專利名稱：雷莫司瓊的一種新制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物化學(xué)領(lǐng)域，特別是5-HT3受體拮抗劑R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑“雷莫司瓊”(Ramosetron)及其鹽酸鹽的應(yīng)用，尤其是雷莫司瓊的一種新制備方法。
背景技術(shù)：
雷莫司瓊是一種新型的5-HT3受體拮抗劑，可使5-羥色胺從消化道的腸嗜鉻細(xì)胞中游離出來，與存在于消化道粘膜內(nèi)的傳入迷走神經(jīng)末梢的5-HT3受體結(jié)合，而發(fā)揮止吐作用。臨床中主要預(yù)防或治療化療藥物引起的惡心、嘔吐等消化道癥狀。歐洲專利E.P 381422；K.Miyata等，J.Pharm.Exper.Thera.(1991)259(1)15～21；Yoshitaka Fujii等，Br.J.Ophthalmol(2001)85670～672；Yoshitaka Fujii等，Clin.Thera.(2002)24(7)1148～1153對其均有報道。
現(xiàn)有公開文獻報道的雷莫司瓊的制備過程(Mitsuaki Ohta等，Chem.Pharm.Bull.，45(5)1000～1008；Chem.Pharm.Bull.，44(9)1707～1716和E.P 381422)，無一例外的采用了“先縮合后拆分”的方法 即采用消旋的4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑-5-甲酸的硫酸鹽(或鹽酸鹽)經(jīng)氯化、?；频?-甲酰吡咯烷-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽(活性酰胺)，再與N-甲基吲哚反應(yīng)生成消旋的5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑，最后用D-二苯甲酰酒石酸拆分，再經(jīng)游離、成鹽獲得鹽酸雷莫司瓊。
該制備過程中拆分收率較低(不足20％)，側(cè)鏈N-甲基吲哚消耗較大，溶劑回收困難，操作繁瑣，成本較高。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的主要目的是通過改進雷莫司瓊的合成方法，使側(cè)鏈N-甲基吲哚消耗降低，總收率提高，簡化操作，降低成本，使之更易于工業(yè)化生產(chǎn)。本發(fā)明的主要技術(shù)特點是“先拆分后縮合”。
即將消旋的4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑-5-甲酸的硫酸鹽(或鹽酸鹽)經(jīng)氯化、與吲哚啉?；频?-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑，再用D-二苯甲酰酒石酸或酒石酸進行拆分，水解后得到R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽(結(jié)構(gòu)式III)。其再經(jīng)氯化、?；频肦-5-甲酰吡咯烷-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽(活性酰胺，結(jié)構(gòu)式II)，與N-甲基吲哚反應(yīng)、游離生成R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(雷莫司瓊，結(jié)構(gòu)式I)，最后成鹽獲得鹽酸雷莫司瓊。
具體來說，制備過程可分為兩部分(一)R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽的制備該化合物可參照已公開的文獻(Mitsuaki Ohta等，Chem.Pharm.Bull.，44(9)1707～1716；U.S 5677326)進行制備。
1. 5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的硫酸鹽(或鹽酸鹽)的制備。
將消旋的4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑-5-甲酸的硫酸鹽(或鹽酸鹽)在適當(dāng)?shù)娜軇┲?如二氯乙烷、乙腈等)或直接與過量的氯化亞砜反應(yīng)，生成5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的硫酸鹽(或鹽酸鹽)。
2. 5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的制備選擇吲哚啉做為酰化劑，是因為其可在分子中手性中心附近引入較大基團，便于拆分。具體方法是將5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的硫酸鹽(或鹽酸鹽)與吲哚啉在堿性條件下(如三乙胺、碳酸鉀等)或直接與過量的吲哚啉縮合反應(yīng)，生成5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑。
3. R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽的制備將消旋的5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑與拆分劑D-二苯甲酰酒石酸或酒石酸在醇類溶劑中(如甲醇等)反復(fù)結(jié)晶，直至獲得光學(xué)純度足夠高的R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的D-二苯甲酰酒石酸或酒石酸鹽，再經(jīng)堿化游離、成鹽，得R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽。
4. R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽(結(jié)構(gòu)式I)的制備將R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽在酸性(如鹽酸、硫酸等)或堿性(氫氧化鈉、碳酸鈉等)條件下進行水解反應(yīng)，生成R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑。
(二)R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(雷莫司瓊)由R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑制備R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(雷莫司瓊)的方法雖從未公開過，但仍可參照已公開文獻(Mitsuaki Ohta等，Chem.Pharm.Bull.，45(5)1000～1008)進行制備。
1. R-5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽的制備將R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽在適當(dāng)?shù)娜軇┲?如二氯乙烷、乙腈等)或直接與過量的氯化亞砜反應(yīng)，生成R-5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽。
2. R-5-甲酰吡咯烷-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽(活性酰胺，結(jié)構(gòu)式II)的制備將R-5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽與吡咯烷在堿性條件下(如三乙胺、碳酸鉀等)或直接與過量的吡咯烷縮合反應(yīng)，生成R-5-甲酰吡咯烷-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽。
實驗證明，由R-5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽制備雷莫司瓊，必須首先制備該中間體(活性酰胺)，否則無法生成目標(biāo)產(chǎn)物。
3. R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(雷莫司瓊，結(jié)構(gòu)式III)的制備將R-5-甲酰吡咯烷-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽(活性酰胺)在三氯氧磷作用下與N-甲基吲哚反應(yīng)，經(jīng)堿游離后生成目標(biāo)產(chǎn)物R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(雷莫司瓊)，其成鹽后可制得鹽酸雷莫司瓊。
綜上所述，用本發(fā)明的“先拆分后縮合”方法制備雷莫司瓊雖反應(yīng)路線較長，但總收率較高(實驗表明采用本發(fā)明的“先拆分后縮合”方法可比原先的“先縮合后拆分”方法總收率提高4％)，尤其是拆分收率顯著高(實驗表明采用本發(fā)明的“先拆分后縮合”方法進行拆分可比原先的“先縮合后拆分”方法收率提高近一倍)，側(cè)鏈N-甲基吲哚消耗大幅度減低(實驗表明采用本發(fā)明的“先拆分后縮合”方法，N-甲基吲哚消耗比原先“先縮合后拆分”方法減少60％以上)，溶劑便于回收再利用，操作簡便，成本較低。尤其是可實現(xiàn)自拆分后的“一勺燴”連續(xù)操作，便于工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實施例方式實施例15-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑硫酸鹽的制備(方法A)將5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑硫酸鹽43.4g(0.20mol)在500ml二氯乙烷中懸浮，加入氯化亞砜47.6g(0.40mol)，攪拌，加熱升溫至60℃，保溫反應(yīng)2小時，減壓蒸除溶劑，得5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑硫酸鹽的粗品36.6g，收率77.7％，其無需進一步精制，可直接用于下面的反應(yīng)。
實施例25-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑硫酸鹽的制備(方法B)5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑硫酸鹽還可直接與大過量氯化亞砜反應(yīng)制得，具體的方法是將5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑硫酸鹽43.4g(0.20mol)懸浮于氯化亞砜238g(2.0mol)中，攪拌，加熱升溫至回流，反應(yīng)2小時，減壓濃縮回收過量的氯化亞砜，得5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑硫酸鹽粗品42.8g，收率90.9％，其也無需進一步精制，可直接用于下面的反應(yīng)。
實施例35-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽的制備參照實施例1或2，用5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽代替5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑硫酸鹽，所得粗品無需進一步精制，可直接用于下面的反應(yīng)。
實施例45-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的制備(方法C)將由實施例2制備的5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑硫酸鹽的粗品35.3g(0.15mol)懸浮于200ml乙腈中，冷卻至5℃以下，滴加含吲哚啉178g(1.5mol)的200ml乙腈溶液，控制滴加速度，使反應(yīng)溫度介于5～10℃間，滴畢，升溫至25℃，保溫反應(yīng)2小時。減壓濃縮至干，殘余物用二氯乙烷500ml溶解，并用水洗至中性，再減壓濃縮至干，殘余物用乙酸乙酯結(jié)晶，過濾，烘干。得5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑32.8g，收率81.3％，M.p182～186℃。
實施例55-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的制備(方法D)5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑還可在溶劑中用堿性脫酸劑進行制備。具體的方法是將由實施例2制備的5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑硫酸鹽的粗品35.3g(0.15mol)懸浮于200ml二氯乙烷中，冷卻至5℃以下，滴加含吲哚啉21.4g(0.18mol)和三乙胺45.5g(0.45mol)的200ml二氯乙烷溶液，控制滴加速度，使反應(yīng)溫度介于5～10℃間，滴畢，升溫至25℃，保溫反應(yīng)2小時。將其傾入約500ml水中，室溫攪拌10分鐘后，分液，有機層用水洗至中性，減壓濃縮至干，殘余物加乙酸乙酯200ml攪拌過夜，過濾所析出的固體，烘干。得5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑36.2g，收率89.7％，M.p218～220℃。
實施例65-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的制備(方法E)參照實施例4或5，用5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的鹽酸鹽代替5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的硫酸鹽進行反應(yīng)。
實施例7R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽的制備(方法F)將由實施例5制備的5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑26.9g(0.10mol)溶解于300ml甲醇中，加入(+)-酒石酸15g(0.10mol)，并加熱回流反應(yīng)4小時，冷至室溫，過濾。濾餅再次用甲醇300ml回流4小時，冷卻，過濾，烘干。得R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的(+)-酒石酸鹽15.8g，M.p228～230℃，[α]D＝+1.7°(C＝0.7，DMF)。
將上述R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的(+)-酒石酸鹽溶解在由100ml二氯乙烷和100ml水組成的混合物中，用20％的氫氧化鈉調(diào)pH＝9～10，分液，有機層水洗至中性，再減壓濃縮至干，殘余物加乙醇溶解，用30％的鹽酸乙醇調(diào)pH＝1～2，析晶，過濾，烘干。得R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的鹽酸鹽11.8g，收率38.5％，M.p240～242℃，[α]D＝-19.5°(C＝1.0，甲醇)。
實施例8R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽的制備(方法G)R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽還可通過用D-二苯甲酰酒石酸進行拆分而獲得，具體的方法是將由實施例5制備的5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑26.9g(0.10mol)和D-二苯甲酰酒石酸一水合物37.6g(0.1mol)一并溶解于500ml甲醇中，并加熱回流，反應(yīng)1小時，冷至室溫，過濾。所得濾餅用與實施例7相似的方法游離、成鹽，得R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的鹽酸鹽12.6g，收率41.2％，M.p240～242℃，[α]D＝-19.2°(C＝1.0，甲醇)。
實施例9R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽的制備(結(jié)構(gòu)式I，方法H)將由實施例7制備的R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽61.1g(0.2mol)溶解于300ml甲醇中，加入氫氧化鈉20g(0.5mol)，攪拌，并加熱至回流，反應(yīng)3小時后，減壓濃縮至干，殘余物加二氯乙烷100ml和水200ml溶解，分液，水層用鹽酸調(diào)pH＝1～2，再減壓濃縮至干。得R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽和氯化鈉的混合物，其無需進一步精制，可直接用于下面的反應(yīng)。
實施例10R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽的制備(方法I)R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽也可通過使R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽在酸性條件下水解而制得。其具體的方法是，將由實施例7制備的R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽61.1g(0.2mol)溶解于300ml 2N的鹽酸(0.6mol)中，加熱至回流，反應(yīng)3小時后，減壓濃縮至干，殘余物溶解在300ml水中，用20％的氫氧化鈉溶液調(diào)pH＝9～10，加二氯乙烷100ml進行萃取，水層再用鹽酸調(diào)pH＝1～2，減壓濃縮至干。得R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽和氯化鈉的混合物，其無需進一步精制，可直接用于下面的反應(yīng)。
實施例11R-5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽的制備參照實施例1或2，用由實施例10制備的R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的鹽酸鹽與氯化鈉的混合物代替5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的硫酸鹽，收率分別為81％(方法A)和92％(方法B)，所得粗品無需進一步精制，可直接用于下面的反應(yīng)。
實施例12R-5-甲酰吡咯烷-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽(結(jié)構(gòu)式II，活性酰胺)的制備參照實施例4或5，用由實施例11制備的R-5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的鹽酸鹽代替5-甲酰氯-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的硫酸鹽，同時用吡咯烷代替吲哚啉進行反應(yīng)，收率分別為82％(方法C)和93％(方法D)，M.p＞250℃，[α]D＝-5.8°(C＝1.12，甲醇)。
實施例13R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(結(jié)構(gòu)式III，雷莫司瓊)的制備將由實施例12制備的R-5-甲酰吡咯烷-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽(活性酰胺)25.8g(0.10mol)、N-甲基吲哚19.7g(0.15mol)、三氯氧磷45.9g(0.30mol)和1，2-二氯乙烷300ml混合，加熱回流反應(yīng)7小時。冷至室溫，將其傾入約500g冰水中，分液，水層用20％的氫氧化鈉調(diào)pH＝9～10，固體析出完全后，過濾，水洗，烘干。得R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(雷莫司瓊)26.2g，收率93.2％，M.p＞200℃(分解)。
實施例14R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(雷莫司瓊)的制備(“一勺燴”法)將由實施例7制備的R-5-甲酰吲哚啉-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽61.1g(0.2mol)溶解于300ml甲醇中，加入氫氧化鈉20g(0.5mol)，攪拌，并加熱至回流，反應(yīng)3小時后，減壓濃縮至干，殘余物加二氯乙烷100ml和水200ml溶解，分液，水層用鹽酸調(diào)pH＝1～2，再減壓濃縮至干。
將所得殘余物懸浮于氯化亞砜238g(2.0mol)中，攪拌，加熱升溫至回流，反應(yīng)2小時，減壓濃縮回收過量的氯化亞砜，所得殘余物懸浮于300ml 1，2-二氯乙烷中，冷卻至5℃以下，滴加含吡咯烷21.3g(0.30mol)和三乙胺40.4g(0.40mol)的100ml 1，2-二氯乙烷溶液，控制滴加速度，使反應(yīng)溫度介于5～10℃間，滴畢，升溫至25℃，保溫反應(yīng)2小時。將其傾入約400ml飽和氯化鈉水溶液中，分液，有機相待用。
將N-甲基吲哚39.3g(0.30mol)、三氯氧磷91.8g(0.60mol)和上述1，2-二氯乙烷溶液混合，加熱回流反應(yīng)7小時。冷卻至室溫，將其傾入約1Kg冰水中，分液，水層用20％的氫氧化鈉調(diào)pH＝9～10，固體析出完全后，過濾，水洗，烘干。得R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(雷莫司瓊)41.2g，收率73.3％，M.p＞200℃(分解)。
實施例15R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽(鹽酸雷莫司瓊)的制備將由實施例13或14制備的R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(雷莫司瓊)28.1g(0.10mol)溶解于150ml無水乙醇中，用30％的鹽酸乙醇調(diào)pH＝1～2，固體析出完全后，過濾，烘干。得R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑鹽酸鹽(鹽酸雷莫司瓊)28.8g，收率90.7％，M.p＞220℃(分解)，[α]D＝-42.8°(C＝1.0，甲醇)。
權(quán)利要求
1.一種制備R-5-[(1-甲基-1H-吲哚-3-基)羰基]-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(“雷莫司瓊”(Ramosetron))(見結(jié)構(gòu)式I)及其鹽酸鹽的新方法， (結(jié)構(gòu)式I)其主要特征在于用R-5-甲酰吡咯烷-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(見結(jié)構(gòu)式II)或其鹽與1-甲基吲哚縮合而制得結(jié)構(gòu)式I。 (結(jié)構(gòu)式II)
2.一種制備如權(quán)利要求1中所述結(jié)構(gòu)式II的方法。其主要特征在于用R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑或其衍生物(見結(jié)構(gòu)式III)或其鹽與吡咯烷縮合而制得結(jié)構(gòu)式II，其中R表示羧基；酰鹵；酰胺；酯等一系列羧酸衍生物。 (結(jié)構(gòu)式III)
3.一種名為R-5-甲酰吡咯烷-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑的化合物(見結(jié)構(gòu)式II)，其是一種如權(quán)利要求1和2中所述制備雷莫司瓊(見結(jié)構(gòu)式I)的關(guān)鍵中間體。
4.一種如權(quán)利要求1和2中所述制備雷莫司瓊(見結(jié)構(gòu)式I)的“一勺燴”制備方法。其主要特征在于用R-5-甲酸-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑或其衍生物(見結(jié)構(gòu)式III)或其鹽(其中R表示羧基；酰鹵；酰胺；酯等一系列羧酸衍生物)經(jīng)中間體R-5-甲酰吡咯烷-4，5，6，7-四氫-1H-苯并咪唑(見結(jié)構(gòu)式II)制得雷莫司瓊(見結(jié)構(gòu)式I)，其制備過程中所有中間體均不經(jīng)純化，而直接用于下一步反應(yīng)，且實現(xiàn)多步反應(yīng)連續(xù)化操作，更易于放大生產(chǎn)。
全文摘要
本發(fā)明描述了5－HT
文檔編號C07D235/00GK1765896SQ20041008618
公開日2006年5月3日 申請日期2004年10月28日 優(yōu)先權(quán)日2004年10月28日
發(fā)明者周華明, 李豐善 申請人:北京博爾達生物技術(shù)開發(fā)有限公司