專利名稱：三環(huán)吲哚羥乙基胺衍生物和它們在治療阿爾茨海默病中的用途的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及具有Asp2(β-分泌酶、BACE1或Memapsin)抑制活性的新的羥乙基胺化合物、它們的制備方法、包含這些化合物的組合物以及它們在治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病尤其是阿爾茨海默病中的用途。
阿爾茨海默病為一種退行性腦病，其中老年斑形式的細胞外Aβ沉積為該疾病的關鍵性病理特點(Selkoe，D.J.(2001)Physiological Reviews81741-766)。老年斑的存在伴隨顯著的炎性反應以及神經元喪失。β-淀粉樣蛋白(Aβ)存在可溶的和不溶的纖絲形式并且特定的纖絲形式已經確定為主要的神經毒性物質(Vassar，R.and Citron，M.(2000)Neuron 27419-422)。此外，已經報道，癡呆與可溶淀粉樣蛋白水平而不是斑痕負荷更緊密地相關(Naslund，J.等(2000)J.Am.Med.Assoc.121571-1577；Younkin，S.(2001)Nat.Med.18-19)。已知Aβ通過被公知為Asp2(也已知為β-分泌酶、BACE1或Memapsin)的天冬氨酰蛋白酶裂解β淀粉樣蛋白前體蛋白(也被稱為APP)而產生(De Strooper，B.and Konig，G.(1999)Nature 402471-472)。
因此，已經有人建議抑制Asp2酶可降低APP處理的水平并因此降低在腦內發(fā)現的Aβ肽水平。因此，也認為抑制Asp2酶為治療阿爾茨海默病的有效治療靶標。
APP可被多種蛋白水解酶裂解(De Strooper，B.and Konig，G.(1999)Nature402471-472)。淀粉樣蛋白酶解通路(amyloidogenic pathway)的關鍵酶為Asp2(β-分泌酶)和γ-分泌酶，兩者都為天冬氨酰類蛋白酶，并通過這些酶裂解APP產生Aβ。非淀粉樣蛋白酶解的α-分泌酶通路，其阻止Aβ的形成，已經顯示可被許多蛋白酶催化，最佳的候選者為ADAM10、解聯蛋白和金屬蛋白酶。Asp1已經顯示出體外的α-和β-分泌酶活性。Asp1和Asp2的表達模式完全不同，Asp2在胰腺以及腦中表達最多，而Asp1表達發(fā)生在許多其他的外周組織中。Asp2敲出(knockout)小鼠顯示Asp2的缺乏破壞了Aβ的產生，并且還表明在這種動物模型中，內源性的Asp1不能代替Asp2的不足(Luo，Y.等(2001)Nat Neurosci.4231-232；Cai，H.等(2001)Nat Neurosci.4233-234；Roberds，S.L.等(2001)Hum.Mol.Genet.101317-1324)。
對于可在治療上用于治療阿爾茨海默病的藥劑，優(yōu)選所述的藥劑為Asp2酶的強效抑制劑，但是理想地其對Asp2的選擇性應該強于天冬氨酰蛋白酶家族中的其他酶，例如，組織蛋白酶D(Connor，G.E.(1998)Cathepsin D inHandbook of Proteolytic Enzymes，Barrett，A.J.，Rawlings，N.D.，&Woesner，J.F.(Eds)Academic Press London.pp828-836)。
WO 01/70672、WO 02/02512、WO 02/02505、WO 02/02506和WO03/040096(Elan Pharmaceuticals Inc.)記載了一系列具有β-分泌酶活性的羥乙基胺化合物，暗示其可用于治療阿爾茨海默病。
我們發(fā)現了新的一系列為Asp2酶的強效抑制劑的化合物，因此表明這些化合物具有有效用于治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物(β-amyloid deposits)為特征的疾病如阿爾茨海默病的潛力。
因此，根據本發(fā)明第一方面，我們提供了式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物 其中R1表示C1-3烷基或鹵素；R2表示C1-3烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基、鹵素、C1-3烷氧基、氨基、氰基或n羥基；m表示0-4的整數；n表示0-2的整數；A-B表示-NR5-SO2-或-NR5-CO-；R5表示氫、C1-6烷基、C3-6鏈烯基、C3-6炔基、C3-10環(huán)烷基、-C0-6烷基-芳基、-C0-6烷基-雜芳基、-C0-6烷基-雜環(huán)基、-C3-10環(huán)烷基-芳基或-C3-10環(huán)烷基-雜芳基；-W-表示-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、-C(H)＝C(H)-或-CH2-C(H)＝C(H)-；
X-Y-Z表示-C＝CR8-NR9-；R8表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基；R9表示氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10環(huán)烷基、-C0-6烷基-芳基、-C0-6烷基-雜芳基、-C0-6烷基-雜環(huán)基、-C3-10環(huán)烷基-芳基、-C3-10環(huán)烷基-雜芳基、-COOR12a、-OR12a、-CONR12aR13a、-SO2NR12aR13a、-COC1-6烷基、-COC3-10環(huán)烷基、-CO-芳基、-CO-雜芳基、-COC1-6烷基-芳基、-COC1-6烷基-雜芳基、-COC3-10環(huán)烷基-芳基、-COC3-10環(huán)烷基-雜芳基、-SO2C1-6烷基、-SO2C3-10環(huán)烷基、-SO2芳基、-SO2雜芳基、-SO2C1-6烷基-芳基、-SO2C1-6烷基-雜芳基、-SO2C3-10環(huán)烷基-芳基或-SO2C3-10環(huán)烷基-雜芳基(其中R12a和R13a獨立地表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基)；R3表示C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-C1-6烷基-C3-10環(huán)烷基、-C0-6烷基-芳基、-C0-6烷基-雜芳基或-C0-6烷基-雜環(huán)基；R4表示氫、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C3-10炔基、-C3-10環(huán)烷基、-C3-10環(huán)烯基(cycloalkenyl)、-C0-6烷基-芳基、-C0-6烷基-雜芳基、-C0-6烷基-雜環(huán)基、-C1-6烷基-C3-10環(huán)烷基、-C3-10環(huán)烷基-芳基、-C3-10環(huán)烷基-雜芳基、-C3-10環(huán)烷基-雜環(huán)基、-C3-10環(huán)烷基-C1-6烷基-芳基、-雜環(huán)基-芳基、-C1-6烷基-芳基-雜芳基、-C(RaRb)-CONH-C1-6烷基、-C(RaRb)-CONH-C3-10環(huán)烷基、-C2-6烷基-S-C1-6烷基、-C2-6烷基-NRcRd、-C(RaRb)-C1-6烷基、-C(RaRb)-C0-6烷基-芳基、-C(RaRb)-C0-6烷基-雜芳基、-C(RaRb)-C0-6烷基-雜環(huán)基、-C2-6烷基-O-C0-6烷基-芳基、-C2-6烷基-O-C0-6烷基-雜芳基或-C2-6烷基-O-C0-6烷基-雜環(huán)基；Ra和Rb獨立地表示氫、C1-6烷基或Ra和Rb與它們相連的碳原子一起可形成C3-10環(huán)烷基或雜環(huán)基；Rc和Rd獨立地表示氫、C1-6烷基、C3-10環(huán)烷基或Rc和Rd與它們相連的氮原子一起可形成含氮雜環(huán)基；其中所述烷基、鏈烯基、炔基和環(huán)烷基可任選被一個或多個(例如1-6個)下列基團所取代鹵素、C1-6烷基、C2-6炔基、C2-6鏈烯基、鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷氧基、氨基、氰基、羥基、-COOR22、-S-C1-6烷基或-C1-6烷基-NR6R7(其中R6和R7獨立地表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基)；和其中所述芳基、雜芳基或雜環(huán)基可任選被一個或多個(例如1-6個)下列基團所取代C1-6烷基、鹵素、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基、氧代、羥基、C1-6烷氧基、C2-6炔基、C2-6鏈烯基、氨基、氰基、硝基、-COOR22、-NR22COR23、-CONR22R23、-SO2NR22R23、-NR22R23、-C1-6烷基-NR22R23、-C1-6烷基-O-C1-6烷基或-C1-6烷?；?其中R22和R23獨立地表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基)。
可提及的具體化合物是下列那些化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，其中R5表示氫、C1-6烷基、C3-6鏈烯基、C3-6炔基、C3-10環(huán)烷基、芳基、雜芳基、-C1-6烷基-芳基、-C1-6烷基-雜芳基、-C3-10環(huán)烷基-芳基或-C3-10環(huán)烷基-雜芳基；和R9表示氫、C1-6烷基、C3-10環(huán)烷基、芳基、雜芳基、-C1-6烷基-芳基、-C1-6烷基-雜芳基、-C3-10環(huán)烷基-芳基、-C3-10環(huán)烷基-雜芳基、-COOR12a、-OR12a、-CONR12aR13a、-SO2NR12aR13a、-COC1-6烷基、-COC3-10環(huán)烷基、-CO-芳基、-CO-雜芳基、-COC1-6烷基-芳基、-COC1-6烷基-雜芳基、-COC3-10環(huán)烷基-芳基、-COC3-10環(huán)烷基-雜芳基、-SO2C1-6烷基、-SO2C3-10環(huán)烷基、-SO2芳基、-SO2雜芳基、-SO2C1-6烷基-芳基、-SO2C1-6烷基-雜芳基、-SO2C3-10環(huán)烷基-芳基或-SO2C3-10環(huán)烷基-雜芳基(其中R12a和R13a獨立地表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基)；和R3表示任選取代的C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-C1-6烷基-C3-10環(huán)烷基、-C1-6烷基-芳基、-C1-6烷基-雜芳基或-C1-6烷基-雜環(huán)基；和R4表示氫、任選取代的C1-10烷基、-C3-10環(huán)烷基、芳基、雜芳基、雜環(huán)基、-C1-6烷基-C3-10環(huán)烷基、-C3-10環(huán)烷基-芳基、-C3-10環(huán)烷基-C1-6烷基-芳基、-雜環(huán)基-芳基、-C1-6烷基-芳基-雜芳基、-C(RaRb)-CONH-C1-6烷基、-C(RaRb)-CONH-C3-10環(huán)烷基、-C1-6烷基-S-C1-6烷基、-C1-6烷基-NRcRd、-C(RaRb)-C1-6烷基、-C(RaRb)-C0-6烷基-芳基、-C(RaRb)-C0-6烷基-雜芳基、-C(RaRb)-C0-6烷基-雜環(huán)基、-C1-6烷基-O-C0-6烷基-芳基、-C1-6烷基-O-C0-6烷基-雜芳基或-C1-6烷基-O-C0-6烷基-雜環(huán)基；和Rc和Rd獨立地表示氫、C1-6烷基、C3-10環(huán)烷基或Rc和Rd與它們相連的氮原子一起可形成雜環(huán)基；和R1、R2、R3、R4、R5、R8、R9、R12a、R13a、Ra、Rb、Rc和Rd中的烷基的任選取代基包括一個或多個(例如1、2或3個)鹵素、C1-6烷氧基、氨基、氰基、羥基或-C1-6烷基-NR6R7(其中R6和R7獨立地表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基)；和其中R3、R4、R5和R9中的所述芳基、雜芳基或雜環(huán)基可任選被一個或多個(例如1、2或3個)下列基團所取代C1-6烷基、鹵素、-CF3、-OCF3、氧代、C1-6烷氧基、C2-6炔基、C2-6鏈烯基、氨基、氰基、硝基、-NR22COR23、-CONR22R23-C1-6烷基-NR22R23(其中R22和R23獨立地表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基)、-C1-6烷基-O-C1-6烷基、-C1-6烷?；蛄u基。
如在本文中作為基團或基團的一部分所用的術語‘Cx-y烷基’指的是含x至y個碳原子的直鏈或支鏈的飽和烴基。這種基團的實例包括甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基、叔丁基、正戊基、異戊基、新戊基或己基等。
如在本文中所用的術語‘Cx-y鏈烯基’指的是含一個或多個碳-碳雙鍵并含x至y個碳原子的直鏈或支鏈的烴基。這種基團的實例包括乙烯基、丙烯基、丁烯基、戊烯基或己烯基等。
如在本文中所用的術語‘Cx-y炔基’指的是含一個或多個碳-碳三鍵并含有x至y個碳原子的直鏈或支鏈的烴基。這種基團的實例包括乙炔基、丙炔基、丁炔基、戊炔基或己炔基等。
如在本文中所用的術語‘Cx-y烷氧基’指的是-O-Cx-y烷基，其中Cx-y烷基如文中所定義。這種基團的實例包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、丁氧基、戊氧基或己氧基等。
如在本文中所用的術語‘Cx-y環(huán)烷基’指的是含x至y個碳原子的飽和的單環(huán)烴環(huán)。這種基團的實例包括環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基或環(huán)辛基等。
如在本文中所用的術語‘Cx-y環(huán)烯基’指的是含一個或多個碳-碳雙鍵的x至y個碳原子的不飽和的非芳香單環(huán)烴環(huán)。這種基團的實例包括環(huán)丙烯基、環(huán)丁烯基、環(huán)戊烯基、環(huán)己烯基、環(huán)庚烯基或環(huán)辛烯基等。
如在本文中所用的術語‘鹵素’指的是氟、氯、溴或碘原子。
如在本文中所用的術語‘鹵代Cx-y烷基’指的是文中所定義的Cx-y烷基，其中至少一個氫原子被鹵素置換。這種基團的實例包括氟代乙基、三氟甲基或三氟乙基等。
如在本文中所用的術語‘鹵代Cx-y烷氧基’指的是文中所定義的Cx-y烷氧基，其中至少一個氫原子被鹵素置換。這種基團的實例包括二氟甲氧基或三氟甲氧基等。
如在本文中所用的術語‘芳基’指的是C6-12單環(huán)或二環(huán)烴環(huán)，其中至少一個環(huán)為芳環(huán)。這種基團的實例包括苯基、萘基或四氫萘基等。
如在本文中所用的術語‘雜芳基’是指含有1-4個選自氧、氮和硫雜原子的5-6員單環(huán)芳香族環(huán)或稠合的8-10員二環(huán)芳香族環(huán)。這種單環(huán)芳族環(huán)的實例包括噻吩基、呋喃基、呋咱基(furazanyl)、吡咯基、三唑基、四唑基、咪唑基、唑基、噻唑基、二唑基、異噻唑基、異唑基、噻二唑基、吡喃基、吡唑基、嘧啶基、噠嗪基、吡嗪基、吡啶基、三嗪基、四嗪基等。這種稠合芳族環(huán)的實例包括喹啉基、異喹啉基、喹唑啉基、喹喔啉基、蝶啶基、噌啉基、2，3-二氮雜萘基、二氮雜萘基(naphthyridinyl)、吲哚基、異吲哚基、氮雜吲哚基、中氮茚基、吲唑基、嘌呤基、吡咯并吡啶基、呋喃并吡啶基、苯并呋喃基、異苯并呋喃基、苯并噻吩基、苯并咪唑基、苯并唑基、苯并異唑基、苯并噻唑基、苯并異噻唑基、苯并二唑基、苯并噻二唑基等。
術語″雜環(huán)基″是指含有1-4個選自氧、氮或硫的雜原子的4-7員單環(huán)或稠合的8-12員二環(huán)，其可為飽和或部分不飽和的。這種單環(huán)的實例包括吡咯烷基、氮雜環(huán)丁烷基、吡唑烷基、唑烷基、哌啶基、哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基(thiomorpholinyl)、噻唑烷基、乙內酰脲基(hydantoinyl)、戊內酰胺基(valerolactamyl)、環(huán)氧乙烷基、氧雜環(huán)丁基、二氧戊環(huán)基、二氧雜環(huán)己基、氧硫雜環(huán)戊基(oxathiolanyl)、氧硫雜環(huán)己基(oxathianyl)、二噻烷基(dithianyl)、二氫呋喃基、四氫呋喃基、二氫吡喃基、四氫吡喃基、四氫吡啶基、四氫嘧啶基、四氫噻吩基、四氫噻喃基、二氮雜環(huán)庚烷基(diazepanyl)、氮雜環(huán)庚烷基(azepanyl)等。這種二環(huán)的實例包括二氫吲哚基、異二氫吲哚基、苯并吡喃基、奎寧環(huán)基、2，3，4，5-四氫-1H-3-苯并氮雜(benzazepine)、四氫異喹啉基等。
術語‘含氮雜環(huán)基’意指表示任何如上所定義的含有氮原子的雜環(huán)基。
優(yōu)選地，A-B表示-NR5-SO2-。
優(yōu)選地，R5表示氫、C1-6烷基(如甲基、乙基或異丙基)或-C0-6烷基-芳基(如苯基或芐基)，更優(yōu)選地表示C1-6烷基(如甲基、乙基或異丙基)，最優(yōu)選地表示甲基或乙基，特別是甲基。
優(yōu)選地，m表示0或1，更優(yōu)選地表示0。
優(yōu)選地，n表示0或1，更優(yōu)選地表示0。
優(yōu)選地，R8表示氫。
優(yōu)選地，R9表示氫或C1-6烷基(如乙基、丙基、異丙基或丁基)，更優(yōu)選地為乙基。
優(yōu)選地，W表示-(CH2)2-或-C(H)＝C(H)-，更優(yōu)選地表示-(CH2)2-。
優(yōu)選地，R3表示-C0-6烷基-芳基(如芐基)，其任選被一個或兩個鹵素原子(如氟或氯)所取代。更優(yōu)選地，R3表示未取代的芐基。
優(yōu)選地，R4表示-C1-10烷基(如乙基、丙基、1-甲基丙基、丁基、3-甲基丁基、2-乙基丁基、1-丙基丁基、3，3-二甲基丁基、1，5-二甲基己基或1，1，5-三甲基己基)，其任選被一個或多個鹵素(如2-氟乙基、3-氟丙基、2，2-二氟乙基、2，2，2-三氟乙基、3，3，3-三氟丙基或2，2，3，3，3-五氟丙基)、C1-6烷氧基(如甲氧基或丙氧基)、鹵代C1-6烷氧基(如2，2，2-三氟乙氧基)或-S-C1-6烷基(如-S-甲基、-S-乙基或-S-t-Bu)基團所取代；-C2-10鏈烯基(如丙烯基或丁烯基)，其任選被一個或多個C1-6烷基所取代(如2-甲基-2-丙烯-1-基或3-甲基-2-丁烯-1-基)；-C3-10炔基(如丙炔基、丁炔基或戊炔基)，其任選被一個或多個C1-6烷基所取代(如1，1-二甲基-2-丙炔-1-基)；-C3-10環(huán)烷基(如環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)己基、環(huán)庚基、環(huán)辛基、三環(huán)癸基或二環(huán)庚基)，其任選被一個或多個鹵素(如氟)、C1-6烷基(如甲基、乙基或丙基)或-C2-6炔基(如乙炔基)基團所取代；-C3-10環(huán)烯基(如環(huán)戊烯基)；-C1-6烷基-C3-10環(huán)烷基(如-CH2-環(huán)丙基或-(CH2)2-環(huán)己基)；-C0-6烷基-芳基(如芐基或苯基)，其任選被一個或多個鹵素(如氯)、氰基、鹵代C1-6烷氧基(如-OCF3)、鹵代C1-6烷基(如-CF3)、C1-6烷基(如甲基)、C1-6烷氧基(如甲氧基)或-NR22R23(如-N(Me)2)基團所取代；-C0-6烷基-雜芳基(如-CH2-吡唑基、-CH2-吡啶基、-CH2-噻吩基或-CH2-異唑基)，其任選被一個或多個鹵素、氰基、鹵代C1-6烷氧基(如-OCF3)、鹵代C1-6烷基(如-CF3或三氟乙基)、C1-6烷基(如甲基或乙基)或C1-6烷氧基(如甲氧基)基團所取代；-C(RaRb)-CONH-C3-10環(huán)烷基(如-C(RaRb)-CONH-環(huán)己基)；-C3-10環(huán)烷基-芳基；或-C0-6烷基-雜環(huán)基(如四氫吡喃基)，其任選被一個或多個C1-6烷基(如甲基)所取代。
優(yōu)選地，Ra和Rb獨立地表示氫、甲基、或Ra和Rb與它們相連的碳原子一起形成環(huán)丙基或環(huán)己基。更優(yōu)選地，Ra和Rb都表示氫。
根據本發(fā)明優(yōu)選的化合物包括如下所示的實施例E1-E90，或其藥學上可接受的鹽。
式(I)化合物可形成其酸加成鹽。應當理解，當用于藥物的時候，式(I)化合物的鹽應該為藥學上可接受的。合適的藥學上可接受的鹽對本領域的普通技術人員而言是顯而易見的，并且包括在J.Pharm.Sci.，1977，66，1-19中描述的那些鹽類，如與無機或有機酸形成的酸加成鹽如鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、磷酸鹽、乙酸鹽、苯甲酸鹽、檸檬酸鹽、硝酸鹽、琥珀酸鹽、乳酸鹽、酒石酸鹽、富馬酸鹽、馬來酸鹽、1-羥基-2-萘甲酸鹽、palmoates、甲磺酸鹽、對甲苯磺酸鹽、萘磺酸鹽、甲酸鹽或三氟乙酸鹽。本發(fā)明在其范圍內包括所有可能的化學計量的和非化學計量的形式。
式(I)化合物可制備成結晶或非結晶的形式，并且如果為結晶，可任選被溶劑化，如為水合物。本發(fā)明包括在其范圍內化學計量的溶劑化物(如水合物)以及包含變量溶劑(如水)的化合物。
一些式(I)化合物能以立體異構體的形式(如非對映異構體和對映異構體)存在，并且本發(fā)明延伸至這些立體異構體形式中的每一種以及其混合物包括外消旋體。不同的立體異構體形式可利用常規(guī)的方法從其他的形式中分離出來，或任何指定的異構體可利用立體特異性或不對稱合成得到。本發(fā)明還延伸至任何互變異構形式及其混合物。優(yōu)選地，式(I)化合物為式(Ia)的單一對映異構體形式 式(I)化合物及其鹽和溶劑化物可根據下文中描述的方法進行制備，構成了本發(fā)明的另一方面。
根據本發(fā)明制備式(I)化合物的方法，所述方法包括(a)使式(II)化合物或其活化的和/或任選保護的衍生物與式(III)化合物反應， 在式(II)中，R1、R2、m、n、A、B、W、X、Y和Z如上所定義， 在式(III)中，R3和R4如上所定義；或(b)制備式(I)化合物，包括用合適的醛或酮對式(IV)化合物進行還原烷基化作用， 在式(IV)中，R1、R2、R3、m、n、A、B、W、X、Y和Z如上所定義；或(c)對保護的式(I)化合物進行脫保護；并且任選之后(d)將該式(I)化合物轉化成其它的式(I)化合物。
若式(II)化合物為活化衍生物(如通過羧酸活化為酰氯、混合酸酐、活化酯、O-?；?異脲或其它類型)時，方法(a)典型地包括用胺處理所述的活化衍生物(Ogliaruso，M.A.；Wolfe，J.F.in The Chemistry of Functional Groups(Ed.Patai，S.)Suppl.BThe Chemistry of Acid Derivatives，Pt.l(John Wiley和Sons，1979)，pp 442-8；Beckwith，A.L.J.in The Chemistry of Functional Groups(Ed.Patai，S.)Suppl.BThe Chemistry of Amides(Ed.Zabricky，J.)(John Wiley andSons，1970)，p 73ff。式(II)的酸和胺優(yōu)選在活化劑如1-(二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亞胺鹽酸鹽(EDC)和1-羥基苯并三唑(HOBT)或O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N′，N′-四甲基脲六氟磷酸鹽(HATU)存在下反應。
若式(II)化合物為羧酸時，方法(a)典型地包括使用水溶性的碳化二亞胺、HOBT以及合適的堿如三級烷基胺或吡啶在合適的溶劑如DMF中并在合適的溫度下，如在0℃和室溫之間反應。
方法(b)典型地包括使用三乙酸基硼氫化鈉在合適的溶劑如乙醇、二氯甲烷和1，2-二氯乙烷存在下并在合適的溫度，如在0℃和室溫之間反應。
在方法(c)中，保護基的實例以及去除保護基的方法可見于T.W.Greene和P.G.M.Wuts‘Protective Groups in Organic Synthesis’(J.Wiley和Sons，3rdEd.1999)。合適的胺保護基包括芳基磺?；?如甲苯磺酰基)、酰基(如乙?；?、氨基甲?；?如芐氧基羰基或叔丁氧基羰基)和芳基烷基(如芐基)，其可合適地通過水解或氫解去除。其他合適的胺保護基包括三氟乙?；?-COCF3)，其可通過堿催化水解去除。合適的羥基保護基可為基于甲硅烷基的基團如叔丁基二甲基甲硅烷基，其可利用標準的方法去除，例如使用酸如三氟乙酸或氫氯酸或氟源如氟化四正丁基銨。
方法(d)可使用常規(guī)的互變步驟進行，如差向異構化、氧化、還原、烷基化、芳香族取代、酯水解、酰胺鍵形成或去除以及磺?；?。例如，其中W表示-C(H)＝C(H)-或-CH2-C(H)＝C(H)-的式(I)化合物可通過催化氫化文中所述的化合物轉化為其中W表示-(CH2)2-或-(CH2)3-的式(I)化合物。
其中W表示-C(H)＝C(H)-或-CH2-C(H)＝C(H)-的式(II)化合物和/或其活化的以及任選保護的衍生物可按照下述方法進行制備
其中R1、R2、m、n、A、B、X、Y和Z如上所定義，P1表示合適的基團如C1-6烷基，P2表示合適的基團如-COC1-6烷基、-CO2C1-6烷基或-SO2芳基，L1和L2獨立地表示合適的離去基如鹵素原子(如氯)，并且Hal表示鹵素原子，如溴或碘。
步驟(i)典型地包括在合適的溫度如室溫下，在合適的堿如吡啶存在下，在合適的試劑如DMAP和合適的溶劑如二氯甲烷存在下，使式(V)化合物與式(VI)a或(VI)b化合物反應。
步驟(ii)典型地包括在合適的溫度如室溫下，在合適的溶劑如二甲基甲酰胺存在下，使用鹵素如溴。
步驟(iii)典型地包括使用標準的試驗方法引入N-保護基。例如，在合適的溶劑如吡啶存在下，在合適的溫度如室溫下，可通過用乙酸酐處理引入乙酸酯基團(acetate group)。
步驟(iv)典型地包括用于將乙烯基鹵化物加成至烯烴的標準步驟，如在合適的溫度如65℃下，使用四丁基氯化銨、乙酸鈀和三鄰甲苯基膦在合適的溶劑如四氫呋喃中的混合物。
步驟(v)典型地包括使用標準的脫保護條件(例如用合適的胺如三乙胺，在合適的溶劑如乙醇中，在合適的溫度如80℃下進行處理)，并隨后使用標準的方法(例如用堿如氫化鈉和烷化劑如碘乙烷，在合適的溶劑如二甲基甲酰胺中，在合適的溫度如室溫下進行處理)進行Z的衍生化。
步驟(vi)典型地包括用于將羧酸酯轉化為酸的標準步驟，如在合適的溶劑如甲醇中，在合適的溫度如50℃下，使用合適的氫氧化鹽(hydroxide salt)如鋰或鈉鹽。在叔丁酯的情況下，此轉化可通過使用合適的酸如三氟乙酸，在合適的溶劑如二氯甲烷中，在合適的溫度如0℃下來完成。然后可按照如上方法(a)中所述的制備得到式(II)化合物的活化的衍生物。
其中W表示-(CH2)2-或-(CH2)3-的式(II)化合物可按照與上述過程相同的方式制備得到，除了需要在步驟(vi)之前氫化式(XI)化合物的另外的步驟。該步驟典型地包括使用標準的還原條件如在合適的溶劑如甲醇中，在合適的溫度如回流下，用10％披鈀木炭和甲酸銨處理。
其中W表示-C(H)＝C(H)-、A-B表示-NR5-SO2-并且m表示0的式(II)化合物也可根據下面的方法制備得到
其中R2、n、R5、X、Y和Z如上所定義，并且P3表示合適的基團如C1-6烷基。
步驟(i)典型地包括在合適的堿如吡啶存在下，在合適的試劑如DMAP和合適的溶劑如二氯甲烷存在下，在合適的溫度如室溫下，使式(V)化合物與(氯磺酰基)乙酸甲酯反應。
步驟(ii)典型地包括在合適的堿如碳酸鉀和合適的溶劑如二甲基甲酰胺存在下，在合適的溫度如室溫下與烷基鹵化物如碘甲烷反應。
步驟(iii)典型地包括在合適的溶劑如二甲基甲酰胺存在下，在合適的溫度如60℃下，與通過使三氯氧化磷和二甲基甲酰胺混合到一起而制得的試劑反應。
步驟(iv)典型地包括在合適的堿如氫化鈉和合適的溶劑如二甲基甲酰胺存在下，在合適的溫度如室溫下，與烷基鹵化物如碘乙烷反應。
步驟(v)典型地包括用于將羧酸酯轉化為酸的標準步驟，如在合適的溶劑如甲醇中，在合適的溫度如65℃下，使用合適的氫氧化鹽如鋰或鈉鹽。
步驟(vi)典型地包括用于脫羧化的標準步驟，例如在合適的溶劑如二烷中，在合適的溫度如100℃下，使用酸如氯化氫進行處理。然后可按照如上方法(a)中所述的制備得到式(II)化合物的活化的衍生物。
式(III)化合物可根據下面的方法制備得到 其中R3和R4如上所定義，并且P4表示合適的胺保護基團，如叔丁氧基羰基。
步驟(i)典型地包括將式(XVII)化合物與式NH2R4化合物在合適的溶劑如乙醇存在下在合適的溫度，如回流溫度下反應。
步驟(ii)典型地包括使用如上方法(c)中所述的合適的脫保護反應，如當P4表示叔-丁氧基羰基的時候，脫保護典型地包括使用三氟乙酸在合適的溶劑如二氯甲烷存在下在合適的溫度如介于0℃和室溫之間進行反應。
式(IV)化合物可按照下述方法進行制備
其中R1、R2、R3、m、n、A、B、W、X、Y、Z和P4如上所定義，并且P5表示與P4不同的合適的胺保護基團，如-COOCH2-苯基。
步驟(i)典型地包括將式(XVII)化合物在氨水中在合適的溶劑如乙醇存在下在合適的溫度，如回流溫度下反應。
當P5表示-COOCH2-苯基的時候，步驟(ii)典型地包括在合適的堿如三乙基胺，合適的溶劑如二甲基甲酰胺存在下在合適的溫度，如介于0℃和室溫之間使用ClCOOCH2-苯基。
步驟(iii)典型地包括使用如上方法(c)中所述的合適的脫保護反應，如當P4表示叔丁氧基羰基的時候，脫保護典型地包括在合適的溶劑如二氯甲烷存在下，在合適的溫度如介于0℃和室溫之間使用三氟乙酸。
步驟(iv)典型地包括使式(XXI)化合物與式(II)化合物在水溶性碳二亞胺和HOBT存在下進行反應。
步驟(v)典型地包括使用如上方法(c)中所述的合適的脫保護反應，如當P5表示-COOCH2-苯基的時候，脫保護典型地包括在合適的溶劑如水和乙醇存在下以及在合適的氫氣源如甲酸銨存在下在合適的溫度如60℃下，使用合適的催化劑，如鈀。
式(V)、(VI)a、(VI)b和(XVII)化合物是市售購得的或可使用標準試驗方法由市售購得的化合物制備得到。
因此，本發(fā)明另一方面提供了式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物用作藥物，尤其是用于治療患有以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病的患者。
根據本發(fā)明另一方面，提供了式(I)化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑化物在制備用于治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病的患者的藥物中的用途。
在另一個或替代性的方面，提供了一種治療患有以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病的人或動物對象的方法，所述的方法包括對所述的人或動物對象給藥有效量的式(I)化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑化物。
本發(fā)明另一方面，因此提供了一種包括式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物的藥物組合物，其用于治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病。
本領域的普通技術人員應當理解，這里的治療延伸至以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病的預防以及治療。
根據本發(fā)明的化合物可以任何常規(guī)的方式進行配制以用于給藥，并且因此本發(fā)明還在其范圍內包括用于治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病的藥物組合物，所述的組合物包括式(I)化合物或其生理上可接受的鹽或溶劑化物以及，如果需要，與一種或多種生理上可接受的稀釋劑或載體一起。
應當理解以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病包括阿爾茨海默病、輕度認知損害(mild cognitive impairment)、唐氏綜合征(Down′s syndrome)、帶有Dutch型β-淀粉樣變的遺傳性腦出血(hereditarycerebral haemorrhage with β-amyloidosis of the Dutch type)、腦β-淀粉樣蛋白血管病(cerebral β-amyloid angiopathy)以及多種類型的退行性癡呆(degenerativedementias)，如與帕金森病、進行性核上性麻痹(progressive supranuclearpalsy)、皮質基質病變(cortical basal degeneration)以及彌散型Lewis體型的阿爾茨海默病(diffuse Lewis body type of Alzheimer′s disease)有關的那些疾病。
最優(yōu)選地，所述的以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病為阿爾茨海默病。
這里還提供了一種制備所述的藥用制劑的方法，包括將各成分混和。
式(I)化合物可與其他的治療劑組合(combination)。這種其他治療劑的合適實例可為乙酰膽堿酯酶抑制劑(如四氫氨基吖啶(tetrahydroaminoacridine)、鹽酸多奈哌齊(donepezil hydrochloride)和雷司替明(rivastigmine))、γ分泌酶抑制劑、消炎藥(如環(huán)氧合酶II抑制劑)、抗氧化劑(如維生素E和ginkolidesor)、斯坦類(statins)或p-糖蛋白(P-gp)抑制劑(如環(huán)孢霉素A(cyclosporin A)、維拉帕米(verapamil)、他莫昔芬(tamoxifen)、奎尼定(quinidine)、維生素E-TGPS、利托那韋(ritonavir)、醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)、黃體酮、雷怕霉素(rapamycin)、10，11-methanodibenzosuberane、吩噻嗪(phenothiazines)、吖啶衍生物如GF120918、FK506、VX-710、LY335979、PSC-833、GF-102和918)。
本發(fā)明的化合物可例如，配制成適于口服、吸入、鼻內、口腔(buccal)、腸內、腸胃外、局部、舌下、鞘內或直腸給藥，優(yōu)選地用于口服給藥。
用于口服給藥的片劑和膠囊可包含常規(guī)的賦形劑如粘合劑，例如糖漿、阿拉伯膠、明膠、山梨醇、黃蓍膠、淀粉膠漿、纖維素或聚乙烯基吡咯烷酮；填充劑，例如，乳糖、微晶纖維素、糖、玉米淀粉、磷酸鈣或山梨醇；潤滑劑，例如，硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、聚乙二醇或硅土；崩解劑，例如，馬鈴薯淀粉、交聯羧甲纖維素鈉或淀粉羥乙酸鈉；或濕潤劑如月桂基硫酸鈉。片劑可根據本領域中公知的方法進行包衣?？诜后w制劑可為，例如，水性或油性懸浮液、溶液、乳劑、糖漿劑或酏劑的形式，或可以干產物的形式存在，在使用前用水或其他合適的媒介(vehicles)重建(constitution)。所述的液體制劑可包含常規(guī)的添加劑如助懸劑，例如，山梨醇糖漿、甲基纖維素、葡萄糖/食糖糖漿(sugar syrup)、明膠、羥基甲基纖維素、羧基甲基纖維素、硬脂酸鋁凝膠或氫化食用脂肪；乳化劑，例如，卵磷脂、去水山梨糖醇單-油酸酯或阿拉伯膠；非水性媒介(可包括食用油)，例如杏仁油、分餾椰子油(fractionated coconut oil)、油酯、丙二醇或乙醇；或防腐劑，例如，對-羥基苯甲酸甲酯或丙酯或山梨酸。適當的時候，該制劑還可包含緩沖鹽、調味劑、著色劑和/或甜味劑(如甘露醇)。
對于口腔給藥，該組合物可按照常規(guī)的方式配制成片劑或錠劑的形式。
所述的化合物還可配制成栓劑，如包含常規(guī)的栓劑基質如可可脂或其他的甘油酯。
根據本發(fā)明的化合物也可配制成用于快速濃注(bolus injection)或連續(xù)輸注的腸胃外給藥的形式，并可以單位劑型的形式提供，例如為安瓿、小瓶、小體積的輸液(small volume infusions)或預-填的注射器(pre-filled syringes)的形式，或為含有添加的防腐劑的多劑量容器的形式。組合物可為在水或非水媒介中的溶液、懸浮液或乳劑的形式，并且可包含制劑物質如抗氧化劑、緩沖劑、抗菌劑和/或張力調節(jié)劑?；蛘?，活性成分可為粉劑的形式，用于在使用前用合適的媒介如無菌、無熱原水重建(constitution)。干燥的固體制劑可通過將無菌的粉末通過無菌的方式填充到單個的無菌容器中或通過將無菌的溶液以無菌的方式充填到各個容器中并凍干而進行配制。
當本發(fā)明的化合物進行局部給藥的時候，它們可以乳劑、軟膏劑或貼劑的形式提供。
取決于給藥方法，組合物可含有0.1％～99％重量，優(yōu)選地含有10～60％重量的活性物質。
用于治療前述疾病的化合物的劑量可按常規(guī)的方式隨疾病的嚴重程度、患者的體重以及其他類似的因素而變。但是，作為一般性的指導，合適的單位劑量可為0.05～3000mg；并且所述的單位劑量可以每天多于一次給藥，例如每天一、二、三或四次(優(yōu)選地一次或兩次)給藥；并且所述的治療可延長至數周、數月或數年。
在本申請中引用的所有的出版物，包括但不限于專利和專利申請，在這里引入作為參考如同每篇具體地以及單獨地引入作為參考一樣公開充分。
實施例中間體的制備說明14-甲基-3，5-二硝基苯甲酸甲酯(D1)在攪拌下將亞硫酰氯(72g，615mmol)滴加到4-甲基-3，5-二硝基苯甲酸(市售購自Aldrich)(100g，440mmol)的甲醇(300ml)懸浮液中。將生成的溶液在室溫下靜置過夜，并然后將形成的沉淀物過濾收集。將濾液用冷的甲醇洗，得到白色固體的標題化合物(D1)(104g，430mmol)，將其不需進一步純化而用于下一步驟。
說明24-[(E)-2-(二甲基氨基)乙烯基]-3，5-二硝基苯甲酸甲酯(D2)將4-甲基-3，5-二硝基苯甲酸甲酯(D1)(40g，170mmol)的二甲基甲酰胺(50ml)溶液用N，N-二甲基甲酰胺二甲基縮醛(dimethyl acetal)(50ml，380mmol)處理，并將生成的混合物在50℃下加熱1小時。然后蒸發(fā)溶劑，并將殘余物用乙醚/異己烷(1∶1)研磨，得到暗紅色固體的粗品標題化合物(D2)(40g，136mmol)。將其不需進一步純化而用于后面的反應中。
說明34-氨基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D3)在氮氣氛下，將4-[(E)-2-(二甲基氨基)乙烯基]-3，5-二硝基苯甲酸甲酯(D2)(10.0g，34mmol)的甲醇(150ml)溶液用甲酸銨(21.4g，340mmol)和濕的(50％水)10％披鈀碳(3g)處理。然后將混合物在50℃下加熱1小時。過濾混合物，并蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶于乙酸乙酯(200ml)中，并用飽和的碳酸氫鈉水溶液(100ml)洗。然后將有機相經硫酸鎂干燥，過濾并真空濃縮。將殘余物用乙醚/異己烷(1∶1)研磨，得到淡粉紅色固體的標題化合物(D3)(5.0g，26mmol)，將其不需進一步純化而用于后面的反應中。[M+H]+＝191.1，RT＝2.17分鐘。
說明44-[(乙烯基磺酰基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D4)向4-氨基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D3)(2.0g，10.5mmol)的二氯甲烷(100ml)溶液中加入三乙胺(2.13g，21mmol)，并將混合物逐漸加熱以溶解任何殘留的固體。然后將2-氯-1-乙磺酰氯(1.63g，10mmol)滴加到混合物中，并繼續(xù)攪拌30分鐘。在此時加入更多量的2-氯-1-乙磺酰氯(0.39g，2.4mmol)，并另外再繼續(xù)攪拌30分鐘。將混合物依序用2M氯化氫水溶液(50ml)和飽和的碳酸氫鈉水溶液(50ml)洗，并然后將有機相經硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)。將殘余物用乙醚/異己烷(1∶1)研磨，得到棕色固體的粗品標題化合物(D4)(1.6g，5.7mmol)，將其不需進一步純化而用于后面的反應中。[M+H]+＝281.1，RT＝2.23分鐘。
說明54-[(乙烯基磺?；?(甲基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D5)在室溫下，將4-[(乙烯基磺?；?氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D4)(5.0g，17.9mmol)的二甲基甲酰胺(50ml)溶液用碳酸鉀(2.48g，18mmol)和碘甲烷(1.12ml，18mmol)處理90分鐘。將乙醚(200ml)加入到混合物中，并然后將混合物依序用2M氯化氫水溶液(100ml)、飽和的碳酸氫鈉水溶液(100ml)和水(3×100ml)洗。然后將水相經硫酸鎂干燥，并然后過濾并真空蒸發(fā)，得到棕色泡沫狀的標題化合物(D5)(4.5g，15.3mmol)。將其不需進一步純化而用于后面的反應中。[M+H]+＝295.1，RT＝2.48分鐘。
說明64-[(乙烯基磺酰基)(乙基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D6)按照用于合成(D5)的類似方法，但使用碘乙烷代替碘甲烷制備得到4-[(乙烯基磺?；?(乙基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D6)。[M+H]+＝309.1，RT＝2.65分鐘。
說明73-溴-4-[(乙烯基磺酰基)(甲基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D7)用15分鐘的時間，通過滴加溴(0.12ml，2.3mmol)的二甲基甲酰胺(5ml)溶液來處理4-[(乙烯基磺?；?(甲基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D5)(0.700g，2.4mmol)的二甲基甲酰胺(20ml)溶液。然后真空蒸發(fā)溶劑，并將殘余物溶于(taken up)乙酸乙酯(50ml)中，并用水(2×50ml)洗。然后將有機相經硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)，得到淡棕色泡沫狀的標題化合物(D7)(0.800g，2.2mmol)。[M+H]+＝373.0，RT＝2.74分鐘。
說明83-溴-4-[(乙烯基磺?；?(乙基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D8)按照所述用于合成(D7)的類似方法，但使用4-[(乙烯基磺酰基)(乙基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D6)代替4-[(乙烯基磺?；?(甲基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D5)，制備得到3-溴-4-[(乙烯基磺?；?(乙基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D8)。[M+H]+＝389.1，RT＝2.89分鐘。
說明91-乙?；?3-溴-4-[(乙烯基磺?；?(甲基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D9)將3-溴-4-[(乙烯基磺?；?(甲基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D7)(0.800g，2.2mmol)的吡啶(5ml)溶液用乙酸酐(1ml，10.6mmol)處理，并將生成的混合物在室溫下攪拌過夜。將混合物用乙酸乙酯(50ml)稀釋，并依序用2M氯化氫水溶液(50ml)和飽和的碳酸氫鈉水溶液(50ml)洗。將有機相經硫酸鎂干燥，然后過濾并真空蒸發(fā)。將粗產物由乙酸乙酯/異己烷重結晶，得到粉紅色固體的標題化合物(D9)(0.510g，1.23mmol)。[M+H]+＝417.0，RT＝2.85分鐘。
說明101-乙?；?3-溴-4-[(乙烯基磺酰基)(乙基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D10)按照所述用于合成(D9)的類似方法，但使用3-溴-4-[(乙烯基磺?；?(乙基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D8)代替3-溴-4-[(乙烯基磺?；?(甲基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D7)，制備得到1-乙酰基-3-溴-4-[(乙烯基磺?；?(乙基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D10)。RT＝3.01分鐘。
說明111-乙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并(thiazepino)[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(D11)在氮氣氛下，將1-乙?；?3-溴-4-[(乙烯基磺酰基)(乙基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D10)(0.400g，0.94mmol)的四氫呋喃(30ml)溶液用四丁基氯化銨(0.560g，2.0mmol)、雙乙酸鈀(0.220g，1.0mmol)和三鄰甲苯基膦(0.304g，2.0mmol)處理。將混合物在回流下加熱30分鐘。蒸發(fā)溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)中，并依序用2M氯化氫水溶液(50ml)和飽和的碳酸氫鈉水溶液(50ml)洗。將有機相經硫酸鎂干燥，然后過濾并真空蒸發(fā)?，F將殘余物溶于乙醇(50ml)中，并用三乙胺(0.5ml，3.5mmol)處理。然后將混合物在回流下加熱15分鐘，隨后冷卻并按照如上進行后處理(workup)，得到粗產物，將其由乙酸乙酯/異己烷結晶，得到棕色固體的標題化合物(D11)(0.280g，0.92mmol)，將其不需進一步純化而用于后面的反應中。[M+H]+＝307.1，RT＝2.54分鐘。
說明121-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(D12)按照所述用于合成(D11)的類似方法，但使用1-乙?；?3-溴-4-[(乙烯基磺酰基)(甲基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D9)代替甲基-1-乙?；?3-溴-4-[(乙烯基磺酰基)(乙基)氨基]-1H-吲哚-6-羧酸酯(D10)，制備得到1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(D12)。[M+H]+＝293.1，RT＝2.37分鐘。
說明131-甲基-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(D13)將1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(D12)(0.400g，1.37mmol)的甲醇(50ml)溶液用甲酸銨(0.800g，12.7mmol)和10％披鈀木炭(0.4g)處理，并將混合物在回流下加熱3.5小時。然后將混合物過濾并真空蒸發(fā)。將殘余物溶于乙酸乙酯(100ml)中，并用飽和的碳酸氫鈉水溶液(50ml)洗，然后經硫酸鎂干燥。過濾并真空蒸發(fā)，得到棕色固體的標題化合物(D13)(0.220g，0.75mmol)。將其不需進一步純化而用于后面的反應中。[M+H]+＝295.1，RT＝2.32分鐘說明144-({[2-(甲氧基)-2-氧代乙基]磺?；鶀氨基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D14)將4-氨基-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D3)(9g，47mmol)的二氯甲烷(180ml)溶液用吡啶(5.8ml)和DMAP(0.577g)處理，并然后滴加(氯磺?；?乙酸甲酯[56146-83-9](8.63g，50mmol)。將生成的黑色混合物在室溫下攪拌過夜。加入另外量的(氯磺?；?乙酸甲酯(1.2g)，并將混合物在室溫下再攪拌48小時。將混合物用乙酸乙酯稀釋，并依序用飽和的碳酸氫鈉水溶液和鹽水洗，經無水硫酸鈉干燥，并真空濃縮。將生成的固體用乙醚研磨，得到棕色固體的粗品標題化合物(D14)(9.37g)。[M-H]-325.2，RT＝2.14分鐘說明154-(甲基{[2-(甲氧基)-2-氧代乙基]磺酰基}氨基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D15)將4-({[2-(甲氧基)-2-氧代乙基]磺?；鶀氨基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D14)(13.4g，41.1mmol)的二甲基甲酰胺(145ml)溶液用碳酸鉀(19.8g)和碘甲烷(2.6ml)處理，并在室溫下攪拌過夜。蒸發(fā)混合物，并將殘余物用乙酸乙酯稀釋，并用飽和的碳酸氫鈉水溶液洗，然后將乙酸乙酯層經硫酸鎂干燥，并真空濃縮。將該粗物質通過biotage(用乙酸乙酯∶己烷洗脫)純化，并將生成的固體用乙醚研磨，得到橙色固體的標題化合物(D15)(4.93g)。[M-H]-＝339.2，RT＝2.38分鐘說明161-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D16)在0℃下，將三氯氧化磷(1.4ml)滴加到二甲基甲酰胺(4.5ml)中，并將混合物再攪拌15分鐘。然后將混合物用4-(甲基{[2-(甲氧基)-2-氧代乙基]磺?；鶀氨基)-1H-吲哚-6-羧酸甲酯(D15)(4.93g，14.5mmol)的二甲基甲酰胺(18ml)溶液處理，并在50℃下加熱1小時。將更多量的三氯氧化磷(0.7ml)加入至混合物中，并在60℃下繼續(xù)加熱過夜。冷卻該混合物，并通過蒸發(fā)除去過量的三氯氧化磷和二甲基甲酰胺。將殘余物用二氯甲烷(500ml)和水(200ml)小心地稀釋，并加入2N氫氧化鈉水溶液直至水層的pH為7。過濾收集沉淀的固體并放置一邊(set aside)。分離二氯甲烷層，并然后用水洗，并經無水硫酸鈉干燥。過濾并蒸發(fā)二氯甲烷層，得到黃色固體，將其與先前放置一邊的固體混合。將該固體用二氯甲烷和乙醚洗，得到黃色固體的標題化合物(D16)(2.85g)。[M+H]+＝351.1，RT＝2.27分鐘說明176-乙基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D17)將1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D16)(2.67g，7.63mmol)的二甲基甲酰胺(11ml)溶液用氫化鈉(0.305g，60％在油中的懸浮液)處理，并在室溫下攪拌10分鐘。然后將混合物用碘乙烷(1.22ml)處理，并在室溫下攪拌過夜。將混合物用乙酸乙酯稀釋，并用飽和的碳酸氫鈉水溶液、并然后用鹽水洗。將在此階段沉淀的固體過濾收集，并用乙醚和水洗，并然后放置一邊。將剩余的有機部分經硫酸鎂干燥，并真空濃縮。將粗物質通過用乙醚研磨純化，并將生成的固體與早先收集的固體混合，得到黃色固體的標題化合物(D17)(2.57g)。[M+H]+＝379.1，RT＝2.61分鐘說明181-甲基-6-(1-甲基乙基)-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D18)按照所述用于制備化合物(D17)的類似方法，但使用2-碘丙烷代替碘乙烷與1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D16)進行反應，得到黃色固體的標題化合物(D18)。[M+H]+＝391.2，RT＝2.86分鐘說明191-甲基-6-丙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D19)按照所述用于制備化合物(D17)的類似方法，但使用1-溴丙烷代替碘乙烷與1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D16)進行反應，得到黃色固體的標題化合物(D19)。[M+H]+＝393.2，RT＝2.87分鐘說明206-丁基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D20)按照所述用于制備化合物(D17)的類似方法，但使用1-碘丁烷代替碘乙烷與1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D16)進行反應，得到黃色固體的標題化合物(D20)。[M+Na]+＝429.18，RT＝3.04分鐘說明216-乙基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸2，2-二氧化物(D21)將6-乙基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D17)(2.57g，6.79mmol)溶于甲醇(50ml)中，并用2N氫氧化鈉水溶液(50ml)處理，并然后在回流下加熱2小時。冷卻混合物，并真空蒸發(fā)，并然后將殘余物溶于乙酸乙酯中，并用2M氯化氫水溶液酸化。過濾收集該沉淀物，并用水、然后用乙醚充分洗滌。真空干燥，得到黃色固體的標題化合物(D21)(2.02g)。[M-H]-349.2，RT＝1.82分鐘說明221-甲基-6-(1-甲基乙基)-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸2，2-二氧化物(D22)按照所述用于制備化合物(D21)的類似方法，與1-甲基-6-(1-甲基乙基)-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D18)反應，得到樹膠狀標題化合物(D22)。[M-H]-＝363.2，RT＝2.20分鐘說明231-甲基-6-丙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸2，2-二氧化物(D23)按照所述用于制備化合物(D21)的類似方法，與1-甲基-6-丙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D19)反應，得到黃色固體的標題化合物(D23)。[M-H]-＝363.2，RT＝2.23分鐘說明246-丁基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸2，2-二氧化物(D24)按照所述用于制備化合物(D21)的類似方法，與6-丁基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸二甲酯2，2-二氧化物(D20)反應，得到淡黃褐色固體的標題化合物(D24)。[M-H]-＝377.2，RT＝2.39分鐘酯的制備酯11，6-二乙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(C1)在氮氣氛下，將1-乙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(D11)(0.250g，0.82mmol)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液用60％氫化鈉在油中的懸浮液(0.034g，0.85mmol)處理。將混合物攪拌10分鐘，并然后加入碘乙烷(0.156g，1.0mmol)，并再繼續(xù)攪拌30分鐘。首先加入更多量的氫化鈉(0.034g，0.85mmol)，并然后加入碘乙烷(0.156g，1.0mmol)，并將混合物靜置過夜。真空蒸發(fā)溶劑，并將由此得到的粗品標題化合物(C1)不需進一步純化而用于下一步驟。[M+H]+＝335.2，RT＝2.83分鐘酯26-乙基-1-甲基-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(C2)在氮氣氛下，將1-甲基-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(D13)(0.200g，0.68mmol)的二甲基甲酰胺(15ml)溶液用60％氫化鈉在油中的懸浮液(0.034g，0.85mmol)處理，并在室溫下攪拌10分鐘。將混合物用碘乙烷(0.156g，1.0mmol)處理，并繼續(xù)攪拌30分鐘。真空蒸發(fā)溶劑，并將殘余物溶于乙酸乙酯中，并依序用2M氯化氫水溶液(50ml)和飽和的碳酸氫鈉水溶液(50ml)洗。然后將有機相經硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)，得到粗品標題化合物(C2)(0.250g，0.78mmol)。將其不需進一步純化而用于后面的反應中。[M+H]+＝323.1，RT＝2.70分鐘酸的制備酸16-乙基-1-甲基-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A1)向6-乙基-1-甲基-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(C2)(0.250g，0.78mmol)的甲醇(20ml)溶液中加入2N氫氧化鈉水溶液(10ml，20mmol)。將生成的混合物在50℃下加熱直至溶液澄清，并然后真空蒸發(fā)溶劑。將殘余物用乙醚萃取，并然后將水層用2M氯化氫水溶液酸化，并用乙酸乙酯萃取兩次。將該乙酸乙酯萃取物經MgSO4干燥，真空濃縮，并然后用乙醚研磨，得到白色固體的標題化合物(A1)(0.150g，0.49mmol)，將其不需進一步純化而用于下一步驟。[M+H]+＝309.1，RT＝2.33分鐘酸1(另外的方法)6-乙基-1-甲基-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A1)按照所述用于合成酸7(A7)的類似方法，由6-乙基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A3)可制備得到標題化合物(A1)。
酸2
1，6-二乙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A2)按照所述用于合成(A1)的類似方法，但使用1，6-二乙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(C1)代替6-乙基-1-甲基-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸甲酯2，2-二氧化物(C2)，制備得到1，6-二乙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A2)。[M+H]+＝321.2，RT＝2.45分鐘酸36-乙基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A3)將6-乙基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸2，2-二氧化物(D21)(2.16g，6.17mmol)溶于2N氯化氫的二烷(120ml)溶液中，并在回流下加熱1小時。然后將混合物冷卻，并真空蒸發(fā)，得到固體。將該固體依序用水、乙醚、乙酸乙酯、并然后再次用乙醚洗，得到淺黃色固體的標題化合物(A3)(1.75g)。[M+H]+＝307.1，RT＝2.18分鐘酸41-甲基-6-(1-甲基乙基)-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A4)按照所述用于合成(A3)的類似方法，與1-甲基-6-(1-甲基乙基)-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸2，2-二氧化物(D22)反應，得到淺黃色固體的標題化合物(A4)。[M+H]+＝321.2，RT＝2.49分鐘酸51-甲基-6-丙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A5)按照所述用于合成酸3(A3)的類似方法，與1-甲基-6-丙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸2，2-二氧化物(D23)反應，得到膏狀物固體的標題化合物(A5)。[M+H]+＝321.2，RT＝2.55分鐘酸66-丁基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A6)按照所述用于合成酸3(A3)的類似方法，與6-丁基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-3，8-二羧酸2，2-二氧化物(D24)反應，得到淡黃褐色固體的標題化合物(A6)。[M+H]+＝355.09，RT＝2.65分鐘酸71-甲基-6-(1-甲基乙基)-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A7)將1-甲基-6-(1-甲基乙基)-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A4)(0.22g，0.69mmol)在乙醇∶水(9∶1，20ml)中的溶液用甲酸銨(0.44g)和10％披鈀碳(0.1g)處理，并在90℃下加熱3小時。冷卻該混合物后，過濾并真空蒸發(fā)至干。將殘余物溶于乙酸乙酯中，并依序用飽和的碳酸氫鈉和水洗。將有機層經硫酸鎂干燥，然后過濾并真空蒸發(fā)。將殘余物用乙醚研磨，并將生成的固體用水、并然后用更多的乙醚洗，隨后干燥，得到白色固體的標題化合物(A7)(0.12g)。[M+H]+＝323.2，RT＝2.57分鐘酸81-甲基-6-丙基-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A8)按照所述用于合成酸7(A7)的類似方法，與1-甲基-6-丙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A5)反應，得到白色固體的標題化合物(A8)。[M+H]+＝323.2，RT＝2.56分鐘酸96-丁基-1-甲基-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A9)按照所述用于合成酸7(A7)的類似方法，與6-丁基-1-甲基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A6)反應，得到淺黃色固體的標題化合物(A9)(0.24g)。[M+H]+＝337.1，RT＝2.75分鐘酸101，6-二乙基-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A10)按照所述用于合成酸7(A7)的類似方法，與1，6-二乙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A2)反應，得到白色固體的標題化合物(A10)。[M+H]+＝323.2，RT＝2.50分鐘胺的制備胺1(B1)(2R，3S)-3-氨基-1-(3-甲氧基-芐基氨基)-4-苯基-丁-2-醇二-甲苯磺酸鹽(tosylate)步驟A將((S)-(S)-1-環(huán)氧乙烷基-2-苯基-乙基)-氨基甲酸叔-丁酯(10g，38mmol)[Chirex 1819W94 Lot#9924382]溶于乙醇(100ml)中，并加入3-甲氧基-芐基胺(14.6ml，114mmol)。在氮氣氛下，將生成的混合物在回流溫度下加熱12小時。冷卻混合物，并真空蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶于乙酸乙酯中，并用水洗三次，經硫酸鎂干燥，并真空濃縮。通過硅膠快速色譜法純化(二氯甲烷/甲醇98/2至95/5)，得到白色固體的[(1S，2R)-1-芐基-2-羥基-3-(3-甲氧基-芐基氨基)-丙基]-氨基甲酸叔-丁酯(10.0g，66％)。
步驟B向[(1S，2R)-1-芐基-2-羥基-3-(3-甲氧基-芐基氨基)-丙基]-氨基甲酸叔-丁酯(B1的產物，步驟A)(10g，25mmol)的乙腈(100ml)溶液中加入對-甲苯磺酸一水合物(14g，75mmol)，并將生成的混合物攪拌16小時。過濾形成的白色沉淀物，并用乙醚洗，然后真空干燥，得到白色固體的標題化合物(B1)(15.6g)，將其不需進一步純化而用于下一步驟。
胺2(2R，3S)-3-氨基-4-苯基-1-(四氫-2H-吡喃-4-基氨基)-2-丁醇二-甲苯磺酸鹽(B2)步驟A將((S)-(S)-1-環(huán)氧乙烷基-2-苯基-乙基)-氨基甲酸叔-丁酯(1.1g，4.1mmol)[Chirex 1819W94 Lot#9924382]溶于乙醇(100ml)中，并加入四氫-2H-吡喃-4-基胺(0.83g，8.22mmol)。在氮氣氛下，將生成的混合物在回流溫度下加熱4小時。冷卻混合物，并真空蒸發(fā)除去溶劑。將殘余物溶于乙酸乙酯中，并用水洗三次，經硫酸鎂干燥，并真空濃縮。由此獲得白色固體的1，1-二甲基乙基[(1S，2R)-2-羥基-1-(苯基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基氨基)丙基]氨基甲酸酯(0.95g，2.6mmol)。[M+H]+＝365.4，RT＝2.16分鐘步驟B按照所述用于合成(B1)的類似方法，但使用1，1-二甲基乙基[(1S，2R)-2-羥基-1-(苯基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基氨基)丙基]氨基甲酸酯(B2的產物，步驟A)代替[(1S，2R)-1-芐基-2-羥基-3-(3-甲氧基-芐基氨基)-丙基]-氨基甲酸叔-丁酯(B1的產物，步驟A)，制備得到(2R，3S)-3-氨基-4-苯基-1-(四氫-2H-吡喃-4-基氨基)-2-丁醇二-甲苯磺酸鹽(B2)。
胺B3-82按照所述用于合成胺1和2的類似方法，使用((S)-(S)-1-環(huán)氧乙烷基-2-苯基-乙基)-氨基甲酸叔-丁酯(1.1g，4.1mmol)[Chirex 1819W94 Lot#9924382]和其合適的胺或合適的鹽(通過市售購得或按照WO2004/094430中所述制備得到)，制備得到胺B3-82。當使用起始胺的鹽代替游離堿時，還向反應混合物中加入1摩爾當量的合適的堿(如三乙胺)。在一些情況下，代替二甲苯磺酸鹽制備得到胺的二鹽酸鹽。這些胺的二鹽酸鹽可按照所述用于制備胺(B1)和(B2)的類似方法，但使用4M HCl的二烷溶液代替對-甲苯磺酸一水合物(按照WO 2004/094430中所述)制備得到。
實施例實施例11，6-二乙基-N-[(1S，2R)-2-羥基-1-(苯基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基氨基)丙基]-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-甲酰胺2，2-二氧化物(E1) 向1，6-二乙基-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-羧酸2，2-二氧化物(A2)(0.038g，0.12mmol)的二甲基甲酰胺(3ml)溶液中加入(2R，3S)-3-氨基-4-苯基-1-(四氫-2H-吡喃-4-基氨基)-2-丁醇二-甲苯磺酸鹽(B2)(0.730g，0.12mmol)、1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基-碳化二亞胺鹽酸鹽(0.030g，0.15mmol)、1-羥基苯并三唑水合物(0.025g，0.15mmol)和三乙胺(0.100ml，0.72mmol)。將混合物在室溫下攪拌過夜，并然后真空蒸發(fā)溶劑。將殘余物溶于乙酸乙酯(50ml)中，并用飽和的碳酸氫鈉水溶液(50ml)洗。將有機相經硫酸鎂干燥，過濾并蒸發(fā)，得到粗產物。通過biotage(用2-5％甲醇的二氯甲烷溶液洗脫)純化，并冷凍干燥，得到白色固體的標題化合物(E1)(0.030g，0.05mmol)。+＝567.6，RT＝2.3分鐘。
實施例2-89(E2-E89)實施例2-89是按照實施例1中所述的類似方法(在實施例中，甲酸鹽(formate salt)指的是該化合物是通過使用乙腈/水/甲酸作為洗脫液的mass-directed automated制備性HPLC而不是通過如上所述的biotage進行純化的)，使用下表所示的合適的酸和合適的胺制備得到的

















實施例901，6-二乙基-N-[(1S，2R)-2-羥基-1-(苯基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基氨基)丙基]-1，3，4，6-四氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-甲酰胺2，2-二氧化物(E90) 將1，6-二乙基-N-[(1S，2R)-2-羥基-1-(苯基甲基)-3-(四氫-2H-吡喃-4-基氨基)丙基]-1，6-二氫[1，2]硫氮雜并[5，4，3-cd]吲哚-8-甲酰胺2，2-二氧化物(E1)(0.010g，0.02mmol)的甲醇(5ml)溶液用甲酸銨(0.020g，0.32mmol)和10％披鈀木炭(0.015g)處理，并在回流下加熱1小時。過濾混合物，并真空蒸發(fā)。將殘余物溶于乙酸乙酯(50ml)中，并用飽和的碳酸氫鈉水溶液(30ml)洗。將有機相經硫酸鎂干燥，過濾并真空蒸發(fā)。冷凍干燥，得到白色固體的標題化合物(E90)(0.005g，0.01mmol)。+＝569.6，RT＝2.3分鐘。
可按照下述試驗，測定本發(fā)明的化合物體外的生物活性(I)Asp-2抑制試驗對于每一個待測的化合物，在384孔板中，加入-a)1μl的試驗化合物的DMSO溶液(IC50曲線使用10個從500μM得到的1/2連續(xù)稀釋液)。
b)10μl底物(FAM-SEVNLDAEFK-TAMRA)的緩沖液溶液。其通過下述方式配制將2ml的2mM底物的DMSO溶液稀釋成400ml緩沖液溶液(100mM乙酸鈉pH＝4.5，1 l Milli-Q水，0.06％Triton X-100(0.5ml/l)，使用冰醋酸調節(jié)pH至4.5)。氨基甲基熒光素(FAM)以及四甲基羅丹明(TAMRA)為熒光分子，一旦SEVNLDAEFK肽裂解(cleavage)，二者協(xié)同在535nm處發(fā)出熒光。
c)10μl酶溶液。其是通過將16ml的500nM酶溶液稀釋到384ml的緩沖液溶液中制備得到的(如上制備)。
在各板上包括空白孔(酶溶液被緩沖液替換)作為對照。將孔在室溫下孵育1小時，并利用Tecan Ultra Fluorimeter/Spectrophotometer(485nm激發(fā)，535nm發(fā)射)讀取熒光。
(II)組織蛋白酶D抑制試驗對于每一個待測的化合物，在384孔板中，加入-a)1μl的試驗化合物的DMSO溶液(IC50曲線使用10個從500μM得到的1/2連續(xù)稀釋液)。
b)10μl底物(FAM-SEVNLDAEFK-TAMRA)的緩沖液溶液。其通過下述方式配制將2ml的2mM底物的DMSO溶液稀釋成400ml緩沖液溶液(100mM乙酸鈉pH＝4.5，1 l Milli-Q水，0.06％Triton X-100(0.5ml/l)，使用冰醋酸調節(jié)pH至4.5)。
c)10μl酶溶液。其是通過將1.6ml的200unit/ml(在10mM HCl溶液中)酶溶液稀釋到398.4ml的緩沖液溶液中制備得到的(制備同上)。
在各板上包括空白孔(酶溶液被緩沖液替換)作為對照。將孔在室溫下孵育1小時，并利用Tecan Ultra Fluorimeter/Spectrophotometer(485nm激發(fā)，535nm發(fā)射)讀取熒光。
藥理數據E1-E90的化合物在試驗(I)和(II)中進行測試并顯示抑制在下面范圍內2nM-10μM(Asp2)和30nM-＞100μM(CatD)。
縮寫DMF 二甲基甲酰胺DMSO二甲亞砜DMAP二甲基氨基苯酚
DABCO 1，4-二氮雜二環(huán)[2.2.2]辛烷DME 甲基醚THF 氫呋喃HOBTN-羥基苯并三唑FAM 羧基熒光素TAMRA 羧基四甲基羅丹明[] 與肽序列有關的單氨基酸字母代號
權利要求
1.式(I)的化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物 其中R1表示C1-3烷基或鹵素；R2表示C1-3烷基、C2-4鏈烯基、C2-4炔基、鹵素、C1-3烷氧基、氨基、氰基或n羥基；m表示0-4的整數；n表示0-2的整數；A-B表示-NR5-SO2-或-NR5-CO-；R5表示氫、C1-6烷基、C3-6鏈烯基、C3-6炔基、C3-10環(huán)烷基、-C0-6烷基-芳基、-C0-6烷基-雜芳基、-C0-6烷基-雜環(huán)基、-C3-10環(huán)烷基-芳基或-C3-10環(huán)烷基-雜芳基；-W-表示-CH2-、-(CH2)2-、-(CH2)3-、-C(H)＝C(H)-或-CH2-C(H)＝C(H)-；X-Y-Z表示-C＝CR8-NR9-；R8表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基；R9表示氫、C1-6烷基、C1-6烷氧基、C3-10環(huán)烷基、-C0-6烷基-芳基、-C0-6烷基-雜芳基、-C0-6烷基-雜環(huán)基、-C3-10環(huán)烷基-芳基、-C3-10環(huán)烷基-雜芳基、-COOR12a、-OR12a、-CONR12aR13a、-SO2NR12aR13a、-COC1-6烷基、-COC3-10環(huán)烷基、-CO-芳基、-CO-雜芳基、-COC1-6烷基-芳基、-COC1-6烷基-雜芳基、-COC3-10環(huán)烷基-芳基、-COC3-10環(huán)烷基-雜芳基、-SO2C1-6烷基、-SO2C3-10環(huán)烷基、-SO2芳基、-SO2雜芳基、-SO2C1-6烷基-芳基、-SO2C1-6烷基-雜芳基、-SO2C3-10環(huán)烷基-芳基或-SO2C3-10環(huán)烷基-雜芳基(其中R12a和R13a獨立地表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基)；R3表示C1-6烷基、C2-6鏈烯基、C2-6炔基、-C1-6烷基-C3-10環(huán)烷基、-C0-6烷基-芳基、-C0-6烷基-雜芳基或-C0-6烷基-雜環(huán)基；R4表示氫、C1-10烷基、C2-10鏈烯基、C3-10炔基、-C3-10環(huán)烷基、-C3-10環(huán)烯基、-C0-6烷基-芳基、-C0-6烷基-雜芳基、-C0-6烷基-雜環(huán)基、-C1-6烷基-C3-10環(huán)烷基、-C3-10環(huán)烷基-芳基、-C3-10環(huán)烷基-雜芳基、-C3-10環(huán)烷基-雜環(huán)基、-C3-10環(huán)烷基-C1-6烷基-芳基、-雜環(huán)基-芳基、-C1-6烷基-芳基-雜芳基、-C(RaRb)-CONH-C1-6烷基、-C(RaRb)-CONH-C3-10環(huán)烷基、-C2-6烷基-S-C1-6烷基、-C2-6烷基-NRcRd、-C(RaRb)-C1-6烷基、-C(RaRb)-C0-6烷基-芳基、-C(RaRb)-C0-6烷基-雜芳基、-C(RaRb)-C0-6烷基-雜環(huán)基、-C2-6烷基-O-C0-6烷基-芳基、-C2-6烷基-O-C0-6烷基-雜芳基或-C2-6烷基-O-C0-6烷基-雜環(huán)基；Ra和Rb獨立地表示氫、C1-6烷基或Ra和Rb與它們相連的碳原子一起可形成C3-10環(huán)烷基或雜環(huán)基；Rc和Rd獨立地表示氫、C1-6烷基、C3-10環(huán)烷基或Rc和Rd與它們相連的氮原子一起可形成含氮雜環(huán)基；其中所述烷基、鏈烯基、炔基和環(huán)烷基可任選被一個或多個(例如1-6個)下列基團所取代鹵素、C1-6烷基、C2-6炔基、C2-6鏈烯基、鹵代C1-6烷基、C1-6烷氧基、鹵代C1-6烷氧基、氨基、氰基、羥基、-COOR22、-S-C1-6烷基或-C1-6烷基-NR6R7(其中R6和R7獨立地表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基)；和其中所述芳基、雜芳基或雜環(huán)基可任選被一個或多個(例如1-6個)下列基團所取代C1-6烷基、鹵素、鹵代C1-6烷基、鹵代C1-6烷氧基、氧代、羥基、C1-6烷氧基、C2-6炔基、C2-6鏈烯基、氨基、氰基、硝基、-COOR22、-NR22COR23、-CONR22R23、-SO2NR22R23、-NR22R23、-C1-6烷基-NR22R23、-C1-6烷基-O-C1-6烷基或-C1-6烷?；?其中R22和R23獨立地表示氫、C1-6烷基或C3-10環(huán)烷基)。
2.根據權利要求1的化合物，其為式E1-E90的化合物或其藥學上可接受的鹽。
3.藥物組合物，包括權利要求1或權利要求2所限定的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物與一種或多種藥學上可接受的稀釋劑或載體相混合。
4.權利要求1或權利要求2所限定的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，其用作藥物。
5.權利要求1或權利要求2所限定的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物在治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病中的用途。
6.權利要求1或權利要求2所限定的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物在制備用于治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病的藥物中的用途。
7.治療或預防以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病的方法，所述方法包括對患者給藥有效量的權利要求1或權利要求2所限定的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物。
8.藥物組合物，包括權利要求1或權利要求2所限定的式(I)化合物或其藥學上可接受的鹽或溶劑化物，其用于治療以升高的β-淀粉樣蛋白水平或β-淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病。
全文摘要
本發(fā)明涉及具有Asp2(β－分泌酶、BACE1或Memapsin)抑制活性的式(I)的新的羥乙基胺化合物、它們的制備方法、包含這些化合物的組合物以及它們在治療以升高的β－淀粉樣蛋白水平或β－淀粉樣蛋白沉積物為特征的疾病尤其是阿爾茨海默病中的用途。在式(I)中，特別是A－B表示－NR
文檔編號A61P25/28GK1914214SQ200480041643
公開日2007年2月14日 申請日期2004年12月9日 優(yōu)先權日2003年12月12日
發(fā)明者薩莉·雷德肖, 伊曼紐爾·H·德蒙特, 達里爾·S·沃爾特, 戴維·R·維西 申請人:葛蘭素集團有限公司