1.一種病毒檢測(cè)方法,其特征在于,該方法以HTLV-1為內(nèi)在陽(yáng)性質(zhì)控,包括如下步驟:
(1)提取待測(cè)樣本的核酸和HTLV-1的核酸;
(2)以待測(cè)樣本的核酸和HTLV-1的核酸為模板進(jìn)行基因擴(kuò)增反應(yīng);
(3)對(duì)擴(kuò)增結(jié)果進(jìn)行分析。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的病毒檢測(cè)方法,其特征在于,
步驟(2)中,所述以待測(cè)樣本的核酸和HTLV-1的核酸為模板進(jìn)行基因擴(kuò)增反應(yīng),為直接以待測(cè)樣本的核酸和HTLV-1的核酸為模板進(jìn)行基因擴(kuò)增反應(yīng)。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的病毒檢測(cè)方法,其特征在于,
步驟(2)中,所述以待測(cè)樣本的核酸和HTLV-1的核酸為模板進(jìn)行基因擴(kuò)增反應(yīng),為先以待測(cè)樣本的核酸和HTLV-1的核酸為模板進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄反應(yīng),再以反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)完成后的反應(yīng)液為模板進(jìn)行基因擴(kuò)增反應(yīng)。
4.根據(jù)權(quán)利要求2或3所述的病毒檢測(cè)方法,其特征在于,所述基因擴(kuò)增反應(yīng)為定量PCR反應(yīng)、環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增反應(yīng)或者依賴(lài)核酸序列的擴(kuò)增反應(yīng)。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的病毒檢測(cè)方法,其特征在于,所述基因擴(kuò)增反應(yīng)的引物包括:
HIV-1的上游引物,HIV-1的下游引物,HBV的上游引物,HBV的下游引物,HCV的上游引物,HCV的下游引物,HTLV-1的上游引物,HTLV-1的下游引物,HIV-1的探針,HBV的探針,HCV的探針,HTLV-1的探針;
所述病毒檢測(cè)方法能夠同步檢測(cè)HIV-1、HBV和HCV三種病毒。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的病毒檢測(cè)方法,其特征在于,
所述HIV-1的上游引物為:
5’-TAAAGCTTGCCTTGAGTGCT-3’(SEQ ID NO:1),
所述HIV-1的下游引物為:
5’-GTCTGAGGGATCTCTAGTTACCAG-3’(SEQ ID NO:2),
所述HIV-1的探針為:
5’-FAM-AGTAGTGTGTGCCCGTCTGTTGTGTG-3’(SEQ ID NO:3),
所述HBV的上游引物為:
5’-CAACCTCCAATCACTCACCAACC-3’(SEQ ID NO:4),
所述HBV的下游引物為:
5’-ATATGATAAAACGCCGCAGACAC-3’(SEQ ID NO:5),
所述HBV的探針為:
5’-Cy5-TCCTCCAATTTGTCCTGGTTATCGCT-3’(SEQ ID NO:6),
所述HCV的上游引物為:
5’-TGCTAGCCGAGTAGYGTTGG-3’(SEQ ID NO:7),
所述HCV的下游引物為:
5’-ACTCGCAAGCACCCTATCAG-3’(SEQ ID NO:8),
所述HCV的探針為:
5’-FAM-CAGCGCTTTCCGGAACACCA-3’(SEQ ID NO:9),
所述HTLV-1的上游引物為:
5’-AATAATTCTACCCGAAGACTGTTTGC-3’(SEQ ID NO:10),
所述HTLV-1的下游引物為:
5’-ATTGTCGGACCGTTGTGCC-3’(SEQ ID NO:11),
所述HTLV-1的探針為:
5’-ROX-TTTCCAGCCTGTTAGGGCACCCGT-3’(SEQ ID NO:12)。
7.一種同步檢測(cè)HIV-1、HBV和HCV的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒包括HTLV-1內(nèi)在陽(yáng)性質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的試劑盒,其特征在于,所述HTLV-1內(nèi)在陽(yáng)性質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)品中HTLV-1的濃度為0-106IU/mL。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8所述的試劑盒,其特征在于,所述試劑盒還包括:HIV-1的上游引物,HIV-1的下游引物,HBV的上游引物,HBV的下游引物,HCV的上游引物,HCV的下游引物,HTLV-1的上游引物,HTLV-1的下游引物。
10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的試劑盒,其特征在于,
所述試劑盒還包括HIV-1的探針,HBV的探針,HCV的探針,HTLV-1的探針;
所述HIV-1的上游引物為:
5’-TAAAGCTTGCCTTGAGTGCT-3’(SEQ ID NO:1),
所述HIV-1的下游引物為:
5’-GTCTGAGGGATCTCTAGTTACCAG-3’(SEQ ID NO:2),
所述HIV-1的探針為:
5’-FAM-AGTAGTGTGTGCCCGTCTGTTGTGTG-3’(SEQ ID NO:3),
所述HBV的上游引物為:
5’-CAACCTCCAATCACTCACCAACC-3’(SEQ ID NO:4),
所述HBV的下游引物為:
5’-ATATGATAAAACGCCGCAGACAC-3’(SEQ ID NO:5),
所述HBV的探針為:
5’-Cy5-TCCTCCAATTTGTCCTGGTTATCGCT-3’(SEQ ID NO:6),
所述HCV的上游引物為:
5’-TGCTAGCCGAGTAGYGTTGG-3’(SEQ ID NO:7),
所述HCV的下游引物為:
5’-ACTCGCAAGCACCCTATCAG-3’(SEQ ID NO:8),
所述HCV的探針為:
5’-FAM-CAGCGCTTTCCGGAACACCA-3’(SEQ ID NO:9),
所述HTLV-1的上游引物為:
5’-AATAATTCTACCCGAAGACTGTTTGC-3’(SEQ ID NO:10),
所述HTLV-1的下游引物為:
5’-ATTGTCGGACCGTTGTGCC-3’(SEQ ID NO:11),
所述HTLV-1的探針為:
5’-ROX-TTTCCAGCCTGTTAGGGCACCCGT-3’(SEQ ID NO:12)。