本發(fā)明屬于皮革化學(xué)品性質(zhì)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種利用分光光度法測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的方法。
背景技術(shù)：
鉻鞣是目前制革工業(yè)中使用最廣泛的鞣法，在此過(guò)程中使用的鉻鞣劑cr2o3含量一般為25±1%。然而這類(lèi)鉻鞣劑吸收率較低，一般只有60—75%，且存在中性鹽污染的問(wèn)題，因此市面上推出了很多高吸收鉻鞣劑和不浸酸鉻鞣劑等新產(chǎn)品，以提高鉻鞣劑的吸收率，減少鉻鞣過(guò)程的污染（杜曉聲，盧麗旭，單志華，等.高吸收鉻粉應(yīng)用研究[j].中國(guó)皮革，2012,41（7）：6-8；陳占光，陳武勇.不浸酸鉻鞣劑的研制及性能表征[j].中國(guó)皮革，2001,30（23）：6-10）。此外，為了使鉻鞣劑耐堿穩(wěn)定性更好，鞣制的藍(lán)濕革粒面平細(xì)，通過(guò)加入蒙囿劑生產(chǎn)了蒙囿型鉻鞣劑（李國(guó)英，張銘讓.kmc系列鉻鞣粉劑的分子設(shè)計(jì)和研制[j].皮革科學(xué)與工程，1992,2(1):13-21）。同時(shí)，為了簡(jiǎn)化操作，自堿化鉻鞣劑也逐漸被開(kāi)發(fā)并投放市場(chǎng)（韓玉林，熊健.新型自堿化皮革鉻鞣劑的合成[j].精細(xì)與專(zhuān)用化學(xué)品，1997，17:3-4）。雖然鉻鞣劑的具體性質(zhì)有所差異，但是目前鉻鞣劑的有效成分含量均以cr2o3計(jì)，根據(jù)制革用粉狀鉻鞣劑國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)（gb/t24331-2009）的規(guī)定，不同類(lèi)型的鉻鞣劑中cr2o3含量均需滿足一定的含量，如標(biāo)準(zhǔn)型、蒙囿型、蒙囿交聯(lián)型和蒙囿自堿化型鉻鞣劑的cr2o3含量應(yīng)分別大于24%、23%、22%和19%。
與常規(guī)鉻鞣劑相比，蒙囿型鉻鞣劑、自堿化鉻鞣劑、高吸收鉻鞣劑和不浸酸鉻鞣劑等特殊鉻鞣劑在生產(chǎn)過(guò)程中均要添加其他助劑，助劑的加入不僅會(huì)降低鉻鞣劑中的cr2o3含量，還會(huì)增加產(chǎn)品成本。以鉻鞣劑中cr2o3含量來(lái)看，蒙囿型鉻鞣劑、自堿化鉻鞣劑、高吸收鉻鞣劑和不浸酸鉻鞣劑等cr2o3含量均低于常規(guī)鉻鞣劑，但是產(chǎn)品的價(jià)格則大大高于常規(guī)鉻鞣劑，因此采用cr2o3含量來(lái)衡量鉻鞣劑的有效物質(zhì)，不能客觀地反應(yīng)特殊鉻鞣劑的性質(zhì)，不利于這類(lèi)產(chǎn)品的推廣。然而目前國(guó)內(nèi)外除了采用cr2o3含量評(píng)價(jià)鉻鞣劑的有效成分含量外，其他測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的方法還未見(jiàn)報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：
針對(duì)目前測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量方法單一，且不能客觀表達(dá)特殊鉻鞣劑性能的現(xiàn)狀，發(fā)明人在已公開(kāi)的鉻鞣劑組成、結(jié)構(gòu)和性能測(cè)試方法和技術(shù)，以及其他鞣劑組成、結(jié)構(gòu)和性能測(cè)試方法和技術(shù)的基礎(chǔ)上，結(jié)合現(xiàn)有鉻鞣技術(shù)和鉻鞣機(jī)理所公開(kāi)的材料，深入研究了鉻鞣劑在鞣制過(guò)程中的反應(yīng)過(guò)程及其與皮膠原蛋白的作用規(guī)律，提出了一種測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的方法。
在鉻鞣過(guò)程中，鉻通過(guò)與皮膠原蛋白上離解的羧基形成配位鍵而產(chǎn)生鞣制效果。在此過(guò)程中，鉻從鞣液進(jìn)入皮革內(nèi)部，表現(xiàn)為鞣液中鉻含量減少，皮革中鉻含量增加。由于皮革在鞣制過(guò)程中引入了鉻，會(huì)使得皮革的質(zhì)量增加，因此，理論上可以采用重量法測(cè)定鉻鞣劑的有效成分。然而發(fā)明人通過(guò)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)通過(guò)測(cè)定皮革在鞣制前后的質(zhì)量差以表征鉻的吸收程度，從而測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的方法是不可行的，主要原因?yàn)椋菏紫?，由于取樣和?shí)驗(yàn)室測(cè)試條件的限制，檢測(cè)過(guò)程中鉻鞣規(guī)模較小，因此可用于進(jìn)行恒重的鞣制前、后的皮或革也較少，這就使得測(cè)試的相對(duì)誤差很大；其次，由于鞣制前后的皮或革水分含量在70%左右，因此恒重時(shí)間長(zhǎng)、效率低，不能滿足企業(yè)常規(guī)檢驗(yàn)和出廠檢驗(yàn)的要求；再次，在鉻鞣過(guò)程中，裸皮不僅吸收了鉻，還吸收了鉻鞣劑中的中性鹽等其他物質(zhì)，而這些物質(zhì)是沒(méi)有鞣制效果的，但是其依然會(huì)導(dǎo)致鞣制前后皮革質(zhì)量的變化；最后，由于在鞣制過(guò)程中，皮內(nèi)的可溶性蛋白會(huì)溶出，使得鞣制后皮革重量的增加小于其實(shí)際吸收的鉻鞣劑中的有效成分，此外，不同批次實(shí)驗(yàn)采用的皮可溶性蛋白含量和在鞣制過(guò)程中的溶出量不一致，使得測(cè)試可重復(fù)性和穩(wěn)定性差。
鉻鞣劑溶液為藍(lán)綠色，其在可見(jiàn)光譜區(qū)域內(nèi)有兩個(gè)特征吸收峰，分別位于420nm左右和580nm左右（陳武勇，李國(guó)英.鞣制化學(xué)（第三版）[m].北京：中國(guó)輕工業(yè)出版社，2011）。溶液的吸光度與其濃度在一定范圍內(nèi)具有線性正相關(guān)性，因此通過(guò)測(cè)定鞣制前后鞣液的吸光度，可以反映出鞣制過(guò)程中鉻的吸收情況，表征鉻鞣劑中有效成分含量的變化。鉻鞣劑中的中性鹽、蒙囿劑等均為有機(jī)酸及其鹽，這些物質(zhì)在可見(jiàn)光區(qū)沒(méi)有吸收，不會(huì)對(duì)結(jié)果造成干擾；皮內(nèi)的可溶性蛋白也沒(méi)有可見(jiàn)吸收光譜，依然不會(huì)干擾鉻的吸光度。因此，在一定條件下，鉻鞣劑溶液的的吸光度僅由鉻元素的含量決定。紫外—可見(jiàn)分光光度法是進(jìn)行常量和微量物質(zhì)含量測(cè)定的重要方法，該方法操作簡(jiǎn)便，所需被測(cè)物少，誤差小，可重復(fù)性和穩(wěn)定性強(qiáng)，因此可以采用紫外—可見(jiàn)分光光度法測(cè)定鉻鞣劑的有效成分含量。
由于不同鉻鞣劑組成和性質(zhì)不同，其紫外—可見(jiàn)特征吸收峰的位置也不相同，在進(jìn)行測(cè)試前，首先采用紫外—可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)鉻鞣劑溶液進(jìn)行掃描，確定特征吸收峰位置，并以該特征吸收波長(zhǎng)作為后續(xù)試驗(yàn)的條件，可以消除鉻鞣劑中不同中性鹽對(duì)鉻特征吸收波長(zhǎng)的影響，進(jìn)一步減少誤差，提高測(cè)試精度和可信度。經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)，發(fā)明人發(fā)現(xiàn)鉻鞣劑母液濃度為2-10g/l時(shí)，制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)線性較好，同時(shí)測(cè)試結(jié)果重復(fù)性好和誤差較小。同時(shí)，發(fā)明人經(jīng)過(guò)多次試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，用0、10、20、30和40ml的鉻鞣劑母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，在事先確定的特征吸收波長(zhǎng)處測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度為縱坐標(biāo)，標(biāo)準(zhǔn)溶液濃度為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，標(biāo)準(zhǔn)曲線可以覆蓋測(cè)試范圍，同時(shí)標(biāo)準(zhǔn)曲線相關(guān)系數(shù)r2較高，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性好。
眾所周知，動(dòng)物皮各部位纖維編織情況不同，存在很大的部位差。同時(shí)，由于準(zhǔn)備工段處理工藝、材料以及原料皮來(lái)源不同，裸皮在鞣制過(guò)程中對(duì)鉻的吸收情況也有所差異。因此，發(fā)明人采用標(biāo)準(zhǔn)化的分析純鉻皮粉代替裸皮進(jìn)行鞣制，既可以消除裸皮部位差對(duì)測(cè)試產(chǎn)生的干擾，又避免了裸皮來(lái)源不同對(duì)測(cè)試結(jié)果的影響，提高了測(cè)試的可操作性和可重復(fù)性。在鉻鞣過(guò)程中，ph值是影響結(jié)合的關(guān)鍵因素，而不同的鉻鞣劑由于分子組成和結(jié)構(gòu)的不同，其鞣制結(jié)束時(shí)的ph也有差異，因此在本發(fā)明提供的一種測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的方法中，需要調(diào)節(jié)鞣制體系ph至4.0，以使鉻充分的與皮膠原蛋白結(jié)合，同時(shí)又不使鉻發(fā)生沉淀而吸附于皮上，這是準(zhǔn)確測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的關(guān)鍵。
在上述研究的基礎(chǔ)上，發(fā)明人提供了一種測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的方法，其特征在于通過(guò)以下7步操作即可測(cè)定鉻鞣劑的有效成分含量：
（1）、稱(chēng)取一定量的鉻鞣劑，溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶并定容至刻度線，配制鉻鞣劑濃度為cg/l的母液，母液濃度為2—10g/l；
（2）、分別量取0、10、20、30和40ml母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度，制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；
（3）、使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)母液進(jìn)行掃描，確定母液的特征吸收波長(zhǎng)，在該波長(zhǎng)下分別測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線的斜率(k)與相關(guān)系數(shù)(r2)，r2應(yīng)當(dāng)大于0.99；
（4）、實(shí)驗(yàn)樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入母液100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與母液充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min，使用濃度為1mol/l的鹽酸或1mol/l氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)鞣液ph至4.0，并記錄鹽酸或氫氧化鈉溶液用量，隨后繼續(xù)振蕩60min；
（5）、空白樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入蒸餾水100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與蒸餾水充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min，加入與實(shí)驗(yàn)樣相同體積的鹽酸或氫氧化鈉溶液，隨后繼續(xù)振蕩60min；
（6）、實(shí)驗(yàn)樣和空白樣振蕩結(jié)束后先采用尼龍濾布過(guò)濾，收集濾液，再用濾紙過(guò)濾濾液，過(guò)濾后的濾液在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的波長(zhǎng)處，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度值a實(shí)和a空；
（7）按照有效成分含量（%）=[k×c-(a實(shí)-a空)]/(k×c)×100%，計(jì)算鉻鞣劑的有效成分含量，測(cè)試需進(jìn)行平行試驗(yàn)，平行試驗(yàn)結(jié)果之差小于1.00%；
上述操作中，測(cè)試用水為蒸餾水，所用試劑除鉻鞣劑外均為分析純?cè)噭?/p>
本發(fā)明提供的一種測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的方法中，母液濃度為2—10g/l，母液特征吸收波長(zhǎng)為420nm左右特征吸收波長(zhǎng)或580nm左右特征吸收波長(zhǎng)的任意一個(gè)。本發(fā)明提供的一種測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的方法可以用于測(cè)定常規(guī)鉻鞣劑、蒙囿型鉻鞣劑、自堿化鉻鞣劑、高吸收鉻鞣劑或不浸酸鉻鞣劑中任意一種的有效成分含量。
在本發(fā)明提供的一種測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的方法中，鉻鞣劑母液濃度為2-10g/l，在此濃度下后續(xù)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線的線性好，同時(shí)也有利于測(cè)試過(guò)程中鞣制反應(yīng)的發(fā)生。母液濃度低于2g/l或高于10g/l，標(biāo)準(zhǔn)曲線線性不好，測(cè)試結(jié)果相對(duì)誤差大。本發(fā)明中配制的母液為1000ml，可在滿足測(cè)試用液需求的同時(shí)，用于潤(rùn)洗測(cè)試過(guò)程中量取溶液體積的玻璃儀器，可以減少實(shí)驗(yàn)誤差并提高測(cè)試的可重復(fù)性和可信度。本發(fā)明采用0、10、20、30和40ml的母液配制標(biāo)準(zhǔn)溶液，所建立標(biāo)準(zhǔn)曲線覆蓋了測(cè)試范圍，同時(shí)標(biāo)準(zhǔn)曲線的相關(guān)系數(shù)r2大于0.99，表明標(biāo)準(zhǔn)曲線具有良好的線性關(guān)系，適合于定量分析。雖然鉻鞣劑溶液在420nm左右和580nm左右處均有兩個(gè)特征吸收峰，然而由于鉻鞣劑組成和結(jié)構(gòu)的差異，這兩個(gè)特征吸收峰的吸收波長(zhǎng)和相對(duì)吸光度會(huì)有所差異，在測(cè)試前使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)掃描母液，確定特征吸收峰和對(duì)應(yīng)的吸收波長(zhǎng)，選擇相對(duì)吸光度較高的特征吸收波長(zhǎng)，這樣可以提高測(cè)試靈敏度，減少誤差，有針對(duì)性的對(duì)不同鉻鞣劑的有效成分含量進(jìn)行測(cè)定。
在本發(fā)明提供的一種測(cè)定鉻鞣劑有效成分含量的方法中，皮粉用量為10g，鞣制時(shí)母液用量為100ml，可以獲得相對(duì)較多的濾液用于測(cè)試，同時(shí)濾液吸光度也在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。采用40℃鞣制，并調(diào)節(jié)鞣制體系ph為4.0，均是模擬常規(guī)鉻鞣過(guò)程中的相關(guān)參數(shù)設(shè)置的，與鉻鞣劑的實(shí)際使用情況相似，測(cè)試結(jié)果貼近實(shí)際生產(chǎn)，同時(shí)此條件下鞣制效果好，鉻鞣劑中的鉻既可以充分與皮膠原結(jié)合，又不會(huì)產(chǎn)生沉淀。在空白樣中加入相同體積的調(diào)節(jié)實(shí)驗(yàn)樣ph所用鹽酸或氫氧化鈉溶液，可以消除加入鉻鞣劑以外的其他物質(zhì)對(duì)濾液吸光度的影響，提高測(cè)試準(zhǔn)確性和可重復(fù)性。通過(guò)測(cè)試實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度，并進(jìn)行平行試驗(yàn)，平行試驗(yàn)結(jié)果之差小于1.00%，表明本方法穩(wěn)定性好、重現(xiàn)性高。
此外，本發(fā)明還具有以下優(yōu)點(diǎn)：
第一，本發(fā)明提供的方法操作簡(jiǎn)單，所用儀器、設(shè)備和試劑均為常規(guī)皮化材料生產(chǎn)廠家實(shí)驗(yàn)室或市面上的常規(guī)物品，可操作性強(qiáng)；
第二，本發(fā)明提供的方法測(cè)試結(jié)果重現(xiàn)性好，結(jié)果誤差小，測(cè)試穩(wěn)定性強(qiáng)，同時(shí)測(cè)試速度快，所需樣品少，可作為常規(guī)檢驗(yàn)和出廠檢驗(yàn)的測(cè)試方法。
具體實(shí)施方式
下面給出實(shí)施例以對(duì)本發(fā)明作更詳細(xì)的說(shuō)明，有必要指出的是以下實(shí)施例不能理解為對(duì)本發(fā)明保護(hù)范圍的限制，該領(lǐng)域的技術(shù)熟練人員根據(jù)上述本發(fā)明內(nèi)容對(duì)本發(fā)明做出的一些非本質(zhì)的改進(jìn)和調(diào)整仍屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。
實(shí)施例1
稱(chēng)取一定量的常規(guī)鉻鞣劑，溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶并定容至刻度線，配制鉻鞣劑濃度為6g/l的母液；分別量取0、10、20、30和40ml母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度，制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)母液進(jìn)行掃描，在423nm特征吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率k和相關(guān)系數(shù)r2，r2值為0.9982；實(shí)驗(yàn)樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入母液100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與母液充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，使用濃度為1mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)鞣液ph為4.0，并記錄氫氧化鈉溶液用量，隨后繼續(xù)振蕩60min；空白樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入蒸餾水100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與蒸餾水充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，加入與實(shí)驗(yàn)樣相同體積的氫氧化鈉溶液，隨后繼續(xù)振蕩60min；振蕩結(jié)束后先采用尼龍濾布過(guò)濾，再利用濾紙過(guò)濾，收集實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液，并在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的波長(zhǎng)處，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度值a實(shí)和a空；按照有效成分含量（%）=[k×c-(a實(shí)-a空)]/(k×c)×100%，計(jì)算鉻鞣劑的有效成分。
實(shí)施例2
稱(chēng)取一定量的蒙囿鉻鞣劑，溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶并定容至刻度線，配制鉻鞣劑濃度為10g/l的母液；分別量取0、10、20、30和40ml母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度，制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)母液進(jìn)行掃描，在585nm特征吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率k和相關(guān)系數(shù)r2，r2值為0.9968；實(shí)驗(yàn)樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉250ml碘量瓶中，加入母液100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與母液充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，使用濃度為1mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)鞣液ph為4.0，并記錄氫氧化鈉溶液用量，隨后繼續(xù)振蕩60min；空白樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入蒸餾水100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與蒸餾水充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，加入與實(shí)驗(yàn)樣相同體積的氫氧化鈉溶液，隨后繼續(xù)振蕩60min；振蕩結(jié)束后先采用尼龍濾布過(guò)濾，再利用濾紙過(guò)濾，收集實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液，并在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的波長(zhǎng)處，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度值a實(shí)和a空；按照有效成分含量（%）=[k×c-(a實(shí)-a空)]/(k×c)×100%，計(jì)算鉻鞣劑的有效成分。
實(shí)施例3
稱(chēng)取一定量的不浸酸鉻鞣劑，溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶并定容至刻度線，配制鉻鞣劑濃度為8g/l的母液；分別量取0、10、20、30和40ml母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度，制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)母液進(jìn)行掃描，在588nm特征吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率k和相關(guān)系數(shù)r2，r2值為0.9956；實(shí)驗(yàn)樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入母液100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與母液充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，使用濃度為1mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)鞣液ph為4.0，并記錄氫氧化鈉溶液用量，隨后繼續(xù)振蕩60min；空白樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入蒸餾水100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與蒸餾水充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，加入與實(shí)驗(yàn)樣相同體積的氫氧化鈉溶液，隨后繼續(xù)振蕩60min；振蕩結(jié)束后先采用尼龍濾布過(guò)濾，再利用濾紙過(guò)濾，收集實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液，并在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的波長(zhǎng)處，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度值a實(shí)和a空；按照有效成分含量（%）=[k×c-(a實(shí)-a空)]/(k×c)×100%，計(jì)算鉻鞣劑的有效成分。
實(shí)施例4
稱(chēng)取一定量的自堿化鉻鞣劑，溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶并定容至刻度線，配制鉻鞣劑濃度為2g/l的母液；分別量取0、10、20、30和40ml母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度，制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)母液進(jìn)行掃描，在420nm特征吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率k和相關(guān)系數(shù)r2，r2值為0.9934；實(shí)驗(yàn)樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入母液100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與母液充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，使用濃度為1mol/l的鹽酸溶液調(diào)節(jié)鞣液ph為4.0，并記錄鹽酸溶液用量，隨后繼續(xù)振蕩60min；空白樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入蒸餾水100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與蒸餾水充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，加入與實(shí)驗(yàn)樣相同體積的鹽酸溶液，隨后繼續(xù)振蕩60min；振蕩結(jié)束后先采用尼龍濾布過(guò)濾，再利用濾紙過(guò)濾，收集實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液，并在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的波長(zhǎng)處，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度值a實(shí)和a空；按照有效成分含量（%）=[k×c-(a實(shí)-a空)]/(k×c)×100%，計(jì)算鉻鞣劑的有效成分。
實(shí)施例5
稱(chēng)取一定量的高吸收鉻鞣劑，溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶并定容至刻度線，配制鉻鞣劑濃度為5g/l的母液；分別量取0、10、20、30和40ml母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度，制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)母液進(jìn)行掃描，在584nm特征吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率k和相關(guān)系數(shù)r2，r2值為0.9938；實(shí)驗(yàn)樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入母液100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與母液充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，使用濃度為1mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)鞣液ph為4.0，并記錄氫氧化鈉溶液用量，隨后繼續(xù)振蕩60min；空白樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入蒸餾水100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與蒸餾水充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，加入與實(shí)驗(yàn)樣相同體積的氫氧化鈉溶液，隨后繼續(xù)振蕩60min；振蕩結(jié)束后先采用尼龍濾布過(guò)濾，再利用濾紙過(guò)濾，收集實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液，并在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的波長(zhǎng)處，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度值a實(shí)和a空；按照有效成分含量（%）=[k×c-(a實(shí)-a空)]/(k×c)×100%，計(jì)算鉻鞣劑的有效成分。
實(shí)施例6
稱(chēng)取一定量的不浸酸鉻鞣劑，溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶并定容至刻度線，配制鉻鞣劑濃度為4g/l的母液；分別量取0、10、20、30和40ml母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度，制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)母液進(jìn)行掃描，在588nm特征吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率k和相關(guān)系數(shù)r2，r2值為0.9989；實(shí)驗(yàn)樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入母液100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與母液充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，使用濃度為1mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)鞣液ph為4.0，并記錄氫氧化鈉溶液用量，隨后繼續(xù)振蕩60min；空白樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入蒸餾水100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與蒸餾水充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，加入與實(shí)驗(yàn)樣相同體積的氫氧化鈉溶液，隨后繼續(xù)振蕩60min；振蕩結(jié)束后先采用尼龍濾布過(guò)濾，再利用濾紙過(guò)濾，收集實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液，并在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的波長(zhǎng)處，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度值a實(shí)和a空；按照有效成分含量（%）=[k×c-(a實(shí)-a空)]/(k×c)×100%，計(jì)算鉻鞣劑的有效成分。
實(shí)施例7
稱(chēng)取一定量的高吸收鉻鞣劑，溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶并定容至刻度線，配制鉻鞣劑濃度為6g/l的母液；分別量取0、10、20、30和40ml母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度，制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)母液進(jìn)行掃描，在580nm特征吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率k和相關(guān)系數(shù)r2，r2值為0.9971；實(shí)驗(yàn)樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入母液100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與母液充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，使用濃度為1mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)鞣液ph為4.0，并記錄氫氧化鈉溶液用量，隨后繼續(xù)振蕩60min；空白樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入蒸餾水100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與蒸餾水充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，加入與實(shí)驗(yàn)樣相同體積的氫氧化鈉溶液，隨后繼續(xù)振蕩60min；振蕩結(jié)束后先采用尼龍濾布過(guò)濾，再利用濾紙過(guò)濾，收集實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液，并在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的波長(zhǎng)處，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度值a實(shí)和a空；按照有效成分含量（%）=[k×c-(a實(shí)-a空)]/(k×c)×100%，計(jì)算鉻鞣劑的有效成分。
實(shí)施例8
稱(chēng)取一定量的不浸酸鉻鞣劑，溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶并定容至刻度線，配制鉻鞣劑濃度為6g/l的母液；分別量取0、10、20、30和40ml母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度，制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)母液進(jìn)行掃描，在587nm特征吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率k和相關(guān)系數(shù)r2，r2值為0.9982；實(shí)驗(yàn)樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入母液100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與母液充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，使用濃度為1mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)鞣液ph為4.0，并記錄氫氧化鈉溶液用量，隨后繼續(xù)振蕩60min；空白樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入蒸餾水100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與蒸餾水充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，加入與實(shí)驗(yàn)樣相同體積的氫氧化鈉溶液，隨后繼續(xù)振蕩60min；振蕩結(jié)束后先采用尼龍濾布過(guò)濾，再利用濾紙過(guò)濾，收集實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液，并在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的波長(zhǎng)處，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度值a實(shí)和a空；按照有效成分含量（%）=[k×c-(a實(shí)-a空)]/(k×c)×100%，計(jì)算鉻鞣劑的有效成分。
實(shí)施例9
稱(chēng)取一定量的常規(guī)鉻鞣劑，溶解后轉(zhuǎn)移至1000ml容量瓶并定容至刻度線，配制鉻鞣劑濃度為7g/l的母液；分別量取0、10、20、30和40ml母液于100ml容量瓶，并用蒸餾水定容至刻度，制得不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液；使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)對(duì)母液進(jìn)行掃描，在425nm特征吸收波長(zhǎng)處，分別測(cè)定不同濃度標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度值，并以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)曲線斜率k和相關(guān)系數(shù)r2，r2值為0.9921；實(shí)驗(yàn)樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入母液100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與母液充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，使用濃度為1mol/l的氫氧化鈉溶液調(diào)節(jié)鞣液ph為4.0，并記錄氫氧化鈉溶液用量，隨后繼續(xù)振蕩60min；空白樣準(zhǔn)備：稱(chēng)取10.00g鉻皮粉于250ml碘量瓶中，加入蒸餾水100ml后蓋緊瓶塞，用手振蕩使皮粉與蒸餾水充分接觸，隨后將碘量瓶放入至40℃的水浴振蕩器中振蕩5min后，加入與實(shí)驗(yàn)樣相同體積的氫氧化鈉溶液，隨后繼續(xù)振蕩60min；振蕩結(jié)束后先采用尼龍濾布過(guò)濾，再利用濾紙過(guò)濾，收集實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液，并在測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)曲線的波長(zhǎng)處，使用紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定實(shí)驗(yàn)樣和空白樣濾液的吸光度值a實(shí)和a空；按照有效成分含量（%）=[k×c-(a實(shí)-a空)]/(k×c)×100%，計(jì)算鉻鞣劑的有效成分。
為了本發(fā)明提供方法的可重現(xiàn)性和穩(wěn)定性，實(shí)施例中平行試驗(yàn)結(jié)果之差也列于表1。