專利名稱：蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于蜂產(chǎn)品加工工藝技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體及其制 備方法。
背景技術(shù)：
蜂膠是蜜蜂從植物幼芽或樹(shù)干破傷部位采集的樹(shù)脂，并混入其上顎腺分泌物和 蜂蠟等加工而成的一種具有芳香味的膠狀固形物。蜂膠具有抗菌防腐、抗病毒、抗氧化、活 血化淤、軟化血管、降血脂、抗腫瘤、增強(qiáng)人體免疫力、促進(jìn)組織再生等作用；
蜂膠的成分相當(dāng)復(fù)雜，其中的黃酮化合物是主要的活性物質(zhì)。蜂膠有“黃酮化合物寶 庫(kù)”之美譽(yù)，現(xiàn)已從蜂膠中分離鑒定的黃酮化合物包括白楊素、芹菜素、金合歡素、槲皮素、 高良姜素、蘆丁、山萘酚、山萘甲黃素、鼠李素、松鼠素等70多種，其中5，7- 二羥基-3，4- 二 甲基黃酮和5-羥基-4，7- 二甲氧基雙氫黃酮是蜂膠的特有成分。不同產(chǎn)地的蜂膠由于地 理環(huán)境和氣候及采集的季節(jié)不同，其活性成分的含量也會(huì)有很大差異。蜂膠的功能活性與 其中有效成分化合物的含量，特別是黃酮含量密切相關(guān)。因此，黃酮類物質(zhì)含量是蜂膠最主 要的質(zhì)量指標(biāo)；
蜂膠及其蜂膠黃酮具有很強(qiáng)的生理活性，但其難溶于水，且光、熱、氧氣、金屬離子和體 系PH值很容易影響到黃酮的穩(wěn)定性。蜂膠生理活性與黃酮含量的量效關(guān)系以及蜂膠、蜂膠 黃酮的不穩(wěn)定性，決定了研究者們的工作主要從提取分離工藝、活性成分的保護(hù)以及蜂膠 新劑型研究等方面展開(kāi)，以期確定最佳的提取和保護(hù)方法，使其免受各種不利因素的影響， 從而最大限度地保護(hù)其生理功效成分，延長(zhǎng)貨架期；
迄今為止，國(guó)內(nèi)外未見(jiàn)有關(guān)于蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體制備的報(bào)道。脂質(zhì)體制劑是以磷脂 等兩性物質(zhì)為基礎(chǔ)的制劑，是將待包封的活性物質(zhì)包封于類脂質(zhì)雙分子層的薄膜中間或者 是包封于類脂質(zhì)雙分子層的內(nèi)水相中得到的。由于活性物質(zhì)被包封在脂質(zhì)體中，具有長(zhǎng)效、 靶向等優(yōu)點(diǎn)，脂質(zhì)體制劑在新產(chǎn)品開(kāi)發(fā)方面表現(xiàn)出極大的開(kāi)發(fā)潛力。許多研究機(jī)構(gòu)和制藥 公司都致力于脂質(zhì)體制劑產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，其中一個(gè)重要的應(yīng)用是保護(hù)所包封的活性物質(zhì)不受 外界環(huán)境的破壞。將不同凍干保護(hù)劑加入到制得的脂質(zhì)體分散液中，冷凍干燥，得到蜂膠黃 酮前體脂質(zhì)體，可增加脂質(zhì)體的物理化學(xué)穩(wěn)定性，減小產(chǎn)品的體積，便于貯存和運(yùn)輸，同時(shí) 方便食品加工及應(yīng)用，擴(kuò)展其應(yīng)用領(lǐng)域。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的為了增強(qiáng)蜂膠黃酮在胃液強(qiáng)酸體系中的穩(wěn)定性，達(dá)到提高生物利用 率和更好的保健效果，以及更方便地貯存、運(yùn)輸，和在更廣泛的食品體系中應(yīng)用，提供一種 蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體及其制備方法。為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案為該種蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體，其特征 在于以蜂膠黃酮為芯材，壁材由卵磷脂、膽固醇和吐溫80組成，制成的蜂膠黃酮前體脂質(zhì) 體為粉狀；所述的一種蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體，其特征在于卵磷脂與膽固醇重量比為大于等于4 ； 吐溫80與卵磷脂重量比為大于等于1. 2 ；
所述的一種蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體，其特征在于芯材蜂膠黃酮含量為卵磷脂含量的 2. 5重量％或以上；
所述的一種蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于包括以下步驟
(1)配制蜂膠黃酮水溶液將蜂膠黃酮去離子水中，控制蜂膠黃酮的濃度小于等于 12mg/mL，得水相；
(2)配制脂質(zhì)無(wú)水乙醚溶液將卵磷脂、膽固醇按質(zhì)量比10:1-10:2溶于無(wú)水乙醚，控 制卵磷脂在其乙醚溶液中的濃度小于等于25 mg/mL，得有機(jī)相；
(3)乳狀液形成將蜂膠黃酮水溶液和脂質(zhì)無(wú)水乙醚溶液混合，再于冰水浴中超聲至混 合物變?yōu)閱蜗喾稚Ⅲw系，即形成了油包水型乳狀液；
(4)脂質(zhì)體生成將形成的油包水型乳狀液轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)燒瓶中，30°C-40°C水浴 中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去無(wú)水乙醚，去除無(wú)水乙醚時(shí)有凝膠生成，進(jìn)一步旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，凝膠塌陷，形 成混懸液后，加入含吐溫80的水溶液，使溶液中含有的吐溫80與卵磷脂的質(zhì)量比為1:4 -1. 25:1，將該體系在30°C -40°C水浴下旋轉(zhuǎn)水合15-30分鐘；即得蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分 散液；
(5)凍干保護(hù)劑的加入將葡萄糖、甘露糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖或海藻糖之一的凍干保 護(hù)劑，以凍干保護(hù)劑磷脂質(zhì)量比大于等于6:1的量加入蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液中；
(6)前體脂質(zhì)體的生成將加入了凍干保護(hù)劑的蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液在冷凍干 燥機(jī)中，于_39°C以下，真空23. SPa以下冷凍干燥24 h以上；冷凍干燥產(chǎn)品即為粉狀蜂膠 黃酮前體脂質(zhì)體；
(7)蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體的復(fù)水取0.2g蜂膠黃酮前提脂質(zhì)體，于PH 6. 8-PH7. 0的 PBS緩沖液中分散，形成分散液；復(fù)水后，包封芯材的保留率81%-96%;平均粒徑為20nm -400nmo本發(fā)明與現(xiàn)有技術(shù)相比的有益效果
由于以蜂膠黃酮為芯材，卵磷脂、膽固醇為膜材，輔以吐溫80，采用反相蒸發(fā)法制備蜂 膠黃酮納米脂質(zhì)體，然后冷凍干燥制備出蜂膠黃酮前提脂質(zhì)體。可增強(qiáng)蜂膠黃酮在胃酸的 強(qiáng)酸性體系中的穩(wěn)定性，達(dá)到提高生物利用率和更好的保健效果。用冷凍干燥法制得蜂膠 黃酮前體脂質(zhì)體，使其能夠更方便地貯存、運(yùn)輸，和在更廣泛的食品體系中應(yīng)用。
具體實(shí)施例方式實(shí)施例1
稱卵磷脂200 mg、膽固醇20 mg，溶于30 mL無(wú)水乙醚中(有機(jī)相)；稱20 mg蜂膠黃酮 溶解在10 mL去離子水中(水相)。將所得有機(jī)相和水相混合，經(jīng)過(guò)超聲處理形成穩(wěn)定均一 的油包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250 mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，35°C水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5-10分 鐘會(huì)有凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往 蒸發(fā)瓶中加入含有250 mg吐溫80的水溶液10mL，35°C水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。水合后， 即得蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液。移取蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散 液中含有磷脂質(zhì)量為200mg，加入4g葡萄糖做凍干保護(hù)劑。首先于_39°C預(yù)冷冷凍干燥機(jī)20分鐘，然后將樣品放入，抽真空至23. 8Pa，冷凍24h，所得樣品保存于干燥器中。包封芯材 的保留率為81. 2%，平均粒徑在30-400 nm之間。實(shí)施例2
稱卵磷脂200 mg、膽固醇20 mg，溶于30 mL無(wú)水乙醚中(有機(jī)相)；稱20 mg蜂膠黃酮 溶解在10 mL去離子水中(水相)。將所得有機(jī)相和水相混合，經(jīng)過(guò)超聲處理形成穩(wěn)定均一 的油包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250 mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，35°C水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5-10分 鐘會(huì)有凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往 蒸發(fā)瓶中加入含有250 mg吐溫80的水溶液10mL，35°C水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。水合后， 即得蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液。移取蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散 液中含有磷脂質(zhì)量為200mg，加入4g甘露糖做凍干保護(hù)劑。首先于_39°C預(yù)冷冷凍干燥機(jī) 20分鐘，然后將樣品放入，抽真空至23. 8Pa，冷凍24h，所得樣品保存于干燥器中。包封芯材 的保留率為82. 6%，平均粒徑在20-380 nm之間。實(shí)施例3
稱卵磷脂300 mg、膽固醇60 mg，溶于30mL無(wú)水乙醚中(有機(jī)相);稱30 mg蜂膠黃酮溶 解在IOmL去離子水中(水相)。將所得有機(jī)相和水相混合，經(jīng)過(guò)超聲處理形成穩(wěn)定均一的油 包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，40°C水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5-10分鐘會(huì)有 凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶 中加入含有300 mg吐溫80的去離子水溶液20 mL，40°C水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。水合后 即得蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液。將所得分散液于4°C冰箱中存放。移取蜂膠黃酮納米脂 質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散液中含有磷脂質(zhì)量為200mg，加入4g乳糖做凍干保護(hù)劑。 首先于_39°C預(yù)冷冷凍干燥機(jī)20分鐘，然后將樣品放入，抽真空至23. 8Pa,冷凍24h，所得樣 品保存于干燥器中。包封芯材的保留率為86.6%，平均粒徑在30-300 nm之間。實(shí)施例4
稱卵磷脂250 mg、膽固醇30 mg，溶于24mL無(wú)水乙醚中(有機(jī)相);稱20 mg蜂膠黃酮溶 解在8 mL去離子水中(水相)。將所得有機(jī)相和水相混合，經(jīng)過(guò)超聲處理形成穩(wěn)定均一的油 包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，40°C水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5-10分鐘會(huì)有 凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶 中加入含有200 mg吐溫80的水溶液12mL，35°C水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。即得蜂膠黃酮納 米脂質(zhì)體分散液。移取蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散液中含有磷脂質(zhì) 量為200mg，加入4g蔗糖做凍干保護(hù)劑。首先于_39°C預(yù)冷冷凍干燥機(jī)20分鐘，然后將樣品 放入，抽真空至23. 8Pa，冷凍24h，所得樣品保存于干燥器中。包封芯材的保留率為88. 5%， 平均粒徑在30-400 nm之間。實(shí)施例5
稱卵磷脂250 mg、膽固醇30 mg，溶于24mL無(wú)水乙醚中(有機(jī)相);稱20 mg蜂膠黃酮溶 解在8 mL去離子水中(水相)。將所得有機(jī)相和水相混合，經(jīng)過(guò)超聲處理形成穩(wěn)定均一的油 包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，40°C水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5-10分鐘會(huì)有 凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶 中加入含有200 mg吐溫80的水溶液12mL，35°C水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。水合后，即得蜂 膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液。移取蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散液中含有磷脂質(zhì)量為200mg，加入4g麥芽糖做凍干保護(hù)劑。首先于_39°C預(yù)冷冷凍干燥機(jī)20分鐘， 然后將樣品放入，抽真空至23. 8Pa，冷凍24h，所得樣品保存于干燥器中。包封芯材的保留 率為83. 8%,平均粒徑在20-350 nm之間。
實(shí)施例6
稱卵磷脂250 mg、膽固醇30 mg，溶于24mL無(wú)水乙醚中(有機(jī)相);稱20 mg蜂膠黃酮溶 解在8 mL去離子水中(水相)。將所得有機(jī)相和水相混合，經(jīng)過(guò)超聲處理形成穩(wěn)定均一的油 包水型乳狀液，轉(zhuǎn)移至250mL旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)瓶中，40°C水浴中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)去除乙醚，5-10分鐘會(huì)有 凝膠狀生成，隨著旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)繼續(xù)，凝膠塌陷，保持減壓30分鐘，以除去殘余乙醚。往蒸發(fā)瓶 中加入含有200 mg吐溫80的水溶液12mL，35°C水浴中旋轉(zhuǎn)水合30分鐘。移取蜂膠黃酮 納米脂質(zhì)體分散液20mL于表面皿中，分散液中含有磷脂質(zhì)量為200mg，加入4g海藻糖做凍 干保護(hù)劑。首先于_39°C預(yù)冷冷凍干燥機(jī)20分鐘，然后將樣品放入，抽真空至23. 8Pa，冷凍 24h，所得樣品保存于干燥器中。包封芯材的保留率為96.2%，平均粒徑在30-400 nm之間。
權(quán)利要求
1.一種蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體，其特征在于以蜂膠黃酮為芯材，壁材由卵磷脂、膽固醇 和吐溫80組成，制成的蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體為粉狀。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體，其特征在于卵磷脂與膽固醇重 量比為大于等于4 ；吐溫80與卵磷脂重量比為大于等于1. 2。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體，其特征在于芯材蜂膠黃酮含量 為卵磷脂含量的2. 5重量％或以上。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體的制備方法，其特征在于包括以下 步驟(1)配制蜂膠黃酮水溶液將蜂膠黃酮去離子水中，控制蜂膠黃酮的濃度小于等于 12mg/mL，得水相；(2)配制脂質(zhì)無(wú)水乙醚溶液將卵磷脂、膽固醇按質(zhì)量比10:1-10:2溶于無(wú)水乙醚，控 制卵磷脂在其乙醚溶液中的濃度小于等于25 mg/mL，得有機(jī)相；(3)乳狀液形成將蜂膠黃酮水溶液和脂質(zhì)無(wú)水乙醚溶液混合，再于冰水浴中超聲至混 合物變?yōu)閱蜗喾稚Ⅲw系，即形成了油包水型乳狀液；(4)脂質(zhì)體生成將形成的油包水型乳狀液轉(zhuǎn)移至旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)燒瓶中，30°C-40°C水浴 中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去無(wú)水乙醚，去除無(wú)水乙醚時(shí)有凝膠生成，進(jìn)一步旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，凝膠塌陷，形 成混懸液后，加入含吐溫80的水溶液，使溶液中含有的吐溫80與卵磷脂的質(zhì)量比為1:4 -1. 25:1，將該體系在30°C -40°C水浴下旋轉(zhuǎn)水合15-30分鐘；即得蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分 散液；(5)凍干保護(hù)劑的加入將葡萄糖、甘露糖、乳糖、蔗糖、麥芽糖或海藻糖之一的凍干 保護(hù)劑，以凍干保護(hù)劑磷脂質(zhì)量比大于等于6:1的量加入蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液中； (6)前體脂質(zhì)體的生成將加入了凍干保護(hù)劑的蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體分散液在冷凍干燥機(jī) 中，于-39°C以下，真空23. SPa以下冷凍干燥24 h以上；冷凍干燥產(chǎn)品即為粉狀蜂膠黃酮前 體脂質(zhì)體；(7)蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體的復(fù)水取0. 2g蜂膠黃酮前提脂質(zhì)體，于PH 6. 8-PH7. 0 的PBS緩沖液中分散，形成分散液；復(fù)水后，包封芯材的保留率81%-96%;平均粒徑為20nm -400nm。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體及其制備方法。其特征在于采用反相蒸發(fā)法制備蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體懸浮液，然后冷凍干燥法制備蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體；以蜂膠黃酮為芯材，卵磷脂、膽固醇為膜材，輔以吐溫80，采用反相蒸發(fā)法將制備的蜂膠黃酮納米脂質(zhì)體冷凍干燥得到蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體。由于采用上述技術(shù)方案，可增強(qiáng)蜂膠黃酮在胃酸的強(qiáng)酸性體系中的穩(wěn)定性，達(dá)到提高生物利用率和更好的保健效果。用冷凍干燥法制得蜂膠黃酮前體脂質(zhì)體，使其能夠更方便地貯存、運(yùn)輸，和在更廣泛的食品體系中應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P3/06GK102138941SQ20111008009
公開(kāi)日2011年8月3日 申請(qǐng)日期2011年3月31日 優(yōu)先權(quán)日2011年3月31日
發(fā)明者梅曙明, 陳金庚, 陳金林 申請(qǐng)人:射陽(yáng)縣慶緣康蜂產(chǎn)品廠