每次48h。合并兩次提取液，減壓濃縮至無醇味，加水分散后上大孔樹脂柱DlOl， 分別用10 %乙醇、95%乙醇梯度洗脫，棄去10 %乙醇洗脫部位，95%乙醇洗脫部位為總皂苷 (400g)〇
[0058] 取總皂苷300g拌樣上MCI柱（小孔樹脂），分別用20 %甲醇、40 %甲醇、60 %甲醇、 90%甲醇、100%甲醇梯度洗脫。90%甲醇洗脫部位（150g)拌樣上硅膠色譜柱（200-300目） 分離，用二氯甲烷-甲醇梯度洗脫(25:1~0:1)，經(jīng)TLC檢測后合并相同組分得至1」7個流份(A， B，C，D，E，F(xiàn)，G)。流份D經(jīng)中壓ODS柱分離(50%甲醇~100%甲醇)得到4個流份(D-1，D-2，D-3，D_4)，其中流份D-2經(jīng)HPLC制備分離（固定相:unitary C_18(250mmX 10mm，5ym)，流動相： 45%乙腈)得到化合物2和化合物3。流份E經(jīng)中壓ODS分離(50%甲醇~90%甲醇)得到5個流 份(EI，E2，E3，E4，E5)，其中流份E3經(jīng)HPLC制備分離（固定相:uni tary C-18(250_ X IOmm，5 μπι)，流動相：38%乙腈)得到化合物5和化合物11。60%甲醇洗脫部位（120g)再拌樣上硅膠 色譜柱（200-300目）分離，用二氯甲烷-甲醇梯度洗脫（25:1~0:1)，經(jīng)TLC檢測后合并相同 組分得到3個流分（I，II，III)。經(jīng)TLC和HPLC檢測，將流份E和流份II合并得到流份Hl (51.6g)，流份G和流份III合并得到H2(30.0g) Al經(jīng)中壓MDS分離(60%~90%甲醇)得到5 個流份(Hl-0-1~Hl-0-5)。其中流份Hl-0-4經(jīng)HPLC制備分離(流動相:75 %甲醇)得到化合 物19、流份H1-0-4-1和流份H1-0-4-2,其中流份H1-0-4-2經(jīng)HPLC制備分離(流動相:64%甲 醇)得到化合物15a和15b。流份Hl-0-2用HPLC制備分離(流動相:76 %甲醇)得到化合物21。
[0059] H2經(jīng)中壓0DS(流動相:40%甲醇~70%甲醇）分離得到6個流份(H2-0-1~H2-0-6)。流份H2-0-5用HPLC制備分離(流動相:33 %乙腈)得到化合物27。流份H2-0-4經(jīng)HPLC制備 分離(流動相：31 %乙腈)得到化合物23，25，和流份H2-0-4-1;流份H2-0-4-1再經(jīng)HPLC制備 分離(流動相:70 %甲醇)得到化合物22b。流份H2-0-2經(jīng)中壓ODS分離(流動相：50 %甲醇~ 90 %甲醇)得到6個組分(H2-0-2-1~H2-0-2-6)。其中流份H2-0-2-5經(jīng)HPLC制備分離(流動 相:27 %乙腈)得到化合物29;流份H2-0-2-3經(jīng)HPLC制備分離(流動相：25 %乙腈)得到化合 物32;流份H2-0-2-2經(jīng)HPLC制備分離(22 %乙腈)得到化合物35。
[0060] 上述制備得到的編號ll、15a、15b、21、22b、23、25、27、29、32、35的三萜類化合物經(jīng) 過糖苷酶水解，逐個脫除單糖，得到次生苷和苷元。
[0061] 上述制備得到的三萜類化合物，編號2、3、5和19的化合物為具有環(huán)氧醚鍵的柴胡 皂苷類化合物。
[0062] 本實施例制備得到的各個化合物的結構鑒定數(shù)據(jù)如下：
[0063]化合物2(6〃-巴豆?；?柴胡皂苷a)
[0064]
[0065] 化學式C46H72O14,質(zhì)譜m/z 871[M+Na] +，核磁數(shù)據(jù)：
[0066] 1H-匪 5.91(111,111,11-27" )，5.68(lH，dd，J=10.2,3.0Hz，H-ll)，5.29(lH，d，J = 7.8Hz，H-l〃），5.03 (IHjCIJ = T-SHzjH-I7 ),1.61 (3H,ddJ = 6.6,1.2Hz,H-4//7 ) ,1.46(3H,dJ = 6.0Hz,H-67 ), 1.42(3H，s，H-26)，1.12(3H，s，H-27)，1.01(3H，s，H-25)，0.95(3H，s，H-29)，0.94(3H，s，H-30)，0.92(3H，s，H-24);。
[0067] ^0^^(0505160010^)3:166.8(01^),145.5(03^),132.6(011),131.6((:-12),123.5(03'" )，107.1 (C-l〃），106.5(01' ),85.9(03' )，84.5(C-13)，82.1(C-3)，78.7 (0-4^),76.0(0-2^),75.9(0-5^),73.5(0-28),72.6(0-40,72.1(0-3^),72.0(0-2 7 ),71.5 (C-57),65.0(0-6^),64.5(0-16,0-23),53.6(0-9),52.6(0-18),47.8(0-5),47.5(0-17), 46.I(C-H)，44.2(C-4)，42.7(C-8)，39.1(C-1)，38.2(C-19)，36.7(C-15)，36.6(C-10)， 35.2(C-21)，34.1(C-29)，32.1(C-7，C-20)，26.6(C-2)，26.2(C-22)，24.3(C-30)，21.3(C- 27),20.5(026),19.2(025),18.2(06),18.0(04'" )，17.8(06' )，13.5(C-24)。
[0068] 化合物3(柴胡皂苷a)，
[0069]
[0070] 化學式C42H680i3,質(zhì)譜數(shù)據(jù)m/z 803[M+Na] +，核磁數(shù)據(jù)：
[0071] 1H-NMR(C5D5N,600MHz)5：6.02(lH,d,J=10.8Hz,H-12),5.68(lH,dd,J=10.8, 3.0Hz,H-II ),5. ST(IHjCU = T-SHzjH-I123)jS-OOdHjCU = T-SHzjH-I7 )a.46(3H,dJ = Θ.0Hz,Η-θ7 )a.42(3H,s,H-26)a.l2(3H,s,H-27)a.01(3H,s,H-25),0.95(3H,s,H-29), 0.94(3H，s，H-30)，0.92(3H，s，H-24)。
[0072] 13C-MMR(C5D5N，600MHz)S:132.6(C-11)，131.6(C-12)，107.2(C-1〃），106.5(C-I 7),85.7(0-37),84.5(0-13),82.0(0-3),79.3(0-3^),78.9(0-5^),76.3(0-2^),73.5(0- 28),72.6(0-4^),72.3(0-40,72.0(0-20,71.5(0-57 ),64.5(C-23),64.4(C-16),63.2(C-6〃），53.6(C-9)，52.6(C-18)，47.8(C-5)，47.5(C-17)，46.1(C-14)，44.2(C-4)，42.7(C-8)， 39.1(C-1)，38.2(C-19)，36.7(C-10)，36.6(C-15)，35.2(C-21)，34.1(C-24)，32.0(C-7，C-20)，26.6(C-2)，26.2(C-22)，24.3(C-30)，21.3(C-27)，20.5(C-26)，19.2(C-25)，18.0(C-6),17.7(060,13.5(024)0
[0073] 化合物5(柴胡皂苷e)，
[0074]
化學式C42H68O12，質(zhì)譜數(shù)據(jù)m/z 787[M+Na] +，核磁數(shù)據(jù)： 2 1H-匪R(C5D5N，600MHz)S :6.00( lH，d，J=IO. 8,2·4Ηζ，H-12)，5.70( lH，dd，J = 10.8,3.0Hz,H-II ),5.44( IHjCIJ = T-SHzjH-I3 ),4.78( IHjCIJ = T-SHzjH-I7 )a.50(3H,d, J = 6.6Hz,H-6/)a.39(3H,s,H-26)a.34(3H,s,H-23)a.20(3H,s,H-27),0.99(6H,s,H-25，H-29)，0.93(6H，s，H-24，H-30)。 3 13C-MMR(C5D5N，600MHz)S:132.6(C-11)，131.7(C-12)，107.3(C-1〃），107.2(C-I 7),89.1(0-3),85.6(0-37),84.5(0-13),79.2(0-3^),78.9(0-5^),76.3(0-2^),73.5(0-28),72.7(0-4^),72.2(0-20,72.0(0-40,71.5(0-5 7 ),64.5(0-16),63.1(0-6^),55.8(0- 5) ，53.4(C-9)，52.6(C-18)，47.5(C-17)，46.1(C-14)，42.7(C-8)，40.2(C-4)，39.1(C-1)， 38· 2(C-19)，36 ·8(C-10)，36 ·6(C-15)，35.2(C-21)，34.2(C-29)，32.3(07)，32.1(020)， 28 · 3(C-23)，27 · I (C-2)，26 · 2(C-22)，24.3(C-30)，21.4(027)，20.5(026)，18.7(06)， 18.4(025),17.8(060,16.8(024)0
[0078] 化合物11(前柴胡皂苷d)，
[0079]
[0080] 化學式C36H58〇s，質(zhì)譜數(shù)據(jù)m/z 641[M+Na] +，核磁數(shù)據(jù)：
[0081] = 10.2Hz,H-12), 5.02( IHjCIJ = T^HzjH-I7 )a.70(3H,s,H-27)a.58(3H,d,J = 6.6Hz,H-67 )a.07(3H,s,H-26)a.05(3H,s,H-25)a.01(3H,s,H-29),0.95(3H,s,H-30),0.91(3H, s，H-24)。
[0082] 13C-MMR(C5D5N，600MHz)S:136.6(C-13)，133.5(C-18)，126.8(c-12)，126.7(C- 11) ,106.8(0-17 ),82.2(0-3),76.0(0-30,73.5(0-27 ),73.3(0-40,71.8(0-50,68.1(0-16)，65.2(C-23)，64.9(C-28)，54.5(C-9)，48.0(C-5)，45.8(C-17)，44.2(C-4)，42.4(C- 14) ，41.6(C-8)，39.5(C-19)，38.9(C-1)，37.0(C-10)，36.0(C-21)，33.1(C-20)，33.0(C- 15) ，32.8(C-7)，32.4(C-30)，26.6(C-2)，25.6(C-29)，24.9(C-22)，22.4(C-27)，19.4(C- 6) ,18.8(0-25),18.0(0-26),17.8(0-60,13.6(0-24).
[0083] 化合物11-1:由化合物11水解得到的苷元，質(zhì)譜數(shù)據(jù)m/z 495[M+Na]+.
[0084] 化合物15a(柴胡皂苷g)，
[0085]
[0086] 化學式C42H68O13質(zhì)譜數(shù)據(jù)m/z 803[M+Na] +，核磁數(shù)據(jù)：
[0087] 1H-MMR(C5D5N，600MHz)S:5.77(lH，d，J = 5.4Hz，H-ll)，5.65(lH，d，J = 5.4Hz，H- 12) , 5. Se(IHjCU = T-SHzjH-I77)^-QSdHjCU = T-SHzjH-I7 )a.45(3H,d,J = 6.0Hz,H-6')，1.31(3H，s，H-27)，1.30(3H，s，H-25)，1.29(3H，s，H-26)，1.00(3H，s，H-30)，0.99(3H， s，H-29)，0.89(3H，s，H-24)。
[0