專利名稱：乙醇-微波浸泡浸提法提取百香果葉黃酮類化合物的方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種植物體內(nèi)活性物質(zhì)的提取方法，具體涉及一種采用乙醇-微波浸泡浸提法提取百香果葉黃酮類化合物的方法。
背景技術：
百香果，學名西番蓮，為西番蓮科西番蓮屬，多年生常綠攀緣性藤本植物，是一種熱帶、亞熱帶水果。它的葉形奇特，花色艷麗，四季常青。果實形狀如雞蛋，果汁黃色如蛋黃， 故又名雞蛋果。果實成熟后香氣芬芳，其果汁可散發(fā)出石榴、菠蘿、香蕉、草莓、檸檬、芒果等十多種水果的濃郁香味。據(jù)分析含有ι 6 5種香氣成分，享有“果汁之王”和“飲料味精”的美譽。近年研究表明，百香果不僅富含各種營養(yǎng)素，有很高的實用價值，而且還含有多種對人體健康有益的功能性物質(zhì)，如黃酮類化合物、多糖、生物堿等，這類活性物質(zhì)、具有抗氧化、降血糖、降血壓、抗菌、抗動脈硬化、抗腫瘤等功能。根、莖、葉均可入藥，有消炎、止痛、活血強身、滋陰補腎、降脂降壓等療效。由此可見，百香果具有很高的營養(yǎng)價值和保健功能。我國從1979年引種西番蓮雜交種，1984年在福建省栽培成功。近年來，西番蓮的價值得到人們的廣泛認可。隨著百香果種植面積的不斷擴大產(chǎn)量逐年增加，加之國際市場對百香果果汁的需求不斷增加，開展百香果加工技術研究及產(chǎn)品開發(fā)，不僅十分必要而且具有重要意義。研究表明，百香果葉富含多種生物活性成分，如黃酮類化合物、植物固醇、多糖、揮發(fā)油等，這類活性物質(zhì)具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗衰老、降血糖等功能，是制作功能食品和藥品的重要原料。因此選擇一種經(jīng)濟、快速、提取率高、有效成分損失少的提取工藝，是本發(fā)明的關鍵技術之一。目前從植物中提取有效成分的方法大致有熱水提取法、溶劑提取法，超臨界流體萃取法、大孔樹脂交換法等。水提取法，工藝簡單、設備投資省、但提取率低、分離困難；CO2 超臨界萃取法，提取率高、有效成分損失少、但設備投資大、成本高。劉南波等人(2009)以總黃酮得率為考察指標，采用乙醇浸提法，在單因素的使用基礎上通過正交試驗對西番蓮葉中的黃酮的提取工藝進行優(yōu)化，結果表明最佳工藝為溫度80°C、乙醇濃度60%、料液比 1 50、提取時間60min，總黃酮得率可達2. 81%。該工藝雖有較好的效果，但料液比大，不利于工業(yè)化生產(chǎn)，同時溫度高，生產(chǎn)能耗大，影響經(jīng)濟效益。趙瑞瑞等人(2010)研究微波萃取法提取紫果西番蓮黃酮類物質(zhì)。采用正交試驗，以黃酮得率為評價指標，優(yōu)選提取工藝條件為乙醇濃度60%、料液比1:30、提取時間9min、微波功率為350W，黃酮得率達3. 46%。由于該方法采用了 9min提取時間，一方面微波作用時間超過7min后，實際生產(chǎn)中極易引起爆沸，同時，采用有機溶劑的濃度低、用量大，浸提時間短；浸提與微波作用同步進行，沒有浸泡的過程，沒有徹底浸出黃酮素，難以達到最佳效果。本項目采用以乙醇浸泡浸提，微波中途輔助提取法，達到提取得率高、節(jié)能的效果，更適于工業(yè)化生產(chǎn)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明以百香果葉為原料，提取的富含黃酮物質(zhì)，提升了百香果的深加工水平，變廢為寶，增加經(jīng)濟效益。為實現(xiàn)本發(fā)明的目的采用的技術方案是
1、粉碎取百香果干葉，去除雜質(zhì)，用粉碎機進行粉碎成40目的粉末料。2、浸提將粉末料浸泡于乙醇中，料液重量體積比為1公斤1 1. 5升，乙醇濃度 80 90%，提取溫度60 70°C，總浸提時間1 1. 5小時，其中在浸泡0. 5小時后，輔以微波作用3 5分鐘，浸提結束后離心去除濾渣得濾液；微波的功率480 W。3、濃縮將濾液用過濾膜進行過濾，濾液先行回收乙醇，再進行真空濃縮，得到濃縮液。4、測定采用氯化鋁比色法測定濃縮液中黃酮類化合物總量，經(jīng)測定，總黃酮在 6% 9%之間。由于本發(fā)明采用了浸提之前增加0. 5小時的浸泡時間，使得微波作用效果更為明顯，黃酮類化合物的總量得率大大提高。同時，由于提高乙醇的濃度，使得料液比降至最低， 實現(xiàn)節(jié)能降耗的目的。
具體實施例方式百香果葉福建匯農(nóng)食品開發(fā)有限責任公司提供。三氯化鋁、酒精均為分析純、95%食用酒精、F2102型植物粉碎機，Pc -1000數(shù)顯電熱恒溫水浴鍋，101電熱恒溫干燥箱、WD800B格蘭仕微波爐、721見分光光度計，自制回收乙醇回流設備、真空抽濾設備和中試設備由福建匯農(nóng)食品開發(fā)有限責任公司提供。實施例1
1、粉碎取百香果干葉，去除雜質(zhì)，用粉碎機進行粉碎成40目的粉末料。2、浸提稱取10公斤40目的粉末料，浸泡于10升濃度為90%的乙醇中，攪勻，升溫至70°C，浸泡半小時。浸泡0.5小時后，輔以480 W微波作用5分鐘，繼續(xù)浸提1小時，結束后離心去除濾渣得濾液。3、將濾液用過濾膜進行過濾，濾液先行回收乙醇，再進行真空濃縮，得到濃縮液。4、黃酮類化合物包括黃酮甙和黃酮醇甙兩大部分，三氯化鋁與黃酮類化合物作用后，生成黃酮的鋁絡合物，為黃色。黃色的深淺與黃酮含量呈比例關系，可做黃酮類化合物總量定量測定。測量步驟
1. 00 g茶葉磨碎干樣，加沸蒸流水40ml，置沸水浴中提取30min，過濾，濾液加蒸餾水定容至50ml，搖勻為供試液。吸取供試液0. 5ml，加A1C13蒸餾水溶液至10ml，搖勻， IOmin后比色。用721型分光光度計，以Icm比色杯420nm波長，1 % A1C13溶液為空白，測
定吸光度。根據(jù)消光值等于1.00時，相當于320 μ g黃酮甙計算含量。黃酮甙(m g / g )=(樣品吸光度X 320 X樣品總溶液量)+ 1000 采用上述方法，經(jīng)測定，本實施例濃縮液中總黃酮為6. 98%。實施例21、粉碎取百香果干葉，去除雜質(zhì)，用粉碎機進行粉碎成40目的粉末料。2、浸提稱取10公斤40目的粉末料，浸泡于15升濃度為80%的乙醇中，攪勻，升溫至60°C，浸泡0.5小時。浸泡0.5小時后，輔以480 W微波作用3分鐘，繼續(xù)浸提40分
鐘，結束后離心去除濾渣得濾液。3、將濾液用過濾膜進行過濾，濾液先行回收乙醇，再進行真空濃縮，得到濃縮液。4、采用氯化鋁比色法測定濃縮液中黃酮類化合物總量，經(jīng)測定，總黃酮為7. 05%。實施例3
1、粉碎取百香果干葉，去除雜質(zhì)，用粉碎機進行粉碎成40目的粉末料。2、浸提稱取10公斤40目的粉末料，浸泡于12升濃度為85%的乙醇中，攪勻，升溫至65 °C，浸泡0. 5小時。0. 5小時后，輔以480 W微波作用4分鐘，繼續(xù)浸提1小時，結束后離心去除濾渣得濾液。3、將濾液用過濾膜進行過濾，濾液先行回收乙醇，再進行真空濃縮，得到濃度擬％ 的濃縮液。4、采用氯化鋁比色法測定濃縮液中黃酮類化合物總量，經(jīng)測定，總黃酮為7. 05%。
權利要求
1.一種乙醇-微波浸泡浸提法提取百香果葉黃酮類化合物的方法，其特征是1)粉碎取百香果干葉，去除雜質(zhì)，用粉碎機進行粉碎成40目的粉末料；2)浸提將粉末料浸泡于乙醇中，升溫浸泡0. 5小時后，輔以微波作用3 5分鐘，浸提結束后離心去除濾渣得濾液；3)濃縮將濾液用過濾膜進行過濾，濾液先行回收乙醇，再進行真空濃縮，得到濃縮液。
2.根據(jù)權利要求1所述的乙醇-微波浸泡浸提法提取百香果葉黃酮類化合物的方法， 其特征是所述的粉末料浸泡于乙醇中時，料液重量體積比為1公斤1 1. 5升。
3.根據(jù)權利要求1所述的乙醇-微波浸泡浸提法提取百香果葉黃酮類化合物的方法， 其特征是所述的乙醇濃度為80 90%。
4.根據(jù)權利要求1所述的乙醇-微波浸泡浸提法提取百香果葉黃酮類化合物的方法， 其特征是所述的微波作用時間為3 5分鐘，微波功率為480 W。
5.根據(jù)權利要求1所述的乙醇-微波浸泡浸提法提取百香果葉黃酮類化合物的方法， 其特征是所述的升溫浸泡時溫度為60 70°C，總浸提時間1 1. 5小時。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種植物體內(nèi)活性物質(zhì)的提取方法，具體涉及一種采用乙醇-微波浸泡浸提法提取百香果葉黃酮類化合物的方法。為實現(xiàn)本發(fā)明的目的采用的技術方案是取百香果干葉，去除雜質(zhì)后粉碎成粉末。將粉末浸泡于乙醇中，輔以微波作用，浸提時間1～1.5小時，浸提結束后離心去除濾渣得濾液。將濾液用過濾膜進行過濾，回收乙醇，真空濃縮得到濃度50—90%的濃縮液。采用氯化鋁比色法測定濃縮液中黃酮類化合物總量，經(jīng)測定，總黃酮在6%～9%之間。由于本發(fā)明采用了浸提之前增加0.5小時的浸泡時間，使得微波作用效果更為明顯，黃酮類化合物的總量得率大大提高。同時，由于提高乙醇的濃度，使得料液比降至最低，實現(xiàn)節(jié)能降耗的目的。
文檔編號A61P3/10GK102225080SQ201110163698
公開日2011年10月26日 申請日期2011年6月17日 優(yōu)先權日2011年6月17日
發(fā)明者葉冰瑩, 張文森, 陳炳炎, 陳由強, 黃儒珠 申請人:福建師范大學