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一種真菌毒素檢測(cè)數(shù)據(jù)庫(kù)的構(gòu)建方法、真菌毒素檢測(cè)方法、試劑盒及裝置的制造方法_3

文檔序號(hào):8255473閱讀:來(lái)源:國(guó)知局
模塊105將酶標(biāo)儀檢測(cè)的 吸光度值輸入分析模塊103。
[0102] 在本發(fā)明一優(yōu)選實(shí)施例中,步驟S4所述的操作預(yù)定程式具體包括:處理模塊104 將其與數(shù)據(jù)庫(kù)中的標(biāo)準(zhǔn)品0吸光度值進(jìn)行比對(duì),同時(shí)自動(dòng)調(diào)用數(shù)據(jù)庫(kù)中與試劑盒所測(cè)標(biāo)準(zhǔn) 品0吸光度值一樣或是最為接近的計(jì)算公式進(jìn)行比對(duì)分析。
[0103] 本發(fā)明真菌毒素快速檢測(cè)儀處理模板104調(diào)用的數(shù)據(jù)庫(kù),預(yù)先存儲(chǔ)在主機(jī)中,該 數(shù)據(jù)庫(kù)為本發(fā)明在真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)庫(kù)建立及數(shù)據(jù)分析需求的基礎(chǔ)上,通過(guò)對(duì)軟件進(jìn)行了 系統(tǒng)設(shè)計(jì),軟件編碼階段,根據(jù)功能、性能、界面等方面的設(shè)計(jì)要求,將標(biāo)準(zhǔn)曲線的數(shù)據(jù)分析 結(jié)果導(dǎo)入軟件程序中,最后對(duì)編寫(xiě)完成的軟件進(jìn)行測(cè)試,獲得存儲(chǔ)在真菌毒素快速檢測(cè)儀 主機(jī)中的數(shù)據(jù)庫(kù)。
[0104] 在本發(fā)明一優(yōu)選實(shí)施例中,步驟S5所述的讀取檢測(cè)結(jié)果具體包括:處理模塊104 的數(shù)據(jù)處理結(jié)果在顯示器102通過(guò)一圖形界面得W顯示。
[01化]優(yōu)選地,輸入對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品0和樣本的檢測(cè)OD值后(如樣本只做了一個(gè)檢測(cè)值,請(qǐng) 把該值輸入兩遍),點(diǎn)擊確定后,界面右邊出現(xiàn)對(duì)應(yīng)的計(jì)算結(jié)果。
[0106] 如需計(jì)算第二批樣本,點(diǎn)擊清除按鈕,數(shù)值全部變?yōu)榭瞻字担^續(xù)對(duì)第二批樣本進(jìn) 行計(jì)算,重復(fù)步驟S2?S5即可。
[0107] 采用本發(fā)明提供的電子數(shù)據(jù)分析終端,所檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品0吸光度值、待測(cè)樣品吸 光度輸入其分析模塊103后,處理模塊104將其與數(shù)據(jù)庫(kù)中的標(biāo)準(zhǔn)品0吸光度值進(jìn)行比對(duì), 同時(shí)自動(dòng)調(diào)用數(shù)據(jù)庫(kù)中與試劑盒所測(cè)標(biāo)準(zhǔn)品0吸光度值一樣或是最為接近的計(jì)算公式進(jìn) 行比對(duì)分析,得出待測(cè)樣品中真菌毒素的含量。
[0108] 在本發(fā)明另一實(shí)施例中,本發(fā)明提供了的真菌毒素的檢測(cè)方法,優(yōu)選包括如下步 驟;S1.樣品處理,并使用酶標(biāo)儀檢測(cè)樣品的OD值;S2.調(diào)用分析模塊;S3.輸入OD值; S4.調(diào)取預(yù)定程式;S5.操作預(yù)定程式;S6.讀取檢測(cè)結(jié)果。具體而言,本包括如下步驟:
[0109] 1、樣品預(yù)處理,并使用酶標(biāo)儀檢測(cè)樣品的OD值;
[0110] 2、開(kāi)機(jī),進(jìn)入檢測(cè)主界面,調(diào)用匹配的真菌毒素分析模塊,進(jìn)入"定量檢測(cè)"界面;
[0111] 3、按照該儀器軟件"定量檢測(cè)"界面上的真菌毒素檢測(cè)說(shuō)明書(shū)的步驟(預(yù)定程式) 進(jìn)行操作;
[0112] 4、直接讀出檢測(cè)結(jié)果。
[0113] 在本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例中,所述的真菌毒素檢測(cè)說(shuō)明書(shū)的步驟如下:
[0114] a.雙擊單標(biāo)準(zhǔn)計(jì)算軟件,點(diǎn)擊進(jìn)入計(jì)算按鈕。
[0115] b.出現(xiàn)輸入數(shù)值界面,上面有輸入零標(biāo)準(zhǔn)OD值的2個(gè)輸入框,下面有可W輸入6 個(gè)檢測(cè)樣本OD值的12個(gè)輸入框,每個(gè)樣本各2個(gè)平行。中間有樣本稀釋倍數(shù)選擇,根據(jù)需 求進(jìn)行選擇。
[0116] C.輸入對(duì)應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品0和樣本的檢測(cè)OD值后(如樣本只做了一個(gè)檢測(cè)值,請(qǐng)把該值 輸入兩遍),點(diǎn)擊確定,界面右邊出現(xiàn)對(duì)應(yīng)的計(jì)算結(jié)果。如需計(jì)算第二批樣本,點(diǎn)擊清除按 鈕,數(shù)值全部變?yōu)榭瞻字担^續(xù)對(duì)第二批樣本進(jìn)行計(jì)算。
[0117] d.軟件使用完,點(diǎn)擊退出按鈕。
[0118] 本發(fā)明提供的單標(biāo)準(zhǔn)專(zhuān)業(yè)計(jì)算軟件的應(yīng)用原理是通過(guò)多因素影響模擬實(shí)驗(yàn),得到 標(biāo)準(zhǔn)品0?4 (標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量不限于5個(gè))的吸光度值,所得標(biāo)準(zhǔn)品0的吸光度值范圍一般 在1. 00?3. 00 (優(yōu)選為1. 50?2. 50)之間但不限于該范圍,構(gòu)建成不同影響因素下的標(biāo)準(zhǔn) 曲線數(shù)據(jù)庫(kù)。在用試劑盒對(duì)樣品進(jìn)行檢測(cè)過(guò)程中,所檢測(cè)的標(biāo)準(zhǔn)品0吸光度值輸入軟件后, 軟件將其與數(shù)據(jù)庫(kù)中的標(biāo)準(zhǔn)品0吸光度值進(jìn)行比對(duì),同時(shí)自動(dòng)調(diào)用數(shù)據(jù)庫(kù)中與試劑盒所測(cè) 標(biāo)準(zhǔn)品0吸光度值一樣或是最為接近的計(jì)算公式進(jìn)行比對(duì)分析,得出受測(cè)樣品中真菌毒素 的含量。
[0119] 第四方面,本發(fā)明還提供了一種真菌毒素的檢測(cè)裝置,包括電子數(shù)據(jù)分析終端,所 述電子數(shù)據(jù)分析終端包含一計(jì)算機(jī)主機(jī)101、一顯示器102,計(jì)算機(jī)主機(jī)101與顯示器102 電連接;計(jì)算機(jī)主機(jī)101包含分析模塊103和處理模塊104 ;將待檢測(cè)樣本的OD值輸入分 析模塊103后,處理模塊104獲取分析模塊103傳輸?shù)碾娮有畔?,處理模塊104的數(shù)據(jù)處理 結(jié)果在顯示器102通過(guò)一圖形界面得W顯示。
[0120] 優(yōu)選地,所述真菌毒素的檢測(cè)裝置還包括數(shù)據(jù)采集模塊105,所述數(shù)據(jù)采集模塊 105與酶標(biāo)儀電連接,所述數(shù)據(jù)采集模塊105將酶標(biāo)儀檢測(cè)的吸光度值輸入分析模塊103。
[0121] 優(yōu)選地,所述真菌毒素的檢測(cè)裝置包括的電子數(shù)據(jù)分析終端為如第二方面所述的 電子數(shù)據(jù)分析終端。
[0122] 本發(fā)明提供的真菌毒素檢測(cè)數(shù)據(jù)庫(kù)的構(gòu)建方法、真菌毒素檢測(cè)方法、試劑盒及裝 置,具有W下優(yōu)點(diǎn)和有益效果:
[0123] a.簡(jiǎn)便性一一檢測(cè)過(guò)程中只需加入真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)品0和待測(cè)樣品。將標(biāo)準(zhǔn)品0和 樣品吸光度值輸入試劑盒配套單標(biāo)準(zhǔn)數(shù)據(jù)分析軟件即可得到結(jié)果,無(wú)需用戶計(jì)算、無(wú)需繪 制標(biāo)準(zhǔn)曲線,非專(zhuān)業(yè)人員也能熟練操作。
[0124] b.實(shí)用性一一試劑盒只需添加標(biāo)準(zhǔn)品0,與W往技術(shù)相比,節(jié)省了添加標(biāo)準(zhǔn)曲線的 步驟,提局檢測(cè)效率和減少操作誤差。
[01巧]C.環(huán)保性一一試劑盒標(biāo)準(zhǔn)品中不含真菌毒素,避免了檢測(cè)人員對(duì)毒素的接觸和廢 棄物的處理,安全環(huán)保。
【附圖說(shuō)明】
[0126] 圖1是本發(fā)明實(shí)施例提供的檢測(cè)真菌毒素的原理流程圖。
[0127] 圖2為本發(fā)明實(shí)施例提供的真菌毒素快速檢測(cè)儀的電子數(shù)據(jù)分析終端組成框架 圖。
[0128] 圖3為本發(fā)明實(shí)施例提供的真菌毒素快速檢測(cè)儀的真菌毒素定量檢測(cè)界面。
【具體實(shí)施方式】
[0129] 為了使本發(fā)明的目的、技術(shù)方案及優(yōu)點(diǎn)更加清楚明白,W下結(jié)合附圖及實(shí)施例,對(duì) 本發(fā)明進(jìn)行進(jìn)一步詳細(xì)說(shuō)明。應(yīng)當(dāng)指出,此處所描述的具體實(shí)施例僅僅用W解釋本發(fā)明,并 不用于限定本發(fā)明。
[0130] 下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說(shuō)明。
[0131] 下述實(shí)施例中所用的方法如無(wú)特別說(shuō)明均為常規(guī)方法,具體步驟可參見(jiàn): 《Molecular Cloning:A Laboratory Manual》(Sambrook, J. , Russell, David W. , Molecular Cloning:A Laboratory Manual, 3rd edition, 2001, NY, Cold Spring Harbor)。
[0132] 若無(wú)特別說(shuō)明,本發(fā)明實(shí)施例采用的試劑皆為市售商品,黃曲霉毒素BLA6636,德 國(guó)Dr. E虹enstorfer ;玉米赤霉締酬,Z2000,德國(guó)Dr. E虹enstorfer ;嘔吐毒素,D0156,德國(guó) 化.E虹enstorfer ;各標(biāo)準(zhǔn)品稀釋方法為;先將嘔吐毒素用水稀釋至lOOOppb,再按照需要 的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)ū热缦♂?0ppb、10ppb、30ppb、90ppb、270ppb等比例)。
[0133] 下面結(jié)合附圖1?3進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明是如何實(shí)現(xiàn)的:
[0134] 實(shí)施例1
[01巧]本實(shí)施例提供了一種真菌毒素檢測(cè)試劑盒,其包含下述組分:
[0136] (1)包被真菌毒素抗原的酶聯(lián)板;
[0137] (2)用辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記的羊抗鼠二抗;
[013引 (3)真菌毒素鼠單克隆抗體;
[0139] (4)真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)品溶液1瓶,濃度為0 y g/L。
[0140] (5)底物顯色液A液為過(guò)氧化氨,底物顯色液B液為鄰苯二胺;
[0141] (6)終止液為2mol/L的硫酸緩沖液;
[01伯](7)濃縮洗漆液為抑7. 4,含有0. 1 %?0. 5%吐溫20,0. 5%疊氮化鋼的磯酸鹽緩 沖液;
[01創(chuàng) (8)抗體稀釋液為抑值8. 0、0. 05mol/L、含有3%小牛血清和5%0N,N'-二甲基甲 酷胺值MF)的磯酸鹽緩沖液;
[0144] (9)濃縮復(fù)溶液為含有50%甲醇、1%小牛血清炬SA)的磯酸鹽緩沖液。
[0145] 該試劑盒的使用方法為:
[0146] a-1)加樣;向真菌毒素偶聯(lián)抗原包被的酶標(biāo)板微孔中分別加入標(biāo)準(zhǔn)品0溶液a W 及待測(cè)樣品溶液50ul/孔,再加入酶工作液50ul/孔,真菌毒素抗體工作液50ul/孔,用蓋 板膜封板,20°C?39°C下解育10?60min分鐘;
[0147] a-。倒出孔內(nèi)液體,用洗漆液a (250 y 1/孔)洗板4?5次,每次間隔10?30 秒,用吸水紙拍干(拍干后未被清除的氣泡可用干凈的槍頭刺破);
[0148] a-如加顯色液:加入底物顯色液A液50 y 1/孔,再加底物顯色液B液50 y 1/孔, 輕輕振蕩混勻,20°C?39°C恒溫箱避光顯色5?30min ;
[0149] a-4)每孔加入終止液a50 y 1,輕輕振蕩混勻,用酶標(biāo)儀測(cè)定每孔吸光度值。
[0150] 實(shí)施例2
[0151] 本實(shí)施例提供了一種真菌毒素檢測(cè)試劑盒,其包含下述組分:
[0152] 使其包含下述組分:
[0153] (1)包被羊抗兔二抗的酶聯(lián)板;
[0154] (2)用堿性磯酸醋酶標(biāo)記的真菌毒素抗原;
[0155] (3)真菌毒素兔多克隆抗體;
[0156] (4)真菌毒素標(biāo)準(zhǔn)品溶液1瓶,濃度為0 y g/L ;
[0157] (5)底物顯色液對(duì)硝基磯酸鹽緩沖液;
[0158] (6)終止液為2mol/L的氨氧化鋼緩沖液;
[0159] (7)濃縮洗漆液為PH 7. 4,含有0. 8 %吐溫20和0. 1 %疊氮化鋼(NaN3)防腐劑的 磯酸鹽緩沖液;
[0160] 做濃縮
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