生物體物質(zhì)捕獲用的過濾器的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及可以高效地捕獲血中循環(huán)癌細(xì)胞（CirculatingTumorCell，以下稱 作CTC)的過濾器。
【背景技術(shù)】
[0002] 癌細(xì)胞濃縮的研究/臨床意義極為重大，只要是可以將血液中的癌細(xì)胞濃縮，則 可以應(yīng)用在癌癥的診斷中。例如，癌癥預(yù)后及治療的最重要的因素是初診時(shí)及處置時(shí)有無 癌細(xì)胞的轉(zhuǎn)移。癌細(xì)胞的初始擴(kuò)散若達(dá)到外周血中時(shí)，則檢測(cè)CTC是判斷癌癥的病情進(jìn)展 的有用手段。但是，由于在血液中絕對(duì)優(yōu)勢(shì)地大量存在著紅細(xì)胞、白細(xì)胞等血液成分，因此 極少量的CTC的檢測(cè)是非常困難的。
[0003] 近年來提出了通過使用利用了聚對(duì)二甲苯的樹脂過濾器高效地檢測(cè)少量的CTC 的方法（專利文獻(xiàn)1)。
[0004] 或者，還提出了通過使用了金屬代替樹脂的過濾器來提高過濾器的強(qiáng)度、利用白 細(xì)胞與癌細(xì)胞變形能力的差異進(jìn)行分離的方法（專利文獻(xiàn)2)。
[0005] 現(xiàn)有技術(shù)文獻(xiàn)
[0006] 專利文獻(xiàn)
[0007] 專利文獻(xiàn)1 :國(guó)際公開第2010/135603號(hào)
[0008] 專利文獻(xiàn)2 :日本特開2013/42689號(hào)
[0009] 非專利文獻(xiàn)
[0010] 非專利文獻(xiàn)1 :《化學(xué)便覧基礎(chǔ)編》日本化學(xué)會(huì)編、丸善、修訂4版、1993年
[0011] 非專利文獻(xiàn)2:A.Yamamotoetal.，J.Biomed.Mater.Res.，39, 331 (1998)

【發(fā)明內(nèi)容】

[0012] 發(fā)明預(yù)解決的技術(shù)問題
[0013] 發(fā)明者們?cè)谶M(jìn)行使用了金屬的過濾器的研究時(shí)，認(rèn)為存在以下所示的課題。
[0014] S卩，離子化傾向比氫高的金屬，例如1%、六1、!1、(>46、附、311等在乙二胺四乙酸二 鈉（EDTA)、檸檬酸、氟化鈉等強(qiáng)力的絡(luò)合劑存在時(shí)會(huì)發(fā)生溶解。另外，該EDTA、檸檬酸、氟化 鈉作為體外用的血液凝固藥使用。之前的專利文獻(xiàn)2中，使用EDTA作為血液凝固藥。
[0015] 離子化傾向用在水溶液中的水合離子與單體金屬之間的標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位的順 序進(jìn)行表示。此時(shí)，水合金屬離子以作為無限稀釋狀態(tài)的假設(shè)的lmol/kg的理想溶液狀 態(tài)為基準(zhǔn)，該標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位與水合金屬離子的標(biāo)準(zhǔn)摩爾生成Gibbs自由能變化有以下 (式1)的關(guān)系。這里，F(xiàn)是法拉第常數(shù)、z是離子的電荷。
[0016] AfG°=zFE° (式 1)
[0017] 以下示出自非專利文獻(xiàn)1引用的代表性標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位。
[0018] 廉價(jià)金屬
[0019]
[0035] 上文中，標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位比氫低的廉價(jià)金屬被水中所含的H+氧化。特別是，該 傾向在H+濃度高的酸性溶液中尤為顯著。其中，當(dāng)上文所述的EDTA等絡(luò)合能力高的物質(zhì) 存在時(shí)，廉價(jià)金屬發(fā)生溶解、變色。
[0036] 不銹鋼（例如鎳/鉻/鐵合金等）是為了應(yīng)對(duì)該課題而設(shè)計(jì)的金屬，但在技術(shù)上 仍未確立利用后述的電鍍來形成不銹鋼。
[0037] 因此，出現(xiàn)了使用貴金屬的想法，作為能夠進(jìn)行電鍍的貴金屬，可舉出Au、Ag、Ir、 Pd、Pt、Cu等。其中，標(biāo)準(zhǔn)氧化還原電位高的Ir、Pt、Au僅溶解在具有強(qiáng)力的氧化劑和絡(luò)合 劑的部分液體（王水等）中。其中，氧化還原電位最高的Au最難溶解，氧化還原電位第二 高的Pt第二難溶。
[0038] 另外，已知除了Au之外的金屬具有細(xì)胞毒性。例如，給出了金屬對(duì)細(xì)胞毒性的順 序的論文有非專利文獻(xiàn)2。根據(jù)非專利文獻(xiàn)2,金屬離子的毒性如下所述。Ag、Ir等貴金屬 的細(xì)胞毒性也很高。
[0039] 毒性強(qiáng)Cd2+>In3+>V3+>Be2+>Sb3+>Ag+>Hg2+>Cr6+>Co2+>Bi3+>Ir4+ > Cr3+>Hg+>Cu2+>Rh3+>Tl3+>Sn2+>Ga3+>Pb2+>Cu+>Mn2+>Tl+>Ni2+>Zn2+ > Y3+>W6+>Fe3+>Pd2+>Fe2+>Ti4+>Hf4+>Ru3+>Sr2+>Sn4+>Ba2+>Cs+>Nb5+ > Ta5+>Zr4+>Al3+>Mo5+>Rb+ >Li+ 毒性弱
[0040] 基于以上的理由，作為一個(gè)有希望的手段可以利用Au制作過濾器。但是，Au是昂 貴的、對(duì)成本不利。
[0041] 此外，由于金屬與血液成分的親和性差，因此假設(shè)在金屬表面處理生物相容性物 質(zhì)時(shí)，形成氧化覆膜的金屬由于表面狀態(tài)穩(wěn)定，因此具有生物相容性物質(zhì)難以吸附的問題。
[0042] 本發(fā)明的目的在于改善現(xiàn)有的CTC捕獲用過濾器，在維持現(xiàn)有金屬過濾器的耐壓 性的同時(shí)，賦予防銹性、降低細(xì)胞毒性、提高生物相容性。
[0043] 用于解決技術(shù)問題的方法
[0044] 本發(fā)明者們進(jìn)行了深入研究，結(jié)果發(fā)現(xiàn)通過對(duì)由除金以外的金屬制作的生物體物 質(zhì)捕獲用過濾器的表面實(shí)施化學(xué)鍍金，可以解決上述課題。
[0045] S卩，本發(fā)明提供一種生物體物質(zhì)捕獲用的過濾器，其特征在于，對(duì)由除金以外的金 屬制作的生物體物質(zhì)捕獲用過濾器的表面實(shí)施鍍金，鍍金是化學(xué)鍍金。
[0046] 化學(xué)鍍金也可以不含氰化物。
[0047] 生物體物質(zhì)捕獲用的過濾器可以以鎳、銀、鈀或銅為主成分，也可以以含有鎳、銀、 鈀或銅的合金作為主成分。
[0048] 化學(xué)鍍金在為置換型鍍金時(shí)，也可以是由存在于置換型鍍金上的還原型鍍金的組 合所構(gòu)成的。
[0049] 置換型鍍金可以是含有亞硫酸金的非氰化物型。
[0050] 鍍金的厚度可以是0.05ym以上且Iym以下。
[0051 ] 生物體物質(zhì)還可以是細(xì)胞、也可以是癌細(xì)胞。
[0052] 可以在鍍金上利用有機(jī)物質(zhì)實(shí)施表面處理，有機(jī)物質(zhì)可以配位結(jié)合于鍍金上的 金，有機(jī)物質(zhì)可以是具有選自疏基、硫釀基及^硫基中的至少1種官能團(tuán)的化合物，具有生 物相容性的聚合物也可化學(xué)吸附在有機(jī)物質(zhì)上。
[0053] 生物體物質(zhì)捕獲用過濾器的貫通孔的開口形狀可以包含選自圓、橢圓、圓角長(zhǎng)方 形、長(zhǎng)方形及正方形中的1種以上形狀。生物體物質(zhì)捕獲用過濾器的貫通孔的開口形狀包 含選自長(zhǎng)方形及圓角長(zhǎng)方形中的1種以上形狀，其短邊的長(zhǎng)度可以是5ym以上且15ym以 下。
[0054] 生物體物質(zhì)捕獲用過濾器的膜厚可以是3ixm以上且50ixm以下。
【附圖說明】
[0055] 圖1是表示使用在覆金屬層疊板（MCL)上粘貼有可剝離銅箱（進(jìn)行鍍銅時(shí)為Ni 箱）的基板來制造金屬制薄膜過濾器的方法的示意截面圖。（A)是作為基板使用的帶可剝 離銅箱（進(jìn)行鍍銅時(shí)為Ni箱）的MCL、（B)是對(duì)基板進(jìn)行的光致抗蝕劑層疊、（C)是重疊光 掩模的光致抗蝕劑曝光、（D)是未曝光部的光致抗蝕劑顯影除去、（E)對(duì)未被光致抗蝕劑覆 蓋的部分進(jìn)行電鑄電鍍、（F)從MCL上將實(shí)施了電鑄電鍍層的可剝離銅箱剝離、（G)通過利 用藥液的化學(xué)溶解的可剝離銅箱除去來形成自支撐膜、（H)將殘留在自支撐膜內(nèi)的光致抗 蝕劑除去、形成貫通孔的工序。此外，（I)是進(jìn)行化學(xué)鍍金的工序。
[0056] 圖2是表示使用銅板（進(jìn)行鍍銅時(shí)為Ni板）來制造金屬制薄膜過濾器的方法的 示意截面圖。（A)是作為基板使用的銅板、（B)是對(duì)銅板進(jìn)行光致抗蝕劑層疊、（C)是重疊 光掩模的光致抗蝕劑曝光、（D)是未曝光部的光致抗蝕劑顯影除去、（E)對(duì)未被光致抗蝕劑 覆蓋的部分進(jìn)行電鑄電鍍、（F)通過利用化學(xué)刻蝕的銅板除去來形成自支撐膜、（G)將殘留 在自支撐膜內(nèi)的光致抗蝕劑除去、形成貫通孔的工序。（H)是進(jìn)行化學(xué)鍍金的工序。
【具體實(shí)施方式】
[0057] 使用圖1對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳細(xì)說明。以下示例了過濾器制作方法，同時(shí)進(jìn)行過濾器 的說明。
[0058] 首先，準(zhǔn)備帶可剝離銅箱（進(jìn)行鍍銅時(shí)為Ni箱）的樹脂層。接著，在基板上準(zhǔn)備 光致抗蝕劑。該光致抗蝕劑的厚度優(yōu)選是之后的導(dǎo)體的厚度的1.0倍~2.0倍。該厚度薄 時(shí)，之后的抗蝕劑剝離變難，厚時(shí)，電路形成性變難。具體而言，優(yōu)選是15~50ym的厚度。 接著，重疊光掩模進(jìn)行光致抗蝕劑曝光。然后，利用堿性溶液等進(jìn)行未曝光部的光致抗蝕劑 顯影除去。接著，利用圖形電鍍對(duì)未被光致抗