一種提高土貝母中有效成分含量及抗氧化活性的處理方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥用植物產(chǎn)地加工技術領域，具體涉及一種提高土貝母中有效成分含 量及抗氧化活性的處理方法。
【背景技術】
[0002] 土貝母為萌蘆科Cucurbitaceae植物土貝母Bolbostemma paniculatum (Maxim.) Franquet的干燥塊莖，含有糖類、皂苷和蒽醌等成分，具有顯著的抗病毒、抗腫瘤等活性。土 貝母肉質(zhì)多汁，目前產(chǎn)區(qū)多使用以下4種方法對其進行前處理，一種按照藥典所記載的采 挖后"洗凈，掰開，煮至無白心，取出，曬干"；第二種為"洗凈，掰開，放蒸籠中蒸透，取出，曬 干。"除此之外，將新鮮土貝母鮮品置烘箱內(nèi)烘烤至干燥或置于通風干燥處自然晾干也是常 用的前處理方法。土貝母鮮品在加工之前，其生理作用依然活躍，塊莖中的氧化酶、水解酶 等并未喪失活性，會影響其中有效成分的含量，但經(jīng)過以上處理后，其相關酶活性喪失，有 效成分含量有所降低，大大影響藥材質(zhì)量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為了克服上述現(xiàn)有技術的不足，本發(fā)明的目的是提供一種提高土貝母中有效成分 含量及抗氧化活性的處理方法，在不改變藥用植物原產(chǎn)地、種植方式及炮制加工等方法的 情況下，在傳統(tǒng)的蒸、煮、烘干、陰干等產(chǎn)地加工之前對土貝母新鮮塊莖增加 UV-B輻射，以 提高其還原糖、土貝母苷甲、大黃素的含量及其抗氧化活性，為土貝母產(chǎn)地加工過程中提高 藥材質(zhì)量提供方法，具有方便易行、效果良好、有效避免產(chǎn)地限制等特點。
[0004] 為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術方案是： 一種提高土貝母中有效成分含量及抗氧化活性的處理方法，包括以下步驟： 1) 將土貝母新鮮塊莖洗凈、分瓣，晾去外表水分； 2) 采用0?100 kj/m2劑量紫外線（UV-B)輻射，依輻射劑量計算公式計算連續(xù)照射時 間，照射0?400 min ; 3) 采用0. 13 mm厚度的醋酸纖維素膜濾去紫外燈（UV-B)中的少量短波紫外線（UV-C); 4) 處理結(jié)束后放置于室溫下（18?25°C)，遮光保存0?20天后取出，依照藥典方法 煮至無白心，0?100°c干燥； 5) 進行還原糖含量、土貝母苷甲含量、大黃素含量及其抗氧化活性的抽樣測定。
[0005] 所述的紫外線（UV-B)輻射劑量為20 kj/m2或40 kj/m2或80 kj/m2或100 kj/m2。
[0006] 所述的照射時間為72 min或142 min或282 min或353 min。
[0007] 所述的遮光保存時間為0天或5天或10天或15天或20天，保存溫度為20°C。
[0008] 所述的干燥溫度為80°C。
[0009] 與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明的有益效果是： 經(jīng)本發(fā)明的處理方法處理后，采用高劑量（100 kj/m2) UV-B輻射的土貝母與未處理土 貝母相比，土貝母中還原糖含量升高60. 17%，大黃素含量升高209. 60% (p〈0. 001)，土貝母 苷甲含量增加15. 02?40. 04% (ρ〈0· 01)。采用1，6-雙（二苯基膦基）己烷（DPPH)法、鐵 氰化鉀還原法考察了土貝母乙醇提取物經(jīng)紫外線（UV-B)輻射后其還原能力及清除DPPH自 由基能力，處理過土貝母的抗氧化活性高于未處理土貝母，與傳統(tǒng)處理方法相比，有效增加 了還原糖、土貝母苷甲、大黃素的含量及其抗氧化活性，提高了藥材質(zhì)量，為土貝母的產(chǎn)地 加工提供了有效的技術方法，具有可實施性強，方便易行、效果良好、有效避免產(chǎn)地限制的 特點。
【具體實施方式】
[0010] 以下結(jié)合具體實施對本發(fā)明作進一步的詳細說明； 根據(jù)實驗發(fā)現(xiàn)，100 kj/m2的紫外輻射對土貝母塊莖中有效成分及其抗氧化活性的影 響最大，因此本【具體實施方式】以100 kj/m2的紫外輻射為實施例作以下描述； 實施例1 一種提高土貝母中有效成分含量及抗氧化活性的處理方法，包括以下步驟： 1) 將土貝母新鮮塊莖洗凈、分瓣，晾去外表水分； 2) 采用100 kj/m2劑量紫外線（UV-B)輻射；根據(jù)輻射劑量計算公式連續(xù)照射353 min ; 3) 采用0. 13 mm厚度的醋酸纖維素膜濾去紫外（UV-B)燈中的少量短波紫外線（UV-C); 4) 處理結(jié)束后放置于20°C下，不經(jīng)過儲存，依照藥典方法煮至無白心，80°C干燥。
[0011] 5)進行還原糖含量、土貝母苷甲含量、大黃素含量及其抗氧化活性的測定。
[0012] ①還原糖含量測定 參照《植物生理學實驗指導》（鄒奇，2001)中還原糖含量測定方法，對土貝母樣品中的 還原糖含量進行測定。以吸光度為縱坐標，葡萄糖質(zhì)量為橫坐標，繪制標準曲線，得到線性 回歸方程：y=〇. 2076X-0. 0002, r=0. 9995。
[0013] ②土貝母苷甲含量測定 制備2 mg/mL 土貝母苷甲的甲醇對照品溶液。取土貝母藥材粉末(過三號篩）約I g， 75%乙醇水浴回流提取2次，每次60 min，制備供試品溶液。色譜條件：流動相：乙腈-0. 1% 磷酸水（30: 70)，波長：210 nm，流速：0.8 mL/min，進樣量：10μ1。
[0014] ③大黃素含量測定 制備0.1 mg/mL大黃素的甲醇對照品溶液。精密稱定藥材粉末(過三號篩)約I g，95% 乙醇超聲提取2次，每次30 min，制備供試品溶液。色譜條件：流動相：甲醇-0.1%磷酸水 (75:25)，波長：254 nm，流速：1 mL/min，進樣量：10μ1。
[0015] ④抗氧化活性測定 (1)清除1，6-雙（二苯基膦基）己烷（DPPH)自由基能力 取I. 0 ml待測溶液與3. 0 mLl，6-雙（二苯基膦基）己烷（DPPH)乙醇溶液（0· I mM， 0.4 mg/mL)依次加入具塞試管中，混合均勻，室溫靜置20 min，在517 nm波長處測定吸光 值，以維生素 C (VC)為陽性對照。DPPH清除率（%) = [1- (As - Ab)/A0]/100,其中As為樣 品吸光值，Ab為樣品本底吸光值，AO為未輻射組陰性對照值。
[0016] (2)還原能力的測定 取I mL待測液，分別加入2. 5 mL磷酸鹽緩沖液（0. 2 M，pH 6. 6)及2. 5 mLl% (w/v)的 鐵氰化鉀溶液，混合均勻。混合物在50°C水浴中保持20 min，然后加入2. 5 mL10%(w/v)的 TCA終止反應，3000 r/min離心10 min，取上清液2. O mL，依次加入2. O mL蒸餾水和0. 5 mLO. l%(w/v)的三氯化鐵（FeC13)溶液，混勻后于700 nm處測