專利名稱：腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本實(shí)用新型屬于病原生物學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種腸道病毒71型抗原檢測(cè)試紙條。
背景技術(shù)：
手足口病是全球性傳染病，近年來已經(jīng)成為嚴(yán)重威脅兒童健康的傳染病之一。其以發(fā)熱和手、足、咽等部位的皮疹或皰疹為主要特征。少數(shù)患者可并發(fā)無菌性腦膜炎、腦炎、急性弛緩性麻痹、呼吸道感染和心肌炎等，個(gè)別重癥患兒病情進(jìn)展快，易發(fā)生死亡，重癥患兒病死率在10%-25%。手足口病主要由腸道病毒屬的柯薩奇病毒(Cox,A組16、4、5、7、9、10型,B組2、5、 13型)、埃可病毒(Echo)和腸道病毒71型(EV71)引起，其中以EV71及CoxA16型最常見。而EV71感染引起重癥病例的比例較大。腸道病毒呈球形,呈二十面體立體外觀,無包膜,直徑27 30nm。衣殼由60個(gè)相同殼粒組成，它們排列為12個(gè)五聚體。每個(gè)殼粒由來自一個(gè)原始?xì)ち５鞍譜PO的4種多肽(VPU VP2、VP3、VP4)組成。VP1、VP2、VP3暴露于外面，帶有中和抗體的特異性抗原位點(diǎn)，VP4位于衣殼內(nèi)部。腸道病毒基因組為單股正鏈RNA，長(zhǎng)7.2 8. 5kb?；蚪M兩端為保守的非編碼區(qū)，中間為連續(xù)的開放讀碼框架，編碼一個(gè)2100 2400氨基酸的多聚蛋白。功能蛋白至少包括RNA聚合酶和兩種其他的蛋白酶。此外，5‘端共價(jià)結(jié)合一個(gè)約23氨基酸的基本蛋白VPg,與病毒RNA的合成和裝配有關(guān)；3端帶有約50 nt的polyA尾,與病毒的感染性有關(guān)。VPl蛋白是病毒中和決定因子，直接決定病毒的抗原性，具有與病毒血清型完全對(duì)應(yīng)的遺傳多樣性及較大的變異性，為EV71基因分型的最重要對(duì)象，VPl蛋白是最適合建立ELISA方法的抗原。由于針對(duì)EV71引起疾病的疫苗、特異性治療藥物等防控手段尚在研制中，因此，對(duì)手足口病病毒尤其是EV71引起的重癥患病兒童的早期診斷，可以更經(jīng)濟(jì)準(zhǔn)確的控制該病流行及重癥并發(fā)癥的出現(xiàn)，從而保證兒童的健康。中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院醫(yī)學(xué)生物學(xué)研究所公開了“EV71型病毒抗原的檢測(cè)方法”專利(申請(qǐng)?zhí)?00910094972. 0)，該專利是采用酶聯(lián)免疫的方法來檢測(cè)EV71抗原。北京科興生物制品有限公司公開了“EV71病毒中和表位抗原檢測(cè)試劑盒或試劑及其制備方法”專利(申請(qǐng)?zhí)?00910131382. 0)，該專利提供了一種采用具有光譜性活性的HD6單克隆抗體對(duì)EV71病毒抗原進(jìn)行定量檢測(cè)的方法。以上均是采用酶聯(lián)免疫的方法來檢測(cè)EV71抗原，適用于臨床診斷，由于檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)且需要借助專業(yè)儀器設(shè)備，不適合作早期大規(guī)模篩查用。

實(shí)用新型內(nèi)容本實(shí)用新型克服了現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供提供一種檢測(cè)腸道病毒71型的快速檢測(cè)試紙條，用于檢測(cè)腸道病毒71型的輔助診斷。本實(shí)用新型通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)一種腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條，包括底襯、金標(biāo)墊、檢測(cè)線和質(zhì)控線，所述底襯上設(shè)置有一層吸膜，所述檢測(cè)線和質(zhì)控線設(shè)置在層吸膜上，所述層吸膜的一邊設(shè)置有金標(biāo)墊，所述層吸膜的另一邊設(shè)置有吸水紙，所述金標(biāo)墊上粘貼有一樣品墊。所述金標(biāo)墊為含有膠體金標(biāo)記單克隆抗體的玻璃纖維膜一端，所述單克隆抗體為腸道EV71型VPl特異性抗原SP70的單克隆抗體；所述膠體金為40nm的膠體金。所述檢測(cè)線為包被另一株單克隆抗體的硝酸纖維膜一端，所述單克隆抗體為腸道EV71型VPl特異性抗原SP55的單克隆抗體；所述質(zhì)控線為包被抗鼠IgG的硝酸纖維膜另一端。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本實(shí)用新型的有益效果是本實(shí)用新型的腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條，具有操作簡(jiǎn)單、快捷且無需應(yīng)用專業(yè)儀器設(shè)備的優(yōu)點(diǎn)，適于腸道病毒71型的早期篩查和臨床輔助診斷。
為了更清楚的說明本申請(qǐng)文件實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)中的技術(shù)方案，以下對(duì)實(shí)施例或現(xiàn)有技術(shù)的描述中所需要使用的附圖作簡(jiǎn)單的介紹。圖I示出了根據(jù)本實(shí)用新型一個(gè)實(shí)施例的腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條結(jié)構(gòu)示意圖。I、底襯；2、樣品墊；3、金標(biāo)墊；4、層吸膜；5、吸水紙；6、檢測(cè)線；7、質(zhì)控線。
具體實(shí)施方式
下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型作進(jìn)一步地詳細(xì)說明，但本實(shí)用新型的實(shí)施方式不限于此。圖I示出了根據(jù)本實(shí)用新型一個(gè)實(shí)施例的腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條結(jié)構(gòu)示意圖。參考圖I所示一種腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條的一個(gè)實(shí)施例，包括1)金標(biāo)墊3，所述金標(biāo)墊3為含有膠體金標(biāo)記腸道EV71型SP70特異性抗原VPl的單克隆抗體的玻璃纖維膜一端，膠體金為40nm的膠體金；2)檢測(cè)線6，所述檢測(cè)線6為包被腸道EV71型SP55特異性抗原VPl的單克隆抗體的硝酸纖維膜一端；3)質(zhì)控線7，所述質(zhì)控線7為包被抗鼠IgG的硝酸纖維膜另一端。參考圖I所示，一種腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條，還包括底襯1，所述底襯I上設(shè)置有一層吸膜4，所述檢測(cè)線6和質(zhì)控線7設(shè)置在所述層吸膜4上，所述層吸膜4的一邊設(shè)置有金標(biāo)墊3，所述層吸膜4的另一邊設(shè)置有吸水紙5，所述金標(biāo)墊3上粘貼有一樣品墊2。上面所述的實(shí)施例僅僅是對(duì)本發(fā)明的優(yōu)選實(shí)施方式進(jìn)行描述，并非對(duì)本發(fā)明的范圍進(jìn)行限定，在不脫離本發(fā)明設(shè)計(jì)精神前提下，本領(lǐng)域普通工程技術(shù)人員對(duì)本發(fā)明技術(shù)方案做出的各種變形和改進(jìn)，均應(yīng)落入本發(fā)明的權(quán)利要求書確定的保護(hù)范圍內(nèi)。
權(quán)利要求1.一種腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條，包括底襯、金標(biāo)墊、檢測(cè)線和質(zhì)控線，其特征在于，所述底襯上設(shè)置有一層吸膜，所述檢測(cè)線和質(zhì)控線設(shè)置在層吸膜上，所述層吸膜的一邊設(shè)置有金標(biāo)墊，所述層吸膜的另一邊設(shè)置有吸水紙，所述金標(biāo)墊上粘貼有一樣品墊。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述金標(biāo)墊為含有膠體金標(biāo)記單克隆抗體的玻璃纖維膜一端，所述單克隆抗體為腸道EV71型VPl特異性抗原SP70的單克隆抗體,所述膠體金為40nm的膠體金。
3.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條，其特征在于，所述檢測(cè)線為包被單克隆抗體的硝酸纖維膜一端，所述單克隆抗體為腸道EV71型VPl特異性抗原SP55的單克隆抗體；所述質(zhì)控線為包被抗鼠IgG的硝酸纖維膜另一端。
專利摘要本實(shí)用新型公開了一種腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條，包括底襯、金標(biāo)墊、檢測(cè)線和質(zhì)控線，所述底襯上設(shè)置有一層吸膜，所述檢測(cè)線和質(zhì)控線設(shè)置在層吸膜上，所述層吸膜的一邊設(shè)置有金標(biāo)墊，所述層吸膜的另一邊設(shè)置有吸水紙，所述金標(biāo)墊上粘貼有一樣品墊。本實(shí)用新型的腸道病毒71型膠體金檢測(cè)試紙條操作簡(jiǎn)單、快捷且無需應(yīng)用專業(yè)儀器設(shè)備，適于腸道病毒71型的早期篩查和臨床輔助診斷。
文檔編號(hào)G01N33/577GK202562926SQ201220214170
公開日2012年11月28日 申請(qǐng)日期2012年5月14日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月14日
發(fā)明者毛金武, 柳克華, 周詠武 申請(qǐng)人:湖南康潤(rùn)藥業(yè)有限公司