一種具有緩解肝損傷作用的組合物及其制備方法及含量測定方法
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種具有緩解肝損傷作用的組合物及其制備方法，該組合物由葛根、白芍、五味子、余甘子、枳椇子、姜黃提取物和番茄紅素組成。本發(fā)明還提供了一種該組合物的含量測定方法。本發(fā)明組合物可以用于制備緩解肝損傷的保健品。
【專利說明】一種具有緩解肝損傷作用的組合物及其制備方法及含量測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及保健品領(lǐng)域，特別涉及一種具有緩解肝損傷作用的保健品組合物。
【背景技術(shù)】
[0002]肝臟損傷是由病毒、藥物、毒劑、酒精、缺氧等因素導(dǎo)致的肝臟病理改變。肝損傷的發(fā)生機制較為復(fù)雜，可分為化學(xué)性和免疫性兩種?；瘜W(xué)機制主要是通過質(zhì)膜的損害、自由基損害、線粒體功能失調(diào)、代謝紊亂等?；瘜W(xué)性肝損傷可因酒精、環(huán)境中的化學(xué)毒物及某些藥物的作用而引起。
[0003]現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證明，質(zhì)膜損害是肝細胞(HC)受損的最基本表現(xiàn)。細胞膜結(jié)構(gòu)和功能的受損，可使肝臟可溶性酶的活性升高，進而不能保持正常的膜流動性和電解質(zhì)的平衡，尤其是鈣離子的穩(wěn)態(tài)失調(diào)，使細胞內(nèi)鈣堆聚，最終引起細胞壞死。
[0004]此外，身體受有害物質(zhì)的損傷后，導(dǎo)致自由基大量產(chǎn)生和抗氧化物顯著減少，引起組織細胞的脂質(zhì)發(fā)生過氧化連鎖反應(yīng)，從而破壞組織細胞的正常結(jié)構(gòu)，影響其正常代謝和功能，出現(xiàn)組織細胞損傷性變化。脂質(zhì)過氧化反應(yīng)是肝損傷發(fā)生的重要機制。脂質(zhì)過氧化的主要降解產(chǎn)物丙二醛(MDA)，可嚴重損傷肝細胞膜結(jié)構(gòu)，導(dǎo)致HC的腫脹、壞死。
[0005]改善肝臟的供血供氧是緩解肝損傷的重要環(huán)節(jié)之一。肝臟正常的血液循環(huán)對維持肝臟正常的生理功能有十分重要的意義。如果血流減慢易使各種炎癥細胞附壁聚集，造成和加重局部的炎癥反應(yīng)。同時，缺血缺氧使肝細胞線粒體內(nèi)尼克酞胺腺嗓吟二核昔酸的氧化型和還原型的比例下降，三磷酸腺苷(ATP)酶受抑制，出現(xiàn)細胞內(nèi)ATP耗竭和酸中毒，持續(xù)缺氧使細胞內(nèi)Ca濃度上升，激活蛋白、脂質(zhì)和DNA的降解，形成以小葉中央?yún)^(qū)為主的肝組織變性、壞死。
[0006]緩解肝損傷的另一重要環(huán)節(jié)是促進HC再生。HC有強烈的再生能力，促進HC的再生是改善肝臟功能、提高患者生存力的重要手段和環(huán)節(jié)。
[0007]目前，臨床上大部分化學(xué)性肝損傷是由酒精引起，即酒精性肝病。
[0008]酒精性肝病(alcoholicliverdisease, ALD),是由于長期大量飲酒所致的肝臟疾病，其發(fā)病率高，后果嚴重，已成為一種嚴重危害人民健康的疾病。過量飲酒是當(dāng)今世界范圍內(nèi)一個重要的公共衛(wèi)生問題，它不僅危害社會治安，且嚴重影響身體健康。酒精性肝病是西方國家中肝硬化的主要致病因素，據(jù)統(tǒng)計，20世紀80年代美國肝硬化患病率為360/1000人口，其中40%?90%為酒精相關(guān)性肝病，每10萬人口中酒精性肝硬化死亡率為4.4。近年來，我國酒類產(chǎn)量逐年增加，從1984年產(chǎn)711.3萬噸，1993年的1846萬噸，到2000年的20萬噸，酒精性肝病也有隨之增加之趨勢，據(jù)估計，20世紀90年代酒精性肝病的發(fā)病率較20世紀80年代以前約增加了 30倍。由此可見，隨著我國人民生活條件的日益改善，我國酒精消耗量呈直線上升，因而我國近年來酒精性肝病的發(fā)生有明顯增多的趨勢。
[0009]目前為止，在國家食品藥品監(jiān)督管理總局已審批的抗肝損傷類保健品有254種，其中審批已上市保肝類產(chǎn)品較為有名的:海王金樽(成分牡蠣粉提取物，偏向于解酒)；昂立多邦(乳酸桿菌，維生素C、E、B1、B2、B6、葡萄糖酸鋅，)；安泰膠囊(卵白蛋白、珍珠粉，解酒、肝腹水、肝硬化、脂肪肝)；大漢靈芝(靈芝多肽、多糖，免疫力低下者、有化學(xué)性肝損傷危險者及肝病患，偏向于腫瘤)；“陪酒師”解酒茶(紫葛花、葛根、枳犋子、低聚木糖醇、富硒野山茶，能醒酒護肝、健胃、養(yǎng)生)；萊福寶保肝丸(新西蘭，主要成分為圣瑪利草精華素、維生素E、維生素C等精制而成，可防止病毒侵入肝細胞，強肝功能，促進膽汁分泌，分解肝臟脂肪并排除進入血液的毒素)。
[0010]與上市品種相比，本發(fā)明組合物采用藥食同源的植物品種，長期服用對人身體沒有毒副作用；同時，本發(fā)明組合物能夠降低脂質(zhì)過氧化產(chǎn)物丙二醛、清除超氧自由基、減輕肝纖維化病變，有效降低肝臟病理性損傷。
[0011]本發(fā)明組合物能夠有效改善肝損傷模型的生化指標，特別是酒精性肝損傷模型，具有的一定緩解肝損傷的作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012]本發(fā)明的目的是提供一種具有緩解肝損傷作用的組合物；
[0013]本發(fā)明的另一目的是提供該組合物的制備方法；
[0014]本發(fā)明的再一個目的是提供該組合物在制備具有緩解肝損傷作用的保健品組合物中的應(yīng)用。
[0015]本發(fā)明的再一個目的是提供一種該組合物的含量測定方法。
[0016]本發(fā)明通過以下方式實現(xiàn):
[0017]一種具有緩解肝損傷作用的組合物，其特征在于，該組合物是由包含以下重量份的成分組成:葛根4?6重量份、白茍I?3重量份、五味子0.50?2重量份、余甘子2?4重量份、枳犋子3?6重量份、姜黃提取物0.10?0.25重量份、番茄紅0.05?0.20重量份。
[0018]上述組合物優(yōu)選以下重量份的成分組成:葛根4重量份、白芍I重量份、五味子0.50重量份、余甘子2重量份、枳犋子3重量份、姜黃提取物0.10重量份、番茄紅素0.05重量份。
[0019]上述組合物優(yōu)選以下重量份的成分組成:葛根6重量份、白芍3重量份、五味子2重量份、余甘子4重量份、枳犋子6重量份、姜黃提取物0.25重量份、番茄紅素0.20重量份。
[0020]上述組合物優(yōu)選以下重量份的成分組成:葛根5重量份、白芍2重量份、五味子I重量份、余甘子3重量份、枳犋子0.45重量份、姜黃提取物0.15重量份、番茄紅素0.10重量份
[0021]上述組合物中還可以加入常用輔料，包括但不限于微晶纖維素、硬脂酸鎂、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、甲基硅油、乳糖、蔗糖、甘露醇或山梨醇、玉米淀粉、小麥淀粉、稻米淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃芪膠、聚乙烯吡咯烷酮(PVP或聚維酮)或磷酸鈣。
[0022]一種具有緩解肝損傷作用的組合物的制備方法，其特征在于，該制備方法包括以下步驟:
[0023](I)葛根、白芍、五味子加6?10倍量50%?80%乙醇，提取2?4次，每次I?3小時，提取液濃縮至1.00?1.30，減壓干燥，粉碎，得到干粉A ;
[0024](2)余甘子、枳犋子加6?10倍量水，提取2?4次，每次I?3小時，提取液濃縮至1.0O?1.30，減壓干燥，粉碎，得到干粉B ;
[0025](3)干粉A、干粉B混合，加入姜黃提取物及番茄紅素，混勻，加入輔料，得所需制劑。
[0026]所述制劑包括片劑、丸劑、膠囊劑、口服液、顆粒劑。
[0027]優(yōu)選的，該制備方法包括以下步驟:
[0028](I)葛根、白芍、五味子加8倍量60%乙醇，提取3次，每次2h，提取液濃縮至1.20，減壓干燥，粉碎，得到干粉A ;
[0029](2)余甘子、枳犋子加8倍量水，提取3次，每次1.5h，提取液濃縮至1.20，減壓干燥，粉碎，得到干粉B ；
[0030](3)干粉A、干粉B混合，加入姜黃提取物及番茄紅素，混勻，加入輔料，得所需制劑。
[0031]一種具有緩解肝損傷作用的組合物的含量測定方法，其特征在于，該測定方法包括以下步驟:
[0032](I)供試品溶液制備；
[0033](2)取沒食子酸、葛根素、姜黃素對照品溶于甲醇，制備混合對照品溶液；
[0034](3)利用高效液相色譜法在三波長條件下，同時測定供試品溶液中沒食子酸、葛根
素和姜黃素的含量；
[0035]色譜條件為:HPLC色譜柱為C18，以甲醇或乙腈為流動相A，以0.2%磷酸或4%乙酸為流動相B，梯度洗脫程序為O — 15min，A為2?5%，B為98?95%;15 — 16min，A從2?5%上升到12?17%，B從98?95%下降到88?83%;16 — 45min，A從12?17%上升到40?60%，B從88?83%降到60?40% ；45 — 46min，A從40?60%上升到75?85%, B 從 60 ?40%下降到 25 ?15% ；46 — 55min, A 為 75 ?85%，B 為 25 ?15% ;柱溫 20 ?400C ;流速 0.8 ?1.2mL.mirT1 ;檢測波長 273nm、250nm、430nm ；
[0036](4)根據(jù)高效液相色譜分析結(jié)果計算供試品中沒食子酸、葛根素和姜黃素的含量。
[0037]優(yōu)選的，供試品溶液是依照以下步驟制備:
[0038](I)取葛根5重量份、白芍2重量份、五味子I重量份、余甘子3重量份、枳犋子4.5重量份、姜黃提取物0.15重量份、番茄紅素0.10重量份；
[0039](2)葛根、白芍、五味子加8倍量60%乙醇，提取3次，每次2h，提取液濃縮至1.20，減壓干燥，粉碎，得到干粉A ;
[0040](3)余甘子、枳犋子加8倍量水，提取3次，每次1.5h，提取液濃縮至1.20，減壓干燥，粉碎，得到干粉B ；
[0041](4)干粉A、干粉B混合，加入姜黃提取物及番茄紅素，混勻，加入輔料，得所需制劑；
[0042](5)取0.1g制劑研細后于50mL容量瓶中加入甲醇或乙醇至刻度，超聲提取30min，用甲醇或乙醇定容，過濾，取續(xù)濾液，即得供試品溶液。
[0043]優(yōu)選的，對照品溶液按以下步驟制備:取沒食子酸、葛根素和姜黃素對照品適量于50mL容量瓶中，加入25mL甲醇或，待姜黃素完全溶解后，用水定容至刻度，搖勻，制得含沒食子酸30 μ g/mL、葛根素40 μ g/mL、姜黃素10 μ g/mL的混合對照品溶液。
[0044]優(yōu)選的，色譜條件為:HPLC色譜柱為Waters C18,以甲醇流動相A，以0.2%磷酸或4%乙酸為流動相B，梯度洗脫程序為O — 15min，A為3%，B為97% ; 15 — 16min，A從3%上升到15%，B從97%下降到85% ；16 — 45min, A從15%上升到50%，B從85%降到50% ；45 — 46min, A 從 50%上升到 80%，B 從 50%下降到 20% ；46 — 55min, A 為 80%，B為 20% ;柱溫 300C ;流速 1.0mL.mirT1 ;檢測波長 273nm、250nm、430nm。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0045]圖1提取溶劑考察圖譜，依次為30%乙醇、50%乙醇、30%甲醇、50%甲醇和70%甲醇。
[0046]圖2流動相考察圖譜，依次為甲醇-4%乙酸、乙腈-4%乙酸、乙腈-0.2%磷酸、甲醇-0.2%磷酸。
[0047]圖3樣品含量測定圖譜。
[0048]對本發(fā)明組合物藥效學(xué)的研究與說明:
[0049]發(fā)明人對本發(fā)明提供的技術(shù)方案進行了實驗研究，用來證明本發(fā)明的技術(shù)效果，下述實驗用于進一步說明本發(fā)明的技術(shù)效果，但不限制本發(fā)明。
[0050]實驗例1:本發(fā)明組合物抗酒精性肝損傷的作用研究
[0051]1.實驗材料
[0052]1.1 動物
[0053]ICR小鼠，清潔級，18?22g，雄性，購自揚州大學(xué)比較醫(yī)學(xué)中心，合格證號:SCXK (蘇)27 ?0001。
[0054]1.2藥物與試劑
[0055]無水乙醇:南京化學(xué)試劑有限公司，批號:09071610663 ；
[0056]冰醋酸:南京化學(xué)試劑有限公司，批號:081010779 ；
[0057]丙二醛(MDA)測定試劑盒、谷胱甘肽(GSH)測定試劑盒、甘油三酯測定試劑盒、考馬斯亮藍蛋白測定試劑盒:南京建成生物工程研究所。
[0058]1.3 儀器
[0059]電子天平，賽多利斯科學(xué)儀器(北京)有限公司。
[0060]紫外分光光度計UV?2550，日本島津公司。
[0061]電子恒溫水浴鍋DK?S26，型，上海精宏實驗設(shè)備有限公司；
[0062]CENTRIFUGE5804R 冷凍離心機，Eppendorf 公司。
[0063]2.實驗方法
[0064]2.1分組與劑量設(shè)置
[0065]空白組:給予蒸餾水，0.2mL/20g體重灌胃；
[0066]模型組:給予蒸餾水，0.2mL/20g體重灌胃；
[0067]低含量組:權(quán)利要求2所述組合物，以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液,0.2mL/20g體重灌胃；
[0068]中含量組:權(quán)利要求4所述組合物，以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液,0.2mL/20g體重灌胃；
[0069]高含量組:權(quán)利要求3所述組合物，以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液,0.2mL/20g體重灌胃；[0070]Al組:缺葛根，白芍3重量份、五味子2重量份、余甘子4重量份、枳犋子6重量份、姜黃提取物0.25重量份、番茄紅素0.20重量份；以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液,0.2mL/20g體重灌胃；
[0071]A2組:缺白芍，葛根6重量份、白芍3重量份、五味子2重量份、余甘子4重量份、枳犋子6重量份、姜黃提取物0.25重量份、番茄紅素0.20重量份；以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液，
0.2mL/20g體重灌胃；
[0072]A3組:缺五味子，葛根6重量份、白芍3重量份、余甘子4重量份、枳犋子6重量份、姜黃提取物0.25重量份、番茄紅素0.20重量份；以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液,0.2mL/20g體重灌胃；
[0073]A4組:缺余甘子，葛根6重量份、白芍3重量份、五味子2重量份、枳犋子6重量份、姜黃提取物0.25重量份、番茄紅素0.20重量份；以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液,0.2mL/20g體重灌胃；
[0074]A5組:缺枳犋子，葛根6重量份、白芍3重量份、五味子2重量份、余甘子4重量份、姜黃提取物0.25重量份、番茄紅素0.20重量份；以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液,0.2mL/20g體重灌胃；
[0075]A6組:缺姜黃提取物，葛根6重量份、白芍3重量份、五味子2重量份、余甘子4重量份、枳犋子6重量份、番茄紅素0.20重量份；以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液,0.2mL/20g體重灌胃；
[0076]A7組:缺番茄紅素，葛根6重量份、白芍3重量份、五味子2重量份、余甘子4重量份、枳犋子6重量份、姜黃提取物0.25重量份；以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液,0.2mL/20g體重灌胃；
[0077]AS組:缺葛根、枳犋子，白芍3重量份、五味子2重量份、余甘子4重量份、姜黃提取物0.25重量份、番茄紅素0.20重量份；以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液,0.2mL/20g體重灌胃；
[0078]A9組:缺葛根、枳犋子、五味子，白芍3重量份、余甘子4重量份、姜黃提取物0.25重量份、番茄紅素0.20重量份；以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準，蒸餾水配成溶液，0.2mL/20g體重灌胃；
[0079]AlO組:缺枳犋子、五味子，葛根6重量份、白芍3重量份、余甘子4重量份、姜黃提取物0.25重量份、番茄紅素0.20重量份；以上成分按照優(yōu)選的制備方法制成制劑，按照小鼠每Ikg體重給予本組制劑0.638g的標準,蒸懼水配成溶液，0.2mL/20g體重灌胃。
[0080]2.2模型制作與給藥
[0081]150只ICR小鼠隨機分為15組，每組10只。每日經(jīng)口灌胃給予各實驗組組合物，空白組、模型組給予蒸餾水。30天后，將模型組及各實驗組一次灌胃50%乙醇12mL/kg體重(折合乙醇的劑量為6g/kg體重)，空白組給蒸餾水，禁食16小時處死動物，取肝臟進行肝組織中丙二醛(MDA)、還原型谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)的測定。
[0082]2.3檢測指標
[0083]肝臟組織中丙二醛(MDA)、還原性谷胱甘肽(GSH)、甘油三酯(TG)含量、肝臟病理檢測。[0084]3.實驗結(jié)果
[0085]3.1動物一般表現(xiàn)
[0086]造模前，各組小鼠可正常飲食，體重逐期增長。酒精造模后，空白對照組小鼠動作自如，反應(yīng)靈敏，毛發(fā)光澤；模型對照組、實驗組小鼠步態(tài)不穩(wěn)，活動減少。
[0087]3.2實驗結(jié)果
[0088]空白組、模型組及各實驗組的實驗結(jié)果見表1。
[0089]表1:肝勻漿中MDA、GSH、TG含量、肝臟病理檢測的結(jié)果
[0090]
【權(quán)利要求】
1.一種具有緩解肝損傷作用的組合物，其特征在于，該組合物是由包含以下重量份的成分組成: 葛根4~6重量份白茍I~3重量份五味子0.5~2重量份 余甘子2~4重量份積犋子3~6重量份 姜黃提取物0.10~0.25重量份番茄紅素0.05~0.20重量份。
2.如權(quán)利要求1所述組合物，其特征在于，該組合物是由包含以下重量份的成分組成: 葛根4重量份白芍I重量份五味子0.50重量份余甘子2重量份 枳犋子3重量份姜黃提取物0.10重量份番茄紅素0.05重量份。
3.如權(quán)利要求1所述組合物，其特征在于，該組合物是由包含以下重量份的成分組成: 葛根6重量份白芍3重量份五味子2重量份余甘子4重量份 枳犋子6重量份姜黃提取物0.25重量份番茄紅素0.20重量份。
4.如權(quán)利要求1所述組合物，其特征在于，該組合物是由包含以下重量份的成分組成: 葛根5重量份白芍2重量份五味子I重量份余甘子3重量份 枳犋子4.5重量份姜黃提取物0.15重量份番茄紅素0.10重量份。
5.如權(quán)利要求1~4所述的任一具有緩解肝損傷作用的組合物，其特征在于，該組合物中還可以加入常用輔料，包括但不限于微晶纖維素、硬脂酸鎂、交聯(lián)羧甲基纖維素鈉、甲基硅油、乳糖、蔗糖、 甘露醇或山梨醇、玉米淀粉、小麥淀粉、稻米淀粉、馬鈴薯淀粉、明膠、黃芪膠、聚乙烯吡咯烷酮或磷酸鈣。
6.一種如權(quán)利要求1所述組合物的制備方法，其特征在于，該制備方法包括以下步驟: (1)葛根、白芍、五味子加6~10倍量50%~80%乙醇，提取2~4次，每次I~3小時，提取液濃縮至1.00~1.30，減壓干燥，粉碎，得到干粉A ; (2)余甘子、枳犋子加6~10倍量水，提取2~4次，每次I~3小時，提取液濃縮至1.00~1.30，減壓干燥，粉碎，得到干粉B ； (3)干粉A、干粉B混合，加入姜黃提取物及番茄紅素，混勻，加入輔料，得所需制劑。
7.如權(quán)利要求5所述制備方法，其特征在于，該制備方法包括以下步驟: (1)葛根、白芍、五味子加8倍量60%乙醇，提取3次，每次2h，提取液濃縮至1.20，減壓干燥，粉碎，得到干粉A ; (2)余甘子、枳犋子加8倍量水，提取3次，每次1.5h，提取液濃縮至1.20，減壓干燥，粉碎，得到干粉B; (3)干粉A、干粉B混合，加入姜黃提取物及番茄紅素，混勻，加入輔料，得所需制劑。
8.—種如權(quán)利要求1所述組合物的含量測定方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟: (1)供試品溶液制備； (2)取沒食子酸、葛根素、姜黃素對照品溶于甲醇，制備混合對照品溶液； (3)利用高效液相色譜法在三波長條件下，同時測定供試品溶液中沒食子酸、葛根素和姜黃素的含量； 色譜條件為=HPLC色譜柱為C18，以甲醇或乙腈為流動相A，以0.2%磷酸或4%乙酸為流動相B，梯度洗脫程序為O — 15min，AS2~5%，BS98~95%;15— 16min, A從2~5%上升到12~17%，B從98~95%下降到88~83% ；16 — 45min，A從12~17%上升到40~60 %，B從88~83 %降到60~40 % ；45 — 46min, A從40~60 %上升到75~85%, B 從 60 ~40%下降到 25 ~15% ；46 — 55min, A 為 75 ~85%，B 為 25 ~15% ;柱溫 20 ~400C ;流速 0.8 ~1.2mL.mirT1 ;檢測波長 273nm、250nm、430nm ； (4)根據(jù)高效液相色譜分析結(jié)果計算供試品中沒食子酸、葛根素和姜黃素的含量。
9.如權(quán)利要求8所述含量測定方法，其特征在于，所述供試品溶液是將權(quán)利要求1~5所述組合物及輔料依照權(quán)利要求6所述制備方法制成制劑，取0.1g制劑研細后于50mL容量瓶中加入甲醇或乙醇至刻度，超聲提取30min，用甲醇或乙醇定容，過濾，取續(xù)濾液，即得。
10.如權(quán)利要求8所述含量測定方法，其特征在于，所述混合對照品溶液的制備方法是:取沒食子酸、葛根素和姜黃素對照品適量于50mL容量瓶中，加入25mL甲醇，待姜黃素完全溶解后，用 水定容至刻度，搖勻，制得含沒食子酸30 μ g/mL、葛根素40 μ g/mL、姜黃素IO μ g/mL的混合對照品溶液。
11.如權(quán)利要求8所述含量測定方法，其特征在于，優(yōu)選的色譜條件為:HPLC色譜柱為Waters C18，以甲醇流動相A，以0.2%磷酸為流動相B，梯度洗脫程序為O — 15min, A為3%，B 為 97% ;15— 16min，A 從 3%上升到 15%，B 從 97%下降到 85% ;16 —45min，A 從15%上升到50%，B從85%降到50% ；45 — 46min, A從50%上升到80%，B從50%下降到 20% ；46 — 55min，A 為 80%，B 為 20% ;柱溫 30°C ;流速 1.0mL ?mirT1 ;檢測波長 273nm、250nm、430nmo
12.如權(quán)利要求1~5所述任一組合物，其特征在于，該組合物可以是片劑、丸劑、膠囊劑、口服液、顆粒劑。
13.如權(quán)利要求1~5所述任一組合物，其特征在于，該組合物在制備抗化學(xué)性肝損傷及抗酒精性肝損傷的 保健品中的應(yīng)用。
【文檔編號】A23L1/29GK103948028SQ201410169732
【公開日】2014年7月30日 申請日期:2014年4月20日 優(yōu)先權(quán)日:2014年4月20日
【發(fā)明者】蕭偉, 王振中, 王躍生, 徐振秋, 王婧, 陸艷芹, 呂耀中, 孫文凱, 范業(yè)文, 曹苗苗, 李曼曼, 劉世娟, 周恩麗, 章晨峰, 于丹 申請人:江蘇康緣藥業(yè)股份有限公司