一種組蛋白去乙酰酶抑制劑2-(1-(4-氯苯甲酰基)-5-甲氧基-2-甲基-1氫-吲哚-3-基-n ...的制作方法
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物化學技術領域,尤其涉及組蛋白去己醜化酶抑制劑2-(1-(4-氯 苯甲醜基)-5-甲氧基-2-甲基-1氨-剛噪-3-基-N-(2-(徑氨基)-2-廁己基)己醜胺 及其制備方法和應用。
【背景技術】
[0002] 組蛋白去己醜化酶(HDACs)是一類功能復雜的水解酶。在細胞核中,由DNA鏈纏 繞著的組蛋白八聚體構成的核小體是構成染色體的結構單元,組蛋白去己醜化酶(HDACs) 能將組蛋白中的賴氨酸殘基末端氨基上的己醜基水解掉(如反應式I),從而導致組蛋白的 正電荷密度增高,繼而引起組蛋白與負電性的DNA的親和力增強,基因轉錄被抑制,(參見 Christian,A.比,etal.Curr.Opin.Chem.Biol.,1997,1,300:Kouzarides,T., Curr.Opin.Genet.Dev.,1999,9,40) :Wolffe,A.P.Sci.Washington, 1996, 272,371。此外,核小體組蛋白的去乙醜化還與染色質(zhì)組裝,DNA修復與重組密切相關,(參 見Polo,S.E·,etal.CancerLett·,2005,220,1;Vidanes,G.M·,etal.Cell, 2005,121,973)。近來,越來越多的非組蛋白被證實為HDACs的底物,如轉錄因子,細胞 骨架蛋白,分子伴侶等,(參見Glozak,M.A.,etal.Gene, 2005,363,15)。正是由于 HDACs具有如此復雜的功能,它的表達和活性失調(diào)與許多疾病密切相關,包括:癌癥,神經(jīng) 變性疾病,病毒感染,炎癥,白血病,追疾和糖尿病等,其中,癌癥無疑是對人類生命健康威 脅最為嚴重的疾病。研究表明,HDACs與腫瘤細胞發(fā)生發(fā)展密切相關,如;抑制腫瘤細胞分 化和調(diào)亡,促進腫瘤細胞增殖,遷移和血管生成,增強腫瘤細胞對化療藥物的抵抗力等,(參 見Witt, 0.,etal.CancerLetter. , 2009, 277,8)。
[0003] 目前在人體中發(fā)現(xiàn)了HDACs家族有18個成員,根據(jù)其結構,功能和分布的不同可 分為四類。其中,I類(HDAC1,2,3和8),II類(IIa;HDAC4,5,7和 9;Hb;HDAC6,10),IV 類(HDAC11)屬于鋒離子依賴性水解酶,而III類HDACs(SIRT1-7)是MD+依賴性的。研 究表明,與腫瘤密切相關的主耍是鋒離子依賴性HDACs,HDA討Φ制劑(HDACsInhibitors, HDACi)能有效抑制癌細胞增殖,促進細胞調(diào)亡。而且,皿ACi具有抗瘤譜廣,毒副作用低的 優(yōu)點,它們對實體瘤,白血病,淋己瘤都具有很好的抑制活性。因此,針對HDACs為祀點設計 抑制劑已成為抗腫瘤藥物研究的熱點。
[0004]目前報道的HDACi藥效團大都包括如下三個部分:鋒離子莖合基團(ZBG),疏水性 的長鏈化inker)和蛋白表面識別區(qū)(SurfaceReco即itionDomain)。鋒離子莖合基團可W 莖合HDACs活性中也的鋒離子,從而抑制酶的活性。目前已知的活性最強,應用最廣的鋒離 子莖合基團是異徑巧酸基團。然而,現(xiàn)在很多處于臨床研究的化合物沒有很好的藥效,坦然 它們在臨床前的研究中表現(xiàn)出了很優(yōu)異的活性。但是,上市的HDA討申制劑(SAHA和FK228) 在治療實體瘤方面藥效很差,它們還存在著半衰期短,難吸收和藥物代謝動力學性質(zhì)較差 的缺點。
【發(fā)明內(nèi)容】
[0005] 本發(fā)明針對現(xiàn)有技術的不足,提供一種組蛋白去己醜酶抑制劑2-(1-(4-氯苯甲 醜基)-5-甲氧基-2-甲基-1氨-剛噪-3-基-N- (2-(徑氨基)-2-廁己基)己醜胺及其制 備方法和應用,本發(fā)明采用異徑巧酸基團為鋒離子莖合基團,剛噪美辛是一種上市抗炎藥, 已經(jīng)表現(xiàn)出了抗腫瘤潛力,將其作為HDACi結構母核,并引入脂肪性Linker,可W改善其脂 水分配系數(shù),促進藥物的吸收。
[0006] 本發(fā)明的技術方案如下: 具有結構式I的組蛋白去己醜化酶抑制劑,2-(1-(4-氯苯甲醜基)-5-甲氧基-2-甲 基-1氨-剛噪-3-基-N- (2-(徑氨基)-2-廁己基)己醜胺,其藥學上可接受的鹽,溶劑合 物或前藥,
本發(fā)明還提供了這些化合物在預防或治療與組蛋白去己醜化酶活性異常表達相關的 哺乳動物疾病的藥物中的應用。所述的與組蛋白去己醜化酶活性異常表達的相關哺乳動物 疾病包括;癌癥,神經(jīng)變性疾病,病毒感染,炎癥和糖尿病等。
[0007] 因此,本發(fā)明還涉及含有結構式I化合物的藥物組合物。
[000引發(fā)明詳述 所用的定義和術語 本文中所用的術語和定義含義如下: "藥學上可接受的鹽"是指化合物具有療效且無毒的鹽形式。其可由任一酸性基團巧口 駿基)形成陰離子鹽,或由任一堿性基團(如氨基)形成陽離子鹽。本領域已知許多這樣 的鹽。在任何酸性基團巧日駿基)上形成的陽離子鹽,或是在任何堿性基團(如氨基)上 形成的陰離子鹽。這些鹽有許多是本領域已知的,如陽離子鹽包括堿金屬(如鋼和鐘)和 堿±金屬巧日鎮(zhèn)和巧)的鹽W及有機鹽巧日使鹽)。還可通過使用相應的酸處理堿性形式 的(I)方便地獲得陰離子鹽,這樣的酸包括無機酸如硫酸、硝酸、憐酸等;或有機酸如己酸、 丙酸、徑基己酸、2-徑基丙酸、2-氧代丙酸、草酸、丙二酸、玻巧酸、馬來酸、富馬酸、蘋果酸、 酒石酸、2-徑基-1,2, 3-丙三酸、甲橫酸、己橫酸、苯甲橫酸、4-甲基苯橫酸、環(huán)己基亞橫酸、 2-徑基苯甲酸、4-氨基-2-徑基苯甲酸等。這些鹽是熟練技術人員熟知的,熟練的技術人員 可制備本領域知識所提供的任何鹽。此外,熟練技術人員可根據(jù)溶解度、穩(wěn)定性、容易制劑 等因素取某種鹽而舍另一種鹽。這些鹽的測定和最優(yōu)化在熟練技術人員的經(jīng)驗范圍內(nèi)。
[0009] "前藥"是指藥物經(jīng)過化學結構修飾后得到的在體外無活性或活性較小、在體內(nèi)經(jīng) 酶或非酶的轉化釋放出活性藥物而發(fā)揮藥效的化合物。
[0010] 所述化合物的制備方法,反應步驟及反應式如下: 制備方法包括如下步驟: 合成路線;W剛噪美辛為原料,先與甘氨酸甲醋縮合,再與徑胺鐘親核反應,最后制得 終產(chǎn)物;反應式如下: 合成路線:
上述合成路線反應式中的試劑:(1)甘氨酸甲醋,0-苯并三氮哇-N,N,N',N'-四甲基 脈四氣棚酸,三己胺,二氯甲焼;似徑胺鐘,無水甲醇; 制備所述組蛋白去己醜酶抑制劑的中間體,該中間體是:甲基2-(2-(1-(4-氯苯甲醜 基)-5-甲氧基-2-甲基-1氨-剛噪-3-基)己醜氨基)己酸醋。
[0011] 本領域技術人員可W對上述步驟進行變動W提高收率,他們可據(jù)本領域的基本知 識確定合成的路線,如選擇反應物,溶劑和溫度,可W通過使用各種常規(guī)保護基W避免副反 應的發(fā)生從而提高收率。這些常規(guī)的保護方法可參見例如T.Greene,Protecting化oups inOrganicSynthesis.。
[0012] 由于鋒離子依賴性組蛋白去己醜化酶(HDACs)各亞型催化中也的高度同源性,我 們選擇含有組蛋白去己醜化酶的Hela細胞提取物(包含HDAC1,HDAC2,HDAC3和HDAC8) 來進行酶活性測試。HDACs活性萊光分析方法(兩步法),能快速、方便檢測HDACs活性, 操作簡單,靈敏度高。第一步,含一個己醜化側鏈的賴氨酸HDACs萊光底物(Boc-Lys (ace巧1)-AMC),用含有組蛋白去己醜化酶的化la細胞提取物樣本賠育,使底物脫去己醜 基,激活底物。第二步,用族酶水解Boc-Lys-AMC,產(chǎn)生AMC這一萊光基團(即發(fā)色團),在發(fā)