一種組合物及其在抗急性腎衰藥物中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體設(shè)及組合物、制備方法及其用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 急性腎功能衰竭(Acute Renal化ilure，ARF)是由多種原因引起的臨床綜合征， 可見于臨床各科病人，發(fā)病率高且往往帶來嚴(yán)重后果，其特點(diǎn)為短期內(nèi)（數(shù)小時(shí)至數(shù)天）腎 功能急劇下降，臨床表現(xiàn)為急性少尿(尿量<400mLPd)或無尿(尿量〈lOOmLPd)，體內(nèi)氮質(zhì)代 謝產(chǎn)物排出產(chǎn)生障礙，迅速出現(xiàn)氮質(zhì)血癥，水及電解質(zhì)、酸堿平衡素亂，并引起全身各系統(tǒng) 相應(yīng)功能失調(diào)。引起急性腎衰的主要因素是腎血流量的急劇減少，W及由于腎組織缺血引 起的氧化應(yīng)激和細(xì)胞損傷，最終導(dǎo)致腎臟組織結(jié)構(gòu)的破壞和功能的惡化。目前臨床上尚無 公認(rèn)的治療急性腎衰有效的藥物，僅能通過糾正水電解質(zhì)平衡，糾正酸中毒等對(duì)癥治療措 施改善癥狀，后期還需要通過血液透析維持機(jī)體機(jī)能。在改善腎臟血流灌注障礙和減輕腎 組織損傷方面有明顯療效的臨床藥物少見。
[0003] 從天然產(chǎn)物中尋找化合物或先導(dǎo)化合物并進(jìn)行結(jié)構(gòu)修飾獲得其衍生物，從而得到 高效低毒的潛在藥物最有重要價(jià)值。
[0004] 本發(fā)明設(shè)及的化合物I是一個(gè)2011年發(fā)表（Ayumi Ohsaki et al.， 2011 . Salviskinone A,a diterpene with a new skeleton from Salvia 口^6￥日131^;[.了日化日11日化0]11日1:1日'3 52(2011)1375-1377)的化合物，我們對(duì)化合物1進(jìn)行 了結(jié)構(gòu)修飾，獲得了兩個(gè)新的衍生物即化合物III和化合物IV，并用化合物III和化合物IV 制備了組合物并對(duì)該組合物抗急性腎衰活性進(jìn)行了評(píng)價(jià)，其具有抗急性腎衰活性。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明公開了一個(gè)新的組合物，該組合物由化合物ΙΠ 和化合物IV組成，該組合物 中化合物ΠI和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為60 %和40 %。
[0006]
[0007] 本發(fā)明公開的組合物可W制成藥學(xué)上可接受的鹽或藥學(xué)上可接受的載體。
[0008] 本發(fā)明的目的是提供組合物用于治療急性腎衰的用途，即用于制備治療急性腎衰 藥物的用途。
[0009] 本發(fā)明的組合物對(duì)急性腎衰疾病有明顯的治療作用。
[0010] 通過我們的研究發(fā)現(xiàn)組合物能夠改善腎臟的功能。
[0011] W下通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的說明，但本發(fā)明的保護(hù)范圍不受具體實(shí) 施例的任何限制，而是由權(quán)利要求加 W限定。
【具體實(shí)施方式】
[0012] 實(shí)施例1化合物Salviskinone A的制備
[0013] 化合物Salviskinone A(I)的制備方法參照Ayumi Ohsaki等人發(fā)表的文獻(xiàn)(Ayumi Ohsaki et al.,2011.Salviskinone A,a diterpene with a new skeleton from Salvia przewalskii.Tetr址e化on Letters 52(2011)1375-1377)的方法。
[0014]
[0015] 實(shí)施例2 Salviskinone A的0-漠乙基衍生物（II)的合成
[0016] 將化合物I(312mg，1.00mmol)溶于15mL苯，向溶液中加入四下基漠化錠（TBAB) (0.08g)，1，2-二漠乙燒(3.760g，20.0 Ommol)和6mL的50%氨氧化鋼溶液?；旌衔镌?5攝氏 度攬拌12h"12h之后將反應(yīng)液倒入冰水中，立即用二氯甲燒萃取兩次，合并有機(jī)相溶液。然 后對(duì)有機(jī)相溶液依次用水和飽和食鹽水洗涂4次，再用無水硫酸鋼干燥，最后減壓濃縮去除 溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油酸/丙酬=100:1.5，v/v)， 收集棟色集中洗脫帶并揮去溶劑即得到化合物II的棟色粉末(327mg，78%)。
[0017] iHMffi(500MHz，DMS0-d6)S6.63(s，lH)，6.37(s，lH)，5.81(s，lH)，4.51(s，2H), 3.84(s，lH)，3.79(s，2H)，2.15(s，lH)，2.04(s，lH)，1.91(s，lH)，1.65(s，lH)，1.39(s，3H), 1.08(3,6扣，0.99(3，細(xì)）.
[001 引"C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl88.07(s),183.70(s),154.38(s),147.57(s),140.21 (s),136.40(s),134.71(s),131.25(s),128.40(s),118.83(s),72.12(s),45.49(s),37.54 (s),33.58(s),31.78(s),26.17(s),25.12(s),24.66(s),23.51(s),23.17(s),22.65(s). [0019] HRMS(ESI)m/z[M+扣+calcd for C2抽2泌r03:419.1222;found 419.1220.
[0020]
[0021] 實(shí)施例3 Salviskinone A的0-(咪挫基）乙基衍生物（III)的合成
[0022] 將化合物II(209mg，0.5mmo 1)溶于30mL乙臘當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鐘(690mg， 5. Ommo 1)，艦化鐘（2 5 2mg，1.5mmo 1)和咪挫（8 7 Omg，1 Ommo 1)，混合物加熱回流4h。反應(yīng)結(jié)束 后將反應(yīng)液倒入45mL冰水中，用等量二氯甲燒萃取3次，合并有機(jī)相。依次用水和飽和食鹽 水洗涂合并之后的有機(jī)相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗品。產(chǎn)物粗 品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油酸/丙酬= 100:0.2，v/v)，收集棟色集中洗脫帶并揮 去溶劑即得到化合物ΠΙ的淡棟色固體(144.1mg，71%)。
[0023] 1h 醒R(500MHz，DMS0-d6)S7.91(s，lH)，7.16(s，lH)，6.65(d，J=103.6Hz，2H), 6.41(s,lH),5.76(s,lH),4.50(s,2H),4.39(s,2H),3.82(s,lH),2.05(s,lH),1.94(s,lH), 1.87(3，1扣，1.61(3，1扣，1.30(3,3扣，0.99(3,6扣，0.90(3，細(xì)）.
[0024] 1化 NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl87.81(s),183.33(s),153.90(s),147.28(s),139.81 (s)，139.19(s)，136.14(s)，l：M.34(s)，130.77(s)，128.43(s)，128.01(s)，118.85(s)， 118.53(s),69.03(s),45.02(s),43.70(s),37.46(s),33.09(s),25.87(s),25.06(s), 24.29(s),23.03(s),23.05(s),22.41(s).
[0025] HRMS化SI):m/z[M+H]+calcd for C2出31 化〇3:407.2335;found:407.2331。
[0026]
[0027] 實(shí)施例4 Salviskinone A的0-(Ξ挫基）乙基衍生物（IV)的合成 [002引將化合物II(209mg，0.5mmo 1)溶于20mL乙臘當(dāng)中，向其中加入無水碳酸鐘(345mg， 2.5mmo 1)，艦化鐘（84mg，0.5mmo 1)和 1，2，3-Ξ氮挫（2760mg，40mmo 1)，混合物加熱回流4h。 反應(yīng)結(jié)束后將反應(yīng)液倒入20mL冰水中，用等量二氯甲燒萃取3次，合并有機(jī)相。依次用水和 飽和食鹽水洗涂合并之后的有機(jī)相，再用無水硫酸鋼干燥，減壓濃縮去除溶劑得到產(chǎn)物粗 品。產(chǎn)物粗品用硅膠柱層析純化(流動(dòng)相為:石油酸/丙酬=100:0.5，v/v)，收集黃色集中洗 脫帶即得到化合物IV的黃色粉末（134.3mg，66 % )。
[0029] 1h NMR(500MHz，Chloroform-dl)S8.37(s，lH)，7.95(s，lH)，6.35(s，lH)，6.14(s, lH)，5.35(s，lH)，4.13(s，lH)，4.42(d，J=16.4Hz，3H)，3.71(s，lH)，2.13(s，lH)，2.05(s， 1扣，1.81(3，1扣，1.63(3，1扣，1.30(3,3扣，1.08(3,6扣，0.97(3，細(xì)）.
[0030] "C NMR(125MHz，DMS0-d6)Sl88.09(s),183.61(s),154.18(s),147.26(s),139.72 (s)，136.40(s)，136.32(s)，l：M.52(s)，130.95(s)，127.99(s)，120.16(s)，118.62(s)， 67.14(s),46.27(s),45.18(s),37.69(s),33.32(s),26.14(s),25.01(s),24.41(s),23.23 (s),23.06(s),22.47(s).
[0031] HRMS化SI) :m/z[M+扣+calc壯or C24H30化03:408.2287; found:408.2282。
[0032]
[0033] 實(shí)施例5組合物對(duì)急性腎衰大鼠的治療作用
[0034] (一)實(shí)驗(yàn)方法
[0035] 組合物的制備：將研磨之后過200目網(wǎng)的60mg化合物III的粉末和研磨之后過200 目網(wǎng)的40mg化合物IV的粉末裝入帶蓋的小管中并用滿輪攬拌儀混合即得到lOOmg組合物， 使用時(shí)用水溶解運(yùn)lOOmg的組合物即得到組合物的溶液。
[0036] 采用肌肉注射甘油致急性腎功能衰竭大鼠動(dòng)物模型。選用180~220g健康雄性SD 大鼠30只，隨機(jī)分為5組:假手術(shù)組(肌肉注射生理鹽水）；模型組(肌肉注射甘油）；給藥干預(yù) 組(組合物、化合物ΠΙ或者化合物IV 0.6mg/Kg，肌肉注射甘油），各組大鼠在甘油造模后立 即尾靜脈注射生理鹽水或待試藥物，12和24小時(shí)后再給藥一次。
[0037] (二)觀察指標(biāo)
[0038] 大鼠末次給藥或生理鹽水后放入代謝籠收集24小時(shí)尿，留尿后6小時(shí)用4%水合氯 醒腹腔注射麻醉，采用激光多普勒血流儀測(cè)定造模后及治療后雙側(cè)腎臟血流量，取平均值 作為單只動(dòng)物腎血流量;取血制備血清，測(cè)定血BUN和化e(均按試劑盒說明書操作）。
[0039] (立)實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0040] 1.組合物可增加急性腎衰小鼠腎血流量
[0041] 組合物可顯著增加急性腎衰小鼠腎血流量，而化合物ΙΠ 和化合物IV無此作用。
[0042] 表1組合物對(duì)急性腎衰小鼠腎血流量的影響
[0043]
[0044] 沖<0.05vs急性腎衰模型組
[0045] 2.組合物對(duì)急性腎衰小鼠腎功能具保護(hù)作用
[0046] 急性腎衰大鼠靜脈注射生理鹽水24小時(shí)后，血清腳財(cái)日化e見表2。急性腎衰模型組 明顯高于假手術(shù)組，說明模型組動(dòng)物腎功能損害嚴(yán)重。組合物能改善急性腎衰大鼠的腎功 能(P<0.05)，而化合物ΠI和化合物IV無此作用。見表2。
[0047] 表2各試驗(yàn)組大鼠腎功能指標(biāo)比較 [004引
[0049] 沖<0.05vs急性腎衰模型組
[0050] 結(jié)論:組合物能夠保護(hù)腎臟的功能，可W用來制備抗急性腎衰藥物。而化合物III 和化合物IV不能夠保護(hù)腎臟，不可用來制備抗急性腎衰藥物。
[0051] 實(shí)施例6本發(fā)明所設(shè)及組合物片劑的制備
[0052] 取2克組合物，加入制備片劑的常規(guī)輔料18克，混勻，常規(guī)壓片機(jī)制成100片。
[0053] 實(shí)施例7本發(fā)明所設(shè)及組合物膠囊的制備
[0054] 取2克組合物，加入制備膠囊劑的常規(guī)輔料如淀粉18克，混勻，裝膠囊制成100粒。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種組合物，其特征為該組合物由化合物III和化合物IV組成，該組合物中化合物 III和化合物IV的質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為60%和40%，IV 〇2. 如權(quán)利要求1所述的組合物的制備方法，其特征為:將化合物III的粉末和化合物IV 的粉末按照質(zhì)量百分?jǐn)?shù)分別為60%和40%充分混合。3. -種如權(quán)利要求1所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用。4. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述組合物改 善急性腎衰所引起的腎臟血流量的降低。5. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述組合物改 善急性腎衰引起的血清BUN的升高。6. 如權(quán)利要求3所述的組合物在治療急性腎衰藥物中的應(yīng)用，其特征為:所述組合物改 善急性腎衰引起的血清Cre的升高。
【專利摘要】本發(fā)明涉及有機(jī)合成和藥物化學(xué)領(lǐng)域，具體涉及組合物、制備方法及其在制備抗急性腎衰藥物上的用途。本發(fā)明公開了一種組合物及其制備方法。藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)表明，本發(fā)明的組合物具有抗急性腎衰的作用，具有開發(fā)抗急性腎衰藥物的價(jià)值。
【IPC分類】A61K31/4164, A61P13/12, A61K31/4192
【公開號(hào)】CN105596332
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510763315
【發(fā)明人】王卓婷
【申請(qǐng)人】南京賦海澳賽醫(yī)藥科技有限公司
【公開日】2016年5月25日
【申請(qǐng)日】2015年11月10日