一種制備脂肪酶的方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明實(shí)施例提供一種工業(yè)規(guī)模的通過(guò)微生物制備脂肪酶的方法。在該方法中，攜帶脂肪酶，優(yōu)選耐熱脂肪酶的大腸桿菌微生物在批式或批式補(bǔ)料條件下，在補(bǔ)充有檸檬酸、(NH4)2SO4、Na2HPO4.12H2O、MgCl2、NH4Cl和葡萄糖的Luria?Bertani(LB)肉湯培養(yǎng)基中發(fā)酵，使用含有鹽酸、FeSO4.7H2O、ZnSO4.7H2O、CaCl2.H2O、MnSO4.5H2O、CuSO4.5H2O、AlCl.6H2O和H3BO3的微量金屬溶液，以及含有葡萄糖、酵母抽提物、MgSO4.H2O、KH2PO4、檸檬酸、(NH4)2SO4、Na2HPO4.12H2O、MgCl2和NH4Cl的進(jìn)料營(yíng)養(yǎng)液，在30-50％的溶氧量，30-40℃的溫度下，同時(shí)控制pH介于6與8之間，葡萄糖含量為15-25g/L，并具有異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)。本發(fā)明的實(shí)施例的制備方法可以提高生產(chǎn)率。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種制備脂肪酶的方法

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種工業(yè)規(guī)模的通過(guò)微生物制備脂肪酶的方法。

【背景技術(shù)】
[0002]脂肪酶或三?；视王；饷窫C3.1.1.3是一類(lèi)對(duì)不溶于水的三?；视拖蚨；视秃蛦熙；视汀⒂坞x脂肪酸和甘油的水解起催化作用的酶。這種水解表面上平衡，然而，通過(guò)改變反應(yīng)條件，該反應(yīng)的方向可以變?yōu)轷サ暮铣伞?br>
【權(quán)利要求】
1.一種工業(yè)規(guī)模的通過(guò)微生物制備脂肪酶的方法，其中，攜帶脂肪酶優(yōu)選攜帶耐熱脂肪酶的大腸桿菌微生物，在批式或批式補(bǔ)料條件下，在具有檸檬酸、(nh4)2so4、Na2HPO4.12H20、MgCl2、NH4Cl 和葡萄糖的 Luria Bertani (LB)肉湯培養(yǎng)基中發(fā)酵， 同時(shí)使用含有鹽酸、FeSO4.7H20、ZnSO4.7H20、CaCl2.H2O, MnSO4.5H20、CuSO4.5H20、AlCl3.6H20和H3BO3的痕量金屬溶液， 以及含有葡萄糖、酵母抽提物、MgSO4.H2O、KH2P04、檸檬酸、(NH4)2SCV Na2HPO4.12H20、MgCl2和NH4Cl的進(jìn)料營(yíng)養(yǎng)液， 溶氧量為30-50%，溫度為30-40°C，同時(shí)控制pH介于6與8之間，葡萄糖含量為15-25g/L，具有異丙基硫代半乳糖苷(IPTG)。
2.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述溶氧量為40%。
3.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述溫度為37°C。
4.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述pH為6.5-7.5。
5.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述葡萄糖含量為20g/L。
6.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，使用0.1mM的異丙基硫代半乳糖苷。
7.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，培養(yǎng)基的組成為:LB肉湯20.00g/L、檸檬酸3.0Og/L、(NH4) 2S046.75g/L,N a2HPO4.12Η205.00g/L、MgCl23.0Og/L,NH4Cl0.lOg/L 和葡萄糖 20.0Og/L以及蒸餾水。
8.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述痕量金屬溶液的組成為:鹽酸5mmol/ml、FeSO4.7H2010.00mg/ml、ZnSO4.7H202.25mg/ml、CaCl2.H2Ol.35mg/ml、MnSO4.5H200.50mg/ml、CuSO4.5H201.00mg/ml、AlCl3.6H200.30mg/ml 和 H3BO30.20mg/ml 以及蒸餾水。
9.如權(quán)利要求1所述的方法，其中，所述進(jìn)料營(yíng)養(yǎng)液包含葡萄糖7.50g/L、酵母抽提物 50.00g/L、MgSO4.Η2020.00g/L、ΚΗ2Ρ046.75g/L、檸檬酸 3.00g/L、(NH4) 2S046.75g/L、Na2HPO4.12H205.00g/L、MgCl23.0Og/L 和 NH4Cl0.lOg/L 以及蒸餾水。
【文檔編號(hào)】C12R1/19GK104178470SQ201410213666
【公開(kāi)日】2014年12月3日 申請(qǐng)日期:2014年5月20日 優(yōu)先權(quán)日:2013年5月20日
【發(fā)明者】拉賈·努爾·扎莉哈·拉賈·阿卜杜勒·拉赫曼, 阿布·巴卡爾·薩利赫, 馬希拉恩·巴斯里, 哈菲扎爾·穆赫德·尼扎爾 申請(qǐng)人:馬來(lái)西亞博特拉大學(xué)