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猴頭菇菌株的制作方法

文檔序號:11540094閱讀:1088來源:國知局
本發(fā)明涉及一種猴頭菇菌株。
背景技術
:猴頭菇hericiumerinaceus(bull.)pers.,屬于多孔菌目、猴頭菌科、猴頭屬,俗稱猴頭菌、刺猬菇、山伏菌、猴頭蘑等。子實體頭狀,常懸于樹干上,布滿針狀菌刺,形狀極似猴子的頭,故名。猴頭菇是一種兼具食、藥用價值的名貴食用菌,食用歷史悠久,鮮嫩的猴頭菇經特殊烹調,色鮮味美,為一種傳統(tǒng)名貴菜肴,與熊掌、燕窩、魚翅列為中國四大名菜,素有“山珍猴頭,海味燕窩”之稱,深受消費者青睞。猴頭菇多糖是從優(yōu)質猴頭菇中提取的有效活性成分,對小白鼠肉瘤180和艾氏腹水癌有明顯的抑制作用,同時具有助消化、利五臟的功能,對慢性胃炎、十二指腸潰瘍等消化道疾病均有較好的療效,能提高人體免疫能力。猴頭菇栽培品種較少,高多糖含量品種更為缺乏,與發(fā)展強勁的猴頭菇產業(yè)極不相稱,市場急需種質創(chuàng)新進一步提升產業(yè)發(fā)展空間。技術實現(xiàn)要素:本發(fā)明的目的在于提供一種高多糖含量、菇質細膩、口感佳、市場前景好的猴頭菇菌株。本發(fā)明的高多糖猴頭菇菌株麗猴1號,屬多孔菌目、猴頭菌科、猴頭屬,保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心,保藏地址為北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號,保藏日期為2015年10月26日,保藏編號為cgmccno.11409。本發(fā)明所述的猴頭菇麗猴1號真菌的its堿基序列為:1tcctccgcttattgatatgcttaagttcagcgggtagtcccgcctgattcgaggtcaagt61tgagatgaaagttgtccgaagacggttagaagcagaccaacgcaaggctacccgcggcgt121agataattaacacaccaagggcaaaccctacaaaagggatccactcatgcattcaagagg181agccgacttcccgagggagcaccggcaagacctccaagtccaagcccagccctctcatga241caagaggattgagttgagaatttcacgacactcgaacaggcgtgcccctcggaataccaa301ggggcgcaaggtgcgttcaaagattcgatgattcactgaattctgcaattcacattactt361atcgcacttcgctgcgttcttcatcgatgcgagagccaagagatccgttgttgaaagttg421tataagatgcgtttatagcattatgacattctgttacatacataagagtttatgaaaaac481gcaagcccgtcgaccgcaaagccgacggacccacgcaagggtgcacaggtgtaagatgga541tgagattggagcgtgcacatgtctggatttcaggccagcaacaactcctttcaaattcat601taatgatccttccgcaggttcacctacggaa。麗猴1號由發(fā)明人于2012年8月于云南省香格里拉市普達措公園內朽木上采集子實體,后經組織分離,并通過發(fā)明人定向馴化培育所得。麗猴1號屬中溫發(fā)菌、低溫變溫結實型菌株。菌齡80-100天,發(fā)菌溫度20℃~28℃,最適25℃,超過35℃或低于6℃,菌絲停止生長;子實體生長最適溫度16℃-20℃,低于4℃或高于25℃子實體停止生長。子實體單生、大小中等、菇體菜花狀,質地細膩,海綿體小,刺短、細密,菌球直徑7-15cm,成熟菇體淺黃色,常略帶微紅色,對光線較為敏感,子實體幼嫩時微紅色,呈腦狀,鮮嫩時口感柔、滑、清香,老熟后有苦味。issr遺傳差異性分析結果表明,麗猴1號在相似性系數(shù)48%水平上與對照猴雜19、猴頭99、猴頭911分為2個類群;其中,麗猴1號單獨歸為一個類群,對照菌株歸為一個類群,可判定麗猴1號為不同于對照的新菌株。本發(fā)明的猴頭菇菌株麗猴1號的菇體形態(tài)和顏色較為特別,區(qū)別于常規(guī)栽培猴頭菇的白色子實體和圓整菇形;麗猴1號子實體多糖含量高達4.96%,比對照猴雜19高35.52%;麗猴1號固體發(fā)酵培養(yǎng)時培養(yǎng)料中多糖含量高達3.66%;栽培產量與對照無顯著差異。因此,麗猴1號應用前景良好。附圖說明圖1、猴頭菇試驗菌株issr多態(tài)性的聚類圖。具體實施方式依據(jù)中華人民共和國農業(yè)行業(yè)標準《ny/t1730-2009食用菌菌種真實性鑒定issr法》進行菌種dna的提取,參照猴頭菇issr法的有關文獻確定最優(yōu)引物。以國家認定品種猴頭911、猴雜19和浙江省主栽品種猴頭99作為對照,用issr分子標記對4個猴頭菇菌株的遺傳差異性進行比較分析。issr試驗引物序列(表1),由擎科生物技術有限公司合成。試驗菌株的菌絲體活化、培養(yǎng)、基因組dna提取、質量檢測、pcr擴增及電泳檢測均參照中華人民共和國農業(yè)行業(yè)標準《ny/t1730-2009食用菌菌種真實性鑒定issr法》進行。表1.issr試驗引物及序列引物名稱序列引物名稱序列h1gagagagagagagagath26agagagagagagagagyth2gagagagagagagagach27cacacacacacacacarch3agagagagagagagaggh28acacacacacacacacyah4agagagagagagagagch29cacacacacacacacaah5gsgtgtgtgtgtgtgtgth30tgtgtgtgtgtgtgtgch6agagagagagagagagth31tgtgtgtgtgtgtgtggh7tctctctctctctctcch32agcagcagcagcagcagch8agagagagagagagagyah33gacagacagacagacah9agagagagagagagagycp4ggatgcaacacacacacach10gagagagagagagagaycp5cgtgtgtgtgtgtgth11gagagagagagagagaytp11gagagagagagagagaach12gagagagagagagagaygp13tctctctctctctctccgh13gagagagagagagagaap15gtgtgtgtgtgtgtgttah14tgcacacacacacacp16tgtgtgtgtgtgtgtggah15gtgacacacacacacp19acacacacacacacaccth16agtgtgtgtgtgtgtp20acacacacacacacacctgh17ccagtggtggtggtgp21agcagcagcagcagcagcgh18ggagtggtggtggtgp22aagaagaagaagaagaagch19agagagagagagagaggcp23gagagagagagagagacth20acacacacacacacaccgp24cacgagagagagagagah21acacacacacacacacp25gagagagagagagagacch22acacacacacacacaccp26caccacacacacacacah23gtgacgactctctctctp27gtatgtatgtatgtatggh24cacacacacacacacagp28gtatgtatgtatgtatgch25acacacacacacacacg利用49條引物對4個猴頭菇菌株進行了issr擴增,篩選出能夠擴增出穩(wěn)定特異條帶的18條引物,分別為h15、h19、h20、h22、h23、h24、h25、h26、p4、p11、p13、p19、p20、p23、p25、p26、p27、p28。18條引物對試驗菌株菌株均擴增出穩(wěn)定的條帶,多態(tài)性條帶在6~18條,18條issr引物對4個猴頭菇菌株共擴增出243條穩(wěn)定性條帶,其中多態(tài)性條帶達181條,多態(tài)性比率為74.49%。聚類分析:對擴增產物進行分析,將試驗出現(xiàn)的穩(wěn)定性條帶進行統(tǒng)計,有條帶的記為1,無條帶記為0,用ntsys-pc2.0軟件進行聚類分析。檢測結論:issr分析結果表明,4個試驗菌株在相似性約48%水平上分為2個類群(圖1)。其中麗猴1號單獨歸為一個類群,三個對照菌株歸為一個類群,麗猴1號與對照菌株的相似性系數(shù)只有48%,表明麗猴1號與對照菌株遺傳差異較大。當前第1頁12
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