艾納香屬植物提取物在制備具有抗菌作用的漁藥中的應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明設(shè)及漁藥技術(shù)領(lǐng)域，具體設(shè)及一種艾納香屬植物提取物在制備具有抗菌作 用的漁藥中的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002] 魚類疾病已成為水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)可持續(xù)發(fā)展的瓶頸，例如珠江Ξ角洲地區(qū)。各種抗生 素已被廣泛應(yīng)用。然而，抗生素的使用將同時(shí)在水生生態(tài)系統(tǒng)和魚的品質(zhì)上帶來(lái)副作用。
[0003] 中藥既可預(yù)防和治療疾病、促進(jìn)動(dòng)物生長(zhǎng)，又不會(huì)產(chǎn)生危害人體健康的藥物殘留， 我國(guó)傳統(tǒng)的中醫(yī)中藥已逐步受到廣大獸藥生產(chǎn)企業(yè)的重視。因此，W中藥為原料，開(kāi)發(fā)含天 然成分的漁藥取代傳統(tǒng)的化學(xué)漁藥，對(duì)于減少畜牧產(chǎn)品中的藥物殘留、發(fā)展綠色漁業(yè)具有 重要的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004] 為了克服現(xiàn)有技術(shù)中天然來(lái)源的漁藥種類少等不足和缺點(diǎn)，本發(fā)明的目的在于提 供一種艾納香屬植物提取物在制備具有抗菌作用的漁藥中的應(yīng)用。
[0005] 本發(fā)明的目的通過(guò)下述技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)：
[0006] -種艾納香屬植物提取物在制備具有抗菌作用的漁藥中的應(yīng)用；
[0007] 所述的具有抗菌作用的漁藥優(yōu)選為具有抗嗜水氣單抱菌、巧光假單胞菌或愛(ài)德華 氏菌作用的漁藥；
[000引所述的漁藥優(yōu)選為治療細(xì)菌所致的魚類腸炎病、赤皮病或爛觸病的藥物；
[0009] 所述的艾納香屬植物優(yōu)選為濱桂艾納香（Blumea riparia)、六耳鈴（Blumea lancinia1:a)、光葉艾納香（Blumea eberhardtii)、東風(fēng)草(Blumea megacephala)、高艾納 香(Blumea repanda)或艾納香(Blumea balsmifera);
[0010] 所述的艾納香屬植物提取物的提取方法，包含如下步驟：
[0011] 將艾納香屬植物的全草或一部分，用有機(jī)溶劑、水或有機(jī)溶劑的水溶液提取，得到 艾納香屬植物提取物；
[001^ 所述的有機(jī)溶劑為乙醇、甲醇、異丙醇、正下醇、乙酸乙醋和丙酬中的至少一種；
[0013] 所述的的艾納香屬植物提取物的提取方法，優(yōu)選包含如下步驟：
[0014] 將艾納香屬植物的全草或一部分，用體積分?jǐn)?shù)為0~100%的乙醇水溶液加熱回流 提取1~3次，每次提取1~化，得到艾納香屬植物粗提取物；
[0015] 所述的的艾納香屬植物提取物的提取方法，還包含如下步驟：
[0016] 將上述艾納香屬植物粗提取物進(jìn)一步用正下醇萃取或經(jīng)大孔吸附樹(shù)脂柱純化；
[0017] 所述的大孔吸附樹(shù)脂柱的純化方法為:將上述艾納香屬植物粗提取物上大孔吸附 樹(shù)脂柱，先用水或體積分?jǐn)?shù)為1~10%的乙醇水溶液洗脫除去雜質(zhì)，再用體積分?jǐn)?shù)為30~ 70 %的乙醇水溶液洗脫，洗脫液減壓濃縮，干燥得艾納香屬植物提取物；
[0018] 所述的大孔吸附樹(shù)脂柱的純化方法優(yōu)選為:將上述艾納香屬植物粗提取物上大孔 吸附樹(shù)脂柱，先用水洗脫除去雜質(zhì)，直至流出液在硅膠薄層板上展開(kāi)后噴灑質(zhì)量百分比為 5%的化C13/乙醇溶液顯藍(lán)色或藍(lán)黑色斑點(diǎn)；再用體積分?jǐn)?shù)為40~60%的乙醇水溶液洗脫， 直至流出液在硅膠薄層板上展開(kāi)后噴灑質(zhì)量百分比為5%的FeCl3/乙醇溶液不顯色；將體 積分?jǐn)?shù)為40~60 %的乙醇洗脫液減壓濃縮，干燥得艾納香屬植物提取物；
[0019] 所述的艾納香屬植物提取物中總酪的質(zhì)量百分含量?jī)?yōu)選>25% (W艾納香屬植物 提取物的干品重量計(jì)算）；
[0020] 所述的艾納香屬植物提取物中總酪的質(zhì)量百分含量進(jìn)一步優(yōu)選為60~99%;
[0021] 本發(fā)明相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)具有如下的優(yōu)點(diǎn)及效果：
[0022] (1)本發(fā)開(kāi)發(fā)了艾納香屬植物的新用途，提供了一種新的天然漁藥。
[0023] (2)本發(fā)明所述的艾納香屬植物提取物具有很好的抗菌作用，可W用來(lái)治療魚類 由上述細(xì)菌感染所致的腸炎病、赤皮病或爛觸病。
[0024] (3)本發(fā)明所述的艾納香屬植物資源廣泛、價(jià)廉，所述的提取物制備工藝簡(jiǎn)單、易 于大規(guī)模生產(chǎn)。
【具體實(shí)施方式】
[0025] 下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步詳細(xì)的描述，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。
[0026] W下實(shí)施例中總酪的含量采用比色法測(cè)量，具體方法如下:在lOmL容量瓶中，加入 待測(cè)物(本發(fā)明艾納香屬植物提取物)的丙酬-水溶液(丙酬的體積分?jǐn)?shù)為70%)8mL，然后加 入化lin-Ciocalteau試劑0.5血，搖勻，放置1分鐘。再加入質(zhì)量百分比為20%的硫酸鋼溶液 1.5mL，搖勻，放置1小時(shí);在750nm下測(cè)定吸收度。同時(shí)在另一容量瓶中加入丙酬-水溶液，按 同上步驟顯色作為空白。另外，用3，5-0-二咖啡酷奎寧酸化PLC分析，純度>95 % )做標(biāo)準(zhǔn)樣 品測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線。將在干燥器中干燥至恒重的標(biāo)準(zhǔn)品配成系列濃度，按同上方法，在750皿 測(cè)定吸收度，作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0027] 實(shí)施例1
[0028] 干燥的濱桂艾納香(Blumea riparia)全草(產(chǎn)于廣西百色)粗粉lOOOg，用5000mL 的體積分?jǐn)?shù)為70%的甲醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓回收得到121g干浸 膏，即濱桂艾納香提取物。經(jīng)測(cè)定，得總酪的質(zhì)量百分比為35%。
[0029] 實(shí)施例2
[0030] 干燥的六耳鈴(Blumea lanciniata)全草(產(chǎn)于云南)粗粉lOOOg，用5000mL的體積 分?jǐn)?shù)為70%的乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓回收得到125g干浸膏，即六 耳鈴提取物。經(jīng)測(cè)定，得總酪的質(zhì)量百分比為31%。
[0031] 實(shí)施例3
[0032] 干燥的光葉艾納香(Blumea eberhardtii)全草(產(chǎn)于云南)粗粉lOOOg，用5000mL 的體積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓回收得到122g干浸 膏，即光葉艾納香提取物。經(jīng)測(cè)定，得總酪的質(zhì)量百分比為33%。
[0033] 實(shí)施例4
[0034] 干燥的東風(fēng)草(Blumea megacephala)(產(chǎn)于云南)全草粗粉lOOOg，用5000mL的體 積分?jǐn)?shù)為70%的乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓回收得到134g干浸膏，即 東風(fēng)草提取物。經(jīng)測(cè)定，得總酪的質(zhì)量百分比為32%。
[0035] 實(shí)施例5
[0036] 干燥的高艾納香(Blumea repanda)(產(chǎn)于云南）全草粗粉lOOOg，用5000mL的體積 分?jǐn)?shù)為70%的乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓回收得到134g干浸膏，即高 艾納香提取物。經(jīng)測(cè)定，得總酪的質(zhì)量百分比為30%。
[0037] 實(shí)施例6
[003引干燥的艾納香(Blumea balsmifera)(產(chǎn)于云南)全草粗粉lOOOg，用5000mL的體積 分?jǐn)?shù)為70%的乙醇回流提取3次，每次2小時(shí)，合并提取液，減壓回收得到134g干浸膏，即艾 納香提取物。經(jīng)測(cè)定，得總酪的質(zhì)量百分比為28%。
[0039] 實(shí)施例7
[0040] 將實(shí)施例1制備得到的濱桂艾納香提取物進(jìn)一步用大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行有效成分的 富集，方法為：
[0041] 稱取大孔吸附樹(shù)脂(D101)2000g，加蒸饋水4000mL，攬拌均勻，用水浮選法除去樹(shù) 脂單體或碎片，然后在室溫下放置24h;待樹(shù)脂充分溶脹后，將樹(shù)脂抽干，再用體積分?jǐn)?shù)為 95%的乙醇濕法裝柱;接著用體積分?jǐn)?shù)為95%的乙醇清洗柱子至流出液與水（1:5)混合不 呈渾濁，然后用蒸饋水充分淋洗柱子至流出液無(wú)乙醇的味道;用質(zhì)量百分比為2%的NaOH通 過(guò)樹(shù)脂柱，浸泡2~4h，再用蒸饋水洗至中性，備用；
[0042] 將實(shí)施例1制備得到的濱桂艾納