專利名稱：一種人參分組皂苷的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及制備由不同人參皂苷組成的人參皂苷混合物即人參分組皂苷的方法，屬于天然藥物化學(xué)研究領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
人參、西洋參、三七是人參屬植物中的常用名貴中藥。近半個(gè)世紀(jì)以來(lái)人們對(duì)人參、西洋參、三七等人參屬植物的化學(xué)成分及生物活性進(jìn)行了深入研究，證明了人參皂苷是其最主要的化學(xué)成分同時(shí)又是最主要的有效成份。
人參皂苷根據(jù)其皂苷元的結(jié)構(gòu)，分為二醇組人參皂苷、三醇組人參皂苷和其它類型人參皂苷三大類。其中二醇組人參皂苷主要包括人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd、三七皂苷Fe、人參皂苷F2、人參皂苷Rg3、人參皂苷Rh2等，三醇組人參皂苷主要包括人參皂苷Re、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、人參皂苷Rh1、人參皂苷Rf、人參皂苷20-葡萄糖-Rf、人參皂苷F1、三七皂苷R1等，其它類型人參皂苷包括人參皂苷R0、擬人參皂苷F11等。
利用人參、西洋參、三七的根及其地上部分可以獲得相應(yīng)的人參皂苷的混合物，包括人參總皂苷、人參(莖)葉總皂苷；三七總皂苷、三七(莖)葉總皂苷；西洋參總皂苷、西洋參(莖)葉總皂苷以及紅參總皂苷等，在這里統(tǒng)稱它們?yōu)榭傇碥铡Ｉ鲜隹傇碥崭鶕?jù)來(lái)源的不同其中人參皂苷的組成和含量有所區(qū)別。比如說(shuō)，西洋參葉總皂苷中含量較高的成分是人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd等二醇組人參皂苷和擬人參皂苷F11，其中人參皂苷Rb3含量最高；而人參葉總皂苷中含量較高的成分是人參皂苷Rb2、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd、人參皂苷F2等二醇組人參皂苷和人參皂苷Re、人參皂苷Rg1、人參皂苷F1等三醇組人參皂苷，而三七總皂苷中含量最高的成分是人參皂苷Rg1和人參皂苷Rb1。
上述總皂苷可以用常用的大孔吸附樹(shù)脂法獲得，也可以通過(guò)水提醇沉或醇提水沉的方法獲得。
二醇組人參皂苷和三醇人參皂苷具有不同的生物活性，比如說(shuō)二醇組人參皂苷具有中樞抑制作用，抗溶血作用；而三醇組人參皂苷具有中樞興奮作用及溶血作用。另外不同的人參皂苷單體其活性也不一樣，比如說(shuō)，人參皂苷Rg1是人參皂苷中抗疲勞活性最強(qiáng)的成分，而人參皂苷Rb2是人參皂苷中降血脂活性最強(qiáng)的成分。因此，在開(kāi)發(fā)利用人參皂苷時(shí)經(jīng)常遇到將二醇組人參皂苷和三醇組人參皂苷分開(kāi)后分別應(yīng)用的問(wèn)題。另外，先將二醇組人參皂苷和三醇組人參皂苷分開(kāi)的話更容易從中分離各種人參皂苷的單體。
分離二醇組人參皂苷和三醇人參皂苷的方法除了有機(jī)溶劑萃取或柱層析分離等傳統(tǒng)方法外中國(guó)專利《人參分組皂甙的制備方法、其藥物組合物及應(yīng)用》(公開(kāi)號(hào)CN11900989)和《一種二醇組人參皂苷和三醇人參皂苷的分離方法》(公開(kāi)號(hào)CN1594352)均公開(kāi)了二醇組人參皂苷及三醇組人參皂苷的分離方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種人參分組皂苷的制備方法。所述的人參分組皂苷是指從總皂苷中分得的含有人參皂苷的種類較少的人參皂苷混合物，主要是指二醇組人參皂苷和三醇組人參皂苷以及含有一種或一種以上其他類型人參皂苷的二醇組人參皂苷和三醇組人參皂苷。所述的總皂苷包括人參總皂苷、人參(莖)葉總皂苷；三七總皂苷、三七(莖)葉總皂苷；西洋參總皂苷、西洋參(莖)葉總皂苷以及紅參總皂苷等。具體是把從人參屬植物中得到的總皂苷溶于堿溶液后用正丁醇萃取，從而獲得含有人參皂苷F1、人參皂苷F2、人參皂苷F11、三七皂苷Fe、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、人參皂苷Re、三七皂苷R1等人參皂苷的一種或一種以上的正丁醇層和含有人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Ro等人參皂苷的一種或一種以上的堿溶液層。也就是說(shuō)本方法適用于從人參總皂苷、人參葉總皂苷、三七總皂苷、三七葉總皂苷、西洋參總皂苷、西洋參葉總皂苷、紅參總皂苷中獲得兩種不同的人參分組皂苷。
將目前為止分得的主要人參皂苷用正丁醇∶乙酸乙酯∶水(4∶1∶5，上層)為展開(kāi)劑在硅膠薄層板上展開(kāi)的話，其Rf值由小到大的順序是人參皂苷R0、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、(人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2)、人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc、人參皂苷20-葡萄糖-Rf、人參皂苷Rd、(人參皂苷Re、三七皂苷Fe、三七皂苷R1)、人參皂苷Rf、(人參皂苷Rg1、人參皂苷F2)、人參皂苷Rg2、擬人參皂苷F11、人參皂苷F1。括號(hào)內(nèi)的人參皂苷在上述條件下其Rf值完全相同。當(dāng)然展開(kāi)劑不同Rf值的大小順序也不同。本發(fā)明所述的Rf值的大小順序是指以正丁醇∶乙酸乙酯∶水(4∶1∶5，上層)為展開(kāi)劑時(shí)的大小順序。本發(fā)明的詳細(xì)技術(shù)方案如下。
把總皂苷，如人參總皂苷、人參葉總皂苷、三七總皂苷、三七葉總皂苷、西洋參總皂苷、西洋參葉總皂苷或紅參總皂苷溶于堿溶液中后再用正丁醇萃取，這時(shí)由于堿的存在，只有Rf值比人參皂苷Rd大的成分進(jìn)入正丁醇層，而Rf值小于等于人參皂苷Rd的成分則留在堿溶液中。Rf值比人參皂苷Rd大的成分具體包括人參皂苷F1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、人參皂苷F2、人參皂苷F11、三七皂苷Fe、人參皂苷Re、三七皂苷R1；Rf值小于等于人參皂苷Rd的成分具體包括人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Ro等。
因?yàn)镽f值比人參皂苷Rd大的成分主要是人參皂苷F1、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、人參皂苷Re等三醇組人參皂苷，Rf值小于等于人參皂苷Rd的成分主要是人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3等二醇組人參皂苷，因此可以說(shuō)堿溶液層主要是二醇組人參皂苷而正丁醇層主要是三醇組人參皂苷。
過(guò)去常把總皂苷，如人參總皂苷、人參葉總皂苷、三七總皂苷、三七葉總皂苷、西洋參總皂苷、西洋參葉總皂苷或紅參總皂苷等溶于水后用正丁醇萃取，從而獲得純度更高的總皂苷。本發(fā)明與上述方法有本質(zhì)的區(qū)別。上述方法是一種純化手段，得到的仍然是總皂苷，只是去掉了一些雜質(zhì)；而本發(fā)明的方法是一種分離手段，得到的是人參分組皂苷。
本方法因使用的原料不同，即使用的總皂苷不同，正丁醇層和堿溶液層中所含的人參皂苷有所不同，也就是說(shuō)得到的人參分組皂苷有所不同。如果使用的是人參總皂苷或紅參總皂苷的話，正丁醇層中含有的主要成分是人參皂苷Re和人參皂苷Rg1，堿溶液層中含有的主要成分是人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Ro等，其中人參皂苷Rc、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2含量較高；如果使用的是人參葉總皂苷的話，正丁醇層中含有的主要成分是人參皂苷F1、人參皂苷F2、三七皂苷Fe、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、人參皂苷Re，堿溶液層中含有的主要成分是人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3等，其中人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2含量較高；如果使用的是三七總皂苷的話，正丁醇層中含有的主要成分是人參皂苷Rg1、三七皂苷R1、人參皂苷Re；堿溶液層中含有的主要成分是人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd、人參皂苷Rb3等；如果使用的是三七葉總皂苷的話，正丁醇層中主要含有三七皂苷Fe，堿溶液層中含有的主要成分是人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3。如果使用的是西洋參總皂苷的話，正丁醇層中含有的主要成分是人參皂苷Rg1和人參皂苷Re，堿溶液層中含有的主要成分是人參皂苷Rb1、人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3；如果使用的是西洋參葉總皂苷的話，正丁醇層中含有的主要成分是擬人參皂苷F11、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re，堿溶液層中含有的主要成分是人參皂苷Rb3、人參皂苷Rd、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2，其中參皂苷Rb3、人參皂苷Rd、人參皂苷Rc含量較高。
上述方法中使用的堿可以是氫氧化鈉、氫氧化鉀等堿金屬氫氧化物，也可以是其它強(qiáng)堿性化合物，通常堿溶液用的是堿的水溶液，也可以根據(jù)樣品溶解性能的不同，采用有機(jī)溶劑與水的混合溶液。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1取人參葉總皂苷5g，加熱溶于20毫升10％的氫氧化鈉水溶液中，加入正丁醇20ml萃取，靜置，分層，分離水層(堿溶液層，下層)和正丁醇層(上層)。重復(fù)上述操作至水層不含人參皂苷Rg1、人參皂苷Re為止，合并正丁醇層。水層加水稀釋后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，85％乙醇解吸，回收乙醇，得二醇組人參皂苷1.1g，主要成分是人參皂苷Rd、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rc和人參皂苷Rb3等。正丁醇層回收正丁醇，加水溶解后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，85％乙醇解吸，回收乙醇，得三醇組人參皂苷2.6g，主要成分是人參皂苷F1、人參皂苷F2、三七皂苷Fe、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re。
實(shí)施例2
取人參總皂苷5g，加熱溶于20毫升20％氫氧化鉀水溶液中，加入正丁醇20ml萃取，靜置，分層，分離水層(下層)和正丁醇層(上層)。重復(fù)上述操作至水層不含人參皂苷Rg1、人參皂苷Re為止，合并正丁醇層。水層加水稀釋后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，80％乙醇解吸，回收乙醇，得二醇組人參皂苷2.3g，主要成分是人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb3和人參皂苷Rd。正丁醇層回收正丁醇，用水稀釋后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，80％乙醇解吸，回收乙醇，得三醇組人參皂苷1.2g，主要成分是人參皂苷Re和人參皂苷Rg1等三醇組人參皂苷。
實(shí)施例3取紅參總皂苷5g，加熱溶于20毫升10％(m/v)氫氧化鈉的乙醇溶液(10％，v/v)(10g氫氧化鈉溶于100ml10％乙醇溶液)中，加入正丁醇20ml萃取，靜置，分層，分離水層和正丁醇層。重復(fù)上述操作至水層不含人參皂苷Rg1、人參皂苷Re為止，合并正丁醇層。水層加水稀釋后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，75％乙醇解吸，回收乙醇，得二醇組人參皂苷2.4g，主要成分是人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rc、人參皂苷Rd和人參皂苷Rb3等。正丁醇層回收正丁醇，殘?jiān)盟芙夂筮^(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，75％乙醇解吸，回收乙醇，得三醇組人參皂苷1.5g，主要成分是人參皂苷Re和人參皂苷Rg1。
實(shí)施例4取西洋參葉總皂苷5g，加熱溶于20毫升5％氫氧化鈉水溶液中，加入正丁醇20ml萃取，靜置，分層，分離水層(堿溶液層，下層)和正丁醇層(上層)。重復(fù)上述操作至水層不含擬人參皂苷F11、人參皂苷Rg1、人參皂苷Re為止，合并正丁醇層。水層加水稀釋后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，95％乙醇解吸，回收乙醇，得二醇組人參皂苷2.4g，主要成分是人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc和人參皂苷Rd。正丁醇層回收正丁醇，產(chǎn)物用水溶解后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，95％乙醇解吸，回收乙醇，得三醇組人參皂苷1.7g，主要成分是擬人參皂苷F11、人參皂苷Re和人參皂苷Rg1。
實(shí)施例5取西洋參總皂苷5g，加熱溶于20毫升15％氫氧化鉀水溶液中，加入正丁醇20ml萃取，靜置，分層，分離水層(堿溶液層，下層)和正丁醇層(上層)。重復(fù)上述操作至水層不含人參皂苷Rg1、人參皂苷Re為止，合并正丁醇層。水層加水稀釋后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，55％乙醇解吸，回收乙醇，得二醇組人參皂苷2.1g，主要成分是人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Rc和人參皂苷Rd。正丁醇層回收正丁醇后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，55％乙醇解吸，回收乙醇，得三醇組人參皂苷1.3g，主要成分是人參皂苷Re和人參皂苷Rg1。
實(shí)施例6取三七總皂苷5g，加熱溶于20毫升5％氫氧化鈉水溶液中，加入正丁醇20ml萃取，靜置，分層，分離水層(下層)和正丁醇層(上層)。重復(fù)上述操作至水層不含人參皂苷Rg1、人參皂苷Re為止，合并正丁醇層。水層加水稀釋后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，85％乙醇解吸，回收乙醇，得二醇組人參皂苷2.1g，主要成分是人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb3和人參皂苷Rd。正丁醇層回收正丁醇后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，85％乙醇解吸，回收乙醇，得三醇組人參皂苷1.6g，主要成分是人參皂苷Rg1、人參皂苷Re和三七皂苷R1。
實(shí)施例7
取三七葉總皂苷5g，加熱溶于20毫升5％氫氧化鉀水溶液中，加入正丁醇20ml萃取，靜置，分層，分離水層(下層)和正丁醇層(上層)。重復(fù)上述操作至水層不含三七皂苷Fe為止，合并正丁醇層。水層加水稀釋后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，85％乙醇解吸，回收乙醇，得二醇組人參皂苷2.3g，主要成分是人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb3、人參皂苷Rd、人參皂苷Rb2和人參皂苷Rc。正丁醇層回收正丁醇后過(guò)AB-8大孔吸附樹(shù)脂吸附，水洗至中性，85％乙醇解吸，回收乙醇，得分組皂苷1.1g，主要成分是三七皂苷Fe。
本發(fā)明提供了一種能夠簡(jiǎn)便地將總皂苷分成兩組(主要是二醇組人參皂苷和三醇組人參皂苷)的分離方法，具有操作簡(jiǎn)單、成本低等優(yōu)點(diǎn)。利用本發(fā)明獲得的人參分組皂苷可以用來(lái)制備各種保健食品、藥物組合物及人參皂苷單體。
權(quán)利要求
1.一種人參分組皂苷的制備方法，其特征在于將總皂苷溶于堿溶液后用正丁醇萃取。
2.權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于萃取后正丁醇層主要含有R1值大于人參皂苷Rd的人參皂苷，堿溶液層主要含有R1值小于等于人參皂苷Rd的人參皂苷。
3.權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的總皂苷是人參總皂苷、人參葉總皂苷、三七總皂苷、三七葉總皂苷、西洋參總皂苷、西洋參葉總皂苷、紅參總皂苷的一種或一種以上。
4.權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征在于所述的堿是氫氧化鈉、氫氧化鉀。
5.權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于Rf值大于人參皂苷Rd的人參皂苷是人參皂苷F1、人參皂苷F2、人參皂苷F11、三七皂苷Fe、人參皂苷Rg1、人參皂苷Rg2、人參皂苷Re。
6.權(quán)利要求2所述的制備方法，其特征在于Rf值小于等于人參皂苷Rd的人參皂苷是人參皂苷Ra、人參皂苷Rc、人參皂苷Rb1、人參皂苷Rb2、人參皂苷Rb3、人參皂苷Ra1、人參皂苷Ra2、人參皂苷Ra3、人參皂苷Ro。
7.權(quán)利要求1所述的制備方法獲得的人參分組皂苷在制備藥物組合物、保健食品及人參皂苷單體中的應(yīng)用。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種人參分組皂苷的制備方法。把從人參屬植物(包括人參、西洋參、三七等)的不同部位中得到的總皂苷(人參總皂苷、紅參總皂苷、西洋參總皂苷、三七總皂苷、人參葉總皂苷、西洋參葉總皂苷、三七葉總皂苷等)溶于堿溶液后用正丁醇萃取，可以獲得二醇組人參皂苷和三醇組人參皂苷，或者含有一種或一種以上其他類型人參皂苷的二醇組人參皂苷和三醇組人參皂苷。
文檔編號(hào)A61K31/7048GK1869054SQ200610093609
公開(kāi)日2006年11月29日 申請(qǐng)日期2006年6月21日 優(yōu)先權(quán)日2006年6月21日
發(fā)明者李緒文, 桂明玉, 金永日 申請(qǐng)人:海南亞洲制藥有限公司