本發(fā)明涉及中藥領(lǐng)域，具體涉及從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物及其制備方法與應(yīng)用。

背景技術(shù)：

1、淫羊藿為小檗科植物淫羊藿、箭葉淫羊藿、柔毛淫羊藿或朝鮮淫羊藿的干燥葉，其中箭葉淫羊藿分布最廣、使用最多。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，箭葉淫羊藿具有廣泛的藥理作用，如抗腫瘤、抗氧化、抗骨質(zhì)疏松、調(diào)節(jié)免疫功能、抗動(dòng)脈粥樣硬化和抗抑郁活性等。根據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，黃酮是箭葉淫羊藿中的主要有效成分類型，而異戊烯基黃酮是在黃酮骨架上有異戊烯基取代的一類結(jié)構(gòu)類型，通常具有更好的親脂性和藥理活性。

2、乳腺癌是常見的多發(fā)病，嚴(yán)重威脅著人們的生命安全和身體健康，特別是人乳腺癌細(xì)胞mcf-7引起的乳腺癌，現(xiàn)雖有治療藥物，但效果有限，中藥活性成分復(fù)雜，具有多重靶向性，而且有治療疾病的獨(dú)特療效，從原藥中提取活性成分用于治療特定的疾病，是中藥發(fā)展的新趨勢(shì)，因此本申請(qǐng)要解決的技術(shù)問題之一是，從箭葉淫羊藿中發(fā)現(xiàn)新的活性成分(化合物)，之二是，如何從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物，之三是，實(shí)現(xiàn)在制備治療乳腺腫瘤(癌)藥物中的應(yīng)用，但至今未見有公開的報(bào)道。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路

1、針對(duì)上述情況，為克服現(xiàn)有技術(shù)之不足，本發(fā)明之目的在于，提供從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物及其制備方法與應(yīng)用，可有效解決從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物，實(shí)現(xiàn)在制備治療乳腺腫瘤(癌)藥物中的應(yīng)用問題。

2、本發(fā)明解決的技術(shù)方案是，從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物，化合物(r)-epimesatine?j(1a)和(s)-epimesatine?j(1b)為對(duì)映體，其分子結(jié)構(gòu)式分別為：

3、

4、化合物(2”r,2”'s)-epimesatine?k(2a)和(2”s,2”'r)-epimesatine?k(2b)為對(duì)映體，其分子結(jié)構(gòu)式分別為：

5、

6、其制備方法是：

7、將干燥的箭葉淫羊藿地上部分粉碎，用乙醇，回流提取，得浸膏，用水混懸成混懸液，再分別用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別得石油醚部位浸膏、二氯甲烷部位浸膏、乙酸乙酯部位浸膏和正丁醇部位浸膏，對(duì)二氯甲烷部位浸膏，采用硅膠柱層析法進(jìn)行梯度洗脫分離，根據(jù)薄層色譜(tlc)顯色結(jié)果將相似部分合并，得到極性段fr.a……fr.g、fr.h；

8、將極性段fr.g用硅膠柱層析，以石油醚/乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，減壓回收溶劑得到多個(gè)組分，然后將所有組分通過薄層色譜(tlc)點(diǎn)板，將薄層板上吸收相似的組分合并，得18個(gè)第一分組分fr.f1……fr.f17、fr.f18；

9、將第一分組分fr.g17經(jīng)硅膠層析，以石油醚/乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫，減壓回收得到多個(gè)組分，然后將多個(gè)組分通過薄層色譜(tlc)點(diǎn)板，對(duì)薄層板上吸收相似的組分合并，得19個(gè)第二分組分fr.g17.1、fr.g17.2、fr.g17.3……fr.g17.15……fr.g17.19；

10、將第二分組分fr.g17.15經(jīng)ods柱色譜層析，以甲醇/水進(jìn)行梯度洗脫，減壓回收溶劑得到多個(gè)組分，然后將多個(gè)組分通過薄層色譜(tlc)點(diǎn)板，對(duì)薄層板上吸收相似的組分合并，得到12個(gè)第三分組分fr.g17.15.1、fr.g17.15.2、fr.g17.15.3……fr.g17.15.9、fr.g17.15.9……fr.g17.15.12；

11、將第三分組分fr.g17.15.9經(jīng)半制備hplc純化，采用液相色譜柱，流動(dòng)相為乙腈:水，流速為1ml/min，收集保留時(shí)間tr14.0?min的流分，干燥，得化合物(r)-epimesatine?j，收集保留時(shí)間tr13.7?min的流分，干燥，得化合物(s)-epimesatine?j。

12、將第三分組分fr.g17.15.10經(jīng)ods柱色譜層析，以甲醇/水進(jìn)行梯度洗脫，減壓回收溶劑得到多個(gè)組分，然后將多個(gè)組分通過薄層色譜(tlc)點(diǎn)板，對(duì)薄層板上吸收相似的組分合并，得13個(gè)組分fr.g17.15.10.1、fr.g17.15.10.2、fr.g17.15.10.3……fr.g17.15.10.6……g17.15.10.13；

13、將組分fr.g17.15.10.6經(jīng)半制備hplc純化，采用液相色譜柱，流動(dòng)相為乙腈:水，流速為2ml/min，分離得到7個(gè)分組分fr.g17.15.10.6.1、fr.g17.15.10.6.2……fr.g17.15.10.6.7，將分組分fr.g17.15.10.6.1再次經(jīng)hplc純化，采用液相色譜柱，流動(dòng)相乙腈:水，流速為2ml/min，收集保留時(shí)間tr42.2?min的流分，干燥，得到化合物化合物(2”r,2”'s)-epimesatine?k，收集保留時(shí)間tr48.9?min的流分，干燥，得化合物(2”s,2”'r)-epimesatine?k。

14、上述四個(gè)異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物(r)-epimesatine?j、(s)-epimesatine?j、(2”r,2”'s)-epimesatine?k和(2”s,2”'r)-epimesatine?k對(duì)人乳腺癌細(xì)胞mcf-7的細(xì)胞活力有顯著的抑制作用，具有抗乳腺癌活性，實(shí)現(xiàn)在制備治療乳腺癌藥物中的應(yīng)用。

15、本發(fā)明原料豐富，制備方法易操作，可有效從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物(r)-epimesatine?j、(s)-epimesatine?j、(2”r,2”'s)-epimesatine?k和(2”s,2”'r)-epimesatine?k，上述化合物具有抗乳腺癌活性，對(duì)人乳腺癌細(xì)胞mcf-7的細(xì)胞活力有顯著的抑制作用，且對(duì)人正常乳腺細(xì)胞mcf-10a無毒性，可有效用于制備治療乳腺癌藥物，開拓了箭葉淫羊藿的藥用價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值，是治療乳腺癌藥物上的創(chuàng)新，有巨大的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益。

技術(shù)特征：

1.從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物(r)-epimesatine?j?(1a)和(s)-epimesatine?j?(1b)為對(duì)映體，分子結(jié)構(gòu)式為：

2.化合物(2''r,2'''s)-epimesatine?k?(2a)和(2''s,2'''r)-epimesatine?k?(2b)為對(duì)映體，分子結(jié)構(gòu)式為：

3.從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物的制備方法是：

4.權(quán)利要求1所述的從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物在制備抗乳腺癌藥物中的應(yīng)用。

5.根據(jù)權(quán)利要3所述的從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物在制備抗乳腺癌藥物中的應(yīng)用，其特征在于，所述的乳腺癌為乳腺癌細(xì)胞mcf-7。

技術(shù)總結(jié)
從箭葉淫羊藿中提取異戊烯基黃酮對(duì)映體化合物及其制備方法與應(yīng)用，其制備方法是：將箭葉淫羊藿粉碎制膏，用水混懸，分別用石油醚、二氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，得各部位浸膏，用硅膠柱層析法進(jìn)行梯度洗脫分離，根據(jù)薄層色譜（TLC）顯色結(jié)果將相似部分合并，得到多個(gè)極性段；將目標(biāo)極性段層析，梯度洗脫，得多個(gè)組分，然后通過薄層色譜（TLC）點(diǎn)板吸收相似組分合并，得多個(gè)分組分；將目標(biāo)分組分洗脫純化，收集不同保留時(shí)間的流分，干燥，分別得4個(gè)化合物，對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF?7的細(xì)胞活力有顯著的抑制作用，具有抗乳腺癌活性，實(shí)現(xiàn)在制備治療乳腺癌藥物中的應(yīng)用，社會(huì)和經(jīng)濟(jì)效益巨大。

技術(shù)研發(fā)人員：解雙雙,張靖柯,喻翔,鄭曉珂,馮衛(wèi)生
受保護(hù)的技術(shù)使用者：河南中醫(yī)藥大學(xué)
技術(shù)研發(fā)日：
技術(shù)公布日：2025/1/9