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提高臍帶間充質(zhì)干細(xì)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞效率的一種方法與流程

文檔序號:11061786閱讀:來源:國知局

技術(shù)特征:

1.本發(fā)明專利其特征是通過下列步驟進(jìn)一步提高臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞體外誘導(dǎo)分化為血管內(nèi)皮細(xì)胞的效率:

1)分離、培養(yǎng)臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞并進(jìn)行鑒定。

2)采用50ng/ml血管內(nèi)皮生長因子對臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行血管內(nèi)皮細(xì)胞定向誘導(dǎo)并鑒定。

3)在血管內(nèi)皮細(xì)胞定向誘導(dǎo)培養(yǎng)液中加入堿性成纖維細(xì)胞生長因子和表皮生長因子,采用流式細(xì)胞儀對內(nèi)皮細(xì)胞分化效率進(jìn)行分析,分析采用血管內(nèi)皮特異性表明分子CD34和CD144。

2.按權(quán)利要求1的方法,誘導(dǎo)1周后,定向誘導(dǎo)的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞形成網(wǎng)格樣結(jié)構(gòu),2周后,表達(dá)內(nèi)皮特異性抗體CD34,具有攝取DiI-Ac-LDL的功能,內(nèi)皮細(xì)胞分化效率為30%。

3.按權(quán)利要求1的方法,堿性成纖維細(xì)胞生長因子的最佳濃度為20ng/ml,表皮生長因子的最佳濃度為10ng/ml。

4.按權(quán)利要求1的方法,加入堿性成纖維細(xì)胞生長因子和表皮生長因子后,流式細(xì)胞儀檢測分化為成熟血管內(nèi)皮細(xì)胞的臍帶間充質(zhì)干細(xì)胞明顯增加,為50-70%。

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