專利名稱：食蟹猴肝損傷造模方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于動(dòng)物模型的造模方法，具體涉及到一種食蟹猴肝纖維化模型建立方法。需要說(shuō)明的是，本發(fā)明沒有涉及外科手術(shù)，具備在產(chǎn)業(yè)上實(shí)施的條件。
背景技術(shù)：
肝臟遭到各種致病原侵襲時(shí)，引起肝臟損害與炎癥反應(yīng)，肝組織免疫系統(tǒng)同時(shí)被激活，進(jìn)行組織修復(fù)。肝纖維化是指這種組織修復(fù)過(guò)程、過(guò)度及失控時(shí)，肝組織內(nèi)細(xì)胞外基質(zhì)過(guò)度增生與異常沉積所致肝臟結(jié)構(gòu)和肝功能異常改變的一種病理過(guò)程。輕者稱為肝纖維化，重者使肝小葉結(jié)構(gòu)改建，假小葉及結(jié)節(jié)，成為肝硬化。在臨床上難以將兩者截然分開，因?yàn)槁愿尾∮筛卫w維化到肝硬化是一個(gè)連續(xù)的發(fā)展過(guò)程。為了深入研究肝纖維化的發(fā)病機(jī) 制及篩選有效預(yù)防和治療本病的藥物，選擇科學(xué)性、實(shí)用性、重現(xiàn)性的肝纖維化動(dòng)物模型有著十分重要的意義。食蟹猴生命周期長(zhǎng)，生物學(xué)特性與人類極其相似，是研究人類慢性疾病的最佳實(shí)驗(yàn)材料，用它建立的人類疾病動(dòng)物模型有利于觀察疾病及其并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展規(guī)律，同時(shí)為治療藥物的療效檢驗(yàn)和安全性評(píng)估提供可靠的保證，已逐漸成為科學(xué)研究和藥物研究中使用較多的一種靈長(zhǎng)類實(shí)驗(yàn)動(dòng)物。目前，化學(xué)性肝損傷動(dòng)物模型主要由四氯化碳、D-氨基半乳糖、異煙肼、撲熱息痛等所致；然而，由于各種動(dòng)物之間的差異以及飲食習(xí)性的問題，各物種的肝損傷模型復(fù)制有較大難度。至今，未見有食蟹猴肝纖維化模型的成功報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于提供一種造模時(shí)間短、成功率高的四氯化碳性肝纖維化食蟹猴模型的建立方法。本發(fā)明通過(guò)下述方案實(shí)現(xiàn)選取雄性8 IOkg,雌性5 7kg的食蟹猴,采取灌胃給藥,劑量為1. 6ml/kg四氯化碳，每周給藥兩次，每次間隔2至3天，連續(xù)給藥34周；在造模期間供給食蟹猴的飼料成分中蛋白質(zhì)10%，脂肪15% 30%，膽固醇0. 1% 0.3%，其余為水份、纖維、礦物質(zhì)等；本飼料較常規(guī)商業(yè)飼料，控制了蛋白質(zhì)和脂肪及膽固醇的含量，為造模成功的必要條件。按照本發(fā)明提供的方法對(duì)46只食蟹猴進(jìn)行造模，其中43只造模成功，可用于科研試驗(yàn)，3只造模失??；成功率為93%。可見，本發(fā)明動(dòng)物模型的建立方法安全可靠，成功率高，填補(bǔ)了食蟹猴肝損傷模型的空白，具有良好的應(yīng)用前景；因食蟹猴與人類基因有高度相似，通過(guò)其肝損傷的模型來(lái)研究肝病的發(fā)生機(jī)制，評(píng)價(jià)、篩選相關(guān)藥物有著重要的意義。


附圖1為對(duì)照組B超影像附圖2為肝纖維化組織超聲3為(200X)，VG染色，匯管區(qū)附近和增生的小膽管周圍出現(xiàn)膠原纖維圖4為(200X)，VG染色，正常肝臟活檢組織
具體實(shí)施例方式(一)本發(fā)明模型的建立實(shí)施例1 選取4-7歲食蟹猴雌、雄各10只，雄性8 10kg，雌性5 7kg，采取灌胃給藥，劑量為1. 6ml/kg四氯化碳，每周給藥兩次，每次間隔2至3天，連續(xù)給藥34周；期間供給飼料為蛋白質(zhì)10%，脂肪15%，膽固醇0.1%，其余為水份、纖維、礦物質(zhì)等；空白對(duì)照組4-7歲，雌、雄各3只,雄性8 IOkg,雌性5 7kg,普通商業(yè)飼料供給。實(shí)施例2選取4-7歲食蟹猴雌、雄各10只，雄性8 10kg，雌性5 7kg，采取灌胃給藥，劑量為1. 6ml/kg四氯化碳，每周給藥兩次，每次間隔2至3天，連續(xù)給藥34周；期間供給飼料為蛋白質(zhì)10%，脂肪30%，膽固醇0.3%，其余為水份、纖維、礦物質(zhì)等；空白對(duì)照組4-7歲，雌、雄各3只,雄性8 IOkg,雌性5 7kg,普通商業(yè)飼料供給。( 二 )食蟹猴肝纖維化診斷模式評(píng)價(jià)方法及結(jié)果該方法包括血清生化標(biāo)志物、影像學(xué)、病理組織學(xué)診斷。1.血清生化標(biāo)志物主要包括血清丙氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(ALT)、門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)。造模8-10周開始，造模組肝細(xì)胞大量壞死，肝功能顯著改變，其中對(duì)照組和造模組肝功能變化如下
權(quán)利要求
1.一種食蟹猴肝損傷的造模方法，其特征在于選取雄性8 10kg、雌性5 7kg的食蟹猴，采取灌胃給藥，劑量為1. 6ml/kg四氯化碳，每周給藥兩次，每次間隔2至3天，連續(xù)給藥34周；在造模期間食蟹猴飼料成分與商業(yè)飼料相比，控制了蛋白質(zhì)為10%，脂肪為 15% 30%，膽固醇為O. 1% O. 3%。
全文摘要
本發(fā)明提供食蟹猴肝損傷模型的造模方法，以四氯化碳灌胃配以特殊的飼料，診斷分析結(jié)果證明本方法造模成功率高，造模周期適中；本發(fā)明為研究肝病的發(fā)生機(jī)制，評(píng)價(jià)、篩選相關(guān)藥物有著重要的意義。
文檔編號(hào)A61K33/00GK103006690SQ20121056977
公開日2013年4月3日 申請(qǐng)日期2012年12月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年12月25日
發(fā)明者謝莉萍, 劉雪萍, 韋祝梅, 梁福東, 李振明, 王科 申請(qǐng)人:廣西瑋美生物科技有限公司