專利名稱：一種香椿葉黃酮類物質(zhì)的分離方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及有機物提取工藝，尤其是涉及一種香椿葉黃酮類物質(zhì)的分離方法。
技術(shù)背景
香椿又名春芽樹、椿、椿樹，在《植物名實圖考》中稱為紅椿，屬楝科(Meliaceae) 香椿屬落葉喬木，是我國特有珍貴速生材、菜、藥多用途樹種，落葉喬木，樹冠龐大，葉繁茂， 樹干通直，生長迅速。香椿具有很高的藥用價值，《本草綱目》中指出，香椿的葉、芽、根、皮和果實均可入藥?，F(xiàn)代醫(yī)學實驗研究表明香椿葉提取物體內(nèi)有調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝、緩解高血糖癥、 增進精子活力、延緩肝纖維化、誘導癌細胞凋亡和抑制肉瘤生長等作用。此外香椿葉提取物還有體外抗氧化、抗菌和對害蟲的毒殺、拒食或驅(qū)避活性等作用。香椿葉主要有效成分之一為黃酮類化合物，主要以苷的形式存在，已發(fā)現(xiàn)的黃酮類化合物主要有槲皮素-3-0-葡萄糖苷、槲皮素-3-0-鼠李糖苷、槲皮素-3-0-葡萄糖苷(6-1)鼠李糖、山萘酚-3-0-葡萄糖苷、山萘酚-3-0-阿拉伯糖、6，7，8，2'-四甲氧基-5，6' - 二羥基黃酮、5，7-二羥基-8-甲氧基黃酮等，所含黃酮醇苷的苷元主要是槲皮素、山萘酚，與銀杏葉所含黃酮苷元大致相同，而且同季節(jié)香椿葉中總黃酮苷元含量比銀杏葉中的含量高出2-3倍。
黃酮類化合物具有廣泛的生物活性，如保肝、抗炎、抗菌、抗病毒、抗腫瘤、抗氧化作用以及對心血管的作用和雌激素樣作用。植物中黃酮類化合物現(xiàn)有的提取富集分離方法主要有有機溶劑萃取、大孔樹脂吸附等方法，也有用雙水相和超濾方法的報道。發(fā)明內(nèi)容
為了加速開發(fā)香椿葉資源，本發(fā)明旨在提供一種質(zhì)量穩(wěn)定可靠，提取方法簡便的香椿葉黃酮類物質(zhì)的工藝。
實現(xiàn)上述目的的技術(shù)方案如下
從香椿葉提取香椿葉黃酮類物質(zhì)的工藝，工藝步驟如下
(1)將香椿葉曬干，粉碎；
(2)干粉用50-95%的乙醇回流進行初提，料液比為6_10倍，在50_85°C回流1_2 小時，再進行減壓蒸餾，壓力為0. 08Mpa，溫度為40-50°C，回收溶劑，得到乙醇浸膏；
(3)乙醇浸膏用1 % -5%的NaOH溶液水解純化，1 % _5 %的NaOH溶液用量為乙醇浸膏體的4-6倍，充分溶解后過濾，除去沉淀；
(4)在室溫下用石油醚萃取脫色，除去石油醚層；
(5)用乙酸乙酯進行萃取，乙酸乙酯用量為1 1.5-1 2，萃取5-6次，收集乙酸乙酯層；
(6)加入HCl 3-10%溶液，熱回流進行酸解，熱回流溫度為60-80°C，回流1-2小時；
(7)水層中加入乙酸乙酯提取酸解后水相中的異黃酮類物質(zhì)，乙酸乙酯用量為 1 1.5-1 2，提取5-6次，收集乙酸乙酯提取層；
(8)合并乙酸乙酯提取層，進行減壓蒸餾，0. 08Mpa，40-50°C，得到香椿葉黃酮類物質(zhì)粗品。
在上述提取工藝中各參數(shù)的優(yōu)選值為熱回流初提用的乙醇濃度為75%。用于水解純化的氫氧化鈉水溶液濃度為2%。酸解時鹽酸溶液濃度為3%。初提時乙醇用量料液比為10倍，回流溫度為70°C，回流時間1小時。HCl酸解時反應溫度為60°C，反應時間為1 小時。
對香椿葉黃酮類物質(zhì)粗品進行HPLC檢測，以十八烷基硅烷鍵合硅膠柱作為色譜柱，分別取適當濃度的磷酸水溶液及乙腈溶液作為流動相，經(jīng)檢測，已劃歸香椿葉黃酮同宗的含量可達20%以上。
本發(fā)明具有以下有益效果工藝簡單，提取效率高；采用通用設(shè)備，設(shè)資少，工程啟動快；成本低、易于推廣。
具體實施方式
現(xiàn)通過以下實施例對本發(fā)明的技術(shù)方案作進一步說明。
實施例1
(1)將香椿葉曬干，粉碎；
(2)干粉用75%的乙醇回流進行初提，料液比為10倍，在70°C回流1小時，再進行減壓蒸餾，壓力為0. 08Mpa，溫度為45°C，回收溶劑，得到乙醇浸膏；
(3)乙醇浸膏用NaOH 3%溶液水解純化，NaOH溶液用量為乙醇浸膏體積的5倍， 充分溶解后過濾，除去沉淀；
(4)在室溫下用石油醚萃取脫色，除去石油醚層；
(5)用乙酸乙酯進行萃取，乙酸乙酯用量為1 1.5，萃取5次，收集乙酸乙酯層；
(6)加入3%鹽酸溶液，熱回流進行酸解，熱回流溫度為70°C，回流1小時；
(7)水層中加入乙酸乙酯提取酸解后水相中的異黃酮類物質(zhì)，乙酸乙酯用量為 1 1.5，提取5次，收集乙酸乙酯提取層；
(8)合并乙酸乙酯提取層，進行減壓蒸餾，0.08Mpa，45°C，得到香椿葉黃酮類物質(zhì)粗品。
實施例2
(1)將香椿葉曬干，粉碎；
(2)干粉用95%的乙醇回流進行初提，料液比為8倍，在85°C回流2小時，再進行減壓蒸餾，壓力為0. 08Mpa，溫度為50°C，回收溶劑，得到乙醇浸膏；
(3)乙醇浸膏用NaOH 溶液水解純化，NaOH溶液用量為乙醇浸膏體積的6倍， 充分溶解后過濾，除去沉淀；
(4)在室溫下用石油醚萃取脫色，除去石油醚層；
(5)用乙酸乙酯進行萃取，乙酸乙酯用量為1 2，萃取6次，收集乙酸乙酯層；
(6)加入10%鹽酸溶液，熱回流進行酸解，熱回流溫度為80°C，回流2小時；
(7)水層中加入乙酸乙酯提取酸解后水相中的異黃酮類物質(zhì)，乙酸乙酯用量為 1 2，提取6次，收集乙酸乙酯提取層；
(8)合并乙酸乙酯提取層，進行減壓蒸餾，0.08Mpa，5(TC，得到香椿葉黃酮類物質(zhì)粗品。
實施例3
(1)將香椿葉曬干，粉碎；
(2)干粉用50%的乙醇回流進行初提，料液比為6倍，在50°C回流1. 5小時，再進行減壓蒸餾，壓力為0. 08Mpa，溫度為40°C，回收溶劑，得到乙醇浸膏；
(3)乙醇浸膏用NaOH 5%溶液水解純化，NaOH溶液用量為乙醇浸膏體積的4倍， 充分溶解后過濾，除去沉淀；
(4)在室溫下用石油醚萃取脫色，除去石油醚層；
(5)用乙酸乙酯進行萃取，乙酸乙酯用量為1 2，萃取6次，收集乙酸乙酯層；
(6)加入5%鹽酸溶液，熱回流進行酸解，熱回流溫度為60°C，回流1小時；
(7)水層中加入乙酸乙酯提取酸解后水相中的異黃酮類物質(zhì)，乙酸乙酯用量為 1 2，提取6次，收集乙酸乙酯提取層；
(8)合并乙酸乙酯提取層，進行減壓蒸餾，0.08Mpa，4(TC，得到香椿葉黃酮類物質(zhì)粗品。權(quán)利要求
1.一種香椿葉黃酮類物質(zhì)的分離方法，其特征為包括以下步驟(1)將香椿葉曬干，粉碎；(2)干粉用50%-95%的乙醇回流進行初提，料液比為6-10倍，在50-85°C回流1_2小時，再進行減壓蒸餾，壓力為0. 08Mpa，溫度為40-50°C，回收溶劑，得到乙醇浸膏；(3)乙醇浸膏用1% -5%的NaOH溶液水解純化，1 % _5%的NaOH溶液用量為乙醇浸膏體的4-6倍，充分溶解后過濾，除去沉淀；(4)在室溫下用石油醚萃取脫色，除去石油醚層；(5)用乙酸乙酯進行萃取，乙酸乙酯用量為1 1.5-1 2，萃取5-6次，收集乙酸乙酯層；(6)加入3%-10%的鹽酸溶液，熱回流進行酸解，熱回流溫度為60-80°C，回流1-2小時；(7)水層中加入乙酸乙酯提取酸解后水相中的黃酮類物質(zhì)，乙酸乙酯用量為 1 1.5-1 2，提取5-6次，收集乙酸乙酯提取層；(8)合并乙酸乙酯提取層，進行減壓蒸餾，0.08Mpa，40-50°C，得到香椿葉黃酮類物質(zhì)粗PΡΠ O
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的香椿葉黃酮類物質(zhì)的分離方法，其特征為熱回流初提用的乙醇濃度為75%。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的香椿葉黃酮類物質(zhì)的分離方法，其特征為用于水解純化的氫氧化鈉水溶液濃度為2%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的香椿葉黃酮類物質(zhì)的分離方法，其特征為酸解時鹽酸溶液濃度為3%。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的香椿葉黃酮類物質(zhì)的分離方法，其特征為初提時乙醇用量料液比為10倍，回流溫度為70°C，回流時間1小時。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的香椿葉黃酮類物質(zhì)的分離方法，其特征為鹽酸酸解時反應溫度為60°C，反應時間為1小時。
全文摘要
本發(fā)明涉及有機物提取工藝，尤其是涉及一種香椿葉黃酮類物質(zhì)的分離方法，包括用乙醇溶液熱回流進行初提，得乙醇浸膏，再用氫氧化鈉溶液進行水解進行純化，再用鹽酸溶液進行水層處理，經(jīng)乙酸乙酯萃取，減壓蒸餾得到香椿葉黃酮類物質(zhì)的粗產(chǎn)品，本發(fā)明具有提取效率高、設(shè)備投資少、工程啟動快、成本低、易于推廣的有益效果。
文檔編號A61P9/00GK102512503SQ20111037172
公開日2012年6月27日 申請日期2011年11月15日 優(yōu)先權(quán)日2011年11月15日
發(fā)明者畢云英 申請人:威海天泓農(nóng)業(yè)科技有限公司