本發(fā)明涉及微生物載體，更具體的涉及施氏假單胞菌yc4+5-1、微生物制劑、生物礦化菌劑及制備方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、目前，co2驅(qū)油作為一種高效的提高采收率技術(shù)已被廣泛應(yīng)用，該技術(shù)通過(guò)擴(kuò)大波及面積，使原油體積膨脹、降低原油黏度和界面張力等作用機(jī)理提高驅(qū)油效率。除了提高采收率，co2驅(qū)油過(guò)程中還會(huì)將一部分co2封存在地層中，實(shí)現(xiàn)co2的固化埋存，獲得封存co2的收益。因此，co2混相驅(qū)油技術(shù)已成為油藏開發(fā)中的重要手段。但在開發(fā)過(guò)程中，一方面由于重力超覆和黏性指進(jìn)等問(wèn)題，co2極易形成氣竄，并且隨著儲(chǔ)層非均質(zhì)性的增大，co2越易沿著高滲透層發(fā)生突進(jìn)，使得驅(qū)油效率顯著下降。另一方面，由于儲(chǔ)層co2逸散通道的存在，會(huì)發(fā)生嚴(yán)重的co2逸散現(xiàn)象，造成大氣污染和諸多環(huán)境問(wèn)題。

2、目前抑制co2逸散的方法多以氣水交替、泡沫調(diào)堵和凝膠封竄為主。氣水交替注入是目前封堵逸散通道最常用的技術(shù)其原理是通過(guò)水相和氣相的交替注入調(diào)整了流體的注入剖面，擴(kuò)大了波及體積，從而提高了采收率。泡沫體系是利用氮?dú)?、天然氣和co2等氣體與泡沫劑混合形成的水包氣體系，可進(jìn)行選擇性封堵。聚丙烯酰胺凝膠和預(yù)交聯(lián)凝膠顆粒等凝膠類封竄體系可用于裂縫和強(qiáng)非均質(zhì)性儲(chǔ)層的封堵。這幾類防逸散體系存在的主要問(wèn)題為堵劑的封堵強(qiáng)度較低以及穩(wěn)定性較差。因此，相較于傳統(tǒng)修復(fù)手段，具有低粘性、可調(diào)控反應(yīng)速度、滲透性高、膠結(jié)強(qiáng)度可調(diào)控、施工簡(jiǎn)單和綠色高效等特點(diǎn)的基于微生物礦化的裂縫修復(fù)技術(shù)為co2逸散通道的修復(fù)提供了新思路，然而，目前研究的基于正常大氣環(huán)境下微生物修復(fù)混凝土裂縫、大理石裂縫和文物修復(fù)方面有較多研究報(bào)道。但基于油藏環(huán)境下微生物的研究還未見(jiàn)報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、為解決以上問(wèn)題，本發(fā)明提供了施氏假單胞菌yc4+5-1、微生物制劑、生物礦化菌劑及制備方法和應(yīng)用，用以修復(fù)油藏儲(chǔ)層co2逸散通道。

2、為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的：

3、本發(fā)明的第一方面提供了一種施氏假單胞菌(stutzerimonas?stutzeri)yc4+5-1，所述施氏假單胞菌yc4+5-1于2023年12月21日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為cgmccno.29371。

4、本發(fā)明的第二方面提供一種微生物制劑，所述施氏假單胞菌yc4+5-1接種至碳酸酐酶培養(yǎng)基中培養(yǎng)制成所述微生物制劑。

5、所述施氏假單胞菌yc4+5-1或所述微生物制劑在產(chǎn)碳酸酐酶中應(yīng)用。

6、優(yōu)選的，將所述的施氏假單胞菌yc4+5-1接種于碳酸酐酶培養(yǎng)基發(fā)酵20h～25h，發(fā)酵溫度為25℃～35℃。

7、本發(fā)明的第三方面提供一種生物礦化菌劑，所述生物礦化菌劑包含所述施氏假單胞菌yc4+5-1和碳酸酐酶培養(yǎng)基；所述生物礦化菌劑中，施氏假單胞菌yc4+5-1的活菌數(shù)量是105cfu～107cfu。

8、優(yōu)選的，所述每升碳酸酐酶培養(yǎng)基的配方如下：麥芽糖3g/l～3.5g/l、胰蛋白胨10g/l～12g/l、氯化鈉5g/l～6g/l、硫酸鋅1μmol/l～1.2μmol/l，水定容到1l，ph值為6～9。

9、優(yōu)選的，所述生物礦化菌劑的制備方法，包括如下步驟：

10、取施氏假單胞菌yc4+5-1菌液接種于所述培養(yǎng)基，發(fā)酵25h～27h，發(fā)酵溫度為25℃～35℃，得到生物礦化菌劑。

11、所述施氏假單胞菌yc4+5-1、所述微生物制劑或所述的生物礦化菌劑在修復(fù)油藏儲(chǔ)層co2逸散通道的應(yīng)用。

12、所述通過(guò)施氏假單胞菌yc4+5-1代謝產(chǎn)生的碳酸酐酶來(lái)修復(fù)油藏儲(chǔ)層co2逸散通道。

13、在本發(fā)明的一些實(shí)施方式中，所述施氏假單胞菌yc4+5-1通過(guò)代謝產(chǎn)生的碳酸酐酶修復(fù)油藏儲(chǔ)層co2逸散通道。

14、與現(xiàn)有技術(shù)相比較，本發(fā)明具有如下有益效果：

15、本發(fā)明從油藏環(huán)境中分離篩選出了一種產(chǎn)碳酸酐酶的施氏假單胞菌(stutzerimonasstutzeri)yc4+5-1，通過(guò)評(píng)價(jià)其碳酸酐酶活性，發(fā)現(xiàn)其可以高效穩(wěn)定的產(chǎn)碳酸酐酶，碳酸酐酶能夠促進(jìn)co2轉(zhuǎn)化為co32-和hco3-，結(jié)合地層中的ca2+，形成微生物水泥礦化物及沉淀，化學(xué)式為caco3，修復(fù)co2驅(qū)油時(shí)儲(chǔ)層的co2逸散通道，提高驅(qū)油效率，從而提高油氣采收率，防止油氣田開發(fā)過(guò)程中co2逸散的不利影響，還可以固化埋存部分co2，起到減碳的作用。通過(guò)油藏儲(chǔ)層co2逸散通道的修復(fù)實(shí)驗(yàn)可以看出，第1～7天修復(fù)效率較高；第8～15天修復(fù)效率較前5天緩慢，但仍在不斷進(jìn)行修復(fù)，在第15天時(shí)逸散修復(fù)率可以達(dá)到98％以上。

16、生物材料保藏

17、施氏假單胞菌(stutzerimonas?stutzeri)yc4+5-1，于2023年12月21日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心(gmcc)，保藏編號(hào)為cgmcc?no.29371，保藏地址為北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)中國(guó)科學(xué)院微生物研究所。

技術(shù)特征：

1.一種施氏假單胞菌(stutzerimonasstutzeri)yc4+5-1，其特征在于，所述施氏假單胞菌，于2023年12月21日保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為cgmccno.29371。

2.一種微生物制劑，其特征在于，將權(quán)利要求1所述施氏假單胞菌yc4+5-1接種至碳酸酐酶培養(yǎng)基中發(fā)酵制成所述微生物制劑。

3.如權(quán)利要求1所述的施氏假單胞菌yc4+5-1或者權(quán)利要求2所述微生物制劑在產(chǎn)碳酸酐酶中的應(yīng)用。

4.如權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于，將所述施氏假單胞菌yc4+5-1接種于碳酸酐酶培養(yǎng)基發(fā)酵20h～25h，發(fā)酵溫度為25℃～35℃。

5.一種生物礦化菌劑，其特征在于，所述生物礦化菌劑包含權(quán)利要求1所述的施氏假單胞菌yc4+5-1和碳酸酐酶培養(yǎng)基；所述生物礦化菌劑中，施氏假單胞菌yc4+5-1的活菌數(shù)量是105cfu～107cfu。

6.如權(quán)利要求5所述的生物礦化菌劑，其特征在于，所述每升碳酸酐酶培養(yǎng)基的配方如下：麥芽糖3g/l～3.5g/l、胰蛋白胨10g/l～12g/l、氯化鈉5g/l～6g/l、硫酸鋅1μmol/l～1.2μmol/l，水定容到1l，ph值為6～9。

7.如權(quán)利要求6所述的生物礦化菌劑的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：

8.如權(quán)利要求1所述施氏假單胞菌yc4+5-1、權(quán)利要求2所述微生物制劑或權(quán)利要求5所述的生物礦化菌劑在修復(fù)油藏儲(chǔ)層co2逸散通道的應(yīng)用。

9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于，通過(guò)施氏假單胞菌yc4+5-1代謝產(chǎn)生的碳酸酐酶來(lái)修復(fù)油藏儲(chǔ)層co2逸散通道。

技術(shù)總結(jié)
本發(fā)明屬于微生物修復(fù)領(lǐng)域，具體涉及施氏假單胞菌yc4+5?1、微生物制劑、生物礦化菌劑及制備方法和應(yīng)用。所述施氏假單胞菌(Stutzerimonas?stutzeri)yc4+5?1的保藏編號(hào)為：CGMCC?NO.29371。所述施氏假單胞菌yc4+5?1所產(chǎn)的碳酸酐酶能夠修復(fù)CO<subgt;2</subgt;驅(qū)油時(shí)儲(chǔ)層的CO<subgt;2</subgt;逸散通道，提高驅(qū)油效率，從而提高油氣采收率，防止油氣田開發(fā)過(guò)程中CO<subgt;2</subgt;逸散的不利影響，還可以固化埋存部分CO<subgt;2</subgt;，起到減碳的作用。

技術(shù)研發(fā)人員：黃海,何延龍,王鑫,唐思源,陳勇,白璐,劉柯祎,張俊曦
受保護(hù)的技術(shù)使用者：西安石油大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/6