本發(fā)明涉及一株副球菌菌株，特別是涉及一種可在缺氧條件下利用硝酸鹽作為電子受體氧化脫除沼氣中硫化氫(H₂S)的善變副球菌菌株。

背景技術(shù)：

沼氣是一種新興的清潔可再生能源，以沼氣為目標(biāo)產(chǎn)物的厭氧發(fā)酵技術(shù)因其良好的能源、環(huán)境效益得到越來(lái)越廣泛的應(yīng)用，將對(duì)緩解我國(guó)能源危機(jī)，保護(hù)環(huán)境具有重要意義。沼氣是一種生物原料經(jīng)厭氧生物發(fā)酵轉(zhuǎn)化產(chǎn)生的一種生物燃料，用于沼氣厭氧發(fā)酵的生物原料主要包括畜禽糞便、秸稈、能源植物、生活垃圾、有機(jī)廢水等廢棄物。目前，我國(guó)沼氣發(fā)酵主要原料為畜禽養(yǎng)殖場(chǎng)糞便和污水，由于畜禽糞便和污水中含有大量蛋白質(zhì)和其它含硫化合物，經(jīng)厭氧發(fā)酵轉(zhuǎn)化，產(chǎn)生的沼氣中含有H₂S氣體成份。H₂S是一種腐蝕性很強(qiáng)的化合物，嚴(yán)重腐蝕管道設(shè)備，H₂S還具有極強(qiáng)的急性毒性，是一種神經(jīng)性毒氣，H₂S含量0.6mg/L時(shí)可使人在0.5-1h內(nèi)致死，含量在1.2-2.8mg/L時(shí)可使人立即致死。同時(shí)，混有H₂S的沼氣燃燒后，H₂S會(huì)轉(zhuǎn)化為硫的氧化物釋放到空氣中，造成大氣污染。因此，為了達(dá)到安全利用沼氣能源和保護(hù)環(huán)境的目標(biāo)，必須在使用前對(duì)沼氣進(jìn)行脫硫處理。

目前，沼氣脫除H₂S的方法主要包括物化法和生物法。物化法脫除H₂S需要大量的化學(xué)藥劑和較高的能耗，還要對(duì)吸附劑或吸收劑進(jìn)行處置，費(fèi)用較高，存在二次污染。在生物脫硫法中，具有高效生物氧化H₂S的功能微生物菌種是脫硫能否實(shí)現(xiàn)的關(guān)鍵。根據(jù)微生物的代謝類型，能夠?qū)₂S(或硫化物)轉(zhuǎn)化為單質(zhì)硫或硫酸鹽的微生物可分為兩大類：①光能自養(yǎng)型硫細(xì)菌；②化能自養(yǎng)型無(wú)色硫細(xì)菌。光能自養(yǎng)型微生物在去除H₂S的過(guò)程中,雖有較高的H₂S去除率和厭氧條件下無(wú)安全隱患等優(yōu)點(diǎn)，但需要大量的輻射能，其經(jīng)濟(jì)成本較高，且容易受光源的限制。故化能自養(yǎng)型微生物成為生物去除沼氣H₂S的較好選擇，在有氧存在條件下，化能自養(yǎng)微生物利用氧氣作為電子受體，但氧氣的調(diào)控比較困難，供氧過(guò)多時(shí)存在爆炸隱患，同時(shí)供氧的同時(shí)會(huì)引入氮?dú)獾绕渌栊詺怏w，降低了沼氣中甲烷的濃度，降低了沼氣的能量效率。而在缺氧條件下，利用氧氣以外的硝酸鹽等其它備選電子受體，可實(shí)現(xiàn)溫和條件下的H₂S脫除。因此，在缺氧條件下，以硝酸鹽作為電子受體，替代氧氣作為電子受體的沼氣生物脫硫研究成為熱點(diǎn)，可有效避免氧氣和沼氣混合引起的安全隱患以及加氧而引入氮?dú)鈱?duì)沼氣能量效率的降低，為我國(guó)沼氣脫硫提供了一條新的技術(shù)途徑。

以硝酸鹽作為電子受體進(jìn)行沼氣生物脫硫的核心是高效功能微生物菌株，因此，高效專性功能菌株的獲得直接關(guān)系到脫硫系統(tǒng)能否構(gòu)建成功，通過(guò)分離篩選高效專性功能菌株再接種于脫硫反應(yīng)器中，可構(gòu)建以專性功能菌株為生物催化劑、硝酸鹽為電子受體的沼氣生物脫硫系統(tǒng)。

技術(shù)實(shí)現(xiàn)要素：

本發(fā)明的目的是提供一種能夠以硝酸鹽作為電子受體脫除沼氣中H₂S的副球菌菌株，該菌株可以作為脫硫微生物接種于脫硫反應(yīng)器中并有良好的脫硫效果。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供善變副球菌(Paracoccus versutus)2#CGMCC No.13321，該菌株保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編100101；保藏日期2016年11月18日，保藏編號(hào)CGMCC No.13321。

善變副球菌菌株CGMCC No.13321采自四川某污水處理廠厭氧污泥。將采集的污泥在厭氧條件下用含硫化合物的富集培養(yǎng)基進(jìn)行馴化，7d后進(jìn)行梯度稀釋，從10^-2、10^-4、10^-6、10^-8、10^-10稀釋度下吸取0.1ml于分離培養(yǎng)基平板涂布，30℃厭氧恒溫培養(yǎng)，經(jīng)多次分離后獲得的該菌株。其中富集培養(yǎng)基：Na₂S₂O₃·5H₂O 5g、KNO₃ 4g、KH₂PO₄ 2g、NaHCO₃ 1g、MgCl₂·6H₂O 0.5g、FeSO₄·7H₂O 0.01g、pH值7.0、自來(lái)水1000mL。121℃，30min高溫滅菌處理。分離培養(yǎng)基：Na₂S₂O₃·5H₂O 10g、KNO₃ 4g、KH₂PO₄ 2g、NaHCO₃ 1g、MgCl₂·6H₂O 0.5g、FeSO₄·7H₂O 0.01g、瓊脂20g、自來(lái)水1000mL、pH7.0-7.5。121℃,30min高溫滅菌處理。

本發(fā)明的菌株在顯微鏡下觀察，菌株細(xì)胞短桿狀，較??；菌落白色凸起,邊緣整齊光滑，表面濕潤(rùn)，平板培養(yǎng)基菌落形態(tài)見(jiàn)圖1，顯微鏡放大1000倍的菌體形態(tài)見(jiàn)圖2。經(jīng)生理生化鑒定為革蘭氏陰性菌。菌株不耐鹽，不能利用檸檬酸鹽；當(dāng)硝酸鹽、亞硝酸鹽或氧化氮存在時(shí)，能以它們?yōu)殡娮邮荏w營(yíng)厭氧生長(zhǎng)。菌株可在15-45℃范圍生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度30-35℃；可在pH7.0-7.5范圍內(nèi)生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)pH7.0。

善變副球菌菌株CGMCC No.13321的固體活化培養(yǎng)基組分為：Na₂S₂O₃·5H₂O 10g、KNO₃ 4g、KH₂PO₄ 2g、NaHCO₃ 1g、MgCl₂·6H₂O 0.5g，F(xiàn)eSO₄·7H₂O 0.01g、瓊脂20g，蒸餾水1000mL,pH7.0-7.5，121℃,30min高溫滅菌處理。

善變副球菌菌株CGMCC No.13321的液體發(fā)酵培養(yǎng)基組分為：Na₂S₂O₃·5H₂O 10g、KNO₃ 4g、KH₂PO₄ 2g、NaHCO₃ 1g、自來(lái)水1000ml、pH7.0-7.5，121℃、30min高溫滅菌處理。

善變副球菌菌株CGMCC No.13321的脫硫培養(yǎng)基組分為：KNO₃ 4g、KH₂PO₄ 1g、NaHCO₃ 1g、自來(lái)水1000ml、pH7.0-7.5，121℃、30min高溫滅菌處理。

本發(fā)明還提供了善變副球菌菌株CGMCC No.13321以硝酸鹽為電子受體在沼氣脫硫中的應(yīng)用。將經(jīng)活化培養(yǎng)與擴(kuò)大培養(yǎng)的善變副球菌菌株CGMCC No.13321的菌液接種到含硝酸鹽的脫硫反應(yīng)器中，連續(xù)通入沼氣，能夠顯著降低沼氣中的H₂S濃度。

善變副球菌菌株CGMCC No.13321應(yīng)用于沼氣脫硫的技術(shù)原理在于善變副球菌菌株CGMCC No.13321接種至脫硫反應(yīng)器后，可以在反應(yīng)器中以硝酸鹽作為電子受體對(duì)H₂S進(jìn)行生物氧化，并進(jìn)行生長(zhǎng)繁殖，達(dá)到沼氣中H₂S脫除的目的。

本發(fā)明中善變副球菌菌株CGMCC No.13321的使用方法：

(1)使用前用固體活化培養(yǎng)基進(jìn)行活化；

(2)將滅菌處理過(guò)的液體發(fā)酵培養(yǎng)基定量備用；

(3)將活化后的菌種分別接種至滅菌處理過(guò)的液體發(fā)酵培養(yǎng)基培養(yǎng)，靜止培養(yǎng)1d-3d；

(4)將菌液按10％比例接種于裝有滅菌處理過(guò)的脫硫培養(yǎng)基的反應(yīng)器中；

(5)通入沼氣，開(kāi)始以小流量通入，以后流量逐漸增大，開(kāi)始進(jìn)行沼氣H₂S脫除處理。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果是：

(1)提供了新的沼氣脫硫菌株：善變副球菌菌株CGMCC No.13321；

(2)善變副球菌菌株CGMCC No.13321從四川省某污水處理廠厭氧污泥中篩選得到，不會(huì)對(duì)周圍環(huán)境和生態(tài)平衡造成危害，符合生態(tài)安全法規(guī)；

(3)善變副球菌菌株CGMCC No.13321具有自養(yǎng)反硝化能力，能夠在沒(méi)有有機(jī)物存在的條件下快速生長(zhǎng)，將硝酸鹽還原成氮?dú)猓瑢⒘蚧瘹溲趸癁榱騿钨|(zhì)或硫酸鹽。這一特性利于通過(guò)外源培養(yǎng)后用于強(qiáng)化對(duì)沼氣硫化氫的去除效率；

(4)善變副球菌菌株CGMCC No.13321能夠在厭氧條件以硝酸鹽作為電子受體去除沼氣中的H₂S，有效避免了傳統(tǒng)以氧氣作為電子受體進(jìn)行沼氣H₂S脫除時(shí)引入甲烷與氧氣混合所帶來(lái)的安全隱患；

(5)善變副球菌菌株CGMCC No.13321以硝酸鹽作為電子受體，對(duì)沼氣中H₂S的去除率高達(dá)93.8％。

說(shuō)明書(shū)附圖

圖1是善變副球菌菌株CGMCC No.13321在平板培養(yǎng)基中的菌落形態(tài)；

圖2是善變副球菌菌株CGMCC No.13321經(jīng)顯微鏡放大1000倍的菌體形態(tài)。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明的技術(shù)內(nèi)容作進(jìn)一步描述。

實(shí)施例一

1、菌株分離純化

取四川成都市第三污水處理廠厭氧污泥。將采集的污泥在厭氧條件下用含硫化合物的富集培養(yǎng)基進(jìn)行馴化，7d后進(jìn)行梯度稀釋，從10^-2、10^-4、10^-6、10^-8、10^-10稀釋度下吸取0.1ml于分離培養(yǎng)基平板涂布，在平板表面出現(xiàn)分散的單個(gè)菌落，挑取單個(gè)菌落，重復(fù)以上操作數(shù)次，最終獲得能夠以硝酸鹽作為電子受體脫除沼氣中H₂S的純化菌株。

其中富集培養(yǎng)基為：Na₂S₂O₃·5H₂O 5g、KNO₃ 4g、KH₂PO₄ 2g、NaHCO₃ 1g、MgCl₂·6H₂O 0.5g、FeSO₄·7H₂O 0.01g、pH值7.0、自來(lái)水1000mL。121℃，30min高溫滅菌處理。分離培養(yǎng)基：Na₂S₂O₃·5H₂O 10g、KNO₃ 4g、KH₂PO₄ 2g、NaHCO₃ 1g、MgCl₂·6H₂O 0.5g、FeSO₄·7H₂O 0.01g、瓊脂20g、自來(lái)水1000mL、pH7.0-7.5。121℃，30min高溫滅菌處理。

2、菌株形態(tài)特征和生理生化特性的鑒定

本發(fā)明菌株在顯微鏡下觀察，菌株細(xì)胞短桿狀，較??；菌落白色凸起,邊緣整齊光滑，表面濕潤(rùn)，平板培養(yǎng)基菌落形態(tài)見(jiàn)圖1，顯微鏡放大1000倍的菌體形態(tài)見(jiàn)圖2。經(jīng)生理生化鑒定為革蘭氏陰性菌。菌株不耐鹽，不能利用檸檬酸鹽；當(dāng)硝酸鹽、亞硝酸鹽或氧化氮存在時(shí)，能以它們?yōu)殡娮邮荏w營(yíng)厭氧生長(zhǎng)。菌株可在15-45℃范圍生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)溫度30-35℃；可在pH7.0-7.5范圍內(nèi)生長(zhǎng)，最適生長(zhǎng)pH7.0。

3、16SrDNA序列分析鑒定

①首先用購(gòu)買(mǎi)于天根生化科技(北京)有限公司的DP302細(xì)菌試劑盒提取純化菌株的總DNA。

②以通用引物27F/1492R進(jìn)行16SrDNA序列擴(kuò)增，擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物用瓊脂糖凝膠電泳和紫外分光光度計(jì)檢測(cè)濃度與純度，當(dāng)紫外投射燈下觀察到和marker相對(duì)應(yīng)位置的清晰條帶時(shí)，初步判斷擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物濃度合格；當(dāng)OD260/OD280比值應(yīng)為1.7-1.9時(shí)，表明擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物純度合格。

③濃度和純度都合格的條件下，對(duì)擴(kuò)增的PCR產(chǎn)物送生工生物工程(上海)股份有限公司專業(yè)測(cè)序公司進(jìn)行測(cè)序分析。將測(cè)序得到的16S rDNA序列在NCBI上進(jìn)行Blast比對(duì)，獲知與善變副球菌(Paracoccus versutus)的序列同源性高達(dá)98％以上,確定純化菌株的分類學(xué)地位。其16S rDNA序列如下：

GCGCACCTTCGGGTGAGCGGCGGACGGGTGAGTAACGCGTGGGAATATGCCCTTTGGTACGGAATAGTCCTGGGAAACTGGGGGTAATACCGTATGCGCCCTTCGGGGGAAAGATTTATCGCCAAAGGATTAGCCCGCGTTGGATTAGGTAGTTGGTGGGGTAATGGCCTACCAAGCCGACGATCCATAGCTGGTTTGAGAGGATGATCAGCCACACTGGGACTGAGACACGGCCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATCTTAGACAATGGGGGCAACCCTGATCTAGCCATGCCGCGTGAGTGATGAAGGCCCTAGGGTTGTAAAGCTCTTTCAGCTGGGAAGATAATGACGGTACCAGCAGAAGAAGCCCCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGGGCTAGCGTTGTTCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCACGTAGGCGGACCGGAAAGTTGGGGGTGAAATCCCGGGGCTCAACCCCGGAACTGCCTTCAAAACTATCGGTCTGGAGTTCGAGAGAGGTGAGTGGAATTCCGAGTGTAGAGGTGAATGCTGGTTAGCGCACGGCCGTCGGGTAGACCCAACTCCCATGGTGTGACGGGCGGTGTGTACAAGGCCCGGGAACGTATTCACCGCGGCATGCTGTTCCGCGATTACTAGCGATTCCAACTTCATGGGGTCGAGTTGCAGACCCCAATCCGAACTGAGATGGCTTTTGGGGATTAACCCACTGTCACCACCATTGTAGCACGTGTGTAGCCCAACCCGTAAGGGCCATGAGGACTTGACGTCATCCACACCTTCCTCCGACTTATCATCGGCAGTTCTTCCAGAGTGCCCAACCAAATGATGGCAACTGGAAGTGTGGGTTGCGCTCGTTGCCGGACTTAACCGAACATCTCACGACACGAGCTGACGACAGCCATGCAGCACCTGTCTCCAGGTCACCGAAGTGAAAGACCCGTCTCCGGGCCGGTCCTGGGATGTCAAGGGTTGGTAAGGTTCTGCGCGTTGCTTCGAATTAAACCACATGCTCCACCGCTTGTGCGGGCCCCCGTCAATTCCTTTGAGTTTTAATCTTGCGACCGTACTCCCCAGGCGGAATGCTTAATCCGTTAGGT

4、純化菌株的種名確定

綜合純化菌株形態(tài)特征、生理生化特性和16SrDNA序列分析，確定該純化菌株為善變副球菌(Paracoccus versutus)。

菌株保藏于中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏地址：北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)，中國(guó)科學(xué)院微生物研究所，郵編100101；保藏日期2016年11月18日，保藏編號(hào)CGMCC No.13321。

實(shí)施例二

本發(fā)明善變副球菌菌株CGMCC No.13321應(yīng)用于沼氣中H₂S脫除。

1、培養(yǎng)基及接種菌液制備

固體活化培養(yǎng)基：Na₂S₂O₃·5H₂O 10g、KNO₃ 4g、KH₂PO₄ 2g、NaHCO₃ 1g、MgCl₂·6H₂O 0.5g，F(xiàn)eSO₄·7H₂O 0.01g、瓊脂20g，蒸餾水1000mL,pH7.0-7.5，121℃,30min高溫滅菌處理。液體發(fā)酵培養(yǎng)基：Na₂S₂O₃·5H₂O 10g、KNO₃ 4g、KH₂PO₄ 2g、NaHCO₃ 1g、自來(lái)水1000ml、pH7.0-7.5，121℃、30min高溫滅菌處理。脫硫培養(yǎng)基：KNO₃ 4g、KH₂PO₄ 1g、NaHCO₃ 1g、自來(lái)水1000ml、pH7.0-7.5，121℃、30min高溫滅菌處理。

將善變副球菌菌株CGMCC No.13321接種到固體活化培養(yǎng)基中，活化培養(yǎng)1d得活化菌種，待用；將活化的菌種接入液體發(fā)酵培養(yǎng)基中，30℃下靜止培養(yǎng)1d-3d得接種菌液(菌液濃度10⁷-10⁸CFU/ml)，待用。

2、沼氣中H₂S脫除處理

將接種菌液按10％的比例接種至裝有250mL的脫硫培養(yǎng)基的反應(yīng)器中；同時(shí)做不加接種菌液的對(duì)照，每組實(shí)驗(yàn)設(shè)置三個(gè)重復(fù)，恒溫30℃連續(xù)通入沼氣，其中沼氣中H₂S的濃度為2000ppm。連續(xù)測(cè)定沼氣中H₂S的去除率，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表1。

表1沼氣H₂S的去除率

由上表可知，溫度為30℃，接種善變副球菌菌株CGMCC No.13321實(shí)驗(yàn)組中的沼氣H₂S濃度比對(duì)照組明顯降低，其中對(duì)照組沼氣H₂S的去除率僅為17.4％，而實(shí)驗(yàn)組沼氣H₂S的去除率高達(dá)92.2％。

實(shí)施例三

善變副球菌菌株CGMCC No.13321用于沼氣H₂S脫除，其與實(shí)施例三相同之處不再重復(fù)，其不同之處在于接種菌液至脫硫反應(yīng)器的處理?xiàng)l件。

處理溫度20℃，連續(xù)測(cè)定沼氣中H₂S的去除率，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

表2沼氣H₂S的去除率

由上表可知，溫度為20℃，接種善變副球菌菌株CGMCC No.13321實(shí)驗(yàn)組中的沼氣H₂S濃度比對(duì)照組明顯降低，其中對(duì)照組沼氣H₂S的去除率僅為6.2％，而實(shí)驗(yàn)組沼氣H₂S的去除率高達(dá)77.1％。與溫度條件30℃相比，雖然善變副球菌菌株CGMCC No.13321對(duì)沼氣H₂S的去除率下降，但依然表現(xiàn)出較好的H₂S脫除效果。

實(shí)施例四

善變副球菌菌株CGMCC No.13321用于沼氣H₂S脫除，其與實(shí)施例三相同之處不再重復(fù)，其不同之處在于通入沼氣中的H₂S濃度。

恒溫30℃連續(xù)通入沼氣，其中沼氣中H₂S的濃度為3000ppm。連續(xù)測(cè)定沼氣中H₂S的去除率，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表2。

表2沼氣H₂S的去除率

由上表可知，接種善變副球菌菌株CGMCC No.13321實(shí)驗(yàn)組中的沼氣H₂S濃度比對(duì)照組明顯降低，其中對(duì)照組沼氣H₂S的去除率僅為11.6％，而實(shí)驗(yàn)組沼氣H₂S的去除率高達(dá)88.6％。與通入沼氣H₂S濃度為2000ppm相比，善變副球菌菌株CGMCC No.13321對(duì)沼氣H₂S的去除率僅略微下降，依然表現(xiàn)出較好的H₂S脫除效果。

實(shí)施例五

善變副球菌菌株CGMCC No.13321用于沼氣H₂S脫除，其與實(shí)施例三相同之處不再重復(fù)，其不同之處在于沼氣中H₂S處理規(guī)模。

將接種菌液按10％的比例接種至裝有10L的脫硫培養(yǎng)基的反應(yīng)器中，連續(xù)測(cè)定沼氣中H₂S的去除率，測(cè)定結(jié)果見(jiàn)表4。

表4沼氣H₂S的去除率

由上表可知，接種善變副球菌菌株CGMCC No.13321實(shí)驗(yàn)組中的沼氣H₂S濃度比對(duì)照組明顯降低，其中對(duì)照組沼氣H₂S的去除率僅為21.6％，而實(shí)驗(yàn)組沼氣H₂S的去除率高達(dá)93.8％。說(shuō)明處理規(guī)模放大后，善變副球菌菌株CGMCC No.13321依然表現(xiàn)出較好的H₂S脫除效果。

序列表

<110>中國(guó)科學(xué)院成都生物研究所

<120>一株善變副球菌菌株及其應(yīng)用

<160>1

<210>1

<211>1142

<212>DNA

<213>善變副球菌(Paracoccus versutus)

<400>1

gcgcaccttc gggtgagcgg cggacgggtg agtaacgcgt gggaatatgc cctttggtac 60

ggaatagtcc tgggaaactg ggggtaatac cgtatgcgcc cttcggggga aagatttatc 120

gccaaaggat tagcccgcgt tggattaggt agttggtggg gtaatggcct accaagccga 180

cgatccatag ctggtttgag aggatgatca gccacactgg gactgagaca cggcccagac 240

tcctacggga ggcagcagtg gggaatctta gacaatgggg gcaaccctga tctagccatg 300

ccgcgtgagt gatgaaggcc ctagggttgt aaagctcttt cagctgggaa gataatgacg 360

gtaccagcag aagaagcccc ggctaactcc gtgccagcag ccgcggtaat acggaggggg 420

ctagcgttgt tcggaattac tgggcgtaaa gcgcacgtag gcggaccgga aagttggggg 480

tgaaatcccg gggctcaacc ccggaactgc cttcaaaact atcggtctgg agttcgagag 540

aggtgagtgg aattccgagt gtagaggtga atgctggtta gcgcacggcc gtcgggtaga 600

cccaactccc atggtgtgac gggcggtgtg tacaaggccc gggaacgtat tcaccgcggc 660

atgctgttcc gcgattacta gcgattccaa cttcatgggg tcgagttgca gaccccaatc 720

cgaactgaga tggcttttgg ggattaaccc actgtcacca ccattgtagc acgtgtgtag 780

cccaacccgt aagggccatg aggacttgac gtcatccaca ccttcctccg acttatcatc 840

ggcagttctt ccagagtgcc caaccaaatg atggcaactg gaagtgtggg ttgcgctcgt 900

tgccggactt aaccgaacat ctcacgacac gagctgacga cagccatgca gcacctgtct 960

ccaggtcacc gaagtgaaag acccgtctcc gggccggtcc tgggatgtca agggttggta 1020

aggttctgcg cgttgcttcg aattaaacca catgctccac cgcttgtgcg ggcccccgtc 1080

aattcctttg agttttaatc ttgcgaccgt actccccagg cggaatgctt aatccgttag 1140

gt 1142