專利名稱：5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶的制備方法
本申請是序列編號為07/951515(1992年9月25日申請)的申請的部分繼續(xù)申請。
本發(fā)明涉及藥學(xué)和有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，本發(fā)明提供5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶衍生物的制備方法，它在基于治療活性的吡咯并[2，3-d]嘧啶抗葉酸藥的制備中可用作中間體。
已知的具有抗葉酸活性的化合物是公認(rèn)的治療癌癥的化學(xué)治療劑。其中甲氨蝶呤是目前最廣泛使用的抗癌藥之一;在化學(xué)和醫(yī)學(xué)文獻(xiàn)中還合成、試驗(yàn)和討論了許多其它葉酸類化合物。這些化合物在酶水平上具有各種活性。特別地，它們抑制酶類，例如二氫葉酸還原酶、葉酸聚谷氨酸酯合成酶、甘氨酰胺核苷酸甲?；D(zhuǎn)移酶和胸苷酸合成酶。
最近，公開了一系列4-羥基吡咯并[2，3-d]嘧啶-L-谷氨酸衍生物，它們被證明是特別有用的抗葉酸鹽藥，參見例如Akimoto等人的歐洲專利公開0434426。
式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶化合物結(jié)構(gòu)如下
式中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′或OR′各R′是H或相同或不同的羧基保護(hù)基團(tuán);
標(biāo)★的碳原子的構(gòu)型是L;
n是0或1;且
是可被取代的芳基基團(tuán)。該化合物可用來制備各種基于5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶的治療劑;或者當(dāng)R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′并且各R′是氫時，其鹽可用作治療劑。
本發(fā)明提供制備5-取代的吡啶并[2，3-d]嘧啶的配向性方法;該化合物尤其可用作制備藥學(xué)活性的吡咯并[2，3-d]嘧啶化合物的中間體，或者可用作治性化合物。
本發(fā)明還提供制備5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶化合物的配向性方法，其中所述方法在同一容器中進(jìn)行。
本發(fā)明提供式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶或其鹽的制備方法;式(Ⅰ)如下
式中
R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′或OR′各R′是H或相同或不同的羧基保護(hù)基團(tuán);
標(biāo)有★的碳原子的構(gòu)型是L;
n是0或1;且
是可被取代的芳基基團(tuán)，它包括a)將2，4-二氨基-6-羥基嘧啶與下述式(Ⅱ)鹵代醛反應(yīng)
式中Y是溴、氯或碘;且
，R;R′，n和★定義如上;和b)可選地將步驟(a)的產(chǎn)品成鹽。
本發(fā)明還提供式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶或其鹽的制備方法，式(Ⅰ)如下
式中R，R′，
，n和☆定義如上，它包括a)將鹵化劑與下式(Ⅲ)化合物反應(yīng)，
式中R，R′，
，n和★定義如上，且R是選自式(Ⅳ)，(Ⅴ)或(Ⅵ)的取代基，OHC-CH2-CH2(Ⅳ)R3-CH＝CH-CH2(Ⅴ)
式中R3是OR4，其中R4是羥基保護(hù)基團(tuán);
OCOR5，其中R5是C1-6烷基、苯基、芐基或C3-6環(huán)烷基，NR6R7，其中R6和R7各自是C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基，或者與氮原子一起，還可包括氧原子，構(gòu)成5元到6元飽和單環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)可被一個或兩個選自C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;或者R8和R9均為C1-4烷基，或者與氧原子一起形成一個5元到6元飽和單環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)可被一個或二個選自羥基、C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;
b)將步驟a)的反應(yīng)產(chǎn)物與2，4-二氨基-6-羥基嘧啶反應(yīng);和c)可選地將步驟b)的反應(yīng)產(chǎn)物成鹽。
本文中，所有的溫度均是攝氏度并且除以體積單位表示的溶劑或其混合物外，所有比例、百分?jǐn)?shù)等均以重量單位表示。
“C1-4烷基”是指1-4個碳原子的直鏈或支鏈脂肪鏈，例如甲基、乙基、丙基、異丙基、正丁基、異丁基、仲丁基和叔丁基。
“C1-6烷基”是指C1-4烷基加上5-6個碳原子的直鏈或支鏈脂肪鏈，例如正戊基，異戊基，異戊基、新戊基、正己基、異己基、3-甲基戊基、2，3-二甲基丁基等。
在描述式(Ⅰ)、(Ⅱ)、(Ⅲ)和(Ⅶ)所示的環(huán)狀結(jié)構(gòu)時，“芳基”一詞是指5元至6元芳香族殘基，包括含有不超過3個雜原子(例如N，O和S)的雜環(huán)基團(tuán)，例如苯基，尤其是1，4-亞苯基、噻吩基、吡啶基、呋喃基等。這樣的基團(tuán)除了可被COR基團(tuán)取代之外，還可被一個或兩個選自鹵素、羥基、C1-4烷基和C1-4烷氧基取代基取代。除了未取代的1，4-亞苯基之外，
在相對于1-位COR官能團(tuán)的2-位上再次單取代的情況是優(yōu)選的。
“C1-4烷氧基”是指通過氧橋連接的1-4個碳原子的烷基，例如甲氧基、乙氧基、正丙氧基、異丙氧基等。
“鹵素”是指溴、氯、氟和碘。
“C3-6環(huán)烷基”是指具3-6個碳原子的飽和烴環(huán)基團(tuán)，例如環(huán)戊基和環(huán)己基。
在本文中，羧基保護(hù)基團(tuán)R′(R′不是H)和羥基保護(hù)基團(tuán)R4代表這樣的基團(tuán)它們通常不存在于最終的治療化合物中，但在合成過程的某一步中有意引入，以便在化學(xué)操作過程中保護(hù)那些如果不保護(hù)就有可能反應(yīng)的基團(tuán)，它們隨后被除去。由于帶有一個或多個保護(hù)基團(tuán)的化合物主要用作重要的化學(xué)中間體(盡管某些被保護(hù)的衍生物也表現(xiàn)出生物活性)，其準(zhǔn)確結(jié)構(gòu)并不關(guān)鍵。在許多標(biāo)準(zhǔn)著作中都描述了眾多的生成和除去所述保護(hù)基團(tuán)的反應(yīng)，包括例如Protective Groups in Organic Chemistry，第3章(McOmie編輯，Plenum Press，1973);Green，Protective Groups in Organic Synthesic 第2章(John Wiley，1981)和Schrooder與Lubke的The Peptides 第Ⅰ卷(Academic Press，1965)。
羧基可被保護(hù)成酯基團(tuán)，酯基團(tuán)可在足夠溫和的條件下選擇性地除去，以便不破壞期望的分子結(jié)構(gòu)。適用于保護(hù)羧基的酯包括支鏈的C1-6烷基酯，例如叔丁酯，和(ⅰ)被C1-4烷氧基取代的酯，例如甲氧基甲酯、1-甲氧基乙酯等;(ⅱ)被C1-6烷硫基取代的酯，例如甲硫基甲酯、1-乙硫基乙酯等;(ⅲ)被鹵素取代的酯，例如2，2，2-三氯乙酯、2-溴乙酯、2-碘乙氧基羰基酯等;(ⅳ)被1-3個苯基取代的酯，其中苯基又可被C1-6烷基、C1-4烷氧基、羥基和硝基一、二或三取代，例如4-硝基芐基酯;或(Ⅴ)被芳?；〈孽?，例如苯甲酰甲酯。當(dāng)有一個以上羧基時，各羧基保護(hù)基團(tuán)可相同或不同。各保護(hù)基團(tuán)最好相同。優(yōu)選的保護(hù)基團(tuán)是C1-6烷基酯，例如甲酯或乙酯。
優(yōu)選的羥基保護(hù)基團(tuán)包括醚基團(tuán)，例如C1-4烷基醚、苯基醚和甲硅烷基醚。特別有用的甲硅烷基醚包括例如三異丙基甲硅烷基醚，三甲基甲硅烷基醚、三乙基甲硅烷基醚和叔丁基二甲基甲硅烷基醚(參見例如，Colvin，E.W.Silicon Reagents in Organic Synthesis，Academic Press，1988)。
式(Ⅰ)化合物以與相應(yīng)4(3H)-氧代化合物互變平衡的形式存在。下面舉例說明吡咯并嘧啶環(huán)體系的平衡及其編號
為方便起見，4(3H)-氧代形式在式(Ⅰ)中描述，并在說明書全文中使用相應(yīng)的術(shù)語。但是應(yīng)當(dāng)理解，這樣的描述包括相應(yīng)的互變4-羥基形式。
本發(fā)明方法需要在對環(huán)化有利的條件下，將2，4-二氨基-6-羥基嘧啶與式(Ⅱ)鹵代醛在溶劑中反應(yīng)。
本發(fā)明方法使用的2，4-二氨基-6-羥基嘧啶原料可購得，而式(Ⅱ)鹵代醛(其中R是OR′和R′是H或羧基保護(hù)基團(tuán))的制備是本領(lǐng)域，公知的(參見，例如Degraw等人J.Med.Chem.，25∶1227-1230(1982))。
De Graw講述了
是1，4-亞苯基，n是O、R是OR′且R′是H的式(Ⅱ)化合物的制備。羧酸基團(tuán)的保護(hù)方法和n是1的式(Ⅱ)化合物的制備方法是公知的。
式(Ⅱ)化合物的另一原料是用常規(guī)縮合技術(shù)，將式(Ⅶ)烯醇醚與式(Ⅷ)化合物反應(yīng)制得的。式(Ⅶ)及式(Ⅷ)如下
式中
是可被取代的芳基;
R是OR′;
R′是H或羧基保護(hù)基團(tuán);
n是0或1;
R3是OR4;而R是上文De Graw一般性描述的羥基保護(hù)基團(tuán);
各R′是相同或不同的羧基保護(hù)基團(tuán)，標(biāo)有★的碳原子的構(gòu)型是L。當(dāng)式(Ⅱ)化合物的R是H時，Taylor等人在美國專利第4684653號中講述了一種優(yōu)選的縮合方法。另外，式(Ⅱ)化合物應(yīng)當(dāng)在縮合前首先去保護(hù)。
縮合完成后，反應(yīng)產(chǎn)物按已知方法(參見，例如上述Dekimpe的方法)用適當(dāng)?shù)柠u化劑鹵化，得到式(Ⅱ)原料化合物，其中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′，Y是溴，氯或碘，R′，n和★定義如上。
特別適宜的囟化劑包括，例如單質(zhì)溴、氯和碘，N-溴、N-氯和N-碘代琥珀酰亞胺，N-溴、N-氯和N-碘代鄰苯二甲酰亞胺等。
因此，本發(fā)明的第一方面是提供式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶或其鹽的制備方法，式(Ⅰ)如下
式中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′或OR′各R′是H或是相同或不同的羧基保護(hù)基團(tuán);
標(biāo)有★的碳原子的構(gòu)型是L;
n是0或1;且
是可被取代的芳基;
它包括a)將2，4-二氨基-6-羥基嘧啶與式(Ⅱ)鹵代醛反應(yīng)，式(Ⅱ)如下
式中Y是溴、氯或碘;且
，R，R′，n和★如上文定義;和b)可選地將步驟a)的反應(yīng)產(chǎn)物成鹽。
上述反應(yīng)在適當(dāng)溶劑中進(jìn)行，所述溶劑包括，例如C1-4醇、乙腈、二甲基甲酰胺(DMF)、二甲亞砜(DMSO)、二甲基乙酰胺、N-甲基吡咯烷酮、水及其混合物。優(yōu)選溶劑的混合物，包括乙醇和水或乙腈和水的混合物。
該反應(yīng)進(jìn)行完全所需的時間是本領(lǐng)域普通技術(shù)人員知道的。層析技術(shù)如TLC和HPLC有助于該反應(yīng)的測定和完成。
該步驟所用的溫度應(yīng)足以有效地完成該反應(yīng)，通常優(yōu)選約25-100℃的溫度范圍，而特別優(yōu)選約70-90℃的溫度范圍。
另外，該方法制得的式(Ⅰ)化合物很容易用常規(guī)技術(shù)分離，用作中間體時不必進(jìn)一步分離。
本發(fā)明的另一方面是5-取代的式(Ⅰ)吡咯并[2，3-d]嘧啶的制備方法，它包括a)將鹵化劑與下式(Ⅲ)化合物反應(yīng)，
R，R′，
n和★定義如上，且R2是選自式(Ⅳ)，(Ⅴ)或(Ⅵ)的取代基，OHC-CH2-CH2(Ⅳ)R3-CH＝CH-CH2(Ⅴ)
式中R3是OR4，其中R4是羥基保護(hù)基團(tuán);
OCOR5，其中R5是C1-6烷基、苯基、芐基或C3-6環(huán)烷基，NR6R7，其中R6和R7各自是C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基，或者與氮原子一起，還可包括氧原子，構(gòu)成5元到6元飽和單環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)可被一個或兩個選自C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;或者R8和R9均為C1-4烷基，或者與氧原子一起形成一個5元到6元飽和單環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)可被一個或二個選自羥基、C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;
b)將步驟a)的反應(yīng)產(chǎn)物與2，4-二氨基-6-羥基嘧啶反應(yīng);和c)可選地將步驟b)的反應(yīng)產(chǎn)物成鹽。
式(Ⅲ)(其中R2是式(Ⅳ)取代基)醛的制備是本領(lǐng)域公知的(參見，例如Taylor等人，J.Med.Chem.，553222-3227(1990))Taylor講述了R是OR′、R′是甲基、n是1或1且R2是式(Ⅳ)取代基的式(Ⅲ)化合物的制備。式(Ⅲ)醛可用有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域公知的方法將其轉(zhuǎn)變?yōu)橄┌?、烯醇酯、烯醇?其中R2是式(Ⅴ)取代基)和乙醛(其中R2是式(Ⅵ)取代基)。因而，本發(fā)明這一方面的原料包括式(Ⅲ)化合物的醛、烯醇醚、烯醇酯、烯胺和縮醛形式。
優(yōu)選的式(Ⅲ)原料是取代基如下定義的式(Ⅲ)烯醇醚R是OR′，R′是羧基保護(hù)基團(tuán)，R2是式(Ⅴ)取代基，R3是OR4，R4是羥基保護(hù)基團(tuán)(特別是甲基)。
或者，式(Ⅲ)烯醇醚原料可通過將上述最好是式(Ⅲ)烯醇醚與上述式(Ⅷ)化合物縮合制備。在縮合前，最好將R是OR′(R′是羧基保護(hù)基團(tuán))的式(Ⅲ)化合物去保護(hù)。但是，最好在本發(fā)明方法進(jìn)行完畢后再進(jìn)行該縮合。
一旦選定了式(Ⅲ)原料并加至適宜的溶劑中后，它首先與鹵化劑反應(yīng)，第一步的反應(yīng)產(chǎn)物再與2，4-二氨基-6-羥基嘧啶反應(yīng)。這一步驟的反應(yīng)應(yīng)產(chǎn)物還可以用常規(guī)方法成鹽。
該方法的適宜和優(yōu)選的溶劑、溫度、反應(yīng)時間和分離方法與上述將式(Ⅱ)化合物環(huán)化為式(Ⅰ)化合物的相同。
在用本發(fā)明方法制備式(Ⅰ)化合物時，各步可獨(dú)立地進(jìn)行，其中各步的反應(yīng)產(chǎn)物經(jīng)分離和純化;或者最好用原位反應(yīng)的方法進(jìn)行，即該方法的每一步依次在同一容器中進(jìn)行。
式(Ⅰ)化合物尤其是制備治療活性的吡咯并[2，3-d]嘧啶抗葉酸劑的有用的中間體，所述式(Ⅰ)中，當(dāng)R是OR′時，R′是H或羧基保護(hù)基團(tuán)，或當(dāng)R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2(COOR′)時，R′是相同或不同的羧基保護(hù)基團(tuán)。
當(dāng)R是OR′且R′是H時，或者在優(yōu)選的去保護(hù)步驟后當(dāng)R′是羧基保護(hù)基團(tuán)時，式(Ⅰ)化合物必須先與上述式(Ⅷ)化合物縮合?？s合后，如果R′是H，則產(chǎn)物便是可直接藥用的最終形式。如果R′是羧基保護(hù)基團(tuán)，則可除去這樣的保護(hù)基團(tuán)，所得產(chǎn)物是治療活性抗葉酸素。
類似地，式(Ⅰ)化合物，當(dāng)R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2(COOR′)且R′是H時，作為本發(fā)明方法的反應(yīng)產(chǎn)物也具有治療活性。另外，當(dāng)R′是羧基保護(hù)基團(tuán)時，也必須用標(biāo)準(zhǔn)方法將其除去，以提供治療活性化合物。
一旦制得了治療活性的吡咯并[2，3-d]嘧啶抗葉酸素，將其轉(zhuǎn)變?yōu)槌甥}的形式便得到藥學(xué)上更易接受的化合物。
下述實(shí)施例是說明本發(fā)明的具體例子，并無意限定其范圍，并且也不應(yīng)這樣認(rèn)為。
制備14-(4-三甲基甲硅烷氧基-3-丁烯基)苯甲酸甲酯于-15℃和氮?dú)夥罩?，?.89g(19.5mmol)三甲基甲硅烷基碘加至3.65g(17.7mmol)4-(4-甲酯基苯基)丁醛和3.43g(21.2mmol)1，1，1，3，3，3-六甲基二硅氮烷在177ml二氯甲烷中的溶液，2分鐘加完。將混合物攪拌10分鐘，自然升溫至室溫。2小時后，加入100ml水使過量的試劑驟冷。分出水層，有機(jī)層用硫酸鈉干燥。真空濃縮除去溶劑，得5.0g 4-(4-三甲基甲硅烷氧基-3-丁烯基)苯甲酸甲酯，收率100%。薄層層析(TLC)分析(二氧化硅;己烷-乙酸乙酯3∶2)表明，上述產(chǎn)物基本上是純品。b.p.170℃(0.12乇)1H NMR(CDCl3)δ 0.15(s，9H)，2.41(q，J＝7.2Hz，2H)，2.69(m，2H)，3.89(s，3H)，4.47(q，J＝7.2 Hz，1H)，6.15(m，1H)，7.25(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.93(d，J＝8.2 Hz，2H);13C NMR(CDCl3)δ -0.60，25.0，35.9，51.8，109.8，128.4，128.5，129.6，138.6，148.0，167.1;FDMS 279(90)，278(M+，100%)280，251，226;
閃層析(二氧化硅;己烷-乙酸乙酯3∶2)制得分析試樣。元素分析理論值(C15H22O3Si)C，64.71;H，7.96;實(shí)測值C，64.90;H，8.05。
制備22-溴-4-(4-甲酯基苯基)丁醛在-20℃下，將溴(2.56g，16mmol)的四氯化碳(16ml)溶液緩慢加至制備1制得的4-(4-三甲基甲硅烷氧基-3-丁烯基)苯甲酸甲酯(4.46g，16mmol)的四氯化碳(16ml)溶液中，4小時加完?；旌衔镬o置升溫至室溫，潷晰除去少量不溶物。旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去溶劑，得4.60g 2-溴-4-(4-甲酯基苯基)丁醛。將上述產(chǎn)物層析純化(二氧化硅;己烷-乙酸乙酯7∶3)，得4.0g純化產(chǎn)物，收率87.8%。
1H NMR(CDCl3) δ 2.24(m，1H)，2，36(m，1H)，2.81(m，1H)，2.90(m，1H)，3.90(s，3H)，4.16(m，1H)，7.27(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.97(d，J＝8.2 Hz，2H)，9.46(d，J＝2.1 Hz，1H);13C NMR(CDCl3)δ 32.5，32.7，51.7，54.3，128.3，128.4，129.8，145.0，166.6，192.0.
實(shí)施例34-(2-[2-氨基-4-氧代-3，7-二氫吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基)苯甲酸甲酯在80℃下，制備2制得的2-溴-4-(4-甲酯基苯基)丁醛(3.82g，13.4mmol)的甲醇(7ml)溶液加至2，4-二氨基-6-羥基嘧啶(1.69g，13.4mmol)、乙酸鈉(2.20g，26.8mmol)和水(20ml)的混合物中，5分鐘加完。將混合物于80℃保溫5分鐘，冷卻至室溫，攪拌30分鐘。將混合物過濾，水洗，在10乇和50℃下干燥18小時，得3.32g 4-(2-[2-氨基-4-氧代-3，7-二氫吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基)苯甲酸甲酯(m.p.〉220℃)，收率79.4%。將剩下的濾液冷卻至5℃，過濾，又得0.069g上述產(chǎn)物，總收率為81%。
1H NMR(DMSO-d6)δ 2.80(m，2H)，2.93(m，2H)，3.78(s，3H)，5.97(s，2H)，6.26(d，J＝2.0 Hz，1H)，7.28(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.80(d，J＝8.2 Hz，2H)，10.12(s，1H)，10.58(s，1H);FDMS 312(M+)，元素分析C16H16N4O3，理論值C，61.53;H，5.16;N，17.94;實(shí)測值C，61.79;H，5.33;N，17.66.
制備44-[2-(2-氨基-4，7-二氫-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酸將3.17g(10.15mmol)4-[2-(2-氨基-4，7-二氫-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酸甲酯(實(shí)施例3制得)、30ml 1N氫氧化鈉水溶液和5ml甲醇的混合物于室溫?cái)嚢?0小時。加四氫呋喃(5ml)，攪拌4小時，然后用30ml 1N鹽酸水溶液中和。過濾分離所得沉淀物，水(20ml)洗，在50℃烘箱中真空干燥，得2.65g上述產(chǎn)物，收率87%。
1H NMR(DMSO-d6)δ 2.45(m，2H)，2.91(m，2H)，5.99(s，2H)，6.27(d，J＝2.0 Hz，1H)，7.27(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.79(d，J＝8.2 Hz，2H)，10.14(s，1H)，10.59(d，J＝2.0 Hz，1H)，13.2(bs，1H).
制備5N-[4-[2-[2-氨基-4，7-二氫-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基]苯甲?；鵠谷氨酸二甲酯在氮?dú)夥罩校瑢?.40g(13.8mmol)N-甲基嗎啉和11.7g(6.70mmol)4-氯-2，6-二甲氧基三嗪加至4-[2-(2-氨基-4，7-二氫-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酸(2.00g，6.74mmol，制備4制得)的二甲基甲酰胺(23ml)溶液中?；钚怎サ纳赏ㄟ^等分試樣的HPLC分析監(jiān)控。室溫下40分鐘后，先后加入0.70(6.9mmol)N-甲基嗎啉和1.56g(7.37mmol)L-谷氨酸二甲酯鹽酸鹽。30分鐘后，HPLC分析表明活性酯基本消耗完畢。并且生成了N-[4-[2-[2-氨基-4，7-二氫-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基]苯甲酰基]谷氨酸二甲酯，過濾反應(yīng)混合物，將上述產(chǎn)物濃縮，用二氧化硅層析純化(洗脫劑，甲醇-二氯甲烷1∶4)。合并純餾分，得1.30g上述產(chǎn)物，收率43%。
1H NMR(DMSO-d6)δ 2.01(m，2H)，2.40(t，J＝7.4 Hz，2H)，2.80(m，2H)，2.92(m，2H)，3.53(s，3H)，3.59(s，3H)，4.40(m，1H)，5.99(s，2H)，6.26(d，J＝1.9 Hz，1H)，7.23(d，J＝8.2 Hz，2H)，7.73(d，J＝8.2 Hz，2H)，8.62(d，J＝7.5 Hz，1H)，10.15(s，1H)，10.57(d，J＝1.9 Hz，1H).
制備6N-[4-[2-[2-氨基-4，7-二氫-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基]苯甲?；鵠谷氨酸在室溫下，將0.50g(1.1mmol)N-[4-[2-[2-氨基-4，7-二氫-4-氧代-3H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基]苯甲?；鵠谷氨酸二甲酯(制備5制得)和3.3ml 2N氫氧化鈉水溶液的混合物攪拌48小時，用6M鹽酸水溶液中和至PH5。濾出沉淀物，水洗，干燥，得0.277g上述產(chǎn)物，收率59%。
制備71-甲氧基-4-(4-羧甲基苯基)-1-丁烯在0℃和氮?dú)夥罩?，?1ml(11mmol)1M叔丁醇鉀的四氫呋喃溶液加到氯化甲氧基甲基三苯基鏻(3.77g，11mmol)的甲苯(10ml)溶液中，20分鐘加完。將所得溶液攪拌10分鐘，然后用15分鐘的時間加3-(4-羧甲基苯基)丙醛(1.92g，10mmol)的甲苯(10ml)溶液。將混合物攪拌20分鐘后，加40ml乙醚。用硅藻土過濾所得沉淀物，收集之，依次用20ml水和20ml飽和氯化鈉洗滌，用9∶1的硫酸鈉/飽和氯化鈉的混合物干燥。將濾液真空濃縮，殘余物用己烷研制，得1.72g 1-甲氧基-4-(4-羧甲基苯基)-1-丁烯。將上述產(chǎn)物層析(硅膠，8∶2己烷∶乙酸乙酯)得1.0g上述產(chǎn)物的幾何異物構(gòu)體混合物(Z/E-6∶4)，總收率45%，b.p.140℃(0.07乇)1H NMR(CDCl3)δ 2.23(dq，J＝1.0，8.1 Hz)，2.40(dq，J＝1.3，8.0 Hz)total 2H，2.70(t，J＝8.1 Hz)，2.71(t，J＝8.0 Hz)，total 2H，3.48(s)，3.55(s)，total 3H，3.89(s)，3.90(s)，total 3H，4.32(q，J＝6.2 Hz)，4.71(dt，J＝7.3，12.6 Hz)，total 1H，5.87(dt，J＝1.3，6.2 Hz)，6.28(dt，J＝1.0，12.6 Hz)，total 1H，7.23(d，J＝8.2 Hz)，7.27(d，J＝8.2 Hz)，total 1H，7.94(d，J＝8.2 Hz)，7.95(d，J＝8.2 Hz)，total 2H;13C NMR(CDCl3)δ 25.2，29.3，36.0，37.4，51.9，56.0，59.5，101.8，101.9，105.5，127.9，128.0，128.5，128.6，129.6，129.7，146.9，147.5，147.9，148.0，167.1，167.2;IR(CHCl3)3025，2954，1716，1656，1610，1437，1284，1112 cm-1;MS(FD) m/z 220(M+).
實(shí)施例84-(2-[2-氨基-4(1H)-氧代-4，7-二氫吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基)苯甲酸甲酯將10ml水加到制備7制得的1-甲氧基-4-(4-羧甲基苯基)-1-丁烯(1.10g，5.0mmol)的乙腈(10ml)溶液中。將所得混合物冷卻至10℃，加0.63g(5.0mmol)2，4-二氨基-6-羥基嘧啶，攪拌混合物并溫?zé)嶂?0℃，40分鐘后，將混合物冷卻至室溫，加20ml水。用5N氫氧化鈉將所得漿液的PH值調(diào)至6。濾集沉淀物，水洗，干燥(50℃，10乇)得1.44g上述產(chǎn)物，收率92%。
實(shí)施例9
4-(2-[2-氨基-4(1H)-氧代-4，7-二氫吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基]乙基)苯甲?；?L-谷氨酸二乙酯將300mg(0.766mmol)N-4-(1-甲氧基-1-丁烯-4-基)苯甲?；?L-谷氨酸二乙酯、3.0ml乙腈和3.0ml水于室溫下攪拌，加122mg(0.766mmol)溴在1ml乙腈中的溶液。向該溶液中加188mg(2.3mmol)乙酸鈉和0.97mg(0.77mmol)2，4-二氨基-6-羥基嘧啶，將所得混合物加熱至60℃，保溫18小時，冷卻，真空濃縮。將所得殘余物研制(2×5ml水)，潷晰。加乙醇(5ml)和440mg(2.3mmol)對甲苯磺酸-水合物。加熱回流20分鐘后，將混合物冷卻至室溫，過濾。沉淀物用乙醇(2×5ml)洗滌，干燥，得標(biāo)題化合物的對甲苯磺酸鹽。
前面已經(jīng)詳述了本發(fā)明，包括其優(yōu)選的實(shí)施方案。但是，應(yīng)當(dāng)明白，考慮到本發(fā)明公開的內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員可在下述權(quán)利要求書的精神范圍內(nèi)對本發(fā)明進(jìn)行改變和/或改進(jìn)。
權(quán)利要求
1.式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶或其鹽的制備方法，式(Ⅰ)如下
式中R是NHC*H(COOR′)CH2CH2COOR′或OR′各R′是H或相同或不同的羧基保護(hù)基團(tuán)；標(biāo)有★的碳原子的構(gòu)型是L；n是0或1；且
是可被取代的芳基基團(tuán)，它包括a)將2，4-二氨基-6-羥基嘧啶與下述式(Ⅱ)鹵代醛反應(yīng)
式中Y是溴、氯或碘；且
，R；R′，n和★定義如上；和b)可選地將步驟(a)的產(chǎn)品成鹽。
2.按照權(quán)利要求1的方法，其中R是OR′，R′是H或羧基保護(hù)基團(tuán)，n是0并且
是1，4-亞苯基。
3.按照權(quán)利要求2的方法，其中Y是氯或溴。
4.按照權(quán)利要求1的方法，其中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′，各R′是H或是相同或不同的羧基保護(hù)基團(tuán)，n是0并且
是1，4-亞苯基。
5.按照權(quán)利要求4的方法，其中Y是氯或溴。
6.式(Ⅰ)5-取代的吡咯并[2，3-d]嘧啶或其鹽的制備方法，式(Ⅰ)如下
式中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′或OR′各R′是H或相同或不同的羧基保護(hù)基團(tuán);標(biāo)有★的碳原子的構(gòu)型是L;n是0或1;且
是可被取代的芳基基團(tuán);它包括a)將鹵化劑與下式(Ⅲ)化合物反應(yīng)，
式中R，R′，
，n和★定義如上，且R2是選自式(Ⅳ)，(Ⅴ)或(Ⅵ)的取代基，OHC-CH2-CH2(Ⅳ)R3-CH＝CH-CH2(Ⅴ)
式中R3是OR4，其中R4是羥基保護(hù)基團(tuán);OCOR5，其中R5是C1-6烷基、苯基、芐基或C3-6環(huán)烷基，NR6R7，其中R6和R7各自是C1-6烷基、C3-6環(huán)烷基，或者與氮原子一起，還可包括氧原子，構(gòu)成5元到6元飽和單環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)可被一個或兩個選自C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;或者R8和R9均為C1-4烷基，或者與氧原子一起形成一個5元到6元飽和單環(huán)基團(tuán)，該基團(tuán)可被一個或二個選自羥基、C1-4烷基和C1-4烷氧基的取代基取代;b)將步驟a)的反應(yīng)產(chǎn)物與2，4-二氨基-6-羥基嘧啶反應(yīng);和c)可選地將步驟b)的反應(yīng)產(chǎn)物成鹽。
7.按照權(quán)利要求6的方法，其中R是OR′，R′是H或羧基保護(hù)基團(tuán)，R2是式(Ⅴ)取代基，R3是OR4，R4是羥基保護(hù)基團(tuán)，n是0并且
是1，4-亞苯基。
8.按照權(quán)利要求7的方法，其中鹵化劑是溴或氯。
9.按照權(quán)利要求6的方法，其中R是NHC＊H(COOR′)CH2CH2COOR′，各R′是氫或是相同或不同的羧基保護(hù)基團(tuán)，R2是式(Ⅴ)取代基，R3是OR4，R4是羥基保護(hù)基團(tuán)，n是0并且
是1，4-亞苯基。
10.按照權(quán)利要求9的方法，其中鹵化劑是溴或氯。
全文摘要
本發(fā)明公開了制備5-取代的吡咯并[2，3，-d]嘧啶的方法。該化合物可用作制備吡咯并[2，3-d]嘧啶抗腫瘤藥的中間體，或者可直接用作抗腫瘤藥。
文檔編號C07D487/06GK1087910SQ9311829
公開日1994年6月15日 申請日期1993年9月24日 優(yōu)先權(quán)日1992年9月25日
發(fā)明者C·J·巴列特, T·M·威爾遜 申請人:伊萊利利公司