化合物、其分離方法、合成方法及用圖
【專利摘要】本發(fā)明涉及新化合物、其分離方法、合成方法及用途，經(jīng)活性實(shí)驗(yàn)證明該化合物具有HMG-CoA還原酶抑制作用；另外還涉及其衍生物。
【專利說(shuō)明】
化合物、其分離方法、合成方法及用途
技術(shù)領(lǐng)域
[0001 ] 本發(fā)明涉及從紅曲中分離出的新化合物、分離方法、合成方法及用途，經(jīng)活性實(shí)驗(yàn) 證明該化合物具有HMG-CoA還原酶抑制作用；以及另外的與其結(jié)構(gòu)相似的化合物及其合成 方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 我國(guó)的中醫(yī)藥具有悠久的使用和研究歷史，紅曲（Monascus-fermented rice)是 以大米為原料，經(jīng)紅曲霉（Monascus)發(fā)酵制成的一種紫紅色米曲，紅曲在我國(guó)的使用可追 溯到漢代。上世紀(jì)70年代，日本Endo教授首次從紅色紅曲霉（Monascus ruber)中分離出 生理活性物質(zhì)莫納克林K(m〇nac〇lin K)以來(lái)，眾多國(guó)內(nèi)外學(xué)者在紅曲霉代謝產(chǎn)物中不斷 發(fā)現(xiàn)生理活性物質(zhì)，包括monacolin類化合物，紅曲色素，降壓成分GABA及抗氧化成分 dimerumic acid等等。紅曲中仍有較大的研究潛力和開(kāi)發(fā)空間。
[0003] 血脂康（膠囊或片）是
【申請(qǐng)人】研制的上市國(guó)產(chǎn)調(diào)脂中藥紅曲制劑，富含他汀等多 種活性成分，相比已有的調(diào)脂藥物化藥，不良反應(yīng)少。適應(yīng)癥為高脂血癥及動(dòng)脈粥樣硬化引 起的心腦血管疾病的治療。除濕祛痰，活血化淤，健脾消食。用于脾虛痰淤阻滯癥的氣短、 乏力、頭暈、頭痛、胸悶、腹脹、食少納呆等；高脂血癥；也可用于由高脂血癥及動(dòng)脈粥樣硬 化引起的心腦血管疾病的輔助治療。
[0004] 現(xiàn)有技術(shù)經(jīng)過(guò)對(duì)于血脂康的研究，從其中分離發(fā)現(xiàn)了以下成分：
[0005] 他汀成分
[0006] 血脂康中富含系列天然他汀類物質(zhì)。
[0007] 異黃酮成分
[0008] 血脂康中還含有異黃酮、留醇類物質(zhì)、20余種氨基酸、不飽和脂肪酸及多種微量元 素。異黃酮成分主要包括染料木素、大豆苷元、黃豆黃素，均屬于大豆異黃酮。
[0009] 甾醇成分
[0010] 植物留醇是一種類似于環(huán)狀醇結(jié)構(gòu)的物質(zhì)，廣泛分布于自然界，代表了植物代謝 的終產(chǎn)物。
[0011] 血脂康中的留醇包括麥角留醇、豆留醇及谷留醇等。
[0012] 氨基酸成分
[0013] 血脂康中具有甘氨酸、脯氨酸、絲氨酸、天門(mén)冬氨酸、谷氨酸、精氨酸、組氨酸、?；?酸、y-氨基丁酸（GABA)等20余種氨基酸成分。
[0014] 不飽和脂肪酸成分
[0015] 血脂康中含大量的脂肪酸成分。采用氣相色譜與質(zhì)譜聯(lián)用技術(shù)對(duì)血脂康中脂肪酸 類成分的甲酯化衍生物進(jìn)行研究，鑒定出14種脂肪酸類成分，其中棕櫚酸、亞油酸及油酸， 含量豐富。
[0016] 微量元素成分
[0017] 血脂康中主要含有鎂、硒等微量元素，其中鎂的含量相對(duì)較高。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0018] 本發(fā)明的一個(gè)目的是提供下式（I)的化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消 旋物、代謝產(chǎn)物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物：
[0019]
式⑴
[0020] 札選自H、C「C6烷基、鹵代C fC6烷基、（CH 2) i 60H、C3-C7環(huán)烷基、鹵代C 3-(：7環(huán)烷基、 Ci-Q烷氧基、鹵代C 氧基、C「C6烷硫基、鹵代C 烷硫基、鹵素、硝基、氨基和氰基；
[0021] R2選自H、C「C6烷基、鹵代C「C6烷基、（CH 2) i 60R6、C3-C7環(huán)烷基、鹵代(：3-(： 7環(huán)烷基、 Ci-Q烷氧基、鹵代C 氧基、C「C6烷硫基、鹵代C 烷硫基、鹵素、硝基、氨基和氰基；
[0022] R3選自 H、C「C6烷基；
[0023] 心和 R5各自獨(dú)立地選自：H、-C0R 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0024] 其中，R7選自C 烷基、鹵代C 烷基，R s選自C 烷基、任意取代的C ^(^烷 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn獨(dú)立地選自C「C 6烷基；
[0025] 其中，R6與上述對(duì)于1?4和R5的定義相同；
[0026] 其中，排除以下式（I)的化合物：&為（CH2)0H，R2S甲基，R 3、RjPR5為H。
[0027] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供制備本發(fā)明式（I)化合物的方法：
[0028]
[0029] 化合物（I)由式（II)化合物，在堿性條件下反應(yīng)制得，或在堿性條件下加入成酯 試劑反應(yīng)制得。式（II)中&、1? 2、和R4與上文在式（I)中的定義相同。
[0030] 堿性條件的pH范圍為7. 5-14,可選加入氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水、碳酸鈉等堿性 試劑或溶劑。成酯試劑可選甲醇、乙醇等低級(jí)醇；酸酐（醋酸酐、磺酸酐、三氟甲磺酸酐等）、 酰氯（甲苯磺酰氯）、氯硅烷（叔丁基二甲基氯硅烷）。
[0031] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供從紅曲或其提取物提取化合物5的方法，所述方法包 括下列步驟：
[0032]
[0033] 1)對(duì)于紅曲或其提取物使用乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇 水溶液）為溶劑進(jìn)行提??；
[0034] 2)對(duì)于步驟1)的乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇水溶液）提 取物進(jìn)行硅膠柱層析分離，用石油醚、乙酸乙酯及甲醇進(jìn)行梯度洗脫，得到乙酸乙脂洗脫部 分；
[0035] 3)對(duì)于步驟2)的乙酸乙脂洗脫部分進(jìn)行硅膠柱層析分離，用二氯甲烷-乙酸乙 脂-甲醇洗脫，將流分進(jìn)行分析、合并后，得到步驟3)5個(gè)流分；
[0036] 4)對(duì)于步驟3)的第2流分進(jìn)行C18柱層析分離，用乙腈-甲醇-水梯度洗脫，得 到82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脫部分；
[0037] 5)對(duì)于步驟4)的82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脫部分進(jìn)一步用二氯甲烷-甲 醇為流動(dòng)相進(jìn)行sephadex LH-20柱層析分離，將流分進(jìn)行分析、合并后，得到步驟5) 6個(gè)流 分；
[0038] 6)對(duì)于步驟5)的第3流分利用色譜純化，以乙腈-甲醇-水為流動(dòng)相，C18色譜 柱為固定相，得到化合物5。
[0039] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供包含本發(fā)明化合物的藥物組合物，所述藥物組合物包 括至少一種本發(fā)明化合物，和任選的藥學(xué)上可以接受的賦形劑。
[0040] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供本發(fā)明化合物或包含該化合物的藥物組合物在制備 藥物、特別是用于抑制HMG-CoA還原酶的藥物中的用途。相應(yīng)地，本發(fā)明提供一種預(yù)防和/ 或治療血脂異常、高血脂癥、或動(dòng)脈粥樣硬化患者的方法，包括給予需要治療的患者治療有 效量的至少一種本發(fā)明的化合物。血脂異常即一種或多種與血脂相關(guān)的人體指標(biāo)不在正常 數(shù)值范圍內(nèi)，包括總膽固醇升高、低密度脂蛋白膽固醇升高、載脂蛋白B升高、甘油三酯升 高等。本發(fā)明提供一種預(yù)防和/或治療高膽固醇血癥、混合型高脂血癥患者的方法，包括給 予需要治療的患者治療有效量的至少一種本發(fā)明的化合物。
[0041] 本發(fā)明提供一種在生活方式干預(yù)治療（如：調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)、控制體重、增加運(yùn)動(dòng)、 戒煙）效果不理想時(shí)，治療其總膽固醇升高、低密度脂蛋白膽固醇升高、載脂蛋白B升高、甘 油三酯升高等。
[0042] 本發(fā)明化合物的上述用途，可單獨(dú)使用，或與有效劑量的其他調(diào)脂藥物聯(lián)合使用。 其他調(diào)脂藥物包括：膽固醇合成抑制劑（他汀類或其鹽類，如洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他 汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、匹伐他汀等）、膽固醇吸收抑制劑（依折麥布等）、貝特類（諾 衡、力平脂環(huán)丙貝特、苯扎貝特、非諾貝特及吉非貝齊）、煙酸類藥物（煙酸、煙酸肌醇酯、東 脂平、戊四煙酯等），膽酸螯合劑藥物、苯氧芳酸類。
[0043] 本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽（例如醋酸鹽、丙二酸鹽、酒石酸鹽、琥珀 酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽等），可用于上述疾病的預(yù)防或治療。
【附圖說(shuō)明】
[0044] 圖1表示本發(fā)明的化合物5的1H-i COSY (-)(附圖1A)和HMBC相關(guān)信號(hào)（〇 ) (附圖1B)。
【具體實(shí)施方式】
[0045] 本發(fā)明涉及下式（I)的化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消旋物、代謝產(chǎn) 物、前藥、藥學(xué)上可接受的鹽或溶劑化物：
[0046]
式⑴
[0047] 札選自H、C「C6烷基、鹵代C fC6烷基、（CH 2)丨60H、C3-C7環(huán)烷基、鹵代C 3-(：7環(huán)烷基、 Ci-Q烷氧基、鹵代C 氧基、C「C6烷硫基、鹵代C 烷硫基、鹵素、硝基、氨基和氰基；
[0048] R2選自H、C「C6烷基、鹵代C「C6烷基、（CH 2) i 60R6、C3-C7環(huán)烷基、鹵代(：3-(： 7環(huán)烷基、 Ci-Q烷氧基、鹵代C 氧基、C「C6烷硫基、鹵代C 烷硫基、鹵素、硝基、氨基和氰基；
[0049] R3選自 H、C「C6烷基；
[0050] 心和 R5各自獨(dú)立地選自：H、-C0R 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0051] 其中，R7選自C 烷基、鹵代C 烷基，Rs選自C 烷基、任意取代的C ^(^烷 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn獨(dú)立地選自C「C 6烷基；
[0052] 其中，R6與上述對(duì)于R4和R5的定義相同；
[0053] 其中，排除以下式（I)的化合物：&為（CH2)0H，R2S甲基，R 3、RdPR5為H。
[0054] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中，札選自H、CfQ烷基、鹵 代烷基、（CH 2) i 30H、C3_C6環(huán)烷基、鹵代C 3_(：6環(huán)烷基、C「(：3烷氧基、鹵代C「(：3烷氧基、 烷硫基、鹵代C i-C3烷硫基、鹵素、硝基、氨基和氰基。
[0055] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中，&選自ICi-Q烷基、鹵代 CfC 3烷基、（01山30H、鹵素、硝基、氨基和氰基。
[0056] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中，札選自H、CfQ烷基、 (CH 2)! 30H〇
[0057] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中
[0058] R2選自 H、C fC3烷基、鹵代 C fC3烷基、（CH2) i 30R6、C3-C(^烷基、鹵代(：3_(： 6環(huán)烷基、 CfQ烷氧基、鹵代C fCjl氧基、C「C3烷硫基、鹵代C i-C3烷硫基、鹵素、硝基、氨基和氰基；
[0059] 其中，R6選自 H、-COR 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0060] 其中，R7選自C 烷基、鹵代C 烷基，R s選自C 烷基、任意取代的C ^(^烷 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn獨(dú)立地選自C「C 6烷基。
[0061] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中
[0062] R2選自 H、C fC3烷基、鹵代 C fC3烷基、（CH2): 30R6、C3-C(^烷基、鹵代(：3_(： 6環(huán)烷基、 烷氧基、鹵代C fCjl氧基、C「C3烷硫基、鹵代C i-C3烷硫基、鹵素、硝基、氨基和氰基；
[0063] 其中，R6選自：H、-C0R7、-S02Rs、-SiR 9R10R11;
[0064] 其中，R7選自C 烷基、鹵代C 烷基，R s選自C 烷基、任意取代的C fCjl 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn獨(dú)立地選自C「C 6烷基。
[0065] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中
[0066] R2選自 H、C「C3烷基、鹵代 C「C3烷基、（CH2): 30R6、C3-C(^烷基、鹵代(：3_(： 6環(huán)烷基、 CfQ烷氧基、鹵代C fCjl氧基、C「C3烷硫基、鹵代C i-C3烷硫基、鹵素、硝基、氨基和氰基；
[0067] 其中，R6選自：H、-C0R7、-S02Rs、-SiR 9R10R11;
[0068] 其中，R7選自_CH3, Rs選自-CF3、對(duì)甲苯基，R9、R1(]、R n獨(dú)立地選自甲基、叔丁基。
[0069] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式⑴的化合物，其中
[0070] R2選自H、C「C3烷基、鹵代C「C3烷基、（CH 2) i 30R6、鹵素、硝基、氨基和氰基；
[0071] 其中，R6選自 H、-C0R7、-S02Rs、-SiR9R 10R11;
[0072] 其中，R7選自C 烷基、鹵代C 烷基，R s選自C 烷基、任意取代的C ^(^烷 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn獨(dú)立地選自C「C 6烷基。
[0073] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中
[0074] R2選自H、C「C3烷基、鹵代C「C3烷基、（CH 2) i 30R6、鹵素、硝基、氨基和氰基；
[0075] 其中，R6選自：H、-C0R7、-S02Rs、-SiR 9R10R11;
[0076] 其中，R7選自C 烷基、鹵代C 烷基，R s選自C 烷基、任意取代的C fCjl 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn獨(dú)立地選自C「C 6烷基。
[0077] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中
[0078] R2選自H、C「C3烷基、鹵代C「C3烷基、（CH 2) i 30R6、鹵素、硝基、氨基和氰基；
[0079] 其中，R6選自：H、-C0R7、-S02Rs、-SiR 9R10R11;
[0080] 其中，R7選自_CH3, Rs選自_CF3、對(duì)甲苯基，R9、R1(]、R n獨(dú)立地選自甲基、叔丁基。
[0081] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中
[0082] R2選自 H、C「C3烷基、（CH 2)丨 30R6;
[0083] 其中，R6選自 H、-COR 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0084] 其中，R7選自C 烷基、鹵代C 烷基，R s選自C 烷基、任意取代的C ^(^烷 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn獨(dú)立地選自C「C 6烷基。
[0085] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中
[0086] R2選自 H、C「C3烷基、（CH 2)丨 30R6;
[0087] 其中，R6選自 H、-COR 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0088] 其中，R7選自C 烷基、鹵代C 烷基，R s選自C 烷基、任意取代的C fCjl 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn獨(dú)立地選自C「C 6烷基。
[0089] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中
[0090] R2選自 H、C「C3烷基、（CH 2)丨 30R6;
[0091] 其中，R6選自 H、-COR 7、-S02Rs、-Si R9R10R11;
[0092] 其中，R7選自_CH3, Rs選自-CF3、對(duì)甲苯基，R9、R1(]、R n獨(dú)立地選自甲基、叔丁基。
[0093] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中，R3選自ICfQ烷基。
[0094] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中，私為C 烷基。
[0095] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中
[0096] 心和 R5各自獨(dú)立地選自：H、-C0R 7、-S02Rs、-SiR9R10R 11;
[0097] 其中，R7選自C 烷基、鹵代C 烷基，R s選自C 烷基、任意取代的C fCjl 基、Q-Q。芳基、任意取代的C 6-(；。芳基，R9、R1Q、Rn獨(dú)立地選自C「C 6烷基。
[0098] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其中
[0099] 心和 R5各自獨(dú)立地選自：H、-C0R 7、-S02Rs、-SiR9R10R 11;
[0] 其中，R7選自-CH3, Rs選自-CF3、對(duì)甲苯基，R9、R1(]、R n獨(dú)立地選自甲基、叔丁基。
[0101] 在一種實(shí)施方式中，本發(fā)明涉及式（I)的化合物，其選自：
[0102]
[0103] 及其二乙酸酯、二對(duì)甲苯磺酯、二（三氟甲磺酸酯）、二（叔丁基二甲基硅醚），
[0104]
[0105] 及其三乙酸酯、三對(duì)甲苯磺酯、三（三氟甲磺酸酯）、三（叔丁基二甲基硅醚）。
[0106] 如本文所使用，術(shù)語(yǔ)"(^-(：6烷基"是指含有1-6個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴基。CfQ 烷基的例子包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基、叔丁基、正戊基和正己基。
[0107] 類似地，術(shù)語(yǔ)"Q-CJI基"是指含有1-3個(gè)碳原子的直鏈或支鏈烴基。C ^(^烷基 的例子包括但不限于甲基、乙基、正丙基、異丙基。
[0108] 術(shù)語(yǔ)"Q-Ce烷氧基"是指-〇_C烷基。
[0109] 術(shù)語(yǔ)"CfC6烷硫基"是指-S-C「C6烷基。
[0110] 類似地，" Ci-Cjl氧基"、" C i-C3烷硫基"具有類似的含義。
[0111] 術(shù)語(yǔ)"c3-c7環(huán)烷基"是指具有飽和環(huán)的3-7元單環(huán)系統(tǒng)的烴，c 3-c7環(huán)烷基可以為 環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基。
[0112] 類似地，術(shù)語(yǔ)"C3-C6環(huán)烷基"是指具有飽和環(huán)的3-6元單環(huán)系統(tǒng)的烴，C 3-C7環(huán)烷基 可以為環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基。
[0113] 術(shù)語(yǔ)"鹵素"是指氟、氯、溴或碘。
[0114] 術(shù)語(yǔ)"鹵代XX基團(tuán)"是指鹵素取代的XX基團(tuán)。例如，"鹵代心-^烷基"是指鹵素 取代的烷基。術(shù)語(yǔ)"鹵代C 3_C7環(huán)烷基"是指鹵素取代的-c3-c7環(huán)烷基。類似地，術(shù) 語(yǔ)鹵代Q-Cf；烷硫基、鹵代C i-Ce烷氧基、鹵代C 3-C6環(huán)烷基、鹵代C i-Qj烷氧基、鹵代C i-Qjl 硫基具有類似于以上的含義。
[0115] 術(shù)語(yǔ)"Q-Ci。芳基"是指6-10個(gè)碳原子的單價(jià)芳香烴基。芳基的例子包括但不限 于苯基、甲苯基、乙苯基、奈基等。
[0116] 如本文所使用，術(shù)語(yǔ)"式（I)化合物的藥學(xué)上可以接受的鹽"的例子是由形成藥學(xué) 上可以接受的陰離子（如甲苯磺酸根、甲磺酸根、蘋(píng)果酸根、醋酸根、檸檬酸根、丙二酸根、 酒石酸根、琥珀酸根、苯甲酸根、抗壞血酸根、a -酮戊二酸根和a -甘油磷酸根）的有機(jī)酸 形成的有機(jī)酸加合鹽。也可形成合適的無(wú)機(jī)鹽，包括但不限于鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽、碳酸 氫鹽和碳酸鹽、磷酸鹽、氫溴酸鹽、氫碘酸鹽等。
[0117] 藥學(xué)上可以接受的鹽可使用本領(lǐng)域熟知的標(biāo)準(zhǔn)程序獲得，例如，通過(guò)將足量的堿 性化合物和提供藥學(xué)上可以接受的陰離子的合適的酸反應(yīng)。
[0118] 本發(fā)明的紅曲或提取物可以為市售的紅曲（紅曲干粉、紅曲發(fā)酵產(chǎn)物、紅曲米）、 或紅曲提取物（如血脂康膠囊、血脂康片或其原料）。
[0119] 本發(fā)明所述紅曲提取物可通過(guò)如下方法（并不限于如下方法）制得：
[0120] 1)取紅曲1重量份，每次加入2 - 10體積份的50 - 100% (v/v)的乙醇或甲醇或 甲醇/乙醇水溶液，或乙酸乙酯（或其它有機(jī)溶劑）加熱回流1 一 3小時(shí)，提取2 - 3次；
[0121] 2)提取液過(guò)濾，合并濾液；可選地，回收溶劑，
[0122] 3)將步驟2)中得到的濾液濃縮成稠膏。
[0123] 如本文所使用，術(shù)語(yǔ)"溶劑化物"可以使用常見(jiàn)的有機(jī)溶劑形成：例如苯或甲苯的 烴溶劑，例如氯仿、二氯甲烷的氯化溶劑，例如甲醇、乙醇或異丙醇的醇溶劑，例如乙醚或四 氫呋喃的醚溶劑，或例如乙酸乙酯的酯溶劑。或者，式（I)化合物的溶劑化物可以使用水形 成，在這種情況下，它們?yōu)樗衔铩?br>[0124] 如本文所使用，術(shù)語(yǔ)"水合物"是指本發(fā)明的化合物或其鹽，其進(jìn)一步包含通過(guò)非 共價(jià)分子間力結(jié)合的化學(xué)計(jì)量的或非化學(xué)計(jì)量的量的水。
[0125] 如本文所使用，除非另外說(shuō)明，術(shù)語(yǔ)"前藥"是指可以在生物學(xué)條件（體外或體內(nèi)） 下水解、氧化或進(jìn)行其他反應(yīng)以提供本發(fā)明的化合物的衍生物。前藥僅在生物學(xué)條件下經(jīng) 過(guò)該反應(yīng)成為活性化合物，或者它們?cè)谒鼈儾环磻?yīng)的形式中具有活性。通?？梢允褂霉?的方法制備前藥，例如 lBurger's Medicinal Chemistry and Drug Discovery (1995) 172-178, 949-982 (Manfred E. Wolff編，第5版）中描述的那些方法。
[0126] 本文使用的立體化學(xué)的定義和約定一般遵循MCGRAW-HILL DICTIONARY 0F CHEMICAL TERMS(S. P. Parker, Ed. , McGraw-Hi11 Book Company,New York, 1984)； 和 ELIEL,E?和 WILEN,S., STEREOCHEMISTRY OF ORGANIC COMPOUNDS(John Wiley & Sons, Inc.，New York, 1994)。許多有機(jī)化合物以光學(xué)活性形式存在，即它們具有旋轉(zhuǎn)平面 偏光的平面的能力。
[0127] 本文使用的術(shù)語(yǔ)"治療" 一般是指獲得需要的藥理和/或生理效應(yīng)。該效應(yīng)根據(jù) 完全或部分地預(yù)防疾病或其癥狀，可以是預(yù)防性的；和/或根據(jù)部分或完全穩(wěn)定或治愈疾 病和/或由于疾病產(chǎn)生的副作用，可以是治療性的。本文使用的"治療"涵蓋了對(duì)患者疾病 的任何治療，包括：(a)預(yù)防易感染疾病或癥狀但還沒(méi)診斷出患病的患者所發(fā)生的疾病或 癥狀；(b)抑制疾病的癥狀，即阻止其發(fā)展；或（c)緩解疾病的癥狀，即，導(dǎo)致疾病或癥狀退 化。
[0128] 本發(fā)明的化合物可以按照常規(guī)的有機(jī)化學(xué)合成方法制備。例如，本發(fā)明涉及一種 制備式（I)化合物的方法：
[0129]
[0130] 化合物（I)由式（II)化合物，在堿性條件下反應(yīng)制得，或在堿性條件下加入成酯 試劑反應(yīng)制得。式（II)中&、1? 2、和R4與上文在式（I)中的定義相同。
[0131] 堿性條件的pH范圍為7. 5-14,可選加入氫氧化鈉、氫氧化鉀、氨水、碳酸鈉等堿性 試劑或溶劑。成酯試劑可選甲醇、乙醇等低級(jí)醇；酸酐（醋酸酐、磺酸酐、三氟甲磺酸酐等）、 酰氯（甲苯磺酰氯）、氯硅烷（叔丁基二甲基氯硅烷）。
[0132] 常規(guī)的化學(xué)轉(zhuǎn)換可用于實(shí)施本發(fā)明。本領(lǐng)域的技術(shù)人員可以決定用于這些化 學(xué)轉(zhuǎn)換的適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)劑、溶劑、保護(hù)基和反應(yīng)條件。相關(guān)信息描述于，例如，R.Lar 〇ck， Comprehensive Organic Transformations，VCH 出版商（1989) ;T.W. Greene 和 P.G. M. ffuts, Protective Groups in Organic Synthesis,第 3 版，John Wiley and Sons (1999) ；L. Fieser 和 M. Fieser，F(xiàn)ieser and Fieser' s Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons(1994);及 L. Paquette 編輯的 Encyclopedia of Reagents for Organic Synthesis，John Wiley and Sons (1995)及其后來(lái)的版本。
[0133] 保護(hù)基指那些一旦連接活性部分（例如，羥基或氨基），防止這些部分被后來(lái)的 反應(yīng)干擾并可在反應(yīng)后通過(guò)常規(guī)的方法去除的基團(tuán)。羥基保護(hù)基的例子包括但不限于，烷 基、苯甲基（芐基）、烯丙基、三苯甲基（g卩，三苯基甲基）、?；ɡ?，苯甲酰基、乙酰基或 H00C-X"-C0-，X"為亞烷基、亞鏈烯基、亞環(huán)烷基或亞芳基）、甲硅烷基（例如，三甲基甲硅 烷基、二乙基甲娃烷基和叔丁基^甲基甲娃烷基）、烷氧基幾基、氣基幾基（例如，^甲基氣 基羰基、甲基乙氨基羰基和苯基氨基羰基）、烷氧甲基、苯甲氧甲基和烷基巰甲基。氨基保護(hù) 基的例子包括但不限于，烷氧基羰基、烷?；⒎佳趸驶?、芳基取代的烷基等。羥基和氨基 保護(hù)基已在 T.W. Greene 和 P.G..M. Wuts，Protective Groups in Organic Synthesis，第 2 版，John Wiley and Sons (1991)中討論。羥基和氨基保護(hù)基都可在反應(yīng)后通過(guò)常規(guī)的方 法去除。
[0134] 本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供化合物的分離方法。具體地說(shuō)，本發(fā)明的另一個(gè)目的 是提供從紅曲或其提取物提取化合物5的方法，所述方法包括下列步驟：
[0135]
[0136] 1)對(duì)于紅曲或其提取物使用乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇，或甲醇/乙醇 水溶液）為溶劑進(jìn)行提??；
[0137] 2)對(duì)于步驟1)的乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇，或甲醇/乙醇水溶液）提 取物進(jìn)行硅膠柱層析分離，用石油醚、乙酸乙酯及、甲醇/乙醇進(jìn)行梯度洗脫，得到乙酸乙 脂洗脫部分；
[0138] 3)對(duì)于步驟2)的乙酸乙脂洗脫部分進(jìn)行硅膠柱層析分離，用二氯甲烷-乙酸乙 脂-甲醇洗脫，將流分進(jìn)行分析、合并后，得到步驟3)5個(gè)流分；
[0139] 4)對(duì)于步驟3)的第2個(gè)流分進(jìn)行C18柱層析分離，用乙腈-甲醇-水梯度洗脫， 得到82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脫部分；
[0140] 5)對(duì)于步驟4)的82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脫部分進(jìn)一步用二氯甲烷-甲 醇為流動(dòng)相進(jìn)行sephadex LH-20柱層析分離，將流分進(jìn)行分析、合并后，得到步驟5) 6個(gè)流 分；
[0141] 6)對(duì)于步驟5)的第3個(gè)流分利用色譜方法純化，以乙腈-甲醇-水為流動(dòng)相，C18 色譜柱為固定相，得到化合物5。
[0142] 在一個(gè)實(shí)施方式中，從紅曲或其提取物提取化合物5的方法，所述方法包括下列 步驟：
[0143] 1)對(duì)于紅曲或其提取物使用2-6倍體積的乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇， 或甲醇/乙醇水溶液）為溶劑提取3次，每次20-40分鐘，合并提取液，減壓濃縮并回收溶 劑，得乙酸乙脂提取物；
[0144] 2)對(duì)于步驟1)的乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇，或甲醇/乙醇水溶液）提 取物進(jìn)行硅膠柱層析分離，用石油醚、乙酸乙酯及甲醇/乙醇進(jìn)行梯度洗脫，得到乙酸乙脂 洗脫部分；
[0145] 3)對(duì)于步驟2)的乙酸乙脂洗脫部分進(jìn)行硅膠柱層析分離，用二氯甲烷-乙酸乙 脂-甲醇（30 :30 :1)洗脫，將流分進(jìn)行分析、合并后，得到步驟3)5個(gè)流分；
[0146] 4)對(duì)于步驟3)的第2個(gè)流分進(jìn)行C18柱層析分離，用82% (乙腈-甲醇1 :1)水 溶液~100% (乙腈-甲醇1 :1)梯度洗脫洗脫，得到82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脫 部分；
[0147] 5)對(duì)于步驟4)的82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脫部分進(jìn)一步用二氯甲烷-甲 醇（2 :1)為流動(dòng)相進(jìn)行sephadex LH-20柱層析分離，將流分進(jìn)行分析、合并后，得到步驟 5) 6個(gè)流分；
[0148] 6)對(duì)于步驟5)的第3個(gè)流分利用色譜純化，以乙腈-甲醇-水為流動(dòng)相，C18色 譜柱為固定相，得到化合物5
[0149]
[0150] 本發(fā)明還提供了包含本發(fā)明式（I)化合物的藥物組合物。本發(fā)明提供了這樣的藥 物組合物，其包含至少一種如上所述的本發(fā)明的式（I)化合物，和任選的藥學(xué)上可以接受 的賦形劑。
[0151] 制備各種含有一定量的活性成分的藥物組合物的方法是已知的，或根據(jù)本發(fā) 明的公開(kāi)內(nèi)容對(duì)于本領(lǐng)域技術(shù)人員是顯而易見(jiàn)的。如REMINGTON'S PHARMACEUTICAL SCIENCES, Martin, E.W.，ed.，Mack Publishing Company, 19th ed. (1995)所述，制備所述 藥物組合物的方法包括摻入適當(dāng)?shù)乃帉W(xué)賦形劑、載體、稀釋劑等。
[0152] 以已知的方法制造本發(fā)明的藥物制劑，包括常規(guī)的混合、溶解或凍干方法。本發(fā)明 的化合物可以制成藥物組合物，并向患者以適于選定的施用方式的各種途徑施用，例如，口 服或腸胃外（通過(guò)靜脈內(nèi)、肌內(nèi)、局部或皮下途徑）。
[0153] 因此，本發(fā)明的化合物結(jié)合藥學(xué)上可以接受的載體（如惰性稀釋劑或可同化的可 食用的載體）可以全身施用，例如，口服。它們可以封閉在硬或軟殼的明膠膠囊中，可以壓 為片劑。對(duì)于口服治療施用，活性化合物可以結(jié)合一種或多種賦形劑，并以可吞咽的片劑、 頰含片劑、含片、膠囊劑、酏劑、懸浮劑、糖漿、圓片等的形式使用。這種組合物和制劑應(yīng)該包 含至少0. 1 %的活性化合物。這種組合物和制劑的比例當(dāng)然可以變化，可以占給定的單位劑 型重量的大約1%至大約99%。在這種治療有用的組合物中，活性化合物的量使得能夠獲 得有效劑量水平。
[0154] 片劑、含片、丸劑、膠囊劑等也可以包含：粘合劑，如黃蓍膠、阿拉伯膠、玉米淀粉或 明膠；賦形劑，如磷酸氫二鈣；崩解劑，如玉米淀粉、馬鈴薯淀粉、藻酸等；潤(rùn)滑劑，如硬脂酸 鎂；和甜味劑，如蔗糖、果糖、乳糖或阿司帕坦；或調(diào)味劑，如薄荷、冬青油或櫻桃香味。當(dāng)單 位劑型是膠囊時(shí)，除了上面類型的材料，它還可以包含液體載體，如植物油或聚乙二醇。各 種其他材料可以存在，作為包衣，或以其他方式改變固體單位劑型的物理形式。例如，片劑、 丸劑或膠囊劑可以用明膠、蠟、蟲(chóng)膠或糖等包衣。糖漿或酏劑可以包含活性化合物，蔗糖或 果糖作為甜味劑，對(duì)羥苯甲酸甲酯或?qū)αu苯甲酸丙酯作為防腐劑，染料和調(diào)味劑（如櫻桃 香料或桔子香料）。當(dāng)然，用于制備任何單位劑型的任何材料應(yīng)該是藥學(xué)上可以接受的且以 應(yīng)用的量基本上無(wú)毒。此外，活性化合物可以摻入緩釋制劑和緩釋裝置中。
[0155] 活性化合物也可以通過(guò)輸注或注射來(lái)靜脈內(nèi)或腹膜內(nèi)施用?？梢灾苽浠钚曰衔?或其鹽的水溶液，任選地混和無(wú)毒的表面活性劑。也可以制備在甘油、液體聚乙二醇、甘油 三乙酸酯及其混合物以及油中的分散劑。在普通的儲(chǔ)存和使用條件下，這些制劑包含防腐 劑以防止微生物生長(zhǎng)。
[0156] 適于注射或輸注的藥物劑型可以包括包含適于無(wú)菌的可注射或可輸注的溶液或 分散劑的即時(shí)制劑的活性成分（任選封裝在脂質(zhì)體中）的無(wú)菌水溶液或分散劑或無(wú)菌粉 末。在所有情況下，最終的劑型在生產(chǎn)和儲(chǔ)存條件下必須是無(wú)菌的、液體的和穩(wěn)定的。液體 載體可以是溶劑或液體分散介質(zhì)，包括，例如水、乙醇、多元醇（例如，甘油、丙二醇、液體聚 乙二醇等）、植物油、無(wú)毒的甘油酯及其合適的混合物?？梢跃S持合適的流動(dòng)性，例如，通過(guò) 脂質(zhì)體的形成，通過(guò)在分散劑的情況下維持所需的粒子大小，或通過(guò)表面活性劑的使用?？?以通過(guò)各種抗細(xì)菌劑和抗真菌劑（如對(duì)羥苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸、硫柳汞等）產(chǎn)生 預(yù)防微生物的作用。在許多情況下，優(yōu)選包括等滲劑，如糖、緩沖劑或氯化鈉。通過(guò)使用延 緩吸收劑的組合物（例如，單硬脂酸鋁和明膠）可以產(chǎn)生可注射的組合物的延長(zhǎng)吸收。
[0157] 通過(guò)將合適的溶劑中的需要量的活性化合物與需要的上面列舉的各種其他成分 結(jié)合，然后進(jìn)行過(guò)濾滅菌，制備無(wú)菌可注射溶液。在用于制備無(wú)菌注射溶液的無(wú)菌粉末的情 況下，優(yōu)選的制備方法是真空干燥和冷凍干燥技術(shù)，這會(huì)產(chǎn)生活性成分加上任何另外需要 的以前無(wú)菌過(guò)濾溶液中存在的成分的粉末。
[0158] 有用的固體載體包括粉碎的固體（如滑石、粘土、微晶纖維素、二氧化硅、氧化鋁 等）。有用的液體載體包括水、乙醇或乙二醇或水-乙醇/乙二醇混合物，本發(fā)明的化合物 可以任選在無(wú)毒的表面活性劑的幫助下以有效含量溶解或分散在其中?？梢约尤胱魟ㄈ?香味）和另外的抗微生物劑來(lái)優(yōu)化對(duì)于給定用途的性質(zhì)。
[0159] 增稠劑（如合成的聚合物、脂肪酸、脂肪酸鹽和酯、脂肪醇、改性纖維素或改性無(wú) 機(jī)材料）也可和液體載體用于形成可涂覆的糊劑、凝膠、軟膏、肥皂等，直接用于使用者的 皮膚上。
[0160] 化合物或其活性鹽或衍生物的治療需要量，不僅取決于選擇的特定的鹽，而且取 決于施藥方式、待治療的疾病的本質(zhì)和患者的年齡和狀態(tài)，最終取決于在場(chǎng)醫(yī)師或臨床醫(yī) 生的決定。
[0161] 上述制劑可以以單位劑型存在，該單位劑型是含有單位劑量的物理分散單元，適 于向人體和其它哺乳動(dòng)物體給藥。單位劑型可以是膠囊或片劑，或是很多膠囊或片劑。根 據(jù)所涉及的具體治療，活性成分的單位劑量的量可以在大約〇. 1到大約1000毫克或更多之 間進(jìn)行變化或調(diào)整。
[0162] 本發(fā)明還提供本發(fā)明的化合物或包含該化合物的組合物在制備藥物、特別是用于 抑制HMG-CoA還原酶的藥物中的用途。相應(yīng)地，本發(fā)明提供一種治療預(yù)防和/或治療血脂異 常、高血脂癥、或動(dòng)脈粥樣硬化患者的方法，包括給予需要治療的患者治療有效量的至少一 種本發(fā)明的化合物。血脂異常即一種或多種與血脂相關(guān)的人體指標(biāo)不在正常數(shù)值范圍內(nèi)， 包括總膽固醇升高、低密度脂蛋白膽固醇升高、載脂蛋白B升高、甘油三酯升高等。本發(fā)明 提供一種預(yù)防和/或治療高膽固醇血癥、混合型高脂血癥患者的方法，包括給予需要治療 的患者治療有效量的至少一種本發(fā)明的化合物。
[0163] 本發(fā)明提供一種在生活方式干預(yù)治療（如：調(diào)整飲食結(jié)構(gòu)、控制體重、增加運(yùn)動(dòng)、 戒煙）效果不理想時(shí)，治療其總膽固醇升高、低密度脂蛋白膽固醇升高、載脂蛋白B升高、甘 油三酯升高等。
[0164] 本發(fā)明化合物的上述用途，可單獨(dú)使用，或與有效劑量的其他調(diào)脂藥物聯(lián)合使用。 其他調(diào)脂藥物包括：膽固醇合成抑制劑（他汀類或其鹽類，如洛伐他汀、普伐他汀、辛伐他 汀、氟伐他汀、阿托伐他汀、匹伐他汀等）、膽固醇吸收抑制劑（依折麥布等）、貝特類（諾 衡、力平脂環(huán)丙貝特、苯扎貝特、非諾貝特及吉非貝齊）、煙酸類藥物（煙酸、煙酸肌醇酯、東 脂平、戊四煙酯等），膽酸螯合劑藥物、苯氧芳酸類。
[0165] 本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)上可接受的鹽（例如醋酸鹽、丙二酸鹽、酒石酸鹽、琥珀 酸鹽、鹽酸鹽、硫酸鹽、硝酸鹽等），可用于上述疾病的預(yù)防或治療。
[0166] 在下列實(shí)施例中，將更加具體地解釋本發(fā)明。但應(yīng)理解，下列實(shí)施例旨在說(shuō)明本發(fā) 明而不對(duì)本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。
[0167] 以下實(shí)施例中所用的化學(xué)原料均為商購(gòu)獲得或通過(guò)本領(lǐng)域熟知的合成方法獲得。
[0168] 實(shí)施例1
[0169] 本發(fā)明人通過(guò)對(duì)于紅曲進(jìn)一步的成分研究，分離純化得到了一種新的他汀類化合 物（化合物5)。
[0170]
[0171] 1?紅曲
[0172] 1)取紅曲干粉（北京北大維信生物科技有限公司生產(chǎn)）6kg，用2-6倍體積的乙酸 乙酯（或二氯甲烷或甲醇或乙醇，或甲醇/乙醇水溶液）為溶劑超聲提取3次，每次20-40 分鐘，合并提取液，減壓濃縮并回收溶劑，得乙酸乙脂提取物（240g)。
[0173] 2)取乙酸乙酯提取物進(jìn)行硅膠柱層析分離，用石油醚、乙酸乙酯及甲醇進(jìn)行梯度 洗脫，得到乙酸乙脂洗脫部分（72g)。
[0174] 3)取乙酸乙脂洗脫部分進(jìn)行硅膠柱層析分離，用二氯甲烷-乙酸乙脂-甲醇（30 : 30:1)洗脫共接收了 110個(gè)流分，每流分為10ml。經(jīng)TLC(或HPLC)跟蹤檢測(cè)后，合并色 譜行為相同或相似的流分，合并后得到5個(gè)流分（分別為合并前的第1-35 ;36-50 ;51-65 ; 66-89 ;90-110 流分）。
[0175] 4)對(duì)步驟3)的第2個(gè)（合并前36-50流分，16g)流分進(jìn)行C18柱層析分離，用 82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液100% (乙腈-甲醇1 :1)梯度洗脫，得到82% (乙腈-甲 醇1 :1)水溶液洗脫部分（3. 2g，共接收900ml)。
[0176] 5)82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脫部分進(jìn)一步用二氯甲烷-甲醇2 :1為流動(dòng)相 進(jìn)行s印hadex LH-20柱層析分離，共接收了 120個(gè)流分，每流分為5ml。經(jīng)TLC (或HPLC) 跟蹤檢測(cè)合并色譜行為相同或相似的流分，合并后得到6個(gè)流分（分別為合并前的第1-40 ; 41-65 ;66-80 ;81-95 ;96-110 ;111-120 流分）。
[0177] 6)將步驟5)的第3個(gè)（合并前66-80流分，256mg)流分，最后利用半制備高效液 相純化，以66% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液為流動(dòng)相，流速為4ml/min，C18半制備色譜柱 (10X250mm, 5 ym)為固定相，DAD 檢測(cè)器波長(zhǎng)為 247nm，收集 22. 8min(21. 5-23. 5min)的色 譜峰流分，多次富集濃縮得到新化合物（化合物5)約13mg。
[0178] 2.血脂康
[0179] 1)取血脂康膠囊（北京北大維信生物科技有限公司）內(nèi)容物干粉3kg，用2-6倍體 積的乙酸乙酯（或二氯甲烷或甲醇）為溶劑超聲提取3次，每次20-40分鐘，合并提取液， 減壓濃縮并回收溶劑，得乙酸乙脂提取物（200g)。
[0180] 2)取乙酸乙酯提取物進(jìn)行硅膠柱層析分離，用石油醚、乙酸乙酯及甲醇進(jìn)行梯度 洗脫，得到乙酸乙脂洗脫部分（60g)。
[0181] 3)取乙酸乙脂洗脫部分進(jìn)行硅膠柱層析分離，用二氯甲烷-乙酸乙脂-甲醇（30 : 30:1)洗脫，共接收了 110個(gè)流分，每流分為10ml。經(jīng)TLC(或HPLC)跟蹤檢測(cè)合并色譜 行為相同或相似的流分后，得到步驟3)5個(gè)流分（分別為合并前的第1-35 ;36-50 ;51-65 ; 66-89 ;90-110 流分）。
[0182] 4)對(duì)步驟3)第2個(gè)（合并前36-50流分，14g)流分進(jìn)行C18柱層析分離，用82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液~100% (乙腈-甲醇1 :1)梯度洗脫，得到82% (乙腈-甲醇 1 :1)水溶液洗脫部分（2. 8g)。
[0183] 5)82% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液洗脫部分進(jìn)一步用二氯甲烷-甲醇2 :1為流動(dòng) 相進(jìn)行s印hadex LH-20柱層析分離，共接收了 120個(gè)流分，每流分為5ml。經(jīng)TLC (或HPLC) 跟蹤檢測(cè)合并色譜行為相同或相似的流分，合并后得到步驟5)6個(gè)流分（分別為合并前的 第 1-40 ;41-65 ;66-80 ;81-95 ;96-110 ;111-120 流分）。
[0184] 6)對(duì)步驟5)第3個(gè)（合并前66-80流分，208mg)流分，最后利用半制備高效液 相純化，以66% (乙腈-甲醇1 :1)水溶液為流動(dòng)相，流速為4ml/min，C18半制備色譜柱 (10X250mm, 5 ym)為固定相，DAD 檢測(cè)器波長(zhǎng)為 247nm，收集 22. 8min(21. 5-23. 5min)的色 譜峰流分，多次富集濃縮得到新化合物（化合物5)約11. 5mg。
[0185] 本發(fā)明也可使用其他紅曲原料或制劑為原料，如血脂康片（北京北大維信生物科 技有限公司）。
[0186] 實(shí)施例2 :化合物5的合成與鑒定
[0187] 方法 A:
[0188]
[0189] 1.化合物2的合成
[0190] 20. 9g(0. 05mo 1)的化合物1 (辛伐他汀，購(gòu)自sigma)溶于500ml二氯甲烷中，加 入12g(0.07mol)的間氯過(guò)氧苯甲酸，室溫?cái)嚢?0min，反應(yīng)結(jié)束后，加入飽和碳酸氫鈉溶 液，靜置分層，依次用飽和碳酸氫鈉、飽和食鹽水洗滌，有機(jī)層干燥濃縮，不經(jīng)分離直接進(jìn)行 下一步反應(yīng)。
[0191] 2.化合物3的合成
[0192] 在250ml四氫咲喃中加入0? 085mol的二乙胺和0? 075mol的叔丁醇，冰浴攪拌下， 加入0. 15mmol的正丁基鋰，攪拌20min，將上述步驟合成的混合物加入反應(yīng)中，繼續(xù)冰浴攪 拌反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)，反應(yīng)結(jié)束后依次用水和飽和食鹽水洗滌，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，濃 縮，所得混合物經(jīng)柱層析分離，得4. 36g化合物3,收率21 %。
[0193] 3.化合物4的合成
[0194] 將13g化合物3 (0. 03mol)溶于60ml氯仿中，鹽酸調(diào)節(jié)溶液PH至酸性，室溫?cái)嚢?過(guò)夜，依次用10%的硫代硫酸鈉、水、飽和食鹽水洗滌，減壓蒸除有機(jī)溶劑得粗品，經(jīng)柱層析 分離得5. 96g化合物4,收率62%。
[0195] 4.化合物5的合成
[0196] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，7g化合物4溶于150ml甲醇中，加入0. 3mol的四丁基胺硫酸氫鹽，加 熱攪拌反應(yīng)，TCL監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓除去溶劑，剩余物溶于150ml混合溶液（水：庚 烷=1:1)中，攪拌2小時(shí)。分離有機(jī)層，無(wú)水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮得6. 82g目標(biāo)化合物 5,收率88%。
[0197] 或方法B:
[0198]
[0199] 1.化合物2b的合成
[0200] 20. 2g (0? 05mo 1)的化合物1 (洛伐他汀，購(gòu)自sigma)溶于500ml二氯甲烷中，加 入12g(0.07mol)的間氯過(guò)氧苯甲酸，室溫?cái)嚢?0min，反應(yīng)結(jié)束后，加入飽和碳酸氫鈉溶 液，靜置分層，依次用飽和碳酸氫鈉、飽和食鹽水洗滌，有機(jī)層干燥濃縮，不經(jīng)分離直接進(jìn)行 下一步反應(yīng)。
[0201] 2.化合物3b的合成
[0202] 在250ml四氫呋喃中加入0? 085mol的二乙胺和0? 075mol的叔丁醇，冰浴攪拌下， 加入0. 15mmol的正丁基鋰，攪拌20min，將上述步驟合成的混合物加入反應(yīng)中，繼續(xù)冰浴攪 拌反應(yīng)，TLC監(jiān)測(cè)，反應(yīng)結(jié)束后依次用水和飽和食鹽水洗滌，有機(jī)層用無(wú)水硫酸鈉干燥，濃 縮，所得混合物經(jīng)柱層析分離，得4. 22g化合物3b，收率21 %。
[0203] 3.化合物4的合成
[0204] 將12. 6g化合物3b (0. 03mol)溶于60ml氯仿中，鹽酸調(diào)節(jié)溶液PH至酸性，室溫?cái)?拌過(guò)夜，依次用10%的硫代硫酸鈉、水、飽和食鹽水洗滌，減壓蒸除有機(jī)溶劑得粗品，經(jīng)柱層 析分離得5. 96g化合物4,收率62%。
[0205] 4.化合物5的合成
[0206] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，7g化合物4溶于150ml甲醇中，加入0. 3mol的四丁基胺硫酸氫鹽，加 熱攪拌反應(yīng)，TCL監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓除去溶劑，剩余物溶于150ml混合溶液（水：庚 烷=1:1)中，攪拌2小時(shí)。分離有機(jī)層，無(wú)水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮得6. 82g目標(biāo)化合物 5,收率88%。
[0207] 化合物5的結(jié)構(gòu)鑒定方法為：
[0208] 1.化合物的理化數(shù)據(jù)
[0209] 淡黃色油狀物，
[0210] UV 光譜中有三個(gè)最大吸收峰，分別為 Anax(CH2Cl2) = 226. 8nm，265. 4nm，301. 2nm。
[0211] FT-IROffitcm1)光譜：3422(-011)，3013,2952(飽和碳?xì)洌?732(羰基）。
[0212] HR-ESI-MS :m/z 355. 1886[M+Na] + (計(jì)算值為 355. 1885, C2(]H2S04Na)。
[0213] 2.結(jié)構(gòu)式的確定
[0214] 分析該化合物的碳譜（13C-NMR及DEPT)，有20個(gè)碳原子，分別為甲基3個(gè)（其中 甲氧基1個(gè)，與sp 2碳相連的甲基1個(gè)），亞甲基4個(gè)，次甲基9個(gè)（其中5個(gè)為sp 2碳）及 季碳為4個(gè)（其中一個(gè)為羰基碳），同時(shí)也可以發(fā)現(xiàn)烯碳區(qū)有8個(gè)碳原子（S 126. 9, 126. 9， 127. 2, 127. 5, 133. 4, 134. 6, 135. 9, 136. 1)。從1H-i COSY 相關(guān)信號(hào)圖（附圖 1A)中可以推 斷出用粗線表示的C2'到C4的片段和C7-C8片段。從烯碳區(qū)的8個(gè)碳原子可以推斷該化合 物有4個(gè)C = C。進(jìn)一步分析HMBC相關(guān)信號(hào)，可以發(fā)現(xiàn)6-Me與C5, C7 ;H-5與C6, C7 ;H-4 與C5, C8a ;H-3與C4a ;H-1與C8a，C4a ;H-8與C8a，C4a等之間的相關(guān)信號(hào)，從此可以推斷 該化合物具有1，2-二氫萘環(huán)部分的他汀母核。從HMBC圖譜（附圖1AB)中，還發(fā)現(xiàn)甲氧基 的甲基（S 3. 69)，H-2'（ S 2. 46/2. 48)和 H-3'（ S 2. 45)與 Cl'（ S 173. 0)之間有相關(guān)信 號(hào)，這表明甲氧基與C1'相連，從而可以推斷該化合物是甲酯化的他汀類似物。進(jìn)一步結(jié)合 HR-ESI-MS結(jié)果，推斷該化合物為：7_ (2, 6-二甲基-1，2-二氫萘-1-基）-3, 5-二羥基庚酸 甲酯（methyl 7-(2, 6-dimethyl-l, 2-dihydronaphthalen-1-yl)-3, 5-dihydroxyheptanoa te)。結(jié)構(gòu)式為圖1中所表示。
[0215] 3.化合物5的NMR數(shù)據(jù)
[0216] 表1.化合物5的NMR數(shù)據(jù)（600MHz, CDC13, S以ppm表示，J以Hz表示）

[0219] 實(shí)施例3 :化合物5a的合成
[0220]
[0221] 1.化合物5a的合成
[0222] 氮?dú)獗Ｗo(hù)下，7. 4g化合物4a溶于150ml甲醇中，加入0. 3mol的四丁基胺硫酸氫 鹽，加熱攪拌反應(yīng)，TCL監(jiān)測(cè)反應(yīng)，反應(yīng)結(jié)束后減壓除去溶劑，剩余物溶于150ml混合溶液 (水：庚烷=1:1)中，攪拌2小時(shí)。分離有機(jī)層，無(wú)水硫酸鈉干燥，抽濾，濃縮得6.91g目標(biāo) 化合物5a，收率85%。
[0223] 實(shí)施例4
[0224] HMG-CoA還原酶抑制活性實(shí)驗(yàn)
[0225] 1實(shí)驗(yàn)材料
[0226] 1. 1 藥品
[0227] 化合物5自制
[0228] 洛伐他汀標(biāo)準(zhǔn)品一購(gòu)于Sigma公司
[0229] 1. 2 酶
[0230] 大鼠肝臟微粒體（HMG-CoA還原酶）商購(gòu)，或者參照下述方法制備：取出雄性大鼠 的肝臟，用KESD緩沖液沖洗之后，12, 000g離心15min，取上清液。再用105, 000g離心90min 兩次之后，收集離心沉淀。離心沉淀里加入8. 3%甘油，用37°C溫浴加熱lh。大鼠肝臟微 粒體粗體物用飽和硫酸銨純化并收集35-50%純化部分即得。得到的大鼠肝臟微粒體存放 在-80 °C冰箱中。
[0231] 1.3 試劑
[0232] 氯化鉀，磷酸二氫鉀，乙二胺四乙酸，二硫蘇糖醇一購(gòu)于北京化學(xué)試劑公司
[0233] 煙酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADPH)購(gòu)于Merck公司
[0234] 3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A (HMG-CoA)--購(gòu)于Sigma公司
[0235] 2實(shí)驗(yàn)方法
[0236] 將化合物5用75 %乙醇溶液溶解，初濃度為8. 6mg/ml并逐級(jí)稀釋，得4. 3mg/ ml，2. 15mg/ml ;測(cè)定體系中總體積為250 y 1，各成分的濃度為：氯化鉀200mM,磷酸二氫 鉀160mM，乙二胺四乙酸4mM，二硫蘇糖醇10mM，兩個(gè)底物煙酰胺腺嘌呤二核苷酸和3-羥 基-3-甲基戊二酰輔酶A的濃度分別為200 yM和50 yM，pH6. 8,酶加 30 yl，試驗(yàn)組加 5 y 1，對(duì)照組加 5 y 1 (溶解樣品溶劑），在Versamax酶標(biāo)儀上37°C條件下檢測(cè)0D34。的動(dòng)態(tài) 變化。通過(guò)檢測(cè)〇D 34。在5分鐘內(nèi)下降的快慢（以斜率值表示），來(lái)評(píng)價(jià)HMG-CoA還原酶活 性的強(qiáng)弱，進(jìn)而評(píng)價(jià)酶抑制劑活性的強(qiáng)弱，結(jié)果見(jiàn)表2。
[0237] 3實(shí)驗(yàn)結(jié)果
[0238] 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，化合物5對(duì)HMG-CoA還原酶的活性有抑制作用，且呈濃度-效應(yīng)關(guān) 系。表明該化合物對(duì)HMG-CoA還原酶的活性有較好的抑制作用。
[0239] 表2.酶抑制劑活性檢測(cè)結(jié)果
[0241] *空白對(duì)照為溶劑
[0242] 洛伐他汀是陽(yáng)性對(duì)照。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 下式（I)的化合物或其立體異構(gòu)體、互變異構(gòu)體、外消旋物、代謝產(chǎn)物、前藥、藥學(xué)上 可接受的鹽或溶劑化物：Ri選自H、C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基、（CH 2) 1 e〇H、C3-C7環(huán)烷基、面代C 3-C,環(huán)烷基、C I-Ce 烷氧基、面代Q-Ce烷氧基、C I-Ce燒硫基、面代C I-Ce燒硫基、面素、硝基、氨基和氛基； Rz選自H、C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基、（CH 2) 1 6〇Re、C3-C7環(huán)烷基、面代C式7環(huán)烷基、C I-Ce 烷氧基、面代Q-Ce烷氧基、C i-Ce燒硫基、面代C i-Ce燒硫基、面素、硝基、氨基和氛基； Rs選自H、C I-Ce烷基； 尺4和R 5各自獨(dú)立地選自出、-COR 7、-SOzRs、-Si RgRloRll; 其中，R7選自C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基，R S選自C I-Ce烷基、任意取代的C I-Ce烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii獨(dú)立地選自C I-Ce烷基； 其中，Re與上述對(duì)于Ra和Rs的定義相同； 其中，排除W下式（I)的化合物：Ri為（CH2)0H，Rz為甲基，Rs、Ra和Rs為H。2. 根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中， Ri選自H、C 1-C3烷基、面代C 1-C3烷基、（CH 2) 1 30H、Cs-Ce環(huán)烷基、面代C 環(huán)烷基、C 1-C3 烷氧基、面代Ci-Cs烷氧基、C I-Cs燒硫基、面代C I-Cs燒硫基、面素、硝基、氨基和氯基。3. 根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中， Ri選自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、畑2) 1 30H、面素、硝基、氨基和氯基。4. 根據(jù)權(quán)利要求1的化合物，其中 Ri選自 H、C 1-C3烷基、（CH 2) 1 30H。5. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rz選自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、（CH 2) 1 3〇Re、Cs-Ce環(huán)烷基、面代Cs-Ce環(huán)烷基、C I-Cs 烷氧基、面代烷氧基、C 燒硫基、面代C 燒硫基、面素、硝基、氨基和氛基； 其中，Re選自 H、-COR,、-SOzRs、-Si RgRioRii; 其中，R7選自C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基，R S選自C I-Ce烷基、任意取代的C I-Ce烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii獨(dú)立地選自C I-Ce烷基。6. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rz選自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、（CH 2) 1 3〇Re、Cs-Ce環(huán)烷基、面代Cs-Ce環(huán)烷基、C I-Cs 烷氧基、面代烷氧基、C 燒硫基、面代C 燒硫基、面素、硝基、氨基和氛基； 其中，Re選自：H、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕選自〇1-〇3烷基、面代〇1-〇3烷基，1?8選自〇1-〇3烷基、任意取代的〇1-〇3烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii獨(dú)立地選自C I-Ce烷基。7. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rz選自H、c 1-C3烷基、面代C1-C3烷基、（邸2) 13〇R6、C3-Ce環(huán)烷基、面代Cs-Ce環(huán)烷基、C 1-C3 烷氧基、面代Ci-Cs烷氧基、C I-Cs燒硫基、面代C I-Cs燒硫基、面素、硝基、氨基和氯基； 其中，Re選自：H、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕選自-CH 3，Rs選自-CF 3、對(duì)甲苯基，R9、Rio、Ri 1獨(dú)立地選自甲基、叔下基。8. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rz選自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、畑2) 1 3〇Re、面素、硝基、氨基和氯基； 其中，Re選自 H、-COR?、-SOzRs、-Si R9R10R11; 其中，R7選自C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基，R S選自C I-Ce烷基、任意取代的C I-Ce烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii獨(dú)立地選自C I-Ce烷基。9. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rz選自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、畑2) 1 3〇Re、面素、硝基、氨基和氯基； 其中，Re選自：H、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕選自〇1-〇3烷基、面代〇1-〇3烷基，1?8選自〇1-〇3烷基、任意取代的〇1-〇3烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii獨(dú)立地選自C I-Ce烷基。10. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rz選自H、C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基、畑2) 1 3〇Re、面素、硝基、氨基和氯基； 其中，Re選自：H、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕選自-CH 3，Rs選自-CF 3、對(duì)甲苯基，R9、Rio、Ri 1獨(dú)立地選自甲基、叔下基。11. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rz選自 H、C 1-C3烷基、（CH 2) 13〇Re; 其中，Re選自 H、-COR7、-SOzRs、-Si R9R10R11; 其中，R7選自C I-Ce烷基、面代C I-Ce烷基，R S選自C I-Ce烷基、任意取代的C I-Ce烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii獨(dú)立地選自C I-Ce烷基。12. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rz選自 H、C I-Cs烷基、（CH 2) 13〇Re; 其中，Re選自 H、-COR7、-SOzRs、-Si RgRioRii; 其中，咕選自〇1-〇3烷基、面代〇1-〇3烷基，1?8選自〇1-〇3烷基、任意取代的〇1-〇3烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii獨(dú)立地選自C I-Ce烷基。13. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 4中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rz選自 H、C 1-C3烷基、（CH 2) 13〇Re; 其中，Re選自 H、-COR7、-SOzRs、-Si R9R10R11; 其中，咕選自-CH 3，Rs選自-CF 3、對(duì)甲苯基，R9、Rio、Ri 1獨(dú)立地選自甲基、叔下基。14. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 13中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rs選自H、Ci-Cs烷基。15. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 13中任一項(xiàng)的化合物，其中 Rs為C I-Cs烷基。16. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 15中任一項(xiàng)的化合物，其中 尺4和R 5各自獨(dú)立地選自出、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕選自C I-Cs烷基、面代C I-Cs烷基，RS選自C I-Cs烷基、任意取代的C I-Cs烷基、 Ce-Cin芳基、任意取代的C 6-Ci。芳基，R 9、Ri。、Rii獨(dú)立地選自C I-Ce烷基。17. 根據(jù)權(quán)利要求1 - 15中任一項(xiàng)的化合物，其中 尺4和R 5各自獨(dú)立地選自出、-COR 7、-SOzRs、-SiRsRioRii; 其中，咕選自-CH 3，Rs選自-CF 3、對(duì)甲苯基，Rs、Rio、Ri 1獨(dú)立地選自甲基、叔下基。18. W下化合物，其選自： 及其二乙酸醋、二對(duì)甲苯橫I 三（叔下基二甲基娃酸）； 及其=乙酸醋、=對(duì)甲苯橫醋、=(=氣甲橫酸醋）、=(叔下基二甲基娃酸）。19. 一種藥物組合物，其包含權(quán)利要求1 - 18中任一項(xiàng)的化合物和任選的藥學(xué)上可W 接受的賦形劑。20. 權(quán)利要求1 - 18中任一項(xiàng)的化合物用于制備藥物的用途，其中所述藥物用于抑制 HMG-CoA還原酶活性。21. 權(quán)利要求1 - 18中任一項(xiàng)的化合物用于制備藥物的用途，其中所述藥物用于抑制 膽固醇合成。22. 從紅曲或其提取物提取化合物5的方法，所述方法包括下列步驟：1)對(duì)于紅曲或其提取物使用乙酸乙醋（或二氯甲燒或甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇水溶 液）為溶劑進(jìn)行提?。? 2) 對(duì)于步驟I)的乙酸乙醋（或二氯甲燒或甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇水溶液）提取物 進(jìn)行硅膠柱層析分離，用石油酸、乙酸乙醋及甲醇進(jìn)行梯度洗脫，得到乙酸乙脂洗脫部分； 3) 對(duì)于步驟2)的乙酸乙脂洗脫部分進(jìn)行硅膠柱層析分離，用二氯甲燒-乙酸乙脂-甲 醇洗脫，對(duì)流分進(jìn)行檢測(cè)、合并，合并后得到步驟3)流分； 4) 對(duì)于步驟3)第2個(gè)流分進(jìn)行C18柱層析分離，用乙臘-甲醇-水梯度洗脫，得到 82% (乙臘-甲醇1 :1)水溶液洗脫部分； 5) 對(duì)于步驟4)的82% (乙臘-甲醇1 :1)水溶液洗脫部分進(jìn)一步用二氯甲燒-甲醇 為流動(dòng)相進(jìn)行Se地adex LH-20柱層析分離，對(duì)流分分析、合并，合并后得到步驟5)流分； 6) 對(duì)于步驟5)的第3個(gè)流分利用色譜方法純化，得到化合物5。23. 根據(jù)權(quán)利要求22的方法，其中， 1) 對(duì)于紅曲或其提取物使用2-6倍體積的乙酸乙醋（或二氯甲燒或甲醇或乙醇、或甲 醇/乙醇水溶液）為溶劑提取3次，每次20-40分鐘，合并提取液，減壓濃縮并回收溶劑，得 乙酸乙脂提取物； 2) 對(duì)于步驟1)的乙酸乙醋（或二氯甲燒或甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇水溶液）提取物 進(jìn)行硅膠柱層析分離，用石油酸、乙酸乙醋及甲醇或乙醇、或甲醇/乙醇水溶液進(jìn)行梯度洗 脫，得到乙酸乙脂洗脫部分； 3) 對(duì)于步驟2)的乙酸乙脂洗脫部分進(jìn)行硅膠柱層析分離，用二氯甲燒-乙酸乙脂-甲 醇（30 :30 :1)洗脫、合并流分，合并后得到5個(gè)流分； 4) 對(duì)于步驟3)合并后的第2個(gè)流分進(jìn)行C18柱層析分離，用82% (乙臘-甲醇1 :1) 水溶液~100% (乙臘-甲醇1 :1)梯度洗脫洗脫，得到82% (乙臘-甲醇1 :1)水溶液洗 脫部分； 5) 對(duì)于步驟4)的82% (乙臘-甲醇1 :1)水溶液洗脫部分進(jìn)一步用二氯甲燒-甲醇 (2 :1)為流動(dòng)相進(jìn)行Se地adex LH-20柱層析分離，合并后得到步驟5)6個(gè)流分； 6) 對(duì)于步驟5)的第3個(gè)流分利用色譜純化，W乙臘-甲醇-水為流動(dòng)相，C18色譜柱 為固定相，得到化合物524. 合成前述權(quán)利要求1 - 17中任一項(xiàng)中的式（I)化合物W及權(quán)利要求18中的化合 物5和化合物5a的方法： 將式（II)化合物在堿性條件下反應(yīng)，或在堿性條件下加入成醋試劑反應(yīng)，制得式（I) 的化合物，其中，式（n)中Ri、Rz和Ra與前述權(quán)利要求1 - 17中任一項(xiàng)中的式（I)中的定義相 同， 堿性條件的抑范圍為7. 5-14,可選加入氨氧化鋼、氨氧化鐘、氨水、碳酸鋼等堿性試劑 或溶劑；成醋試劑可選自甲醇、乙醇等低級(jí)醇；酸?。ù姿狨　M酸酢、=氣甲橫酸酢等）、酷 氯（甲苯橫酷氯）、氯硅烷（叔下基二甲基氯硅烷）。 W化會(huì)物I F；的會(huì)成節(jié)法.26.化合物5的合成方法：
【文檔編號(hào)】C07C67/03GK105985244SQ201510058282
【公開(kāi)日】2016年10月5日
【申請(qǐng)日】2015年2月4日
【發(fā)明人】段震文, 郭樹(shù)仁, 李雪梅
【申請(qǐng)人】北京北大維信生物科技有限公司