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含有益生的異麥芽-寡糖的谷物組合物及其制造和應(yīng)用方法

文檔序號:426075閱讀:1022來源:國知局

專利名稱::含有益生的異麥芽-寡糖的谷物組合物及其制造和應(yīng)用方法
技術(shù)領(lǐng)域
:本發(fā)明描述了含有異麥芽寡糖(isomalto-oligosaccharides)的谷物組合物及其制造方法。該方法包括從谷物中含有的淀粉衍生異麥芽寡糖。
背景技術(shù)
:異麥芽寡糖(“IMOs”)是混合的鍵接寡糖(mixedlinkageoligosaccharides),含有1,4α和/或1,6α糖苷鍵的混合物。它們也被稱為不規(guī)則連接寡糖(“ALOs”)。異麥芽寡糖包含大量的分支寡糖,如異麥芽糖、4-α-葡糖基麥芽糖、異麥芽三糖、異麥芽四糖、異4-α-葡糖基麥芽糖和更加高度分支的寡糖。存在對含有IMOs的產(chǎn)品的市場需求。IMO產(chǎn)品以粉末形式或者液體形式出售,這取決于所打算的用途。潛在的用途是在食品領(lǐng)域。IMO產(chǎn)品的例子是調(diào)味品(蛋黃醬、醋、湯底等),甜食(糖果、口香糖、巧克力、冰激凌、果子露、糖漿),水果和蔬菜加工食品(果醬、柑橘醬、水果沙司、腌菜),肉類或者魚類食品(火腿、香腸等),焙烤食品(面包、蛋糕、曲奇、酥皮糕點(diǎn)),預(yù)先烹熟的食物(色拉、煮熟的豆等),罐裝和瓶裝食品、方便食品(速溶咖啡、速溶蛋糕酒底(instantcakebase)等),和飲料,既包括含酒精的飲料(酒精飲料、seju、果酒、日本米酒、啤酒[國際公布號WO02/20712A1],等)又包括不含酒精的飲料(咖啡、果汁、蜜汁飲料、充氣飲料或者碳酸飲料、檸檬水、可樂)。異麥芽寡糖可以進(jìn)一步用作動(dòng)物飼料和寵物飼料中的成分。非食物的應(yīng)用領(lǐng)域是化妝品和藥物(香煙、口紅、牙膏、內(nèi)服藥等)。異麥芽寡糖屬于被歸類為功能健康食品寡糖(“FHFO”)的一類寡糖。代表性的IMOs包括果糖-寡糖、半乳糖-寡糖、木糖-寡糖和龍膽-寡糖(gentio-oligosaccharides)。當(dāng)IMOs被規(guī)則地每日口服時(shí),與之相聯(lián)系的是人類和動(dòng)物的綜合健康狀態(tài)的增進(jìn),IMOs被歸類為“益生質(zhì)(prebiotics)”。益生質(zhì)被定義為不易消化的物質(zhì)(例如,食物纖維),其通過選擇性刺激存在于腸道或者在治療中被導(dǎo)入腸道的有益微生物的生長或者生物活性,對人類施加一些生物學(xué)效應(yīng)。(PrzemyslawJanTomasikandPiotrTomasik.2003AmericanAssociationofCerealChemists,Inc.80(2)113-117)。寡糖的“益生(prebiotic)”作用是增加大腸中雙歧桿菌(bifidobacteria)和乳酸桿菌(lactobacilli)(″益生質(zhì)″)的數(shù)量,和降低腐敗細(xì)菌(putrifactivebacteria)的濃度。雙歧桿菌與一些促進(jìn)健康的性質(zhì)有關(guān),例如抑制病原體生長,這是通過形成酸或者是通過抗微生物活性實(shí)現(xiàn)的。它們也和這一類的種種效應(yīng)有關(guān),如調(diào)節(jié)免疫系統(tǒng)(抗腫瘤性質(zhì)),降低甘油三酯和膽固醇水平,生成維生素(B族),降低血氨濃度,防止易位,抗菌治療后恢復(fù)正常的腸道菌群,產(chǎn)生消化酶,減少與抗生素相關(guān)的副作用(KohmotoT.,F(xiàn)ukuiF.,TakakuH.,MachidaY.,etal.,BifidobacteriaMicroflora,7(2)(1988),61-69;KohmotoK.,TsujiK.,KanekoT.,ShiotaM.,etal.,Biosc.Biotech.Biochem.,56(6)(1992),937-940;KanekoT.,KohmotoT.,KikuchiH.,F(xiàn)ukuiF.,etal.,NipponNogeikagakuKaishi,66(8)(1992),1211-1220,ParkJ-H,Jin-YoungY.,Ok-HoS.,Hyun-KyungS.,etal.,Kor.J.Appl.Microbiol.Biotechnol.,20(3)(1992),237-242)。Modler,H.W.,1992,″CompoundswhichenhancethegrowthofPrebioticBacteria″,presentedattheInternationalRoundtableonAnimalFeedBiotechnology,Ottawa,Ontario,Canada。異麥芽寡糖是應(yīng)用D-葡糖基轉(zhuǎn)移酶(E.C.2.4.1.24,轉(zhuǎn)葡糖苷酶,α-葡糖苷酶),通過酶催化的轉(zhuǎn)葡糖基反應(yīng)(transglucosylationreaction)合成的。此酶在與α-D-葡糖-寡糖溫育時(shí),催化水解反應(yīng)和轉(zhuǎn)移反應(yīng)。對6-OH(葡萄糖分子的羥基基團(tuán)6)的轉(zhuǎn)移發(fā)生得最頻繁,由D-葡萄糖產(chǎn)生異麥芽糖,或者從麥芽糖產(chǎn)生4-α-葡糖基麥芽糖。該酶也可以催化向D-葡萄糖的2-OH或者3-OH的轉(zhuǎn)移,形成曲二糖(2-葡糖-α-葡糖苷)或者黑霉糖,或者回到4-OH再形成麥芽糖。轉(zhuǎn)葡糖苷酶反應(yīng)的結(jié)果是,麥芽寡糖轉(zhuǎn)變?yōu)楫慃溠抗烟?,形成了含有更高比例的葡萄糖部分的一類寡糖,所述葡萄糖部分連接于葡萄糖分子非還原末端的一級羥基基團(tuán),例如,通過α-D-1,6糖苷鍵連接。來自黑曲霉的轉(zhuǎn)葡糖苷酶僅作用于低聚合度(DP)的寡糖(McClearyB.V.,GibsonT.S.,CarbohydrateResearch185(1989)147-162;BensonC.P.,KellyC.T.,F(xiàn)ogartyW.M.,J.Chem.Tech.Biotechnol.,32(1982)790-798;PazurJ.H.,TominagaY,DeBrosseC.W.,JackmanL.M.,CarbohydrateResearch,61(1978)279-290)。聚合度是指葡萄糖單位的數(shù)目。例如,二葡糖基分子,例如麥芽糖的DP是2。這些糖作為食品添加劑受到了越來越多的關(guān)注,原因是它們有助于預(yù)防齲齒(Oshima,et.al1988.Thecariesinhibitoryeffectsofgos-sugarinvitroandratexperiments.MicrobialImmunol.32,1093-1105),并且可作為雙歧桿菌的生長因子(益生質(zhì)),改善人類的腸道微生物作用(Komoto,et.al1988;EffectofIsomalto-oligosaccharidesonhumanfecalflora,BifidobacteriaMicroflora7,61-69)??梢砸圆煌椒ǖ玫疆慃溠抗烟恰@?,用葡糖淀粉酶處理高干固體濃度,即60-80%的葡萄糖糖漿,導(dǎo)致DP主要為2的異麥芽寡糖的形成。高固體水平的存在,迫使反應(yīng)從有利于水解的正常方向逆轉(zhuǎn)。谷物,包括小麥、大麥等,在許多增值的功能食物成分,如小麥粉、淀粉、淀粉水解產(chǎn)物(葡萄糖、果糖、高麥芽糖糖漿等)和小麥麩(wheatgluten)的經(jīng)濟(jì)生產(chǎn)中,是極好的原材料。在抗生素、藥物、疫苗、生物化學(xué)制品,如乙醇(既包含飲料也包括燃料)、氨基酸、有機(jī)酸等的生產(chǎn)中,以及最近在被稱為異麥芽寡糖的功能健康食品寡糖的生產(chǎn)中,含有高水平麥芽糖的糖漿也被用作許多微生物發(fā)酵中的碳源。在生產(chǎn)淀粉水解產(chǎn)物,如麥芽糖糖漿的傳統(tǒng)方法中,在水解前,通常通過淀粉液化和產(chǎn)麥芽α淀粉酶,將不溶的顆粒狀淀粉與小麥的其它細(xì)胞成分分離。麥芽糖是由通過α1-4D-糖苷鍵連接的兩個(gè)葡糖基殘基組成的二糖,它是麥芽寡糖家族中最小的物質(zhì)。它是作為不同純度級別的糖漿、粉末和晶體而大規(guī)模生產(chǎn)的。各種麥芽糖糖漿受到了明顯的關(guān)注,它們可用于釀造、烘烤、罐裝軟飲料、糖果和其它食品和飲料工業(yè)的商業(yè)用途中。在日本,超純麥芽糖被用作靜脈內(nèi)營養(yǎng)物。麥芽糖的催化還原形成麥芽糖醇,其被認(rèn)為是低卡路里的甜味劑。近來,高麥芽糖糖漿已經(jīng)成為工業(yè)生產(chǎn)異麥芽寡糖的重要原料(J.K.ShittyandO.J.Lantero,1999″TransglucosylationofMalto-oligosaccharides.″Paperpresentedat50thStarchConvention,Detmold,Germany)。在生產(chǎn)淀粉水解產(chǎn)物如高麥芽糖糖漿的傳統(tǒng)方法中,在水解之前,用來自地衣形芽孢桿菌(Bacilluslicheniformis)或嗜熱脂肪芽孢桿菌(Bacillusstearothermophilus)的耐熱液化α淀粉酶[EC3.2.1.2,α(1,4)-葡聚糖葡聚糖水解酶]將不溶性淀粉分離出來。純化淀粉(精制的)的水解是通過,在水中懸浮不溶性顆粒淀粉(30%-50%溶解固體成分[dsb])并加熱至85℃至120℃之間的溫度以溶解淀粉,和使其易受到酶促水解而進(jìn)行的。使用麥芽糖生成酶,進(jìn)一步處理液化的淀粉,以產(chǎn)生具有不同的糖類組成的淀粉水解產(chǎn)物,如真菌α淀粉酶(GenencorInternational,PaloAlto,CA出售,商標(biāo)名為CLARASEL)用于含有少于55%麥芽糖的糖漿,β淀粉酶(GenencorInternational,PaloAlto,CA出售,商標(biāo)名為OPTIMALBBA)用于產(chǎn)生含有55%至62%的麥芽糖成分和少于1%葡萄糖的糖漿。對于>62%的更高水平麥芽糖糖漿,聯(lián)合加入脫支酶(GenencorInternational,PaloAlto,CA出售,商標(biāo)名為OPTIMAXL-1000)和β淀粉酶是有用的。(Faigh,J.;Duan,G.;Strohm,B.andShetty,J.(2002)″ProductionofMaltose,HighMaltose&VeryHighMaltoseSyrups,″TechnicalBulletin,GenencorInternationalInc.)。已經(jīng)報(bào)道了一種將顆粒淀粉(精制的)轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苄运猱a(chǎn)物的方法,這是通過在低于淀粉糊化溫度的溫度,與細(xì)菌α淀粉酶溫育(Leachet.al1978;美國專利號4,113,509),隨后由β淀粉酶水解,產(chǎn)生高麥芽糖糖漿(Leachet.al1975;美國專利號3,922,196)實(shí)施的。然而,通過這種方法產(chǎn)生的糖漿形成的麥芽糖僅占總含糖量的55%,而含有的麥芽三糖水平非常高。歐洲專利申請0905256(Christophersen,et.al2000)和美國專利5,141,859(Nimmi,et.al1992),描述了應(yīng)用液化的淀粉(糊化后,應(yīng)用耐熱α淀粉酶水解)生產(chǎn)高麥芽糖糖漿的方法。此過程麻煩、昂貴,并且需要將淀粉從其它細(xì)胞組分中分離出來,添加的麥芽糖生成酶的成本高,需要高溫處理和較長的反應(yīng)時(shí)間。歐洲專利申請0350737A2(Shinke,et.al1989)公開了一種生成麥芽糖糖漿的方法,方法是應(yīng)用來自嗜熱脂肪芽孢桿菌的α淀粉酶,在60℃,水解來自玉米、小麥、馬鈴薯和甘薯的顆粒狀(純化的)淀粉,沒有傳統(tǒng)的液化步驟(凝膠化,隨后在高溫下液化)。然而,該水解的淀粉導(dǎo)致麥芽糖濃度范圍為50%至55%。該糖漿含有的麥芽三糖水平也非常高(30-36%)。不論淀粉的來源如何,此方法均造成麥芽糖與麥芽三糖的比率少于2.0。由于代謝麥芽三糖的難度大,含有高水平麥芽三糖的麥芽糖糖漿在許多微生物發(fā)酵包括酵母的乙醇發(fā)酵中,不是碳供給的優(yōu)選底物(J.K.ShettyandO.J.Lantero,1999″TransglucosylationofMalto-oligosaccharides.″,論文在德國Detmold第50屆淀粉大會上發(fā)布)。美國專利6,361,809描述了生產(chǎn)麥芽糖和極限糊精的方法,方法為用水解酶,分類為EC3.2.1.133的來自嗜熱脂肪芽孢桿菌的maltogenaseα淀粉酶處理純化的顆粒狀蠟質(zhì)玉米淀粉,隨后應(yīng)用超濾方法分離麥芽糖。對含有麥芽糖的稀釋透過物(dilutepermeate)的蒸發(fā)是昂貴的,因?yàn)槟茉椿ㄙM(fèi)高,并且存在著微生物污染的高風(fēng)險(xiǎn)。傳統(tǒng)地,谷物如小麥、麥芽、高粱屬(買羅高梁)、黍(鴨腳稗),特別地是整個(gè)的谷物,可作為宏量(micro-)元素和微量元素、蛋白質(zhì)、纖維和維生素的載體,被用在營養(yǎng)品中。谷物谷物中的大多數(shù)似乎太容易被消化,以至于不能作為益生質(zhì)或者甚至作為營養(yǎng)物質(zhì)(nutraceuticals)而起到有效的作用。已經(jīng)建議,設(shè)計(jì)遺傳修飾的、較不易消化的、適于作為益生質(zhì)的谷物,以調(diào)節(jié)腸道微生物群(Gibson,G.R,andRoberfroid,M.B.1995,DietarymodulationofthehumancolonicmicrfloraIntroducingtheconceptofprebiotics.J.Nutr.125,1401-1412)。生產(chǎn)含有異麥芽寡糖的谷物組合物的方法一直受到關(guān)注,希望在這樣的方法中在轉(zhuǎn)葡糖苷反應(yīng)(transglucosidationaction)之前,不需要將淀粉與其它谷物成分分離開來和/或使底物的淀粉遭受蒸氣加壓的高溫,便能從源底物例如谷物或者塊莖酶促地衍生出異麥芽寡糖。用于最小化微生物污染的低pH方法,也一直受到關(guān)注。本發(fā)明即是針對這些關(guān)注。發(fā)明概述本發(fā)明描述了用于生產(chǎn)異麥芽寡糖谷物組合物的方法,所述方法包括(a)用產(chǎn)麥芽酶(maltogenicenzyme)和淀粉液化酶(starchliquefyingenzyme)接觸含有未糊化淀粉的谷物,以生成麥芽糖;(b)用轉(zhuǎn)糖苷的酶(transglucosidicenzyme)接觸所述麥芽糖,其中所述步驟(a)和所述步驟(b)發(fā)生的溫度是低于或者等于淀粉糊化溫度;和(c)獲得具有酶促生成的異麥芽寡糖的谷物組合物,其中所述寡糖來源于所述谷物。可任選地,在一種實(shí)施方案中,步驟(a)和(b)同時(shí)發(fā)生。在另一種實(shí)施方案中,該方法進(jìn)一步包括干燥所述谷物組合物的步驟。在另一種實(shí)施方案中,所述谷物選自小麥、黑麥、大麥、麥芽和水稻。在另一種實(shí)施方案中,所述谷物選自高粱、黍和水稻。在另一種實(shí)施方案中,所述產(chǎn)麥芽酶是β淀粉酶。在另一種實(shí)施方案中,所述產(chǎn)麥芽酶對所述谷物來說,是內(nèi)源性的。在另一種實(shí)施方案中,所述產(chǎn)麥芽酶對所述谷物來說,是外源性的。在另一種實(shí)施方案中,所述淀粉液化酶是源自桿菌(Bacillus)的α淀粉酶。在另一種實(shí)施方案中,所述淀粉液化酶源自地衣形芽孢桿菌或嗜熱脂肪芽孢桿菌。在另一種實(shí)施方案中,所述轉(zhuǎn)葡糖苷的酶是轉(zhuǎn)葡糖苷酶(transglucosidase)。在另一種實(shí)施方案中,轉(zhuǎn)葡糖苷酶源自曲霉菌(Aspergillus)。在另一種實(shí)施方案中,轉(zhuǎn)葡糖苷酶源自黑曲霉(Aspergillusniger)。本發(fā)明的其它實(shí)施方案包括根據(jù)上面所描述方法而產(chǎn)生的谷物組合物。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案包括含有上面所描述谷物組合物的食品添加劑。本發(fā)明也描述了在等于或者低于糊化溫度時(shí)生產(chǎn)異麥芽寡糖強(qiáng)化谷粉的方法,其中使帶有內(nèi)源性的產(chǎn)麥芽酶的未糊化谷物接觸選自桿菌的溶解酶(solubilizingenzyme),以產(chǎn)生麥芽糖糖漿。使麥芽糖糖漿接觸轉(zhuǎn)葡糖苷酶,產(chǎn)生基質(zhì)(塊莖或者谷物)組合物,所述組合物包括來源于它們的異麥芽-糖類。本發(fā)明也描述了在等于或者低于糊化溫度時(shí)生產(chǎn)異麥芽寡糖強(qiáng)化谷粉的方法,其中將帶有內(nèi)源性的產(chǎn)麥芽酶的未糊化谷物(小麥、大麥等)與不帶有內(nèi)源性的產(chǎn)麥芽酶的未糊化谷物(例如,高粱、黍或者水稻)混合,將該谷物混合物接觸選自桿菌的溶解酶,以生成麥芽糖糖漿。將該麥芽糖糖漿接觸于轉(zhuǎn)葡糖苷酶,產(chǎn)生基質(zhì)(塊莖或者谷物)組合物,所述組合物包括來源于它們的異麥芽-糖類。本發(fā)明也描述了用于制造小麥谷物組合物的方法,所述方法包括(a)將含有內(nèi)源性的產(chǎn)麥芽β淀粉酶的未糊化小麥谷物與來自桿菌的淀粉液化α淀粉酶接觸,以產(chǎn)生麥芽糖;(b)用轉(zhuǎn)葡糖苷酶接觸所述麥芽糖,其中所述步驟(a)和步驟(b)發(fā)生在低于小麥糊化溫度的溫度;和(c)獲得含有酶促生成的異麥芽寡糖的小麥谷物組合物,其中所述寡糖來源于所述的未糊化谷物。可任選地,在另一種實(shí)施方案中,本方法應(yīng)用上述方法來制造用于制造食品添加劑的谷物組合物。另一種實(shí)施方案包括由此制成的谷物組合物。另一種實(shí)施方案包括含有如上所述的谷物組合物的谷粉。另一種實(shí)施方案包括根據(jù)上面所述方法制成的異麥芽寡糖。另一種實(shí)施方案包括含有上述的異麥芽寡糖的口服再水合溶液。另一種實(shí)施方案包括含有未糊化谷物和至少一種異麥芽寡糖的谷物組合物,其中所述異麥芽寡糖酶促地來源于所述的未糊化谷物。在另一種實(shí)施方案中,谷物組合物含有重量大于1%的至少一種異麥芽寡糖。附圖簡述圖1是描述異麥芽寡糖強(qiáng)化谷粉生產(chǎn)的流程圖。圖2是描述異麥芽寡糖強(qiáng)化小麥粉生產(chǎn)的另一個(gè)流程圖。發(fā)明詳述定義術(shù)語“谷物(grain)”是指植物,其被歸類為谷類(cereal)或者屬于禾本目的單子葉植物,尤其是屬于禾本科的單子葉植物。屬于此類的植物的例子是選自小麥屬(小麥),大麥屬(大麥);黑麥屬(黑麥);玉蜀黍?qū)?玉米(corn))或者玉蜀黍(maize));燕麥屬(燕麥),蕎麥屬(蕎麥);高粱屬(高粱或者買羅高梁),黍?qū)倩蛘吖肺膊輰?黍或者鴨腳稗);或者稻屬(稻)。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“小麥(wheat)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為小麥(Triticumaestivum)品系。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“大麥(barely)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為大麥(Hordeumvulgare)品系。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“黑麥(rye)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為黑麥(Secalecereal)品系。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“玉米(corn)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為玉米(Zeamays)品系。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“燕麥(oats)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為燕麥(Avenasativa)品系。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“蕎麥(buckwheat)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為蕎麥(Fagopyrumesculentum)品系。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“高粱(sorghum)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為高梁(Sorghumbicolor)品系。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“黍(millet)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為黍(Panicummiliaceum)或者粟(Setariaitalic)品系。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“稻(rice)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為水稻(Orvzasativa)品系。術(shù)語“塊莖(tuber)”是指淀粉貯存器官(例如馬鈴薯、甘薯、山藥、樹薯等),其由地下莖或者根的遠(yuǎn)端膨脹而形成。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“馬鈴薯(potato)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為馬鈴薯(Solanumtuberosum)品系。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“甘薯(sweetpotato)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為甘薯(ipom[oe]abatatas)品系。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語“山藥(yam)”是指植物,其被分類為或者曾經(jīng)被分類為山藥(Dioscoreasativa、D.villosa、C.batatas)品系。術(shù)語底物(substrate,本文中有時(shí)也稱為“基質(zhì)”)是指可以酶促地轉(zhuǎn)變?yōu)辂溠刻遣亩D(zhuǎn)變?yōu)镮MOs的物質(zhì)。術(shù)語“底物”包括,例如,谷物和塊莖。進(jìn)一步地,術(shù)語底物包括谷物(去外殼的或者未去外殼的)或者塊莖的所有形式,如完整谷物、破碎的谷物、粗粉和面粉以及任何植物部分。術(shù)語“淀粉(strach)”是指由植物的復(fù)雜多糖碳水化合物組成的任何物質(zhì),由式子為(C6H10O5)x的直鏈淀粉和支鏈淀粉組成,其中X可以是任何數(shù)字。術(shù)語“顆粒淀粉(granularstrach)”是指未煮過的(生的)淀粉,其還未被糊化。術(shù)語“糊化(gelatinization)”是指淀粉分子的溶解,形成粘性的懸浮物。術(shù)語“含有未糊化淀粉的“底物”、“谷物”或者“塊莖””是指未糊化的底物、谷物或者塊莖,其未遭受高于淀粉糊化溫度的溫度,所述的淀粉糊化溫度導(dǎo)致底物中包含的淀粉糊化或者液化。術(shù)語“麥芽糖(maltose)”是指具有兩個(gè)葡糖基殘基的二糖,這兩個(gè)葡糖基殘基通過α1,4D-糖苷鍵連接。術(shù)語“異麥芽糖(isomaltose)”是指具有兩個(gè)葡糖基殘基的二糖,這兩個(gè)葡萄糖殘基通過α1,6D-糖苷鍵連接。術(shù)語“異麥芽寡糖(isomalto-oligosaccharide,IMO)”是指具有至少兩個(gè)葡糖基殘基的糖,所述殘基通過在非還原端的α1,6糖苷鍵連接。此外,該術(shù)語可指不規(guī)則連接的寡糖,既有α1,6糖苷鍵又有α1,4糖苷鍵的糖。代表性的異麥芽寡糖包括異麥芽糖、4-α-葡糖基麥芽糖(panose)和異麥芽三糖(isomalto-triose)。術(shù)語“異麥芽寡糖”谷物組合物是指谷物組合物,其特征為異麥芽-糖(isomalto-sugars)水平占總含糖量的至少1%(w/w%),如由高效液相色譜方法所測定。術(shù)語“產(chǎn)麥芽酶(maltogenicenzyme)”是指將淀粉轉(zhuǎn)變?yōu)辂溠刻堑拿?。代表性的產(chǎn)麥芽酶包括源自真菌、細(xì)菌和植物的α淀粉酶和β淀粉酶。術(shù)語“淀粉酶(amylases)”是指催化淀粉水解的酶。術(shù)語“α-淀粉酶(α-amylases)”是指(E.C.)3.2.1.1類別和/或3.2.1.133類別的酶,其催化α-1,4-糖苷鍵的水解。這些酶也被描述為,在含有1,4-α連接的D-葡萄糖單位的多糖中,外切水解或者內(nèi)切水解1,4-α-D-糖苷鍵的那些酶。用以描述這些酶的另一個(gè)術(shù)語是糖原酶。代表性的酶包括α-1,4-葡聚糖4-葡聚糖水解酶葡聚糖水解酶。術(shù)語“β-淀粉酶(β-amylases)”是指(E.C.)3.2.1.2類別的酶,其催化α-1,4-糖苷鍵水解,釋放麥芽糖單位。這些酶也被描述為,使多糖中1,4-α-D-糖苷鍵水解,以致從鏈的非還原末端移除連續(xù)的麥芽糖單位的那些酶。術(shù)語“轉(zhuǎn)糖苷的(transglucosidic)”酶是指在和αD-葡糖-寡糖(αD-gluco-oligosaccharides)溫育時(shí),催化水解和轉(zhuǎn)移兩種反應(yīng)的酶。代表性的酶包括轉(zhuǎn)葡糖苷酶(transglucosidases)和/或(E.G.)2.4.1.24類別的那些酶,例如,D-葡糖基轉(zhuǎn)移酶。這些酶也被稱為1,4-α-葡聚糖-α-葡糖基轉(zhuǎn)移酶和寡葡聚糖分支糖基轉(zhuǎn)移酶。術(shù)語脫支酶(debranchingenzyme)是指催化α-1,6-糖苷鍵水解的酶。就此而論,E.C.3.2.1.41類的酶是有用的。此類的代表性酶是普魯蘭酶(pullanase),也被稱為α-糊精內(nèi)切-1,6-α葡糖苷酶、極限糊精酶、脫支酶、支鏈淀粉1,6-葡聚糖水解酶。(E.C.)3.2.1.41類的其它代表性酶,例如,支鏈淀粉酶(pullulanases),[α-(1-6)-葡聚糖6-葡聚糖水解酶,也被稱為α-(1,6)-葡糖苷酶])。術(shù)語“淀粉糊化溫度(starchgelatinizingtemperatures)”是指足夠地高以致可以有效液化或者糊化顆粒淀粉的溫度。在水中加熱淀粉引起淀粉顆粒膨脹。在足夠的固體濃度時(shí),膨脹的顆粒占據(jù)了大部分空間,稱為糊(paste)的粘性物質(zhì)產(chǎn)生。淀粉分子的溶解被稱為糊化。糊化伴隨著雙折射的喪失。術(shù)語淀粉糊化溫度是指糊化發(fā)生時(shí)的溫度。術(shù)語“淀粉液化酶(starchliquefyingenzyme)”是指實(shí)現(xiàn)顆粒淀粉的流體化的酶。代表性的淀粉液化酶包括(E.C.)3.2.1.1.類的α淀粉酶。術(shù)語“內(nèi)源性”是指在谷物或者塊莖中存在的酶,而無需求助于向谷物加入該產(chǎn)麥芽酶。術(shù)語“外源性”是指在谷物中不存在的酶。代表性的外源性酶包括,例如,在野生型底物例如,稻、黍等中不存在的酶。術(shù)語“總含糖量(totalsugarcontent)”是指在淀粉、谷物或者塊莖組合物中存在的糖的總量。術(shù)語“IMO數(shù)(IMONo.)”計(jì)算為,異麥芽糖、4-α-葡糖基麥芽糖、異麥芽三糖和DP大于3的分支糖的總和。IMO數(shù)提供了在化合物或者溶液中存在的IMO化合物的量的指示。術(shù)語“分支糖的比(ratioofbranchedsugars,RBS)”是指,在谷物中存在的麥芽糖(DP2)與得到的谷物組合物中存在的麥芽三糖(DP3)水平的比。術(shù)語“糖化力程度(DegreesofDiastaticPower)”(DP°)單位是指,在0.10ml的酶制備物樣品5%溶液中含有的酶量,其在20℃(68°F)和100ml底物溫育1小時(shí),會生成足夠的還原糖,以還原5mlFehling′s溶液。術(shù)語“DE”或者“右旋糖當(dāng)量(dextroseequivalent)”是用于測定總還原糖的濃度的工業(yè)標(biāo)準(zhǔn),所述總還原糖的濃度在被計(jì)算時(shí)是換作為D-葡萄糖來計(jì)算的,按干重計(jì)算(onadryweightbasis)。未水解的顆粒淀粉的DE基本上是0,D-葡萄糖的DE是100。術(shù)語“總含糖量(totalsugarcontent)”是指在淀粉組合物中存在的糖的總含量。術(shù)語“干固體成分(drysolidbasis)”和“dsb”是指漿體中的化合物例如面粉的總量(以%表示),按干重計(jì)算。術(shù)語“Brix”是指用于測定特定溫度下溶液的糖含量的公知的比重計(jì)標(biāo)度值(hydrometerscale)。因此,術(shù)語“Brix”是指溶液中溶解的糖的量度。Brix標(biāo)度值測定的是每100克的含水糖溶液中存在的蔗糖的克數(shù)(總的溶解固體含量)。例如,1.00Brix的測定值是指溶液中的糖大約是10mg/ml。Brix的測定值通常是通過應(yīng)用液體比重計(jì)或者折射計(jì)而完成的。術(shù)語“聚合程度(degreeofpolymerization,DP)”是指在特定糖類中吡喃型葡糖酐單元的數(shù)目(n)。DP1的例子是單糖,如葡萄糖和果糖。DP2的例子是二糖,例如麥芽糖和蔗糖。DP4+意味著聚合度大于3的聚合物。術(shù)語“酶促生成(enzymaticallyproduced)”是指底物被酶促催化為IMO,這不同于IMO的化學(xué)合成或者有機(jī)化學(xué)合成。術(shù)語“絲狀真菌(filamentousfungi)”是指真菌亞門(subdivisionEumycotina)的所有絲狀形式(參見,Alexopoulos,C.J.(1962),INTRODUCTORYMYCOLOGY,NewYorkWiley)。這些真菌的特征在于營養(yǎng)菌絲體,其帶有由殼素、纖維素和其它復(fù)合多糖組成的細(xì)胞壁。本發(fā)明的絲狀真菌在形態(tài)學(xué)、生理學(xué)和遺傳學(xué)上不同于酵母。絲狀真菌的營養(yǎng)生長是借助于絲菌延長,并且碳分解代謝是專性需氧的。在本發(fā)明中,絲狀真菌親代細(xì)胞可以是下列屬的細(xì)胞,但不限于這些細(xì)胞木霉菌屬(Trichoderma),例如,里氏木霉(Trichodermareesei)(以前被歸類為長枝木霉(T.longibrachiatum),目前被稱為Hypocreajecorina)、綠色木霉(Trichodermaviride)、康寧木霉(Trichodermakoningii)、哈茲木霉(Trichodermaharzianum);青霉菌屬(Penicilliumsp.);腐質(zhì)霉屬(Humicolasp.),包括Humicolainsolens和Humicolagrisea;金孢霉菌屬(Chrysosporiumsp.),包括C.lucknowense;粘帚霉屬(Gliocladiumsp.);曲霉屬(Aspergillussp.),包括米曲霉(A.oryzae)、構(gòu)巢曲霉(A.nidulans)、黑曲霉(A.niger)和泡盛曲霉(A.awamori);鐮刀菌屬(Fusariumsp.)、脈抱菌屬(Neurosporasp.)、肉座菌屬(Hypocreasp.)和裸孢殼屬(Emericellasp.)。也參考Innisetal.,(1985)Sci.22821-26。術(shù)語“曲霉菌”或者“曲霉屬”是指以前被歸類為曲霉菌或者目前被歸類為曲霉菌的任何霉菌。術(shù)語“細(xì)菌”是指芽孢桿菌屬(Bacillus),包括但不限于枯草芽孢桿菌(B.subtilis)、解淀粉芽孢桿菌(B.amyloliquefaciesn)、緩慢芽孢桿菌(B.lentus)、B.Carlsberg、地衣芽孢桿菌(B.licheniformis)和嗜熱脂肪芽孢桿菌(B.stearothermophilus)。術(shù)語“植物起源(plantorigin)”是指由植物來源中衍生、提取、分離、表達(dá)的酶,所述植物來源例如大麥麥芽、大豆、小麥或者大麥。術(shù)語“接觸”是指將各個(gè)酶(一種或者多種)放置在足夠近地接近于各自的底物的位置,以便酶(一種或多種酶)能夠?qū)⒌孜镛D(zhuǎn)變?yōu)樗璧慕K產(chǎn)物。本領(lǐng)域的技術(shù)人員將認(rèn)識到,將所述酶或者所述多種酶的溶液與各自的底物混合,可以實(shí)現(xiàn)接觸。術(shù)語“溫育(incubating)”是指在特定的條件下,在限定的時(shí)間期間將含有底物的基質(zhì)與分別的酶混合,所述的酶例如,液化酶或者產(chǎn)麥芽麥或者轉(zhuǎn)葡糖苷酶。術(shù)語“酶促轉(zhuǎn)化(enzymaticconversion)”是指對對稻底物進(jìn)行修飾,產(chǎn)生可溶的水解顆粒狀稻淀粉,優(yōu)選地產(chǎn)生葡萄糖。術(shù)語“漿(slurry)”是指含有不溶顆粒淀粉的含水混合物。有時(shí)術(shù)語“漿”和“懸浮液”在此處可交換使用。術(shù)語“培養(yǎng)”是指在合適條件下,在液體或者固體介質(zhì)中生長一群微生物細(xì)胞。在一種實(shí)施方案中,培養(yǎng)是指顆粒淀粉底物發(fā)酵性的生物轉(zhuǎn)化為葡萄糖糖漿或者其它所需的終產(chǎn)物(典型地在容器或者反應(yīng)器中)。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語α淀粉酶單位被定義為,在pH5.2和40℃的標(biāo)準(zhǔn)分析條件下,1分鐘內(nèi)水解1微摩爾淀粉底物的α淀粉酶量。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語β淀粉酶單位被定義為,在pH4.6和20℃的標(biāo)準(zhǔn)分析條件下,1分鐘內(nèi)水解l微摩爾淀粉底物的β淀粉酶量。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語轉(zhuǎn)葡糖苷酶單位被定義為,在pH4.8和37℃的標(biāo)準(zhǔn)分析條件下,1分鐘內(nèi)轉(zhuǎn)化1微摩爾麥芽糖底物的轉(zhuǎn)葡糖苷酶量。在另一種實(shí)施方案中,術(shù)語轉(zhuǎn)葡糖苷酶單位被定義為,在pH4.8和37℃的標(biāo)準(zhǔn)分析條件下,每分鐘生成1微摩爾4-α-葡糖基麥芽糖的轉(zhuǎn)葡糖苷酶量。例如,在一種實(shí)施方案中,術(shù)語一個(gè)Liquefon單位(LU)是碘溶液產(chǎn)生顏色變化所需的消化時(shí)間的量度,它表示了在pH5.6和25℃的標(biāo)準(zhǔn)分析條件下,淀粉底物糊精化的確定時(shí)期。“ATCC”是指美國典型培養(yǎng)物保藏中心(AmericanTypeCultureCollection),位于Manassas,VA20108(ATCC,www/atcc.org)?!癗RRL”是指農(nóng)業(yè)研究菌種保藏中心,美國國家農(nóng)業(yè)效用研究中心(AgriculturalResearchServiceCultureCollection,NationalCenterforAgriculturalUtilizationResearch)(以前被稱為美國農(nóng)業(yè)部北區(qū)研究實(shí)驗(yàn)室(USDANorthernRegionalResearchLaboratory),Peoria,ILL?!癗CBI”是指美國國家生物技術(shù)信息中心(NationalCenterforBiotechnologyInformation),NatlLibraryMed.(www.ncbi.nlm.nih.gov/)?!耙?a)”、“一個(gè)(an)”和“該(the)”包括復(fù)數(shù)含義,除非上下文另外清楚地指明。本發(fā)明描述了用于制造異麥芽寡糖基質(zhì)(substrate),谷物或者塊莖組合物的方法,所述方法包括(a)用產(chǎn)麥芽酶和淀粉液化酶接觸含有未糊化淀粉的基質(zhì),例如谷物或者塊莖,以生成麥芽糖;(b)用轉(zhuǎn)葡糖苷的酶接觸所述麥芽糖,其中所述步驟(a)和所述步驟(b)發(fā)生的溫度低于或者等于淀粉糊化溫度;和(c)獲得具有酶促生成的異麥芽寡糖的基質(zhì),谷物或者塊莖組合物,其中所述寡糖來源于所述基質(zhì),谷物或者塊莖。圖1描述了本發(fā)明的一種實(shí)施方案。本發(fā)明也描述了在等于或者低于糊化溫度的溫度,制造富含異麥芽寡糖的基質(zhì),谷物或者塊莖組合物,粉末,口服再水合溶液,和/或食品添加劑的方法,其中將具有或含有未糊化淀粉和含有內(nèi)源性產(chǎn)麥芽酶的基質(zhì)與選自芽孢桿菌的溶解酶接觸,產(chǎn)生麥芽糖糖漿。然后,在等于或者低于糊化溫度或者液化溫度的溫度,將麥芽糖糖漿與轉(zhuǎn)葡糖苷酶接觸,產(chǎn)生具有異麥芽寡糖的谷物組合物。在一種實(shí)施方案中,該谷物組合物的特征在于,在糖組成中麥芽糖多于60%和分支糖的比大于2.0至1.0。從底物到IMO的轉(zhuǎn)化可以酶促地產(chǎn)生。本發(fā)明也描述了用于制造異麥芽寡糖基質(zhì),谷物或者塊莖組合物的方法,該方法包括(a)用產(chǎn)麥芽酶和淀粉液化酶接觸含有淀粉的基質(zhì),谷物或者塊莖,生成麥芽糖;(b)用轉(zhuǎn)葡糖苷的酶接觸麥芽糖,其中所述步驟(a)和所述步驟(b)發(fā)生的溫度低于或者等于淀粉糊化溫度;和(c)獲得具有酶促生成的異麥芽寡糖的基質(zhì),谷物或者塊莖組合物,其中所述寡糖來源于基質(zhì),谷物或者塊莖。本發(fā)明可任選地進(jìn)一步描述了將不溶性組成成分與可溶性組成成分分離的附加步驟。本發(fā)明進(jìn)一步描述了干燥基質(zhì),谷物或者塊莖組合物的附加步驟。在一種實(shí)施方案中,谷物選自小麥、黑麥、大麥、麥芽、蕎麥、高梁(買羅高梁)、黍(鴨腳稗)和稻。在另一種實(shí)施方案中,產(chǎn)麥芽酶是β淀粉酶。在另一種實(shí)施方案中,產(chǎn)麥芽酶對于谷物來說是內(nèi)源性的。在另一種實(shí)施方案中,淀粉液化酶是來源于桿菌的α淀粉酶。在另一種實(shí)施方案中,淀粉液化酶來源于地衣芽孢桿菌或者嗜熱脂肪芽孢桿菌。在另一種實(shí)施方案中,轉(zhuǎn)葡糖苷的酶是轉(zhuǎn)葡糖苷酶。在另一種實(shí)施方案中,轉(zhuǎn)葡糖苷酶來源于曲霉菌。在另一種實(shí)施方案中,曲霉菌是黑曲霉。本發(fā)明也描述了根據(jù)上面描述方法生成的谷物組合物、食品添加劑、口服再水合溶液和/或者粉末。在另一種實(shí)施方案中,本發(fā)明描述了用于制造小麥谷物組合物的方法,所述方法包括(a)將具有內(nèi)源性產(chǎn)麥芽β淀粉酶的未糊化小麥谷物與來自桿菌的淀粉液化α淀粉酶接觸,生成麥芽糖;(b)用轉(zhuǎn)葡糖苷酶接觸麥芽糖,其中所述步驟(a)和所述步驟(b)發(fā)生的溫度低于或者等于淀粉糊化溫度;和(c)獲得具有酶促生成的異麥芽寡糖的小麥谷物組合物,其中所述寡糖來源于所述的未糊化谷物。圖2描述了本發(fā)明的一種實(shí)施方案。在另一種實(shí)施方案中,上面描述的方法可以被用于制造食品添加劑、焙烘產(chǎn)品、口服再水合溶液和/或者粉末。在另一種實(shí)施方案中,產(chǎn)麥芽酶是β淀粉酶。在另一種實(shí)施方案中,產(chǎn)麥芽酶對于谷物來說是內(nèi)源性的。在另一種實(shí)施方案中,淀粉液化酶是來源于細(xì)菌來源的α淀粉酶。在另一種實(shí)施方案中,細(xì)菌來源是芽孢桿菌屬。在另一種實(shí)施方案中,淀粉液化酶來源于地衣芽孢桿菌或者嗜熱脂肪芽孢桿菌。在另一種實(shí)施方案中,轉(zhuǎn)葡糖苷的酶是轉(zhuǎn)葡糖苷酶。在另一種實(shí)施方案中,轉(zhuǎn)葡糖苷酶來源于真菌來源。在另一種實(shí)施方案中,真菌來源是曲霉菌屬。在另一種實(shí)施方案中,曲霉菌是黑曲霉。本發(fā)明也描述了根據(jù)上面描述方法生成的谷物組合物、食品添加劑、口服再水合溶液和/或者粉末。谷物組合物可以含有重量大于1%的至少一種異麥芽寡糖。所述的至少一種異麥芽寡糖可以選自異麥芽糖、4-α-葡糖基麥芽糖、異麥芽三糖。在本發(fā)明的進(jìn)一步實(shí)施方案中,內(nèi)源性產(chǎn)麥芽酶選自β淀粉酶或者α淀粉酶。在本發(fā)明的再進(jìn)一步的實(shí)施方案中,溶解酶是來源于芽孢桿菌的液化α淀粉酶。在本發(fā)明的再進(jìn)一步的實(shí)施方案中,液化淀粉酶來源于地衣芽孢桿菌或者嗜熱脂肪芽孢桿菌?;|(zhì)(或者底物)(substrates)本發(fā)明包括含有淀粉的基質(zhì),例如含有淀粉的谷物或者塊莖,其與產(chǎn)麥芽酶和淀粉液化酶接觸,產(chǎn)生麥芽糖。術(shù)語基質(zhì)是指可以酶促地轉(zhuǎn)變?yōu)辂溠刻遣亩D(zhuǎn)變?yōu)镸IO的物質(zhì)。代表性的基質(zhì)可以是選自谷物和塊莖的至少一種基質(zhì)。麥芽糖可以是富含麥芽糖的糖漿或者漿液的形式。淀粉以兩種形式存在,直鏈淀粉,一種線性鏈多糖,和支鏈淀粉,一種分支鏈多糖。直鏈淀粉含有長的不分支的鏈,其中所有D-葡萄糖單位由α-1,4-鍵(“α-1,4-鍵”或者“1,4-α-D-葡糖基鍵”)連接。支鏈淀粉是高度分支的,骨架的糖苷鍵是α-1,4鍵,但是分支點(diǎn)的糖苷鍵是α-1,6鍵。淀粉的主要成分可以以兩種不同方式被酶促地水解。直鏈淀粉可以由α淀粉酶(E.C.3.2.1.1),例如,α-(1-4)-葡聚糖4-葡聚糖水解酶(α-(1-4)-glucan4-glucanohydrolase)水解。α淀粉酶水解α-(1,4)鍵,產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖和更高級的糖的混合物。直鏈淀粉也可以由β-淀粉酶(E.C.3.2.1.2)[α(1,4)-葡聚糖麥芽水解酶,1,4-α-D-葡聚糖麥芽水解酶]水解。此酶從非還原末端開始切掉連續(xù)的麥芽糖單位,定量地產(chǎn)生麥芽糖。α淀粉酶和β淀粉酶也水解支鏈淀粉。α淀粉酶和β淀粉酶均不能水解支鏈淀粉分支位置的α(1-6)鍵。β-淀粉酶對支鏈淀粉徹底作用的終產(chǎn)物是大的、高度分支的核心結(jié)構(gòu)或者β極限糊精。脫支酶(E.C.3.2.1.41,例如,pullulanases,[α-(1-6)-葡聚糖6-葡聚糖水解酶,也稱為α-(1,6)-葡糖苷酶])可以水解分支位置的α-(1-6)鍵。因此,β-淀粉酶和α1,6葡萄糖苷酶聯(lián)合作用可以徹底降解支鏈淀粉為麥芽糖和葡萄糖,導(dǎo)致麥芽糖含量高達(dá)總含糖量的60%、65%、79%、75%、80%或者更高。對于本發(fā)明的目的,含有淀粉的基質(zhì)可以是谷物或者塊莖或者其混合物。谷物可以是含有淀粉的任意谷類作物或者種子?;|(zhì)可以被碾碎、磨碎或者否則減小其尺寸,以增加基質(zhì)與各自的酶接觸的表面面積。例如,依照需要,基質(zhì)可以是被濕磨或者干磨的。在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中,淀粉是顆粒狀的淀粉。預(yù)期可以應(yīng)用在本發(fā)明中的谷物包括,目前被用于烘焙、面團(tuán)或者其它用途的任何谷物。預(yù)期的代表性谷物包括但不限于,選自下列中至少一種小麥(小麥屬,包括但不限于一粒小麥(T.monococcum)、圓錐小麥(T.turgidum)、斯卑爾脫小麥(T.spelta)和/或者普通小麥(T.aestivum))、大麥(例如,大麥(Hordeumvulgare)和美國專利6,492,576表1中描述的變種)、黑麥(黑麥屬(Secalesp.),包括但不限于黑麥(S.cereal))、玉米(玉米屬,包括但不限于玉米(Zeamays))、蕎麥(蕎麥屬,包括但不限于甜蕎(F.esculentum))、麥芽(例如,發(fā)芽的大麥)、高梁(高梁屬,包括但不限于高梁(Sorghumbicolor)或者另被稱為買羅高梁、黍(鴨腳稗)(黍?qū)俸凸肺膊輰?,包括但不限于?P.milaceum);狗尾草屬包括但不限于栗(S.italica))和稻(稻屬,包括但不限于稻(Oryzasativa))。可以預(yù)期,野生型植物和具有有益特性的轉(zhuǎn)基因植物,都可用作含淀粉的基質(zhì),所述的有益特性例如內(nèi)源性酶水平增加或者外源性酶的存在。發(fā)芽谷類,例如,麥芽,被用作許多食品和健康飲料配方的關(guān)鍵成分之一,原因是它們具有高營養(yǎng)價(jià)值,例如,含麥芽食品(表A)。發(fā)芽導(dǎo)致了內(nèi)源性的產(chǎn)麥芽酶和蛋白水解酶的合成和活化。因此,發(fā)芽谷類是含內(nèi)源性產(chǎn)麥芽酶的谷物的好的來源。麥芽粉和麥芽提取物也被用作釀造和烘培應(yīng)用中的消化酶的來源。然而,大麥的發(fā)芽致使谷物成分太容易消化,以致于不能作為益生質(zhì)(prebiotics)或者甚至作為營養(yǎng)保健物質(zhì)(nutraceuticals)起有效作用,因?yàn)樗鼈冓呄蛴谠诘竭_(dá)下胃腸道之前全面地被消化。不幸的是,益生質(zhì)化合物的有益作用在下胃腸道最得到認(rèn)同。因此,將高度可消化的麥芽-糖類轉(zhuǎn)化為較不易消化的異麥芽-糖類,使修飾的麥芽能夠起到益生質(zhì)的作用,使麥芽能夠到達(dá)下胃腸道并提供額外的功能和健康益處。例如,表A提供了含有麥芽提取物的合適的商業(yè)上可獲得的食品。表A含有麥芽提取物的商業(yè)食品因此,應(yīng)用麥芽作為含淀粉的基質(zhì),將包含在該基質(zhì)中的顆粒淀粉中的一些轉(zhuǎn)變?yōu)楣烟堑钠渌幸嫘问?,例如,IMO。另外,含淀粉的基質(zhì)可以是塊莖。可以預(yù)期的塊莖包括馬鈴薯(茄屬(Solanumsp.),包括但不限于馬鈴薯(S.tuberosum))、甘薯(蕃薯屬(Ipomoeasp.),包括但不限于甘薯(Ipomoeabatatas))、樹薯[tapioca,cassava](木薯屬(Manihotsp.),包括但不限于木薯(Manihotesculenta、Manihotaipi和Manihotutilissima))和/或芋頭根(芋屬(Colocasiasp.),包括但不限于C.esculenta或C.macrorhiza)。含淀粉的基質(zhì)可以是含水的漿體,特征是具有10%至50%的溶解固體(DS)濃度。在另一種實(shí)施方案中,含淀粉基質(zhì)的特征是具有2%至90%的DS濃度。在另一種實(shí)施方案中,含淀粉基質(zhì)的特征是具有5%至70%的DS濃度。在另一種實(shí)施方案中,含淀粉基質(zhì)的特征是具有10%至60%的DS濃度。在另一種實(shí)施方案中,含淀粉基質(zhì)的特征是具有20%至40%的DS濃度。在另一種實(shí)施方案中,含淀粉基質(zhì)的特征是具有25%至35%的DS濃度。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中,含淀粉基質(zhì)的pH是1.00至9.00之間。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中,含淀粉基質(zhì)的pH是2.00至8.00之間。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中,含淀粉基質(zhì)的pH是3.00至7.50之間。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中,含淀粉基質(zhì)的pH是4.00至6.50之間。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中,含淀粉基質(zhì)的pH是4.25至5.75之間。酶本發(fā)明包括,用產(chǎn)麥芽酶和淀粉液化酶接觸含淀粉的基質(zhì),生成麥芽糖?!爱a(chǎn)麥芽”意味著酶可以酶促地轉(zhuǎn)變淀粉為麥芽糖。代表性的產(chǎn)麥芽酶包括α淀粉酶和β淀粉酶。如前面所描述,直鏈淀粉可以被α-淀粉酶(E.C.3.2.1.1),例如,α-(1-4)-葡聚糖4-葡聚糖水解酶水解。α淀粉酶水解α-(1,4)-鍵,產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖、麥芽三糖和更高級糖的混合物。直鏈淀粉也可以被β淀粉酶(E.C.3.2.1.2)[α(1,4)-葡聚糖麥芽糖水解酶,1,4-α-D-葡聚糖麥芽糖水解酶]水解。此酶從非還原末端開始切掉連續(xù)的麥芽糖,產(chǎn)生一定數(shù)量的麥芽糖。α淀粉酶和β淀粉酶也水解支鏈淀粉。α淀粉酶在本發(fā)明所包括的一些實(shí)施方案中,α淀粉酶是真菌中的酶或者微生物中的酶,具有E.C.編號,E.C.3.2.1.1-3,特別是E.C.3.2.1.1。在一些實(shí)施方案中,α淀粉酶是耐熱的真菌α淀粉酶。合適的α淀粉酶可以是天然發(fā)生的,也可以是重組和突變的α淀粉酶。在一些實(shí)施方案中,α淀粉酶來源于芽孢桿菌。優(yōu)選的芽孢桿菌包括解淀粉芽孢桿菌、緩慢芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌和嗜熱脂肪芽孢桿菌。在特別優(yōu)選的實(shí)施方案中,α淀粉酶來源于曲霉菌。優(yōu)選的曲霉菌包括黑曲霉和米曲霉菌。也參考NCIB11837的菌株??捎糜诒景l(fā)明方法的商業(yè)上可得到的α淀粉酶包括CLARASEL([米曲霉]GenencorInternationalInc.)和NOVAMYL([嗜熱脂肪芽孢桿菌]NovozymeBiotech.)。本領(lǐng)域技術(shù)人員理解,用于本發(fā)明方法的α淀粉酶的量,取決于α淀粉酶的酶活性。一般來說,將α淀粉酶以大約0.01至5.0kg的量加入1公噸(MT)含淀粉的底物中。在一些實(shí)施方案中,α淀粉酶以每MT大約0.05至4.0kg的量被加入。在其它的實(shí)施方案中,α淀粉酶以每MT大約0.1至2.5kg,也可以每MT大約0.5至1.5kg的量被加入。在進(jìn)一步的實(shí)施方案中,其它的量被應(yīng)用。例如,通常地,大約0.01至1.5kg之間的量的CLARASEL(GenencorInternationalInc.)被加入1MT淀粉中。在其它的實(shí)施方案中,酶加入的量是,每MT淀粉CLARASEL大約0.05至1.0kg之間;大約0.1至0.6kg之間;大約0.2至0.6kg之間和大約0.4至0.6kg之間。β淀粉酶在本發(fā)明包括的一些實(shí)施方案中,產(chǎn)麥芽酶是β淀粉酶。雖然,從將含淀粉的基質(zhì)與α淀粉酶接觸會提供麥芽糖這個(gè)意義上說,α淀粉酶是產(chǎn)麥芽的,但是β淀粉酶的應(yīng)用是有用的,這是因?yàn)樗鼈兒皖w粒淀粉接觸會提供更多量的麥芽糖而不是其它的糖類,例如葡萄糖。在一些實(shí)施方案中,β淀粉酶是植物酶或者微生物酶,具有E.C.編號,E.C.3.2.1.2(例如,美國專利4,970,158和4,647,538中描述的那些β淀粉酶)。在一些實(shí)施方案中,β淀粉酶是耐熱的細(xì)菌β淀粉酶是。合適的β淀粉酶可以是天然發(fā)生的,也可以是重組和突變的β淀粉酶。術(shù)語“細(xì)菌的”是指來源于桿菌,例如枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌(B.coagulans)、解淀粉芽孢桿菌和/或緩慢芽孢桿菌的酶。特別優(yōu)選的β淀粉酶來源于芽孢桿菌菌株嗜熱脂肪芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌和地衣芽孢桿菌。也參考NCIB11608菌株。術(shù)語“植物來源”是指,酶衍生、提取、分離、表達(dá)于植物來源,例如,大麥麥芽、大豆、小麥或者大麥。商業(yè)上可得到的預(yù)期可用于本發(fā)明方法的β淀粉酶包括OPTIMALBBA、SpezymeDBA和OPTIMALME(GenencorInternationalInc.)。其它商業(yè)上可得到的小麥β淀粉酶在本發(fā)明的方法中也是有用的。在一些實(shí)施方案中,含淀粉的基質(zhì),例如,小麥、黑麥、大麥、麥芽,包含內(nèi)源性的產(chǎn)麥芽酶,其水平足以產(chǎn)生足夠的麥芽糖,用于轉(zhuǎn)變?yōu)楫慃溠抗烟?。術(shù)語“內(nèi)源性的”是指谷物或者塊莖中存在的酶,無需向谷物加入產(chǎn)麥芽酶或者對谷物進(jìn)行遺傳修飾以提供產(chǎn)麥芽酶。在含淀粉基質(zhì)不包含內(nèi)源性產(chǎn)麥芽酶或者內(nèi)源性產(chǎn)麥芽酶水平低的實(shí)施方案中,例如,基質(zhì)為稻、黍、高梁和/或玉米,任何的外源性產(chǎn)麥芽酶的等量加入也被發(fā)明人所預(yù)期。外源性的產(chǎn)麥芽酶可以被加入,例如,通過遺傳學(xué)操縱宿主細(xì)胞以表達(dá)足夠水平的產(chǎn)麥芽酶,和/或提供來自另一來源的產(chǎn)麥芽酶濃縮物或者產(chǎn)麥芽酶材料。術(shù)語外源性產(chǎn)麥芽酶是指谷物中不存在的產(chǎn)麥芽酶。在此實(shí)施方案中,產(chǎn)麥芽酶以足夠的量接觸于底物,以產(chǎn)生麥芽糖。在一種實(shí)施方案中,與含淀粉基質(zhì)接觸的外源性產(chǎn)麥芽酶的量是,0.050至5.000糖化力程度(″DP°″)單位/克的產(chǎn)麥芽酶。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中,將0.100至2.000DP°單位/克的產(chǎn)麥芽酶與含淀粉谷物接觸。在又一種實(shí)施方案中,將0.100至3.000DP°單位/克的產(chǎn)麥芽酶與含淀粉谷物接觸。在另一種實(shí)施方案中,接觸于含淀粉基質(zhì)的外源性產(chǎn)麥芽酶的量是以每公噸底物產(chǎn)麥芽酶的千克數(shù)表示的。在一種實(shí)施方案中,接觸于基質(zhì)的外源性產(chǎn)麥芽酶的量是每公噸干固體成分(drysolidbasis)中產(chǎn)麥芽酶大約0.05kg(″kg/mtdsb″)。在另一種實(shí)施方案中,外源性產(chǎn)麥芽酶的量是每公噸干固體成分中產(chǎn)麥芽酶大約0.1kg(″kg/mtdsb″)。在其它的實(shí)施方案中,0.2、0.4、0.6、0.8和/或1.0kg/mtdsb提供了足量的產(chǎn)麥芽酶,例如,β-淀粉酶。在另一種實(shí)施方案中,接觸于含淀粉基質(zhì)的外源性產(chǎn)麥芽酶的量是以每公噸基質(zhì)產(chǎn)麥芽酶的千克數(shù)表示的。在一種實(shí)施方案中,接觸于基質(zhì)的外源性產(chǎn)麥芽酶的量是每公噸溶解淀粉成分(dissolvedstarchbasis)中產(chǎn)麥芽酶大約0.05kg(″kg/mtdsb″)。在另一種實(shí)施方案中,外源性產(chǎn)麥芽酶的量是每公噸溶解淀粉成分中產(chǎn)麥芽酶大約0.1kg(″kg/mtdsb″)。在其它的實(shí)施方案中,0.2、0.4、0.6、0.8和/或1.0kg/mt溶解淀粉成分提供了足量的產(chǎn)麥芽酶,例如,β-淀粉酶。在另一種實(shí)施方案中,要與谷物接觸的產(chǎn)麥芽酶量是用產(chǎn)麥芽酶單位來表示的。用于測定產(chǎn)麥芽活性的分析包括在實(shí)施例中描述的那些分析和描述β淀粉酶活性的那些分析。術(shù)語DP°單位是指包含在5%的樣品酶制備物溶液0.10ml中的酶量,當(dāng)與100ml底物在20℃(68F°)溫育1小時(shí)時(shí),會產(chǎn)生足夠的還原糖,以還原Fehling′s溶液5ml。在另一種實(shí)施方案中,具有內(nèi)源性產(chǎn)麥芽酶的谷物(大麥、小麥等)可以和需要外源性產(chǎn)麥芽酶的那些谷物混合。發(fā)明人預(yù)期了,具有內(nèi)源性產(chǎn)麥芽酶的谷物與利用外源性產(chǎn)麥芽酶的谷物之比為30∶70、60∶40、50∶50、60∶40、70∶30的混合物,條件是混合物中存在足夠量的產(chǎn)麥芽酶(內(nèi)源性來源或者外源性來源)。應(yīng)用內(nèi)源性來源的產(chǎn)麥芽酶,可以減少加入到谷物混合物或者與谷物混合物接觸的外源性酶的量。淀粉液化酶(starchliquefyingenzymes)將淀粉液化酶與淀粉接觸,以降低液化的淀粉或者溶解的淀粉的粘性。在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中,淀粉液化酶是選自E.C.3.2.1.1的酶,例如,α淀粉酶。代表性的α淀粉酶可以衍生、分離或者提取自細(xì)菌來源。在一種實(shí)施方案中,細(xì)菌來源是桿菌。在另一種實(shí)施方案中,來源于桿菌的α淀粉酶包括那些衍生于選自下列的至少一種細(xì)菌來源的酶枯草芽孢桿菌、地衣芽孢桿菌、嗜熱脂肪芽孢桿菌、凝結(jié)芽孢桿菌、解淀粉芽孢桿菌和緩慢芽孢桿菌。地衣芽孢桿菌和嗜熱脂肪芽孢桿菌中的那些酶特別有用。發(fā)明人預(yù)期了其它的淀粉酶,例如但不限于EC3.2.1.133(美國專利6,361,809號)的那些。其它被發(fā)明人預(yù)期的淀粉酶包括,特征是氧化或者熱穩(wěn)定增加的酶,包括在美國專利5,763,385;5,824,532;5,958,739和/或6,008,026中的那些突變體或者遺傳修飾的淀粉酶或者變異的淀粉酶。有用的α淀粉酶是那些源于地衣芽孢桿菌株NCIB8059、ATCC6598、ATCC6634、ATCC8480、ATCC9945A、ATCC11945的酶。有用的α淀粉酶是那些源于嗜熱脂肪芽孢桿菌株ATCC39709的酶。這樣的酶包括商標(biāo)名為“SPEZYMEAA”或者“SPEZYMEFRED”、“SPEZYMELT300”和“SPEZYMELT75”的酶,可以從GenencorInternational(PaloAlso,California,USA)得到。其它這樣的酶包括來自嗜熱脂肪芽孢桿菌的α淀粉酶,其以商標(biāo)名GZYMEG997、GC007出售,和來自地衣芽孢桿菌的α淀粉酶,其以商標(biāo)名GC262SP出售,也可以從GenencorInternational得到。將產(chǎn)麥芽酶和淀粉液化酶與含淀粉的谷物接觸,產(chǎn)生麥芽糖。如本領(lǐng)域的技術(shù)人員所理解,用于本發(fā)明方法的淀粉液化酶的量,將取決于淀粉液化酶的酶活性。在一種實(shí)施方案中,將淀粉液化酶以0.01至25Liquefon單位/gm的量與含淀粉的谷物接觸。在另一種實(shí)施方案中,將l至10Liquefon單位/gm的淀粉液化酶與含淀粉的谷物接觸。一個(gè)Liquefon單位(LU)是使碘溶液產(chǎn)生顏色變化所需要的消化時(shí)間的量度,這表示的是在特定條件下淀粉底物糊精化的特定時(shí)段。在一種實(shí)施方案中,將0.1kg淀粉液化酶加入每公噸的谷物溶解固體成分(graindissolvedsolidbasis)(kg/mtdsb)。在其它的實(shí)施方案中,將0.2、0.4、0.6、0.8或者1.0kg淀粉液化酶加入每公噸谷物(kg/mt溶解淀粉成分)。在一種實(shí)施方案中,將0.1kg淀粉液化酶加入每公噸的谷物溶解淀粉成分(kg/mt溶解淀粉成分)。在其它的實(shí)施方案中,將0.2、0.4、0.6、0.8或者1.0kg淀粉液化酶加入每公噸谷物(kg/mt溶解淀粉成分)。用于確定淀粉液化活性的分析包括,在此處的實(shí)施例中描述的那些。用于α淀粉酶活性測定的代表性的分析也在美國專利5,763,385;5,824,532;5,958,739和/或6,008,026中描述,這些專利在此并入為參考。轉(zhuǎn)葡糖苷的酶(Transglucosidicenzyme)將麥芽糖與轉(zhuǎn)葡糖苷的酶接觸,獲得具有來源于含淀粉谷物的酶促生成的異麥芽寡糖的谷物組合物。當(dāng)與α-D-葡糖-寡糖溫育時(shí),轉(zhuǎn)葡糖苷的酶催化水解反應(yīng)和轉(zhuǎn)移反應(yīng),產(chǎn)生異麥芽糖、4-α-葡糖基麥芽糖、曲二糖或者黑曲霉糖(nigerose)。DP2二糖的增加量提示了這些糖的存在和因此由轉(zhuǎn)葡糖苷的酶介導(dǎo)的轉(zhuǎn)化。轉(zhuǎn)葡糖苷的酶(E.C.2.4.1.24)可以是轉(zhuǎn)葡糖苷酶(transglucosidase)。代表性的轉(zhuǎn)葡糖苷酶有TRANSGLUCOSIDASEL-1000(GenencorInternational,Inc.)和AmanoEnzymes,Inc.,(Nagoya,Japan)的TRANSGLUCOSIDEL。在一種實(shí)施方案中,轉(zhuǎn)葡糖苷的酶來源于絲狀真菌來源,例如,曲霉菌屬。來源于曲霉菌的轉(zhuǎn)葡糖苷的酶可以來源于黑曲霉。在一種實(shí)施方案中,黑曲霉菌株是ATCC14916。在一種實(shí)施方案中,將足夠量的轉(zhuǎn)葡糖苷的酶與基質(zhì),例如含淀粉的谷物接觸,產(chǎn)生麥芽糖。如本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解,用于本發(fā)明方法的轉(zhuǎn)葡糖苷的酶的量,將取決于α淀粉酶的酶活性。在一種實(shí)施方案中,將0.01至25.00轉(zhuǎn)葡糖苷酶單位(“TGU”)/gm的轉(zhuǎn)葡糖苷酶與含淀粉的谷物接觸。在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中,將0.05TGU至10.00TGU/gm的轉(zhuǎn)葡糖苷酶與含淀粉的谷物接觸。在本發(fā)明的又一種實(shí)施方案中,將0.10TGU至5.00TGU/gm的轉(zhuǎn)葡糖苷酶與含淀粉的谷物接觸。術(shù)語TGU是指在分析條件下,每分鐘產(chǎn)生1微摩爾4-α-葡糖基麥芽糖所需的酶活性。在一種實(shí)施方案中,將0.05至6.00kg轉(zhuǎn)葡糖苷的酶加入每公噸谷物(kg/mtdsb)。在另一種實(shí)施方案中,將0.10至5.00kg轉(zhuǎn)葡糖苷的酶加入每公噸谷物(kg/mtdsb)。在另一種實(shí)施方案中,將0.25至3.00kg轉(zhuǎn)葡糖苷的酶加入每公噸谷物(kg/mtdsb)。在另一種實(shí)施方案中,將0.50至1.50kg轉(zhuǎn)葡糖苷的酶加入每公噸谷物(kg/mtdsb)。用于確定轉(zhuǎn)葡糖苷活性的其它分析包括,那些在實(shí)施例中描述和在Shetty,J.,etal(美國專利4,575,487(1986),題目是″Methodfordeterminationoftransglucosidase″)中描述的分析,它們在此并入為參考。在一種實(shí)施方案中,將0.05至6.00kg轉(zhuǎn)葡糖苷的酶加入每公噸溶解淀粉(kg/mt淀粉dsb)。在另一種實(shí)施方案中,將0.10至5.00kg轉(zhuǎn)葡糖苷的酶加入每公噸谷物(kg/mt淀粉dsb)。在另一種實(shí)施方案中,將0.25至3.00kg轉(zhuǎn)葡糖苷的酶加入每公噸谷物(kg/mtdsb)。在另一種實(shí)施方案中,將0.50至1.50kg轉(zhuǎn)葡糖苷的酶加入每公噸谷物(kg/mt淀粉dsb)。作為轉(zhuǎn)葡糖苷酶作用的結(jié)果,麥芽-寡糖被轉(zhuǎn)變?yōu)楫慃溠?寡糖,形成新的類別的多糖,其含有更高比例的在非還原末端與葡萄糖分子的一級羥基基團(tuán)連接的葡糖基殘基。此方法產(chǎn)生的異麥芽-寡糖包括異麥芽糖、4-α-葡糖基麥芽糖、異麥芽-三糖、異麥芽-四糖、異麥芽-五糖、異麥芽-己糖和異麥芽-庚糖。這些糖作為食品添加劑得到了越來越多的關(guān)注,因?yàn)樗鼈儙椭A(yù)防齲齒(Oshima,et.al1988,Thecariesinhibitoryeffectsofgos-sugarinvitroandratexperiments.MicrobialImmunol.32.1093-1105))和改善人腸道菌群,作為雙歧桿菌的生長因子(益生質(zhì))而起作用(Komoto,et.al1988;EffectofIsomalto-oligosaccharidesonhumanfecalflora,BifidobacteriaMicroflora7,61-69)。為了確定IMO的產(chǎn)生,可以應(yīng)用試驗(yàn)和/或其它分析方法,來確定產(chǎn)生的IMO的量。確定生成的IMO的水平的一種方法包括高效液相色譜(HPLC)。例如,混合物的分析可以提供對由該方法產(chǎn)生的各種糖的水平的提示。有用的評價(jià)是混合物的聚合程度(DP)。術(shù)語聚合程度是分子中葡萄糖殘基數(shù)的相對量的量度。例如,葡萄糖(一個(gè)葡糖基單位,最低的聚合水平)通常被認(rèn)為是DP1。異麥芽-寡糖通常被認(rèn)為是DP2(兩個(gè)葡萄糖單位)。在一種實(shí)施方案中,谷物組合物含有重量大于至少1%、至少5%、至少25%、至少40%、至少50%、至少55%、至少60%、至少65%、至少70%的至少一種異麥芽-寡糖。在一種實(shí)施方案中,所述的至少一種異麥芽-寡糖選自異麥芽糖、4-α-葡糖基麥芽糖和/或異麥芽-三糖。在一種實(shí)施方案中,谷物組合物中生成的異麥芽-寡糖的量占谷物組合物的1%至99%之間。在一種實(shí)施方案中,谷物組合物中生成的異麥芽-寡糖的量占谷物組合物的1%至90%之間。在一種實(shí)施方案中,谷物組合物中生成的異麥芽-寡糖的量占谷物組合物的1%至80%之間。在一種實(shí)施方案中,谷物組合物中生成的異麥芽-寡糖的量占谷物組合物的1%至70%之間。在本發(fā)明的一種實(shí)施方案中,上述程序之后的谷物組合物中存在的總糖,包括占總糖含量的大于50%、大于60%、大于70%或大于80%的麥芽糖水平。大于50%的麥芽糖水平包括從50%至85%、從55%至80%和/或從60%至75%的范圍。術(shù)語RBS比是指谷物中存在的麥芽糖(DP2)與得到的谷物組合物中存在的麥芽三糖(DP3)水平的比。更高的PBS值提示,存在更高量的麥芽糖和因此淀粉更徹底地轉(zhuǎn)變?yōu)辂溠刻?,這與存在其它的較不需要的終產(chǎn)品如麥芽三糖是不同的。在一種實(shí)施方案中,RBS比大于2.0。在一種實(shí)施方案中,RBS比大于3.0、大于4.0。代表性的范圍包括,2.0至50.00、2.0至30.00和/或2.0至10.00的RBS比。實(shí)施例中描述了各種RBS比。已指出,液化淀粉被商業(yè)上的β淀粉酶(大麥或者小麥)水解,通常產(chǎn)生的麥芽糖含量在55%至65%之間。為了應(yīng)用液化淀粉得到大于50%的麥芽糖含量,之前需要加入脫支酶和/或者液化淀粉的非常低的起始DE。可任選地,加入脫支酶可以用于增加麥芽糖的產(chǎn)生。術(shù)語脫支酶是指催化α-1,6-鍵的水解的酶。就這一點(diǎn),E.C.3.2.1.41類的酶是有用的。此類的代表性酶是pullanase,也稱為α-糊精內(nèi)切-1,6-α葡糖苷酶、極限糊精酶、脫支酶、支鏈淀粉1,6-葡聚糖水解酶。將含淀粉的谷物與產(chǎn)麥芽酶接觸,生成麥芽糖,并將麥芽糖與轉(zhuǎn)葡糖苷的酶接觸,其發(fā)生時(shí)的溫度低于所使用的谷物的淀粉的糊化溫度。將基質(zhì)與分別的酶接觸或者溫育,溫育時(shí)間為至少12小時(shí)、至少18小時(shí)、至少24小時(shí)、至少30小時(shí)和/或至少36小時(shí)。至少一個(gè)被提及的時(shí)間的期間是指12-80小時(shí)、至少18-60小時(shí)和/或至少24-48小時(shí)的期間。術(shù)語溫育時(shí)間是指麥芽糖或者底物轉(zhuǎn)變?yōu)镮MO的時(shí)間期間。可以將轉(zhuǎn)糖苷的酶與基質(zhì)例如含淀粉的谷物、產(chǎn)麥芽酶例如α淀粉酶或者β淀粉酶,和/或液化酶,例如α淀粉酶分別或者同時(shí)接觸或加入。在一種實(shí)施方案中,轉(zhuǎn)糖苷的酶和液化酶同時(shí)加入。因此在一種實(shí)施方案中,步驟(a)和步驟(b)同時(shí)進(jìn)行。在另一種實(shí)施方案中,步驟(a)和步驟(b)按順序或者分別進(jìn)行。在另一種實(shí)施方案中,步驟(a)早于步驟(b)進(jìn)行。術(shù)語糊化溫度是指谷物中含有的淀粉改變相或者形成凝膠狀的溫度。盡管具體的溫度依谷物不同而有所不同的,但足以使得淀粉糊化的溫度包括大于45℃、大于50℃、大于60℃、大于70℃、大于80℃和/或大于90℃的溫度。大于指出的糊化溫度的代表性溫度包括45℃至120℃、50℃至110℃、50°至100℃。在一種實(shí)施方案中,例如,小麥,糊化溫度是谷物被保持在低于,例如,選自低于50℃至70℃的溫度,在另一種實(shí)施方案中,低于55℃至65℃,在另一種實(shí)施方案中,低于60℃。例如,已經(jīng)描述了玉米、馬鈴薯、小麥、木薯、蠟質(zhì)玉米、高梁、稻、西貢米、竹芋、淀粉玉米(arrowrootamylomaize)和/或甘薯的糊化溫度,如表1中所顯示(Beynum,G.M.AandRoels,J.A.,StarchConversionTechnology(MarcelDekker,Inc.,NewYork,NewYork(1985),pp.15-45)表1在本發(fā)明的另一種實(shí)施方案中,溫育時(shí)間過后,漿體可以進(jìn)行一段時(shí)期的快速加熱,其足以中止進(jìn)一步的酶活性,但是并不使?jié){體糊化或者液化。例如,可以將漿體加熱至80℃、85℃、90℃、95℃或者100℃的溫度,持續(xù)時(shí)間為5-60分鐘、10.0至40.0分鐘或者30.0分鐘。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案進(jìn)一步包括,將漿體分離為不溶物和可溶物的步驟。分離步驟可以是本領(lǐng)域中已知的任何色譜分析方法,例如但不限于HPLC,大小排阻和/或者電荷層析。過濾可以被用于將可溶物與不溶物分離。不溶物或者全部漿體可以進(jìn)行本申請中隨后描述的干燥步驟。在另一種實(shí)施方案中,從分離步驟中得到的可溶物,可以通過蒸發(fā)例如旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)、盤式烘燥等而濃縮。蒸發(fā)后的濃縮物可以進(jìn)行炭處理(通過炭粒進(jìn)行過濾)和/或進(jìn)一步的色譜處理,以提供分離的IMO液體濃縮物。分離的IMO濃縮物可以具有大于75%、大于80%、大于90%、大于95%、大于97%和/或大于99%的IMO濃度。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是,在口服再水合溶液中應(yīng)用或者整合進(jìn)這種糖漿(酶促地來源于具有未糊化淀粉的基質(zhì)的異麥芽-寡糖)。異麥芽-寡糖的量可以是美國專利4,981,687;5,096,894和/或5,733,579中描述的量或者配方。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是,干燥前述的異麥芽-寡糖基質(zhì),谷物或者塊莖組合物,產(chǎn)生含有谷物組合物的粉末。典型地,干燥步驟通過加熱而加速。通過應(yīng)用合適的干燥方法,例如但不限于噴射式干燥器、盤式烘燥器、轉(zhuǎn)筒式干燥機(jī)、轉(zhuǎn)鼓式干燥器或者箱式干燥機(jī),谷物組合物可以被干燥為所需的潮濕水平??梢詰?yīng)用其它的干燥方法學(xué),例如噴射干燥、降壓蒸發(fā)干燥。通過干燥谷物組合物、漿體、分離的不溶物和/或分離的可溶物,從中得到粉末或者其它的干燥粉末??梢詫⒌玫降姆勰┗蛘叻蹱钗锊⑷胄枰慃溠?寡糖的組合物,例如,食品(早餐谷類,干面包)、食品添加劑和烘焙制品中。術(shù)語食品添加劑是指將異麥芽-寡糖散布于材料上,將其用作制造其它食品時(shí)的配料,和/或作為加入到食品的局部成分應(yīng)用。在另一種實(shí)施方案中,干燥的粉末可以被并入食物增補(bǔ)劑(foodsupplements)。可以以任何可接受的增補(bǔ)或者形式將干燥的粉末并入食物增補(bǔ)劑。飲食增補(bǔ)劑可以在基質(zhì)中配制成適于口服施用的形式,例如但不限于,藥粉、晶體、粒狀物、微粒(包括尺寸為微米級別的顆粒,如微球體和微膠囊)、顆粒(包括尺寸為微米級別的顆粒)、珠、微珠、小球、丸劑、微片劑、壓縮片劑或者研磨片劑(tablettriturates)、模制片劑或者片劑研磨物(tablettriturates),還可以配制于膠囊中,其是硬或軟的,并且含有形式為粉末、顆粒、珠、溶液或者懸浮物的組合物。飲食增補(bǔ)劑也可以在含水液體中配制成用于口服的溶液或者懸浮液,可以是整入到膠囊中的液體,或者可以配制成適于施用或者適于直腸施用的任何其它方便的形式,例如栓劑、灌腸劑或者其它方便的形式。異麥芽-寡糖組合物也可以作為可控制的釋放系統(tǒng)而被提供。飲食增補(bǔ)劑制劑也可以包括任何類型的可接受的賦形劑、添加劑或者載體。例如,但不是為了限制,稀釋劑或者填充劑,如葡萄糖結(jié)合劑(dextrates)、磷酸二鈣、硫酸鈣、乳糖、纖維素、高嶺土、甘露醇、氯化鈉、干淀粉、山梨醇、蔗糖、肌醇、糖粉、膨潤土、微晶纖維素或者羥丙基甲基纖維素,可以被加入異麥芽-寡糖組合物,以增加組合物的體積。同樣,粘合劑例如但不限于,淀粉、明膠、蔗糖、葡萄糖、右旋糖、糖蜜、乳糖、阿拉伯樹膠、藻酸鈉、愛爾蘭蘚(角叉菜)提取物、panwar膠、茄替(ghatti)膠、isapgolhusks膠黏液、羧甲基纖維素、甲基纖維素、聚乙烯吡咯烷酮、硅酸鎂鋁(改性)(veegum)和淀粉阿拉伯半乳聚糖、聚乙二醇、甲基纖維素、單硬脂酸甘油酯和蠟,可以被加入制劑,以增加其黏附性質(zhì)。另外地,潤滑劑,例如但不限于,甘油單硬脂酸酯、滑石、硬脂酸鎂15、硬脂酸鈣、硬脂酸、氫化植物油、聚乙二醇、苯甲酸鈉、醋酸鈉、氯化鈉、亮氨酸、碳蠟(carbowax)、月桂硫酸鈉(sodiumlaurylsulfate)和月桂硫酸鎂可以被加入制劑。同樣,助流劑,例如但不限于二氧化硅膠質(zhì)、硅酸錳或者云母可以被加入,以改善粉末制劑的流動(dòng)性質(zhì)。最后,崩解劑,例如但不限于,淀粉、粘土、纖維素、褐藻酸、樹脂、交聯(lián)的聚合物(例如,交聯(lián)羧甲纖維素、交聚維酮和淀粉乙醇酸鈉)、硅酸鎂鋁(改性)、甲基纖維素、瓊脂、膨潤土、纖維素和木材制品、天然海綿(naturalsponge)、陽離子交換樹脂、褐藻酸、瓜爾膠、柑橘果肉(citruspulp)、羧甲基纖維素或者帶有淀粉的月桂硫酸鈉,也可以被加入,以協(xié)助制劑在胃或者腸中分解。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是,將此處描述的新的基質(zhì),塊莖或者谷物組合物,應(yīng)用于面粉的生產(chǎn),所述的面粉用于各種烘焙制品。術(shù)語烘焙制品涉及發(fā)酵的制品和未發(fā)酵的制品。術(shù)語“發(fā)酵的”是指在烘焙過程中應(yīng)用了酵母的烘焙制品。而術(shù)語“未發(fā)酵”是指在烘焙過程中不應(yīng)用酵母的烘焙制品。代表性的制品包括面包、餅干、蛋糕、餡餅、點(diǎn)心、naan、百吉餅、意大利面食、薄脆餅干、卷制品、油炸圈餅、皮塔餅和面粉糕餅。代表性的未發(fā)酵物品包括無酵餅、印度薄餅、早餐谷類食品和玉米粉圓餅。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是,將新的谷物組合物應(yīng)用于面食,例如面條(短通心面、實(shí)心細(xì)面條、寬面條、玉米面條等)。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是,根據(jù)上述方法制成的基質(zhì),塊莖或者谷物組合物。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是,包含根據(jù)上述方法制成的基質(zhì),塊莖或者谷物組合物的面粉。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是,包含上述的異麥芽-寡糖的口服再水合溶液。根據(jù)上述方法,可以制成包含基質(zhì),塊莖或者谷物組合物的粉末。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是,根據(jù)上述方法制成的基質(zhì)、塊莖或者谷物組合物。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是,根據(jù)上述方法制成的基質(zhì),塊莖或者谷物組合物。本發(fā)明的另一種實(shí)施方案是,將新的谷物組合物應(yīng)用于發(fā)酵/啤酒麥芽汁或者基質(zhì)中。例如,新的谷物組合物可以如所描述地用于啤酒發(fā)酵,如國際發(fā)明者F·李,J·瓦達(dá)庫特,G·段,J·K·謝蒂申請人:金克克國際有限公司
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