本申請(qǐng)涉及檢測(cè)分析,特別是一種洗發(fā)水抑菌效果的檢測(cè)方法。
背景技術(shù):
1、馬拉色菌(malassezia)為一種嗜脂性酵母菌,是人類及溫血?jiǎng)游锲つw上的正常菌群之一。作為一種條件致病菌,在某些易感因素作用下,馬拉色菌常侵襲皮膚角質(zhì)層引起淺部真菌感染,如花斑糠疹、馬拉色菌毛囊炎、脂溢性皮炎、特應(yīng)性皮炎、銀屑病、甲真菌病及新生兒膿皰病等疾病等。馬拉色菌的感染,易造成病理性頭皮屑,一般表現(xiàn)為頭皮屑過多,毛孔被堵塞,就造成毛發(fā)衰弱狀態(tài),容易細(xì)菌增殖,而刺激皮膚產(chǎn)生頭癢問題。
2、宣稱去頭屑的發(fā)用產(chǎn)品,一般需要做相關(guān)的功效評(píng)估測(cè)試、人體功效測(cè)試,特別是去頭屑的功效,需要招募特殊受試者,同時(shí)測(cè)試周期長(zhǎng),費(fèi)用大。
3、且馬拉色菌較一般菌種培養(yǎng)條件較為特殊,無法直接借鑒其他抗菌抑菌產(chǎn)品所用測(cè)試方法中的菌種培養(yǎng)方法,如僅為簡(jiǎn)單參考培養(yǎng)條件,馬拉色菌的培養(yǎng)將會(huì)受到影響,不能正常的傳代,保存,并用于正常的抑菌測(cè)試。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
1、鑒于所述問題,提出了本申請(qǐng)以便提供克服所述問題或者至少部分地解決所述問題的一種洗發(fā)水抑菌效果的檢測(cè)方法,包括:
2、一種洗發(fā)水抑菌效果的檢測(cè)方法,包括步驟:
3、依據(jù)預(yù)設(shè)條件對(duì)糠秕馬拉色菌進(jìn)行培養(yǎng)得到測(cè)試菌落;其中,所述預(yù)設(shè)條件為29-31℃,mea加吐溫40培養(yǎng)基,稀釋液為含吐溫40的滅菌生理鹽水;
4、通過所述測(cè)試菌落配置菌懸液;其中,所述菌懸液濃度高于1×106cfu/ml;
5、通過所述菌懸液對(duì)待測(cè)物進(jìn)行測(cè)定,確定所述待測(cè)物的抑菌效果。
6、進(jìn)一步地,所述通過所述菌懸液對(duì)待測(cè)物進(jìn)行測(cè)定,確定所述待測(cè)物的抑菌效果的步驟,包括:
7、依據(jù)預(yù)設(shè)條件對(duì)所述待測(cè)物進(jìn)行稀釋,得到測(cè)試樣液;
8、向所述測(cè)試樣液中加入第一體積的菌懸液得到測(cè)試混合液,并將所述在29-31℃的溫度下放置50-70s;
9、所述測(cè)試混合液取樣,加入中和劑,得到待培養(yǎng)液;其中,所述測(cè)試混合液與所述中和劑的體積比為1:9;
10、對(duì)所述待培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng),得到菌落數(shù),并依據(jù)所述菌落數(shù)確定所述待測(cè)物的抑菌效果。
11、進(jìn)一步地,所述對(duì)所述待培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)步驟,包括:
12、將所述待培養(yǎng)液在29-31℃的環(huán)境下放置290-310s;
13、將所述待培養(yǎng)液分成若干份,并按預(yù)設(shè)稀釋梯度進(jìn)行稀釋,得到若干稀釋培養(yǎng)液;
14、將所述稀釋培養(yǎng)液取樣至無菌平皿,加入10-15ml的44-46℃含吐溫40的mea培養(yǎng)基,在29-31℃的環(huán)境下,培養(yǎng)48-72小時(shí)。
15、進(jìn)一步地,還包括:
16、稀釋所述菌懸液濃度至300-1000cfu/ml,得到驗(yàn)證菌液;
17、通過所述驗(yàn)證菌液對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行驗(yàn)證。
18、進(jìn)一步地,所述通過所述驗(yàn)證菌液對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行驗(yàn)證的步驟,包括:
19、通過所述驗(yàn)證菌液確定中和劑的中和效果,具體地,向1ml待測(cè)物中加入9ml的中和劑,加熱至29-31℃維持50-70s,加入1ml驗(yàn)證菌液,在29-31℃的環(huán)境放置290-310s,取樣計(jì)算菌落數(shù),依據(jù)所述菌落數(shù)確定中和效果。
20、進(jìn)一步地,所述通過所述驗(yàn)證菌液對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行驗(yàn)證的步驟,包括:
21、通過所述驗(yàn)證菌液確定中和劑的毒害作用;具體地,向1ml緩沖液中加入9ml的中和劑,加熱至29-31℃維持50-70s,加入1ml驗(yàn)證菌液,在29-31℃的環(huán)境放置290-310s,取樣計(jì)算菌落數(shù),依據(jù)所述菌落數(shù)確定所述中和劑的毒害作用。
22、進(jìn)一步地,所述通過所述驗(yàn)證菌液對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行驗(yàn)證的步驟,包括:
23、通過所述驗(yàn)證菌液確定菌活性;具體地,向10ml緩沖液中加入1ml驗(yàn)證菌液,在29-31℃的環(huán)境放置290-310s,取樣計(jì)算菌落數(shù),依據(jù)所述菌落數(shù)確定所述菌活性。
24、進(jìn)一步地,所述通過所述驗(yàn)證菌液對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行驗(yàn)證的步驟,包括:
25、通過所述驗(yàn)證菌液確定環(huán)境作用;具體地,向10ml待測(cè)物中加入1ml驗(yàn)證菌液,在29-31℃的環(huán)境放置290-310s,取樣計(jì)算菌落數(shù),依據(jù)所述菌落數(shù)確定所述菌活性。
26、進(jìn)一步地,所述測(cè)試菌落的菌活性大于6,為白色凸起菌落。
27、進(jìn)一步地,所述依據(jù)預(yù)設(shè)條件對(duì)糠秕馬拉色菌進(jìn)行培養(yǎng)得到測(cè)試菌落的步驟,包括:
28、通過接種環(huán)劃線接種第1代培養(yǎng)物于mea加吐溫40培養(yǎng)基粗斜面;
29、將接種后的培養(yǎng)基置于29-31℃的環(huán)境下培養(yǎng)48-72h;
30、使用滅菌生理鹽水加吐溫40的混合液洗脫所述培養(yǎng)基的菌落得到測(cè)試菌落。
31、本申請(qǐng)具有以下優(yōu)點(diǎn):
32、在本申請(qǐng)的實(shí)施例中,針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)中對(duì)于洗發(fā)水產(chǎn)品的去屑效果的檢測(cè)方案,都需要人體功效檢測(cè)且沒有對(duì)于馬拉色菌的合適的培養(yǎng)方法,測(cè)試周期較長(zhǎng),費(fèi)用較大的缺點(diǎn),本申請(qǐng)?zhí)峁┝艘环N洗發(fā)水抑菌效果的檢測(cè)方法,包括步驟:依據(jù)預(yù)設(shè)條件對(duì)糠秕馬拉色菌進(jìn)行培養(yǎng)得到測(cè)試菌落;其中,所述預(yù)設(shè)條件為29-31℃,mea加吐溫40培養(yǎng)基,稀釋液為含吐溫40的滅菌生理鹽水;通過所述測(cè)試菌落配置菌懸液;其中,所述菌懸液濃度高于1×106cfu/ml;通過所述菌懸液對(duì)待測(cè)物進(jìn)行測(cè)定,確定所述待測(cè)物的抑菌效果。通過預(yù)設(shè)條件對(duì)馬拉色菌進(jìn)行培養(yǎng),保證馬拉色菌的活性的同時(shí),減少試驗(yàn)成本,從而驗(yàn)證去屑洗發(fā)水對(duì)馬拉色菌的抑菌效果。
1.一種洗發(fā)水抑菌效果的檢測(cè)方法,其特征在于,包括步驟:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述通過所述菌懸液對(duì)待測(cè)物進(jìn)行測(cè)定,確定所述待測(cè)物的抑菌效果的步驟,包括:
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述對(duì)所述待培養(yǎng)液進(jìn)行培養(yǎng)步驟,包括:
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,其特征在于,還包括:
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述通過所述驗(yàn)證菌液對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行驗(yàn)證的步驟,包括:
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述通過所述驗(yàn)證菌液對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行驗(yàn)證的步驟,包括:
7.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述通過所述驗(yàn)證菌液對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行驗(yàn)證的步驟,包括:
8.根據(jù)權(quán)利要求4所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述通過所述驗(yàn)證菌液對(duì)測(cè)定條件進(jìn)行驗(yàn)證的步驟,包括:
9.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述測(cè)試菌落的菌活性大于6,為白色凸起菌落。
10.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法,其特征在于,所述依據(jù)預(yù)設(shè)條件對(duì)糠秕馬拉色菌進(jìn)行培養(yǎng)得到測(cè)試菌落的步驟,包括: