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一株產(chǎn)生生物表面活性劑菌及其應(yīng)用的制作方法

文檔序號(hào):12644481閱讀:260來源:國知局
一株產(chǎn)生生物表面活性劑菌及其應(yīng)用的制作方法與工藝
本發(fā)明屬于環(huán)境污染物生物處理
技術(shù)領(lǐng)域
。具體涉及一株產(chǎn)生生物表面活性劑菌及其應(yīng)用。
背景技術(shù)
:生物表面活性劑指生物活體如微生物、植物或動(dòng)物合成的具備一定表面活性的兩性物質(zhì),與化學(xué)合成表面活性劑類似,也包含著親水、親油基團(tuán),是一種天然的表面活性劑。生物表面活性劑同化學(xué)合成表面活性劑相比,具有自身無毒無害、不造成任何污染、化學(xué)結(jié)構(gòu)更加復(fù)雜、生產(chǎn)工藝簡(jiǎn)單、操作環(huán)境安全、種類多樣、有很多特殊官能團(tuán)、合成的原料來源廣和生產(chǎn)成本低等特點(diǎn)。生物表面活性劑主要以糖脂、磷脂、脂肽、脂肪酸、多糖-脂類復(fù)合物和中性類脂衍生物為主。生物表面活性劑具有良好的增溶、乳化、潤濕和滲透作用,因而在含油廢水或土壤的治理領(lǐng)域中有著廣泛的應(yīng)用。此外,生物表面活性劑還可以應(yīng)用于家用洗滌劑、化妝品、藥物和食品工業(yè)等領(lǐng)域。生物表面活性劑以其獨(dú)特的結(jié)構(gòu)和特性、多樣低成本的合成方法、低毒性和可生物降解等優(yōu)點(diǎn),正逐步取代化學(xué)合成表面活性劑。長鏈烷烴是嚴(yán)重破壞生態(tài)環(huán)境的難降解有機(jī)物之一,其化學(xué)性質(zhì)穩(wěn)定、疏水性強(qiáng)、常溫常壓下為固體,因此很難自然降解,會(huì)對(duì)環(huán)境造成長期的危害。其中正十六烷對(duì)環(huán)境危害較大,對(duì)水體造成嚴(yán)重污染。人體接觸正十六烷會(huì)對(duì)皮膚和眼睛有刺激性,吸入正十六烷液體會(huì)對(duì)呼吸道造成刺激,吸入肺部會(huì)引起化學(xué)性肺炎。焦化廢水經(jīng)生化處理后還含有大量長鏈烷烴,而導(dǎo)致水質(zhì)達(dá)不到工業(yè)再生水的標(biāo)準(zhǔn)。近年來,含烴類污染的微生物修復(fù)技術(shù)有了迅速發(fā)展,然而由于大多數(shù)微生物對(duì)長鏈烷烴的降解速度普遍較慢,治理過程耗時(shí)較長,因此對(duì)長鏈烷烴高效降解菌的研究是目前微生物修復(fù)技術(shù)的重點(diǎn)。目前,已報(bào)道的降解烷烴類的微生物主要為細(xì)菌,其中主要有假單胞菌屬、黃桿菌屬、節(jié)桿菌屬、不動(dòng)桿菌屬和無色桿菌屬等。這些細(xì)菌在降解烷烴類物質(zhì)時(shí)也會(huì)產(chǎn)生生物表面活性劑,但產(chǎn)生的生物表面活性劑量少,并且這些細(xì)菌在降解的實(shí)際應(yīng)用中普遍存在問題。如“一株產(chǎn)生物表面活性劑的不動(dòng)桿菌及其應(yīng)用”(CN105505830A)專利技術(shù),該技術(shù)的特點(diǎn)是培養(yǎng)細(xì)菌所用碳源為價(jià)格低廉的下腳料乳酪粉,但產(chǎn)生的生物表面活性劑的排油圈直徑小,產(chǎn)量較低;“一株柴油烷烴組分降解菌及其應(yīng)用”(CN101186890B)專利技術(shù),該技術(shù)可有效降解柴油中所含的烷烴類,但對(duì)正十六烷的降解不徹底,且耗時(shí)較長,在實(shí)際應(yīng)用中可操作性較差。而粘質(zhì)沙雷菌屬用于處理水污染中的烷烴或石油類污染物未見報(bào)道。技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素:本發(fā)明的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的不足,目的是提供一株產(chǎn)生生物表面活性劑菌,該菌種能產(chǎn)生生物表面活性劑,能有效地降解工業(yè)廢水中的長鏈烷烴組分,實(shí)現(xiàn)對(duì)工業(yè)廢水生物強(qiáng)化深度再生處理。為實(shí)現(xiàn)上述目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:一株產(chǎn)生生物表面活性劑菌,來源于荊門石化廠受油類物質(zhì)污染的土壤,經(jīng)人工富集、篩選、分離純化所得到;該菌株為粘質(zhì)沙雷菌(Serratiamarcescens),編號(hào)為O2,菌落為規(guī)則的圓形,邊緣整齊,表面光滑,菌落顏色呈乳白色;通過革蘭氏染色后在顯微鏡下呈陽性,菌體呈桿狀;所述粘質(zhì)沙雷菌(Serratiamarcescens)O2的16SrDNA的GenBank登錄號(hào)為KY174958;菌株SerratiamarcescensO2于2016年11月17日由中國典型培養(yǎng)物保藏中心(武漢大學(xué))保藏,保藏號(hào)為:CCTCCNO:M2016642。所述菌株SerratiamarcescensO2的16SrDNA基因如序列表1所示,序列長度為1489bp。本發(fā)明提供的菌株SerratiamarcescensO2在發(fā)酵降解正十六烷的過程中生成了一種磷脂類生物表面活性劑,磷脂類生物表面活性劑干燥后的產(chǎn)率為0.5~3g/L,發(fā)酵液的表面張力降到24.54mN/m,乳化能力為65~100%。由于此生物表面活性劑具有較強(qiáng)的乳化增溶作用,提高了菌株SerratiamarcescensO2對(duì)正十六烷的降解效率,且濃度越高,降解效率越好。菌株SerratiamarcescensO2應(yīng)用于焦化廢水和石油烴類污染水體的治理與修復(fù),能使正十六烷得到了有效的降解。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn):1、本發(fā)明提供的菌株SerratiamarcescensO2在發(fā)酵過程中能產(chǎn)生一種磷脂類生物表面活性劑,有效促進(jìn)了正十六烷的降解效率,干燥后產(chǎn)量為0.5~3g/L,可將發(fā)酵液的表面張力降低到24.54mN/m,乳化能力為65~100%;產(chǎn)生的生物表面活性劑穩(wěn)定性好,耐高溫和耐高鹽度,有較寬的pH適應(yīng)范圍,實(shí)際應(yīng)用范圍廣。2、本發(fā)明提供的菌株SerratiamarcescensO2適用于不同環(huán)境和不同濃度的正十六烷有效降解:對(duì)濃度為1000mg/L的正十六烷60h降解率可達(dá)100%;對(duì)聯(lián)合焦化廠的廢水COD(80~200mg/L)處理后,出水水質(zhì)COD達(dá)到30~60mg/L,達(dá)到工業(yè)再生水的標(biāo)準(zhǔn)(COD≤60mg/L);對(duì)聯(lián)合焦化廠的廢水中正十六烷的去除率為60~85%。因此,本發(fā)明提供的菌株SerratiamarcescensO2在發(fā)酵過程中能產(chǎn)生磷脂類生物表面活性劑,對(duì)于正十六烷的降解有極大的促進(jìn)作用;菌株SerratiamarcescensO2在應(yīng)用于焦化廢水和石油烴類污染水體的治理與修復(fù)中能有效去除難降解的正十六烷。附圖說明圖1為菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生的生物表面活性劑干燥前的純品照片;圖2為圖1所示生物表面活性劑的紅外吸收光譜圖;圖3為圖1所示生物表面活性劑臨界膠束濃度的測(cè)定圖;圖4為圖1所示生物表面活性劑乳化性能的測(cè)定圖;圖5為菌株SerratiamarcescensO2對(duì)正十六烷的降解曲線。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的描述,并非對(duì)其保護(hù)范圍的限制。實(shí)施例1菌株SerratiamarcescensO2的分離和鑒定土壤樣品采源于荊門石化廠受油類物質(zhì)污染的土壤中,距表層2~5cm,土壤呈深褐色。將采集的土壤樣品2g加入到100ml含正十六烷500mg/L為唯一碳源的LB培養(yǎng)基中,在150r/min和30℃的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)24h,得到初培養(yǎng)液。取初培養(yǎng)液5mL轉(zhuǎn)接于100ml含正十六烷500mg/L為唯一碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中,在150r/min和30℃的恒溫?fù)u床中培養(yǎng)36h,得到中培養(yǎng)液。取中培養(yǎng)液5mL轉(zhuǎn)接于100ml含正十六烷為唯一碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中,在150r/min和30℃的恒溫?fù)u床中馴化36h,轉(zhuǎn)接6次,轉(zhuǎn)接過程中逐漸增大正十六烷的濃度,濃度依次為1000mg/L、1500mg/L、2000mg/L、3000mg/L、4000mg/L和5000mg/L,得到終培養(yǎng)液。取含正十六烷濃度為5000mg/L的終培養(yǎng)液1mL,用去離子水將終培養(yǎng)液按體積比稀釋為10-6的菌懸液;然后取200μL稀釋后的菌懸液涂布于無機(jī)鹽平板上,于37℃的恒溫培養(yǎng)箱中培養(yǎng)48h,待長出菌落后,挑取不同形態(tài)菌落于LB平板上反復(fù)劃線,得到純化的單菌落。挑取單菌落轉(zhuǎn)接于100ml含正十六烷為唯一碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)24h,測(cè)定發(fā)酵液的表面張力,采用氣相色譜法檢測(cè)正十六烷的殘余濃度,確定表面張力小且正十六烷降解率高的菌株,編號(hào)為O2。菌株O2的菌落為規(guī)則的圓形,邊緣整齊,表面光滑,菌落顏色呈乳白色;通過革蘭氏染色后在顯微鏡下呈陽性,菌體呈桿狀;菌株O2的16SrDNA基因序列長度為1489bp,如序列表1所示,提交到GenBank后,登錄號(hào)為KY174958,經(jīng)NCBIBlast檢索,本發(fā)明的菌株O2與粘質(zhì)沙雷菌Serratiamarcescens的相似性達(dá)99%。故,根據(jù)菌株O2的形態(tài)特征和生理生化特征及其16SrDNA基因序列特征,確定菌株O2屬于粘質(zhì)沙雷菌(Serratiamarcescens),將菌株O2命名為SerratiamarcescensO2。菌株SerratiamarcescensO2由中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏,保藏編號(hào)為:CCTCCNO:M2016642,保藏日期為2016年11月17日(見附件1:中國典型培養(yǎng)物保藏中心保藏-用于專利程序的培養(yǎng)物保藏受理通知書)。所述的LB培養(yǎng)基配方為:酵母浸提物5g,蛋白胨10g,氯化鈉10g,去離子水1L,自然pH。所述的無機(jī)鹽培養(yǎng)基配方為:硝酸銨1g,磷酸氫二鈉1.42g,磷酸二氫鉀1.36g,七水硫酸鎂0.432g,氯化鈣0.006g,去離子水1L,自然pH。實(shí)施例2溫度對(duì)菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生生物表面活性劑及降解正十六烷的影響將菌株SerratiamarcescensO2接種至正十六烷濃度為1000mg/L的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中,在120~180r/min、培養(yǎng)溫度分別為27℃、30℃、33℃和36℃的搖床中培養(yǎng)48h,檢測(cè)發(fā)酵液的表面張力,檢測(cè)發(fā)酵液內(nèi)的生物表面活性劑產(chǎn)量,并采用氣相色譜法檢測(cè)溫度對(duì)菌株SerratiamarcescensO2降解正十六烷的影響,結(jié)果見表1。表1溫度對(duì)菌株SerratiamarcescensO2生產(chǎn)生物表面活性劑及降解正十六烷的影響溫度(℃)表面張力(mN/m)產(chǎn)量(g/L)降解率(%)2735.510.50781.73033.70.62195.93332.420.72498.13634.790.67287.2由表1可以看出,菌株SerratiamarcescensO2在27~36℃范圍內(nèi)均可降低發(fā)酵液的表面張力且對(duì)正十六烷有較好的降解效果,在33℃時(shí)降解效果最佳,且發(fā)酵液的表面張力越低,生物表面活性劑的產(chǎn)量越高,正十六烷的降解率越高。本實(shí)施例說明菌株SerratiamarcescensO2在不同的溫度環(huán)境中均可產(chǎn)生生物表面活性劑,能有效降低表面張力大小,并且對(duì)正十六烷的降解性能較好。實(shí)施例3pH值對(duì)菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生生物表面活性劑及降解正十六烷的影響將菌株SerratiamarcescensO2接種至正十六烷濃度為1000mg/L的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中,調(diào)pH值分別為5.0、6.0、7.0和8.0,在120~180r/min和33℃的搖床中培養(yǎng)48h,檢測(cè)發(fā)酵液的表面張力,檢測(cè)發(fā)酵液內(nèi)的生物表面活性劑產(chǎn)量,并采用氣相色譜法檢測(cè)pH值對(duì)菌株SerratiamarcescensO2降解正十六烷的影響,結(jié)果見表2。表2pH值對(duì)菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生生物表面活性劑及降解正十六烷的影響pH表面張力(mN/m)產(chǎn)量(g/L)降解率(%)5.033.310.65080.36.033.640.62281.47.033.040.65491.38.027.590.84399.4從表2可以看出,pH值為8.0時(shí),菌株SerratiamarcescensO2發(fā)酵液的表面張力可降至27.59mN/m,生物表面活性劑的產(chǎn)量為0.843g/L,對(duì)正十六烷的降解率高達(dá)99.4%,且表面張力越低,生物表面活性劑的產(chǎn)量越高,正十六烷的降解率越高。本實(shí)施例說明菌株SerratiamarcescensO2在偏堿性的pH值范圍內(nèi)能有效降低發(fā)酵液的表面張力并產(chǎn)生生物表面活性劑,在中性和偏堿性較寬的pH值范圍內(nèi)正十六烷的降解性能較好。實(shí)施例4搖床轉(zhuǎn)速對(duì)菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生生物表面活性劑及降解正十六烷的的影響將菌株SerratiamarcescensO2接種至正十六烷濃度為1000mg/L的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中,調(diào)節(jié)搖床轉(zhuǎn)速分別為125r/min、150r/min、175r/min和200r/min,33℃的搖床中培養(yǎng)48h,檢測(cè)發(fā)酵液的表面張力,檢測(cè)發(fā)酵液內(nèi)的生物表面活性劑產(chǎn)量,并采用氣相色譜法檢測(cè)正十六烷的殘余濃度,結(jié)果見表3。表3搖床轉(zhuǎn)速對(duì)菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生生物表面活性劑及降解正十六烷的影響搖床轉(zhuǎn)速(r/min)表面張力(mN/m)產(chǎn)量(g/L)降解率(%)12529.990.92397.415025.921.67199.517530.080.74398.420029.31.02099.2從表3可以看出,菌株SerratiamarcescensO2在125~200r/min范圍內(nèi)發(fā)酵液表面張力均在30mN/m左右,對(duì)正十六烷的降解率均大于90%,且表面張力越低,生物表面活性劑的產(chǎn)量越高,正十六烷的降解率越高。其中150r/min時(shí)達(dá)到最低,此時(shí)生物表面活性劑的產(chǎn)量達(dá)到1.671g/L。本實(shí)施例說明菌株SerratiamarcescensO2在較大范圍的搖床轉(zhuǎn)速下均能有效降低表面張力和產(chǎn)生生物表面活性劑,且對(duì)正十六烷的降解率也較高。實(shí)施例5正十六烷濃度對(duì)菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生生物表面活性劑及降解性能的影響將菌株SerratiamarcescensO2接種至正十六烷濃度為500~2000mg/L的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中,pH值為8.0時(shí),在150r/min和33℃搖床中培養(yǎng)48h,檢測(cè)發(fā)酵液的表面張力,檢測(cè)發(fā)酵液內(nèi)的生物表面活性劑產(chǎn)量,并采用氣相色譜法檢測(cè)正十六烷的殘余濃度,結(jié)果如表4所示。表4正十六烷濃度對(duì)菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生生物表面活性劑及降解正十六烷的影響正十六烷濃度(mg/L)表面張力(mN/m)產(chǎn)量(g/L)降解率(%)50028.481.04598.9100024.542.105100150026.311.80799.1200029.040.96497.9從表4可以看出,菌株SerratiamarcescensO2在不同濃度的正十六烷條件下均可將發(fā)酵液的表面張力降至30mN/m以下,生物表面活性劑的產(chǎn)量也較高,正十六烷降解率大于97%,且表面張力越低,生物表面活性劑的產(chǎn)量越高,正十六烷的降解率越高。本實(shí)施例說明菌株SerratiamarcescensO2在較寬濃度范圍內(nèi)均能有效降低發(fā)酵液的表面張力和產(chǎn)生生物表面活性劑,且正十六烷的降解性能較好,為其在實(shí)際環(huán)境中的應(yīng)用提供了保證。實(shí)施例6菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生生物表面活性劑的提取及性能研究將菌株SerratiamarcescensO2在正十六烷濃度為1000~5000mg/L的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中培養(yǎng)36h,發(fā)酵液低溫(10000rpm,30min,4℃)離心去除菌體雜質(zhì),調(diào)上清液pH值至2.0,發(fā)酵液內(nèi)出現(xiàn)絮狀沉淀;4℃靜置12h過夜;10000r/min、4℃離心30min收集沉淀;用pH值為2.0的HCl洗滌沉淀,1mol/L的NaOH將沉淀調(diào)至pH為7.0,得到淺黃色的生物表面活性劑粗品;再用CH2Cl2萃取3次,合并有機(jī)相,旋轉(zhuǎn)蒸發(fā),得到粘稠狀的褐色產(chǎn)物,如圖1所示;將褐色產(chǎn)物冷凍干燥,得到深褐色生物表面活性劑純品,產(chǎn)量為0.5~3g/L。采用紅外分析法和薄層層析(TLC)法對(duì)菌株SerratiamarcescensO2所產(chǎn)生生物表面活性劑進(jìn)行類別鑒定,并對(duì)生物表面活性劑的CMC值、排油圈直徑以及乳化性能進(jìn)行檢測(cè)。生物表面活性劑紅外光譜掃描結(jié)果如圖2所示,3278cm-1處為-OH吸收,2926cm-1處為C-CH2-C吸收;1746cm-1處和1637cm-1處為C=O的吸收;1539cm-1、1451cm-1和1397cm-1處為-NO2的吸收;1069cm-1處為PO-R的吸收;664cm-1處為P=S的吸收。該生物表面活性劑初步鑒定為磷脂類活性劑。將提取的生物表面活性劑的純品溶于甲醇溶液,以苯酚-硫酸試劑為顯色劑;用移液槍吸取少量溶解了生物表面活性劑的甲醇溶液于硅膠板上,點(diǎn)樣的斑點(diǎn)直徑應(yīng)小于2mm;展開劑選用氯仿/甲醇/水為65/15/2(v/v/v),于100℃條件下烘干,在硅膠板上均勻噴灑顯色劑;顯色反應(yīng)結(jié)果為藍(lán)色,說明此生物表面活性劑為磷脂類生物表面活性劑。與紅外光譜掃描鑒定結(jié)果一致,故,可鑒定菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生的生物表面活性劑為磷脂類生物表面活性劑。CMC值的測(cè)量結(jié)果如圖3所示,當(dāng)生物表面活性劑的濃度增加到25mg/L時(shí),發(fā)酵液的表面張力不再降低,表明菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生的生物表面活性劑的臨界膠束濃度為25mg/L。排油圈直徑:在培養(yǎng)皿中加入少量蒸餾水,使其鋪滿整個(gè)培養(yǎng)皿,再加入0.1ml液體石蠟在水面上形成油膜。在油膜中心加提取的生物表面活性劑,油膜被擠向四周形成圓圈,測(cè)量排油圈的直徑為140mm。乳化性能的結(jié)果如圖4所示,72h內(nèi)乳化能力為65~100%。說明菌株SerratiamarcescensO2產(chǎn)生的生物表面活性劑乳化性能良好,是一種較為良好的乳化劑。對(duì)產(chǎn)生的生物表面活性劑進(jìn)行理化性質(zhì)的研究:(1)pH值的穩(wěn)定性:將提取的生物表面活性劑的純品用無菌水溶解配成溶液,分別調(diào)節(jié)溶液pH值為2.0、4.0、6.0、8.0、10.0和12.0,測(cè)定在不同pH值條件下溶液的表面張力(見表5);(2)鹽度穩(wěn)定性:將提取的生物表面活性劑的純品用無菌水溶解配成溶液,在溶液中加入NaCl溶液,使其濃度分別為0%、3%、6%、9%、12%、15%、18%和21%,測(cè)定在不同NaCl濃度條件下溶液的表面張力(見表5);(3)溫度穩(wěn)定性:將提取的生物表面活性劑的純品用無菌水溶解配成溶液,分別在不同溫度下處理不同時(shí)間(1h和2h),取出,恢復(fù)至室溫,測(cè)定溶液的表面張力(見表5)。表5pH值、鹽度和溫度對(duì)生物表面活性劑穩(wěn)定性的影響結(jié)果如表5所示,不同pH值、鹽度和溫度條件下溶液的表面張力變化不大,說明該生物表面活性劑有良好的穩(wěn)定性和耐受性。實(shí)施例7菌株SerratiamarcescensO2對(duì)正十六烷的降解將菌株SerratiamarcescensO2接種至以正十六烷為唯一碳源的無機(jī)鹽培養(yǎng)基中,正十六烷濃度為1000mg/L和pH值為7.0時(shí),在120~180r/min和30℃搖床中培養(yǎng),間隔時(shí)間取樣,利用氣相色譜儀檢測(cè)正十六烷殘留量,繪制降解曲線,實(shí)驗(yàn)結(jié)果如圖5所示。由圖5可見,60h時(shí),正十六烷的降解率可達(dá)100%。實(shí)施例8菌株SerratiamarcescensO2對(duì)某聯(lián)合焦化廠廢水的降解某聯(lián)合焦化廠生化處理后的廢水COD為80~200mg/L,未能達(dá)到工業(yè)再生水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)。將菌株SerratiamarcescensO2接種至裝有該焦化廢水的燒瓶中,在120~180r/min和30℃搖床中培養(yǎng)48h,能將出水COD降低到30~60mg/L,達(dá)到工業(yè)再生水的標(biāo)準(zhǔn)(COD≤60mg/L);氣質(zhì)聯(lián)用分析處理后的焦化廢水,正十六烷的去除率達(dá)到80%。說明菌株SerratiamarcescensO2對(duì)焦化廢水中的正十六烷也有較強(qiáng)的降解能力。本具體實(shí)施方式具有以下優(yōu)點(diǎn):1、本具體實(shí)施方式的菌株SerratiamarcescensO2在發(fā)酵過程中能產(chǎn)生一種磷脂類生物表面活性劑,有效促進(jìn)了正十六烷的降解效率,干燥后產(chǎn)量為0.5~3g/L,可將發(fā)酵液的表面張力降低到24.54mN/m,乳化能力為65~100%;產(chǎn)生的生物表面活性劑穩(wěn)定性好,耐高溫和耐高鹽度,有較寬的pH適應(yīng)范圍,實(shí)際應(yīng)用范圍廣。2、本具體實(shí)施方式的菌株SerratiamarcescensO2適用于不同環(huán)境及不同濃度的正十六烷均能有效降解:對(duì)濃度為1000mg/L的正十六烷60h降解率可達(dá)100%;對(duì)聯(lián)合焦化廠的廢水COD(80~200mg/L)處理后,出水水質(zhì)COD達(dá)到30~60mg/L,達(dá)到工業(yè)再生水的標(biāo)準(zhǔn)(COD≤60mg/L);對(duì)聯(lián)合焦化廠廢水中正十六烷的去除率為60~85%。因此,本具體實(shí)施方式的菌株SerratiamarcescensO2在發(fā)酵過程中能產(chǎn)生磷脂類生物表面活性劑,對(duì)于正十六烷的降解有極大的促進(jìn)作用;菌株SerratiamarcescensO2在應(yīng)用于焦化廢水和石油烴類污染水體的治理與修復(fù)中能有效去除難降解的正十六烷。序列表<1>1489<2>DNA<3>粘質(zhì)沙雷菌Serratiamarcescens<4>1CACGGATAAAAGTGGTAGCGCCCTCCCGAAGGTTAAGCTACCTACTTCTT51TTGCAACCCACTCCCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAA101CGTATTCACCGTAGCATTCTGATCTACGATTACTAGCGATTCCGACTTCA151TGGAGTCGAGTTGCAGACTCCAATCCGGACTACGACATACTTTATGAGGT201GGGTAAAGGCCTACCAAGGCGACGATCTGTAGCGGGTCTGAGAGGATGAT251CCGCTTGCTCTCGCGAGGTCGCTTCTCTTTGTATATGCCATTGTAGCACG301TGTGTAGCCCTACTCGTAAGGGCCATGATGACTTGACGTCATCCCCACCT351TCCTCCAGTTTATCACTGGCAGTCTCCTTTGAGTTCCCGGCCGAACCGCT401GGCAACAAAGGATAAGGGTTGCGCTCGTTGCGGGACTTAACCCAACATTT451CACAACACGAGCTGACGACAGCCATGCAGCACCTGTCTCAGAGTTCCCGA501AGGCACCAATCCATCTCTGCTAAGTTCTCTGGATGTCAAGAGTAGGTAAG551GTTCTTCGCGTTGCATCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGG601CCCCCGTCAATTCATTTGAGTTTTAACCTTGCGGCCGTACTCCCCAGGCG651GTCGATTTAACGCGTTAGCTCCGGAAGCCACGCCTCAAGGGCACAACCTC701CAAATCGACATCGTTTACAGCGTGGACTACCAGGGTATCTAATCCTGTTT751GCTCCCCACGCTTTCGCACCTGAGCGTCAGTCTTCGTCCAGGGGGCCGCC801TTCGCCACCGGTATTCCTCCAGATCTCTACGCATTTCACCGCTACACCTG851GAATTCTACCCCCCTCTACGAGACTCTAGCTTGCCAGTTTCAAATGCAGT901TCCCAGGTTGAGCCCGGGGATTTCACATCTGACTTAACAAACCGCCTGCG951TGCGCTTTACGCCCAGTAATTCCGATTAACGCTTGCACCCTCCGTATTAC1001CGCGGCTGCTGGCACGGAGTTAGCCGGTGCTTCTTCTGCGAGTAACGTCA1051ATTGATGAGCGTATTAAGTTCACCACCTTCCTCCTCGCTGAAAGTGCTTT1101ACAACCCGAAGGCCTTCTTCACACACGCGGCATGGCTGCATCAGGCTTGC1151GCCCATTGTGCAATATTCCCCACTGCTGCCTCCCGTAGGAGTCTGGACCG1201TGTCTCAGTTCCAGTGTGGCTGGTCATCCTCTCAGACCAGCTAGGGATCG1251TCGCCTAGGTGAGCCATTACCCCACCTACTAGCTAATCCCATCTGGGCAC1301ATCTGATGGCAAGAGGCCCGAAGGTCCCCCTCTTTGGTCTTGCGACGTTA1351TGCGGTATTAGCTACCGTTTCCAGTAGTTATCCCCCTCCATCAGGCAGTT1401TCCCAGACATTACTCACCCGTCCGCCGCTCGTCACCCAGGGAGCAAGCTC1451CCCTGTGCTACCGCTCGACTGCATGGTAGCCTCCCCCGC當(dāng)前第1頁1 2 3 
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