本發(fā)明涉及藥物，具體涉及一種13-o-癸?；?佛波醇酯類衍生物及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、腫瘤是當(dāng)前全球影響人類健康的最普遍和最危險的疾病之一，據(jù)統(tǒng)計，全球每年有超過1400萬人患上腫瘤，使其成為造成死亡的主要原因之一。目前，治療腫瘤主要采用手術(shù)、化療、放療和生物治療等綜合手段，但治療效果并不令人滿意。因此，研究人員一直在努力尋找新的腫瘤治療靶點(diǎn)和開發(fā)新的治療藥物，特別是天然小分子藥物。并且天然產(chǎn)物具有巨大的支架多樣性、復(fù)雜性和生物活性，長期以來在藥物發(fā)現(xiàn)和開發(fā)中發(fā)揮著至關(guān)重要的作用，特別是作為抗癌和抗感染劑。

2、佛波醇酯是一種四環(huán)二萜類化合物，廣泛分布于瑞香科和大戟科植物中，如烏桕、連香樹、乳漿大戟、密花麻黃、麻風(fēng)樹、丁香、小桐子、海漆、澳楊等，由于其多環(huán)骨架中存在多個含氧官能團(tuán)而具有結(jié)構(gòu)多樣性，并且具有多種生物活性，如促腫瘤活性、抗腫瘤活性、抗hiv、抗病毒等。

3、蛋白激酶c(pkc)是一類絲氨酸/蘇氨酸蛋白激酶，根據(jù)其輔助因子的需求，pkc被分為三個亞家族，包括傳統(tǒng)的(α，β，γ)、新型的(δ，ε，η，θ)和非典型的(ζ，λ，ι)亞家族。傳統(tǒng)pkc的激活依賴于甘油二酯(dag)和ca2+，而新型pkc僅依賴dag，非典型pkc不依賴dag和ca2+。佛波醇酯類化合物作為強(qiáng)效、持久的dag類似物，可激活傳統(tǒng)和新型的pkc，影響多種酶的活性、蛋白質(zhì)的生物合成、dna、多胺、細(xì)胞分化過程和基因表達(dá)。此外，最近的研究表明，與癌癥相關(guān)的pkc突變通常是功能喪失的，這表明pkc具有抑癌作用，于是就產(chǎn)生了一種假說，即恢復(fù)而不是抑制pkc的活性可能是對抗癌癥的一種新策略。

4、迄今，現(xiàn)在技術(shù)中未見有13-o-癸?；?佛波醇酯類衍生物制備方法及應(yīng)用的報道。

技術(shù)實現(xiàn)思路

1、本發(fā)明提供一種13-o-癸?；?佛波醇酯類衍生物及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明通過創(chuàng)造性的研究發(fā)現(xiàn)13-o-癸酰基-佛波醇酯類衍生物對人卵巢癌細(xì)胞(a2780)、宮頸癌細(xì)胞(hela)和人肝癌細(xì)胞(hepg2)具有潛在的治療效果。

2、為了實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明實施例提供如下技術(shù)方案：

3、一種13-o-癸?；?佛波醇酯類衍生物，所述衍生物的結(jié)構(gòu)如通式(i)所示：其中r為h(化合物4)、(化合物6a)、(化合物6b)、(化合物6c)、(化合物6d)、(化合物6e)、(化合物6f)、(化合物6g)或(化合物6h)。

4、上述13-o-癸酰基-佛波醇酯類衍生物的制備方法，通式(i)所示化合物的合成路線如下：

5、

6、合成過程如下：

7、(1)化合物1(佛波醇)與叔丁基二甲基氯硅烷反應(yīng)選擇性的保護(hù)過20-oh制得化合物2；

8、(2)化合物2與正癸酸縮合成酯，得到化合物3；

9、(3)化合物3在高氯酸的作用下脫除叔丁基二甲基硅基(tbs)保護(hù)基制得化合物4；

10、(4)化合物3與不同的羧酸縮合成酯制得化合物5a～h；

11、(5)化合物5a～h在高氯酸的作用下脫除tbs保護(hù)基制得化合物6a～h。

12、進(jìn)一步地，化合物4的具體制備過程為：

13、s1、將佛波醇溶于吡啶中，-5℃～5℃加入叔丁基二甲基氯硅烷，室溫攪拌反應(yīng)完全，加入飽和nahco3溶液猝滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)層，用飽和cuso4溶液沖洗有機(jī)層，分液后用無水硫酸鈉干燥、過濾、減壓濃縮、柱層析分離純化得到化合物2；

14、s2、將化合物2和正癸酸溶于二氯甲烷中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，-5℃～5℃加入edci，攪拌10～20min后再加入dmap，攪拌5～15min后移至室溫，攪拌反應(yīng)完全，加入飽和nahco3溶液猝滅反應(yīng)，用二氯甲烷萃取，分液后用無水硫酸鈉干燥、過濾、減壓濃縮，得到化合物3的粗產(chǎn)物，加入hclo4的meoh溶液，室溫下攪拌反應(yīng)完全，加入飽和nahco3溶液猝滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取，分液后用無水硫酸鈉干燥、過濾、減壓濃縮、柱層析分離純化得化合物4。

15、其中，佛波醇和叔丁基二甲基氯硅烷的摩爾比為1∶5，化合物2、正癸酸、edci和dmap的摩爾比為1∶(1.0～1.5)∶(1.0～1.5)∶1；化合物2和高氯酸的摩爾比為1∶25。

16、進(jìn)一步地，化合物6a～h的具體制備過程為：

17、s1、將佛波醇溶于吡啶中，-5℃～5℃加入叔丁基二甲基氯硅烷，室溫攪拌反應(yīng)完全，加入飽和nahco3溶液猝滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取，合并有機(jī)層，用飽和cuso4溶液沖洗有機(jī)層，分液后用無水硫酸鈉干燥、過濾、減壓濃縮、柱層析分離純化得到化合物2；

18、s2、將化合物2和正癸酸溶于二氯甲烷中，氮?dú)獗Ｗo(hù)下，-5℃～5℃加入edci，攪拌10～20min后再加入dmap，攪拌5～15min后移至室溫，攪拌反應(yīng)完全，加入飽和nahco3溶液猝滅反應(yīng)，用二氯甲烷萃取，分液后用無水硫酸鈉干燥、過濾、減壓濃縮，柱層析分離純化得到化合物3；

19、s3、將化合物3和乙酸、(s)-2-甲基丁酸、苯甲酸、4-氯苯甲酸、4-氟苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、3-吡啶甲酸或2-甲酸吡嗪溶于二氯甲烷中，-5℃～5℃加入edci，攪拌10～20min后再加入dmap，攪拌5～15min后移至室溫，攪拌反應(yīng)完全，加入飽和nahco3溶液猝滅反應(yīng)，用二氯甲烷萃取，分液后用無水硫酸鈉干燥、過濾、減壓濃縮，加入hclo4的meoh溶液，室溫下攪拌反應(yīng)完全，加入飽和nahco3溶液猝滅反應(yīng)，用乙酸乙酯萃取，分液后用無水硫酸鈉干燥、過濾、減壓濃縮、柱層析分離純化得化合物6a～h。

20、其中，佛波醇和叔丁基二甲基氯硅烷的摩爾比為1∶5，化合物2、正癸酸、edci和dmap的摩爾比為1∶(1.0～1.5)∶(1.0～1.5)∶1；化合物3和乙酸、(s)-2-甲基丁酸、苯甲酸、4-氯苯甲酸、4-氟苯甲酸、4-甲氧基苯甲酸、3-吡啶甲酸或2-甲酸吡嗪以及edci、dmap的摩爾比為1∶3∶3.5∶3；化合物3和高氯酸的摩爾比為1∶25。

21、前述的13-o-癸?；?佛波醇酯類衍生物在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用，所述腫瘤是指人卵巢癌、子宮頸癌或人肝癌。

22、進(jìn)一步地，使用所述13-o-癸?；?佛波醇酯類衍生物在制備抑制腫瘤細(xì)胞增殖、誘導(dǎo)其焦亡或促進(jìn)其凋亡藥物中的應(yīng)用，所述腫瘤細(xì)胞為a2780、hela或hepg2。

23、本發(fā)明選用mtt法對所述的13-o-癸?；?佛波醇酯類衍生物進(jìn)行了體外活性測試，活性測試表明，本發(fā)明所合成的化合物對人卵巢癌細(xì)胞(a2780)、宮頸癌細(xì)胞(hela)和人肝癌細(xì)胞(hepg2)具有良好的抗增值活性，化合物6b的ic50值最低，為13.58μm。

24、本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn)：

25、1.本發(fā)明設(shè)計并合成了9個13-o-癸?；?佛波醇酯衍生物。研究結(jié)果表明優(yōu)選化合物6b對a2780、hepg2和hela細(xì)胞均具有良好的抑制作用，ic50值分別為13.58、19.79和16.94μm，強(qiáng)于陽性對照組tpa。

26、2.本發(fā)明設(shè)計合成路線未見報道。

27、3.化合物6b存在于天然產(chǎn)物中。