專利名稱:一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域:
本發(fā)明涉及微生物菌劑技術(shù)領(lǐng)域,尤其涉及一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌及其制備方法。
背景技術(shù):
隨著社會經(jīng)濟(jì)的快速發(fā)展以及城市化進(jìn)程的加快,我國城市生活垃圾的產(chǎn)生量持續(xù)增加。生活垃圾中餐廚垃圾約占37% 62%,餐廚垃圾中含有大量的糖、淀粉、蛋白質(zhì),且鹽分和油脂含量也很高,極易腐爛變質(zhì),散發(fā)惡臭,傳播細(xì)菌和病毒,滋生蚊蠅,已成為市容環(huán)境的主要污染物。由餐廚垃圾引發(fā)的“地溝油”、“垃圾豬”已成為城市生活中的公害問題。但從另一角度講,餐廚垃圾具有豐富的營養(yǎng)元素、高有機(jī)物及無機(jī)鹽含量,能合理處理會成為具有一定價值的資源。餐廚垃圾資源化處理對我國這樣人均資源缺乏的發(fā)展中國家意義重大,也是我國面臨的迫切問題。 目前,好氧堆肥化技術(shù)是處理餐廚垃圾的主要微生物技術(shù)之一。好氧堆肥化技術(shù)分為大中型處理和小型就地處理兩類。其中大中型處理存在的主要缺點(diǎn)是添加大量水分調(diào)節(jié)劑而增加處理成本、容易產(chǎn)生惡臭、占地面積大。小型就地處理技術(shù)多采用60 80°C的高溫工藝,其主要缺點(diǎn)是處理量小、設(shè)備費(fèi)和運(yùn)行費(fèi)用高。
發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌及其制備方法,投資小、處理成本低、使用方便。本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案來實(shí)現(xiàn)一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌,由以下重量份數(shù)的原料混合制備而成,枯草芽孢桿菌15 30份、釀酒酵母10 25份、曲霉10 30份、嗜熱側(cè)孢10 30份、白地霉10 30份。一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌的制備方法,其包括以下步驟步驟I :分別將枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、曲霉、嗜熱側(cè)孢霉、白地霉的菌種進(jìn)行高密度培養(yǎng),然后接種至裝有體積比為15 30%的培養(yǎng)基的搖瓶中活化培養(yǎng),再將培養(yǎng)好的菌種接種到裝有體積比為50 70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵擴(kuò)大培養(yǎng);步驟2 :將米糠、玉米芯粉和麩皮按質(zhì)量比為I 3 O. 5 I : I 3混合制成載體,并將步驟I中培養(yǎng)好的各菌種分別用上述載體吸附,制備成菌體質(zhì)量百分比為5 10%的單一菌劑,所述單一菌劑包括枯草芽孢桿菌單一菌劑、釀酒酵母單一菌劑、米曲霉單一菌劑、嗜熱側(cè)孢霉單一菌劑、白地霉單一菌劑;步驟3 :取重量份數(shù)分別為15 30份的枯草芽孢桿菌單一菌劑、10 25份的釀酒酵母單一菌劑、10 30份的曲霉單一菌劑、10 30份的嗜熱側(cè)孢單一菌劑以及10 30份的白地霉單一菌劑,將上述單一菌劑混合,制備完成。所述枯草芽孢桿菌單一菌劑的制備包括以下步驟
步驟I :將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的枯草芽孢桿菌s菌種接種至裝有體積比為15 30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖15 20g/L、蛋白胨10 15g/L、氯化鈉3 7g/L和牛肉膏O. 3 O. 8g/L,在培養(yǎng)溫度為36 40°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為150 200rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24 32h ;步驟2 :將活化培養(yǎng)好的枯草芽孢桿菌菌種接種到裝有體積比為50 70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為I 3%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉10 15g/L、葡萄糖3 8g/L、豆餅粉18 22g/L、魚粉3 8g/L、碳酸鈣5 10g/L、硫酸銨O. 8 I. Og/L、磷酸氫二鉀O. I O. 5g/L、硫酸鎂O. I O. 3g/L和硫酸錳O. I O. 3g/L,在培養(yǎng)溫度為36°C 40°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為200 220rpm的發(fā)酵罐中擴(kuò)大培養(yǎng)24 40h,直至發(fā)酵罐中的枯草芽孢桿菌含量> IO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的枯草芽孢桿菌單菌按質(zhì)量百分比5 10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。所述釀酒酵母單一菌劑的制備包括以下步驟
步驟I :將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的釀酒酵母菌種接種至裝有體積比為15 30%的培養(yǎng)基的搖瓶中,在培養(yǎng)溫度為28 30°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為130 180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)32 48h ;步驟2 :將活化培養(yǎng)好的釀酒酵母菌種接種到裝有體積比為50 70%培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),接種量為體積比I 3%,所述活化培養(yǎng)和發(fā)酵時的培養(yǎng)基為麥芽汁馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,在培養(yǎng)溫度為30 32°C,發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速130 180rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)60 84h,直至發(fā)酵罐中釀酒酵母含量SlO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的釀酒酵母單菌按質(zhì)量百分比5 10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。所述米曲霉單一菌劑的制備包括以下步驟步驟I :將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的米曲霉菌種接種至裝有體積比為15 30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖8 14g/L、磷酸二氫鉀I 3g/L、硫酸鎂I 2g/L、硫胺素O. 01 O. 05g/L,在培養(yǎng)溫度為28 30°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為140 180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)30 42h ;步驟2 :將活化培養(yǎng)好的米曲霉菌種接種到裝有體積比為50 70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為I 3 %,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉30 60g/L、豆柏粉15 40g/L、硝酸鈉I 5g/L、磷酸氫二鉀I 5g/L、硫酸鎂I 3g/L、硫酸亞鐵O. 01 O. 05g/L,在培養(yǎng)溫度為28 30°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為140 180rpm的發(fā)酵罐中擴(kuò)大培養(yǎng)42 54h,直至發(fā)酵罐中米曲霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的米曲霉單菌按質(zhì)量百分比5 10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。所述嗜熱側(cè)孢霉單一菌劑的制備包括以下步驟步驟I :將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為15 30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為20wt%的馬鈴薯汁18 22g/L、蔗糖15 30g/L,在培養(yǎng)溫度40 45°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為140 180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)36 48h ;步驟2 :將活化培養(yǎng)好的嗜熱側(cè)孢菌種接種到裝有體積比為50 70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為I 3%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為麩皮15 30g/L、蛋白胨10 20g/L、硫酸銨I 5g/L、氯化鈣O. 2 O. 6g/L,在培養(yǎng)溫度40 45°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為140 180rpm的發(fā)酵罐中擴(kuò)大培養(yǎng)48 60h,直至發(fā)酵罐中嗜熱側(cè)孢霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的嗜熱側(cè)孢單菌按質(zhì)量百分比5 10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。所述白地霉單一菌劑的制備包括以下步驟步驟I :將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的白地霉菌種接種到裝有體積比為15 30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖10 25g/L、蛋白胨20 30g/L、磷酸氫二鉀I 3g/L、豆油10 15g/L,在培養(yǎng)溫度為28 30°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為180 250rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24 36h ;步驟2:將活化培養(yǎng)好的白地霉菌種接種到裝有體積比為50 70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為I 3 %,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米淀粉10 15g/L、豆油8 15g/L、玉米衆(zhòng)15 30g/L、硫酸銨I 5g/L、磷酸氫二鉀4 8g/L、硫酸鎂I 3g/L,在培養(yǎng)溫度為28 30°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為180 250rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)36 48h,直 至發(fā)酵罐中白地霉含量SlO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的白地霉單菌按質(zhì)量百分比5 10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。本發(fā)明中的枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)是α -淀粉酶和中性蛋白酶的重要產(chǎn)生菌,枯草芽孢桿菌菌體生長過程中產(chǎn)生的枯草菌素、多粘菌素、制霉菌素、短桿菌肽等活性物質(zhì),對致病菌或內(nèi)源性感染的條件致病菌有明顯的抑制作用;枯草芽孢桿菌菌體自身合成α-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纖維素酶等酶類;枯草芽孢桿菌對弧菌、大腸桿菌和桿狀病毒等有害微生物有很強(qiáng)的抑制作用;枯草芽孢桿菌可產(chǎn)生大量幾丁質(zhì)酶,其能分解病原真菌的細(xì)胞壁而抑制真菌病害、分解有毒有害物質(zhì)、糞便、有機(jī)物等,對垃圾小顆粒有很強(qiáng)的清理作用。本發(fā)明中的釀酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)能分解利用環(huán)境中的糖類、硫化氫、氨氣等,擁有豐富的酶系統(tǒng)和蛋白質(zhì),對高糖、高滲透壓環(huán)境具有較強(qiáng)的適應(yīng)性,代謝過程中產(chǎn)生酸性物質(zhì),可有效抑制致病菌生長,并且酵母菌體可作為其他配合菌的營養(yǎng)物質(zhì),有利于復(fù)合菌群的快速增值。本發(fā)明中的米曲霉(Aspergillus oryzae)是復(fù)合酶的重要產(chǎn)生菌,其菌體能自身合成蛋白酶、淀粉酶、糖化酶、纖維素酶、植酸酶等,可以有效分解多種有機(jī)物質(zhì)。本發(fā)明中的嗜熱側(cè)孢霉(Sporotrichum thermophile)是典型的嗜熱纖維素分解菌,能大量分泌纖維素酶,將秸桿、畜禽糞便、草炭等有機(jī)物快速腐解成有機(jī)質(zhì);與其它微生物菌協(xié)同作用,可將處于休眠狀態(tài)期的病菌和蟲卵提早分解。本發(fā)明中的白地霉(Geotrichum candidum)在自然界分布很廣,其脂肪酶活性很強(qiáng),可用于處理發(fā)酵工業(yè)和食品加工業(yè)的有機(jī)廢水,也可用于獲得工業(yè)催化劑胞外脂肪酶。本發(fā)明的有益效果為本發(fā)明將枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、米曲霉、嗜熱側(cè)孢霉、白地霉的菌種進(jìn)行高密度培養(yǎng),將高密度培養(yǎng)得到的各單菌用載體吸附,制備成干燥的單一菌劑,根據(jù)其用途采用合理配比,復(fù)合得到餐廚垃圾降解復(fù)合菌,用于餐廚垃圾的處理,具有以下優(yōu)點(diǎn)(I)針對不同構(gòu)成的餐廚垃圾可對單菌做合理配比,使得各個單菌相互協(xié)同降解餐廚垃圾;(2)復(fù)合菌種各個組分之間采用了中溫、高溫相互科學(xué)配伍,結(jié)合中、高溫的發(fā)酵工藝,可快速降解餐廚垃圾中的有機(jī)成分,節(jié)約能源;(3)復(fù)合菌可配合單批次、連續(xù)投加等不同工藝實(shí)現(xiàn)餐廚垃圾的“無害化、減量化、資源化”的處理。本發(fā)明用于餐廚垃圾處理,相比現(xiàn)有技術(shù),生產(chǎn)投資小,生產(chǎn)成本低,使用方便,降解效果好。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體的實(shí)施例,進(jìn)一步闡述本發(fā)明。實(shí)施例I分別對枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、米曲霉、嗜熱側(cè)孢霉、白地霉的菌種進(jìn)行高密度
培養(yǎng) (I)單一菌劑吸附載體將米糠、玉米芯粉、麩皮按照質(zhì)量比I : O. 5 : I的比例混合均勻,作為菌劑的吸附載體。(2)枯草芽孢桿菌將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的枯草芽孢桿菌菌種接種至裝有體積比為15%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖15g/L、蛋白胨10g/L、氯化鈉3g/L和牛肉膏O. 3g/L,在培養(yǎng)溫度為37°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為170rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24h ;將活化培養(yǎng)好的枯草芽孢桿菌菌種接種的裝有體積比為50%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為1%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉10g/L、葡萄糖3g/L、豆餅粉18g/L、魚粉3g/L、碳酸鈣5g/L、硫酸銨O. 8g/L、磷酸氫二鉀O. lg/L、硫酸鎂O. lg/L和硫酸錳O. lg/L,在培養(yǎng)溫度為37°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)28h,直至發(fā)酵罐中枯草芽孢桿菌含量SlO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的枯草芽孢桿菌單菌按質(zhì)量百分比5%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。釀酒酵母將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的釀酒酵母菌種接種至裝有體積比為15%的培養(yǎng)基的搖瓶中,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為130rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)32h ;將活化培養(yǎng)好的釀酒酵母菌種接種到裝有體積比為50%培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),接種量為體積比I %,所述活化培養(yǎng)和發(fā)酵時的培養(yǎng)基為麥芽汁馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,在培養(yǎng)溫度為30°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為130rpm的發(fā)酵罐中擴(kuò)大培養(yǎng)60h,直至發(fā)酵罐中釀酒酵母含量> IO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的釀酒酵母單菌按質(zhì)量百分比5%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。米曲霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的米曲霉菌種接種至裝有體積比為15%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖8g/L、磷酸二氫鉀lg/L、硫酸鎂Ig/L、硫胺素O. 01g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C,搖瓶轉(zhuǎn)速140rpm培養(yǎng)30h ;將活化培養(yǎng)好的米曲霉菌種接種到裝有體積比為50%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為1%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉30g/L、豆柏粉15g/L、硝酸鈉lg/L、磷酸氫二鉀lg/L、硫酸鎂lg/L、硫酸亞鐵O. 01g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為140rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)42h,直至發(fā)酵罐中米曲霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的米曲霉單菌按質(zhì)量百分比5%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。嗜熱側(cè)孢霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為15%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為20wt%的馬鈴薯汁18g/L、蔗糖15g/L,在培養(yǎng)溫度42 °C、搖瓶轉(zhuǎn)速為150rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)36h ;將活化培養(yǎng)好的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為50%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為1%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為麩皮15g/L、蛋白胨10g/L、硫酸銨lg/L、氯化鈣O. 2g/L,在培養(yǎng)溫度42°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為150rpm的發(fā)酵罐中擴(kuò)大培養(yǎng)48h,發(fā)酵罐中嗜熱側(cè)孢霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的嗜熱側(cè)孢霉單菌按質(zhì)量百分比5%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。白地霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的白地霉菌種接種到裝有體積比為15%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖10g/L、蛋白胨20g/L、磷酸氫二鉀lg/L、豆油10g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24h ;將活化培養(yǎng)好的白地霉菌種接種到裝有體積比為50%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為1%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米淀粉10g/L、豆油8g/L、玉米漿15g/L、硫酸銨lg/L、磷酸氫二鉀4g/L、硫酸鎂lg/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為180rpm的發(fā)酵罐中擴(kuò)大培養(yǎng)36h,直至發(fā)酵罐中白地霉含量彡IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的白地霉單菌按質(zhì)量百分比5%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。 最后將高密度培養(yǎng)得到的各單一菌劑,按枯草芽孢桿菌20份、釀酒酵母15份、米曲霉25份、嗜熱側(cè)孢霉25份、白地霉15份的質(zhì)量比,復(fù)合得到餐廚垃圾降解復(fù)合菌。實(shí)施例2分別對枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、米曲霉、嗜熱側(cè)孢霉、白地霉的菌種進(jìn)行高密度
培養(yǎng)(I)單一菌劑吸附載體將米糠、玉米芯粉、麩皮按照質(zhì)量比3 I 3的比例混合均勻,作為菌劑的吸附載體。(2)枯草芽孢桿菌將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的枯草芽孢桿菌菌種接種至裝有體積比為30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖20g/L、蛋白胨15g/L、氯化鈉7g/L和牛肉膏O. 8g/L,在培養(yǎng)溫度為37°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24h ;將活化培養(yǎng)好的枯草芽孢桿菌菌種接種的裝有體積比為70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為3%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉15g/L、葡萄糖8g/L、豆餅粉22g/L、魚粉8g/L、碳酸鈣10g/L、硫酸銨I. 0g/L、磷酸氫二鉀0. 5g/L、硫酸鎂0. 3g/L和硫酸錳0. 3g/L,在培養(yǎng)溫度為37°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)40h,直至發(fā)酵罐中枯草芽孢桿菌含量SlO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的枯草芽孢桿菌單菌按質(zhì)量百分比10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。釀酒酵母將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的釀酒酵母菌種接種至裝有體積比為30%的培養(yǎng)基的搖瓶中,在培養(yǎng)溫度為30°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)32h ;將活化培養(yǎng)好的釀酒酵母菌種接種到裝有體積比為70%培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),接種量為體積比3 %,所述活化培養(yǎng)和發(fā)酵時的培養(yǎng)基為麥芽汁馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,在培養(yǎng)溫度為30°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速180rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)60h,直至發(fā)酵罐中釀酒酵母含量> IO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的釀酒酵母單菌按質(zhì)量百分比10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。米曲霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的米曲霉菌種接種至裝有體積比為30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖14g/L、磷酸二氫鉀3g/L、硫酸鎂2g/L、硫胺素0. 05g/L,在培養(yǎng)溫度為30°C,搖瓶轉(zhuǎn)速160rpm培養(yǎng)30h ;將活化培養(yǎng)好的米曲霉菌種接種到裝有體積比為70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為3%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉60g/L、豆柏粉40g/L、硝酸鈉5g/L、磷酸氫二鉀5g/L、硫酸鎂3g/L、硫酸亞鐵0. 05g/L,在培養(yǎng)溫度為30°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速160rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)42h,直至發(fā)酵罐中米曲霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的米曲霉單菌按質(zhì)量百分比10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。嗜熱側(cè)孢霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為30 %的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為20wt %的馬鈴薯汁22g/L、蔗糖30g/L,在培養(yǎng)溫度42 °C、搖瓶轉(zhuǎn)速為180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)36h ;將活化培養(yǎng)好的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為3%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為麩皮30g/L、蛋白胨20g/L、硫酸銨5g/L、氯化鈣O. 6g/L,在培養(yǎng)溫度42°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為180rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)54h,直至發(fā)酵罐中嗜熱側(cè)孢霉含量^ IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的嗜熱側(cè)孢霉單菌按質(zhì)量百分比10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。白地霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的白地霉菌種接種到裝有體積比為30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖25g/L、蛋白胨30g/L、磷酸氫二鉀 3g/L、豆油15g/L,在培養(yǎng)溫度為30°C,搖瓶轉(zhuǎn)速200rpm培養(yǎng)24h ;將活化培養(yǎng)好的白地霉菌種接種到裝有體積比為70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為3%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米淀粉15g/L、豆油14g/L、玉米漿30g/L、硫酸銨5g/L、磷酸氫二鉀8g/L、硫酸鎂3g/L,在培養(yǎng)溫度為30°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為200rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)48h,直至發(fā)酵罐中白地霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的白地霉單菌按質(zhì)量百分比10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。最后將高密度培養(yǎng)得到的各單一菌劑,按枯草芽孢桿菌25份、釀酒酵母17份、米曲霉15份、嗜熱側(cè)孢霉18份、白地霉25份的質(zhì)量比,復(fù)合得到餐廚垃圾降解復(fù)合菌。實(shí)施例3分別對枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、米曲霉、嗜熱側(cè)孢霉、白地霉的菌種進(jìn)行高密度
培養(yǎng)(I)單一菌劑吸附載體將米糠、玉米芯粉、麩皮按照質(zhì)量比2 O. 5 2的比例混合均勻,作為菌劑的吸附載體。(2)枯草芽孢桿菌將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的枯草芽孢桿菌菌種接種至裝有體積比為20%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖16g/L、蛋白胨12g/L、氯化鈉4g/L和牛肉膏O. 5g/L,在培養(yǎng)溫度為37°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為170rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24h ;將活化培養(yǎng)好的枯草芽孢桿菌菌種接種的裝有體積比為60%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉12g/L、葡萄糖5g/L、豆餅粉20g/L、魚粉5g/L、碳酸鈣6g/L、硫酸銨O. 8g/L、磷酸氫二鉀O. 2g/L、硫酸鎂O. 2g/L和硫酸錳O. 2g/L、在培養(yǎng)溫度為37°C,發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)30h,直至發(fā)酵罐中枯草芽孢桿菌含量SlO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的枯草芽孢桿菌單菌按質(zhì)量百分比8%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。釀酒酵母將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的釀酒酵母菌種接種至裝有體積比為20%的培養(yǎng)基的搖瓶中,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為150rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)32h ;將活化培養(yǎng)好的釀酒酵母菌種接種到裝有體積比為60%培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),接種量為體積比2 %,所述活化培養(yǎng)和發(fā)酵時的培養(yǎng)基為麥芽汁馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,在培養(yǎng)溫度為30°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為150rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)64h,直至發(fā)酵罐中釀酒酵母含量> IO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的釀酒酵母單菌按質(zhì)量百分比8%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。米曲霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的米曲霉菌種接種至裝有體積比為20%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖10g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L、硫胺素O. 02g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為160rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)30h ;將活化培養(yǎng)好的米曲霉菌種接種到裝有體積比為60 %發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2 %,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉40g/L、豆柏粉20g/L、硝酸鈉2g/L、磷酸氫二鉀3g/L、硫酸鎂lg/L、硫酸亞鐵O. 02g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為160rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)42h,直至發(fā)酵罐中米曲霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的米曲霉單菌按質(zhì)量百分比8%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。嗜熱側(cè)孢霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為20%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為20wt%的馬鈴薯汁20g/L、蔗糖20g/L,在培養(yǎng)溫度42 °C、搖瓶轉(zhuǎn)速為160rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)36h ;將 活化培養(yǎng)好的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為60%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為麩皮20g/L、蛋白胨15g/L、硫酸銨2g/L、氯化鈣O. 4g/L,在培養(yǎng)溫度42°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為160rpm的發(fā)酵罐內(nèi)培養(yǎng)48h,直至發(fā)酵罐中嗜熱側(cè)孢霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的嗜熱側(cè)孢霉單菌按質(zhì)量百分比8%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。白地霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的白地霉菌種接種到裝有體積比為20%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖20g/L、蛋白胨20g/L、磷酸氫二鉀2g/L、豆油12g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為200rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24h ;將活化培養(yǎng)好的白地霉菌種接種到裝有體積比為60 %發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米淀粉12g/L、豆油10g/L、玉米漿20g/L、硫酸銨2g/L、磷酸氫二鉀5g/L、硫酸鎂2g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為200rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)36h,直至發(fā)酵罐中白地霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的白地霉單菌按質(zhì)量百分比8%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。最后將高密度培養(yǎng)得到的各單一菌劑,按枯草芽孢桿菌20份、釀酒酵母20份、米曲霉20份、嗜熱側(cè)孢霉20份、白地霉20份的質(zhì)量比,復(fù)合得到餐廚垃圾降解復(fù)合菌。實(shí)施例4分別對枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、米曲霉、嗜熱側(cè)孢霉、白地霉的菌種進(jìn)行高密度
培養(yǎng)(I)單一菌劑吸附載體將米糠、玉米芯粉、麩皮按照質(zhì)量比I : O. 5 : 2的比例混合均勻,作為菌劑的吸附載體。(2)枯草芽孢桿菌將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的枯草芽孢桿菌菌種接種至裝有體積比為20%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖15g/L、蛋白胨12g/L、氯化鈉3g/L和牛肉膏O. 5g/L,在培養(yǎng)溫度為37°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為170rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24h ;將活化培養(yǎng)好的枯草芽孢桿菌菌種接種的裝有體積比為55%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉10g/L、葡萄糖5g/L、豆餅粉20g/L、魚粉4g/L、碳酸鈣6g/L、硫酸銨O. 8g/L、磷酸氫二鉀O. 2g/L、硫酸鎂O. 2g/L和硫酸錳O. 2g/L,在培養(yǎng)溫度為37°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)30h,直至發(fā)酵罐中枯草芽孢桿菌含量Sio9個/mL,然后將發(fā)酵得到的枯草芽孢桿菌單菌按質(zhì)量百分比6%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。釀酒酵母將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的釀酒酵母菌種接種至裝有體積比為20%的培養(yǎng)基的搖瓶中,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速150rpm,活化培養(yǎng)32h ;將活化培養(yǎng)好的釀酒酵母菌種接種到裝有體積比為55%培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),接種量為體積比2%,所述活化培養(yǎng)和發(fā)酵時的培養(yǎng)基為麥芽汁馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,在培養(yǎng)溫度為30°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為150rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)60h,直至發(fā)酵罐中釀酒酵母含量> IO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的釀酒酵母單菌按質(zhì)量百分比6%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。米曲霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的米曲霉菌種接種至裝有體積比為20%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖8g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂Ig/L、硫胺素O. 02g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為160rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)30h ;將活化培養(yǎng)好的米曲霉菌種接種到裝有體積比為55%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉30g/L、豆柏粉20g/L、硝酸鈉lg/L、磷酸氫二鉀3g/L、硫酸鎂lg/L、硫酸亞鐵O. 02g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為160rpm的發(fā)酵罐內(nèi) 擴(kuò)大培養(yǎng)42h,直至發(fā)酵罐中米曲霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的米曲霉單菌按質(zhì)量百分比6%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。嗜熱側(cè)孢霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為20 %的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為20wt %的馬鈴薯汁20g/L、蔗糖18g/L,在培養(yǎng)溫度42 °C、搖瓶轉(zhuǎn)速為160rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)36h ;將活化培養(yǎng)好的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為55%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為麩皮20g/L、蛋白胨15g/L、硫酸銨2g/L、氯化鈣O. 2g/L,在培養(yǎng)溫度42°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為160rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)48h,直至發(fā)酵罐中嗜熱側(cè)孢霉含量^ IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的嗜熱側(cè)孢霉單菌按質(zhì)量百分比6%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。白地霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的白地霉菌種接種到裝有體積比為20%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖18g/L、蛋白胨20g/L、磷酸氫二鉀2g/L、豆油12g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24h ;將活化培養(yǎng)好的白地霉菌種接種到裝有體積比為55 %發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米淀粉12g/L、豆油10g/L、玉米漿18g/L、硫酸銨2g/L、磷酸氫二鉀5g/L、硫酸鎂2g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為200rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)36h,直至發(fā)酵罐中白地霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的白地霉單菌按質(zhì)量百分比6%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。最后將高密度培養(yǎng)得到的各單一菌劑,按枯草芽孢桿菌15份、釀酒酵母10份、米曲霉10份、嗜熱側(cè)孢霉10份、白地霉10份的質(zhì)量比,復(fù)合得到餐廚垃圾降解復(fù)合菌。實(shí)施例5分別對枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、米曲霉、嗜熱側(cè)孢霉、白地霉的菌種進(jìn)行高密度
培養(yǎng)(I)單一菌劑吸附載體將米糠、玉米芯粉、麩皮按照質(zhì)量比3 I 2的比例混合均勻,作為菌劑的吸附載體。
(2)枯草芽孢桿菌將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的枯草芽孢桿菌菌種接種至裝有體積比為25%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖18g/L、蛋白胨13g/L、氯化鈉4g/L和牛肉膏O. 5g/L,在培養(yǎng)溫度為37°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為170rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24h ;將活化培養(yǎng)好的枯草芽孢桿菌菌種接種的裝有體積比為65%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉12g/L、葡萄糖4g/L、豆餅粉20g/L、魚粉5g/L、碳酸鈣8g/L、硫酸銨O. 8g/L、磷酸氫二鉀O. lg/L、硫酸鎂O. 2g/L和硫酸錳O. 2g/L,在培養(yǎng)溫度為37°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為200rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)30h,直至發(fā)酵罐中枯草芽孢桿菌含量SlO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的枯草芽孢桿菌單菌按質(zhì)量百分比10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。釀酒酵母將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的釀酒酵母菌種接種至裝有體積比為25%的培養(yǎng)基的搖瓶中,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為150rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)32h ;將 活化培養(yǎng)好的釀酒酵母菌種接種到裝有體積比為65%培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),接種量為體積比2 %,所述活化培養(yǎng)和發(fā)酵時的培養(yǎng)基為麥芽汁馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,在培養(yǎng)溫度為30°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)為速150rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)64h,直至至發(fā)酵罐中釀酒酵母含量> IO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的釀酒酵母單菌按質(zhì)量百分比10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。米曲霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的米曲霉菌種接種至裝有體積比為25%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖12g/L、磷酸二氫鉀2g/L、硫酸鎂lg/L、硫胺素O. 03g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為160rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)30h ;將活化培養(yǎng)好的米曲霉菌種接種到裝有體積比為65 %發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2 %,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉50g/L、豆柏粉25g/L、硝酸鈉2g/L、磷酸氫二鉀3g/L、硫酸鎂2g/L、硫酸亞鐵O. 03g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為160rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)42h直至發(fā)酵罐中米曲霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的米曲霉單菌按質(zhì)量百分比10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。嗜熱側(cè)孢霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為25 %的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為20wt %的馬鈴薯汁20g/L、蔗糖20g/L,在培養(yǎng)溫度42 °C、搖瓶轉(zhuǎn)速為160rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)36h ;將活化培養(yǎng)好的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為65%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為麩皮25g/L、蛋白胨15g/L、硫酸銨2g/L、氯化鈣O. 4g/L,在培養(yǎng)溫度42°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為160rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)48h,直至發(fā)酵罐中嗜熱側(cè)孢霉含量^ IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的嗜熱側(cè)孢霉單菌按質(zhì)量百分比10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。白地霉將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的白地霉菌種接種到裝有體積比為25%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖20g/L、蛋白胨25g/L、磷酸氫二鉀2g/L、豆油12g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為200rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24h ;將活化培養(yǎng)好的白地霉菌種接種到裝有體積比為65 %發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為2%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米淀粉14g/L、豆油12g/L、玉米漿20g/L、硫酸銨2g/L、磷酸氫二鉀5g/L、硫酸鎂2g/L,在培養(yǎng)溫度為28°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為200rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)36h,直至發(fā)酵罐中白地霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的白地霉單菌按質(zhì)量百分比10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。最后將高密度培養(yǎng)得到的各單一菌劑,按枯草芽孢桿菌30份、釀酒酵母25份、米曲霉30份、嗜熱側(cè)孢霉30份、白地霉30份的質(zhì)量比, 復(fù)合得到餐廚垃圾降解復(fù)合菌。
權(quán)利要求
1.一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌,其特征在于,所述餐廚垃圾降解復(fù)合菌由以下重量份數(shù)的原料混合制備而成,枯草芽孢桿菌15 30份、釀酒酵母10 25份、曲霉10 30份、嗜熱側(cè)孢10 30份、白地霉10 30份。
2.一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌的制備方法,其特征在于,其包括以下步驟 步驟I :分別將枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、曲霉、嗜熱側(cè)孢霉、白地霉的菌種進(jìn)行高密度培養(yǎng),然后接種至裝有體積比為15 30%的培養(yǎng)基的搖瓶中活化培養(yǎng),再將培養(yǎng)好的菌種接種到裝有體積比為50 70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵擴(kuò)大培養(yǎng); 步驟2 :將米糠、玉米芯粉和麩皮按質(zhì)量比為I 3 O. 5 I : I 3混合制成載體,并將步驟I中培養(yǎng)好的各菌種分別用上述載體吸附,制備成菌體質(zhì)量百分比為5 10%的單一菌劑,所述單一菌劑包括枯草芽孢桿菌單一菌劑、釀酒酵母單一菌劑、米曲霉單一菌齊U、嗜熱側(cè)孢霉單一菌劑、白地霉單一菌劑; 步驟3 :取重量份數(shù)分別為15 30份的枯草芽孢桿菌單一菌劑、10 25份的釀酒酵母單一菌劑、10 30份的曲霉單一菌劑、10 30份的嗜熱側(cè)孢單一菌劑以及10 30份的白地霉單一菌劑,將上述單一菌劑混合,制備完成。
3.如權(quán)利要求2所述的一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌的制備方法,其特征在于,所述枯草芽孢桿菌單一菌劑的制備包括以下步驟 步驟I :將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的枯草芽孢桿菌菌種接種至裝有體積比為15 30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖15 20g/L、蛋白胨10 15g/L、氯化鈉3 7g/L和牛肉膏O. 3 O. 8g/L,在培養(yǎng)溫度為36 40°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為150 200rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24 32h ; 步驟2 :將活化培養(yǎng)好的枯草芽孢桿菌菌種接種到裝有體積比為50 70%的發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為I 3%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉10 15g/L、葡萄糖3 8g/L、豆餅粉18 22g/L、魚粉3 8g/L、碳酸鈣5 10g/L、硫酸銨O. 8 I. Og/L、磷酸氫二鉀O. I O. 5g/L、硫酸鎂O. I O. 3g/L和硫酸錳O. I O. 3g/L,在培養(yǎng)溫度為36°C 40°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為200 220rpm的發(fā)酵罐中擴(kuò)大培養(yǎng)24 40h,直至發(fā)酵罐中的枯草芽孢桿菌含量> IO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的枯草芽孢桿菌單菌按質(zhì)量百分比5 10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。
4.如權(quán)利要求2所述的一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌的制備方法,其特征在于,所述釀酒酵母單一菌劑的制備包括以下步驟 步驟I :將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的釀酒酵母菌種接種至裝有體積比為15 30%的培養(yǎng)基的搖瓶中,在培養(yǎng)溫度為28 30°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為130 180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)32 48h ; 步驟2 :將活化培養(yǎng)好的釀酒酵母菌種接種到裝有體積比為50 70%培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),接種量為體積比I 3%,所述活化培養(yǎng)和發(fā)酵時的培養(yǎng)基為麥芽汁馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基,在培養(yǎng)溫度為30 32°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為130 180rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)60 84h,直至發(fā)酵罐中釀酒酵母含量SlO9個/mL,然后將發(fā)酵得到的釀酒酵母單菌按質(zhì)量百分比5 10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。
5.如權(quán)利要求2所述的一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌的制備方法,其特征在于,所述米曲霉單一菌劑的制備包括以下步驟步驟I :將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的米曲霉菌種接種至裝有體積比為15 30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖8 14g/L、磷酸二氫鉀I 3g/L、硫酸鎂I 2g/L、硫胺素O. 01 O. 05g/L,在培養(yǎng)溫度為28 30°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為140 180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)30 42h ; 步驟2 :將活化培養(yǎng)好的米曲霉菌種接種到裝有體積比為50 70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為I 3%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米粉30 60g/L、豆柏粉15 40g/L、硝酸鈉I 5g/L、磷酸氫二鉀I 5g/L、硫酸鎂I 3g/L、硫酸亞鐵O. 01 O. 05g/L,在培養(yǎng)溫度為28 30°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為140 180rpm的發(fā)酵罐中擴(kuò)大培養(yǎng)42 54h,直至發(fā)酵罐中米曲霉含量> IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的米曲霉單菌按質(zhì)量百分比5 10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。
6.如權(quán)利要求2所述的一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌的制備方法,其特征在于,所述嗜熱側(cè)孢霉單一菌劑的制備包括以下步驟 步驟I :將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的嗜熱側(cè)孢霉菌種接種到裝有體積比為15 30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為20wt%的馬鈴薯汁18 22g/L、蔗糖15 30g/L,在培養(yǎng)溫度40 45°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為140 180rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)36 48h ; 步驟2 :將活化培養(yǎng)好的嗜熱側(cè)孢菌種接種到裝有體積比為50 70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為I 3%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為麩皮15 30g/L、蛋白胨10 20g/L、硫酸銨I 5g/L、氯化鈣O. 2 O. 6g/L,在培養(yǎng)溫度40 45°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為140 180rpm的發(fā)酵罐中擴(kuò)大培養(yǎng)48 60h,直至發(fā)酵罐中嗜熱側(cè)孢霉含量彡IO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的嗜熱側(cè)孢單菌按質(zhì)量百分比5 10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。
7.如權(quán)利要求2所述的一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌的制備方法,其特征在于,所述白地霉單一菌劑的制備包括以下步驟 步驟I :將純化培養(yǎng)的斜面培養(yǎng)基上的白地霉菌種接種到裝有體積比為15 30%的活化培養(yǎng)基的搖瓶中,所述活化培養(yǎng)基的配方為葡萄糖10 25g/L、蛋白胨20 30g/L、磷酸氫二鉀I 3g/L、豆油10 15g/L,在培養(yǎng)溫度為28 30°C、搖瓶轉(zhuǎn)速為180 250rpm的搖瓶中活化培養(yǎng)24 36h ; 步驟2 :將活化培養(yǎng)好的白地霉菌種接種到裝有體積比為50 70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi),體積接種量為I 3%,所述發(fā)酵培養(yǎng)基的配方為玉米淀粉10 15g/L、豆油8 15g/L、玉米衆(zhòng)15 30g/L、硫酸銨I 5g/L、磷酸氫二鉀4 8g/L、硫酸鎂I 3g/L,在培養(yǎng)溫度為28 30°C、發(fā)酵罐攪拌轉(zhuǎn)速為180 250rpm的發(fā)酵罐內(nèi)擴(kuò)大培養(yǎng)36 48h,直至發(fā)酵罐中白地霉含量SlO8個/mL,然后將發(fā)酵得到的白地霉單菌按質(zhì)量百分比5 10%的比例經(jīng)載體吸附得到單一的菌劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種餐廚垃圾降解復(fù)合菌及其制備方法,制備方法包括以下步驟分別將枯草芽孢桿菌、釀酒酵母、曲霉、嗜熱側(cè)孢霉、白地霉的菌種進(jìn)行高密度培養(yǎng),然后接種至裝有體積比為15~30%的培養(yǎng)基的搖瓶中活化培養(yǎng),再將培養(yǎng)好的菌種接種到裝有體積比為50~70%發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐內(nèi)發(fā)酵擴(kuò)大培養(yǎng);將培養(yǎng)好的各菌種分別載體吸附,制備成干燥的單一菌劑;然后將重量份數(shù)分別為15~30份的枯草芽孢桿菌單一菌劑、10~25份的釀酒酵母單一菌劑、10~30份的曲霉單一菌劑、10~30份的嗜熱側(cè)孢單一菌劑以及10~30份的白地霉單一菌劑混合。本發(fā)明的有益效果為生產(chǎn)投資小,生產(chǎn)成本低,使用方便,降解效果好。
文檔編號C12N1/14GK102925395SQ20121046121
公開日2013年2月13日 申請日期2012年11月16日 優(yōu)先權(quán)日2012年11月16日
發(fā)明者李春龍 申請人:北京世紀(jì)阿姆斯生物技術(shù)股份有限公司