性研究，以鑒別口服活性的和安全的DFT類似物。最初的目標(biāo)是確定在po給藥時(shí)與鐵清除相容的最小結(jié)構(gòu)平臺(tái)[Bergeron,R.J.、Streiff，R.R.、Creary，E.A.、Daniels,R.D.、Jr.、King,W.、Luchetta,G.、Wiegand,J.、Moerker,T.禾口Peter,H.H.AComparativeStudyoftheIron-ClearingPropertiesofDesferrithiocinAnalogueswithDesferrioxamineBinaCebusMonkeyModel.(去鐵硫辛類似物與去鐵胺B在巻尾猴模型中鐵螯合性質(zhì)的比較研究)Blood1993,81，2166-2173]、[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、Dionis,J.B.、Egli隱Karmakka,M.、Frei，J.、Huxley-Tencer,A.禾口Peter,H.H.EvaluationofDesferrithiocinandItsSyntheticAnaloguesasOrallyEffectiveIronChelators.(去鐵硫辛及其合成類似物作為口服有效的鐵螯合劑的評(píng)價(jià))J.Med.Chem.1991,34,2072-2078]。隨后進(jìn)行了一系列結(jié)構(gòu)-活性研究，目的在于開發(fā)具有良好的口服鐵清除活性和可接受的毒性特征的DFT類似物[Bergeron，R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J,R.T.、Yao,H.、Bharti,N.和Rocca,J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4勿droxyphenyl)-4-methyl-4隱thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783;Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、McCosar,B.H.、Weimar,W.R.、Brittenham,G.M.禾卩Smith,R.E.EffectsofC-4StereochemistryandC-41HydroxylationontheIronClearingEfficiencyandToxicityof21DesferrithiocinAnalogues(C-4立體化學(xué)和C-4，羥基化對(duì)去鐵硫辛類似物的鐵清除效率和毒性的影響).J.Med.Chem.1999,42,2432-2440]。結(jié)果是得到了(S)-4，-(HO)-DADFT(1)，現(xiàn)在處于臨床試驗(yàn)階段。然而，動(dòng)物研究提示，即使在這個(gè)系統(tǒng)中，限制劑量的毒性將可能是腎毒性[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao，H.、Bharti,N.和Rocca,J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006，49，2772-2783]。我們隨后發(fā)現(xiàn)，為4'-位連接聚醚，致使(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)的腎毒性顯著降低。近球小管損害的減少似乎與配體3在2小時(shí)時(shí)腎臟中的水平與母體配體1相比降低相符。[Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.和Rocca，J.R.(S)-4，5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。決定從位置異構(gòu)體角度更好地理解聚醚片段所起到的作用；設(shè)計(jì)策略是基于對(duì)比性結(jié)果(comparativeissues)。致力于三個(gè)問題改變芳族環(huán)中聚醚的位置如何影響(l)在嚙齒類動(dòng)物中的鐵清除效率、(2)在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中的鐵清除效率、和(3)在嚙齒類動(dòng)物中的組織分布？帶著該信息，我們將判斷如何最好地在嚙齒類動(dòng)物中進(jìn)行可能的進(jìn)一步和延長(zhǎng)的毒性試驗(yàn)。在這項(xiàng)研究中評(píng)價(jià)了平臺(tái)，(8)-4,5-二氫-2-(2-羥基苯基)-4-甲基-噻唑甲酸(DADFT)。在每種情況中，為芳族環(huán)的3'(7-9)、4，(卜3)或5'(4-6)位添加單個(gè)取代基，羥基、甲氧基或3,6,9-三氧雜癸氧基。在每種情況中，提供了在嚙齒類和靈長(zhǎng)類動(dòng)物中的鐵清除數(shù)據(jù)，以及k)gPapp數(shù)值(表1和2)。包括了歷史數(shù)據(jù)[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis，J.S.、Bharti，N.TheDesign,Synthesis,andEvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med.Chem.2006,49,7032-7043;Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao，H.、Bharti,N.、Rocca，J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783;Bergeron,R.J.、Wiegand,J,、McManis,J.S.、McCosar，B.H.、Wdmar，W.R;Brittenham,G.M.、Smith,R.E.EffectsofC-4StereochemistryandC-4'HydroxylationontheIronClearingEfficiencyandToxicityofDesferrithiocinAnalogues.(C-4立體化學(xué)和C-4，羥基化對(duì)去鐵硫辛類似物的鐵清除效率和毒性的影響)J.Med.Chem.1999,42，2432-2440;Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis,J.S.、Bussenius，J.、Smith,R.E.、Weimar,W.R.MethoxylationofDesazadesferrithiocinAnalogues:EnhancedIronClearingEfficiency.(脫氮雜去鐵硫辛類似物的甲氧基化提高鐵清除效率)J.Med.Chem.2003,46,1470-1477;Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis，J.S.、Weimar，W.R;Park,J.-H.、Eiler-McManis,E.、Bergeron,J.、Brittenham,G.M.Partition-VariantDesferrithiocinAnalogues:OrganTargetingandIncreasedIronClearance.(分配改變的去鐵硫辛類似物器官定向和增加鐵清除)J.Med.Chem.2005,48,821-831]。關(guān)于配體在嚙齒類動(dòng)物的器官中分布的討論限于(S)-4，-(HO)-DADFT(l)和三種三氧雜癸氧基化合物3、6和9(圖4)。非聚醚2、4和5的器官分布數(shù)據(jù)可以在以前的出版物中找到[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Bharti,N.TheDesign,Synthesis,andEvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med.Chem.2006,49，7032-7043]?？捎玫闹С中畔⒑铣苫衔锏脑胤治鰯?shù)據(jù)。如下實(shí)現(xiàn)(8)-4,5-二氫-2-[2-羥基-5-(3，6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-5，-(HO)-DADFT-PE，6]和(S)-4，5-二氫-2-[2-羥基-3-(3，6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)3，-(HO)-DADFT-PE(9)]的合成首先將(8)-2-(2,5-二羥基苯基)-4,5-二氫-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-5，-(HO)-DADFT，4]和(S)-2-(2,3-二羥基苯基)-4,5-二氫-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-3，-(HO)-DADFT，7〗分別轉(zhuǎn)化為其異丙酯IO和乙酯ll(合成路線1)。(S)5，-(HO)-DADFT(4)通過在N,N-二異丙基乙胺(1.8當(dāng)量)的存在下在DMF中用2-碘丙烷(1.8當(dāng)量)烷基化，以定量的收率轉(zhuǎn)化為其異丙酯10。(S)-3，-(HO)-DADFT的乙酯11通過在DMF中用碘乙烷(1.8當(dāng)量)和N,N-二異丙基乙胺(1.8當(dāng)量)進(jìn)行烷基化得到?；衔?0和11然后在三信(Mitsunobu)條件下[在THF中的偶氮二羧酸二異丙酯(1.19當(dāng)量)和三苯基膦(1.23當(dāng)量)]，使用等摩爾量的三(乙二醇)單甲基醚在5，-羥基和3，-羥基處被垸基化，分別以52和25%的收率得至(J(S)-5，-(HO)-DADFT-PE-iPrE(12)和(S)-3，-(HO)-DADFT-PE-EE(13)。在甲醇中用50%NaOH水解異丙酯和乙酯，隨后用2NHC1酸化，得到(S)-5，-(HO)-DADFT-PE(6,97%)和60%收率的(S)3，-(HO)-DADFT-PE(9)。為了證明9的聚醚鏈確實(shí)連接于3，-位，而不是其2'-羥基上，獲得質(zhì)子核歐沃豪斯(Overhauser)效應(yīng)(NOE)示差譜，結(jié)果如圖1中所示。在4.28ppm處的共振的低能飽和度，屬于最靠近芳香族殘基的聚醚的亞甲基質(zhì)子(g)，使3.94ppm處的相鄰亞甲基(e)信號(hào)增強(qiáng)6。/。，而在7.30ppm處單獨(dú)的芳香族信號(hào)(i)也顯示顯著增強(qiáng)了11%。這些觀察結(jié)果與9的結(jié)構(gòu)相符。還使用質(zhì)子NOE示差譜來驗(yàn)證聚醚鏈的垸基化發(fā)生在12的5'位，而不是位阻更大的2，-羥基；這些結(jié)果顯示在如2中。在4.10ppm的信號(hào)輻射，屬于聚醚鏈的亞甲基(h)，使3.84ppm處的相鄰亞甲基(f)共振增強(qiáng)6%，并且在6.94ppm(j)和7.01ppm(k)的兩個(gè)芳香族信號(hào)分別顯示顯著了增強(qiáng)13%和7%。這些增強(qiáng)顯示，12的結(jié)構(gòu)與所示相同，因此，得到的水解產(chǎn)物確實(shí)是6。在非鐵過載的嚙齒類動(dòng)物中進(jìn)行的螯合劑誘導(dǎo)的鐵清除。我們以前證明了在(S)-4，-(HO)-DADFT系列、(S)-4，-(HO)-DADFT(1)、(S)-4，-(CH30)-DADFT(2)、禾口(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)中，甲氧基配體(2;ICE6.6±2.8%)和聚醚(3;ICE5.5±1.9%)分別是比母體配體1的ICE1.1±0.8%(相對(duì)于2為p<0.02和相對(duì)于3為pO.003)更有效的鐵螯合齊廿(表l)[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis，J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti，N.和Rocca,J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4曙噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。提示一下，鐵清除效率(ICE)定義為(凈鐵排泄)/(螯合劑的總鐵結(jié)合能力)，以百分率表示。化合物l和2的相對(duì)ICE值符合它們的logPapp值親脂性越大，logP，越大，螯合劑越有效。但是對(duì)于聚醚類似物3情況不是這樣的；它具有比其l0gPapp所預(yù)測(cè)的大得多的活性。然而，ICE趨勢(shì)符合膽汁鐵動(dòng)力學(xué)(圖3)和螯合劑的肝臟濃度，例如3>l(圖4)。至于(S)-S，國(guó)(HO)-DADFT系列(表1)，(S)-5，曙(HO)-DADFT(4)、(S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-5-甲氧基苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-5，-(CH30)-DADFT，5]、禾口(S)-5，-(HO)-DADFT-PE(6)，甲氧基類似物5(ICE6.3±1.2%)和聚醚6(ICE8.0±1.8%)都是比母體配體4(ICE1.0±0.9%)更有效的鐵螯合劑(分別是，相對(duì)于5為p<0.001和相對(duì)于6為p<0.005)。此外，4與5的相對(duì)ICE符合logPapp和肝臟濃度[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.禾口Bharti,N.TheDesign,Synthesis,andEvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med.Chem.2006,49,7032-7043]。盡管肝臟濃度(圖4)是聚醚6的ICE相對(duì)于4好的指示[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.禾卩Bharti,N.TheDesign,Synthesis,and25EvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med.Chem.2006,49,7032-7043]，但logP柳不是。值得注意的是，在(S)-5，-(HO)-DADFT和(S)-4'-(HO)-DADFT系列中，相應(yīng)的HO-、CH30-和聚醚配體具有相似的ICE值和相似的在尿和膽汁中的鐵清除分布(表1)。(S)-3，-(HO)-DADFT組化合物7-9的ICE與4'-(HO)和5'-(HO)系列非常不同。所述配體作為一個(gè)家族在清除鐵方面更有效(表1)。此外，盡管通過logPapp值預(yù)測(cè)了3'-(HO)和3'-(CH30)化合物的相對(duì)鐵清除效率，但是沒有預(yù)測(cè)3，-聚醚(9)的ICE。在這種情況中最相關(guān)的是3'-聚醚(9)和4，-聚醚(3)之間的ICE顯著差異；3，-配體(9)接近200r。更有效(10.6±4.4%對(duì)5.5±1.9%，p<0.05)。9的ICE也大于5-聚醚6的(分別為10.6±4.4%對(duì)8.0±1.8%)，但是增加未達(dá)顯著性(p-0.06)。尿相對(duì)于膽汁，鐵排泄的模式是相似的。母體1和三種聚醚3、6和9的膽汁鐵動(dòng)力學(xué)(圖3)顯示，配體1的鐵清除Og/kg)在給藥后3小時(shí)達(dá)峰，并且從未超過68lig/kg。由4'-和5，-聚醚(3和6)誘導(dǎo)的鐵排泄也在三小時(shí)達(dá)峰，但是水平高得多，分別為183和388ug/kg(1相對(duì)于3或6都是p<0.001)。3，-聚醚9處理的動(dòng)物的膽汁鐵含量在6小時(shí)最大，為287"g/kg。另夕卜，盡管l、3和6的膽汁鐵清除在15小時(shí)回到基線水平，但是3'-聚醚(9)直到>30小時(shí)仍良好保持高于這個(gè)水平(數(shù)據(jù)未示出)。9的鐵排泄的延遲達(dá)峰和活性持續(xù)時(shí)間還反映在組織分布研究(圖4)中，在以下討論。在鐵過載的巻尾猴靈長(zhǎng)類動(dòng)物中的螯合劑誘導(dǎo)的鐵清除。提供了所有三組配體的鐵清除數(shù)據(jù)(表2)。在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中(S)-4，-(HO)-DADFT系列的情況下，盡管(S)-4，-(HO)-DADFT(1)和(S)-4，-(CH30)-DADFT(2)的平均ICE值提示與logPapp的相關(guān)性，例如，親脂性更大的類似物2的ICE(24.4±10,8%)[Bergeron,R.J.、Wiegand,J,、McManis，J.S.、Bussenius,J.、Smith,R.E.禾口Weimar,W.R.MethoxylationofDesazadesferrithiocinAnalogues:EnhancedIronClearingEfficiency(脫氮雜去鐵硫辛類似物的甲氧基化增加鐵清除效率).J.Med.Chem.2003,46,1470-1477]>1的ICE(16.8±7.2%)[Bergeron，R.J.、Wiegand,J.、McManis，J.S.、McCosar,B.H.、Weimar,W.R.、Brittenham,G.M.禾口Smith,R.E.EffectsofC-4StereochemistryandC-4'HydroxylationontheIronClearingEfficiencyandToxicityofDesferrithiocinAnalogues.(C-4立體化學(xué)和C-4'羥基化對(duì)去鐵硫辛類似物的鐵清除效率和毒性的影響)J.Med.Chem.1999,42,2432-2440]，但是增加不顯著。盡管(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)在1-3系列中是親脂性最小的螯合劑，但是卻是與類似物2同樣有效(ICE,25.4±7.4%)[Bergeron，R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao，H.、Bharti,N.禾卩Rocca，J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)j.Med.Chem.2006,49,2772-2783]并且比母體1略更有效，盡管提高不是十分顯著(p=0.06)。在(S)-5，-(HO)-DADFT類似物4-6的情況中，配體的ICE趨勢(shì)與logP卿有很好的相關(guān)性。親脂性最大的配體5的ICE(18.9士2.3。/。)比親脂性最小的類似物6(ICE8.1±2.8%,p〈0.001)的有效性高過兩倍；5還比螯合劑4(ICE12.6士3.0o/o)更有效(p0.01)[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.禾卩Bharti,N.TheDesign,Synthesis,andEvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med.Chem.2006,49,7032-7043]。至于(S)-3，-(HO)-DADFT類似物7-9，盡管在logPapp上有明顯的差異，但是三種配體的ICE都在彼此的誤差范圍內(nèi)(表2)。關(guān)于聚醚配體的最終比較性注釋涉及膽汁與尿的金屬排泄。在嚙齒動(dòng)物模型中，數(shù)字通常是相似的，幾乎所有的鐵都在膽汁中排泄(表1)。在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中情況不是這樣的；在尿中發(fā)現(xiàn)了大得多的部分的鐵(表2)。最顯著的情況是在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中(S)-5，-(HO)-DADFT-PE(6)具有56/44的糞/尿比例，和(S)-3，-(HO)-DADFT-PE(9)具有72/28的糞/尿比例。在嚙齒類動(dòng)物中，這些數(shù)字分別是98/2和95/5。靈長(zhǎng)類動(dòng)物相對(duì)于嚙齒類動(dòng)物的鐵清除性能比。性能比(PR),定義為平均ICE靈長(zhǎng)類動(dòng)物/ICE嚙齒類動(dòng)物？是值得注意的(表3)。初看起來，配體在鐵過載的靈長(zhǎng)類動(dòng)物中比在非鐵過載的大鼠中一致地表現(xiàn)更好并不令人驚訝(表1和2)。靈長(zhǎng)類動(dòng)物組的平均ICE比得上嚙齒動(dòng)物組的平均ICE(表3)。盡管對(duì)于1-5和7-9來說，兩個(gè)物種的標(biāo)準(zhǔn)偏差不相等，但是這并不重要，因?yàn)榘骄档膮^(qū)間并不互相影響。對(duì)于5'-聚醚(6)來說情況不是這樣，其ICE在兩個(gè)物種中實(shí)質(zhì)上是相等的。性能比的最大差異通常隨母體配體1、4、和7發(fā)展。但是，在組內(nèi)(即，1對(duì)2和3、4對(duì)5和6、以及7對(duì)8和9)比率變化如此顯著的事實(shí)提示，在靈長(zhǎng)類動(dòng)物與嚙齒類動(dòng)物的對(duì)比中，ICE差異并不是完全基于猴子是鐵過載的而嚙齒類動(dòng)物不是的事實(shí)。配體-白蛋白結(jié)合對(duì)ICE的可能影響。為了試圖理解母體配體1、4、和7以及它們的類似物之間在嚙齒動(dòng)物模型中的ICE差異，我們進(jìn)行了集中于配體-白蛋白結(jié)合的一系列實(shí)驗(yàn)。我們選擇針對(duì)處于由Genzyme進(jìn)行臨床試驗(yàn)的藥物(S)-4'-(HO)-DADFT(1)?；叵胍幌孪鄳?yīng)的聚醚(3)在嚙齒動(dòng)物中表現(xiàn)顯著更好(對(duì)于3和1，ICE分別為5.5±1.9%對(duì)l.l±0.8%)[Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.和Rocca，J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4，5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4.甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。在大鼠中進(jìn)行了集中于將(S)-4，-(HO)-DADFT(1)和(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)從血清白蛋白結(jié)合部位轉(zhuǎn)移的一系列對(duì)比實(shí)驗(yàn)。苯甲酸已經(jīng)很好地確立了作為將藥物從人血清白蛋白兩個(gè)位置轉(zhuǎn)移的配體[Ostergaard,J.、Schou,C，Larsen,C.禾口Heegaard，N.H.Evaluationofcapillaryelectrophoresis-frontalanalysisforthestudyoflowmolecularweightdrug-humanserumalbumininteractions.(低分子量藥物-人血清白蛋白相互作用研究的毛細(xì)管電泳前沿分析)Electrophoresis2002,23,2842-2853]。我們選擇評(píng)價(jià)使用苯甲酸鈉處理膽管-插管的嚙齒類動(dòng)物對(duì)轉(zhuǎn)移任何可能結(jié)合于SudlowI型和II型白蛋白結(jié)合部位的螯合劑的影響[Ostergaard,J.、Schou，C，Larsen，C.和Heegaard,N.H.Evaluationofcapillaryelectrophoresis-frontalanalysisforthestudyoflowmolecularweightdrug-humanserumalbumininteractions.((低分子量藥物-人血清白蛋白相互作用研究的毛細(xì)管電泳前沿分析))Electrophoresis2002,23,2842-2853]。進(jìn)行了五個(gè)實(shí)驗(yàn)(表4)。嚙齒類動(dòng)物被給予(i)以250mg/kg/劑sc給予的溶解于蒸餾水的苯甲酸鈉，給藥六次，(ii)以300nmol/kgpo給予的(S)-4,-(HO)-DADFT(l)，(iii)以300umol/kgpo給予的1加上苯甲酸鈉(250mg/kg/劑)。在給予1之前的0.5小時(shí)給予苯甲酸鈉并且在其后的每小時(shí)再給5個(gè)劑量，(iv)以300wmol/kgpo施用(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3),或(v)以300umol/kgpo給予3加上苯甲酸鈉(250mg/kg/劑)。苯甲酸鈉也是在給予3之前的0.5小時(shí)給予，并且在其后的每小時(shí)再給5個(gè)劑量。結(jié)果(表4)表明，苯甲酸鈉本身的sc給藥不誘導(dǎo)任何鐵清除。然而，如上所述在除了l之外還對(duì)嚙齒類動(dòng)物施用苯甲酸鈉時(shí)，ICE有10.9倍的增加，從1.1±0.8%增加到12.0±2.6%(p<0.001)。在相同條件下，(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)的ICE也增加，但是幅度小得多，從5.5±1.9%到8.8±2.4%(p<0.05)，為1.6倍的增加。更低劑量的苯甲酸鈉對(duì)1的ICE增加具有較小的影響(數(shù)據(jù)未示出)。這些數(shù)據(jù)符合在嚙齒類動(dòng)物中母體配體和相應(yīng)聚醚之間的ICE差異有可能很依賴配體-白蛋白結(jié)合差異的想法。該數(shù)據(jù)還符合靈長(zhǎng)類動(dòng)物相對(duì)于嚙齒類動(dòng)物的性能比差異，也就是說，配體對(duì)靈長(zhǎng)類動(dòng)物白蛋白的結(jié)合均不如對(duì)嚙齒動(dòng)物白蛋白緊密。在嚙齒類動(dòng)物中的螯合劑組織分布。使3,6,9-三雜癸氧基(聚醚)基團(tuán)在DADFT芳族環(huán)周圍移動(dòng)解決了兩個(gè)問題——對(duì)ICE的影響和對(duì)組織分布的影響。這些評(píng)價(jià)代表了在鑒定哪個(gè)一_如果有的話一一另外的DADFT聚醚應(yīng)該進(jìn)入嚙齒類動(dòng)物的延長(zhǎng)毒性試驗(yàn)中的第一步。目前的研究明確表明，將聚醚從DADFT的芳族環(huán)4'-位移動(dòng)到3，-或5'-位對(duì)于所得配體的ICE(表1和2)和組織分布(圖4)有深遠(yuǎn)的影響。在腎中(圖4)，在0.5小時(shí)時(shí)間點(diǎn)，5，-聚醚(6)達(dá)到最高濃度(643±92nmol/g濕重)，隨后是4，-聚醚(3;368土74nmol/g濕重，相對(duì)于6p<0.01)和3'-聚醚(9;280土26nmol/g濕重，相對(duì)于6p<0.01)。有趣的是，在這個(gè)時(shí)間點(diǎn)，4，-聚醚(3)和母體(1;361±56nmol/g濕重)的濃度接近相同(p>0.05)。在1小時(shí)，同樣5，-配體(6)是最大濃度(435±111nmol/g濕重)，而3，-螯合劑(9)和4，-螯合劑(3)達(dá)到非常相似的水平(分別為259±35和252±10nmol/g濕重)。母體藥物1的濃度最小(179土4nmol/g濕重)。在2小時(shí)，相對(duì)的腎臟水平實(shí)際上是不同的。此外，5'-配體(6)濃度最大(321土20nmol/g濕重)>>9;145±27nmol/g濕重>>3;41±3nmol/g濕重(6與9或3相比，pO.OOl)。在4小時(shí)，順序現(xiàn)在為6(116±65nmol/g濕重)"9(90±7nmol/g濕重)>3(34±13nmol/g濕重)"1(27±7nmol/g濕重)?；叵胍幌?，以前的研究證明了4，-聚醚(3)比母體藥物(S)-4，-(HO)-DADFT(1)的腎毒性小得多[Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T,、Yao，H.、Bharti，N.和Rocca,J.R.(S)-4，5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4，5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783〗。這符合在2小時(shí)時(shí)間點(diǎn)的相對(duì)的組織水平4'-聚醚濃度3比母體1低得多[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti，N.禾口Rocca,J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4墨噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。然而，得自2小時(shí)之前時(shí)間點(diǎn)的腎濃度數(shù)據(jù)不符合4'-聚醚(3)相對(duì)于母體(l)的腎毒性降低可以簡(jiǎn)單地以腎臟螯合劑水平更低來解釋的想法。在0.5小時(shí)，三種聚醚配體的肝臟濃度(圖4)遵循與腎中所見的相同相對(duì)順序，6(483±85nmol/g濕重)〉3(339±35nmol/g濕重)>9(242±38nmol/g濕重)。在1小時(shí)，所有三種聚醚類似物在肝臟中的的濃度都是相似的("315nmol/g濕重)。有趣的是，在1小時(shí)，3'-聚醚(9)的濃度從242±38nmol/g濕重顯著地提高到318±46nmol/g濕重(p〈0.05)，而6和3的濃度分別降低36%和6%。在2和4小時(shí)，3，-配體(9)在肝臟中的濃度最大，隨后是5'-類似物(6)和4'-類似物(3)。在所有的時(shí)間點(diǎn)，母體1的肝臟濃度低于聚醚(圖4)。在心臟中，在0.5小時(shí)(圖4)聚醚的相對(duì)濃度(6>3>9)遵循腎和肝臟中相同時(shí)間點(diǎn)的相同趨勢(shì)。然而，實(shí)際水平低得多，<90nmol/g濕重。在1和2小時(shí)，在心臟中的濃度順序保持一樣。在4小時(shí)，5'-配體(6)仍是濃度最大的螯合劑。盡管在0.5小時(shí)時(shí)母體藥物1高于9，但是在所有其它時(shí)間點(diǎn)，它都是濃度最小的配體(圖4)。在胰腺中(圖4)，在所有的時(shí)間點(diǎn)，聚醚的相對(duì)濃度都是6>3>9。從0.5到1小時(shí)，3和9二者的組織含量都提高(圖4)。在2小時(shí)，3和6的水平相似("30nmol/g濕重)，而9的濃度是16nmol/g濕重。在0.5小時(shí)，母體藥物(l)的濃度高于3和9,在1小時(shí)相似(圖4)。在2小時(shí)，l是濃度最小的配體，在4小時(shí)時(shí)檢測(cè)不出。血槳螯合劑濃度數(shù)據(jù)(圖4)符合配體倍快速清除的想法。在0.5小時(shí)，血漿配體水平[6(324土20uM)>3(194土60nM)>9(62士24uM)]反映了肝臟、腎臟、胰腺、和心臟中的情況。在1小時(shí)，盡管順序相同，但是6減少39%，3減少28%，9減少26%。在2小時(shí)，6這時(shí)降低54%，3降低92%，9降低61%。在4小時(shí)，6降低82%，3降低97%，9降低79%。配體3的血漿濃度降低顯著地比6或9的消失更快。然而，319從未達(dá)到接近3和6的血漿水平。母體藥物1只在0.5小時(shí)濃度高于9;在所有其它時(shí)間點(diǎn)其低于所有的其它配體(圖4)。該觀察結(jié)果與螯合劑的肝臟濃度有關(guān)，提示1和9的有效首過清除。由于3'-聚醚(9)的出色I(xiàn)CE及其適中的腎臟濃度，這種配體將進(jìn)入臨床前毒性試驗(yàn)。對(duì)這種配體特別感興趣的事實(shí)在于其在嚙齒類和靈長(zhǎng)類動(dòng)物中表現(xiàn)都很好，提示在人類中具有較高的成功系數(shù)。早期研究明確地顯示，在嚙齒類動(dòng)物中，聚醚(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)的腎毒性比相應(yīng)的(S)-4，-(CH30)-DADFT(2)或母體藥物(S)-4，-(HO)-DADFT(l)明顯更小[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis，J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao，H.、Bharti，N.和Rocca，J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity,((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。聚醚3還表現(xiàn)出在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中具有優(yōu)異的鐵清除效率。用(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)處理的大鼠腎的組織病理學(xué)呈現(xiàn)出與從暴露于母體配體1的嚙齒類動(dòng)物采集的組織相比，近球小管的結(jié)構(gòu)變化明顯更少[Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao，H.、Bharti，N.禾卩Rocca,J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4勿droxyphenyl)隱4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。在2小時(shí)時(shí)，從4，-聚醚(3)處理的動(dòng)物得到的最初腎臟組織水平測(cè)量結(jié)果看來與組織病理學(xué)一致；在腎中的聚醚比母體藥物少，并且腎毒性較低[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.和Rocca,J.R.(S)-4，5-Dihydro-2—(S-hydroxy-A-hydroxyphenyl^A-mothyl-A-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)j.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。使用4，-聚醚(3)在嚙齒類和靈長(zhǎng)類動(dòng)物二者中的ICE以及觀察到的沒有毒性促使來研究將3,6,9-聚醚鏈連接于DADFT的芳族環(huán)上4'-碳以外的位置對(duì)ICE和配體組織分布的影響。選擇了兩個(gè)系統(tǒng)，(S)-3'-(HO)-DADFT-PE(9)和(S)-5，-(HO)-DADFT-PE(6)(表1和2)。裝配兩種配體的關(guān)鍵步驟(合成路線l)包括在三信(Mitsunobu)條件下用三(乙二醇)單甲醚將2,5-二羥基異丙酯(10)或2,3-二羥基乙酯(ll)烷基化。在這個(gè)烷基化之后進(jìn)行酯水解。三信垸基化對(duì)于5，或3'是高度特異性的，并不涉及2，-(HO)，可能是因?yàn)榭臻g排列的原因。反應(yīng)的區(qū)域選擇性與聚醚9和12二者的核歐沃豪斯效應(yīng)示差譜(圖1和2)—致。盡管在嚙齒類動(dòng)物中甲氧基化類似物相對(duì)于其相應(yīng)母體(l對(duì)2)、(4對(duì)5)、和(7對(duì)8)的情況中以及在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中對(duì)于5'取代的配體4-6，logP^是ICE的預(yù)報(bào)因子，但是它對(duì)于母體對(duì)聚醚的比較來說并不是有用的工具。每組化合物在嚙齒類中，聚醚的ICE都顯著大于母體配體的ICE(l對(duì)3,500%，p<0.003;4對(duì)6,800%,pO.005;禾卩7對(duì)9,230%,p<0.05;表1)。這提示很有可能存在配體-金屬通道之外的其它參數(shù)控制ICE:通過各種有機(jī)陰離子轉(zhuǎn)運(yùn)例如cMOAT進(jìn)行的金屬?gòu)?fù)合物轉(zhuǎn)運(yùn)效率、金屬?gòu)?fù)合物本身的logPapp、和配體-白蛋白結(jié)合。在嚙齒類動(dòng)物中，母體和聚醚之間例如(S)-4'-(HO)-DADFT(l)和(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)的ICE差異表現(xiàn)出與配體-白蛋白結(jié)合差異平行(表3)。嚙齒類動(dòng)物與l或3—起給予苯甲酸鈉，苯甲酸鈉是已知從SudlowI型和II型白蛋白結(jié)合部位轉(zhuǎn)移配體的化合物。苯甲酸鈉的sc施用使1的ICE提高10.9倍(p〈0.001)。給予配體3和苯甲酸鈉的動(dòng)物的ICE也得到提高，但是只有1.6倍(p0.05)。這可以最終解釋，至少部分解釋，靈長(zhǎng)類動(dòng)物相對(duì)于嚙齒類動(dòng)物的配體ICE差異。螯合劑對(duì)靈長(zhǎng)類動(dòng)物白蛋白的結(jié)合均更弱。在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中，配體ICE的差異不那么顯著，并且，除了4與6的比較外，通常在實(shí)驗(yàn)誤差內(nèi)(表2)其中母體的ICE(12.6土3.0。/o)大于相應(yīng)聚醚6的ICE(8.1±2.8%)(p<0.05)。改變聚醚的位置對(duì)配體-組織濃度的影響是顯著的(圖4)。在肝臟之外的所有組織中的濃度趨勢(shì)通常是(S)-5'-(HO)-DADFT-PE(6)>(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)>(S)-3，-(HO)-DADFT-PE(9)。在肝臟中0.5小時(shí)，濃度也是6>3>9>1，在1小日寸，6"3"9>>1。但是，在該時(shí)間點(diǎn)之外，9達(dá)到并保持在最高濃度。數(shù)據(jù)最混淆不清的部分與2小時(shí)之前時(shí)間點(diǎn)的(S)-4'-(HO)-DADFT-PE(3)的腎配體濃度有關(guān)。以前的研究明確地證明，4'-聚醚(3)比母體藥物(S)-4，-(HO)-DADFT(l)的腎毒性小得多[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.禾BRocca,J.R.(S)-4，5隱Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4隱methy1—4陽(yáng)thiazokcarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。這與在2小時(shí)時(shí)間點(diǎn)的腎組織水平(l>3)一致[Bergeron，R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.禾卩Rocca，J.R.(S)-4，5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4，5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。然而，在本研究中，發(fā)現(xiàn)1和3在0.5小時(shí)具有相似的濃度；在1小時(shí)，配體3實(shí)際上略高于1。因此看來，聚醚3相對(duì)于母體1的毒性降低不能簡(jiǎn)單地通過腎臟螯合劑濃度解釋。最后，配體3、6和9的性能比(ICE靈長(zhǎng)類/ICE噴齒類)都《4.6，表明在兩個(gè)物種之間有可比較的鐵清除。盡管配體6在靈長(zhǎng)類動(dòng)物和嚙齒類動(dòng)物中具有實(shí)質(zhì)上相同的ICE(PR=1.0)，但是其在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中是三種聚醚中效率最低的(ICE8.1±2.8%),并且不會(huì)對(duì)其繼續(xù)研究。盡管3，-(CH30)-DADFT(8)在嚙齒類動(dòng)物中是最有效的螯合劑(12.4±3.5%)并且在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中也有很好的表現(xiàn)(22.5±7.1%)，但是預(yù)期的毒性特征(腎毒性)分別與4'-和5，-(CH30)-DADFT配體2[Bergeron,R.J.、34Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti，N.禾卩Rocca,J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((8)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)j.Med.Chem.2006，49,2772-2783]和5[Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis，J.S.禾口Bharti,N.TheDesign,Synthesis,andEvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med.Chem.2006,49,7032-7043]相似，并將不會(huì)繼續(xù)下去。(S)-3，-(HO)-DADFT-PE(9)在靈長(zhǎng)類動(dòng)物(24.5土7.6。/o)和大鼠(10.6±4.4%)中表現(xiàn)都很好，PR2.3，提示在第三個(gè)物種——人類中會(huì)有較高的成功系數(shù)。另外，如果在患者的尿中也發(fā)現(xiàn)在猴子尿中排泄的相對(duì)大部分的鐵，則會(huì)促進(jìn)鐵-平衡研究的執(zhí)行。這種螯合劑將進(jìn)入到嚙齒類動(dòng)物的延長(zhǎng)的臨床前毒性評(píng)價(jià)中。在實(shí)施例中巻尾猴(C.apella)得自WorldWidePrimates(Miami,FL)。雄性的Sprague-Dawley大鼠得自HarlanSprague-Dawley(Indianapolis,IN)。CremophorRH-40得自BASF(Parsippany,NJ)。超纟屯鹽購(gòu)自JohnsonMattheyElectronics(Royston:U.K.)。所有的血液學(xué)和生物化學(xué)研究[Bergeron，R.J.、Streiff,R.R.、Creary,E.A.、Daniels,R.D.、Jr.、King,W.、Luchetta,G.、Wiegand,J.、Moerker,T.禾口Peter,H.H.AComparativeStudyoftheIron-ClearingPropertiesofDesferrithiocinAnalogueswithDesferoxamineBinaCebusMonkeyModel.(去鐵硫辛類似物與去鐵胺B在巻尾猴模型中鐵螯合性質(zhì)的比較研究)Blood1993,81,2166-2173]都由AntechDiag簡(jiǎn)tics(Tampa,FL)進(jìn)行。原子吸收(AA)測(cè)量在Perkin-Elmer5100PC型(Norwalk,CT)上進(jìn)行。組織病理學(xué)分析由FloridaVetPath(Bushnell,FL)進(jìn)行。在非鐵過載的大鼠中膽管插管術(shù)以前已有描述。插管術(shù)以前已有描述。以3小時(shí)間隔從雄性的Sprague-Dawley大鼠(400-450g)收集膽汁樣品，直到48小時(shí)。以24小時(shí)間隔收集尿樣品。樣品收集和處理如前所述[Bergeron,R.J.、Streiff,R.R.、Creary,E.A.、Daniels,R.D.、Jr.、King,W.、Luchetta,G.、Wiegand，J.、Moerker,T.和Peter,H.H.AComparativeStudyoftheIron-ClearingPropertiesofDesferrithiocinAnalogueswithDesferoxamineBinaCebusMonkeyModel.(去鐵硫辛類似物與去鐵胺B在巻尾猴模型中鐵螯合性質(zhì)的比較研究)Blood1993,81,2166-2173;Bergeron,R.J.、Streiff，R.R.、Wiegand，J.、Vinson,J.R.T.、Luchetta,G.、Evans，K.M.、Peter,H.和Jenny,H,B.AComparativeEvaluationofIronClearanceModels.(鐵清除模型的比較評(píng)價(jià))Ann.N.Y.Acad.Sci.1990，612,378-393]。如以前的出版物中詳細(xì)說明的，用靜脈內(nèi)給予鐵-葡聚糖以提供每kg體重約500mg鐵而使猴子(3.5-4kg)鐵過載[Bergeron,R.J.、Streiff，R.R.、Wiegand,J.、Luchetta,G,、Creary,E.A.禾卩Peter,H.H.AComparisonoftheIron-ClearingPropertiesofl,2-Dimethyl-3-hydroxypydd-4-one，l,2-Diethyl-3-hydroxypyrid-4-one，andDeferoxamine.(1,2誦二甲基-3-,圣基吡啶-4-酮、1，2-二乙基-3-羥基吡啶-4-酮和去鐵胺的鐵螯合性質(zhì)比較)Blood1992,79，1882-1890];血清轉(zhuǎn)鐵蛋白鐵飽和度升高到70-80%之間。在至少20個(gè)半衰期，60天[Wood，J.K.、Milner,P.F.和Pathak,U.N.TheMetabolismofIron-dextranGivenasaTotal-doseInfusiontoIronDeficientJamaicanSubjects.(鐵-葡聚糖以全劑量輸注給予缺鐵的牙買加受試者的機(jī)制)Br.J.Haematol.1968,14,119-129]之后，才將任何動(dòng)物用于評(píng)價(jià)鐵螯合劑的實(shí)驗(yàn)。以24小時(shí)間隔收集糞便和尿樣品，并且如前所述進(jìn)行處理[Bergeron,R.J.、Streiff,R.R.、Creary,E.A.、Daniels,R.D.、Jr.、King,W.、Luchetta,G,、Wiegand,J.、Moerker,T.禾口Peter,H.H.AComparativeStudyoftheIron-ClearingPropertiesofDesferrithiocinAnalogueswithDesferoxamineBinaCebusMonkeyModel.(去鐵硫辛類似物與去鐵胺B在巻尾猴模型中鐵螯合性質(zhì)的比較研究)Blood1993,81，2166-2173;36Wiegand，J.、Vinson,J.R,T.、Luchetta，G.、Evans,K.M.、Peter,H.禾卩Jenny,H.國(guó)B.AComparativeEvaluationofIronClearanceModels.(鐵清除模型的比較評(píng)價(jià))Ann.N.Y.Acad.Sci.1990,612,378-393;Bergeron,R.J.、Wiegand,J.和Brittenham,G.M.HBED:APotentialAlternativetoDeferoxamineforIron-ChelatingTherapy.(HBED:鐵螯合療法中去鐵胺的潛在備選品)Blood1998,91,1446-1452]。簡(jiǎn)而言之，在施用試驗(yàn)藥物之前的4天開始收集并且持續(xù)到給藥之后的另外5天。通過在其它出版物中提供的火焰原子吸收光譜法測(cè)定鐵濃度[Bergeron,R.J.、Streiff,R.R.、Wiegand,J.、Vinson,J.R.T.、Luchetta,G.、Evans，K.M.、Peter,H.和Jenny,H,B.AComparativeEvaluationofIronClearanceModels.(鐵清除模型的比較評(píng)價(jià))Ann.N.Y.Acad.Sci.1990,612,378-393;Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、Wollenweber,M.、McManis，J.S.、Algee,S.E.和Ratliff-Thompson,K.SynthesisandBiologicalEvaluationofNaphthyldesferrithiocinIronChelators.(萘基去鐵硫辛鐵螯合劑的合成和生物學(xué)評(píng)價(jià))J.Med.Chem.1996,39,1575-1581]。在鐵清除實(shí)驗(yàn)中，大鼠口服給予(po)單一30(Uimol/kg劑量的藥物1-9。將化合物作為(l):水溶液(3);或(2):感興趣的化合物的單鈉鹽(通過向游離酸在蒸餾水中的懸浮液加入l當(dāng)量的NaOH來制備)(l-2、4-9)。將藥物以75umol/kg(6、9)或150umol/kg(l-5、7-8)的劑量對(duì)猴子po給藥。同樣制備用于大鼠的藥物，不同之處在于將2和7-8溶解在40%CremophorRH-40/水中。根據(jù)2:1復(fù)合物產(chǎn)生螯合劑的理論鐵排出量。按照別處的說明計(jì)算在大鼠和猴子中的效率[Bergeron,R.J.、Wiegand，J.、McManis，J.S.、McCosar，B.H.、Weimar,W.R.、Brittenham,G,M.和Smith,R.E.EffectsofC-4StereochemistryandC-4'HydroxylationontheIronClearingEfficiencyandToxicityofDesferrithiocinAnalogues.(C-4立體化學(xué)禾口C-4'羥基化對(duì)去鐵硫辛類似物的鐵清除效率和毒性的影響)J.Med.Chem.1999,42,2432-2440]。數(shù)據(jù)表示為平均值士平均標(biāo)準(zhǔn)誤差；通過單尾sutdent，st檢驗(yàn)生成p值，其中假定方差不等；并且認(rèn)為p值〈0.05是顯著的。從嚙齒類動(dòng)物收集組織分布樣品雄性Sprague-Dawley大鼠(250-350g)給予如上所述制備的6和9的單鈉鹽300umol/kg劑量，單次sc注射劑。在給藥之后0.5、1、2、和4小時(shí)的時(shí)間，使動(dòng)物暴露于032氣體進(jìn)行安樂死(每個(gè)時(shí)間點(diǎn)11=3)。經(jīng)由心臟穿刺獲得血液放入含有檸檬酸鈉的真空采血管中。將血液離心，并分離血漿用于分析。然后從動(dòng)物取出肝臟、心臟、腎、和胰腺。制備用(S)-4'-(HO)-DADFT(1)禾口(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)處理的動(dòng)物的組織樣品，如前所述用于HPLC分析[Bergeron，R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti,N.禾卩Rocca,J.R.(S)-4,5-Dihydro-2-(2勿droxy-4勿droxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫陽(yáng)2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]。在本研究中，通過將得自(S)-3，-(HO)-DADFT-PE(9)和(S)-5，-(HO)-DADFT-PE(6)處理的大鼠的組織以l:3(w/v)的比例在0.5NHC104中勻漿來制備用于HPLC分析。然后，加入l:3(w/v)比例的CH3OH作為漂洗并將混合物在-20。C儲(chǔ)存30分鐘。將勻漿離心。上清液用流動(dòng)相A(95y。緩沖液[25mMKH2P04,pH3.0]/5%CH3CN)稀釋，渦旋，并且用0.2um薄膜過濾。如前所述[Bergeron,R.J.、Wiegand，J,、Weimar,W.R.、McManis,J.S.、Smith,R.E.禾卩Abboud，K.A.IronChelationPromotedbyDesazadesferrithiocinAnalogues:AnEnantioselectiveBarrier.(脫氮雜去鐵硫辛類似物促進(jìn)鐵螯合對(duì)映選自屏障)Chirality2003,15,593-599;Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、Ratliff-Thompson,K.禾口Weimar，W.R.TheOriginoftheDifferencesin(R)-and(S)-Desmethyldesferrithiocin:Iron-ClearingProperties.((R)-和(S)-去甲基)去鐵硫辛差異的起源鐵螯合性質(zhì))Ann.N.Y.Acad.Sci.1998,850,202-216]，在DiscoveryRPAmideC16HPLC38系統(tǒng)上以310nmUV檢測(cè)進(jìn)行分析分離。流動(dòng)相和色譜條件如下溶劑A，5yoCH3CN/95。/。緩沖液；溶齊UB，60%CH3CN/40。/o緩沖液。通過用RaininDynamaxHPLCMethodManager軟件(RaininInstrumentCo.)進(jìn)行未加權(quán)最小二乘法線性回歸，從對(duì)校準(zhǔn)曲線擬合的峰面積計(jì)算濃度。該方法的檢測(cè)限為0.25uM，并且在1-lOOOyM范圍內(nèi)是可復(fù)現(xiàn)的和線性的。組織分布數(shù)據(jù)表示為平均值；p值通過單尾studentt檢驗(yàn)生成，其中假定方差不等并且認(rèn)為p值〈0.05是顯著的。使用以前發(fā)表的方法合成化合物4和7[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.禾口Bharti，N.TheDesign,Synthesis,andEvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med，Chem.2006,49,7032-7043;Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Weimar,W.R,、Park,J.-H.、Eiler-McManis,E.、Bergeron,J.禾卩Brittenham,G.M.Partition-VariantDesferrithiocinAnalogues:OrganTargetingandIncreasedIronClearance.(分配改變的去鐵硫辛類似物器官定向和增加鐵清除)J.Med.Chem.2005,48,821-831]。試劑購(gòu)自AldrichChemicalCo.(Milwaukee，WI)，并且常規(guī)使用FisherOptima級(jí)溶劑。DMF在惰性氣氛下蒸餾，THF自鈉和二苯甲酮蒸餾。反應(yīng)在氮?dú)夥障逻\(yùn)行，有機(jī)提取物用硫酸鈉干燥并過濾。使用得自SiliCycle，Inc.的硅膠40-63用于快速柱色譜法。用于反相柱色譜法的C-18得自SigmaChemicalCo。利用Perkin-EImer341旋光儀偏振器在589nm(鈉D線)處測(cè)量旋光性，c是以氯仿中每100mL溶液中的化合物克數(shù)表示的濃度。在400MHz記錄&NMR光譜，并且化學(xué)位移(S)以對(duì)于CDC13是距離四甲基硅烷(未指示)或?qū)τ贒20是距離3-(三甲基甲硅烷基)丙酸鈉-2,2,3,3-(14下游的百萬分率給出。"C光譜在100MHz運(yùn)行，化學(xué)位移(S)參考CDC13中殘余溶劑共振(S77.16)的百萬分率給出。耦合常數(shù)(J)以赫茲表示，對(duì)于ESI-FTICR質(zhì)譜報(bào)告了基峰。元素分析由AtlanticMicrolabs(Norcross,GA)進(jìn)行。在500MHz得至ljNOE示差譜，并且樣品沒有脫氣、沒有旋轉(zhuǎn)、且探針溫度調(diào)節(jié)在27"。對(duì)于12，濃度為15mg/0.6mLCDC13;對(duì)于9，濃度為5mg/mLD20。39通過低功率輻射偏共振、然后對(duì)亞甲基氫進(jìn)行共振，得到用于研究核歐沃豪斯效應(yīng)(NOE)的分離光譜，使用3秒的預(yù)飽和時(shí)間、45°脈沖、和3秒的采集時(shí)間。典型地，在用指數(shù)線加寬和傅里葉變換處理之前，對(duì)于每對(duì)自由感應(yīng)衰減累積100-300次采集。通過從共振預(yù)飽和光譜減去輻射偏共振光譜提供NOE示差譜。然后通過相關(guān)信號(hào)的積分分析這些示差譜。對(duì)于標(biāo)記為g(圖l)和h(圖2)的兩個(gè)氫的反轉(zhuǎn)亞甲基共振態(tài)被指定為-200%的積分值，然后將各種其它共振態(tài)正信號(hào)增強(qiáng)的積分取作它們母體信號(hào)的百分比增強(qiáng)。結(jié)果報(bào)告為得自每個(gè)示差譜的三或四個(gè)重復(fù)的平均增強(qiáng)。實(shí)施例12-(2,5-二羥基苯基)-4,5-二氫-4-甲基-4-噻唑甲酸異丙酯(10)。將2-碘丙烷(8.95g,52.65mmol)和DIEA(6.79g,52.65mmol)先后加入到含4(7.40g,29.25mmol)的DMF(90mL)中，并將溶液在室溫?cái)嚢?2小時(shí)。在高真空下除去溶劑之后，殘余物用1:1的0.5M檸檬酸/飽和NaC1(300mL)處理并用EtOAc提取(250mL，2x100mL)。合并的有機(jī)提取物用50mL份的1%NaHS03、H20和飽和NaCl洗滌并將溶液蒸發(fā)。通過使用含20。/。EtOAc的甲苯進(jìn)行快速柱色譜純化，得到7.94g的10(92%)，為黃色油[a]20+41.1。；'HNMRS1.27和1.29(2d,6H，J=5.5),1.65(s,3H),3.21(d,1H，J=11.6),3.85(d,1H，J=11.2)，5.09(septet,1H,J=6.4),6.89(m，2H,);13CNMRS21.70,24.36,40.05，70.02,83.78,115.90,115.94,118.05，121.59，148.02，153.11,171.24，172.57;HRMSm/z，對(duì)C14H18N04S的計(jì)算值，296.0956(M+H)，實(shí)測(cè)值296.0956。分析(C,4H"N04S)C，H，N。實(shí)施例22-(2，3-二羥基苯基)-4,5-二氫-4-甲基-4-噻唑甲酸乙酯(11)。將碘乙烷(8.61g,55.20mmol)和DIEA(7.13g，55.20mmol)先后加入到含7(7.36g，29.06mmol)的DMF(100mL)中，并將溶液在室溫?cái)嚢?8小時(shí)。在高真空除去溶劑之后，殘余物用1:1的0.5M檸檬酸/飽和NaCI(300mL)處理并用EtOAc提取(200mL，2x100mL)。合并的有機(jī)層用150mL份的l%NaHS03、H20、和飽和NaCl洗滌并將溶劑蒸發(fā)。通過使用含10%EtOAc的DCM進(jìn)行快速柱色譜純化，得到8.01g的11(98%),為黃色油[a]20+57.41°;&NMR1.31(t,3H,7=7.2),1.68(s,3H)，3.25(d，1H,J=11.6)，3.88(d,1H,J=11.2),4.26(q,2H,J=7.2),5.71(brs,1H),6.79(t,1H，J=7.8)，6.97(dd，1H,J=8.4,1.2),7.03(dd，1H,J=7.8,1.2);13CNMRS14.22，24.56,40.19,62.17,83.26,115.74,117.88,119.13,121.20，145.11,146.83，172.09,172.69;HRMSm/z，C13H15N04SNa的計(jì)算值，304.0619(M+Na);實(shí)測(cè)值304.0625。分析(C函5N04S)C，H,N。實(shí)施例3(S)-4,5-二氫-2-[2-羥基-5-(3，6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸異丙酯(12):將三(乙二醇)單甲醚(3.19g,19.40mmol)和偶氮二羧酸二異丙基酯(4.73g，23.39mmol)先后加入到冰浴冷卻的含10(5.62g，19.02mmol)和三苯膦(5.93g，22.63mmol)的無水THF(120mL)溶液中。將溶液在室溫下攪拌5小時(shí)，并且在5'C保持16小時(shí)。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，加入40%EtOAc/石油醚(100mL)。將溶液在5"C保持12小時(shí)，將形成的固體過濾。將濾液真空濃縮并通過柱色譜法純化(50%EtOAc/石油醚)，得到4.36g的12(52%)，為黃色油[a]2()+23.2°;^NMRsS1.27和1.29(2d，6H，J=6.2),1.65(s,3H),3.22(d,1H,J=11.2),3.53-3.58(m,2H),3.64-3.71(m,4H)，3.72墨3.77(m,2H),3.84(t，2H,J=4.7)，3.87(d,1H，J=11.4),4.08-4.12(m,2H),5.08(septet,1H,J=4.0)，6.91國(guó)6.96(m,2H),7.01(dd,1H,J=9.2,3.2),12.02(brs,1H);13CNMRS21.71，24.37,40.01,59.15,68.52,69.69,69.91，70.68，70.76,70.92,72.03,83.83,115.23，115.82,118.03,121.49,151.17，153.80，171.12,172.13;HRMSm/z，C21H32N07S計(jì)算值，442.1899(M+H);實(shí)測(cè)值442.1887。分析(C21H32N07S)C，H，N。實(shí)施例4(S)-4，5-二氫-2-[2-羥基-5-(3，6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4曙噻唑甲酸(6)。在冰浴冷卻下將含50%(w/w)NaOH(3.34mL,94mmol)的CH3OH(34mL)溶液加入到含12(2.14g,4.85mmol)的CH3OH(70mL)中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌18小時(shí)，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去大部分的溶劑。殘余物用稀的NaC1(100mL)處理并用乙醚(3x50mL)提取。堿性水相在冰中冷卻，用2NHC1酸化到pH=2，并用EtOAc提取(3x100mL)。在將EtOAc層用飽和NaC1(100mL)洗滌之后，以下使用的玻璃器皿在在3NHC1中預(yù)浸15分鐘。在旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑之后，得到1.88g的6(97%)，為橙色油[a]20+40.0°;NMR(D20)3l'72(s，3H),3.26(d,IH,J=11.2),3.38(s,3H),3.54-3,58(m,2H),3.64-3.71(m,4H),3.72-3.76(m，2H),4.07-4.1l(m,3H)，6.91-6.95(m,2H),7.01(dd,1H,J=9.0,3.0);13CNMR824.46,40.04,59.04，68.40,69.86,70.48,70.62，70.80:71.91，83.44,115.21,115.65,118.09,121.63，151.12,153.69,171.83,176.18;HRMSm/z，C18H26N07S計(jì)算值，400.1429(M+H);實(shí)測(cè)值400.1416。實(shí)施例5(S)-4，5-二氫-2-[2-羥基-3-(3,6，9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸乙酯(13)。將三(乙二醇)單甲醚(1.70g,10.36mmol)和偶氮二甲酸二異丙基酯(2.53g，12.50mmol)先后加入到冰浴冷卻的含11(3.0g,10.16mmol)和三苯膦(3.17g,12.09mmol)的無水THF(60mL)溶液中。將溶液在室溫下攪拌8小時(shí)，并且在5。C保持40小時(shí)。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，加入40%EtOAc/石油醚(50mL)。將溶液在5。C保持12小時(shí)，將形成的固體過濾。將濾液真空濃縮并通過柱色譜法純化，用50e/。EtOAc/石油醚洗脫，得到1.08g的13(25%)，為橙色油。在C-18反相柱上純化分析樣品，分別用等體積的50%MeOH水溶液和40%MeOH水溶液洗脫[ct]2Q440.0°;NMRSs1.30(t,3H，7=7.2),1.66(s，3H),3.23(d,1H,J=11.2)，3.38(s,3H),3.52國(guó)3.58(m,2H),3.63-3.71(m，4H),3.74-3.79(m,2H)，3.88(d,1H,7=11.6),3.91(t，2H，J=5.0),4.20-4.26(m，4H)，6.79(t，1H,7=7.6)，7.01-7.07(m,2H);13CNMRS14.18,24.47,39.96，59.10,62.07,68.95,69.79,70.60，70.70,70.91,71.99，83.48,116.42，117.62，118.29，122.71,147.72,150.35,171.70，172.69;H謹(jǐn)Sm/z計(jì)算值，C20H29NO7SNa，450.1562(M+Na);實(shí)測(cè)值450.1568。元素分析(C20H29NO7S)C，H,N。實(shí)施例6(S)-4，5-二氫-2-[2-羥基-3-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸(9)在冰浴冷卻下將含50%(w/w)NaOH(13.88mL，266.02mmol)的CH3OH(120mL)溶液加入到含13(8.89g,20.80mmol)的CH3OH(280mL)中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌6小時(shí)，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去大部分的溶劑。殘余物用稀NaCl(300mL)處理并將堿性的水相在冰中冷卻，用2NHC1酸化到pH=2，并用EtOAc提取(4x150mL)。在將EtOAc層用飽和NaC1(300mL)洗滌之后，以下使用的玻璃器皿在3NHC1中預(yù)浸15分鐘。在通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑之后，在C-18反相柱上進(jìn)行純化，用50%甲醇水溶液洗脫并且凍干，得到4.98g的9(60%)，為橙色油[a]2Q+61.9°;&NMR(D20)SL77(s,3H),3.35(s,3H)，3.56-3.62(m,3H)，3.64-3.73(m,4H),3.75國(guó)3.89(m,2H),3.92-3.96(m，2H),3.99(d，1H，7=11.6),4.25-4.3l(m，2H),6.99(t,1H,7=8.2),7.26-7.33(m,2H);13CNMRS24.52，39.93,59.07，69.04,69.83，70.49，70.64,70.86,71.97,83.21，116.33，117.94，118.50,122.80，147.67,150.24,172.38，176.10;HRMSm/z，計(jì)算值C18H26NO7S，400.1429(M+H);實(shí)測(cè)值400.1413,表1.去鐵硫辛類似物在對(duì)嚙齒類動(dòng)物口服給藥時(shí)的鐵清除活性和化合物的分配系數(shù)<table>tableseeoriginaldocumentpage44</column></row><table>a.在嚙齒類動(dòng)物中[11=3(6)、4(2,4,5,7,9)、5(3,8、或8(1)]，劑:為300umol/kg。將化合物溶解于蒸餾水中(3)或作為它們通過向游離酸在蒸餾水中的懸浮液加入1當(dāng)量NaOH而制備的單鈉鹽給予(l、2、4-9)。通過從處理的動(dòng)物的鐵排泄中減去對(duì)照動(dòng)物的鐵排泄，計(jì)算每個(gè)化合物的效率。然后用理論排出量除以這個(gè)數(shù)字，結(jié)果表示為百分?jǐn)?shù)。括號(hào)中顯示在膽汁和尿中的鐵排泄的相對(duì)百分比。數(shù)據(jù)表示為在辛醇層中的部分的對(duì)數(shù)(logPapp);使用"搖瓶"直接法在pH7.4的TRIS緩沖液中進(jìn)行測(cè)量。化合物1和2的數(shù)值得自Bergeron等人，J.Med.Chem.2003,46，1470-1477;3的數(shù)值得自Bergeron等人，J.Med.Chem.2006,49,2772-2783;4和5的數(shù)值得自Bergeron等人，J.Med.Chem.2006，49，7032-7043;7和8的數(shù)值得自Bergeron等人，J.Med.Chem,2005,45，821-831。c.數(shù)據(jù)得自參考文獻(xiàn)Bergeron等人，J.Med.Chem.2006,49，2772-2783。d.數(shù)據(jù)得自參考文獻(xiàn)Bergeron等人，J.Med.Chem.2006，49,7032-7043.。e.ICE基于48小時(shí)的樣品收集時(shí)間。表2.去鐵硫辛類似物在對(duì)巻尾猴靈長(zhǎng)類動(dòng)物動(dòng)物口服給藥時(shí)的鐵清除活性和化合物的分配系數(shù)去鐵硫辛類似物鐵清除效率(o/o)a'CO2HCS)-4'-(HO)-DADFT,116.8±7.2C[88/12]CH30.、CH3(5>4'-(CH30)-DADFT,224.4±10.8"[91/9](W-(HO)-DADFT-PE,25.4±7.4e[96/4]々CH3S^^C02HQS>5'-(HO)-DADFT,412.6±3.(/[88/12]logPapi-1.05-0.70一I.IO_1.1445QS>5'-(CH30)-DADFT，58.1±2.8s-1.27[56/44]QS>3'-(HO)-DADFT22.5±7."-1.12[91/9]24.5±7.6g—1.22[72/28]a.在猴子中，[n=4(3-7)、5(8)、6(1)、或7(2,9)]。將藥物以75umol/kg(6、9)或150iimol/kg(1-5、7-8)的劑量po給藥。將化合物溶解于蒸餾水(3)、40%Cremophor(2、7、8)中，或作為它們通過向游離酸在蒸餾水中的懸浮液加入1當(dāng)量的NaOH而制備的單鈉鹽給予(l、4-6、9)。如下計(jì)算每個(gè)化合物的效率將給藥之前4天的鐵排出量取平均值，從給藥后的2天鐵清除減去這些數(shù)，然后除以理論排出量；結(jié)果表示為百分?jǐn)?shù)。括號(hào)中顯示在糞和尿中的鐵排泄的相對(duì)百分比。b.數(shù)據(jù)表示為在辛醇層中的部分的對(duì)數(shù)(logPapp);使用"搖瓶"直接法在pH7.4的TRIS緩沖液中進(jìn)行測(cè)量?；衔?和2的數(shù)值得自參考文獻(xiàn)Bergeron等人，J.Med.Chem.2003,46,1470-1477;3的數(shù)值得自參考文獻(xiàn)Bergeron等人，J.Med,Chem.2006，49,2772-2783;4和5的數(shù)值得自參考文獻(xiàn)[Bergeron,R.J.、Wiegand,J.、McManis，J.S.和Bharti,N.TheDesign,Synthesis,andEvaluationofOrgan-SpecificIronChelators.(器官特異性鐵螯合劑的設(shè)計(jì)、合成和評(píng)價(jià))J.Med.Chem.2006,49,7032-7043];對(duì)于7和8的數(shù)值得自Bergeron等人，J.Med.Chem.2005，48,821-831。c.數(shù)據(jù)得自Bergeron等人，J.Med.Chem.1999，42,2432-2440。18.9±2.y[94/6]—0.610S>5'-(HO)-DADFT-PE,623.1±5.一-1.17[83/17]CH3q>(5)-3'-(CH30)-DADFT,8GS>3'-(HO)-DADFT-PE,946d.數(shù)據(jù)得自Bergeron等人，J.Med.Chem.2003,46,1470-1477。e.數(shù)據(jù)得自Bergeron等人，J.Med.Chem.2006，49,2772-2783。f.數(shù)據(jù)得自Bergeron等人，J.Med.Chem.2006，49，7032-7043。g.齊慢為75|imol/kg。h.數(shù)據(jù)得自Bergeron等人，J.Med,Chem.2005,48，821-83L表3.去鐵硫辛類似物在靈長(zhǎng)類動(dòng)物對(duì)嚙齒類動(dòng)物中的鐵清除效率性能比去鐵硫辛類似物<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>(W-(ho)-dadft，1s--/\;o2h(W-(CH30)-DADFT，2W、qs)匿4'-(ho)-dadft-pe，、CO2H(W-(ho)-dadft,4CH3qs)-5'-(ch30)-dadft,s0S)-5'-(ho)-dadft-pe,6OHr乂"3(W-(ho)-dadft，CH3q(W-(CH30)-dadft,8I(TE靈長(zhǎng)類/IGE咱齒類15.:4.612.61.05.01.8<formula>formulaseeoriginaldocumentpage47</formula>(S)-3'-(HO)-DADFT-PE,9表4.在用苯甲酸鈉處理的嚙齒類動(dòng)物中的配體-白蛋白結(jié)合實(shí)驗(yàn)劑量途徑N鐵清除效率(%)苯甲酸鈉250mg/kg/劑sc5基線鐵排泄(S)-4，-(HO)-DADFT(1)300umol/kgpo81.1±0.8(S)-4，-(HO)-DADFT(1)力口分別為300ymol/kg和250分別為po和12.0±2.6b上苯甲酸鈉mg/kg/齊!jsc(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)300nmol/kgpo5.5±1.9(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)分別為300umol/kg和250分別為po和48.8±2.4e加上苯甲酸鈉mg/kg/齊Usca.配體l作為其通過向游離酸在蒸餾水中的懸浮液加入1當(dāng)量的NaOH制備的單鈉鹽po給藥。配體3溶解于蒸餾水中并且po給予。苯甲酸鈉溶解于蒸餾水中并以250mg/kg/劑sc給予6劑。苯甲酸鈉的第一劑在螯合劑之前的0.5小時(shí)給予；另外的劑量在其后5小時(shí)每小時(shí)一次給予。b.相對(duì)于沒有苯甲酸鹽的1處理的動(dòng)物，p<0.001。c.相對(duì)于沒有苯甲酸鹽的3處理的動(dòng)物，p<0.05。本發(fā)明還包括上式表示的化合物的對(duì)映異構(gòu)體和對(duì)映異構(gòu)體混合物(例如，外消旋混合物)以及它們的鹽(例如，可藥用的鹽)、溶劑合物和水合物。本發(fā)明的化合物可以作為具有使平面偏振光的平面旋轉(zhuǎn)能力的光學(xué)活性形式存在。在描述光學(xué)活性化合物時(shí)，前綴D和L或R和S用于表示分子手性中心周圍的絕對(duì)構(gòu)型。前綴d和1或(+)和(-)用于標(biāo)明化合物旋轉(zhuǎn)平面偏振光的符號(hào)，(-)或l是指化合物為左旋的。以(+)或d為前綴的化合物是右旋的。對(duì)于給定的化學(xué)結(jié)構(gòu)，被稱為立體異構(gòu)體的這些化合物是相同的，不同之處在于一個(gè)或多個(gè)手性碳是彼此的不能重疊的鏡像。作為另一個(gè)立體異構(gòu)體的精確鏡像的特定立體異構(gòu)體還可以稱為對(duì)映異構(gòu)體，這樣的異構(gòu)體的混合物經(jīng)常被稱為對(duì)映體混合物。對(duì)映異構(gòu)體的50:50混合物被稱為外消旋混合物。本文中描述的許多化合物可以具有一個(gè)或多個(gè)手性中心，因此可以作為不同的對(duì)映體形式存在。如果需要，手性碳可以用星號(hào)(*)指明。在本申請(qǐng)中，噻唑啉或四氫噻唑環(huán)的4-位上的手性碳可以用星號(hào)指明，因?yàn)檫@個(gè)碳的構(gòu)型具有特殊意義。與手性碳所成的鍵在本發(fā)明的式中描繪為直線時(shí)，應(yīng)該理解，每個(gè)手性碳的(R)和(S)構(gòu)型以及由此產(chǎn)生的對(duì)映異構(gòu)體及其混合物都被包括在該式中。如本領(lǐng)域中使用的，在希望具體說明手性碳的絕對(duì)構(gòu)型時(shí)，與手性碳所成的鍵可以描繪為楔形(與平面上方的原子所成的鍵)，另一種可以描述為一組短或楔形的平行線(與平面下方的原子所成的鍵)。Cahn-Ingold-Prelog系統(tǒng)可用于指定手性碳的(R)或(S)構(gòu)型。優(yōu)選噻唑啉或四氫噻唑環(huán)的4-位手性碳具有(S)構(gòu)型。在本發(fā)明的化合物包含一個(gè)手性中心時(shí)，不是通過不對(duì)稱合成制備的化合物存在兩種對(duì)映體形式，本發(fā)明包括任一種或兩種對(duì)映異構(gòu)體以及對(duì)映異構(gòu)體的混合物，例如稱為外消旋混合物的特定50:50混合物。對(duì)映異構(gòu)體可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法拆分，例如形成可以通過例如結(jié)晶分離的非對(duì)映異構(gòu)體鹽(參見，DavidKozma的CRCHandbookofOpticalResolutionsviaDiastereomericSaltFormation(CRC手冊(cè)通過形成非對(duì)映異構(gòu)體鹽進(jìn)行光學(xué)拆分)(CRCPress,2001));形成可以通過例如結(jié)晶、氣-液或液相色譜分離的非對(duì)映異構(gòu)體衍生物或復(fù)合物；一種對(duì)映異構(gòu)體與對(duì)映異構(gòu)體特異性試劑的選擇性反應(yīng)，例如酶促的酯化作用；或在手性環(huán)境中進(jìn)行氣-液或液相色譜，例如，在手性載體上(例如，具有結(jié)合的手性配體的二氧化硅)或在手性溶劑的存在下進(jìn)行。應(yīng)該理解，在所需的對(duì)映異構(gòu)體通過上述分離程序之一被轉(zhuǎn)化為另一種化學(xué)實(shí)體的情況下，需要其它步驟來將所需的對(duì)映體形式釋放出來?；蛘?，特定的對(duì)映異構(gòu)體可以使用光學(xué)活性的試劑、底物、催化劑或溶劑通過不對(duì)稱合成來合成，或者通過不對(duì)稱轉(zhuǎn)化將一種對(duì)映異構(gòu)體轉(zhuǎn)化為另一種。指明本發(fā)明化合物手性碳的具體絕對(duì)構(gòu)型，應(yīng)該理解為是指該化合物的所指明的對(duì)映異構(gòu)體形式是對(duì)映體過量(ee)的，或者，換言之，是指基本上不含另一種對(duì)映異構(gòu)體。例如，化合物的"R"形式基本上不含該化合物的"S"形式，因此，相對(duì)于"S"形式是對(duì)映體過量的。相反地，化合物的"S"形式基本上不含該化合物的"R"形式，因此，相對(duì)于"R"形式是對(duì)映體過量的。本文中使用的對(duì)映體過量是指在對(duì)映體混合物中存在的特定對(duì)映異構(gòu)體大于50%。例如，在混合物包含80%的第一種對(duì)映異構(gòu)體和20%的第二種對(duì)映異構(gòu)體時(shí)，第一種對(duì)映異構(gòu)體的對(duì)映體過量是60°/。。在本發(fā)明中，對(duì)映體過量可以為約20%以上，特別是約40%以上，更特別是約60%以上，例如約70%以上，例如約80%以上，例如約90%以上。在指明了具體絕對(duì)構(gòu)型的特定實(shí)施方案中，所述化合物的對(duì)映體過量至少為約90%。在更特定的實(shí)施方案中，化合物的對(duì)映體過量至少為約95%，例如至少約97.5%，例如，至少約99%對(duì)映體過量。在其中R4和R5不同的情況下，本發(fā)明的化合物具有兩個(gè)以上手性碳時(shí)，其可以具有兩種以上的光學(xué)異構(gòu)體，并且可以作為非對(duì)映體形式存在。例如，在有兩個(gè)手性碳時(shí)，化合物可以具有最多4種光學(xué)異構(gòu)體和2對(duì)對(duì)映異構(gòu)體((S，S)/(R,R)和(R，S)/(S,R)。所述對(duì)映異構(gòu)體對(duì)(例如，(S,S)/(R,R)彼此為鏡像立體異構(gòu)體。不是鏡像的立體異構(gòu)體(例如，(S，S)和(R，S)是非對(duì)映體。非對(duì)映體對(duì)可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法例如色譜或結(jié)晶進(jìn)行分離，并且可以如上所述分離每對(duì)內(nèi)的個(gè)體對(duì)映異構(gòu)體。本發(fā)明包括這類化合物的每種非對(duì)映體及其混合物。烷基基團(tuán)是分子中的飽和烴，其通過其一個(gè)碳原子上的單共價(jià)鍵與分子的一個(gè)其它基團(tuán)鍵合。垸基基團(tuán)可為環(huán)狀或非環(huán)狀、支鏈或非支鏈(直鏈)的。烷基一般具有1到約14個(gè)碳原子，例如一到約六個(gè)碳原子或一到約四個(gè)碳原子。低級(jí)垸基具有一到四個(gè)碳原子，包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、仲丁基和叔丁基。在為環(huán)狀時(shí)，垸基基團(tuán)一般包含約3到約IO個(gè)碳原子，例如約3到約8個(gè)碳原子，例如，環(huán)丙基基團(tuán)、環(huán)丁基基團(tuán)、環(huán)戊基基團(tuán)、環(huán)己基基團(tuán)、環(huán)庚基基團(tuán)或環(huán)辛基基團(tuán)。芳基基團(tuán)包括碳環(huán)芳族基團(tuán)，例如苯基、對(duì)甲苯基、l-萘基、2-萘基、l-蒽基和2-蒽基。芳基基團(tuán)還包括雜芳族基團(tuán)，例如N-咪唑基、2-咪唑基、2-噻吩基、3-噻吩基、2-呋喃基、3-呋喃基、2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基、2-嘧啶基、4-嘧啶基、2-吡喃基、3-吡喃基、3-吡唑基、4-吡唑基、5-吡唑基、2-吡嗪基、2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基、2-惡唑基、4-惡唑基和5-惡唑基。芳基基團(tuán)還包括稠合的多環(huán)芳族環(huán)系統(tǒng)，其中碳環(huán)、脂族環(huán)、或芳族環(huán)或雜芳基環(huán)與一個(gè)或多個(gè)其它雜芳基或芳基環(huán)稠合。實(shí)例包括2-苯并噻吩基、3-苯并噻吩基、2-苯并呋喃基、3-苯并呋喃基、2-吲哚基、3-吲哚基、2-喹啉基、3-喹啉基、2-苯并噻唑基、2-苯并惡唑基、2_苯并咪唑基、L異喹啉基、3_異喹啉基、^異吲哚基、3_異吲哚基。本發(fā)明還包括本文中所述化合物的鹽和可藥用的鹽。本文中公開的具有充分酸性的官能團(tuán)、充分堿性的官能團(tuán)或這二者的化合物能夠與多種有機(jī)或無機(jī)堿、以及無機(jī)和有機(jī)酸反應(yīng)，形成鹽。酸性基團(tuán)可以與上述一種或多種金屬還有堿和堿土金屬(例如，鈉、鉀、鎂、鈣)形成鹽。另外，酸性基團(tuán)能夠與胺形成鹽。本發(fā)明的化合物可以作為過渡金屬、鑭系金屬、錒系金屬、或主族金屬的鹽來提供。例如，所述鹽可為化合物的Ga(III)鹽。作為過渡金屬、鑭系金屬、錒系金屬或主族金屬的鹽，本發(fā)明的化合物傾向于與金屬形成復(fù)合物。例如，如果本發(fā)明的化合物是三齒合的，而與其形成鹽的金屬具有六個(gè)配位位51置，則形成2:1的化合物與金屬的復(fù)合物。化合物與金屬的比例將根據(jù)金屬的齒合度(denticity)和金屬上的配位位置數(shù)而變化(盡管配位位置可以由其它陰離子例如氫氧根、鹵根或羧酸根占據(jù)，但優(yōu)選每個(gè)配位位置都被本發(fā)明的化合物占據(jù)，)。或者，所述化合物可為基本上不含金屬(例如，不含鐵)的鹽。不含金屬的鹽一般不傾向于包括堿金屬鹽和堿土金屬鹽。不含金屬的鹽施用于患有例如金屬過載病的對(duì)象、或遭到引起不當(dāng)反應(yīng)的有毒金屬暴露或病灶性金屬濃度的個(gè)體是有利的。通常用于與具有堿性基團(tuán)的化合物形狀酸加成鹽的酸是無機(jī)酸，例如鹽酸、氫溴酸、氫碘酸、硫酸、磷酸等，以及有機(jī)酸，例如對(duì)甲苯磺酸、甲磺酸、草酸、對(duì)溴苯基磺酸、碳酸、琥珀酸、檸檬酸、苯甲酸、乙酸等。這類鹽的實(shí)例包括氫氧化物、硫酸鹽、焦硫酸鹽、硫酸氫鹽、亞硫酸鹽、重亞硫酸鹽、磷酸鹽、磷酸一氫鹽、磷酸二氫鹽、偏磷酸鹽、焦磷酸鹽、氯化物、溴化物、碘化物、乙酸鹽、丙酸鹽、癸酸鹽、辛酸鹽、丙烯酸鹽、甲酸鹽、異丁酸鹽、已酸鹽、庚酸鹽、丙炔酸鹽、草酸鹽、丙二酸鹽、琥珀酸鹽、辛二酸鹽、癸二酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、丁炔-l,4-二酸鹽、己炔-l,6-二酸鹽、苯甲酸鹽、氯苯甲酸鹽、甲基苯甲酸鹽、二硝基苯甲酸鹽、羥基苯甲酸鹽、甲氧基苯甲酸鹽、酞酸鹽、磺酸鹽、二甲苯磺酸鹽、苯基乙酸鹽、苯基丙酸鹽、苯基丁酸鹽、檸檬酸鹽、乳酸鹽、Y-羥基丁酸鹽、羥乙酸鹽、酒石酸鹽、甲烷磺酸鹽、丙垸磺酸鹽、萘-l-磺酸鹽、萘-2-磺酸鹽、和扁桃酸鹽等。本文中公開的化合物可以制備為其水合物形式，例如半水化合物、一水合物、二水合物、三水合物、四水合物等，以及制備為溶劑合物?；加袑?duì)三價(jià)金屬的螯合或多價(jià)螯合作出響應(yīng)的病理狀態(tài)的對(duì)象可以用治療或預(yù)防有效量的本發(fā)明化合物或藥用化合物來治療。對(duì)三價(jià)金屬的螯合作出響應(yīng)的病理狀態(tài)的一個(gè)特定類型是三價(jià)金屬過載病(例如，鐵過載病、鋁過載病、鉻過載病)。對(duì)于金屬螯合或多價(jià)螯合作出響應(yīng)的另一種類型病理狀態(tài)是在游離三價(jià)金屬的量升高(例如，在血清或細(xì)胞中)時(shí)，例如在三價(jià)金屬的存儲(chǔ)能力不足或者導(dǎo)致金屬釋放的金屬存儲(chǔ)系統(tǒng)異常時(shí)。鐵過載病或疾病的特征在于全身性鐵過載或局灶性鐵過載。全身性鐵過載病通常涉及多個(gè)組織中鐵過量或位于整個(gè)生物體中的鐵過量。全身性鐵過載病可以源于對(duì)象過度攝取鐵、鐵的過量?jī)?chǔ)存和/或滯留，例如來自膳食鐵或輸血引起。一種全身性鐵過載病是原發(fā)性血色沉著病，其一般是一種遺傳性病癥。第二種全身性鐵過載病況是繼發(fā)性血色沉著病，其一般是接受多次(長(zhǎng)期)輸血的結(jié)果?；加械刂泻Ｘ氀蜱牭缎渭t細(xì)胞貧血病的對(duì)象經(jīng)常需要輸血。一種類型的膳食鐵過載被稱為Bantu鐵質(zhì)沉著，其與攝取具有高鐵含量的自釀啤酒有關(guān)。在局灶性鐵過載病中，過量鐵限于一種或幾種細(xì)胞型或組織或特定器官。或者，與鐵過量有關(guān)的癥狀限于個(gè)別的器官，例如心臟、月市、肝臟、胰腺、腎或腦。據(jù)認(rèn)為，局灶性鐵過載可以引起神經(jīng)病學(xué)或神經(jīng)變性病癥，例如帕金森氏病、阿爾茨海默氏病、亨廷頓氏病、神經(jīng)鐵蛋白病(neuroferritinopathy)、肌萎縮性側(cè)索硬化和多發(fā)性硬化。金屬螯合或多價(jià)螯合造成的病理狀態(tài)經(jīng)常與對(duì)象組織中的金屬沉積有關(guān)。如上所述，沉積可以全身性或局灶性發(fā)生。需要減少氧化應(yīng)激的對(duì)象可以具有一種或多種以下狀況還原劑水平降低、活性氧物類水平提高、抗氧化酶(例如，Cu/Zn過氧化物歧化酶、Mn過氧化物歧化酶、谷胱甘肽還原酶、谷胱甘肽過氧化物酶、硫氧還蛋白、硫氧還蛋白過氧化物酶、DT-黃遞酶)突變或水平降低、金屬結(jié)合蛋白(例如，轉(zhuǎn)鐵蛋白、鐵蛋白、血漿銅藍(lán)蛋白、白蛋白、金屬硫蛋白)突變或水平降低、能夠產(chǎn)生過氧化物的酶(例如，氧化氮合酶、NADPH氧化酶、黃嘌呤氧化酶、NADH氧化酶、醛氧化酶、二氫乳清酸脫氫酶、細(xì)胞色素C氧化酶)突變或過度活躍、和輻射性損傷。還原劑、活性氧物類和蛋白質(zhì)的水平增加或減少是相對(duì)于一般在健康人中發(fā)現(xiàn)的這些物質(zhì)的量來確定的。需要降低氧化應(yīng)激的對(duì)象可以患有缺血發(fā)作。缺血發(fā)作可以在供血發(fā)生機(jī)械阻塞時(shí)發(fā)生，例如動(dòng)脈變窄或破裂。心肌缺血可以引起心絞痛和心肌梗塞，是由血液對(duì)心肌的循環(huán)不充分引起的，通常是由于冠狀動(dòng)脈病。在24小時(shí)內(nèi)消散的腦的缺血發(fā)作被稱為一過性缺血性發(fā)作。長(zhǎng)時(shí)間的缺血發(fā)作，中風(fēng)，涉及不可逆的腦損傷，其中癥狀的類別和嚴(yán)重程度取決于通向血液循環(huán)的通道受損的腦組織的位置和范圍。處于罹患缺血性急性發(fā)作風(fēng)險(xiǎn)下的對(duì)象一般患有動(dòng)脈粥樣硬化、血管的其它病癥、血液稱為凝塊的趨勢(shì)增加、或心臟病。本發(fā)明的化合物可用于治療這些病癥。需要降低氧化應(yīng)激的對(duì)象可以患有炎癥。炎癥是基礎(chǔ)病理過程，由細(xì)胞學(xué)反應(yīng)和化學(xué)反應(yīng)的集合體組成，所述反應(yīng)響應(yīng)物理、化學(xué)、或生物學(xué)劑引起的損傷或異常刺激而在血管和鄰近的組織中發(fā)生。炎癥性病癥的特征在于長(zhǎng)時(shí)間持續(xù)(即，慢性炎癥)或損害組織的炎癥。這樣的炎性病癥可以影響多種組織，例如呼吸道、關(guān)節(jié)、腸、和軟組織。本發(fā)明的化合物可用于治療這些病癥。盡管不受限于理論，但認(rèn)為本發(fā)明的化合物通過各種不同的機(jī)制獲得其降低氧化應(yīng)激的能力。在一個(gè)機(jī)制中，化合物與金屬、特別是氧化還原-活性金屬(例如，鐵)結(jié)合，并且占據(jù)該金屬的所有配位位置。在所有的金屬配位位置都被占時(shí)，認(rèn)為氧化和/或還原劑與金屬相互作用并引起氧化還原循環(huán)的能力降低。在另一個(gè)機(jī)制中，化合物使處于特定氧化態(tài)的金屬穩(wěn)定化，使得其不太可能會(huì)經(jīng)歷氧化還原循環(huán)。在又一個(gè)機(jī)制中，化合物本身具有抗氧化活性(例如，自由基清除、活性氧或活性氮物類的清除)。已知去鐵硫辛及其衍生物和類似物具有固有的抗氧化活性，如2004年3月4日公布的美國(guó)申請(qǐng)公布No.542004/0044220、和2004年7月8日公布的美國(guó)申請(qǐng)公布No.2004/0132789、禾D2004年3月4日公布的PCT申請(qǐng)W02004/017959、2003年12月25日公布的美國(guó)申請(qǐng)公布Nos.2003/0236417、和美國(guó)專利6,083,966、6,559,315、6,525,080、6,521,652所述，所述文獻(xiàn)每一篇的內(nèi)容都并入本文作為參考。還已有報(bào)道說降低人的鐵過載可以有助于預(yù)防或控制癌癥生長(zhǎng)[Ozaki，等人，JAMA,February14,2007-Vol.297,No.6，pp603-610;Kalinowski等人，"Theevolutionofironchelatorsforthetreatmentofironoverloaddiseaseandcancer"(鐵螯合劑治療鐵過載病和癌癥的發(fā)展)，PharmacologicalReviews,vol57，4pgs547-83(2005);Taetle等人，"CombinationIronDepletionTherapy"(聯(lián)合去鐵療法),J.Nat.CancerInst.、81,1229-1235(1989);Bergeron等人，"InfluenceofIrononinvivoProliferationandLethalityofL1210Cells"(鐵對(duì)L1210細(xì)胞體內(nèi)增殖和致死性的影響)，J.Nutr.、115,369-374(1985)]。實(shí)際上，Ozaki等人報(bào)道了這樣的假說累積的鐵通過對(duì)關(guān)鍵生物分子發(fā)生鐵催化的自由基介導(dǎo)的損害以及通過改變的細(xì)胞功能停留在安全的生物化學(xué)基礎(chǔ)上而作用于疾病風(fēng)險(xiǎn)。然而，他們也報(bào)道，由于發(fā)現(xiàn)結(jié)果矛盾，鐵和疾病之間的關(guān)系仍是基本上未知的。最后，Osaki等人報(bào)告的數(shù)據(jù)支持以下發(fā)現(xiàn)結(jié)果在人類中，顯著的"所有原因的死亡率降低(all-causemortalitydecrease)"與鐵水平降低到正常水平有關(guān)。"對(duì)象"一般為人，但是也可為需要處理的動(dòng)物，例如，陪伴動(dòng)物(例如，狗、貓等)、農(nóng)畜(例如，牛、豬、馬、綿羊、山羊等)、和實(shí)驗(yàn)動(dòng)物(例如，大鼠、小鼠、豚鼠、非人靈長(zhǎng)類動(dòng)物等等)。本發(fā)明的化合物和藥物組合物可以通過適當(dāng)?shù)耐緩浇o藥。適合的給藥途徑包括但不限于口服、腹膜內(nèi)、皮下、肌內(nèi)、透皮、直腸、舌下、靜脈內(nèi)、經(jīng)頰或通過吸入給藥。優(yōu)選，本發(fā)明的化合物和藥物組合物口服給藥。優(yōu)選本發(fā)明的藥物組合物包含適合使得化合物或混合物可口服、非腸道、靜脈內(nèi)、皮內(nèi)、肌內(nèi)或皮下、直腸給藥、通過吸入或經(jīng)頰給藥、或透皮給藥的可藥用的載體或稀釋劑。活性成分可以與常規(guī)的可藥用載體或稀釋劑混合或復(fù)合。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解，給藥方式、所用的介質(zhì)或載體及其相對(duì)于活性劑來說為惰性的，可以用于制備和施用本發(fā)明藥物組合物。這樣的方法、介質(zhì)和載體的舉例說明是那些描述在例如Remington'sPharmaceuticalSciences(雷氏藥物科學(xué))，18版(1990)中的，本書的內(nèi)容并入本文作為參考。用于對(duì)象的本發(fā)明的制劑包括藥物和為此的一種或多種合格的載體或稀釋劑以及任選的其它治療性成分。所述載體或稀釋劑在與制劑的其它成分相容并且不對(duì)其接受者有害的意義上必須是"合格的"。制劑便于在單位劑型中存在并且可以通過藥劑學(xué)領(lǐng)域中的任何公知方法來制備。所有的方法都包括使藥物與構(gòu)成一種或多種輔助成分的載體或稀釋劑相結(jié)合的步驟。一般說來，通過使藥劑與載體均勻且密切地結(jié)合并且然后根據(jù)需要將產(chǎn)物分成其單位劑量來制備制劑。適合口服給藥的形式包括通過本領(lǐng)域認(rèn)可的程序制備的片劑、錠劑、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿、薄片劑(wafer)、口香糖等。在這種治療有用的組合物或制備物中，活性化合物的量是使得將獲得適合的劑量。糖漿制劑通常由化合物或鹽在具有調(diào)味劑或著色劑的液體載體例如乙醇、甘油或水中的懸浮液或溶液構(gòu)成。在組合物使片劑形式的情況中，可以使用常規(guī)用于制備固體制劑的一種或多種藥用載體。這類載體的實(shí)例包括硬脂酸鎂、淀粉、乳糖和蔗糖。在組合物為膠囊形式時(shí)，采用常規(guī)的囊封通常是適合的，例如在硬明膠膠囊殼中使用上述載體。在組合物為軟明膠殼膠囊的形式時(shí)，可以考慮常規(guī)用于制備分散劑或懸浮劑的藥用載體，例如含水膠、纖維素、硅酸鹽或油，并且結(jié)合在軟明膠膠囊殼中。適合于非腸道給藥的制劑便于包括藥劑的無菌含水制劑，優(yōu)選與接受者的血液為等滲的。適合的載體溶液包括磷酸鹽緩沖鹽水、鹽水、水、乳酸鹽林格液或葡萄糖(5%，在水中)。這種制劑可以方便地如下制備將藥劑與水混合以產(chǎn)生溶液或懸浮液，將其填充到無菌容器中并且密封以防細(xì)菌污染。優(yōu)選，在無菌制造條件下使用無菌材料以免需要最終滅菌。這種制劑可以任選包含一種或多種另外的成分，其可以包括防腐劑例如對(duì)羥基苯甲酸甲酯、氯甲酚、間甲酚、苯酚和苯扎氯銨。這類物質(zhì)在制劑存于多劑量容器中時(shí)具有特殊的價(jià)值。還可以包括緩沖劑，以便為制劑提供適合的pH值。適合的緩沖物質(zhì)包括磷酸鈉和乙酸鈉?？梢允褂寐然c或甘油來使制劑與血液等滲。如果需要，可以在惰性氣氛例如氮?dú)庵袑⒅苿┭b入容器中，并且可以方便地作為單位劑量或多劑量形式存在于例如密封的安瓿中。本領(lǐng)域技術(shù)人員會(huì)意識(shí)到，準(zhǔn)備根據(jù)本發(fā)明的方法施用于對(duì)象的本發(fā)明組合物中各種組分的量取決于上述那些因素。典型的栓劑制劑包括化合物或其以這種方式給藥時(shí)具有活性的可藥用鹽，以及粘合劑和/或潤(rùn)滑劑，例如聚合的乙二醇、明膠、可可脂或其它低熔點(diǎn)的植物蠟或脂肪。典型的透皮制劑包括常規(guī)的含水或非水介質(zhì)，例如霜?jiǎng)?、膏劑、洗劑或糊劑，或者是加藥的塑料、貼劑或薄膜的形式。用于吸入的典型組合物是溶液、懸浮液或乳劑的形式，其可以作為氣霧劑的形式、使用常規(guī)的推進(jìn)劑例如二氯二氟甲垸或三氯氟甲垸來給藥。在每種情況中，本發(fā)明的化合物或藥物組合物的治療有效量取決于若干因素，例如，特別是要治療的對(duì)象的健康、年齡、性別、尺碼和病癥，預(yù)定的給藥方式、和對(duì)象接納預(yù)定劑型的能力?；钚詣┑闹委熡行Я渴菍?duì)于要治療的病癥具有預(yù)期效果的足夠量。在治療的對(duì)象患有可通過螯合或多價(jià)螯合金屬離子治療的病癥的方法中，活性劑的治療有效量為如下的量，例如，該量足以降低對(duì)象的金屬負(fù)擔(dān)、減少與金屬離子有關(guān)的癥狀、或預(yù)防、抑制或延遲與金屬存在有關(guān)的癥狀的發(fā)病和/或嚴(yán)重程度。在降低需要治療的對(duì)象的氧化應(yīng)激的方法中，活性劑的治療有效量是例如足以減少與氧化應(yīng)激有關(guān)的癥狀的量、或足以預(yù)防、抑制或延遲與氧化應(yīng)激有關(guān)的癥狀的發(fā)病和/或嚴(yán)重程度的量。施用于對(duì)象給藥的本發(fā)明化合物的典型總?cè)談┝?假定對(duì)象平均70kg)為約10mg至lj1.0g。以下描述合成(S)-4,5-二氫-2-[2-羥基-4-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基〗-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-4，-(HO)-DADFT-PE,3]和[(S)-4，5-二氫-2-[2-羥基-3-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-3，-(HO)-DADFT-PE,9]的備選方法。在其它地方[Bergeron，R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao,H.、Bharti，N.禾0Rocca，J.R.(S)-4，5-Dihydro-2-(2勿droxy-4-hydroxyphenyl)-4-methyl-4-thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4，5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49,2772-2783]描述的方法中，如下進(jìn)行(8)-4,5-二氫-2-[2-羥基-4-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-4，-(HO)-DADFT-PE,3]的合成將(S)-4，-(HO)-DADFT(l)轉(zhuǎn)化為其異丙酯，99%收率。在三信條件下(偶氮二甲酸二異丙酯和三苯膦，在THF中)，使用三(乙二醇)單甲醚將4，-羥基烷基化，過濾，并色譜分離，以76%收率得到3的異丙酯。酯的皂化反應(yīng)得到(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)，95%收率，提供了71%的總收率?；蛘?，(S)-4，-(HO)-DADFT(14)的乙酯的選擇性烷基化如下實(shí)現(xiàn)在丙酮中加熱三(乙二醇)單甲醚的甲苯磺酸酯(15，1.0當(dāng)量)和碳酸鉀(2.0當(dāng)量)，以82%收率得到掩蔽的螯合劑16(圖6，合成路線1)。乙酯16如前所述裂解，以95。/。收率得到(S)-4，-(HO)-DADFT-PE(3)。得到配體3的新途徑以更大的總收率進(jìn)行，78%對(duì)71%;此外，在合成路線1中，聚醚鏈的連接使用了不昂貴的試劑，并且不形成三苯膦氧化物和1,2-肼二羧酸二異丙酯，簡(jiǎn)化了純化。在上述的合成中，(S)-4,5-二氫-2-[2-羥基-3-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-3'-(HO)-DADFT-PE,9]的合成如下進(jìn)行將用適當(dāng)?shù)碾孢M(jìn)行氨基酸環(huán)化，以88n/。收率得到的(S)-2-(2，3-二羥基苯基)-4，5-二氫-4-甲基-4-噻唑甲酸以98%收率轉(zhuǎn)化為其乙酯。然而，得到螯合劑9的其余兩個(gè)步驟只有15%的收率。在三信條件下，將聚醚鏈連接于3，-羥基，以25%收率得到9的乙酯。酯水解得到9，在反相柱上純化之后收率為60%，總收率為13%。(S)-3，-(HO)-DADFT-PE(9)的更有效合成示于圖6;合成路線2。2,3-二羥基芐腈(n)位阻較小的苯酚基團(tuán)[Bergeron，R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Weimar，W.R.、Park,J.-H.、Eiler隱McManis，E.、Bergeron,J.禾口Brittenham,G.M.Partition-VariantDesferrithiocinAnalogues:OrganTargetingandIncreasedIronClearance.(分配改變的去鐵硫辛類似物器官定向和增加鐵清除)J.Med.Chem.2005，48,821-831]在DMSO中室溫下用甲苯磺酸酯15(1.3當(dāng)量)和氫化鈉(2.1當(dāng)量)垸基化，以70%的色譜收率得到18。由此，三醚鏈以與三信偶聯(lián)相比接近三倍的收率連接，同時(shí)避免了麻煩的副產(chǎn)物。腈18與(S)-a-甲基半胱氨酸(19)在被緩沖為pH6的CH3OH水溶液中進(jìn)行環(huán)化縮合，以90%的收率完成(S)-3'-(HO)-DADFT-PE(9)的合成。因?yàn)橹钡胶铣陕肪€2的最后一步才引入稀有氨基酸19，所以羧基不需要保護(hù)。9的總收率是63%，比前述的路線高得多。實(shí)施例7(S)-4,5-二氫-2-[2-羥基-4-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸(3)。在冰浴冷卻下將含50%(w/w)NaOH(10.41mL,199.5mmol)的CH3OH(90mL)溶液加入到含16(6.54g,15.3mmol)的CH3OH(200mL)中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌16小時(shí)，通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去大部分溶劑。殘余物用稀NaCl(150mL)處理并用乙醚(3xl50mL)提取。堿性的水相在冰中冷卻，用2NHCl酸化到pHs2,并用EtOAc提取(4x100mL)。EtOAc提取物用飽和NaCl(200mL)洗滌，并真空濃縮。在高真空下干燥，得到5.67g的3[Bergeron，R.J.、Wiegand,J.、McManis,J.S.、Vinson,J.R.T.、Yao，H.、Bharti，N.禾卩Rocca，J.R.(S)-4,5畫Dihydro-2-(2-hydroxy-4-hydroxyphenyl)畫4-methyl畫4陽(yáng)thiazolecarboxylicAcidPolyethers:ASolutiontoNephrotoxicity.((S)-4,5-二氫-2-(2-羥基-4-羥苯基)-4-甲基-4-噻唑甲酸聚醚腎毒性的解決方案)J.Med.Chem.2006,49，2772-2783](92%)，為橙色油[a〗25+53.1°(c0.98);&NMR(D20)S1.76(s,3H),3.35(s,3H),3.54國(guó)3.61(m,3H),3.64-3.72(m，4H)，3.74-3.78(m,2H)，3.90-3.94(m，2H)，3.96(d，1H，J=12.0)，4.25-4.29(m,2H)，6.53(d,1H，J=2.4),6.64(dd,1H,J=9.0,2.2),7,61(d,1H，J=9.2);13CNMR(D20)S23.65,39.56，58.65，68.34,69.33,70.07,70.18，70.44,71.62,77.58，102.11,106.72，109.66,134.67，161.27，167.07，176.86，180.70。分析((181125:^078)C，H,N。實(shí)施例8(S)-4，5-二氫-2-[2-羥基-3-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸(9)。將化合物18(7.63g，27.1mmol)、脫氣的0.1MpH5.95磷酸鹽緩沖液(200mL)、19(6.98g，40.7mmol)、和NaHC03(4.33g，51.5mmol，分份加入)先后加入到經(jīng)過蒸餾脫氣的CH3OH(200mL)中。將pH為6.2-6.6的反應(yīng)混合物在7(TC加熱72小時(shí)。在冷卻到室溫之后，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去大部分的溶劑。將殘余物溶解于8%NaHC03(200mL)中并用CHCl"3x100mL)提取。含水的部分在冰水浴中冷卻，用5NHC1酸化到pH1，并用EtOAc提取(4x100mL)。EtOAc提取物用飽和NaCl洗滌，并真空濃縮。在高真空下干燥，得到9.74g的9(卯％)，為橙色油:[a]20+61.9°;!HNMR(D20)S1.77(s,3H),3.35(s,3H),3.56-3.62(m,3H),3.64-3.73(m，4H),3.75-3.79(m,2H),3.92-3.96(m，2H)，3.99(d，1H:J=11.6),4.25-4.3l(m,2H),6.99(t，1H，J=8.2),7.26-7.33(m,2H);13CNMRS24.52,39.93,59.07,69.04，69.83，70.49，70.64,70.86，71.97，83.21,116.33,117.94，118.50,122.80，147.67,150.24,172.38,176.10;HRMSm/z，計(jì)算值C18H26N07S，400.1429(M+H);實(shí)測(cè)值400.1413。實(shí)施例9(S)-4,5-二氫-2-[2-羥基-4-(3，6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸乙酯(16)。向含14(9.35g,33.2mmol)的丙酮(300mL)中加入火焰活化的K2CO3(5.05g,36.6mmol)，隨后加入含15(11.11g,34.9mmol)的丙酮(50mL)。將反應(yīng)混合物回流下加熱3天。加入含追加的K2C03(4.59g,33.2mmol)和15(2.12g，6.65mmol)的丙酮(5mL)，并將反應(yīng)混合物回流下加熱1天。在冷卻到室溫之后，將固體過濾掉，并且通過旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶解于1:1的0.5M檸檬酸/飽和NaCl(320mL)中并用EtOAc提取(3x150mL)。將合并的有機(jī)提取物用經(jīng)過蒸餾的H2O(200mL)和飽和的NaCl(200mL)洗滌，然后真空濃縮。用快速柱色譜法純化，用50%EtOAc/石油醚洗脫，得到12.0g的16(84%)，為油:[a]23十40.2(c1.09);'HNMRS1.30(t,3H，J=7.2)1.66(s,3H),3.19(d，1H，J=11.2)，3.38(s，3H)，3.54陽(yáng)3.57(m,2H),3.64國(guó)3.70(m，4H),3.72-3.76(m，2H),3.81-3.88(m,3H),AX2-Ul(m,2H)，4.20-4.28(m:2H)，6.46(dd,1H，J=8.8,2.4),6.49(d,1H,7=2.4),7.28(d,1H，J=8.4),12.69(s,1H);"CNMRS14.21,24.58,39,94,59.17，62.01，67.65,69.60,70.69，70.76,70.98,72.03,83.22，101.51，107.41，109.98，131.77,161.27,163.09,170.90,172.95。分析(<:201129:^078)C,H,N。實(shí)施例102-羥基-3-(3,6，9-三氧雜癸氧基)芐腈(18)。使用烘干的玻璃器皿將化合物17(5.3g,39.2mmol)加入到含60%NaH(3.13g,78.2mmol)的DMSO(60mL)懸浮液中。將反應(yīng)混合物在室溫下攪拌1小時(shí)之后，引入含15(12.49g,39.22mmol)的DMSO(25mL)。在室溫下攪拌24小時(shí)之后，在攪拌下將反應(yīng)混合物傾倒在冷水(100mL)中并用CHCl3提取(3X100mL)。水相用6NHC1酸化到pH1并用CHCl3提取(5X60mL)。后一次的CHCl3提取物真空濃縮。使用柱色譜法以10%CH3OH/CHC13洗脫，通過重力純化，得到7.84g的18(70%),為油iHNMRS3.40(s,3H),3.58-3.62(m，2H)，3.65-3.73(m，4H)，3.75隱3.78(m，2H),3.83-3.87(m,2H)，4.14-4.18(m,2H),6.79-6.85(m，1H),7.09(dd,1H,J=7.8，1.6),7.15-7.18(m,1H)，8.6(s,1H);13CNMR557.25，67.76,67.85,68.79，68.92，69.06,70.36，98.38,115.44,116.55,118.51,123.13,145.98,149.46;HRMSm/z，計(jì)算值C14H20NO5,282.134(M+H);實(shí)測(cè)值282.135。本文中發(fā)明的說明表明，在脫氮雜去鐵硫辛(DADFT)芳族環(huán)的不同位置引入3，6,9-三氧雜癸氧基基團(tuán)對(duì)鐵清除和器官分布的影響得到了描述。評(píng)價(jià)了三種DADFT聚醚(S)-4，5-二氫-2-[2-羥基-4-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-4，誦(HO)-DADFT-PE,3]、(S)-4,5-二氫-2-[2-羥基-5-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-5，-(HO)-DADFT-PE，6]、禾口(S)-4，5-二氫-2-[2-羥基-3-(3,6,9-三氧雜癸氧基)苯基]-4-甲基-4-噻唑甲酸[(S)-3，-(HO)-DADFT-PE,9]。在嚙齒類和靈長(zhǎng)類動(dòng)物中的鐵清除效率(ICE)表現(xiàn)出對(duì)所評(píng)價(jià)的位置異構(gòu)體非常敏感，在嚙齒類動(dòng)物中的器官分布也是這樣。在嚙齒類動(dòng)物中，所述聚醚均具有比它們的相應(yīng)母體配體均更高的ICE，與體內(nèi)配體-血清白蛋白結(jié)合研究相符。在嚙齒類動(dòng)物中，配體9是活性最大的聚醚類似物并且在靈長(zhǎng)類動(dòng)物中也非常有效，提示在人類中會(huì)有較高的成功系數(shù)。另外，這個(gè)類似物還表現(xiàn)出比許多其它螯合劑在靈長(zhǎng)類動(dòng)物尿中清除更多的鐵?，F(xiàn)在，已經(jīng)描述了本發(fā)明的幾個(gè)實(shí)施方案，本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該明了，前述只是說明性的而非限制性的，只是作為實(shí)例給出。在本領(lǐng)域技術(shù)人員的范圍內(nèi)有許多變體和其它實(shí)施方案，并且都被考慮為落入本發(fā)明及其任何等效體的范圍內(nèi)。可以理解，本發(fā)明的變體對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，本發(fā)明意在包括那些備選方案。另外，因?yàn)楸绢I(lǐng)域技術(shù)人員可以容易地做出許多的修改，因而不希望將本發(fā)明限制為所說明和描述的確切構(gòu)造和操作上，因此，所有適合的修改和等效體都被包括在本發(fā)明范圍內(nèi)。權(quán)利要求1.一種由下式表示的相對(duì)無毒的脫氮雜去鐵硫辛類似物，或其鹽、水合物或溶劑合物其中R1、R2、R4和R5可以相同或不同，并且可為H、具有最多14個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基例如甲基、乙基、丙基和丁基、或芳基烷基，其中芳基部分是烴基并且烷基部分是直鏈或支鏈，所述芳基烷基具有最多14個(gè)碳原子，R2任選是具有最多14個(gè)碳原子的烷氧基；R3是[(CH2)n-O]x-[(CH2)n-O]y-烷基；n獨(dú)立地是1-8的整數(shù)；x是1-8的整數(shù)；y是0-8的整數(shù)，和R3O可以占據(jù)苯基環(huán)上除4-位之外的任何位置。2.權(quán)利要求l的類似物，其中R4是H或CH3。3.權(quán)利要求l的類似物，其中R2是H或CH30。4.權(quán)利要求1的類似物，其中R3-0是0-[(CH2)2-0]3-CH3。5.權(quán)利要求l的類似物，其由下式表示<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>6.權(quán)利要求l的類似物，其由下式表示:7.治療對(duì)象的對(duì)三價(jià)金屬的螯合或多價(jià)螯合作出響應(yīng)的病理狀態(tài)的方法，包括對(duì)所述對(duì)象施用治療有效量的權(quán)利要求1的類似物。8.權(quán)利要求7的方法，其中所述三價(jià)金屬是鐵。9.權(quán)利要求8的方法，其中所述病理狀態(tài)是鐵過載。10.權(quán)利要求8的方法，其中所述病理狀態(tài)是糖尿病。11.權(quán)利要求8的方法，其中所述病理狀態(tài)是肝臟疾病。12.權(quán)利要求8的方法，其中所述病理狀態(tài)是弗里德賴希共濟(jì)失調(diào)(FRDA)。13.權(quán)利要求8的方法，其中所述病理狀態(tài)是心臟病。14.權(quán)利要求8的方法，其中所述病理狀態(tài)是癌癥。15.權(quán)利要求8的方法，其中Ri是H或CH3。16.權(quán)利要求8的方法，其中R2是H或CH30。17.權(quán)利要求8的方法，其中R3-0是0-[(CH2)2-0〗3-CH3。18.權(quán)利要求8的方法，所述類似物由下式表示19.權(quán)利要求8的方法，所述類似物由下式表示:CH3~3-CH:31.權(quán)利要求19的組合物，所述類似物由下式表示32.權(quán)利要求19的組合物，所述類似物由下式表示:33.—種制品，其包括包裝材料和在所述包裝材料內(nèi)包含的藥劑，其中所述藥劑對(duì)于治療患有三價(jià)金屬過載的對(duì)象是有效的，并且其中所述包裝材料包括標(biāo)簽，其指示所述藥劑可用于改善與三價(jià)金屬過載有關(guān)的癥狀，并且其中所述藥劑是權(quán)利要求1的類似物。全文摘要本發(fā)明公開了具有右式的相對(duì)無毒的脫氮雜去鐵硫辛類似物或其鹽、水合物或溶劑合物其中R₁、R₂、R₄和R₅可以相同或不同，并且可為H、具有最多14個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烷基例如甲基、乙基、丙基和丁基、或芳基烷基，其中所述芳基部分是烴基并且所述烷基部分是直鏈或支鏈，所述芳基烷基基團(tuán)具有最多14個(gè)碳原子，R₂任選是具有最多14個(gè)碳原子的烷氧基；R₃為[(CH₂)_n-O]_x-[(CH₂)_n-O]_y-烷基；n獨(dú)立地為1-8的整數(shù)；x為1-8的整數(shù)；y為0-8的整數(shù)，和R₃O可以占據(jù)苯基環(huán)上除4-位之外的任何位置；以及用于治療三價(jià)金屬影響即鐵過載的方法和組合物。文檔編號(hào)C07D277/10GK101687825SQ200880014934公開日2010年3月31日申請(qǐng)日期2008年3月14日優(yōu)先權(quán)日2007年3月15日發(fā)明者雷蒙德·J·貝爾格隆申請(qǐng)人:佛羅里達(dá)大學(xué)研究基金公司