專利名稱：吡咯并氮雜卓酮類化合物及其作為蛋白酪氨酸磷酸酯酶1b抑制劑的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一類蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B抑制劑(PTP1B Inhibitors)，具體涉及 一類新型的吡咯并氮雜卓酮類化合物及其作為蛋白酪氨酸磷酸酯酶IB抑制劑的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
糖尿病是一種由于體內(nèi)胰島素缺乏或胰島素敏感性降低，而引起糖、蛋白、脂肪、 水、電解質(zhì)等一系列代謝紊亂的疾病，其基本特征是長期高血糖。由于糖尿病嚴重危害著人 們的健康，現(xiàn)已成為繼腫瘤、心腦血管病之后嚴重威脅人類健康的第三大殺手，因此對糖尿 病的防治研究已經(jīng)成為各國醫(yī)藥學界的重要課題。 根據(jù)患者體內(nèi)胰島素是絕對缺乏還是相對缺乏，糖尿病主要分為I型糖尿病和II 型糖尿病，即胰島素依賴型糖尿病和非胰島素依賴型糖尿病。I型糖尿病患者體內(nèi)胰腺產(chǎn) 生胰島素的細胞已經(jīng)損壞，從而失去了正常產(chǎn)生胰島素的功能，屬于胰島素的絕對缺乏。II 型糖尿病患者發(fā)病原因與分泌胰島素的能力沒有關(guān)系，而在于體內(nèi)對胰島素產(chǎn)生了抵抗， 即正常濃度的胰島素的生理效應(yīng)低于正常，胰島素促進血液中游離的葡萄糖被骨骼肌肉吸 收的能力和抑制肝釋放葡萄糖的能力降低，屬于胰島素的相對缺乏。其中II型糖尿病所占 的比例在90%以上。 對II型糖尿病發(fā)病機制復(fù)雜，目前一線的臨床治療藥物存在多種缺陷，不能根本 上治愈糖尿病患者。隨著研究的深入，以胰島素信號轉(zhuǎn)導(dǎo)通路中酶或受體為靶標，篩選發(fā)展 藥物成為尋找新藥的關(guān)鍵途徑。最新研究表明，蛋白酪氨酸磷酸酯酶(PTPase)在胰島素作 用的信號途徑中起到重要的負調(diào)節(jié)作用，其中PTP1B的作用尤為明顯。通過抑制PTPIB在 細胞中的表達，可以提高胰島素信號通路的敏感性；同時小鼠模型試驗表明，PTPIB基因敲 除的小鼠健康良好，表現(xiàn)出良好的抵抗肥胖和糖尿病的能力(Echebly M. ， et al ;Science， 283， 1544-1548)。從而說明，PTP1B是一個新穎的治療糖尿病和肥胖癥的有效分子靶點。
近年來，PTP1B抑制劑的研究已經(jīng)取得了很大的進展。但由于PTPIB與PTP家族其 他酶(如SHP、VHR、LAR、CD45等)在結(jié)構(gòu)上都具有同源性，特別是TCPTP同源性達到80%， 因此大多數(shù)已報道的抑制劑的選擇性都不高；而一些選擇性高的抑制劑大多為多肽類磷酸 化合物，但由于其強的電負性，細胞膜通透性較差，不易達到分子靶標。所以到目前尚未有 PTP1B抑制劑進入III期臨床研究。因此，找尋一種具有高活性和高選擇性的PTPIB抑制劑 成為目前的一個研究熱點。 本發(fā)明是在國家863基金資助下，為設(shè)計合成一類新型的具有自主知識產(chǎn)權(quán)的 PTPIB抑制劑而進行的研究。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的一個目的是提供了一類具有蛋白酪氨酸磷酸酯酶IB抑制活性的如式 (I)結(jié)構(gòu)所示的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽。
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為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案為
如式(I)表示的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽
<formula>formula see original document page 5</formula> (I) 其中n代表0或l A代表H， C「(；烷基，節(jié)基或C (0) R4，其中R4代表C「C4烷基， 苯基或被羧基、羧酸酯、醛基、羥基、或烷氧基取代的苯基；R2代表0H， 0，或N_NHR5，當R2代 表OH時，其與相應(yīng)的C單鍵連接，當R2代表0或者N-NHR5時候，其與相應(yīng)的C雙鍵連接， 其中R5代表苯環(huán)或被N、 0、 S原子取代的五元或六元芳香基；R3代表H、乙酰基，鹵素，苯基 或取代苯基。
優(yōu)選為當&代表取代苯基時，具有如下結(jié)構(gòu)式(II)所示的結(jié)構(gòu)
<formula>formula see original document page 5</formula>
(II)
其中，R6代表C4-C6烷氧基，或被N、 0、 S原子取代的五元或六元飽和烷烴基。
優(yōu)選為所述吡咯并氮雜卓酮類化合物或其藥用鹽選自以下化合物
4-(l-芐基-4，8-二酮-l，4，5，6，7，8-六氫吡咯[2，3_c]氮雜卓_7_羰基)苯甲
4-(l-芐基-4，8-二酮-l，4，5，6，7，8-六氫吡咯[2，3_c]氮雜卓_7_羰基)苯甲
7-苯甲?；?l-苯基_6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-4，8(1H，5H)-二酮、 4-(4，8-二酮-l-苯基-l，4，5，6，7，8-六氫吡咯[2，3_c]氮雜卓_7_羰基)苯甲
7-乙?；?1-苯基-6， 7- 二氫吡咯[2， 3-c]氮雜卓-4， 8 (1H， 5H) - 二酮、 (E)-l-((4'-甲氧聯(lián)苯基-4-取代)甲基)-4-(2-吡啶-2-取代)腙-4，5，6，
5


酸甲酯、
醛、
醛、7-四氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-S(lH)-酮、 l-((4' -丁氧聯(lián)苯基-4_取代)甲基)-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-4，8(lH， 5H)-二酮、 1- ((4，-嗎啡啉聯(lián)苯基-4-取代)甲基)-6， 7- 二氫吡咯[2， 3_c]氮雜卓_4， 8 (1H， 5H)-二酮、 l-((4'-(4-甲基哌啶-l-取代)聯(lián)苯基-4-取代)甲基)-6，7-二氫吡咯[2，3-c] 氮雜卓-4，8(1H，5H)-二酮。 本發(fā)明的另外一個目的是提供了吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽作為蛋 白酪氨酸磷酸酯酶1B抑制劑的應(yīng)用。 本發(fā)明的再一個目的是提供了吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽在制備治 療II型糖尿病和肥胖癥的藥物中的應(yīng)用。 本發(fā)明的式(I)所示的化合物能夠以可藥用鹽的形式使用，尤其是酸的加成鹽， 采用可藥用的游離酸來制備，如氫氯酸，硫酸，檸檬酸，酒石酸等。 —種治療II型糖尿病或肥胖癥的藥物組合物，其含有有效量的作為活性成份的 上述吡咯并氮雜卓酮類化合物或其藥用鹽和可藥用的載體。 本發(fā)明的化合物的制備可通過以下基本方法和原則制備，其所用的原料都可從市 場上購買，本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以根據(jù)本發(fā)明制備到本發(fā)明所述的任一種化合物。
步驟一 根據(jù)化學方程式
以乙腈做溶劑，三乙胺做堿，三氯乙酰吡咯與e-氨基丙酸乙酯鹽酸鹽在室溫下 發(fā)生偶合反應(yīng)，生產(chǎn)化合物2 ;然后化合物2在2N Na0H溶液中室溫水解得到化合物3 ;在加 熱條件下，化合物3在PPA和P205作用下關(guān)環(huán)得到化合物4.
步驟二 根據(jù)化學方程式
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以乙腈做溶劑，碳酸鉀做堿，在回流的條件下，化合物4與芐溴偶合得到化合物5 ;而以二氯甲烷做溶劑，醋酸銅做催化劑，化合物4與苯硼酸在室溫條件可以偶聯(lián)得到化合物6 ;化合物5和化合物6在三乙胺做堿，室溫下與酰氯反應(yīng)可以得到相應(yīng)的化合物7和化合物8。 步驟三根據(jù)化學方程式
化合物9和化合物10在Pd (PPh3) 4催化下偶聯(lián)得到化合物11 ;隨后，NBS溴代得到化合物12 ;在回流條件下，化合物12和化合物4偶聯(lián)得到化合物13 ;化合物13在醇中，濃鹽酸催化下與肼脫水成腙得到化合物14.
步驟四根據(jù)化學方程式
7<formula>formula see original document page 8</formula> 化合物4和4-溴節(jié)溴反應(yīng)得到化合物15 ;化合物15在Pd (d卯f) Cl2 *CH2C12催化
下與聯(lián)硼酸頻那醇酯反應(yīng)得到化合物16 ;化合物16又在同樣的催化劑下與溴代物偶聯(lián)得到化合物17。 本發(fā)明所述的吡咯并氮雜卓酮類化合物及其藥用鹽對蛋白酪氨酸磷酸酯酶IB具有較好的抑制作用，可用于制備治療II型糖尿病和肥胖癥的藥物中。為臨床治療II型糖尿病或肥胖癥提供了更多的藥物選擇。 本發(fā)明所提供的制備方法具有簡單，易操作，成本低等優(yōu)點。
具體實施例方式
下列實施例進一步解釋了本發(fā)明的化合物及其中間體的合成方法，但并不限制本
發(fā)明的范圍。 —、儀器與藥品 NMR由美國VARIAN公司生產(chǎn)的Mercury-Plus 300M儀器測定，溶劑峰做內(nèi)標；質(zhì)譜由DSQ臺式質(zhì)譜儀(EI源)和日本島津公司生產(chǎn)的LCMS-2010A(ESI源)測定；化學試劑購自廣州東征，粵申化學品公司，Alfar-Aser公司，百靈威化學，阿拉丁化學試劑公司；柱層析用硅膠購自青島海洋化工廠。 實施例一 6， 7- 二氫吡咯[2， 3-c]氮雜卓_4， 8 (1H， 5H) - 二酮的合成(化合物4)
在含有8. 5g(40mmo1)三氯乙酰吡咯的lOOmL無水乙腈溶液中，加入7. 38gP -丙氨酸甲酯鹽酸鹽(48mmol)和7. 2mL(52mmo1)三乙胺。混合溶液在室溫下攪拌12小時左右，至原料轉(zhuǎn)化完全，停止攪拌，減壓轉(zhuǎn)旋蒸發(fā)除掉溶劑，再用乙酸乙酯溶解，用水，IN HC1溶液，飽和食鹽水分別洗滌，有機相用無水Na2S04干燥，抽濾除去Na2S04，減壓旋蒸除去溶劑，得化合物2(7. 70g，產(chǎn)率92X )。 往化合物2 (7. 7g， 36. 7,1)中加入37mL 2N的Na0H溶液(約73. 4,1)，混合液在室溫下攪拌15小時，至反應(yīng)物轉(zhuǎn)化完全，冰浴下用6N的HC1溶液(約8mL)將混合液調(diào)至pH = 3，析出大量灰白色固體，抽濾，洗滌，濾餅真空4(TC下烘干，稱量，得化合物3 (6. 28g，產(chǎn)率94% )。 9. 80g P205與103. 2g PPA在12(TC條件下攪拌50分鐘左右，至溶液澄清。將溫度降至105°C ，加入化合物3 (6. 28g， 34. 6mmo1)，攪拌1個小時左右，把混合液傾倒進碎冰中(約200mL)，攪拌1個小時，抽濾，固體烘干，得2. 319g褐色固體。濾液用用乙酸乙酯萃取，合并有機層用飽和食鹽水洗滌兩次，用無水Na2S04干燥，抽濾除去Na^(^減壓旋蒸除去乙酸乙酯，得淡黃色固體1. 243g。合并固體得化合物4(3. 56g，產(chǎn)率65% )。
力NMR (300MHz ， DMS0-d6) : S 12. 14 (br s， 1H) ， 8. 31 (m， 1H) ， 6. 96 (m， 1H) ， 6. 52 (m，1H) ， 3. 34 (m， 2H) ， 2. 68 (m， 2H) ;EI-MS :m/z = 164 [M] + 實施例二 l-芐基-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-4，8(lH，5H)-二酮的合成(化合物5) 將化合物4(lmmol，164mg)溶于20ml無水乙腈中，在向其中加入溴節(jié)(1. 5mmo1，256mg)和無水碳酸鉀(2mmol，276mg)?；亓鞣磻?yīng)12h至原料點消失。減壓蒸發(fā)溶劑，加入乙酸乙酯和水，分出有機相，水層用乙酸乙酯抽提2次，合并有機相，用飽和食鹽水洗滌。干燥，濃縮，粗產(chǎn)品柱層析(二氯甲烷乙酸乙酯=1 : 1)，得化合物5(220mg，產(chǎn)率87X)。
力NMR (300MHz ， CDC13) : S 7. 23—7. 34 (m， 6H) ， 6. 52 (d， J = 2. 7Hz ， 1H) ， 6. 73 (d， J =2. 7Hz， 1H) ，5. 60(s，2H) ，3. 40—3. 46 (m， 2H) ， 2. 75—2. 79 (m， 2H) ;EI-MS :m/z = 254[M]+.[OO57] 實施例三l-苯基-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-4，8(lH，5H)-二酮的合成(化合物6) 在帶有CaCl2干燥管的100mL圓底燒瓶中依次加入化合物4 (1. OOg， 6. 10m mol)、苯硼酸(1.49g，12.20m mol)、一水乙酸銅(1.83g，9.20m mol) ， 50mL無水二氯甲烷和吡啶(1.00mL，12. 20m mol)，在室溫下攪拌5小時。停止反應(yīng)，減壓蒸出二氯甲烷，剩余物中加入水和乙酸乙酯，過濾除去不溶物，水相用乙酸乙酯萃取2次，合并有機相。用飽和食鹽水洗滌有機相2 3次，無水化2504干燥，抽濾，濃縮，粗產(chǎn)品柱層析(二氯甲烷乙酸乙酯=3 : 1)，得到白色固體6(1.5g，產(chǎn)率90X )。 力NMR (300MHz ， CDC13) : S 7. 47 7. 27 (m， 5H) ， 6. 97 (d， J = 3Hz ， 1H) ， 6. 84 (d， J =3Hz ， 1H) ， 3. 55 (m， 2H) ， 2. 82 (m， 2H) ;EI-MS :m/z = 240 [M] + 實施例四4-(l-芐基-4，8-二羰基-l，4，5，6，7，8-六氫吡咯[2，3_c]氮雜卓-7-羰基)苯甲酸甲酯的合成 將對苯二甲酸單甲酯(3mmo1)溶于CH2C12中，加入S0C12(lml)，和催化量的DMF。4(TC下反應(yīng)3h。減壓濃縮掉溶劑和S0C1^得4-氯羰基苯甲酸甲酯。 將化合物5(lmmo1)溶于CH2C12中，加入2ml三乙胺。將上述酰氯溶于5ml 二氯甲烷，然后滴入。加完后，室溫攪拌5h。反應(yīng)完畢后，向反應(yīng)液中加水和CH^1"分出有機相，用飽和食鹽水洗滌，有機相用無水化2504干燥。濃縮得132mg白色固體，產(chǎn)率32%。
力NMR(300MHz， CDC13) :S7. 99(d， J = 8. 1Hz， 2H) ， 7. 48 (d， J = 8.1Hz，2H)，7.28-7.31(m，3H)，7.00-7.02(m，3H)，6.80(d， J = 2. 7Hz， 1H) ， 5. 49 (s， 2H) ， 4. 34 (t， J =5. 4Hz，2H) ，3. 93(s，3H) ，2. 94(t， J = 5. 4Hz，2H) ;EI-MS :m/z = 416 [M]+.
實施例五4-(l-芐基-4，8-二羰基-l，4，5，6，7，8-六氫吡咯[2，3_c]氮雜卓-7-羰基)苯甲醛的合成 將4-甲?；郊姿?3mmo1)溶于CH2C12中，加入S0Cl2(lml)，和催化量的DMF。4(TC下反應(yīng)3h。減壓濃縮掉溶劑和SOC^。得甲?；郊柞Ｂ?。 將化合物5(lmmo1)溶于CH2C12中，加入lml三乙胺。將上述酰氯溶于5ml 二氯甲烷，然后滴入。加完后，室溫攪拌5h。反應(yīng)完畢后，向反應(yīng)液中加水和CH^1"分出有機相，用飽和食鹽水洗滌，有機相用無水化2504干燥。濃縮得148mg白色固體，產(chǎn)率38%。
9
力NMR(300MHz， CDC13) S : 10. 03 (s， 1H) ， 7. 83 (d， J = 7. 6Hz， 2H) ， 7. 57 (d， J =
7. 6Hz，2H) ，7. 22-7. 36(m，3H) ，6. 94—7. 06(m，3H) ，6. 81 (s， 1H) ， 5. 48(s，2H) ，4. 36(s，2H)，2.95(s，2H) ;EI-MS :m/z = 386[M]+. 實施例六7-苯甲酰基-l-苯基-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓_4， 8 (1H， 5H) - 二酮的合成 合成方法與實施例四類似，不同之處在于將化合物5換成化合物6， 4-氯羰基苯甲酸甲酯換為苯乙酰氯。純化后得120mg白色固體，產(chǎn)率68%。 力NMR(300MHz， CDC13) : S 7. 23—7. 51 (m， 10H) ， 7. 08 (d， J = 2. 7Hz， 1H) ， 6. 88 (d， J=2. 7Hz ， 1H) ， 4. 52 (m， 2H) ， 2. 99 (m， 2H) ;EI-MS :m/z = 344 [M] + 實施例七4-(4，8-二酮-l-苯基-l，4，5，6，7，8-六氫吡咯[2，3_c]氮雜卓-7-羰基)苯甲醛的合成 合成方法與實施例五類似，不同之處在于將化合物5換成化合物6。純化后得60mg白色固體，產(chǎn)率54%。 力腿(300MHz， CDC13) : S 9. 97 (s， 1H) ， 7. 80 (d， J = 8. 1Hz， 2H) ， 7. 57 (d， J =
8. 1Hz，2H) ，7. 35-7. 42 (m， 3H) ， 7. 21-7. 24(m，2H) ，7. 10(d， J = 3Hz， 1H) ，6. 89(d， J = 3Hz，1H) ，4. 55(t， J = 5. 4Hz，2H) ，3. 02(t， J = 5. 4Hz，2H) ;EI-MS :m/z = 372[M]+. 實施例八7-乙?；?1-苯基-6， 7- 二氫吡咯[2， 3_c]氮雜卓_4， 8 (1H， 5H) - 二酮的合成 合成方法與實施例四類似，不同之處在于將化合物5換成化合物6， 4-氯羰基苯甲酸甲酯換為乙酰氯。純化后得58mg白色固體，產(chǎn)率52%。 力NMR (300MHz ， CDC13) : S 7. 46-7. 50 (m， 3H) ， 7. 30-7. 33 (m， 2H) ， 7. 08 (d， J = 3Hz ，1H)，6.81(d， J = 3Hz，lH)，4.41(t， J = 5. 4Hz， 2H) ， 2. 86—2. 90 (m， 2H) ， 2. 44 (s， 3H) ;EI-MS :m/z = 282[M]+. 實施例九l-((4' -丁氧聯(lián)苯基-4_取代)甲基)-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-4，8(1H，5H)_ 二酮 將1-溴-4-正丁氧基苯(lmmol) ， 4-甲基苯硼酸(1. 5mmo1)溶于水和丙酮的混合液6. 5ml(3. 5/3，v/v)，然后向其中加入碳酸鈉(2mmo1)和Pd(0Ac)2(0. 5mol%)。溶液室溫攪拌4h，加水和乙酸乙酯，抽濾，濾餅用乙酸乙酯洗滌，合并有機相，鹽水洗，干燥，濃縮，柱層析(乙酸乙酯石油醚=1 : IO)，得白色固體化合物11(204mg，產(chǎn)率85X )。
在10ml微波反應(yīng)管中加入化合物11 (192mg，0.8,1)， NBS(149mg，0. 84mmo1)，BPO (19mg， 0. 08mmo1)和CC14 (2ml)，加入攪拌磁子后蓋上密封蓋，置于單模微波反應(yīng)器內(nèi)。8(TC下反應(yīng)20分鐘，停止反應(yīng)，冷卻至室溫，反應(yīng)液抽濾，濾液濃縮，得白色固體12，不需純化，直接投入下步反應(yīng)。 在一50ml的圓底燒瓶中加入化合物4(98mg，0. 6mmo1)， K2C03(166mg， 1. 2mmo1)，上步粗產(chǎn)物和20ml無水乙腈，加熱回流10h，停止反應(yīng)，濃縮。向剩余物中加入水和乙酸乙酯，水相用乙酸乙酯萃取兩次，合并有機相，用無水硫酸鈉干燥，干燥完后蒸去溶劑，粗產(chǎn)品柱層析分離(二氯甲烷乙酸乙酯=1 : 1)，得化合物13(140mg，產(chǎn)率58X)。
力NMR(300MHz， CDC13) : S 7. 46—7. 51 (m， 4H) ， 7. 19 (d， J = 8. 4Hz， 2H) ， 6. 95 (d， J=8. 4Hz，2H)，6.91(d，J = 2. 7Hz，lH)，6. 78(d，J = 2. 7Hz，lH)，6. 37-6. 42 (m， 1H) ， 5. 65(s，2H) ，4. OO(t， J = 6. 6Hz，2H) ，3. 51—3. 56(m，2H) ，2. 83—2. 87 (m， 2H) ， 1. 75—1. 85 (m， 2H)，
1. 48-1. 58(m，2H) ， 1. OO(t， J = 7. 2Hz，3H) ;EI-MS :m/z = 402[M]+. 實施例十(E) -1- ((4，-甲氧聯(lián)苯基-4-取代)甲基)-4- (2_吡啶_2_取代)腙_4，5，6，7-四氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-S(lH)-酮 將l-((4'-甲氧聯(lián)苯基-4-取代)甲基)-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-4，8(lH，5H)-二酮(180mg，0. 5mmol)，2-肼吡啶(81.7mg，0. 75,1)溶于5ml無水乙醇中，加熱回流5h后，冷卻至室溫，析出固體，抽濾，用冰乙醇洗滌，干燥得淡黃色固體(158mg，70% )。
^ NMR(300MHz， CDC13) : S 8. 33 (s， 1H) ， 8. 08—8. 11 (m， 1H) ， 7. 56—7. 62 (m， 1H)，7. 46-7. 49(m，4H) ，7. 37(d， J = 8. 4Hz， 1H) ， 7. 18 (d， J = 8. 1Hz， 2H) ， 6. 95-6. 99 (m， 3H)，6. 86(d， J = 2. 7Hz， 1H) ，6. 74-6. 78 (m， 1H) ，6. 70(d， J = 2. 7Hz， 1H) ， 5. 58(s，2H) ，3. 83(s，3H) ， 3. 40-3. 45 (m， 2H) ， 2. 76-2. 80 (m， 2H) ;EI-MS :m/z = 452 [M] + 實施例i^一 l-((4'-嗎啡啉聯(lián)苯基-4-取代)甲基)-6，7-二氫吡咯[2，3_c]氮雜卓-4，8(1H，5H)-二酮 化合物15(664mg，2mmo1)溶解在預(yù)先脫氧氣的DMF(5ml)中，然后向其中加入聯(lián)硼酸頻那醇酯(558mg，2. 20,1) ， KOAc (589mg， 6mmo1) ， Pd(dppf)Cl2 CH2Cl2(61mg，0. 075mmol)。反應(yīng)混合液在氮氣保護下8(TC反應(yīng)6h。冷卻到室溫，倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相干燥，干燥完后蒸去溶劑，粗產(chǎn)品柱層析分離(乙酸乙酯石油醚=2 : l)，得化合物16 (480mg，產(chǎn)率61 % )。 化合物16 (0. 5mmo1) ， 4_ (4-溴苯基)嗎啡啉(lmmol) ， 2N Na2C03水溶液(1. 5ml)加入到預(yù)先脫氧氣的DMF(5ml)中，然后向其中加入Pd(d卯f)Cl2 *CH2C12 (25mg， 0. 03mmo1)。反應(yīng)混合液在氮氣保護下8(TC反應(yīng)6h。冷卻到室溫，倒入水中，乙酸乙酯萃取，有機相干燥，干燥完后蒸去溶劑，粗產(chǎn)品柱層析分離(二氯甲烷乙酸乙酯=20 : l)，得化合物17(73mg，產(chǎn)率35% )。 丄H NMR (300MHz ， CDC13) :5 7. 48—7. 52 (m， 4H) ， 7. 19 (d， J = 8. 1Hz ， 2H) ， 6. 97 (d，J = 9. 0Hz，2H) ，6. 90(d， J = 3. OHz， 1H) ，6. 78(d， J = 3. OHz， 1H) ，6. 15(t， J = 6. 6Hz，1H) ，5. 65(s，2H) ，3. 89(t， J = 4. 8Hz， 4H) ， 3. 50—3. 56 (m， 2H) ， 3. 21 (t， J = 4.8Hz，4H)，
2. 83-2. 86(m，2H) ;ESI—MS :m/z = 416[M+H] + 實施例十二 l-((4' -(4-甲基哌啶-l-取代)聯(lián)苯基-4-取代)甲基)-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-4，8(1H，5H)-二酮 合成方法與實施例十類似，不同之處在于將4-(4-溴苯基)嗎啡啉換成1_(4-溴苯)-4-甲基哌嗪。純化后得64mg白色固體，產(chǎn)率30%。 力NMR(300MHz，CDCl3) :7. 48(t， J = 7. 5Hz，4H) ，7. 18(d， J = 8. 4Hz，2H) ，6. 98(d，J = 8. 7Hz，2H) ，6. 89(d， J = 2. 7Hz， 1H) ，6. 77(d， J = 2. 4Hz， 1H) ，6. 27(t， J = 5. 1Hz， 1H)，5. 64(s，2H) ，3. 49-3. 54(m，2H) ，3. 27(t， J = 4. 5Hz，4H) ，2. 84(t， J = 5. 1Hz，2H) ，2. 61(t， J=4. 5Hz，4H) ，2. 38(s，3H) ;ESI-MS :m/z = 429[M+H]+.
實施例十三PTP1B抑制活性實驗 實驗方法用于篩選的蛋白酪氨酸磷酸酯酶PTP1B是從大腸桿菌中表達并純化的GST融合蛋白。采用紫外底物pNPP，觀察不同化合物對重組酶的活性的抑制，以初步評價化合物的藥用效果。PTPlB水解底物pNPP的磷脂得到的產(chǎn)物在410nm處有很強的光吸收。因此可以直接檢測410nm處光吸收的變化以觀察酶的活性變化以及化合物對其抑制情況。陽性對照BPV在200uM濃度時的抑制率為98. 32% 。 按照實施例十三所介紹的方法，測定了本發(fā)明的部分式(I)和(II)結(jié)構(gòu)中的吡咯并氮雜卓酮類化合物對PTP1B的抑制活性，測試結(jié)果是指抑制劑在lOOuM濃度時對酶活性的百分抑制率，抑制活性高出50%時，按常規(guī)篩出ICs。值。結(jié)果如下表
編號nR2R3抑制率IC50(uM)
11H0H-5.4%-
21HOHH-18.9%-
310H-30.6%—
41H3COOC~~^0H—81.3%73.6
51H0-n-BuO-85.3%16.3
6H，" 《y~NHMeO125.8%14.93
70CH3C(0)0H-11.7%-
800H11.6%—
900H59.0%— 由上述結(jié)果可以看出本發(fā)明的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽對蛋白酪氨酸磷酸酯酶PTP1B具有抑制作用，因此可以用于制備治療II型糖尿病和肥胖癥的藥物，具有廣闊的應(yīng)用前景。
1權(quán)利要求
下述式(I)表示的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽其中n代表0或1；R1代表H，C1-C6烷基，芐基或C(O)R4，其中R4代表C1-C4烷基，苯基或被羧基，羧酸酯，醛基，羥基，烷氧基取代的苯基；R2代表OH，O，或N-NHR5，其中R5代表苯環(huán)或被N、O、S原子取代的五元或六元芳香基；R3代表H、乙?；?，鹵素，苯基或取代苯基。F2009102614187C00011.tif
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽，其特征在于當Rs代 表取代苯基時，其具有式(II)表示的結(jié)構(gòu) <formula>formula see original document page 2</formula>(n)其中R6代表C4-C6烷氧基，或被N、 0、 S原子取代的五元或六元飽和烷烴基；其中n、 & 和R2的定義與權(quán)利要求1相同。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽，其特征在于所述的 吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽選自以下化合物4-(l-芐基-4，8-二酮-l，4，5，6，7，8-六氫吡咯[2，3_c]氮雜卓_7_羰基)苯甲酸甲酯、4-(l-芐基-4，8-二酮-l，4，5，6，7，8-六氫吡咯[2，3_c]氮雜卓_7_羰基)苯甲醛、 7-苯甲?；?l-苯基-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-4，8(1H，5H)-二酮、 4-(4，8-二酮-l-苯基-l，4，5，6，7，8-六氫吡咯[2，3_c]氮雜卓_7_羰基)苯甲醛、 7-乙酰基-1-苯基-6， 7- 二氫吡咯[2， 3-c]氮雜卓-4， 8 (1H， 5H) - 二酮。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽，其特征在于所述的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽選自以下化合物(E)-l-((4'_甲氧聯(lián)苯基-4-取代)甲基)-4-(2-吡啶-2-取代)腙-4，5，6，7-四氫 吡咯[2， 3-c]氮雜卓-S(lH)-酮、l-((4'-丁氧聯(lián)苯基-4-取代)甲基)-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-4，8(lH，5H)-二酮、l-((4'-嗎啡啉聯(lián)苯基_4-取代)甲基)-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮雜卓-4，8(lH， 5H)-二酮、1-((4'-(4-甲基哌啶-l-取代)聯(lián)苯基-4-取代)甲基)-6，7-二氫吡咯[2，3-c]氮 雜卓-4，8(1H，5H)-二酮。
5. 權(quán)利要求1所述的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽作為蛋白酪氨酸磷酸酯 酶1B抑制劑的應(yīng)用。
6. 權(quán)利要求1所述的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽在制備治療II型糖尿病 或肥胖癥藥物中的應(yīng)用。
7. —種治療II型糖尿病或肥胖癥的藥物組合物，其含有有效量的作為活性成份的權(quán) 利要求1所述的吡咯并氮雜卓酮類化合物或者其藥用鹽和藥用載體。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種吡咯并氮雜卓酮類化合物及其作為蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B抑制劑的應(yīng)用，旨在提供一類具有蛋白酪氨酸磷酸酯酶1B抑制活性的吡咯并氮雜卓酮類化合物及其在制備治療II型糖尿病和肥胖癥的藥物中的應(yīng)用。它具有式(I)其中n代表0或1；R1代表H，C1-C6烷基，芐基或C(O)R4，其中R4代表C1-C4烷基，苯基或被羧基、羧酸酯、醛基、羥基、或烷氧基取代的苯基；R2代表OH，O，或N-NHR5其中R5代表苯環(huán)或被N、O、S原子取代的五元或六元芳香基；R3代表H、乙?；?，鹵素，苯基或取代苯基。本發(fā)明可以用于制備治療II型糖尿病和肥胖癥的藥物。
文檔編號A61K31/55GK101735222SQ200910261418
公開日2010年6月16日 申請日期2009年12月11日 優(yōu)先權(quán)日2009年11月2日
發(fā)明者萬一千, 葉菲, 孟飛, 朱新海, 汪晨霞, 田金英, 蘇麗, 謝建偉, 黃漫娜 申請人:中山大學