1.一種半連續(xù)法生產(chǎn)不同分子量普魯蘭多糖的方法,其特征在于,包括以下步驟:
(1)制備發(fā)酵種子液,將菌種活化6-8小時候后接到種子培養(yǎng)基中,28℃,180rpm培養(yǎng)28到32h,得到發(fā)酵種子液;
(2)發(fā)酵培養(yǎng):將步驟(1)得到的種子液接入發(fā)酵培養(yǎng)基中,采用半連續(xù)式發(fā)酵, 在發(fā)酵過程中,放出發(fā)酵液,并補充相同體積的新鮮發(fā)酵培養(yǎng)基,并調(diào)節(jié)pH,繼續(xù)發(fā)酵,發(fā)酵過程中放出發(fā)酵液,并補充相同體積的新鮮發(fā)酵培養(yǎng)基,再調(diào)節(jié)pH,重復(fù)操作,調(diào)節(jié)發(fā)酵pH不同,獲得含有不同分子量普魯蘭多糖的發(fā)酵液;
(3)精制,將步驟(2)中得到的含有不同分子量普魯蘭多糖的發(fā)酵液進行精制提取,獲得不同分子量的普魯蘭多糖。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種半連續(xù)法生產(chǎn)不同分子量普魯蘭多糖的方法,其特征在于,所述步驟(2)中發(fā)酵過程中pH的調(diào)節(jié)范圍為3.5-4.5。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種半連續(xù)法生產(chǎn)不同分子量普魯蘭多糖的方法,其特征在于,所述步驟(2)中發(fā)酵過程中放罐體積為發(fā)酵液總體積的40-60%。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種半連續(xù)法生產(chǎn)不同分子量普魯蘭多糖的方法,其特征在于,所述步驟(2)中種子液的接種量為質(zhì)量百分比3~5%,采用5L發(fā)酵罐中裝有3L發(fā)酵培養(yǎng)基。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種半連續(xù)法生產(chǎn)不同分子量普魯蘭多糖的方法,其特征在于,所述步驟(2)發(fā)酵培養(yǎng)的條件為通風量為1.25V/V,轉(zhuǎn)速為400r/min,發(fā)酵初始pH值為5.5,開始發(fā)酵24h內(nèi),溫度為32℃培養(yǎng),發(fā)酵24h后溫度調(diào)至28℃發(fā)酵。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種半連續(xù)法生產(chǎn)不同分子量普魯蘭多糖的方法,其特征在于,所述步驟(2)中發(fā)酵進行至48~60h,取出40%發(fā)酵液,而后補充同樣體積的新鮮發(fā)酵培養(yǎng)基,并調(diào)節(jié)pH至4.5,繼續(xù)發(fā)酵48~56h后取出40%發(fā)酵液,再加入相同體積新鮮發(fā)酵培養(yǎng)基,并調(diào)節(jié)pH至4.0,發(fā)酵至殘?zhí)呛谋M為止。
7.根據(jù)權(quán)利要求1-6任意一項所述的一種半連續(xù)法生產(chǎn)不同分子量普魯蘭多糖的方法,其特征在于,種子培養(yǎng)基的質(zhì)量配比如下:蔗糖100份,酵母浸粉3份,K2HPO4 2份,NaCl 2.5份,MgSO4 0.4份,(NH4)2SO4 1份,F(xiàn)eSO4 0.05份,pH為6.0。
8.根據(jù)權(quán)利要求1-6任意一項所述的一種半連續(xù)法生產(chǎn)不同分子量普魯蘭多糖的方法,其特征在于,發(fā)酵培養(yǎng)基的質(zhì)量配比如下:蔗糖150份,蛋白胨 5份,K2HPO4 7份,NaCl 2.5份,MgSO4 0.4份,F(xiàn)eSO4 0.05份,pH為6.0。