一種有效降解菌糠的混合菌劑及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及了食用菌工業(yè)廢棄物的降解領(lǐng)域，尤其涉及一種有效降解菌糠的混合菌劑及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]菌糠，又叫菌渣，是指栽培食用菌后所產(chǎn)生的培養(yǎng)基廢棄物，主要包括棉仔殼、木肩和秸桿等纖維素成分。近年來，隨著我國食用菌產(chǎn)業(yè)的不斷擴大，人們對食用菌需求量的不斷增加，使得菌糠的產(chǎn)量也隨之增加。菌糠如若隨意丟棄或燃燒掉，容易造成環(huán)境污染和引起資源浪費現(xiàn)象。因此，菌糠的合理開發(fā)利用對纖維素資源循環(huán)利用和減少環(huán)境污染至關(guān)重要。菌糠主要由粗纖維、粗蛋白和粗脂肪構(gòu)成。此外，還含有豐富的氨基酸和Ca等礦質(zhì)元素。目前菌糠常被用作基質(zhì)、肥料和飼料等。但菌糠飼料還未被大面積推廣利用，原因在于菌糠中的粗纖維含量較高，難以降解。只有將菌糠中的粗纖維成分進一步降解，菌糠才能用作動物飼料。利用混合菌劑降解菌糠中的粗纖維成分，可以使菌糠飼料更易被動物消化和吸收。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]為了解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明的一個目的是提供一種有效降解菌糠的混合菌劑及其制備方法，本發(fā)明的另外一個目的是提供上述的混合菌劑的應(yīng)用。本發(fā)明利用微生物降解菌糠無毒，操作簡單，菌糠降解效果明顯，不會給動物帶來安全隱患，經(jīng)濟效益明顯。降解過程不會影響菌糠飼料口感，更為重要的是降解過程屬于密封發(fā)酵，不會引起環(huán)境污染，利于環(huán)境保護。
[0004]為了實現(xiàn)上述的第一個目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案:
一種有效降解菌糠的混合菌劑，該混合菌劑由秸桿發(fā)酵菌液與粗纖維降解專用菌液分別以1:5-5:1比例混合制備混合菌劑原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接種于無菌蒸餾水中，同時加入1.0-5.0%無菌蒸餾水重量由黑曲霉、青霉組成的混合發(fā)酵液穩(wěn)定混合培養(yǎng)2 ~3 d，得到；
所述的混合發(fā)酵液的制備方法如下:將黑曲霉菌株、青霉分別接入到PDA斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)3-4 d后，用無菌水將斜面上的孢子洗下，制成孢子懸浮液，活菌數(shù)106 CFU/mL ;將黑曲霉、青霉按照15%~25%的比例液體發(fā)酵培養(yǎng)7~8 d后得到混合發(fā)酵液；
所述的秸桿發(fā)酵菌液制備方法如下:先配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)基原材料配方是:紅糖100g，無菌水1000 mL ;加入5 g秸桿發(fā)酵菌裝入含1000 mL培養(yǎng)基的塑料桶內(nèi)，密封，在35°C條件下厭氧發(fā)酵3 d變酸后即可得到秸桿發(fā)酵菌液；
所述的粗纖維降解專用菌液制備方法如下:取0.5 g粗纖維降解專用菌劑，添加到含1000 mL蒸餾水的塑料桶內(nèi)，密封，于28°C培養(yǎng)10 h后即制備得到粗纖維降解專用菌液。
[0005]上述的混合菌劑的制備方法，該方法包括以下的步驟:
I)將黑曲霉菌株、青霉分別接入到PDA斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)3-4 d后，用無菌水將斜面上的孢子洗下，制成孢子懸浮液，活菌數(shù)16 CFU/mL ;將黑曲霉、青霉按照15%~25%的比例液體發(fā)酵培養(yǎng)7?8 d后得到混合發(fā)酵液；
2)先配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)基原材料配方是:紅糖100g，無菌水1000 mL ;加入5 g稻桿發(fā)酵菌裝入含1000 mL培養(yǎng)基的塑料桶內(nèi)，密封，在35°C條件下厭氧發(fā)酵3 d變酸后即可得到秸桿發(fā)酵菌液；
3)取0.5 g粗纖維降解專用菌劑，添加到含1000 mL蒸餾水的塑料桶內(nèi)，密封，于28°C培養(yǎng)10 h后即制備得到粗纖維降解專用菌液；
4)秸桿發(fā)酵菌液與粗纖維降解專用菌液分別以1:5~5:1比例混合制備混合菌劑原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接種于無菌蒸餾水中，同時加入1.0-5.0%無菌蒸餾水重量由黑曲霉、青霉組成的混合發(fā)酵液穩(wěn)定混合培養(yǎng)2 ~3 d，得到混合菌劑。
[0006]為了實現(xiàn)上述的第二個目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案:
上述的混合菌劑用于降解菌糠的應(yīng)用。
[0007]本發(fā)明的的混合菌劑降解菌糠操作方便，降解效果明顯。采用混合菌劑降解的菌糠，粗纖維含量減少，使菌糠飼料更易于動物消化和吸收。此外，菌糠飼料的應(yīng)用可以減少菌糠的丟棄及燃燒，減少環(huán)境污染，給環(huán)保工作帶來了很大的好處。
【具體實施方式】
[0008]I)將黑曲霉菌株、青霉(均采購沂源康源生物科技有限公司)分別接入到PDA斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)3 d后，用無菌水將斜面上的孢子洗下，制成孢子懸浮液，活菌數(shù)16 CFU/mL ;將黑曲霉、青霉按照20%的比例液體發(fā)酵培養(yǎng)7 d后得到混合發(fā)酵液；
2)先配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)基原材料配方是:紅糖100g，無菌水1000 mL ;加入5 g稻桿發(fā)酵劑(采購農(nóng)富康生物科技有限公司)裝入含1000 mL培養(yǎng)基的塑料桶內(nèi)，密封，在35°C條件下厭氧發(fā)酵3 d變酸后即可得到秸桿發(fā)酵菌液；
3)取0.5 g粗纖維降解專用菌劑(采購廣州農(nóng)冠生物科技有限公司)，添加到含1000mL蒸餾水的塑料桶內(nèi)，密封，于28°C培養(yǎng)10 h后即制備得到粗纖維降解專用菌液；
4)秸桿發(fā)酵菌液與粗纖維降解專用菌液分別以1:3比例混合制備混合菌劑原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接種于無菌蒸餾水中，同時加入5.0%無菌蒸餾水重量由黑曲霉、青霉組成的混合發(fā)酵液穩(wěn)定混合培養(yǎng)2 d，得到有效降解菌糠的混合菌劑。
[0009]分別利用秸桿發(fā)酵菌液、粗纖維降解專用菌種以及不同比例制備的復(fù)合發(fā)酵菌液，按照每10 mL菌劑噴灑I kg菌糠的比例噴灑，24 h噴灑一次，翻倒I次，35°C下培養(yǎng)3d后，測定菌糠的降解率。
[0010]經(jīng)不同菌劑的處理，平菇菌糠和杏鮑菇菌糠以不同的比例降解。結(jié)果表明利用粗纖維降解專用菌種降解平菇菌糠3 d時，平菇菌糠降解率最大值可達19.8% ;利用混合菌劑(秸桿發(fā)酵劑與粗纖維降解專用菌種混合比例為4:2)降解杏鮑菇菌糠3 d時，可以使杏鮑菇菌糠降解率最大值達13.7%。利用黑曲霉、青霉組成的混合發(fā)酵液與混合菌劑(秸桿發(fā)酵劑與粗纖維降解專用菌種混合比例為4:2)共同降解菌糠3 d后，平菇菌糠及杏鮑菇菌糠降解率分別達到30.2%和23.2%，分別是是未添加黑曲霉及青霉發(fā)酵液前的降解率的1.8倍、1.7倍。故黑曲霉、青霉與秸桿降解菌劑等混合共同降解菌糠，菌糠降解效果最好。利用黑曲霉、青霉與秸桿降解菌劑等混合共同降解菌糠不僅簡單方便，可行性較高。此外，相同條件下利用不同菌降解平菇菌糠及杏鮑菇菌糠，平菇菌糠的降解率均大于杏鮑菇菌糠的降解率。因此，平菇菌糠相較于杏鮑菇菌糠更易于降解，即平菇菌糠更適合用于動物飼料。
【主權(quán)項】
1.一種有效降解菌糠的混合菌劑，其特征在于該混合菌劑由秸桿發(fā)酵菌液與粗纖維降解專用菌液分別以1:5~5:1比例混合制備混合菌劑原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接種于無菌蒸餾水中，同時加入1.0-5.0%無菌蒸餾水重量由黑曲霉、青霉組成的混合發(fā)酵液穩(wěn)定混合培養(yǎng)2 ~3d，得到； 所述的混合發(fā)酵液的制備方法如下:將黑曲霉菌株、青霉分別接入到PDA斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)3-4 d后，用無菌水將斜面上的孢子洗下，制成孢子懸浮液，活菌數(shù)16 CFU/mL ;將黑曲霉、青霉按照15%~25%的比例液體發(fā)酵培養(yǎng)7~8d后得到混合發(fā)酵液； 所述的秸桿發(fā)酵菌液制備方法如下:先配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)基原材料配方是:紅糖100g，無菌水1000 mL ;加入5 g秸桿發(fā)酵菌裝入含1000 mL培養(yǎng)基的塑料桶內(nèi)，密封，在35°C條件下厭氧發(fā)酵3 d變酸后即可得到秸桿發(fā)酵菌液； 所述的粗纖維降解專用菌液制備方法如下:取0.5 g粗纖維降解專用菌劑，添加到含1000 mL蒸餾水的塑料桶內(nèi)，密封，于28°C培養(yǎng)10 h后即制備得到粗纖維降解專用菌液。2.權(quán)利要求1所述的混合菌劑的制備方法，其特征在于該方法包括以下的步驟: 1)將黑曲霉菌株、青霉分別接入到PDA斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)3-4d后，用無菌水將斜面上的孢子洗下，制成孢子懸浮液，活菌數(shù)16 CFU/mL ;將黑曲霉、青霉按照15%~25%的比例液體發(fā)酵培養(yǎng)7?Sd后得到混合發(fā)酵液； 2)先配置培養(yǎng)基，培養(yǎng)基原材料配方是:紅糖100g，無菌水1000 mL ;加入5 g稻桿發(fā)酵菌裝入含1000 mL培養(yǎng)基的塑料桶內(nèi)，密封，在35°C條件下厭氧發(fā)酵3 d變酸后即可得到秸桿發(fā)酵菌液； 3)取0.5 g粗纖維降解專用菌劑，添加到含1000 mL蒸餾水的塑料桶內(nèi)，密封，于28°C培養(yǎng)10 h后即制備得到粗纖維降解專用菌液； 4)秸桿發(fā)酵菌液與粗纖維降解專用菌液分別以1:5~5:1比例混合制備混合菌劑原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接種于無菌蒸餾水中，同時加入1.0-5.0%無菌蒸餾水重量由黑曲霉、青霉組成的混合發(fā)酵液穩(wěn)定混合培養(yǎng)2 ~3d，得到混合菌劑。3.權(quán)利要求1所述的混合菌劑用于降解菌糠的應(yīng)用。
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種有效降解菌糠的混合菌劑，該混合菌劑由秸稈發(fā)酵菌液與粗纖維降解專用菌液分別以1:5~5:1比例混合制備混合菌劑原液，然后以0.25%~1.0%的混合原液接種于無菌蒸餾水中，同時加入1.0~5.0%無菌蒸餾水重量由黑曲霉、青霉組成的混合發(fā)酵液穩(wěn)定混合培養(yǎng)2~3d，得到；混合發(fā)酵液的制備方法如下：將黑曲霉菌株、青霉分別接入到PDA斜面培養(yǎng)基上培養(yǎng)3-4？d后，用無菌水將斜面上的孢子洗下，制成孢子懸浮液，活菌數(shù)106？CFU/mL；將黑曲霉、青霉按照15%~25%的比例液體發(fā)酵培養(yǎng)7~8d后得到混合發(fā)酵液；本發(fā)明的混合菌劑降解菌糠操作方便，降解效果明顯。
【IPC分類】A23K1/14, C12R1/685, A23K1/00, C12N1/14, C12R1/80
【公開號】CN105087398
【申請?zhí)枴緾N201510569108
【發(fā)明人】蔡妙珍, 張麗影, 邢承華, 潘婷, 陳碧春
【申請人】浙江師范大學(xué)
【公開日】2015年11月25日
【申請日】2015年9月9日